Препарат для индикации оксидазы микробов

 

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к препаратам для индикации оксидазоположительных групп микробов, С целью повышения качества препарата для индикации оксидазы микробов препарат в качестве основы пчелиный воск, используемый как твердофазный носитель, консервант и стабилизатор, при следукнцем соотношении компонентов, мас.%: п-аминоэтипоксиэтиланилйнсульфат, или N,N,N , N -тетраметил-п-фенилендиамин, или К,М-диметил-п-фенилендиамин 7,27- 10,91; пчелиный воск 89,09-92,72. Преимущество изобретения заключается в увеличении срока годности препарата , сохранении его чувствительности. Использование пчелиного воска обуславливает пишущие свойства препарата и снижает-его себестоимость, 4 табл. И (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„1364636 А 1 (51) 4

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4121068/31-13 (22) 02.07.86 (46) 07.01.88. Бюл. М 1 (71) Кишиневский государственный медицинский институт (72) Ф.И.Георгица и В,М.Никитин (53) 577.15 (088.8) (56) Патент Англии У 1565675, кл. С 1 В, опублик, 1980.

Андреева З.M. Система индикаторная бумажная для идентификации энтеробактерий. — Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1983, 9 4, с. 20-23, (54) ПРЕПАРАТ ДЛЯ ИНДИКАЦИИ ОКСИДАЗЫ

МИКРОБОВ (57) Изобретение относится к области микробиологии, а именно к препаратам для индикации оксидазоположительных групп микробов ° С целью повышения качества препарата для индикации оксидазы микробов препарат в качестве основы пчелинын воск, используемый как твердофазный носитель, консервант и стабилизатор, при следующем соотношении компонентов, мас.%: n-аминоэтилоксиэтиланилинсульфат,или N,N,N

t »

° э

N -тетраметил-п-фенилендиамин, или

N, N-диме тип-и-фениленди амин 7, 2710, 9 1; пчелиный во ск 89, 09-9 2, 7 2 . Пр еимущество изобретения заключается в увеличении срока годности препарата, сохранении его чувствительности.

Использование пчелиного воска обуславливает пишущие свойства препарата и снижает его себестоимость, 4 табл, 1 — 13646

Изобретение относится к микробиологии, а именно к препаратам для индикации оксидазоположительных групп микробов.

Цель изобретения — повышение качества препарата.

Предлагаемый препарат имеет форму карандаша для многократного примененения, обладающий пишущими свойствами на различных поверхностях (стекла, пластмассы, бумаги, полимера, фарфора и пр.). Нанесение штриха позволяет использовать минимальное количество и-аминоэтилоксиэтиланилин15 сульфата или N,N,N N -тетраметил-: и-фенилендиамин или N,N-диметил-пфенилендиамина (0,00005 г), достаточное для индикации оксидазы микробов.

В пределах указанных граничных значений ингредиентов получены препараты, позволяющие определить оксидазу микробов, составы которых приведены в табл.1.

Препараты, полученные вне пределах 25 граничных значений ингредиентов, имеют более низкую чувствительность, В качестве ингредиентов использованы п-аминоэтилоксиэтиланилинсуль" (( фат или N,N,N N -тетраметил-и-фенилендиамин или N,N-диметил-п-фенилендиамин, представляющие собой порошки светло-коричневого цвета и пчелиный воск в твердом состоянии, растворимый в жирных маслах, т.пл. 62-64 С.

Воск вносят в препарат в количест- З5 ве 89,09-92,73 мас.7. как твердофазный носитель, консервант и стабилизатор, что обуславливает пишущие свойства, обеспечивает увеличение срока "одности, сохранение его чувствительности табл.2. и позволяет использовать минимальные количества реактива без потерь, а следовательно, снижает се.бестоимость препарата.

Пример. В фарфоровую ступку берут навеску воска 1 г и расплавляют над пламенем горелки. В расплавленный воск вносят навеску порошка иаминоэтилоксиэтиланилинсульфата 0,1 г, тщательно перемешивают, растирая пес- 0 тиком до получения карандашной массы.

Полученной массе придают форму карандаша. После этого карандаш надписывают и используют для работы. Препарат для индикации оксидазы микробов хранят при комнатной температуре неограничено долго.

Для индикации оксидазы на поверхность стекла, бумаги, пластмассы, 36 2

ФарФора, полимерной пленки делают штрих карандаша, Затем бактериальную петлю изучаемой микробной культуры, снятую со скошенного агара, или колонию смешивают со штрихом карандаша. При наличии оксидазы через 1%30 с происходит покраснение штриха и культуры, а через 1 мин цвет меняется от синего до черного. При отсутствии оксидазы у микробов штрих не меняет свою первоначальную окраску (светло-коричневый цвет).

Результаты сравнительного изучения чувствительности препарата для индикации оксидазы и СИБ-оксидазы в зависимости от сроков хранения приведены в табл.3.

Из табл.3 видно, что с увеличением сроков хранения чувствительность препарата для индикации оксидазы ьыкробов на протяжении 5 лет не меняет свои свойства, а при использовании СИБ-оксидазы ее чувствительность снижается, что статистически доказано (P (0,01 и Р с 0,001).

Результаты чувствительности препарата для индикации оксидазы микробов в зависимости от количественного содержания ингредиентов приведены в табл,4, Из табл .4 видно, что чувствительность препаратов с количественным соотношением ингредиентов в диапазоне предельных, включая и граничные значения (препараты 1-9) превышает чувствительность препаратов, содержащих ингредиенты вне диапазона граничных значений их количественного содержания (препарат А,Б,В,Г,Д,Е), что статистически достоверно (P (0,05-P c

< 0,001).

Препарат позволяет четко разграничивать группу оксидазоположительных микробов родов Uibrio, Pseudomonas, Alcaligens, Aегоmonas, Neisseria от энтеробактерий и других микроорганизмов

Преимущество предлагаемого препарата заключается в длительном сроке годности, сохранении чувствительности при хранении, упрощении индикации оксидазы микробов и удешевлении препарата.за счет минимального использования реактива.

Формула из о бр ет ения

Препарат для индикации оксидазы микробов, включающий и-аминоэтил! 364636

Пчелиный воск, г

Препарат и-Аминоэ тилоксиэ тиланилинсульфат или N,N,N,N— тетраметил-и-фенилендиамин или N,N"äèìåтил-и-фенилендиамин, r абс. X абс. Ж

1,02

7,27

0,08

7,73

1,015

0,085

0,09

8,18

1,0!

8,63

0,095

1,005

9,09

0,1

1,0

0,105

9,56

0,995

0,990

0,985

10,0

0,11

l0 45

l0,91

0,115

89 09

0,12

0,98

170

172

172

100

6 мес

1 год

)98

217

192

203

100

14

2 года

3 года

4 года

5 лет

268

100

261

268

100

261 7

П р и м е ч а н и е. Интенсивность реакции "+++" — резко положительная1 "++ — положительная;

"+11 слабо положительная!, 11 1! От рицательная. оксиэтиланилинсульфат, или N,N,N, N -тетраметил-п-феннлендиамин, или

N,N-диметил-п-фенилендиамин и основу, отличающийся тем, что, с целью повышения качества препарата, в качестве основы он содержит пчелиный воск при следующем соотношении входящих в нее ингредиентов, мас.Ж:

Пчелиный воск 89,09-92,73 и-Аминоэ тилоксиэтиланилинсульфат или Н,N,N, I

N --тетраметил-и-фе нил ендиамин, или

N N-диметили-фенилендиамин Остальное

Таблица 1

92 ° 73

92,27

91,82

91,36

90,91

90,46

90,00

89,55

1364636

Таблица 3

Статические показатели

Интервалы наблюдений

Из них положи TpJI ьных

Число испытянных QK сидаз оположи тельных микробов

СИБ-оксидаз а

Препарата для индикации оксидазы микробов абс, 3+m абс. 01m

119 86,23+3 16 2,08 с 0,01

114 66>28 4>43 7,61 (0>001

16 9 > 30т7>26 12,49 с0 >001

100,0+0,0

100,0+0,0

138

138

172

172

100,0+0,0

172

172

100,0+0,0

198

198

100,0+0,0

217

217

268

100,0+0,0

100,0+0,0

268

268

268

Таблица 4 л-Амннозтилокси9 тил анилин сульфат нли N,N,N >N-тетраметил-л-фенилендиамин нли

N, N-диметил-о-. фенилендиамин, r

Пчелиный воск, г

Препарат

Количество испытанных оксидазо»

П >ЛОЖИ тельных микробов

Статистические пока9атели них положи тельных

Х абс. 2 абс.

94,5 i

32 65>30+8>41 4,13

<0,001

ñ0>О5

<0,05

1,04

А 0,06 5,45

Б 0,07 6,36

93,64

38 77>55+6>77 2,32

1,03

42 85,71+5,40 2,65

93,18 49

l,025

Е 0,075 6,82

I00>0+0>0

I00>0+0>0

1 0О8 727

2 0085 7 73

Э 0>09 8>18

4 0,095 8,63

92,73

1,02

1 015

49 100,0iO>0

1>0l

I>005

100,0>.0,0

100,0фо,о

5 0,1

l>0

9,09

100,010,0

6 0,105 9,56

7 О 11 10 О

8 0,115 10 45

0,995

0,990

0,985

90,00

89,55

49

1Оа,ogo,а

I00>0+0>0

100,OÔ0,0

49

9 О 12 1091

Г 0>125 11 37

0,98

89,09 49

88,63 49

88 18 49

87,27 49

0,975

39 79 >59 6 >45 3,16

35 71 ° 43т7,64 3,74

28 57 >14 9 >35 4,58

CO t0l (0,001 с 0900 I

Д 0,13 11,82

Е 0,14 12 7

0,97

0,96

1 мес

6 мес

1 г.од

2 года

3 года

4 года

5 лет

92,27 49

91,81 49

91,36 49

90,91 49

90,46 49

BHHlIIlH Заказ 6539/20 Тираж 520 Полни с ное!

1роизв.— полигр. пр-тие, r. Ужгороц, ул. Проектная, 4