Способ получения замещенных бензамидов

 

Изобретение касается производных аминокислот, в частности способа получения замещенных бензамидов (БЗ) общей формулы I: CHt CCl-C(NH4 CH-C(OA)C-C(0)-NH-(CH,2)-N(C,,H5)j, где ,-C(R)-CH, , -СН,,-СН(ОН) R(NOH), (NOCH3), которые могут быть использованы для лечения эмези- . са, вызэанногр химиотерапией. Цель - создание более активных веществ указанного класса. Синтез БЗ ведут из соединения формулы (I), где вместо -ОА-группа -ОН, и хлорацетона в среде инертного растворителя. Полученное соединение обрабатьшают , H-jNOCHg или NaBH. Новые БЗ позволяют выявить соединения, способные замещать радиоактивньш спипероновый лиганд, т.е. соединения, проявляющие аффинность по отношению к допаминергичным (D,) рецепторам (доза 1000 нМ). БЗ оказьшают антагонистичное действие на эмезис, вызванный апоморфином (доза Т 3 мг/кг) , цисплантином (3 мг/кг), обеспечивая 95- 100%-ный эффект без побочных действий. 1 табл. i СУ) со со 00 1

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

1511 4 С 07 С 103/82

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ПАТЕНТУ ц е

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4027330/23-04 (62) 3914151/23-04 (22) 22.04.86 (23) 27.06.85 (3)) 625742 (32) 28.06.84 (33) US (46) 23.05.88. Бюл, !ар 19 (71) Бристоль-Мейерз Компани (US) (72) Иво Монкович и Дэвид Виллнер (08, (53) 547.298.1.07(088,8) (56) Патент США Ф 4503075, кл. С 07 С 103/82, опублик. 1981.

Патент ФРГ У 1966212, кл. С 07 С 103/82, опублик. !972. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЗАМЕЩЕННЫХ

БЕНЗАМИДОВ (57) Изобретение касается производных аминокислот, в частности способа получения замещенных бензамидов (БЗ) общей формулы I: СН,=CCI-C(NH

„„SU„„1398771 A3

=СН-С(OA) =С-С(О) -NH (ÑÍ ), -N(CzH .) z. где А -СН -С Я) -СН, -СН -СН(ОН) -СН

R= (=NOH), (=N0CH ), которые могут быть использованы для лечения эмезиса, вызванного химиотерапией. Цель создание более активных веществ указанного класса. Синтез БЗ ведут из соединения формулы (I), где вместо

-ОА-группа -ОН, и хлорацетона в среде инертного растворителя. Полученное соединение обрабатывают H NOH, H N0CH или NaBH4. Новые БЗ позволяют выявить соединения, способные замещать радиоактивный спипероновый лиганд, т.е. соединения, проявляющие аффинность по отношению к допаминергнчным (D ) рецепторам гааза т Q)

)1000 нМ) . БЗ оказывают антагонистичное действие на эмезис, вызванный апоморфином (доза 3 мг/кг), цис- р плантином (3 мг/кг), обеспечивая 95I00X-ный эффект защиТы без побочных действий. 1 табл.

1398/71

Изобретение относится к химии азотсодержащих соединений, а именно к способу получения замещенных безамидов общей формулы

Я ЯОЕ Щ)(Я е которые могут быть пригодны для лече- 20 ния эмезиса, в частности для лечения эмезиса, вызванного химиотерапией.

Целью изобретения является разработка доступного способа получения замещенных бензамидов общей формулы,,которые обладают высокой антиэметической эффективностью.

Пример 1. 4-Амино-5-хлор-М— 2-(диэтиламино}этил)-2-оксибензамид, А, Хлористоводородная соль 4-амино-30

-5-хлор-И-j2-(диэтиламино)-этила-2оксибензамида. о

К охлажденной ниже 10 перемеши— ваемой суспензии гидрида натрия (57,44 г; концентрация 60%; 436 моль) 35

B диметилформамиде (T275 мл) по каплям прибавляют холодный раствор этан тиола (89,22 г; 1,436 моль) и диметил,формамида (250 мл). После окончания выделения водорода прибавляют 4-ами- 4О но-5-хлор-Ж-(2-(диэтиламино)этил -2метоксибензамид (287,0 г; 0,957 моль) (получен в соответствии с патентом

США У 3357978, 1965) и смесь нагревают на масляной бане при 100-105 С в течение 90 мин. Растворитель удаляют под вакуумом и остаток обрабатывают смесью хлористого метилена (800 мл) и воды (400 мл). Водный слой промывают еще одной порцией хлористого мети- 5О лена и соединенные органические экстракты отмывают воцой (150 мл). Соединенные водные фазы охлаждают на ледяной бане и обрабатывают концентрированной хлористоводородной кислотой (200 мл). Через 20 мин осадок собирают фильтрованием, быстро отсасывают на фильтре, суспендируют в метаноле (500 мл) и снова фильтруют. Продукт сушат под вакуумом и получают 302,3 г (98%) целевого соединения в виде светло-бежевого твердого соединения, т,пл. 235-237. С.

Найдено, %: С 47,67; Н 6,73;

N 12,84; С1 21.43, С „Н С111,0, Ввтчислено, %: С 48,46; Н 6,57;

N l3,04; С1 22,0.

В. 4-Амино-5-хлор-N-(2-{диэтиламино} этил)-2-оксибензамид, К перемешиваемой концентрированной гидроокиси аммония (6 мл) прибавляют хлористоводородную соль 4-амино-5-хлор-N-(2-(диэтиламино)этил)-2 оксибензамида (3,0 г; 0,0093 моль) . и смесь перемешивают еще в течение

5 мин, после чего прибавляют 3-4 мл воды и перемешивают еще 5 мин. После фильтрования твердое соединение два раза промывают водой порциями по 3 мл и после высушивания получают 2,37 г целевого соединения, т.пл. 134-136 С.

В ЯМР-спектре (90 МГц), записанном в CDC1, наблюдаются следующие резонансы, 8: 7,26 (синглет, 1Н); 6,90 (синглет, 1Н); 6,14 (синглет, 1Н};

4,39 (синглет, 2Н); 3,40 (синглет, 2Н); 2,60 {мультиплет, 6Н); 1,06 (триплет, 6Н).

Пример 2 (препаративный).

4-Амино-5-хлор-N-(2-(диэтиламино)этил12-оксибензамид (другая методика) .

Смесь 4-амино-5-хлор-Н- 2-(диэтиламино)этил -2-метоксибензамида (29,5 г; 0,1 моль), гидроокиси натрия (в таблетках) (4,0 г; 0,1 моль) и

1,2-пропандиола (70 мл) перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 20 ч, после чего концентрируют под вакуумом. Остаток обрабатывают lNHCl (100 мл) и снова концентрируют под вакуумом. Остаток хроматографируют на силикагеле с использованием следующей системы растворителей: хлористый метилен (90), метанол (10}, аммиак (0,5). Соответствующие фракции соединяют и концентрируют под вакуумом, остаток кристаллизуют из диэтилового эфира и получают 9,3 r порошка. Его растворяют в горячей воде и раствор фильтруют через активированный уголь. Фильтрат охлаждают, фильтруют и получают 6,7 r целевого соединения фмеющего рыжевато †коричнев

У

О цвет, т.пл. 126-127 С (по данным патента. США В 3357978 т.пл. 160 С).

1398771

С < Н ьо С ) ) О а

Вычислено, 7: С 54 64; Н 7 05;

N 14,70.

Тетра-н-бутиламмониевая соль 4-амйно-5-хлор-N (2 †(дизтиламино)этил)-2оксибензамида.

Раствор хлористоводородной соли

4-амино-5-хлор-N-!2-(диэтиламино)этил)-2-оксибезамида (10 г; 0,031 ммоль) и 5 г гидроокиси натрия в 100 мл воды при перемешивании обрабатьвают гидросульфатом тетра-н-бутиламмония (10,6 г; 0,031 ммоль). Кристаллы собирают, промьвают водой и сушат (14,7 г;

877) . Перекристаллизацией из этилацетата получают целевое соединение, содержащее 0,5 моль воды, т.пл. 136,5- 2

138,5 С.

Найдено, 7: С 56,44; Н 7,)55;

N 14,65.

Найдено, X: С 65,06;. Н 10,42;

N l0,40; Н О 1,41.

С 9 Н С1И40 0,5Н О

Вычислено, 7: С 65,95; H 10,53;

N l0,44; Н О 1,?1., Пример 1. 4-Амино-5-хлор-N-(2-(диэтиламино)этил)-2-(2-пропанон-)-ил)оксибензамид.

К перемешиваемой суспензии гидрохлорида 4-амино-5-хлор-N-)2-(диэтиламино)этил) — 2-оксибензамида (5,0 г;

16 ммоль) и карбоната калия (10,62 г;

77 ммоль) в ДМФ (25 мл) прибавляют хлорацетон (2,32 г; 90Х; 22 ммоль) и смесь энергично перемешивают в течение 5 ч, после чего выпивают в воду (130 мл), фильтруют и после высушивания получают 4,57 r сырого продукта. его растворяют в хлористом метилене, фильтруют через короткую воронку с окисью алюминия, затем концентрируют, перекристаллизовьвают остаток иэ толуола и получают 4,16 г (78А) целевого продукта в виде белого твердого соединения, т.пл. 105106,5 С. Методом ЯМР (90 МГц) в

CDC1 получают следующие резонансы, 9: 8,44 (синглет, 1Н); 8,24 (синглет, !Н); 6,)6 (синглет, 1Н); 4,72 (синглет, 2Н); 4,4 (синглет, 2Н);

3,6 (мультиплет, 2Н); 2,68 (мультиплет, 6Н); 2,28 (синглет, ЗН); 1,08 (триплет, 6H), Найдено, 7: С 56,14; Н 6,97;

N 12,29; С1 )0,29.

С !6 С 4 С)-)) О з

Вычислено, 7: С 56,2); Н 7,08;

N )2,29; С1 10,37.

Пример 2. А. 4-Амина-?-(бутан-2-он-3-ил)окси-5-хлор-N-(2-(диэтиламино)этил) бензамид.

К перемешиваемой суспензии гидрида натрия (40 мг; 60Х; 1 ммоль, про10 мыт н-пентаном) в ДМФ (2 мл) прибавляют 4-амино-5-хлор-N-(2-(диэтиламино)этил) — 2-(2-пропанол-1-ил)оксибензамид, полученный в примере 5 (0,349 г;

1 ммоль), в атмосфере азота. Смесь

15 перемешивают до прекращения выделения водорода, после чего прибавляют иодометан (0,07 мл; 160 мг; 1,1 ммоль) и перемешивание продолжают еще в течение l ч. Смесь обрабатывают смесью

0 воды и хлористого метилена, органическую фазу промывают водой, сушат, концентрируют и остаток хроматографируют на дезактивированной двуокиси кремния с использованием следующей

25 системы растворителей: хлористый метилен (100), метанол (4,5), аммиак (0,5). Соответствующие фракции соединяют и получают 160 мг целевого соединения в виде густого масла. В

З0 ЯМР-спектре (90 МГц) в CDC1 наблюдаются следующие резонансы, У: 8,24 (синглет, наложенный на широкий синглет, 2Н); 6,08 (синглет, 1Н); 4,70 (квартет, a =5,4 Гц, 1Н); 4,44 (синглет, 2Н); 3,56 (мультиплет, 2Н);

2,62 (мультиплет, 6Н); 2,2 (синглет, ЗН); 1,6 (дублет,Г =5,4 . ц, ЗН); 1,04 (триплет, 6Н).

40 В, Гидрохлорид-4-амино-2-(бутан-2он-3-ил)окси-5-хлор- N-(2-(диэтиламино)этил)бензамида.

К перемешиваемой суспензии гидро45 хлорида 4-амино-5-хлор-N- t2-(диэтиламино)этил)-2-оксибензамида (1,94 г;

6 ммоль) и карбоната калия (4,16 г;

30 ммоль) в ДМФ (1О мл) прибавляют

3-хлор-2-бутанон (0,95 г; 8,9 ммоль), 50 смесь перемешивают в течение 3 ч, выливают в воду и экстрагируют, хлористым метиленом. Экстракт промывают водой, сушат и концентрируют под вакуумом. Остаток растворяют в )-ëðoïàío55 ле, обрабатывают lн.хлористоводород- ной кислотой и после концентрирова.ния получают маслянистый остаток.

Его кристаллизуют из ацетона, продукт перекристаллизовывают из 2-пропанола

И получают целевое соединение в форо ме полугидрата, т.пл. 98 С.

Найдено, : С 51,26; Н 6,86;

N 10,51; Cl 17,38, С, Н аC1NзО НС1 0,5Н О

Вычислено, : С 51 00; Н 6,80;

N 10,50; Сl 17,71.

С. Гидрохлорид 4-амина-2-(бутан-2-он-3-он-3-ил) окси-5-хлор-N-f2-(диэтиламино)этил1бензамида.

К перемешинаемой суспензии гидрохлорида 4-амино-5-хлор-N-(2-(диэтиламино)этил1-2 — оксибензамида (19,4 г „

,60 ммоль), карбоната калия (41,6 г;

0,3 моль) и иодида натрия (10 г) н

ДМФ (100 мл) прибавляют 3-хлор-2-бутанон (9,5 г; 89 ммоль) и смесь интенсинно перемешивают и нагревают при о

70-80 С в течение 2 ч, после чего охлаждают и обрабатывают смесью воды и хлористого метилена. Органическую фазу промывают водой„ сушат и кон,:центрируют. Остаток обрабатывают 2 н. хлористоводородной кислотой, азеотропно высушивают с н-пропанолом,, кристаллизуют из ацетона и получают

19,0 г (81 ) целевого соединения, т.пл. 177-179 С.

Пример 3. 4-Лмино-5-хлор-И- (2-(диэтиламино) этил)-2- (3-метил) -5-гексен-2-он †--ил)оксибензамид.

К перемешинаемой суспензии г дрида натрия (0,2 г; 601; 5 ммоль, промыт н-пентаном) в ДМФ (10 мл) по каплям прибавляют раствор 4-амино-2-(бутан-2 — он-3-ил)окси-5-хлор-N- (2 †(диэтиламино) этил бензамида(1,78 г;

5 ммоль) в ДИФ (10 мл). После прекращения выделения водорода прибавляют аллибромид (690 мг 5,7 ммоль) и смесь перемешивают в течение 72 ч, после чего обрабатывают смесью воды и хлористого метилена. Органическую фазу промывают водой, сушат и концентрируют. Остаток хроматографируют на дезактивированной двуокиси кремния с использованием смеси хлористого метилена (1 00), метанола (4) и аммиака (0,5). Соотнетстнующие фракции соединяют и получают 0,58 r сырого продукта в виде густого масла. Еro кристаллизуют из диэтилоного эфира и получают целевой продукт н виде. белого твердого соединения, т.пл. 139-140 С.

В ЯМР-спектре (90 МГц) в CDCL> наблюдаются следующие резонансы, О : 8,24 (синглет, 1Н); 8,0 (широкий синглет, 1Н); 5,92 (синглет, IH); 5,9-5,0

1398771 6 (мультиплет, 4Н); 4,38 (широкий синглет, 2Н); 3,58 (мультиплет, 2Н);

3,0-2,3 (мультиплет, 8Н); 2,28 (синглет, ЗН); 1,62 (синглет, ЗН); 1,04 (триплет, бН).

Найдено, : С 60,34; Н 7,67;

Ы 10,54.

2о эо ъ 3

10 Вычислено, : С 60, 67; Н 7, 68;

N 10,6).

Пример 4, 4-Амино-5-хлорЫ- <2-(диэтиламино) этил1-2-((2-оксиимино)пропан-1-ил) оксибензамида.

15 Смесь 4-амино-5-хлор-N-12-(диэтиламино)этила-2-(пропанон-1-ил)оксибензамида {1,0 г; 2,9 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,3 г;

4,3 ммоль) в метаноле (20 мл) кипя20 тят с обратным холодильником в течение 10 мин, после чего концентрируют под вакуумом. Остаток обрабатывают смесью водного раствора карбоната натрия и хлористого метилена. Органи25 ческую фазу сушат, концентрируют, остаток растворяют в метаноле, обрабатывают активированным углем и фильт" руют. Фильтрат концентрируют под вакуумом, остаток кристаллизуют из сме30 си этилацетата и н-пентана и получают 0,58 r (56 ) целевого соединения, содержащего 0,25 моль кристаллоо гидратной воды, т.пл. 112 †1 С. В

ЯМР 9,16 (синглет, 1Н); 8,32 (синЗ5 глет, 1Н); 6,36 (синглет, 1Н); 4,72 (синглет, 2Н); 4,36 (синглет, 2Н);

3,68 (мультиплет, 2Н); 2,68 (мультиплет бН); 1,92 (синглет, накладывающийся на широкое поглощение, 4Н); р0 1,12 (триплет, 6Н).

Найдено, : С 53,18; Н 7,01;

N 15,36; Cl 9,52.

С Н С1Х О 1/4Н О

Вычислено, : С 53,18; Н 7, ll; дВ И 15,50; Сl 9,80.

Пример 5. 4-Амико-5-хлорМ- 2-{диэтиламино)этил -2- ((2-метоксиимино)пропан-1-ил оксибензамид.

Воспроизводят общую методику по б0 примеру 4 за исключением того, что использованный гидрохлорид гидроксиамина заменяют на гидрохлорид метоксиамина и проводят реакцию при комнатной температуре (16 ч), получая

55 целевой продукт с выходом 70 в виде белого твердого соединения, т.пл.

121 †1 С, из смеси хлористый метилен-н-пейтан, ЯМР-спектр (90 МГц) н

CDC1> аналогичен спектру в примере

1398

10, и имеет дополнительный синглет при 3,92 (ЗН).

Найдено, Х: С 54,69; Н 7,48;

N 14,92; Сl 9,47.

С „Н С1Н,О

Вычислено, Х: С 55,05; Н 7,34;

N 15,11; Сl 9,56.

Пример 6. 4-Амино-5-хлор-N-(2-(диэтиламино)этил 1-2-(2-оксипро- 10 пан-1 -ил) оксибензамид.

Смесь 4-амино-5-хлор-N-(2-(диэтиламико)этил) -2-(2-пропанон-1-ил)оксибензамида (1,28 г; 3,7 ммоль) и боргидрида натрия (80 мг, 2,1 ммоль) 15 в абсолютированном этаноле (15 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин, после чего прибавляют дополнительно 50 мг (1,3 ммоль) боргидрида натрия и кипятят с обрат- 20 ным холодильником в течение 10 мин.

Смесь подкисляют 2н. НС1 и концентрируют под вакуумом. Остаток обрабаты вают смесью воды и диэтилового эфира эфирный слой отбрасьвают. Водный лой подщелачивают карбонатом натрия, твердое соединение отфильтровьвают получают 0,80 г (77X) целевого соединения, т.пл. 149-!50 С. В ЯМРспектре (90 МГц) в CDC1 наблюдаются 30 следующие резонансы, о : 8,48 (широкий синглет, IН); 8,16 (синглет, IН);

6,28 (синглет, IH) 4,4-3,4 (мультиплет, 7Н); 2,64 (мультиплет, 6Н);

l,26 (дублет,7 =7,5 Гц, ÇH); 1,08 (триплет, ЗН).

Найдено, X: С 56,08; Н 7,65;

N 12,05; Cl 9,80.

С,б Нгб С1МзОз

Вычислено, Х: С 55,88; H 7,62; 40

N 12,22; Cl 10,31.

Пример 7. 4-Амино-5-хлорN-12-(диэтиламино)этил -2-(5-гексен-2-он-Ç-ил)оксибензамидгидрохлорид.

В суспензию гидрида натрия (400 мг; 60Х-ный, 10 ммоль, промыт н-пентаном) в диметилформамиде (10мл) при премешивании добавляют 4-амино-5-хлор-К- f2-(диэтиламино) этил)-2-(2-пропан-1-ил)-оксибензамид (3,4 г; «О

10 ммоль), приготовленный по примеру 1, в атмосфере азота. Эту смесь перемешивают до тех пор, пока не завершится выделение водорода, Добавляют бромистый аллил (0,9 мл; 1,26 г;

10,5 ммоль), и перемешивание продолжают в течение 18 ч. Смесь распределяют между водой и хлористым метиленом и органическую фазу промывают

771 8 водой, сушат, концентрируют и остаток разделяют хроматографически на дезактивированном силикагеле, используя в качестве растворителя смесь хлористого метилена (100), метанола (4) и аммиака (0,5) ° Подходящие. фракции объединяют и получают 1,14 г свободного основания. Это вещество растворяют в пропаноле-1 и обрабатывают

7 мл двухнормальной соляной кислоты, после чего концентрируют и получают маслянистый остаток. Последний кристаллизуют из смеси ацетона с эфиром и продукт перекристаллизовывают из пропанола-2, получая 0,53 r указанного соединения с т.пл. 171-173 С. В спектре ЯМР (90 МГц) в D О наблюдались следующие резонансы, 8: 7,88 (синглет, IH); 6,42 (с, IН); 6 124,88 (мультиплет, ÇH); 3,76 (широкий дублет, 2Н); 3,28 (м, 6Н); 2,88 (шир. триплет, 2H); 2,4 (с, ÇH); 1,35 (триплет, 6Н).

Найдено, Х: С 54,22; Н 7,11;

N 9,90; Cl 16,51.

Cl N 0

Вычислено, Х: С 54, 55; Н 6,99;

N I0,04; Cl 16,95.

Пример 8. 4-Амино-5-хлорN-f2-(диэтиламино)этил -2-(2-гидроксиимино-бут-З-ил)оксибензамид.

Раствор гидрохлорида 4-амино-2-(2бутанон-3-ил)окси-5-хлор-N-j2-(диэтиламино) этил1бензамид" (1,!4 г

2,9 ммоль), полученного по примеру

2С, и гидрохлорида гидроксиламина (0,3 г; 4,3 ммоль) в 20 мл метилового спирта кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин. Растворитель выпаривают, и остаток распределяют между хлористым метиленом и насыщенным раствором карбоната натрия. Органическую фазу промьвают во- дой, сушат и растворитель выпаривают.

Остаток кристаллизуется из этилацета" та и петролейного эфира, давая указанное в заголовке вещество т.пл. о

113-115 С (0,37 r). В спектре ЯМР (90 МГц) в CDCl> наблюдались следующие резонансы, g: 9,8 (шир., с., 1Н);

8,16 (с, IH) 6,4 (с, IН); 4,96 (кв, lH); 4,4 (с, 2н); 4,02-3,08 (шир. мультиплет, ÇH); 2,66 (м, 6Н); 1,84 (с, ЗН); .1,6 (д, ÇH); 1,08 (т, 6Н).

Найдено, Х: С 54,91 Н 7,34;

Н 14,97; Cl 9,45.

1398

771 !О тирующий рН 7,4) центрифугируют при

39000g. Супернатант отбрасывают и осадок снова суспендируют в буфере

НЕРЕЯ КОН и снова центрифугируют аналогично описанному. Супернатант снова отбрасывают и осадок суспендируют н буфере, состоящем из 50 мМ НЕРЕЯ "

«КОН, содержащего 0,1 мас.% (вес/объем) аскорбиновой кислоты, 10 мкМ паргилин, 120 мМ NaC1, 5 мМ КС1, 2 MN

СаС1 и 1 мМ MgC1 при 20 С (результирующий рН 7,4), при концентрации ! г влажного тканевого осадка на 100 мл буферной смеси.

Испытания на определение ИК соединений общей формулы и соединений, взятых для сравнения, по отношению к Н-спиперону проводят следующим об3 разом. Готовят пробирки, каждая из которых содержит либЬ 100 мкл буферной смеси (для общего связывания), либо 100. мкл буферной смеси плюс

100 мкл 10 MD(+) áóòàêëàìoë (для контрольного, т.е. неспецифического связывания), либо 100 мкл буферной смеси, содержащей испытуемое соединение н концентрации 10, 10 или — 6

-5

10 М. В каждую пробирку прибавляют по 100 мкл раствора Н-спиперона (New

England !1пс1еаг) в буферной смеси (2000 импульсон в I мин в инкубационной смеси) и 800 мкл суспензии мозговой ткани. После этого содержимое пробирок разбавляют до объема 1 мл буферной смесью, получая результирующие концентрации испытуемого соединения, равные 10, 10 или 10 M u

-8 -Т 6 з концентрацию Н-спиперона приблизительно 100 пиком. Образцы инкубируют при о

37 С в течение 15 мин, фильтруют под вакуумом на стеклянном фильтре и определяют количество импульсов с помощью жидкостной сцинтилляционной спектрометрии. Для каждого из испытуемых соединений ИК не достигается при б наибольшей концентрации (10 мкМ= !

000 нМ) испытуемого соединения.

В. Антагонизм эмезиса, вызванного апоморфином у собак.

В качестве испытуемого объекта использовали сытых гончих собак обоего пола. Как испытуемые соединения, так и апоморфин„ вводили подкожно в виде водных растворов, причем испытуемые соединения вводили за 30 мин до введения апоморфина. Через 60 мин после

I введения апоморфина собак обследовали и устанавливали либо эмезис, либо

С, Í C1N О,, Вычислено, %: С 55, 05; Н 7, 34;

N 15,11; Cl 9,56,.

Пример 9, 4--Амико †-хлор5

N- (2- (ди э тил а ми но ) э тил)- 2- ((2- г ид" рокси)-бут-3-ил) оксибензамид (смесь трео- и эритро-изомерон).

Смесь 4-амино--?-(?-оутанон-3-ил) окси-5-хлор-N- !2--(диэтнламино) этид 10 бензамида (получен обработкой 1,2 г;

3,! ммоль, соответс.. вующей хлористоводородной соли, приготовленной по .примеру 2С, насыщенным раствором кар, боната натрия) и боргицрица натрия (100 мг) в 20 мл этанола кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч.

Раствор концентрирун т, разбавляют водой, подкисляют 2н, соляной кислотой и подщелачивают насыщенным нод- 20 ным раствором карбоната натрия. Смесь экстрагируют хлористым метиленом, получая l,!6 r пенообразного вещест, ва. Этот материал разделяют хроматографически на деактиниронанном силн- 25 кагеле, используя систему растворите лей: хлористый метилен (100), мета— нол (2), аммиак (0,5). Соответствующие фракции объединяют, получая ука— занное н заголовке вещество в ниде 30 пенистой смеси диастероизомеров, В спектре ЯМР (90 МГц) в CDC1> наблюдались следующие резонансы, о : 8,54 . (шир. дублет, IH); 8„2 (2с, IН);

6,32, 6,35 (2с, IН); 4,36 (с, 2Н);

: 4,24-4 (м, 1Н); 4-2,12 (м, ЗН); 2 82,52 (м, 6Н); 1,41-0,96 (м, 12Н).

Найдено, %: С 56,34; Н 7,79;

N 11,55; Cl 9,65.

С т H2288C1N30„, 40

Вычислено, %: С 57,05; H 7,89!

N 1l,74) Cl 9,91.

Методики биологических испытаний.

А. Замещение H-спиперона.

Это испытание служит для выявления соединений, способных замещать радиоактивный спипероновый лиганд п vitro с использованием мозгоногс гомогенизата крысы. Его используют для выявления соединений, проявляюБО щих аффинность по отношению к допаминергичным (D<) рецепторам.

Крыс (150+10 г) Charleskion обезглавливают, corpus 81:г1асцш вырезают и замораживают на сухом льду. Ткани о

65 собирают и хранят при -80 С до момента использования. Гомогенизаты (Brinhmann .Polytron) Corpus striatum в холодном буфере НЕРЕЯ КОН (резуль1398771

12, полное предупреждение эмеэиса (однозначный ответ) .

Апоморфин вводят в концентрации

0,3 мг/кг. Так как испытуемые соединения практически лишены антагонизма к апоморфину, то их вводят в количестве 3 мг/кг. Невозможность достижения 50Х-ного антагонизма (предотвращения эмезиса) при этой дозе показана )0 в таблице как 3 мг/кг. Так как взятые для сравнения соединения: метоклопрамид, ализаприд, клебоприд и домперидон, обладают допаминергичной антагонистической активностью, то 15 вводят меньшие дозы этих стандартных соединений, и рассчитанные ЭД о представлены в таблице. Все испытания проводили по крайней мере на двух собаках. 20

С. Антагонизм к эмеэису, вызванному цисплатином у хорьков.

Взрослых, кастрированных самцовхорьков (1,0-1,5 кг) анестезируют пентобарбиталом натрия (30 мг/кг, 26 парэнтерально). Выбривают вентральную и дорсальную области шеи и делают 3 см разрез. Обнажают яремную вену и перевязывают шелковой нитью конец, расположенный около головы. Иэготав- 30 ливают вживляемый катетер иэ силастиковой трубки 18 см длины (внутренний диаметр 0,05 см, внешний диаметр

0,0925 см) и 2 см полэтиленового конца (внутренний диаметр 0,1113 см, внешний диаметр 0,155 см), наполненный гепарином (1000 ед/мл) и закрытый с внешнего конца иглой 23 калибра длиной 2,5 см, имеющей уплотнения на обоих концах. В яремной вене дела- 40 ют небольшой разрез, куда вводят ка-= тетер, а свободный конец пропускают через трохар калибра 13 длиной 5 см под кожей и прикрепляют к задней час-. ти шеи шелковой нитью. Хорьков содер- 4В жат в индивидуальных вольерах и дают им 2-4 дня отдыха перед испытаниями.

В день испытаний испытуемые соединения вводят внутривенно (3 мг/мл или

1 мл/кг) через катетер за 5 мин до 50 и через 90 мин после введения цисплатина. Раствор цисплатина получают, прибавляя физиологический солевой раствор, имеющий температуру 70 С, о перемешивая и обрабатывая ультразвуком до растворения. Результирующий раствор (4 мг/мл) поддерживают при температуре 40 С и вводят внутривенно (12,мл/кг) через катетер. После введения цисплатина хорьков наблюдают непрерывно в течение 4 ч и фиксируют случаи эмезиса. Два или больше случая эмезиса, произошедших в тече-. ние 1 мин, рассматривают как единичный случай.

Хорьков эвтанизируют внутривенным введением Т-61 в конце эксперимента и убеждаются в том, что катетер. расположен нужным образом. Результаты испытаний представлены в таблице в виде процента защиты (количественный ответ) по сравцению с введением солевого физиологического раствора.

Для каждого испытания показаны также дозы и число животных.

Как видно из таблицы, соединения общей формулы обладают пригодной антиэметической активностью, при этом эти соединения практически лишены допаминэргичного антагонизма, что по» эволяет избежать побочных эффектов, присущих доступным антиэметическим и гастрокинематическим агентам на основе замещенных бензамидов.

Соединения общей формулы могут вводиться орально, парэнтерально или суппозиторно. При использовании их в качестве антиэметических агентов для пациентов, принимающих такие противоопухолевые химиотерапевтические агенты, как цисплатин, их предпочтительно вводить в виде внутривенного вливания, разбавленного до большего объема парзнтеральным раствором (5Х-ный раствор декстрозы в воде, 5Х-ный раствор декст-: розы в 0,45Х-ном растворе хлористого натрия, раствор Рингера для инъекций или лактатный раствор Рингера для инъекций). При использовании в качестве гастрокинетического агента соединения предпочтительно вводить орально, если симптомы легкие. Если симптомы тяжелые, то в,начале лечения следует вводить лекарство внутримышечно или внутривенно до исчезновения тяжелых симптомов, после чего можно присту" пать к оральному введению.

Доза соединений общей формулы зависит от целей, для которых,они используются (антиэметических или гастрокинематических), от конкретного Вво» димого соединения, возраста, веса и общего состояния пациента, а также от тяжести заболевания и находится в компетенции лечащего врача.

При использовании для гастрокинетических целей соединения общей фор1398771

14 мулы вводят (в дозе 1- 100 мг) 550 мг предпочтительно 4 (2-5) раза в день, например, перед каждым приемом пищи и перед сном.

Для предупреждения тошноты и рвоты, нызвянных эметогенными противоопухолевыми химиотерапевтическими агентами, соединения общей формулы вводят (разбавляя до большего объема парэн- >g теральным раствором) в дозе 0,1—

50 мг/кг предпочтительно 0,5-10 мг/кг нескопько раз в день. Конкретная используемая доза зависи" от указанных факторов, а также от эметогенности )5

1 противооиухоленого химиотерапевтического агента. Первую дозу следует вводить перед приемом противоопухолевого химиотерапевтического агента, например, за 30 мин и затем каждые 20

2-8 ч после введения химиотерапевтического агента до тех пор, пока симптомы тошноты и рвоты Не исчезнут или не станут менее тяжелыми, например в течение 12-24 ч. 25

Таблетки и капсулы для орального и именения имеют форму единичной дозы и могут содержать обычные инертные наполнители: снязующие агенты, разбавители, любриканты, облегчающие таб- 39 летирование, диспергирующие агенты, смачивающие агенты и т.п. При необходимости таблетки можно покрывать пленочной оболочкой обычными способами.

ЖИдкие рецептуры для орального при— мвнения могут иметь форму водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или элексиров либо могут представлять собой сухой продукт, который перед использованием разбавляют водой или другим подхоцящим инертным разбанителем. Жидкие рецептуры могут содержать обычные добавки: суспендирующие агенты, эмульгирующие агенты,, неводные разбавители (включая пищевые масла), консервирующие агенты, а также отдушки и/или окрашивающие агенты.

При парэнтеральном введении соединйния общей формулы сочетают со стерильным инертным разбанителем. В зависимости от носителя и концентрации активного ингредиента дозированная форма может представлять собой раст- вор или суспензию. Обычный разбавитель включает в себя по крайней мере в виде основной своей части стерильную воду, хотя можно использовать соленые растворы, растворы глюкозы и т.п. Для инъекций можно использовать также суспензии и в этом случае можно использовать обычные суспендирующие агенты. В дозированные формы для парэнтерального введения можно прибавлять также обычные консервирующие агенты, буферные агенты.

Для твердых дозированных форм можно использовать соединения общей формулы как в форме свободного оснонания, так и в виде соли.В случае водных растворов оральных или парэнтеральных часто используют соль соединения общей формулы, так как соли лучше растноряются в водных растворах.

Особенно удобно готовить указанные фармацевтические рецептуры н форме единичных доз, что облегчает введение в стандартность дозирования. Единичные дозированные формы — это физически дискретные единичные изделия, пригодные в качестве стандартных доз, каждое такое изделие содержит заданное количество активного ингредиента, рассчитанное на достижение целевого эффекта, а также пригодный фармацевтический носитель.

Соединения предлагаемого изобретения могут быть также включены в фармацевтические композиции для уменьшения тошноты и рвоты, н эффективном антиэметическом количестве вместе с соармацевтически приемлемым носителем.

Соединения общей формулы в активной дозе не проявляли признаков токсичности, ни одно из подопытных животных не погибло.

Соединения общей формулы являются эффективными антиэметическими агентами, но не допаминергичными антагонистами, как показано испытаниями in

vitro (связанные спиперона) и испытаниями in vitro (апоморфиновый эмезис у собак). Таким образом соединения общей формулы обладают хорошей антиэметической активностью (особенно против эмезиса: вызванного химиотерапией) при высокой специфичности дей— ствия, но не проявляют ни одного из побочных эффектов, описанных выше, присущих классу допаминергичных антагонистов, представляющих собой антиэметические агенты на основе замешенных бензамидов.

Многие из коммерчески доступных антиэметических агентов на основе замещенных .бензамидов (метоклопрамид) обладают также гастрокинетической активностью и пригодны для лечения

-: NHg 2Н5

СОякся,щ,ю

О Нг С НБ

Формула изобретения

Способ получения замещенных бензамидов общей формулы

С Н5 союнсн,снеек

ОА С Н5 замещают в положении 2 путем взаимодействия его или с H NOH, или=с

Н ИОСН, или с ЯаВН4 °

Антагонизм к эмезису вызванному цисплатином у хорьков

Замещение

Н-спипеСоединение по

Антагонизм к примеру эмезису, вызванному апоморфином у собак, Зд й), мг/кг, лодкожно рона, Доза, мг/кг, внутривенно

К2 (число живот

Защита, X ных равно 3) >1000 1000

+IО0О l 000

1000 1000 I OOO

>3.

95

«3

100

>Э -.

86

«3

15 1398771 l6 А-СН С- М СК К вЂ” СЦ ° гастроинтестинальной подвижности: за-.. г„з а — з медленное опорожнение желудка, дис- R Н пепсия, флатуленция, ухудщенная функ- 5 В КОН, N0CH ) q ция пищевода и т.п. Некоторые из соеотличающийся тем, что, динений общей формулы обладают активсоединение формулы костью, подобной активности метоклоС Н5 прамида, в испытаниях на электростиму- сомнсн ся к лирование илеума морской свинки, ко- 30 Й 2

ОН СН торые являются одними из стандартных он с,н испытаний на гастрокинетическую активО " ность. Н в этом случае в силу того, С1 что они не являются допаминергичными антагонистами, соединения общей фор- 15 мулы не проявляют указанных побочных подвергают взаимодействию с хлорацедействий, присущих коммерически дос- тоном в среде инертного растворителя тупным замещенным бензамндам: меток- и полученное при этом соединение фор" лопрамид или клебоприд. мулы

II398771

18!

Продолжение таблицы

Антагонизм к эмезису, вызванному цисплатнном у хорьков

Антагонизм к

Соединение по примеру

Замещение

Н-спиперона, so >

Защита, Х

«1000

«1000

Метоклопрамид

310

0,5

Ализа прид 290

0,3

Клебоприд 11

Домперидон 4,1

0,04

0,2

Ф

Число животных равно 4.

Составитель В. Мякушева

Техред A,Êpàâ÷óê Корректор М. Пожо

Редактор А. Гратилло

Заказ 2609/58 Тираж 370 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., p. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 эмезису, вызванному апоморфином у собак, ЭД Б, мг/кг, подкожно

Доза, мг/кг, внутривенно, к2 (число животных pasно 3)