Способ выделения кристаллической натриевой соли 6- аминопенициллановой кислоты из культуральной жидкости, получающейся при глубинной ферментации микроорганизма pemcillium chrysogenum

 

3963

Класс ЗОК 6 ссср

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ПОд7ПаСНая груППа 1» ИУ

Е. М. Савицкая, Г. С. Либинсон, Н. Н. Шелленберг, T. С. Колыгина, Б. П. Брунс, П. С. Засыпкина, Л. Ф. Яхонтова, М. М. Левитов и М. А. Губерниев

СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ КРИСТАЛЛИЧЕСКОЙ НАТРИЕВОЙ СОЛИ

6-АМИНОПЕНИЦИЛЛАНОВОЙ КИСЛОТЫ ИЗ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ

ЖИДКОСТИ, ПОЛУЧАЮЩЕЙСЯ

ПРИ ГЛУБИННОЙ ФЕРМЕНТАЦИИ МИКРООРГАНИЗМА

PENICILLIUM CHRYSOGENUM

Заявлено 5 апреля 196. г. за М 725173/31 в Комитет по депагя изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Оиубпиковаио в сбюппетене изобретений» Л 1 за !962 г.

Изобретсние касается способов выделения 6-аминопенициллановой кислоты в виде ее натриевой соли из культуральной жидкости, получающейся при глубинной фермснтации микроорганизма Penicillium chrysogenum.

Известные способы не позволяют выделить препарат 6-аминопенициллановой кислоты из ку,IbT) i?àëüíûõ ?кидкостеЙ, полученных путем глубинной ферментации в кристаллическом виде.

В данном изобретении этот недостаток устраняется тем, что находящуюся в нативном растворе 6-аминопенициллановую кислоту с помощью переносчика экстрагируют при рН=1,8 органическим растворителем. Экстракт подшелачивают и реакстрагируют из него 6-аминопенициллановую кислоту водой. Из полученного реэкстракта удаляют воду и перекристаллизовывают готовый препарат, например, из этилового спирта, Способ основан на свойстве 6-аминопеници lлановой кислоты, находящейся в кислом нативном растворе в виде катиона, образовывать соли с органическими соединениями, обладающими ярко выраженным кислотным характсром B качестве таковых применяют сульфокислоты жирного или ароматического ряда, однозамещенные эфиры органических сульфокислот и прочие. Указанные соединения выполняют роль переносчиков 6-аминопенициллановой кислоты из водной среды в органическую, Органическая среда может быть образована малорастворимымн в воде спиртами, сложными эфирами или другими подходящими растворителями. Реэкстракцию 6-аминопенициллановой кислоты в водную среду производят в щелочной среде. В результате проведения процесса экстракции и реэкстракции происходит как концентрирование раствора 6-аминопенициллановой кислоты, так и удаление большого количества примесей, содержавшихся в нативном растворе. 1Лз полученного реэкстракта удаляют воду и обрабатыва1от сухой препарат спиртом

¹ 143963

Предмет из об ретен ия

Способ выделения кристаллической натриевой соли 6-аминопенициллановой кислоты из культуральной жидкости, получающейся при глубинной ферментации микроорганизма Penicillium chrysogeIIum, о т л ич а ющ ий с я тем, что, с целью выделения вышеуказанного препарата в кристаллическом виде, 6-аминопенициллановую кислоту, находящуюся в нативном растворе, экстрагируют при кислоте рН в органическую фазу с помощью переносчиков-сульфонатов жирного или ароматического ряда, реэкстрагируют при щелочных рН в водную фазу, а водный рсэкстракт упаривают, полученный осадок обрабатывают этиловым спиртом, упаривают и кристаллизуют.

Составитель В, А. Таратута

Редактор А. К. Лейкина Техред T. П. Курилко Корректор М. И. Козлова

Поди. к печ. 23.1-62 г

Зак. 249

Формат бум. 700(108 / 6

Тираж 420

ЦБ ГИ при Комитете по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, М. Черкасский пер., д. 2/0.

Объем 0,18 изд. л.

Цена 4 коп.

Типография ЦБТИ Комитета по делам изобретений и открытий иои Совете Министров СССР, Москва, Петровка, 14.! с или другим растворителем. При упаривании раствора под вакуумом

fIpoHcxo/IHT кристаллизация 6-аминопенициллановой кислоты, которую отделяют от маточника и промывают органическим растворителем.

Определение активности препарата производят, предварительно переводя его в биологически активный феноксиметилпенициллин, путем ацилирования хлорангидридом феноксиуксусной кислоты.

Пример. 100 л нативного раствора б-аминопенициллановой кислоты, из которого природные пенициллины удаляют экстракцией бутилацетатом при рН=2, подкисляют до рН=1,8 раствором серной кислоты.

Активность б-аминопенициллановой кислоты в полученном растворе равна 1650 ед/лтл. При перемешивании к раствору добавляют 6 кг сульфоната из мягких парафинов. После растворения сульфонатов в смесь вводят 100 л изоамилового спирта, перемешивают в течение 10 минут и помещают в сепаратор, в котором происходит разделение водного и органического слоя. Органический раствор помещают в аппарат с мешалкой и при перемешивании добавляют 12 л дистиллированной воды и раствор едкого натра до щелочной реакции раствора. После десятиминутного перемешивания и отстаивания смесь переливают в аппарат для разделения фаз. Водный реэкстракт нейтрализуют серной кислотой до pH=6,9- Активность б-аминопенициллановой кислоты в нем составила 8000 eolìë при общем объеме 14,5 л. После удаления воды берут 170 г сухого препарата и обрабатывают 850 нл 96%-ного этилового спирта; активность 6-аминопенициллановой кислоты при этом равна

16 000 ед/лы при общем объеме экстракта 730 мл. Осадок, полученный после отделения спиртового экстракта центрифугированием, был вторично обработан 650 лл этилового спирта; активность 6-аминопенициллановой кислоты во втором экстракте составляет 6300 ед/лл при общем объеме 640 лл. Оба экстракта соединяют и упаривают под вакуумом.

Выпавшие светло- келтые кристаллы отделяют от маточника центрифугированием, промывают 100 л1л этилового спирта и 25 ил диэтилового эфира. Всего получено 3,5 г препарата с активностью 2200 ед/лг.

По заключению Академии медицинских наук СССР предлагаемый способ может найти промышленное применение,