Способ окраски мазков с бруцеллезными микробами

 

Класс QQh, в4

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СБИДЕТЕЛЬСТ8У

Подписная группа .Ч 139

Л. И. Дацевич

СПОСОБ ОКРАСКИ МАЗКОВ С БРУЦЕЛЛЕЗНЪ|МИ МИКРОБАМИ

Заявлено 10 июля 1961 г. за № 737509/30 — 15 в Комитет по делам изобретений и открькгий при Совете Министров СССР

Опубликовано в «Бюллетене изобретений» № 3 за 1962 г.

Способы окраски мазков с целью идентификации типа возбудителя заболеваний известны, однако для идентификации типа возбудителя бруцеллеза применяются трудоемкие методы по изучению биологических, биохимических и серологических свойств бактерий. Чаще используют бактериостатический (изучение роста чистых культур возбудителя на средах с фуксином и тионином) и серологический метод, заключающийся в постановке реакции агглютинации с монорецепторными сыворотками. Эти методы требуют стандартных красок, типоспецифнче=ких сывороток и много времени, чтобы получить приближенной точности определение.

Способ дифференциальной окраски бруцелл, описанный в авт. св.

; в 693317 от 10.5.1961 г., выданном автору данного изобретения, позволяет дифференцировать бруцелл типа бовпс от супс и мелитензис, но не обеспечивает дифференциации супс от мелитензис.

Описываемый способ не имеет указанных выше недостатков благодаря применению специального реактива для окраски бруцелл типа мелитензис.

Отличительной особенностью способа является применение реактива, состоящего из равных частей 1%-ного водного раствора основного фуксина и 4%-ного водного раствора бриллиантовой зелени. Этим реактивом окрашивают мазки в течение 10 — 11 мин, после чего промывают водой и высушивают. Подсушенный мазок исследуют под микроскопом с иммерсионной системой. Такой способ окраски мазков с бруцеллпми обеспечивает дефференциацию бруцеллы мелитензис от типов супс и бовис с наименьшей затратой средств и времени. Использование такого простого способа идентификации типов бруцелл имеет большое значение не только в микробиологии, но и в практике борьбы с бруцеллезом.

Для осуществления способа окраски мазков реактив, включающий фуксин и бриллиантовую зелеш; готовят следующим образом.

Предмет изобретения

Способ окраски мазков с бруцеллезными микробами с применением химических реактивов, отличающийся тем, что, с целью обнаружения бруцелл типа мелитензис путем придания им ярко-красного цве-та, применяют реактив, состоящий из равных частей 1%-ного водного раствора основного фуксина и 4%-ного водного раствора бриллиантовой зелени, которым окрашивают мазок в течение 10 — 11 мин, после чего промывают водой, высушивают и исследуют под микроскопоэм с иммер«ионной системой.

Описание составил эксперт А. Д. Мусин

Редактор М. И. Бородина Техред А. А. Кудрявицкая Корректор Р. Я. Беркович

Объем 0,18 изд. л.

Цена 4 коп.

Формат бум. 70 (108 /1а

Тираж 420

ЦБТИ при Комитете по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, М, Черкасский пер., д. 2/6.

Типография ЦБТИ Комитета по делам изобретений и открытий,при .Совете Министров СССР, Москва Петровка, 14.

Поди. к печ. 27.!-62

Зак. 561

Ввиду того, что растворимость фуксина. в воде равняется только 0,39%, оба раствора препаратов перед смешиванием подогревают до 70 — 80 .

Для ускорения растворения фуксина раствор при подогревании помешивают. После подогрева растворы смешивают в горячем виде и полученную смесь в течение суток выдерживают в термостате при 37 .

Мазки для окраски готовят из 2 — 4-суточной культуры бруцелл, выращенной на плотном агаре. При нанесении культуры на стекло ее смешивают с физиологическим раствором. Мазки подсушивают на воздухе. или слабо фиксируют над пламенем. Подготовленный мазок окрашивают реак ивом в течение 10 — 11 мин, затем подсушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют.

При микроскопии мазков наблюдают следующую микроскопическую картину: живые недиссоциированные бруцеллы типа суис и бовиссине-зеленого цвета, а мертвые — красного цвета: недиссоциированные бруцеллы типа мелитензис — мертвые и живые — ярко-красного цвета, в некоторых случаях среди этих клеток встречаются зеленоокрашенные клетки.