Способ профилактики отторжения пересаженного органа
Изобретение относится к трансплантологии . Цель изобретения - повышение эффективности профилактики при снижении токсического воздействия. За сутки до операции и каждые 2 - 3 сут после операции проводят лимфо лейкаферез. Способ позволяет предотвратить прогрессирование развиЕ. аегося острого криза отторжения, ликвидировать этот криз и нормализовать функцию трансплантата.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК (191 (11) Ш 4 A 61 В 10/00, 17/00
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К A BTOPCHGMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
:Вь
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4104309/28-14 (22) 30 ° 07.86 (46) 23.09.88. Бюл. 9 35 (71) Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов (72) A.А.Писаревский, С.Н.Игнатенко, Ю.В.Кипренский и А,Н.Скобенников (53) 615.45(088.8) (56) Dubernard I. et.al. — World, J.Surg, 1984, vol 2, р .262-266 . (54) СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ОТТОРЖЕНИЯ
ПЕРЕСАЖЕННОГО ОРГАНА (57) Изобретение относится к трансплантологии. Цель изобретения — повышение эффективности профилактики при снижении токсического воздействия.
3а сутки до операции и каждые 2
3 сут после операции проводят лимфолейкаферез. Способ позволяет предотвратить прогрессирование развившегося острого криза отторжения, ликвидирлвать этот крив и нормализовать функ. цию трансплантата.
1424854
Изобретение отно(.ится к медпцпне1 в частности к трансплантологии.
Цель изобретения — повышение эфф(зктивноcти профилактики и p меньше ние токсического воздействия..
П р » е р 1. У донора (собака, самец массой 16 кг) под общим обез1 боливанием (калипсол 10 мг/кг в/м, ! атропин 0,3% R/м, тиопентал натрия 10
30 мг/кг в/в) с применением интубации тряхеи и искусственной вентиляции аппаратом PO-5 кислородно-воздушной смесью произвели срединную лапяротомию и забор дистяльного сегмента левой доли поджелудочной железы вместе с селезеночными сосудами.
После промывания сосудистого русла гепаринизировянным раствором Евроколлпнзя трансплантат желе cтвор при 4 С на 2 ч. У реципиента (собака, самка Mdc— сой 15 кг) поJ общим обезболивяние;l по указанной методике за 3 ч до сегментяр ной трансплантации поджелудо.- ной железы Во вскрытый просвет обнаженной сонной артерии и наружпой яремной вены справя ввели канюли. С помощью экстракорпоральных 1 шунтов их соединили с фракционятором крови ФК-3, и осуществили лимфох!е1lка<ь(.-pe з ° Перси процед jpой рсци пиенту внутривенно ввели 7 500 ед. гепярина (500 ед. ця 1 кг массы) . При исследозании исходной пробы 3 периферической вено зной крови быпи определены следующие параметры изучаемых показателей: эритроциты 4,5 млн, лейкоциты 7,6 тыс., лимфо циты 29/,, СОЭ 5 мм/ч. Д В результате проведенного лимфолейкафереза было удалено 80K лейкоцитов и лимфoIIH ToB,от их исходно— го содержа ния в периферической в енозной крови реципиента. Повторное ис— 4 следование изучаемых показателей сразу после процедуры позволило получить следующие резулы яты: эритроциты 4,2 млн., лейкоциты 1,5 тыс., лимфоциты 5,97., СОЭ 8 мм/ч. Тякии образом, реципиент был подготовлен к пересацке поджелудочной железы путем снижения его предоперационной иммунной реактивности на аллотрянсплантируемый орган. ! Далее пяраректальным разрезом внебрюшинно обнажили и мобилизовали наружные подвздошные сосуды. Для обеспечения жизнеспособности поджелудочной железы на период ее подгoтовки к пересадке и непосредственно во время трансплантации проксимяльные концы селезено ных сосудов посредством канюль и экстрякорпоряль= IIbIx шунтов соединили с сосудами, временно вью еле иными на пр оти вол оложной конечности, внутривенно ввели гепарин (500 ед. на 1 кг массы) и приступили к перфузии. Подготовка железы с пересадке состояла в проведении тщательного гемостазя путем электрокоагуляции и лигировяния мелких сосудов, я также удаления из— лишней жировой клетчятки, Затем .сформированные воронкообразные раструбы из наиболее крупных дистальных ветвей селезеночной артерии и вены путем продольного расcå÷errêÿ их места деления вшивяли в соответствующие наружные подвздошные сосуды реципиента по типу конец в бок . Пересаженную железу включили в кровоток и закончили ее внутриоргянную перфузию. Продолжительность теплоО вой (18-21 С) аноксии («o время <яЛора) тря нсплантата нс превышала 3 мин, а длительность его холоцовой (4-12 С) аноксии составила 2 ч 40 мин Сегмент железы трянсплянтировали вместе с клетчаткой, окружаюя ей панкр еатич ес ки е. и с еле зеночные с ос уды, и расположенными в Heri отводящими лимфатическими сосудами, регионяр— ными лимфатическими узлами и поджелудочными нервами. Лимфоотток ocy— ществили наложением анястомоза между вскрытым 1 ряевым синусом одного и з самых крупных лимфатических узлов, раси, пагающимся у места впадения селезеночной вены в воротную, и глубской огибающей подвздошной веной. Реиннернацию железы осуществили путел1 сшивания сформированного лоскута из клетчатки, локализ MU(eHclr на задней поверхности трянсплянтата> с фясциально-клет аточным лоскутом, образованным над подвздошными сосудами, Дренировяние панкреатического протока осуществили в орюшную полость посредством подшивания усечен ого участка железы к краям образованного окна в брюшине с размещением трянсплантата экстрапери"oileaльно. После фиксирования трянспланта rа железы к окружающим тканям рану зашили послойно няг.: уxo. Or с..рацию выпол1424854 нили под опер;|ционным микроскопом с применением микрохирургической техники, проленовых нитей 8/0-10/О на атравматической игле. В последующем на 3-, 5-, 7- и 9-е сутки после операции подопытному животному осуществили лимфолейкаферез с целью снижения иммунной реактивности реципиента на аллотрансплантированный сегмент поджелудочной железы. В течение всего периода наблюдения после операции не наблюдали осложиений, а трансплантированная поджелудочная железа сохраняла жизнеспособность. Для профилактики воспалительных осложнений, тромбоза сосудистых анастомозов и послеоперационного панкреатита был проведен курс лечения антибиотиками, гепарином и гордоксом. На 10-е сутки после операции согласно задачам эксперимента оперированное животное было выведено из 25 опыта, В >тот период наблюдения уровень инсулина, глюкозы и липязы крови составлял соответственно 20,4 мкед/мл, 5,4 ммоль/л и 6- : ед В, что подтвердило нормальную эндокрин30 ную функцию трансплантата и отсутствие в нем признаков панкреатита. Не высокое СОЭ (10 мм/ч), небольшое уменьшение эритроцитов (4 млн.), нормальные показатели КШС и оксигенации крови РН вЂ” 7,36, SB — 20,5 мэкв/л, 35 ВЕ= — 1,5 мэкв/л, НвО А 94,5Х, НвО В 74,2Z, А-В различие по кислороду 20,37., отсутствие увеличения АСТ и AlIT (соответственно 6, 7 MH/л и 3,9 МЕ/л) также свидетельствовали об отсутствии развития криза отторжения трянсплантата. При макро- и микроскопическом исследовании транс— плантлта сегмента поджелудочной железы признаки деструкции органа не были выявлены, В течение всего послеоперлционного периода животное не получало иммунодепресанты, Таким образом, представленные результаты нлблк|дения показали, что 50 предл |глемый способ позволяет добиться си||женив иммунной реакции реципиента нл трансплантат H дает возможность сохранить функцию транс.-|лантата нл протяжрнни всего периода наблю- 55 дения, Па трaнс||:|антлции поджелудочной желе |ы в условиях клиники делаются первые попытки. Поскольку иммунологические мехлнизмы у людей и живот— ных в ответ ня аллотрлнсплантацию любого органа однотипны, то все приемы предлагаемого способа с полным основанием могут быть применимы в клинической практике не только при пересадке поджелудочной железы, но и других органов и тканей. Об этом убедительно свидетельствуют резул|таты использования предлагаемого способа как для предотвращения, так и купирования криза отторжения при трансплантации щитовидной железы в комплексе с плращитовидными желе злми, а также почки. При этом наблюдалось восстановление функции пересаженных органов. Пример 2. У донора К. через 50 мин после смерти от ишемической болезни сердца = острым развитием коронлросплэм; и кардиогенного шока осуществили забор щитовидной железы вместе с плрл|цитовидными железами. После отмывания внутриорглнного сосудистого русла до чистого отделяемого и 18-часовой консервлции бесперфузионным гипстермпческим с|;особом трансплантаI был пересажен рецигиентке А, на сосуды левого плеча в связи с наличием послеоперационного гипопаратиреозл и гипот||ряс я средней тяжести. 3 . сутки до операции с ц< лью уменьшения иммунного ответя и пре дупреждения рлзвития кр||зл отторжения больной бьй проведен лимфолейклферез, В результате этого было удалено 80Z лейкоцитов и лимфоцитов от исходного количества. Прп исследовании исходной пробы веыо.зной крови количество эритроцитав, лейкоцитов, лимфоцитов и уровень СОЭ составили соответственно 5,4 млн, 7,2 тыс., 313 и 4 мм/ч, а срлзу пос..|е процедуры были получены следующие результаты: эритроциты 5,1 млн., лейкоциты 1,52 тыс., лимфоциты 6Ж и СО 3 9мм/ч. В посттрансплантяционном периоде на 3 вЂ, 7- и 10 †сутки к больной применили предложенный спос оо для снижения иммунной реактивности реципиента на пересаженный щитов||днс -паращитовидный комплекс, Лабораторные исследования показали, что после каждой процедуры снижалось количество лейкоцитов до 1,2-2,2 тыс., лимфоцитов до 3-6Х и через 2 — 4 сут после 5 14 нее их число возрастало соотве I cT венно до 3,7-4,5 тыс. и до 14-177.. При этом количество эритроцитов и уровень СОЭ практически изменялось. Несмотря на то, что больная не получала иммунодепрессивную терапию, в этот период наблюдения не имелось признаков отторжения. На 3- и 10-е сутки после операции нормальные Г оказатели гормонов и общего калья крови (трииодтиронин Т вЂ” 1,5 и 1,9 мг/мп, тироксин Т 79 и 90 нг/мп, аратгормон ПГ 2,2 и 2,7 мкед/мл,, иреотропный гормон ТТГ 3,1 и 3,4 мк ед/мп, общий Ca 2,25 и 2,30 ммоль/л) указывали на адекватную эндокринную функцию пересаженноо щитовидно-паращитовидногo компЛекса и нормальный кальцевый обмен. С 12 сут реципиентка быпа переедена на постоянную щадящую иммунодепрессивную терапию, которая «лючала предиизолон 1 мг/кг и хоиогопин 10 ед./кг, В течение 12 мес после операции ересаженный трансплантат хорошо у (кционировал (T> 1,2-2, 1 нг/мг, 86-102 нг/мл, ПГ 2, 1-2,6 мкед(мл, 1TI 2,0-2,6 мкед/мл, общий Са 2,10-?,25 ммоль/л) и не наблюдалось pçâèòHÿ признаков криза отторжения. Таким образом, представленное наблюдение показывает, что пред1 л оженный способ обеспечивает снижен е иммунной реакции реципиент н а аллотранспланта" и предупрежден е криза отторжения без применения иммуннодепрессивной терапии и обес течивает нормальную функцию пересаженного органа. Предложенный способ может применяться не только с целью предупреждения развития криза отторжения трансплантата, но и для купирования начавшегося криза отторжения. ! Пример 3. Бная 3. Клиническийй диагноз . Гипопаратир еоз и гопотиреоз послеоперационнг»Й, тяжелая форма. Больной была произве-дена аллот ра нспла нтация шит овидной железы в комплексе с паращитовидными железами. Трансплантат был взят через 30 мин после смерти от инфракта миокарда и в течеш!е 20 ч подвергался консервации бесперфузионным гипотермиче .«им способом, С первых суток после опера24854 6 5 45 ции больная получала щадящую имм iioдепрессивную терапию (предниэолон 0,5 мг/кг, гепарин 330 кед/«г), На 10-е сутки развились признаки острого криза отторжения, выразившиеся в уменьшении в крови тпреоидных гормоНоВ (Тэ 1,8 до 0,4 нг/мл, Т1 с 96 до 32 i г/мл), паратгормона (ПГ с 2,4 до 0,7 мкед/мп), общего кальция (Са с 2,24 до 1,65 ммоль/л) и повышении уровня тиреотропногп гормона (ТТГ с 2,4 до 42,5 мкед/мл). Одновременно возросло количество лейкоцитов (с 3,3 до 12,5 тыс.) и лимфоцитов (с 5 до 287). В связи с чем больной гровели две процедуры лимфолейкафереза по о предложенному способу с интервалом в 3 дн. и начавшийся криз отторжения был купировал без увеличения дозы иммуннодепрессантов. Через сутки после первой процедуры было отмечено быстрое восстановление функции пересаженного щитовидно-паращитовидного комплек .а и нормали зация содержания общего кальция в «рови на фоне снижения количества лейкоцитов и лимфоцитов. Спустя двое суток после второй процедуры концентраци; в крови изучаемых показа— телей составила Т> 2,3 нг/мл, Т 98 нг/мл, ПГ 2,4 мкед/мл,ТТГ 1,4мкед/мп, общий кальций 2,18 ммоль/л, -!то указывало на нормальную функцию трансплантата. Нормальная функция пересажепного щитовидно-паращитовидного комплекса сохранялась в течение 10 мес наблюдения за больной. На протяжении всего периода наблюдения получала иммуннодепрессивную терапию. Таким образом, данное наблюдение свидетельствует, что применение предложен) эго способа дает возможность предотвратить развитие криза отторжения и сохранить функцию пересаженного органа. При этом важно отметить, что применение предлагаемсго с.пособа усиливает действие проводимой иммуннодепрессивной терапии. Пример 4, У больного Х ва 6-е сутки после аллотрансплантапии почки по поводу хроничес«ой почеч— чой недостаточности в "талии декомпенсации развился острый «риэ отторжения на фоне проводимой иммунодепрессивной терапии (преднизолон 1,5 мг/кг, азатиоприн 3 мг/кг в сут ки). При этом количество отделяемой мочи в сутки сократилось с 9(!O, ï 14248 Формула изобретения Способ профилактики отторжения переСаженного органа путем иммуносупрессии, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности профилактики при снижении токсического воздействия, за сутки до операции и каждые 2-3 сут после операции проводят лимфолейкаферез. С ос тавит ель Л. Столярова Техред Л. Сердюкова Корректор И.Муска Редактор В.Данко Заказ 4710/6 Тираж 655 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, И-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 150 мл, возрос ло количество лейкоцитов с 5,4 тыс. до 19,7 тыс. лимфоцитов с 5 до 267, Одновременно увеличилась концентрация креатинина в плазме до 0,76 ммоль/л. Больному была проведена одна процедура лимфолейкофереза на 7-е сутки после операции. В результате чего снизились лейкоциты и лимфоциты периферической 10 крови соответственно до 3,1 тыс, и 4 . Через сутки после процедуры началось быстрое восстановление мочевыделительной и азотовыделительной функции трансплантата. Это вырази- 1В лось в увеличении количества мочи до 800 мл, уменьшилась концентра-. ция креатинина плазмы крови до 0,37 ммоль/л. Спустя трое суток после процедуры количество мочи достигло 2300 мл в сутки и наступила нормализация креатинина плазмы крови 54 8 (0,12 ммоль/л) . В течение следующих 2,5 мес иммуннопрессивной терапии развития признаков криза отторжения не отмечалось. Больной был выписан в удовлетворительном состоянии. Таким образом, предлагаемый способ может не только предотвратить дальнейшее прогрессирование уже развившегося острого криза отторжения, но ликвидировать его и нормализовать функцию трансплантата, 
