Способ определения токсичности плазмы крови

 

Изобретение относится к медицине, касается определения токсичности плазмы крови больных. Цель изобретения - ускорение и упрощение способа. Пробу крови 10 мин центрифугируют при 5000 об/мин, затем 1 мл плазмы переносят в отдельную пробирку и у донора, идентичного по группе и резус-фактору берут 0,01 мл крови и смешивают в пробирке с исследуемой плазмой. Смесь инкубируют при 18-22^oC, затем исследуют микроскопически. Степень токсичности плазмы оценивают по скорости трансформации эритроцитов в сфероциты и по числу последних, определяемых микроскопией суспензии под малым и большим увеличением через 30, 60 и/или 120 мин. Инкубация одногруппных донорских эритроцитов в высокотоксичной плазме через 0,5 ч всегда приводит к 100%-ной трансформации их в сфероциты. В плазме здоровых лиц в течение 2 ч не наблюдается никаких изменений формы.

Предлагаемое изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения токсичности плазмы крови больных. Цель изобретения ускорение и упрощение способа. Способ определения токсичности плазмы осуществляется следующим образом. Исследуемую кровь в количестве 3-4 мл центрифугируют в течение 10 мин при скорости вращения центрифуги 5 тыс. оборотов в минуту. Далее отсасывают 1 мл плазмы и переносят в отдельную пробирку, затем у донора, идентичного по группе и резус-фактору, путем прокола мякоти пальца в стерильных условиях с помощью лабораторного капилляра берут 0,01 мл крови и смешивают в пробирке с исследуемой плазмой. Смесь инкубируют при комнатной температуре, осторожно периодически перемешивая ее. Затем каплю суспензии наносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Степень токсичности плазмы оценивают по скорости и трансформации эритроцитов в сфероциты и по числу последних, определяемых путем микроскопии суспензии под малым и большим увеличением через 30, 60 и/или 120 мин. Инкубация одногруппных донорских эритроцитов в высокотоксичной плазме через 30 мин всегда приводит к 100%-ной трансформации их в сфероциты. Инкубация одногруппных эритроцитов донора в плазме здоровых лиц в течение 2 ч не приводит к изменениям их формы. Пример 1. Больному З. 60 лет (N истории болезни 2669) по поводу опухоли нижней трети пищевода произведена проксимальная резекция желудка и нижней третий пищевода. Послеоперационный период осложнился двусторонней пневмонией, левосторонним гнойным плевритом, обнаружена несостоятельность анастомоза. Клинически через 8 дней выявлены выраженные симптомы эндогенной интоксикации. Одногрупповая кровь донора инкубирована с плазмой больного в разведении 1:100 в течение 2 ч. Микроскопией инкубированных эритроцитов обнаружена полная трансформация их в сферические клетки-эхиноциты. Пример 2. В 1 мл плазмы консервированной донорской крови группы А П, резус-фактор +, сроком хранения 21 день добавлено 0,01 мл крови той же группы, взятой у здорового лица. После инкубации в пробирке в течение 30 мин при периодическом перемешивании произведена микроскопия капли суспензии. Обнаружена 100%-ная трансформация красных кровяных клеток в сфероциты (эхиноциты). Определена высокая степень токсичности плазмы. Пример 3. Больному К.64 лет (N истории болезни 666) по поводу рака желудка произведена гастрэктомия. Через 3 дня после операции симптомы интоксикации выражены умеренно. Плазма больного смешана с кровью одногруппного донора в соотношении 100: 1. Микроскопия суспензии через 2 ч инкубации выявила сфероцитоз в 20% что соответствует клиническим признакам интоксикации.

Формула изобретения

Способ определения токсичности плазмы крови путем воздействия исследуемой плазмы на тест-систему в сравнении с контролем, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, исследуемой плазмой воздействуют на кровь здоровых доноров, идентичную по группе и резусфактору, суспензию инкубируют при комнатной температуре, микроскопируют, а токсичность определяют по скорости трансформации донорских эритроцитов в сфероциты и по процентному содержанию сфероцитов.