Способ получения биопрепаратов для коррекции кишечной микрофлоры

 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к производству лечебно-профилактических биопрепаратов. Цель изобретения - снижение антигенной нагрузки на единицу дозы препарата и предупреждение побочных эффектов при его использовании. Культуру штамма ESCHERICHIA COLI ГИСК N 18 выращивают в питательной среде (несколько пассажей), полученный посевной материал инокулируют в питательную среду, культивируют в аэробных условиях при постоянном перемешивании и регулировании PH в процессе культивирования. Полученную биомассу высушивают или смешивают с биомассой бифидобактерий.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИ, ЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (5D 4 А 61 К 35/74

ГОСУДАРСТВЕННЬ1Й НОМИ I ET

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21 ) 4287731/28-13 (22) 21.07.87 (46) 15.05.89. Бюл. № 18 (71) Московский чаучно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г. Н. Габричевского, Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи, Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л. A. Тарасевича и 1-й Московский медицинский институт им. И. М. Сеченова (72) В. В. Поспелова, Н. Г. Рахимова, H. М. Грачева, А. Ф. Гаврилов, О. В. Чахава, Н. М. Шустрова, Е. М. Горская, M. Г. Богатырева, Л. Н. Евтухова и Н. Н. Каншина (53) 576.8.093 (088.8) (56) Руководство по вакцинному и сывороточному делу./Под ред. П. Н. Бургасова, М.:

Медицина, 1978, с. 88 — 94, 98 — 101.

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности производству лечебно-профилактических биопрепаратов.

Цель изобретения — снижение антигенной нагрузки на единицу дозы препарата и предупреждение побочных эффектов при его использовании.

Пример 1. Получение монопрепарата.

Для получения маточной культуры ампулу с лиофилизированным производственным штаммом Escherichia coli ГИСК № 18 вскрывают стерильно и пипеткой вносят в нее 5 — 6 капель мясо-пептонного бульона. Полученную взвесь той же пипеткой переносят в пробирку с мясо-пептонным бульоном (рН 7,2—

7,4), которую выдерживают в термостате при 37 + 1 С в течение 2 — 4 ч.

„. SU 1479076 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ КИШЕЧНОИ

МИКРОФЛОРЫ (57) Изобретение относится к микробиологической громышленности, в частности к производству лечебно-профилактических биопрепаратов. Цель изобретения — снижение антигенной нагрузки на единицу дозы препарата и предупреждение побочных эффектов при его использовании. Культуру штаммa Escherichia со11 ГИСК ¹ 18 выращивают в питательной среде (несколько пассажей), полученный посевной материал инокулируют в питательную среду, культивируют в аэробных условиях при постоянном перемешивании и регулировании рН в процессе культивирования. Полученную биомассу высушивают при смешивают с биомассой бифидобактерий.

В в4

Бульонную культуру первой генерацин в 1 пересевают на 3,5 — 4,0 /О-ный питательный агар в матрицах (четвертях), приготовленный на дрожжевом автолизате, мясном и.1и казеиновом гидролизатах (рН агара 7,2 — 4

7,6) и инкубируют при 37 1 С в течение (, Ь

12 — 18 ч. Затем культуру с поверхности агара в матрицах (четвертях) смывают 0,8",0ным раствором натрия хлорида или питательным бульоном. B реактор засевают 1218-часовую агаровую маточную культуру второй генерации или 6 — 8-часовую бульонную культуру пятой генерации. Плотность посева в реакторе — 400 — 600 м 1H микробных клеток на 1 мл среды.

Выращивание культуры F. coli ¹ 18 производят в реакторе на казеиновом бульоне, с содержанием 1,2 — 2%-ной желатозы при

1479076

Формула изобретения

Составитель Г. Смирнова

Редактор M. Товтин Техред И. Верес Корректор Н. Король

Заказ 2464(4 Тираж 644 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, 7K — 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат «Патент», г. Ужгород, ул. Гагарина, 101

37+ 1 С в течение 6 — 9 ч при интенсивном перемешивании и беспрерывной подаче сжатого стерильного воздуха. В процессе культивирования в реактор добавляют 40%-ный раствор глюкозы, в зависимости от рН среды, величину — которой поддерживают 7,4—

7,6 в начале выращивания, 7,8 — 8,0 в конце выращивания, не допуская резких колебаний

Выращенную культуру после соединения с компонентами среды суспендирования разливают в стерильные лотки-кассеты из нержавеющей стали, имеющие форму секторов или стеклянные емкости (ампулы, флаконы, матрицы), закрывая четырьмя слоями стерильной марли и подвергают лиофильной сушке.

Пример 2. Получение двухкомпонентного препарата с производственным штаммом бифидобактерий.

Подготовленную маточную культуру штамма E. Coli № 18 засевают в стеклянные или металлические емкости с питательной средой при одновременном засеве производственного штамма бифидобактерий согласно технологии получения биопрепарата

«Бификол». Посевы инкубируют при 37 С в течение 10 в ll ч, после чего разливают в стеклянные металлические емкости названных в примере 1 вариантов и подвергают лиофилизации.

Высушенную биомассу выпускают в нативном виде — в ампулах, флаконах или используют для таблетирования.

Таким образом, использование способа позволяет предупредить возникновение подобных эффектов, поскольку получаемые биопрепараты свободны от антигенов 02 и Н6, свойственных патогенным энтеробактериям, что повышает степень их переносимости и безвредности, в составе получаемых биопрепаратов содержание микробных клеток уменьшено более чем в 100 раз, что значительно уменьшает антигенную нагрузку на каждую дозу, а антагонистическая активность действующего начала биопрепаратов проявляется в более высокой степени, чем у существующих ныне при более выраженной адгезивной способности по сравнению со штаммом Е. coli M17.

Ранее штамм ГИСК № 18 Е. coli использовался для санации холерного носительства, Способ получения биопрепаратов для коррекции кишечной микрофлоры на основе живой культуры Escherichia coli путем культивирования посевного материала в питатель25 ной среде в условиях аэрации, перемешивания и регулирования рН культуральной жидкости с последующим отделением полученной биомассы и высушиванием целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью снижения антигенной нагрузки на единицу дозы препарата и предупреждения побочных эффектов при его использовании, используют штамм бактерий Escherichia coli ГИСК № 18.