Способ определения сорбционной способности гемосорбентов

 

Изобретение относится к медицине, а именно к способам апробации гемосорбентов. По предлагаемому способу определяют сорбционную способность гемосорбентов по отношению к ингибиторам протеолитических ферментов , в частности, трипсина. Изобретение позволяет снизить побочное действие гемосорбции, обусловленное нарушением функций протеолитических ферментов, в том числе регуляции процессов коагуляции и фибринолиза путем отбора гемосорбентов. Гемосорбенты, обладающие выраженной способностью к поглощению ингибитора трипсина, не могут быть рекомендованы для клинического применения.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧ ЕСНИ Х

РЕСПУБЛИН

155 А1 (19) (11) ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4259646/28 — 14 (22) 23.03.87 (46 ) 15.09.89. Бюл, № 34 (71) Киевский медицинский институт им. акад. А,A.Богомольца, Киевский, научно-исследовательский институт эпидемиологии и инфекционных болезней им. Л.В. Громапевского и Институт общей и неорганической химии АН УССР (72) E Д.Молюк, В.С,Земсков, А,Б,Процюк, H,Ò,Картель, Т.М„Хомив и С.Л.Медведев (53) 615.362.342.4(088.8) (56) Филиппов С.И., Ктениди Л,И, и др. Гемосорбция с индивидуальным выбором гемосорбентов в комплексном лечении перитонита, Лечение перитонитов. Ультразвук в хирургии (Тезисы докладов), Омск, 1986.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам апробации гомо сорбентов.

Цель изобретения — повышение эффективности способа за счет отбора гемосорбентов по способности к поглощению ингибитора протеолитического фермента, Способ осуществляется следующим

Образоме

В пробирки помещают по 50 мг каждого из исследуемых сорбентов, куда добавляют по 0,5 мл- сыворотки крови (разведение 1: 20) . Контакт сыворото ки с сорбентами 30 мин при 37 С.

Готовят ряд из восьми пробирок с различным количеством трппсина на забуференном физиологическом раство(51) y G 01 N 33/48, А 61 М 1/34

2 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОРБЦИОННОЙ

СПОСОБНОСТИ ГЕМОСОРБЕНТОВ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к способам апробации гемосорбентов. По предлагаемому способу определяют сорбционную способность гемосорбентов по отношению к ингибиторам протеолитических ферментов, в частности трипсина. Изобретение позволяет снизить побочное действие гемосорбции, обусловленное нарушением функций протеолитических ферментов, в том числе регуляции про цессов коагуляции и фибринолиза путем отбора гемосорбентов, Гемосорбенты, обладающие выраженной способностью к поглощению ингибитора трипсина, не могут быть рекомендованы для клинического применения, 2 табл. ре (рН 7,2), начиная с 500 мкг/мл— с последующим перепадом концентраций в 2 раза до 3,9 мкг/мл в последней пробирке. Раствор трипсина до исполь— о зования в опыте хранят при 2-4 С.

После контакта сорбентов с иссле,дуемой сывороткой крови жидкую фазу смести в объеме по 0,1 мл переносят в лунки полистироловой пластины (восемь лунок), куда добавляют равные объемы (по О, 1 мл) ранее приготовленного раствора трипсина соответствующих концентраций, Одновременно ставят контроль на активность трипсина: в ьосемь лунок добавляют по 0,1 мп раствора трипсина различных концентраций, указанных . .выше,и по 0,1 мл забуференного физиоТаблица 1

Исследуемые Количество трипсина, мкг/мл

500 250 125 62,4 31,2 15 6 7,8 3.,9

Контроль трипсина

Контроль сыворотки

АУ - 1

Ау № 2

АУ -3

АУ¹4

АУ№5

АУ№6

+ + +

+ + +

+ + +

+ + ° + +

+ + +

+ + + +

+ + +

+ + +

+ +

/Э

Как видно из табл. 1, активирован-35 ные угли № 2 и 4 обладают выраженной способностью поглощать ингибиторы протеиназ иэ сыворотки крови и не могут быть рекомендованы для проведения гемосорбции, l40

Экспериментальное обоснование необходимости апробации гемосорбентов способности поглощать ингибиторы протеолитических ферментов приведено в табл. 2.

В качестве опытных животных были

I использованы белые мыши, В 1-м опыте животным внутрибрюшинно вводилась токсическая доза трипсина (4 мл на 1 животное), во 2-м— трипсин после обработки донорской сывороткой, обладающей высокой ингибиторной емкостью в отношении трипсина, в 3-м опыте сыворотка предварительнр пропускалась через сорбент

СКН П-1, не понижающий ее ингибиторной емкости, в 4-м — через сорбент

СКН П-4, уменьшающий ингибиторную емкость сыворотки в 2 раза, Таблица 2

Содержание

Летально ст ь опытных жи вотных через сутки, Х

100

Три псин

Трипсин + сыв. после

СКН П-1

Трипсин + сыв. после

СКН П-4

Сыворотка

Нет

Нет

Из табл. 2 видно, что сорбент СКН

П-4 при использовании его при гемосорбции может вызвать побочное действие, обусловленное нарушением функций протеолитических ферментов, в частности регуляции процессов коагуляции и фибринолиза, формула изобретения

Способ определения сорбционной способности гемосорбентов, включающий биохимический метод исследования

3 1508155

4 логического раствора (рН 7,2), Иссле- в зоне контакта исследуемого материдуют и антипротеаэную емкость сыво— ала и желакинового слоя пленки. ротки крови без воздействия сорбентов (контроль сыворотки), Смещение просветлений вправо"

На предварительно приготовленную свидетельствует об эффективной сорбрентгенологическую пленку, бывшую ции активированными углями ингибитов употреблении, наносят по капле сме ров протеина сыворотки крови ввиду си каждого разведения. Экспозиция того, что добавленный трипсин не ин1 ч при 37 С, После смыва смеси из 10 активировался и вызвал расщепление пленки под струей воды и просушива- желатины. ния на воздухе учитывают результат Изобретение иллюстрируется припо образованию просветлений на пленке мером (см. табл.).! 508!

Составитель В. Егорова

Редактор М.Келемеш Техред, H.Верес, Корректор С.Черни

Заказ 5535/47 Тираж 789 Подписное г

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретенйям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент" ° г.ужгород, ул. Гагарина, 101 сыворотки крови до и после контакта с гемосорбентом, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения эффективности способа за счет

5 отбора гемосорбентов по способности

6 к поглощению ингибитора протеолитических ферментов, определяют активность ингибитора трипсина и по его уровню определяют сорбционную способность.