Способ непрерывного выращивания дрожжей
Изобретение относится к микробиологической промышленности и представляет собой способ непрерывного выращивания дрожжей на углеводородах. Цель изобретения - увеличение выхода биомассы и продуктивности процесса. Дрожжи рода CANDIDA непрерывно выращивают в условиях аэрации на питательной среде, содержащей углеводороды, минеральные соли и поверхностно-активное вещество (ПАВ). После отделения биомассы в осветленную культуральную жидкость, возвращаемую в процесс выращивания, периодически добавляют медный купорос, обеспечивая соотношение концентраций ионов меди и ПАВ в диапазоне от 0,01 до 1,0. Периодичность ввода медного купороса определяют по формуле Т=1/(0,1-0,2)+C<SB POS="POST">орг</SB>, где Т - период времени между добавками медного купороса, ч C<SB POS="POST">орг</SB> - концентрация органических кислот в осветленной культуральной жидкости, мас.%
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСГ1УБЛИК
А1 (19) (11) (5ц 4 С 12 N 1/26
1 к
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А BTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
IlPH ГКНТ СССР
1 (21) 4378503/30-13 (22) 12.02.88 (46) 30. 10.89. Бюп. У 40 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ (72) А.Ю.Винаров, Г.Н.Хорошева, А.Н.Скворцов, Л.И.Василенко, Н.И.Коломыцев, Ф.Б.Ибрагимов, В.Я.Волох, А.И.Заикина и Н.И.Цыганкова (53) 663.18(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР
Ф 1212039, кл. С 12 N 1/16, 1984.
Авторское свидетельство СССР
М 1309575, кл. С 12 N 1/16, 1985. (54) СПОСОБ НЕПРЕРЫВНОГО В61РАЩИВАНИЯ
ДРОЖЖЕЙ (57) Изобретение относится к микробиологической промышленности и представляет собой способ непрерывного
Изобретение относигся к микробиологической промышленности, а именно к способу непрерывного выращивания дрожжей на углеводородах.
Цель изобретения — увеличение вы- хода биомассы и продуктивности процесса °
Способ осуществляют следующим образом.
Дрожжи непрерывно выращивают в условиях аэрации и перемешивания на питательной среде, содержащей н-парафины, исгочники азо.га, фосфора, калия, железа, цинка, магния и поверхностно2 выращивания дрожжей на углеводородах.
Цель изобретения — увеличение выхода биомассы и продуктивности процесса.
Дрожжи рода Candida непрерывно выращивают в условиях аэрации на питательной среде, содержащей углеводороды, минеральные соли и поверхностноактивное вещество (ПАВ). После отделения биомассы в осветленную культуральную жидкость, возвращаемую в процесс выращивания, периодически добавляют медный купорос, обеспечивая соотношение конценграций ионов меди и
ПАВ в диапазоне от 0,01 до 1,О. Периодичность ввода медного купороса с определяют по формуле T=-,— — --- — — - 6 (0,1-0,2)+Се у где Т вЂ” период времени между добавками медного купороса, ч, С ops- концентрация органических кислот в осветленной культуральной жидкости, мас.%. акгивное вещество (ПАВ) на основе окиси этилена. Температура выращивания
3"-35 С, рН среды 3,5-4,5. После отцеления биомассы дрожжей 50-80% отработанной культуральной жидкости возвращают в процесс выращивания. При этом в рециркулируемую культуральную жидкость периодически добавляют медный купорос, обеспечивая при этом поддержание соотношения концентраций ионов меди и ПАВ в диапазоне 0,011,0, преимущественно 0,1-0,2. Периодичность ввода медного купороса изменяют в зависимости от концентрации
1 8 3 <) . «рганических неп(ес гв в рецир кул<>руeмои культуральной жидк ><- ги и > формуле,, полученной на основе анализ;1 <ксисримен) альных данных и механиз«с> ироЭ ц.c(а биосингеза: i0 г. (Т вЂ” период между д«банками медног о куп ор «са, Сс1с — конЦентРаЦИЯ ОРганич(с к((х кислот в pe!«I(;> byJI(fp v
Физическая суть предлагаем«Г«по-Обз состоит в слецуюп(ем. В непр=рыв(1)м ир«tipr е выр.< (:.: 1(>tH "<>Ожжей на углевоцородном суо<.тр
<асгь углерода субс (ра с» пер(;: >Jt,, ) г жидкие продукт>1 ме саб«-(и зма > в ->а( ности органичегкие кислоты, в —. Нязи с <(e!f расход углероде«цержаще(.- <: б(тра га непОср едс све111(О на и< с i p t>P HI > t" биО" массы дрожжей cHIIMaprcII. С цс <ью:оз дани < мал ООтх «1(Hnif ) к«логиче(ки < иг то > биО г P YH«J«nI 1(<1 < с ч (<ит<. >(11PI« Iи> ип r it »!(а Я Зала -lа 3 IM! IK,! ИЯ > РХНО! К y J!Ü 1 УРа I RH«rr I> Нl(Ч ЦР >>" с(". (1(а СЕ(> : .> (>«<с .Iii сс i i сr i Лр 3> Г lfl iil ir < Rr itf " Л о«> Э.< >1 1 > >> 1 > (> " II,Prre ц. <я -"=C :.;I »;,3«n= t,i Ж<З>< "Е.. НОЛОГ!1>Iс t Ксс1! <)«с "i., .< с Сi .it 1(tr к ре Зкол(у сн<ьке<г<1 t - (» «,1 re (ii ii )« « ЧЕСКИХ f;Or«XRR Ч» (.1:n(Г тКУ . > .. гь з воцоемь(„0цн.«<О н и(чие 1(л 3>(,, MErабОлизма, В ч((с <.Нос > и Ор< (3 tt >;, c ê «х кHc 1«г, в рец(«рк гл(«р;ел(«11 к)(ib )а.-<ь НОЙ ЖИЛКОС I И Ока 3мнсlв i HH) Иб<; I> it>iil Е ВЛI(Я НИЕ !(а Л&> )(роор i З1>И 1»< i ср«,(",ЦЕ с(< б(«О>ласс bl с (. н>«>((ая i i«> <3ЦУiw сивнс с(. < ь if bt ХО1(ДРОжжЕй. Тспк .ОГЛае;<О ЗКГП -.i i
У сальным Jar(HbrM, ll! СНИжа Е) . О СРИЦатЕЛЬНОЕ ВОЗДЕйС(с И. гиб) рующих npr>II!I(weel.lfx ки л .>т., гз>. как в (lpHct, f c гвин ионов меди li(исх дит активация процесса оокисле 1(«я кисло чему cã.i- ОГ бс г(3; т ц(1;!1<ит I!: Ный h>«CJ>r>POQ В )сtl C ., C>(JPC Е 1! !< наличием ПАВ. Cour HO!>>Crt,(e ион«т меди и П.- .В. цепего< бра 3itn (оцл(р ВаГЬ В уКа.",аННОМ цИЗПа <оii;=., ГЗК КаК ИЗб)(ГОК ИОНОВ МРГ(И ., () О с Ii()1ii< к 11АВ ири да Iri)ом уровне Органических кислот >,акже можег ингибировать рост микроорганизмов, избыток ПАВ и, Г i ношению к л(еди приводит к пере— p,",сходу вещества, а наличие свободного, не вклк>чеиного в процесс, кис— лорода приводиг к перераспредению зат«)а г уг»ерода субстрата на образование (.O Ii р и и е р 1. Дрожжи Cal«d«.da п)а1 поза ВСБ-899 выр ащиваю г непр ерывв аппарате с рабочим объемом 450 л ilpH .>зрац(ги и перемешивании среды тур(>О )жек горами. Процесс ведуг при регламеч гнои для штамма темт«ературе 34-3>> С и р(1 4,0. В аппарат непре«ыо>ц год . с(пигательную cðåöó, coii.;. ti!yIo>, —:apart»Hb! нефти фракций С,„I; на;>; гьнГ)е элел(ен> ы питания, в с, . ; Р (3 q 1,2; КС1 1; NHqNO« О, > ми>;пазлементы Ее804 О 0? IIgSOq О, 1 . ;18(I., О, 03 .II«SOq О 01 и ПАВ марки "c.i;Hi зноя" O 005. Огб(рае(лую из ферерcl су-.пе(:зию раздечя от на сепа»зци ., (> rnl.;„ccу направляют и» даль i< и >Гие ск.-.лии произ (3одс гва (вьп«арку < ушку, гра нуля цию), а осве гле иную <. уль< уральную жидкос i ь (OIv>I) возвра <аю(в процесс в количес гве 60% от про г« <«н«в меди 2 мг/л. По данным анализо:-1 J i fx у ЛГ><зиях измеренн" я концентраия Орган<«ческ)гх кислот составляет )0 мг/..I (0,035K), период времени междобав);ам«медного купороса orr pegе,>чл " Огласно формуле O,0"..+0,03 : ерез кажцые 18 ч повторяют ввод ;:!!Horî купороса с достижением в -<.,--,(е заданного соотношения ионов меФ ор мул а и з о бр е т е ни я продуктивности процесса, в рециркулир:емой культчральной» жидкости определяют концентрации поверхностноактивного вещества и органических к »слет и периодически добавляют медный купорос в количестве, обеспечивающем соотношение конценграций ионов меди и поверхностно-активного вещества 0,01 — 1,0, при этом время введения медного купороса определяют по формуле где Т вЂ” период времени между добавками медного купороса, ч, CI> Составитель Т Мелентьева Редактор М.Петрова Техред А.Кравчук Корректор Т. Еолб Заказ 6567/30 Тираж 501 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по и.-обретениям и открытиям при ГЕНТ СГСР 113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 5 15183 ди и ПАВ. Показатели процесса следующие: производительность процесса (продукгивность процесса 3,5 кг/м ч, продуктивность х на объем аппарата) 38 т/сут, выход биомассы 987 от переработанного парафина. Качес гво получаемой биомассы соответствуег высшей группе, содержание белка 63Z. Пример 2 (контрольньп») . Спо- !О соб осуществляют согласно примеру 1, но беэ добавления медного купороса. Продуктивность процесса 2,9 г/и ч, производительность 31 т/сут, вьиод биомассы 92Х. 15 Пример 3. Дрожжи Candida sake ВСБ-778 выращивают аналогично примеру 1, осуществляя рециркуляцию 807 ОКЖ в процесс, при э "îì содержание органических кислог в среде сосгавляег 620 мг/л. В кульгуральную жидкость периодически (через Т 12 ч) добавляют медный 0,02+0, 062 25 купорос и корректируют подачу ПАВ ("синганол" >»арки АЦСЭ-12) в процесс „ чтобы обеспечить соотношение концентраций ионов меди и ПАВ, равное 1,0 (ПАВ 5 мг/л, ионов меди 0 10 мг/л). Достигнуты следующие показагели процесса непрерывного выращнва ш»я дрожжей: продуктивность составляе > 3,4 кг/м ° ч.производительность 37 т/сут, выход биомассы 97Z. Пример 4. Дрожжи Candida salmonicola ВСБ-779 непрерывно выращивают аналогично примеру 1 на н-пара— финах с фракциями С н -С»ь, осуществляя рециркуляцию 707 РЮК в процесс, .0 при этом концентрация органических кислот составляе г 280 мг/л. В рециркулируемую культуральную жидкость периодически добавляют медный купорос 1 (Т = — -- — — -- = 26 ч) и обеспечива0,01+0,028 ют соотношение концентраций ионов меди 68 6 и ПАВ (блоксополимер окиси эт»»лена и окиси пропилена), рави»е О, 05 (ПАВ 10 мг/л, ионов меди 0,5 мг/л) . Продукгивностb процесса 3, 55 кг/м ч, производительность 38, 5 т/сут, выход биомассы 967. Таким образом, предлагаемый способ позволяет увеличить выход биомассы дрожжей и продуктивность процесса при рециркуляции о работанной культуральной жидкости, v,е. способствуег решению задач малоотходной технологии. Способ непрерывного выращивания дрожжей в условиях аэрации на питательной среде, содержащей углеводороды в качестве источника углерода, минеральные соли и поверхностно-активное Вс щество на основе окиси этилена в каIerтве интенсификатора роста, отделение биомассы с последующей рециркуляцией отработанной культуральной жидкости в процесс выращивания, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью увеличения выхода биомассы и
