Способ определения пирогенности фармпрепаратов и биологических жидкостей
Изобретение относится к фармакологии, а именно к тестированию фармпрепаратов и биологических жидкостей на присутствие токсических примесей бактериального происхождения - пирогенов. Целью изобретения является удешевление способа определения пирогенности за счет использования отечественного сырья. Для этого у промыслового краба получают гемолимфу, готовят из клеток гемолимфы лизат, добавляют к нему исследуемое вещество, инкубируют, а суждение выносят на основании качественной реакции с диоксифенилаланином. 1 табл.
Изобретение относится к фармакологии, а именно к тестированию фармпрепаратов и биологических жидкостей на присутствие токсических примесей бактериального происхождения пирогенов. Целью изобретения является удешевление способа определения пирогенности за счет использования отечественного сырья. Для этого получают амебоциты из гемолимфы камчатского краба, осаждают клетки центрифугированием, лизируют апирогенной водой, к полученному лизату амебоцитов добавляют исследуемое вещество и водный раствор диоксифенилаланина. Полученную смесь инкубируют при 37оС и по появлению окраски судят о наличии в исследуемом веществе пирогенов. П р и м е р 1. 10 мл гемолимфы камчатского краба отбирают в центрифужную пробирку, содержащую 10 мл антикоагулянтного буфера. Пробирку встряхивают и содержимое подвергают центрифугированию при 3000 об/мин в течение 10 мин. Супернатант сливают, клеточный осадок заливают 2 мл воды, перемешивают и дают постоять 10 мин, в течение которых происходит лизис клеток. Лизат осветляют центрифугированием при 12000 об/мин в течение 30 мин. Супернатант осветленный лизат амебоцитов краба используют для определения пирогенности. Вся лабораторная посуда, химические реактивы и растворы должны быть апирогенны. П р и м е р 2. В качестве исследуемого раствора используют водные растворы брюшнотифозного антигена Ту-4446 различной концентрации и воду. Антиген Ту-4446 менее чем на 1/10 часть состоит из пирогенов. Результаты исследований представлены в таблице.
Формула изобретения
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПИРОГЕННОСТИ ФАРМПРЕПАРАТОВ И БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ, включающий получение гемолимфы морского беспозвоночного, приготовление из клеток гемолимфы лизата, добавление к лизату исследуемого вещества с последующей инкубацией и вынесение суждения по качественной реакции, отличающийся тем, что, с целью удешевления способа, из морских беспозвоночных используют промыслового краба, а из качественных реакций используют реакцию с диоксифенилаланином.РИСУНКИ
Рисунок 1MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Номер и год публикации бюллетеня: 8-2000
Извещение опубликовано: 20.03.2000
