Способ диагностики гонореи
Изобретение относится к медицине, в частности к венерологии, и может быть использовано для диагностики гонореи. Целью изобретения является повышение точности способа. Способ осуществляется путем добавления в кровь, взятую из пальца больной, живых гонококков и изготовления мазка, в котором определяют процентное содержание гранулоцитов с измененными (округлыми) ядрами, а среди них - гранулоцитов с прилипшими к их поверхности гонококками. При содержании гранулоцитов с измененными (округлыми) ядрами с прилипшими к их поверхности гонококками более 31% диагностируют гонорею.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (У1)5 G 01 N .1/28
QCYQAPCTBEHHblA HOMHTET
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ
ПРИ ГННТ СССР (21) 4077377/28-14 (22) 12.06.86 (46) 15.04.90. Бюл. Р 14 (71) Горьковский научно-исследовательский кожно-венерологический институт (72) Л.Д.Кунцевич и В.Ю.Хижин (53) 615.475(088.8) (56) Овчинников Н.M. Лабораторная диагностика венери .еских заболеваний, M., 196=, с . 74-91 .
t (54) СПОСОБ Д4ЛГНОСППИ ГОНОРЕИ (57) Изобретение относится к медицине, в частности к венерологии, и может
Изобретение относится к медицине, в частности венерологии, и может быгь использовано для диагностики гонореи.
Целью изобретения является повышение точности способа при экспресс-диаагностике.
Цель достигается тем, что в кровь, взятую иэ пальца, добавляют живых гонококков и из полученной смеси готовят мазок, в котором определяют процентное содержание .гранулоцитов с измененными (округлыми) ядрами, а среди них - гранулоцитов с прилипшими к их поверхйости гонококками, за исключением клеток, имеющих внутри фагоцитированные микробные тела, и при содержании гранулоцитов с измененными (округлыми) ядрами с прилипшими к их поверхности гонококками более 31Х диагностируют гонорею.
Способ осуществляют следующим об- разом.
„„Я0„„1557476 А 1 быть использовано для диагностики гонореи. Целью изобретения является повьппение точности способа. Способ осуществляется путем добавления в кровь, взятую из пальца больной, живых гонококков и изготовления мазка, в кото" ром определяют процентное содержание гранулоцитов с измененными (округлыми) ядрами, а среди них — гранулоцитов с прилипшими к их поверхности гонококками. При содержании гранулоцитов с измененными (округлыми) ядрами с прилипшими к их поверхности гонококками более 313 диагностируют гонорею.
Кровь, взятая из пальца больной, С в количестве 0,08 мл, смешанная с антикоагулянтом (0,02 мл 57.-ного раство- = ра натрия цитрата), инкубируется в термостате при 37 С 4 ч. Затем в кровь добавляется смесь суточной куль- СЛ туры живых гонококков (концентрация — C7l
3,5 млрд микробных тел на 1 мл иэотонического раствора натрия хлорида) «фЬ объемом 0,04 мп, после чего кровь снова помещается в термостат при той же температуре на 2 ч. Затем из нее готовятся мазки общепринятым методом. Мазки высушиваются при 1820 С и фиксируются в смеси Карнуа в о течение 10 мин. После этого мазки промываются последовательно в абсо- 3ь лютном 962-ном и 707.-HoM sTHJloBbIK спиртах по 5 мин в каждом и высушиваются на воздухе при той же температуре. Обработанные таким образом мазки подвергаются окраске по Граму по об15574 76 щепринятой методике и микроскопируются под световым микроскопом с иммерсионной системой. В поле зрения микроскопа подсчитывается количество (в процентах) гранулоцитов с измененными (округлыми) ядрами, а среди них гранулоцитов с прилипшими к их поверхности гонококками, за исключением клеток, имеющих внутри фагоцитированные микробные тела, и при процентном содержании более 31 числа гранулоцитов с измененными (округлыми) ядрами с прилипшими к их поверхности гонококками диагностируется гонорея. 1S
Пример. Больная М., 31 год, госпитализирована как источник заражения больного острой гонореей. При поступлении предъявляла жалобы. на выделения из половых путей, появив- 20 шиеся месяц назад.
Месячные с 13 лет, установились сразу по 2-3 дня через 28 дней, безболезненные. Имела 2 беременности, закончившиеся нормальными срочными 25 родами 13 и 10 лет назад.
Венерические заболевания в прошпом отрицает. Три года назад при профосмотре гинеколог обнаружил у нее эрозию шейки матки. Лечение не.проводилось. Половая жизнь с мужем с 18 лет в течение 8 лет. Разведена 10 лет назад. С тех пор больная постоянно злоупотребляет алкоголем, ведет беспорядочную половую жизнь. Данные анамнеза позволяют предположить, что зараже ние гонореей наступило 3 мес. назад.
Данные клинических исследований: наружные половые органы сформированы правильно, стенки уретры несколько инфильтрированы, свободных .выделений нет, после массажа на ложке — серозномутные. Большие вестибупярные железы не пальпируются, отделяемое после массажа слизистое. Осмотр на зеркалах: шейка цилиндрической формы, всю ее поверхность занимает обширная, фолликулярная эрозия, иэ цервикального канала — слизисто-мутные выделения. При бимануальном исследовании патологические изменения в области внутренних половых органов не выявляются.
Произведено бактериоскопическое
H культуральное исследование отделяемого уретры, шейки матки и прямой
55 кишки на гонококк. В связи с тем, что в первых мазках и посевах гонококки не быпи обнаружены, проводились повторные лабораторные исследования на гонококк после провокации. В четвертом посеве после провокации у больной обнаружен рост гонококка из отделяемого цервикального канала. Данные бактериоскопического исследования были отрицательны.
Больной поставлен диагноз хронической гонореи нижнего отдела.
Для установления высокой специфичности предлагаемой иммунной реакции и возможности ее использования для диагностики гонореи у больной из пальца была взята кровь в количестве 0,08 мл и смешана с антикоагулянтом (0,02 мл
5Е-ного раствора натрия цитрата).
Кровь инкубировали в термостате при
37 С 4 ч. Затем в кровь добавили смесь суточной культуры живых гонококков (концентрация — 3,5 млрд микробных тел на 1 мл изотонического раствора натрия хлорида) объемом
0,04 мл, после чего кровь снова поо местили в термостат при 37 С на 2 ч.
Из крови приготовили мазок по общепринятой ой методике . Высуше нный при о
18-20 С мазок фиксировали в смеси
Карнуа. После фиксации его промыли последовательно в абсолютном 967.— ном, 70%-ном этиловых спиртах по
5 мин в каждом и высушили на воздухе при той же температуре. Мазок окрасили по Граму по общепринятой методике и микроскопировали под световым микроскопом с иммерсионной системой.
В поле зрения микроскопа подсчитали количество гранулоцитов в процентах с измененными (округлыми) ядрами, а среди них — гранулоцитов с прилипшими к их поверхности гонококками, за исключением клеток, имеющих внутри фагоцитированные микробные тела. У данной больной, количество гранулоцитов с округлыми ядрами с прилипшими к их поверхности гонококками составило
897..
Этот показатель свидетельствует о сенсибилизации гранулоцитов с измененными ядрами к живым микробным клеткам — гонококкам (специфическая реакция) и может считаться подтверждающим у больной диагноза гонореи.
Формула и з обр ет ения
Способ диагностики гонореи путем исследования крови, î т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения точности способа при экспрессдиагностике, в пробу крови добавляют
Составитель И.Мелемука
Редактор Е. Копча Техред А. Кравчук
Корректор Т.Палий
Заказ 713 Тираж 493 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãoðîä, ул. Гагарина, 101
5 1557476
6 культуру живых гопококков, затем иэ ми, а среди них — гранулоцитов, имек— полученной смеси готовят мазок, в ко- щих на поверхности гонококки, и при тором определяют процентное содержа- их содержании более 317 диагностируют ние гранулоцитов с измененными ядра- гонорею.