Способ оценки чувствительности к диетотерапии больных ишемической болезнью сердца

 

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. Цель изобретения - упрощение способа за счет числа трудоемких операций и повышение его точности за счет индивидуализации оценки. Осуществляют забор венозной крови у больных до и после диетотерапии и определяют содержание в ней эфиров холестерина: арахидоната, пальмитата, олеата и линолената методом высокоэффективной жидкости хроматографии. Приближение содержания этих эфиров к соответствующим значениям здоровых лиц свидетельствуют об эффективности диетотерапии. Индивидуализация оценки достигается расчетом индекса индивидуальной чувствительности (ИИЧ) по формуле ИИЧ=(Л°/П°-Л<SP POS="POST">п</SP>/П<SP POS="POST">п</SP>)+(Л°/ОЛ°-Л<SP POS="POST">п</SP>/ОЛ<SP POS="POST">п</SP>)+(Л<SP POS="POST">п</SP>/А<SP POS="POST">п</SP>-Л°/А°), где Л, П, А и ОЛ - содержание соответственно линолената, пальмитата, арахидоната и олеата холестерина

о - показатель до лечения

п - показатель после лечения. Значения ИИЧ, равные и выше +1,5, свидетельствуют о положительном действии диетотерапии, а -1,2 и ниже - о ее неэффективности.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ÄÄSUÄÄ 1564547

А1

OIlHCAHHE ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4381503/28-14 (22) 24.02.88 (46) 15.05.90. Бюл. ¹ 18 (71) Институт питания АМН СССР (72) Р .А.Владимирская, Б,Г,Ляпков, С.С.Шадур, Д.И.Воинов и M.À,Ñàìñoнов (53) 612.015 (088.8) (56) Vessby В. et al. Athегоsclегоsis, 1980, v.35, N 1, р,р. 51-65, (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ЧУВСТВИТЕЛЬНОС51

К ДИЕТОТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ ИИЕМИЧЕСКОЧ

БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. Цель изобретения — упрощение способа за счет числа трудоемких операций и повышение его точности эа счет индивидуализации оценки. Осуществляют забор венозной крови у больных до и после диетотерапии и определяют соИзобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для определения индивидуальной чувствительности больных ишемической болезнью. сердца (ИБС) к диетам с различным составом жирных кислот.

Цель изобретения — упрощение спо соба за счет сокращения числа трудоемких операций, а также повышения точности способа за счет индивидуализации оценки диетотерапии.

Способ осуществляется следующим образом. д1)5 G О1 N 33/48, А 61 В 10/00

2 держание в ней эфиров холестерина: арахидоната, пальмитата, олеата и линолената методом высокоэффективной жидкости хроматографии. Прибли жение содержания этих эфиров к соответствующим значениям здоровых лиц свидетельствуют об эффективности диетотерапии, Индивидуализация оценки достигается расчетом индекса индивидуальной чувствительности (ИИЧ) 6о формуле . ИИЧ = (Л /П вЂ” Л /!! ) +

+ (Л /ОЛ вЂ” Л /ОЛ") + (Л "/А" — Л /Po), где Л, П; А и ОЛ вЂ” содержание соответственно линолената, пальмитата, арахидоната и олеата хо-. лестерина; Π— показатель до лечения; П вЂ” показатель после лечения.

Значения ИИЧ, равные и выше +1,5, свидетельствуют о положительном действии диетотерапии, а — 1,2 и ниже— о ее неэффективности. 1 э.п. ф-лы, 3 табл.

Больным ИБС, перенесшим инфаркт миокарда различных сроков давности, назначается противоатеросклеротическая диета с повышенным содержанием полиненасьпценных жирных кислот (ПНЖК) за счет включения в рацион растительных масел, сниженным уровнем холесте-. рина и солей натрия, общей калорийностью ?400 ккал.

В состав диеты входят, г: белки

85; жиры 78; углеводы 350; холестерин 0,260, отношение полиненасыщенных жирных кислот к насыщенным сос1564547

35

50 тавляет 1,42. Диетотерапия проводится 35 дней, Содержание общего холестерина (ХС) в крови определяют по неспецифической реакции на стеролы, К- ХС

5 тем же методом, но с предварительным разделением на липопротеиды высокой и низкой плотностей и триглицериды (ТГ) по титрованию восста0 новленного глицерина. Фракцию эфи- ров (ЭФ) ХС выделяют из сыворотки крови и разделяют на индивидуальные молекулярные формы, методом высокоэффективной жидкостной хроматографии рассчитывают их содержание,относительные величины и индекс индивидуальной чувствительности по формуле л л" л 20

ИИЧ = (— — — — --)

По П4 (ОЛО

Лл, Л0 Л (— — - — --)

ОЛ" А" А где ИИЧ вЂ” индекс индивидуальной чувствительности; . Л вЂ” содержание линолената холестерина;

П. — содержание пальмитата

30 холестерина;

А — содержание арахидоната холестерина;

ОЛ вЂ” содержание олеата холестерина,"

Π— показатель до лечения, П вЂ” показатель после лечения.

Эффект диетотерапии оценивают по одновременному увеличению содержания А и снижению П и ОЛ и прибли- 40 жению их значений к соответствующим значениям у здоровых людей, Расчет

ИИЧ позволяет индивидуализировать .оценку: при значении ИИЧ +1,5 и выше делают вывод о положительном действии диетотерапии, причем эффект тем больше, чем выше величины ИИЧ, а при значениях ИИЧ вЂ” 1,2 и ниже делают вывод о неэффективности диетотерапии .

Для выделения фракции эфиров холестерина сыворотку крови последовательно обрабатывают органическими растворителями: ацетоном, смесью хлороформ — метанол (2:1) и гексан— эфир (85:15). Нейтральные липиды

55 разделяют на фракции ЭФ ХС и ТГ препаративной ТСХ, Эфиры холестерина анализируют методом ВЭЖХ на колонке с обращенной фазой тица ",11Сгавр1е

re" 0DH (250x4,6 мм, 5 мкм) в качестве подвижной фазы используют смесь ацетон — ацетонитрил — гексан (64

36 5) со скоростью потока 1,5 мл/

/мин, детектирование проводят при

1206 нм, На хроматограмме с помощью стандартов идентифицируют 4 пика,ко торые соответствуют следующим молекулярным формам эфиров холестерина : арахидонату (А), линолеату (Л), олеату (ОЛ) и пальмнтату (П) холестерина.

Методом внутренней нормализации по площадям пиков рассчитывают их количественное содержание и относительные величины.

В табл.1 представлено процентное содержание молекулярных форм этерифицированного холестерина, а также данные клинических анализов — ОХС, p(ХС и ТГ у 20 больных до и после диетотерапии, при этом у пяти больных (N - 6,1 0,14,19 и 20) эффекта не обнаружено, Полученные данные сравнительно небольшого массива больных (20 человек) и здоровых (5 человек, см, табл,2) были обработаны íà ЭВМ по программам непараметрической статистики по Вилкоксону, Спирману,Кендалу, а также методом кластерного анализа, была оценена информативность исследованных параметров и показано наличие корреляции между общепринятыми параметрами оценки обмена ХС (общий ХС, М-ХС), ТГ сыворотки крови и индивидуальными формами

ЭФ ХС в ней, При этом выявлена существенная зависимость между арахидонатом ХС и общего ХС (ОХС) в процессе диетотерапии и менее существенная, но достоверная взаимосвязь между уровнями пальмитата, олеата ХС и ОХС. Из четырех индивидуальных форм ЭФ ХС принадлежность к одному типу распределения показана только для трех молекулярных типов ЭФ ХС— арахидоната, олеата и пальмитата ХС, Линолеат ХС по данным критериям не является информативным для оценки обмена холестерина, Три молекулярные формы ЭФ ХС (пальмитат, олеат и арахидонат ХС) более подвержены изменениям йод воздействием диеты, а потому являются более чувствительными критериями, а следовательно, и более

5 1 информативными для оценки диетотерапии, С помощью кластерного анализа по трем выбранным критериям — индивидуальным формам этерифицированного холестерина — у 15 из 20 обследованных больных было найдено преобладание положительного эффекта под влиянием диетотерапии, При положительном эффекте диетотерапии арахидонат холестерина повышался (исходный уровень был 9,2, после лечения 19,5, у здоровых лиц 23,3), пальмитат и олеат холестерина снижались (соответственно исходный уровень 8,3 и 13,6, после лечения 5,3 и 9,.8, у здоровых лиц 6,6 и 10,3).

Таким образом, тенденция изменения выбранных показателей при положительном эффекте диетотерапии вполне отчетливы и приближаются к значениям их у здоровых лиц. Иную картину наблюдаем при отсутствии эффекта: уровень пальмитата и олеата ХС возросли, а уровень арахидоната ХС снизился, Как указано BbKUp> для оценки инди видуальной чувствительности больного

ИБС к диетотерапии рассчитывают индекс индивидуальной чувствительности (ИИЧ), который определяют как сумму разностей относительных величин до (О) и после (П) лечения: линолеата холестерина к пальмитату (Л /П

П /П ), олеату (Л /ОЛ вЂ” Л /ОЛ ) и арахидонату (Л /А" — Л /А ) холестерина, Следует пояснить три обстоятельства в указанной формуле: во-первых, на относительных величинах в меньшей степени отражаются погрешности измерений, хотя и при использовании абсолютных величин формула определения индивидуальной чувствительности правомерна: во-вторых, в числителе указанных относительных величин используется значение линолеата холестерина, малоизменяемой и неинформативной формы в процессе диетотерапии; в-третьих в последнем слагаемом (Л"/А" — Л /А ), в сравнении с двумя другими, составные меняются местами, что обусловлено разнонаправленными тенденциями в изменениях количеств молекулярных форм

ЭФ ХС в процессе диетотерапии, В табл.3 представлены индексы индивидуальной чувствительности (ИИЧ) 20 больных.

564547!

При положительной динамике индекс выражается положительными величинами и колеблется от 1,5 до 48,4, при

5 о тсутс твии динамикй — о трицательными величинами от -1,2 до -12,9,Полученные результаты по ИИЧ полностью коррелируют с клиническим состоянием больных, 10 Пример 1. Больной С-нов В.Г, (Ф5), 53 лет, поступил в клинику лечебного питания с диагнозом: ИБС; атеросклероз венечных сосудов сердца, аорты; постинфарктный кардиоскле15 роз, хроническая коронарная недостаточность, стенокардия напряжения

ФК-П, В анамнезе — острый трансмуральный инфаркт миокарда; В момент поступления в стационар беспокоили

20 колющие боли в области сердца, особенно при повышенных физических нагрузках, возникающие практически ежедневно и купируемые приемом нитроглицерина (1-2 таблетки в день), Длитель25 ными курсами принимал нитраты пролонгированного действия, В условиях клиники больному назначалась диета, описанная выше, Медикаментозной терапии не проводили.

30 Анализ крови на содержание OXC

Ю-ХС и индивидуальных форм эфиров холестерина. У больного берут кровь из вены (5-6 мл) утром натощак,сыворотку отделяют от эритроцитов цент35 рифугированием (2000 об/мин). К 2 мл сыворотки крови добавляют 2 мл охлажденного ацетона, 2 мл смеси хлороформ — метанол (2:!), 2 мл смеси гексан — эфир (85:15) и 2 мл эфира, 40 Фильтрат и промывки упаривают в вакууме, а из оставшейся водной фазы нейтральные липиды экстрагируют смесью гексан — эфир (85:15) 3 раза по 2 мл, Объединенные экстракты упа45 ривают в токе азота досуха, остаток растворяют в 0,1 мл смеси гексан— эфир и наносят на пластину с силикагелем (размер частиц 5/40 меш,ЧССР ) в виде полоски и 0,1 мкл в пятно

50 для контроля, хроматографируют в системе растворителей петролейный эфир — диэтиловый эфир (15:2). После проявления контрольной эоны иодом, шпателем снимают с пластины зону с

55 силикагелем, соответствующую ЭФ ХС (Ri 0,8) и элюируют смесью гексанэфир (85 15). Элюаты упаривают досуха, остаток растворяют в 0,1 мп свежеперегнанного гексана и вводят микро1564547 шприцом 5 мкл раствора в инжектор. жидкостного хроматографа "АльтексБекман 334" с использованием колонки с обращенной фазой типа "LJltrasphere" 0DS 5 ммк, 250х4,6 мм, детектор

"Kratos" БР757 при 9 206 нм. Разделение проводят с использованием в

° ° ° качестве подвижной фазы смеси раст, ворителей ацетон — ацетонитрил — гек- l p сан (64:36:5) со скоростью потока

1,5 мл/мин, чувствительностью

0,02 в течение 20-25 мин, На хроматограмме идентификацию пикоМ проводят по временам удерживания стандар" тов, с помощью интегратора CR 3 (фирма ."Шимадзу", Япония) рассчитывают процентное содержание указанных выше

ЭФ ХС по соответствующим площадям пиков. 20

Данные лабораторных анализов до лечения: ОХС 7,8 ммоль/л; M-ХС

2,4 ммоль/л; .ТГ 3,1 ммоль/л; эфиры ХС; пальмитат ll,б ; олеат 19,6 ; линолеат 59 6Х; арахидонат 9,2Х.Пос- 25 ле лечения: ОХС 5,6 ммоль/л; М-ХС

2,2 ммоль/л; ТГ 2,0 ммоль/л; Ч@ XC: пальмитат 4,8; олеат 8,4; линолеат

58,4 ; арахидонаг 27,3% .

На фоне лечения диетой, обогащен- 30 ной ПНИК, в течение 35 дней отмечено улучшение самочувствия, полностью исчез,кардиальный синдром, повысилась толерантность к физическим нагрузкам, что позволило больному на время полностью отказаться от применения коронароактивных средств. Индекс индивидуальной чувствительности составил 15,28.

Л р и м е р 2. Больной Г-ков М.В,, 40

56 лет, инвалид III группы, находился на лечении в клинике с диагнозом:

ИБС II ст,, стенозирующий атеросклероз венечных артерий, атеросклероз церебральных артерий и аорты, Постин- 45 фарктный атеросклероз. Хроническая коронарная недостаточность, Стенокардия напряжения, ФК III, В амбулаторных уоловиях постоянно принимал нитраты пролонгированного действия. 0

При поступлении в клинику беспокоили сжимающие боли за грудиной при ходьбе, снимаемые нитроглицерином, При физических нагрузках страдает одышкой. Больному назначена противоатеросклеротическая диета, описанная вы-. ше. Из лекарственных средств назна1 чены симптоматические препараты,Дан- ные лабораторных анализов до лечения:

ОХС 9, 5 ммоль/л; М вЂ” ХС 2, 2 ммоль/л;

ТГ 1,2 ммоль/л; 3> ХС: пальмитат

4,5Х; олеат 5,5 ; линолеат 71,0 ;. арахидонат 18,6/, После лечения: ОХС

6,4 ммоль/л; g -ХС 1,5 ммоль/л; ТГ

1,3 ммоль/л; 3

После проведения курса диетотерапии состояние больного практически не изменилось, сохранились кардиалгии прежней частоты и интенсивности, толерантность к физическим нагрузкам осталась на прежнем уровне. В данном случае использованная диета была малоэффективной. Возможно,кор-, рекция изменения в обмене липидов у данного больного может быть достигнута с .использованием рационов с дру гим соотношением ПНЖК, Индекс индивидуальной чувствительности,рассчитанный для данного больного по результатам относительных величин молекулярных форм ЗФ ХС, составил отрицательную величину и равен -12,45.

Предлагаемый способ позволяет проводить оценку эффективности диетотерапии по трем выбранным критериям эфиров холестерина: пальмитату,олеату и арахидонату как наиболее показательным и изменяемым формам, Вместе с тем определение этих показателей до лечения дает возможность у большинства больных ИБС прогнозировать эффективность диетической терапии и своевременно решать вопрос о необходимости сочетанного использования ее с другими лечебными факторами.

Предлагаемый метод прост,корректен,обладает большой информативностью,.возможной индивидуализацией оценки в сравнении с другими методами и может быть использован в качестве оценочного критерия при лечении больных ИБС, а также как метод диагностики изменения липидного обмена у лиц, предрасположенных к ате-, росклеротическим изменениям в любом возрасте, либо лиц, подверженных наследственной гиперлипидемии, Особое значение имеет предлагаемый способ для выявления начальных нарушений липидного обмена и проведения соответствующих профилактичес.ких мероприятий у лиц молодого воэ" раста с избыточной массой тела;

Предлагаемый способ может быть использован при профилактическом

Ло

+ (——

03Iî

9 15 обследовании здоровых лиц для выявления фактора риска ИБС.

Формула и з о б р е т е н и я

1. Способ оценки чувствительности к диетотерапии больных ишемической болезнью сердца, включающий забор крови до и после диетотерапии,экстрагирование липидов из сыворотки крови, разделение выделенных липидов препаративной тонкослойной хроматографией с последующей хроматографией эфиров холестерина, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью упрощения способа за счет сокращения числа трудоемких операций, выделенные у,больных и здоровых .лиц эфиры холестерина разделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, определяют содержание арахидоната, холестерина, пальмитата холестерина и олеата холестерина, а чувствительность к диетотерапии оценивают по одновременному увеличению содержания арахидоната холестерина и снижению содержания пальмитата холестерина и олеата холестерина и приближению их значений к соответствующим значениям у здоровых лиц.

2, Способ по п,1, о т л и ч а ющ и " c я тем, что, с целью повыше64547 in ния точности способа за счет индивидуализации оценки эффекта диетотерапии, дополнительно определяют содер5 жанне линолената холестерина и рассчитывают индекс индивидуальной чувствительности по формуле

Ло Лп

ИИЧ = (— —.— — — — )

Лп ЛО Ло, — — — - + (— — — — — ) ОЛЕЙ АЯ А

15 где ИИЧ вЂ” индекс индивидуальной чувствительности;

Л вЂ” содержание линолената холестерина;

П вЂ” содержание пальмитата холестерина;

А — содержание арахидоната холестерина;

ОЛ вЂ” содержание олеата холестерина;

25 0 — показатель до лечения;

П вЂ” показатель после лечения, при этом значения ИИЧ + l,5 и выше свидетельствуют о положительном действии диетотерапии, причем большая

30 величина индекса сооветствует большому лечебному эффекту, а значения индекса — I 2 и ниже свидетельствуют о неэффективности диетотерании.

1564547

1.

l

1

3ГЪ

I

1 л 1 л

«с л л и са л сч е л л л

00 О С сч с

ОЪ сч

00 Е О С сч < С л л в л л а л л

М 00 ОЪ СЧ О O! сч с а сч в, л а

M 0000

МWЮ «d CO(Л-О1

° а tl л ° »l л л л солла и с сасас л л м

I«î л Qj

o оЪ

» л сч I с са и

1 Э I

Ц 1

1 с! I о о (,д

С1Ъ 1О Со Л СЧ л л л е л в л л

Л СЧ О1 СЧ СЧ сч

"о л ь л л с

Х I 1! — -1

cd 1

Э(O

СЧ О ОЪ СЧ СС1 1О в в л л л л е о «м сч сч съ м сч л а

» л л сч л м л с.и e I Х (I

v I о

cd 1 са в ссЪ

E»,. I

Ж I

Е I о (I

1

1-»-!

«» с л

cv л л

00 аъ с л с! (сч» Гълoo ю в л л а fl а а е

-сч- счссч

co c и л el л

СьиЪ- СЧV<М< в л в л в л а л сч сч сч м л с

Л СЧ 00 о 1

1 в в, л л с л с

СОС ОсЧаь СЪ к л л л в л л л

-сч с

--С. Оъ ссЪ сч -- л л е л л о !. о съ л л л а иЪ

I аъ с л с

ОЪ и Ъ (Ch М «I л л л л л

- - сч с -(« с в л аъ .С. М Л с Ъ С е л л л Е л сч c«I л л л сч л л сч

1

1

1

I м л с сч л л аъ л м л с л л

Э I (1

1 Ж Ж (» Ю с(Х (о, (ж о(e (с(М

m woaxo

1

I (»

««

1! («11 л

Ы

Э I

b Ц (cd I u ж 1 O

О 1

» 1

cd I о,(о!

Е 1

cd 1

Э 1(1

О 1 о 11

I (I

1 — -+»1 (Э

1» I

v 1 о о((::

1 ! -о

I и

1 — !

А Э 1

О(V I

1 3 о 1

Х I (1 о

1 1! 1

1, I

1 . I

1o I I

Ц I о э

О 1

o (И 1 1

1о

С 1

СЧ ССЪ ОЪ СЧ С Со Л Оо O O СЧ O A л,л л л л л л л л л л л л

Са О С а Л вЂ” СЧ СЧ иЪ â€” n cO

СЧ СЧ СЧ C«I «» «» СЧ СЧ СЧ со сч w u w сч с с сч л о со — с w « аъ о сч о л л л а л в л в а л л л в л л л л л в л лe

ССЪ О «О !О ОЪ Л Л Ч0 Ф О Ф ССЪ Л Ф О О ССЪ (Л 1СЪ

О W C СС МΠ— С Ъ Ю СЧ OO МЪ М C СЧ О0 Н С > С в л л л л л л л л л л л л л л л л л л в

СЧ О С С Ъ ОЪ О0 OO W - 00 OO ОЪ С 00 СЧ С СЧ вЂ” CO

МWC — Лж — iОИОИИаИОжессЪr C W

ССЪ СЧ М СЪ W ССЪ â€” CC иЪ С Со л в л л а л л к л а л

ОЪЛОiСCOO 00a Cr OO с сч с iо с i с ъ o w e аъ л л л л л л л в л л л

МЛЛ«I ОъЛссЪ ССОс"Ъ ф О Ъ сСЪ вЂ” М ОЪ 00 Co CO — - — М Л вЂ” ССЪ М !СЪ С И М л а л л ° л л а л л л е в л а в в л в л е 5 Ф ССЪ ССЪ 1О СГ\ О 1 VD «I ÑO ССЪ Ъ ССЪ Ю СГ\ (wcмсгъ осчwс0c а о — i — осчrсоа л в л л л л л л л л л а л л л л а л л

WOOL WtOcc;Мa iΠ— W ОOC iОW

СЧ с Ъ с Ъ сч

ОЪССОСЧ ООЪМСOЛММ л л л л л в а л в л в л в л в л л сч с ъ сч м сч сч «сч сч сч» сч сч

С CC CO CO a СЧ W М С CO — С ОЪ О CO W — Л W СЧ в л л а а л в л л в в в л л в л л л л л

ОЪ ССЪ М С !.1Ъ W ОЪ «» ГЪ CO C«. 1О W 00 !ГЪ Л Л О 1.О Л л оо сч сч со rо съ с ъ оъ аъ л — аъ . а л»C л л в л л л л в л л в л л л л

ОWCW W Ъ О О ОСОЛC СО О ООЪ. 1 с — счмwь олооаъс с1 сч С1 < ъ о л со аъ сч Э Э о cU

o x!

3!

564547

Таблица 2

Пальмитат ХС

ФМ - и/п

Арахизонат

ХС

Линоленат ХС,У.

Олеат ХС, Е

8,08

5,55

6,63

7,92

4,86

14,32

10,27

7,88

13,42

7,66

64, 41

60, 83

61,16

56,06

56,43

2

4

Среднее значение йстан- . дартная ошибка

13, 17

23,35

24,3

22,58

31,03

h,612 0,64

60,83+

+ !,57

10,75+

<1,35

?2,87":

+ 2,86

Таблица3

Л/П л/ол

До

Л/А

ИИЧ

Э

До После

После До После

Составитель Н,Гуляева

Редактор М.Циткина Техред JI.Îëèéíûê Корректор N,,Самборская

Подии< ноТ Заказ 1157

Тираж 518

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР! 13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г Ужгород, уп. Гагарина,101

9,78

1,88

8,52

0,39

5,14

16,21 . 9,23

0,47

11,26

17,64

6,07 .

9,72

2,8

16,63

9,33

5,96

6,95

10,63

15,78

8,23

11,02

16, 88

12,15

12,35

12,17

12,44

10,29

6,06

l2,44

10,28

14,33

8,18

17,34

7,65

12,44

12,72

9,98

14,52

12,95

7,62

4,82

1,69

4,11

0,31

3,04

12,85

5,14

0,27

6,17

8,09

l4,19

3,68

5,95

6,69

5,58

4,47

4,15

5,93

12,91

4,29

5,22

9,61

6,92

5,87

6,95

6,84

6,31

3,56

6,86

6,46

7,0

5 43

9,74

5,1

6,16

7,41

4,29

6,21

5,84

3,52

3,52

29,0

19,64

1,69

6,48

3,04

7,59

21,64

4,59

3,64

3,20

3,24

8,20

3,9

3,22

3,95

2,07

8,3!

3,82

2,79

1,36

3,55

3,08

2,5

2,14

6,16

5,51

24, 04

4,48

2,93

2,44

1,93

4,06

4,47

4,53

3,72

2,05

6,79

6,36

2,6!

3,80

48,37

23,0

16,71

15,28

-12, 91

4,31

6,49

1,97

-8,28

11,82

1,51

22,46

-11, 13

2,38

9,92

3,2

5,69

-12,45 — 1,2