Способ дифференциации географических рас туляремийного микроба

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при экспресс-анализе циркулирующих в природе штаммов туляремийных микробов во время эпизоотологического или эпидемического обследований. Цель изобретения - ускорение и упрощение способа. Из исследуемой культуры готовят суспензию в дистиллированной воде с концентрацией микр.клеток 1-10 млрд,/мл. К суспензии добавляют фенолфталеинфосфат из расчета 500 - 1500 мкг/мл суспензии, инкубируют 10 - 15 мин. Затем в смесь вводят щелочь и при появлении малинового окрашивания дифференцируют штаммы американской (неарктической) и среднеазиатской рас, а при отсутствии окрашивания - штаммы голарктической разновидности. fe

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

tsl)s С 12 Q 1/04

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

° ) ) ггг .г - г

) К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4692673/13 (22) 16.05.89 (46) 15,06,91. Бюл,М22 (71) Ростовский-на-Дону государственный научно-исследовательский противочумный институт (72) Н,S.ÏaâëîBè÷, Б.Н.Мишанькин, И.В.Рыжко, В.Е. Валенцев, Г,И.Данилевская и M,Â.Цимбалистова (53) 573.8.093,1 (088.8) (56) Олсуфьев Н.Г.Таксономия, микробиология и лабораторная диагностика возбудителя туляремии. M.: Медицина, 1975, с.143, (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ГЕОГРАФИЧЕСКИХ РАС ТУЛЯРЕМИЙНОГО

МИКРОБА

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при экспресс-анализе циркулирующих в природе штаммов туляремийных микробов во время эпизоотологического или эпидемического обследований, Цель изобретения — ускорение и упрощение способа.

Пример 1. В пробирке с 1 мл дистиллированной воды готовят (1 — 10 млрд./мл) суспензию штамма Franciselfa м!агепз!з

Schu (неарктическая раса), добавляют фенолфталеинфосфат (500 мкг) и инкубируют при 37 С 10 — 15 мин. Затем в реакционную смесь добавляют 1 н. раствор щелочи, например NaOH (не менее 1 капли). Смесь окрашивается в малиновый цвет, Контрольные пробирки (с кипяченой в течение 10 мин

„„Я „„1655989 А1 (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при экспресс-анализе циркулирующих в природе штаммов туляремийных микробов во время эпизоотологического или эпидемического обследований. Цель изобретения— ускорение и упрощение способа, Из исследуемой культуры готовят суспенэию в дистиллированной воде с концентрацией микр.клеток 1 — 10 млрд,/мл. К суспенэии добавляют фенолфталеинфосфат иэ расчета

500 — 1500 мкгlмл суспензии, инкубируют

10 — 15 мин. Затем в смесь вводят щелочь и при появлении малинового окрашивания дифференцируют штаммы американской (неарктической) и среднеазиатской рас, а при отсутствии окрашивания — штаммы голарктической разновидности. взвесью Е tularensis Schu ) остаются бесцветными.

Пример 2, Способ выполняют аналогично примеру 1, но используют штамм

Е tularensis 543 (среднеазиатская раса) и концентрацию субстрата 1000 мкг. В пробирке через.10 — 15 мин также появляется малиновое окрашивание.

Пример 3, Способ выполняют аналогично примерам 1 и 2, но используют концентрацию фенолфталеинфосфата 1500 мкг, Малиновая окраска появляется после инкубации при 37"С, Пример 4. Выполняют способ аналогично примеру 1, но используют штамм

F, tularensis 503 (голарктическая раса) и концентрацию фенолфталеинфосфата 1000 мкг.

После 10 — 15 мин инкубации и добавления

1655989

Формула изобретения

Составитель Г. Смирнова

Редактор Т, Лазоренко Техред М.Моргентал Корректор Т. Палий

Заказ 2030 Тираж 372 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 щелочи окраска в пробирке не пеявляется и смесь остается бесцветной, как и в контрольной пробирке.

Таким образом, способ позволяет быстро (10 — 15 мин) и просто дифференцировать европейскую расу.от американской и среднеазиатской, Способ ускоряет получение результатов (в 40 — 80 раз), упрощает процедуру определения разновидности

Р tularensi s (не требует сложного нингидринового реактива, не зависит от качества и точности его приготовления, не требует кипячения,реакционной взвеси).

Предлагаемый способ может быть использован при работе с большим набором штаммов.возбудителя, а также при работе в полевых условиях, при необходимости срочной характеристики выделенных культур

Р tularensis иэ объектов внешней среды. В летнее время необходимость инкубации при 37 С отпадает, так как ракция может протекать и при комнатной температуре, Способ дифференциации географических рас туляремийного микроба, включаю5 щий приготовление суспенэии исследуемой культуры, инкубирование в присутствии субстрата, обработку реактивом с последующей дифференциацией штаммов американской и среднеазиатской рас от штаммов

10 голарктической разновидности по появлению малинового окрашивания реакционной смеси, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, исследуемую культуру суспензируют в дистиллиро15 ванной воде, в качестве субстрата используют фенолфталеинфосфат в количестве 500 — 1500 мкг на 1 мл суспензии с концентрацией 1 — 10 млрд,микр.клеток, инкубирование проводят в течение 10—

20 15 мин, а в.качестве реактива используют щелочь.