Способ определения чистоты и гибридности семян подсолнечника

 

Изобретение относится к биотехнологии и касается оценки чистоты и гибридности семян подсолнечника. Целью изобретения является повышение точности способа. Изобретение состоит в том, что исследуют электрофоретический спектр фермента - супероксиддисмутазы, выделенной из семянок подсолнечника, при этом по наличию определенных компонентов спектра судят о чистоте и гибридности.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 А 01 Н 1/04

ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

К (21) 4640433/13 (22) 24.01,88 (46) 23,07.91. Бюл. N 27 (71) Одесский технологический институт пищевой промышленности им, М.В.Ломоносова (72) И.С,Крестинков, В.П,Нецветаев, П,В.Данильчук, В.И.Крутько и Е.А,Черника (53) 631.043.22,11(088.8) (56) Попереля Ф.А., Асыка Ю.А, Методические указания по электрофорезу кукурузы для определения. гибридности семян F> — M., 1988.

Изобретение относится к биотехнологии.и может быть использовано в сельском хозяйстве при селекции и семеноводстве подсолнечника.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Способ состоит в том, что определяют изоферментный спектр суперосиддисмутазы (СОД), выделенной из семянок подсолнечника.

Для достижения более высокой разрешающей способности метода, выявления полиморфизма по возможно большему чиСлу локусов СОД используют различные методы выделения фермента и его разделения в гелевых носителях. При электрофоретическом разделении получают четкие генотипические различия по спектру СОД, Наличие в изоферментном спектре СОД характерных для отцовской формы аллеломорфов фермента рассматривается как доказательство гибридности этих семян.

Чистота материала характеризуется типичностью изоферментных спектров СОД различных семян данной линии.. Ж„» 1664200 А1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧИСТОТЫ И

ГИБРИДНОСТИ СЕМЯН ПОДСОЛНЕЧНИКА (57) Изобретение относится к биотехнологии и касается оценки чистоты и гибридности семян подсолнечника. Целью изобретения является повышение точности способа, Изобретение состоит в том, что изследуют электрофоретический спектр фермента — супероксиддисмутазы, выделенной из семя нок подсолнечника, при этом по наличию определенных компонентов спектра судят о чистоте и гибридности, Пример 1. Семянки подсолнечника (линии Одесский 3369, Одесский 4В и их гибрид Одесский 123) гомогенизируют в

0,1 М К- фосфатном буфере рН 7,8(отношение массы семянки к объему буфера 1:1).

Супернатант после центрифугирования при 15 тыс. в течение 10 мин при +2 С используют как сырой экстракт СОД. С целью выявления новых аллельных состояний СОД в среду выделения добавляют 2%

/3-меркаптоэтанол. Среда инкубации содержит 14 мг ксантина; фенозинметосульфата 8 мг; 30 мг нитротетразолиевого синего

0,20 ед, ксантиноксидазы на 100 мл К-фосфатного буфера рН 8,0.

После проявления гелей сравнивают электрофореграммы СОД исследуемого ма. териала с электрофореграммами СОД известных форм подсолнечника. Чистоту материала определяют по типичности изоферментных спектров СОД различных семян данной линии. Доказательством гибридноСти семян служит наличие в изоферментном спектре характерных для отцовской формы аллеломорфов фермента, 1664200

Составитель В.Демкин

Техред М.Моргентал Корректор Т.Палий

Редактор Н.Тупица

Заказ 2334 Тираж 369 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

П ри мер ы 2 и 3. Проводят аналогично примеру 1, исследуя другие линии и гибриды подсолнечника: Одесский 128, Одесский

1036, Одесский IB, Одесский 5В.

Значительный полиморфизм по СОД позволяет оценивать чистоту материала и гибридность значительно большего числа линий и гибридов по сравнению с известными способами..

Формула изобретения

Способ определения чистоты и гибридности семян подсолнечника, включающий электрофоретическое разделение маркерных белков родительских и гибридных форм, сопоставление полученных электро5 фореграмм с последующей оценкой чистоты и гибридности по белковым спектрам, о тл и ча ю щи йся тем;что,c целью повышения точности способа, в качестве маркерного белка используют фермент

10 супероксиддисмутазу, выделенную из семянок подсолнечника.