Способ прогнозирования течения туберкулеза легких при проведении лекарственной терапии

 

Изобретение относится к медицине и касается способов оценки эффективности лекарственной терапии туберкулеза легких. Целью изобретения является повышение точности прогнозирования Для этого определяют содержание фосфатидилэтанолэмина в альвеолярных макрофагах и при содержании этой фракции 0 0,58 мкг Р/10 клеток прогнозируют течение заболевания с малыми остаточными изменениями в легких , а при содержании 0,6 мкг Р/106 клеток и более - течение заболевания с большими остаточными изменениями в легких

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (Я)6 6 01 N 33/92

ГОСУДАРСТВЕНМЫИ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ!

3 (7с

00 ()

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ8У (21) 4667029/14 (22) 27.03.89 (46) 15.10.91. Бюл, М 38 (71) Научно-исследовательский институт пульмонологии и фтиэиатрии (72) А.К.Абрамовская, Е.M.Ñêðÿãèíà, А.Д.Таганович и Г,Н,Тамашакина (53) 616.07(088,8) (56) Авторское свидетельство СССР

М 1197638, кл. А 61 В 10/00, 1983, (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ТЕРАПИИ

Изобретение относится к медицине и касается способов оценки эффективности лекарственной терапии туберкулеза легких.

Целью изобретения является повышение точности прогнозирования.

Способ осуществляется следующим образом.

Получение альвеолярных макрофагов осуществляют при проведении фибробронхоскопии, которую проводят под местной анестезией. Носовые ходы задней стенки глотки, надгортанник и голосовые складки смазывают 5)ь-ным раствором лидокаина, либо 107;-ным раствором новокаина, после чего вводят фибробронхоскоп до бифуркации трахеи. Через микроирригатор по мере продвижения аппарата и появления кашлевого рефлекса вводят дополнительно анестезирующее вещество, После введения фибробронхоскопа проводят осмотр слизистой бронхов и устанавливают бронхоскоп в устье среднедолевого сегментарного бронха, затем продвигают микроирригатор до устья бронхов 5 — 6 порядка. С помощью

„„SU „„1684687 А1 (57) Изобретение относится к медицине и касается способов оценки эффективности лекарственной терапии туберкулеза легких.

Целью изобретения является повышение точности прогнозирования. Для этого определяют содержание фосфатидилэтаноламина в альвеолярных макрофагах и при содержании этой фракции 0-0,58 мкг Р/10

6 клеток прогнозируют течение заболевания с малыми остаточными изменениями в легких, а при содержании 0,6 мкг Р/10 клеток

6 и более — течение заболевания с большими остаточными изменениями в ver ких. шприца через микроирригатор веодят дробно по 20 мл (всего 100-150 мл) стерильного физиологического раствора с рН 7,2-7,4, подогретого до 38 — 40 С. После каждого введения жидкости с помощью вакуум-аспирата через введенный микроииригатор отсасывают ее в стерильную емкость, Полученный бронхоальвеолярный смыв (БАС) фильтруют через 4 слоя стерильной марли в центрифужную силиконизированную пробирку. В

БАС определяют жизнеспособность альвеолярных макрофагов (АМ) путем добавления семи капель отфильтрованного смыва с одной каплей 1;(,-ного раствора трипанового синего на часовом стекле. Через 3 — 5 мин этой смесью заполняют счетную камеру Горяева. Жизнеспособные макрофаги не воспринимают окраску и остаются, бесцветными, а нежизнеспособные клетки диффуэно прокрашиваются трипановым синим. Подсчитывают 100 альвеолярных макрофагов. Макрофаги, не воспринявшие окраску, составляют процент жизнеспособности. Для подсчета общего количества кле1684 587 ток в 1 мл bA(берут 10 капель профильтрованного смыва, смешивают его на часовом стекле с 1 каплей жидкости Симсона и заполняют счетную камеру. Подсчет клеток проводят по всей камере и определяют их число в 1 мл смыва, Оставшийся профильтрованный БАС центрифугируют при комнатной температуре в течение не менее 10 мин со скоростью 1500 об/мин, Иэ осадка приготавливают мазки, которые высушивают на воздухе, фиксируют метиловым спиртом или смесью Никифорова и окрашивают краской Романовского в течение 4 мин. Эндопульмональную цитограмму определяют при подсчете не менее чем 500 клеток с использованием иммерсионного обьектива, при этом учитывают АМ, лимфоциты, нейтрофилы, эозинофилы и другие клетки. Для выделения АМ из общей смеси клеточных элементов используют метод центрифугирования в феколверографиновом градиенте плотности. Клеточный осадок ресуспендируют в 6 мл среды Хенкса или M 199 и наслаивают на 3 мл фекола с градиентом плотности 1075; после центрифугирования

20 мин при 3000 o6/мин клетки, проходя через градиент плотности, распределяются в различных слоях фекола: фракция АМ располагается в виде кольца несколько ниже границы, разделяющей среду Хенкса или N.

199 и фекол. Пастеровской пипеткой отсасывают кольцо АМ, переносят в пробирку, подсчитывают общее количестом АМ и жизнеспособность AM указанным выше способом, Затем клетки 2 раза промывают, приливая по 7-8 мл среды Хенкса или N.

199, перемешивают и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин.

Супернатат сливают, отмывают, АМ ресуспендируют в дистиллированной воде e соогношении 0,5х10 клеток в 1 мл и

6 замораживают при t — 20"С на 5 мин, затем помещают в водяную баню (t =- 45" С) на

5 мин (повторяют трижды с целью разрушения клеточных мембран). Для получения липидного экстракта используют спиртозфирную смесь Блюра. Тонкослойную хромато рафию фосфолипидов осуществляют на стеклянных обезжиренных пластинках размером 90х120 мм, покрытых слоем сорбента, сосгоящих иэ взвеси силикагеля (Л 5/40 мк, ЧССР) и медицинского гипса в воде. Фосфолипидные фракции разделяют с помощью одномерной хроматографии в системе растворителей хлороформ-метанол вода 65:25;4 (Wagner

ctall, 1961). Пластинки высушивают при комнатной температуре до исчезновения запахов компонентов разделяющей смеси.

Проявляют в парах йода и осуществляют количественный учеr фракций по фосфору.

Общее количество липидного фосфора OR ределяют следующим образом: к сухому остатку добавляют 0,25 мл раствора хлорной

5 кислоты и помещают пробу на песчаной бане, где ее выдерживают до обесцвечивания смеси. В пробирку добавляют по 1,25 мл дистиллированной воды. Готовят контрольную и три стандартные пробы. Контрольная

10 проба состоит из 0,2 мл раствора хлорной кислоты и 1,3 мл воды, стандартные пробыиз 0,5 мл раствора фосфата калия, 0,2 мл хлорной кислоты и 0,8 мл воды. В каждую пробирку прибавляют по 0,25 мл раствора

15 молибдата аммония, Содержимое пробирок тщательно перемешивают и приливают 0,25 мл раствора аскорбиновой кислоты, В контрольную и стандартные пробы добавляют по 0,5 мл воды. а объем опытных проб дово20 дят водой до 2,5 мл. Содержимое проб геремешивают и через 20 мин после доливания реактива аскорбиновой кислоты все пробы спектрофотометрируют, Полученные показатели перерассчитывают и выражают со25 держание фосфора в мкг /10 клеток.

Прогнозирование характера течения туберкулеза легких при проведении лекарственной терапии определяют по содержанию фосфатидилэтаноламиновой

30 фракции фосфолипидов в АМ. При содержании фосфатидилэтаноламиновой фракции фосфолипидов в АМ 0,6 мкг Р/10 клеток и более прогнозируют исход заболевания с формированием в легких больших остаточных

35 изменений, а при содержании фосфатидилэтаноламиновой фракции фосфлипидов в АМ от

0-0,58 мкг Р/10 клеток — исход заболевания с малыми остаточными изменениями в легких.

40 Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больной С., 48 лет, находился на лечении в клинике института фтизиопульмонологии с декабря по июль с

45 диагнозом: очаговый туберкулез верхней доли правого легкого в фазе распада, МБТ -.

Клинические признаки заболевания отсутствовали, Гемограмма в норме. Рентгенологически в верхней доле правого легкого на

50 фоне усиленного бронхососудистого рисунка с "дорожкой" к корню легкого определяли густо расположенные полиморфные очаги мелких и средних размеров. в некоторых иэ них имелись участки просветления округлой

55 формы (деструкции). В альвеолярных макрофагах БАС определили содержание фосфатидилэтаноламиновой (кефалин) фракции фосфолипидов 0,63 мкг Р/10 клеток. Проб гнозировали гечение заболевания с большими остаточными изменениями в легких.

1681б87

15

50

Проводилось лечение изониэзид, этэмбу тол, сгрептомицин, который за еM заменен на тизамид, ингаляции салютизона, фонофорез гепарина М. 20 на проекцию вер. IF и доли праного легкого. Через 8 мес лечения наступила стабилизация легочного процесса. Основной курс лечения закончен, В легких определялись большие остаточные изменения. Рентгенологически определяли в верхней доле правого легкого сохранение множественных разновеликих оча ов на фоне фиброзных изменений, в некоторых очагах по-прежнему сохранились у агтки просветления. B нижней доле правого легкого определялся умеренно выраженный пневмофиброз. Диагноз. очаговый туберкулез верхней доли правого легкого в фазе рассасывания и уплотнения, MBT -. Прогноз подтвердился, лечение закончилось с ф.>рмированием в легких больших остаточных изменений.

Пример 2. Больной Б., 32 лет, находился на лечении с января по апрель, затем антибактериальное лечение (изониазид, этамбутол, рифампицин) продолжал в санаторных и амбулаторных условиях до декабря по поводу клинического диагноза: инфильтративный туберкулез нижней доли левого легкого, МБТ вЂ”. Клинические признаки туберкулезной интоксикации определялись только на первом месяце лечения.

Рентгенологически в шестом сегменте нижней доли левого легкого определя,",I; инфильтративное затемнение нео пород Iné структуры с нечеткими контурами, редне . интенсивности. В корне легкого и во втором сегменте справа — единичные мелкие кальцинаты. B альвеолярных лакрофагэ>. БАС определяли содержание фосфэтидилэтаноламиновой (кефалин) фракции фосфолипи-дов. — 0,72 мкг фосфора /10 клеток.

Прогнозировали течение заболевания с большими остаточными изменениями в легких. B процессе лечения рентгенологическим методом выявлено значительное рассасывание инфильтративных изменений в нижней доле левого легкого. Через 6 мес лечения наступила стабилизация процесса.

В декабре 1988 г. в легких сохраняется фокус размером до 1,5 см на фоне выраженного пневмофиброза и кальцинатов во втором сегменте и корне правого легкого. Диагноз: туберкулез на нижней доле левого легкого.

Прогноз течения заболевания с большими остаточными изменениями в легких подтвердился.

Пример 3, Больная 3, находилась на лечении с декабря по ноябрь следующего года с диагнозом: инфильтративный туберкулез верхней доли правого легкого в фазе распада. МБ! —. Рентгенологически эпределчпи в верхнеи доле право о легк<нг инфильтрэтивную тень размером 2х3 см без четких контуров с полостью распада в цент ре, вокруг единичные мелких размеров очаговые тени с бронхососудистои "дорожкой" к корню легкого. Клинические признаки туберкулезной интоксикации сохранялись в течение первых двух месяцев лечения, затем общее состояние больной было удовлетворительное. В альвеолярных макрофагах

БАС определяли содержание фосфатидилэтанола линовой (кефалина) фракции фосфолипидов 1,54 мкг фосфора/10 клеток.

Прогнозировали исход заболевания в конце лечения с большими остаточными изменениями в ле ких. В течение 12 мес проводилось лечение антибактериальными препаратами: изониазид, рифампицин, стрептомицин в течение 3 мес, затем последний заменен на этамбутол. В ингаляциях использовали изониазид и салютизон

Проводилось и патогенети <еское лечение: пирогенэл и ультразвук. В течение первых 6 мес наблюдалэсь положительная динамика туберкулезного процесса в легких частичное рассасывание вогпалительных изменений, уменьшение размеров инфильтрата в первом сегменте .D3Rofe легкого. полость распада сохранялась От показанного хирургического еч"ения больная отказалась. В последук)щие, мес продолжалось консервативное лечение эн-.иба к препаратами до олной стабилизации лего II Oго процесса.

-, ерез 12 м;.с лечсних; в ле к1:х .формировали.ь больши ueтэточныс; вменения (в врехней доле правого nerroI о определяли туберкулему с краевым участком просветления, фиброэные изменения и единичные очаги вокруг с четкими очертаниями). Диагноз: инфильтративный туберкулез верхней доли правого легкого в фазе рассасывания и уплотнения, МБТ вЂ”. ПрогНоз течения заболевания с большими остаточными изменениями подтвердился.

Пример 4. Больная С, 28 лет. находилась на лечении с марта по июль. затем лечение антибактериальными препаратами (стрептомицин, изониазид, рифадин, этамбутол) продолжала в санаторных и амбулаторных условиях до ноября с диагнозом: очаговый туберкулез верхней доли правого легкого в фазе инфильтрации, МБТ+. Клинические признаки интокискации отсутствовали. В начале лечения рентгенологически в верхней доле правого легкого на фоне усиленного бронхососудистого рисунка определял1л полиморфные очаговые тени с умеренно выраженной "дорожкой" к корню, В альвеолярных макрофагах БАС определя1684687

55 ли содержание фосфатидилэтаноламиновой (кефалин) фракции фосфолипидов в виде следов (количественному учету не подлежало О). Прогнозировали исход заболевания с малыми остаточными изменениями. После окончания (ноябрь 1988 г) основного курса лечения в первом и втором сегментах правого легкого сохранялись деформация легочного рисунка и единичные мелкие очаги.

Диагноз: очаговый туберкулез верхней доли правого легкого в фазе рассасывания и уплотнения, МБТ-. Прогноз течения заболевания с малыми остаточными изменениями в легких подтвердился, Пример 5. Больная Я., 28 лет, находилась на лечении с апреля по октябрь с диагнозом: инфильтративный туберкулез верхней доли левого легкого в фазе распада, МБТ i. B начале лечения рентгенологически в верхней доле левого легкого определяли усиление бронхососудистого рисунка с широкой "дорожкой" к корню и множественные густо расположенные разновеликие очаги воспаления, местами сливающиеся в инфильтраты с участками деструкций. При поступлении в клинику определялись умеренно выраженные клинические признаки интоксикации, которые исчезли через месяц лечения. Получала антибактериальные средства; стрептомицин иэониазид, рифадин, зтамбутол. В альвеолярных макрофагах БАС определяли содержание фосфатидил3таноламиновой (кефалин) фракции фосфолипидов - 0,22 мкг фосфора/10 клеток. Прогнозировали течение забол вания с малыми остаточными изменениями. В конце основного курса лечения (через 7 мес) в легких полости распада рентгенологически не определялись, сохранялись единичные мелкие, интенсивные очаги в первом и втором сегментах левого легкого. Диагноз. очаговый туберкулез верхней доли левого легкого в фазе рассасывания и уплотнения, МБТ вЂ”. Прогноз течения заболевания подтвердился, в легких определялись мелкие остаточные изменения.

Пример 6. Больной Л., 55 лет., находился на лечении (получая стрептомицин, иэониазид, тизамид) с января по май, затем антибактериальное лечение (изониазид, зтэмбутол) продолжал в санаторных и амбулаторных условиях до декабря по поводу установленного клинического диагноза; очаговый туберкулез верхней доли правого легкого в фазе инфильтрации, МБТ вЂ”. Клинические симптомы туберкулезной интоксикации отсутствовали. Рентгенологически в верхней доле правого легкого определяли множественные полиморфные очаги, неко5

40 торые очаги — осумкованные и неструктурные в центре на фоне деформации легочного рисунка и пневмосклероэа. 09.02.88 в альвеолярных макрофагах БАС определяли содержание фосфатидилэтаноламиновой (кефалин) фракции фосфолипидов — 0,58 мкг фосфора/10 клеток. Прогнозировали тече6 ние заболевания с малыми остаточными изменениями в легких. В процессе лечения отмечалось значительное рассасывание перифокальной инфильтрации вокруг очагов и полное рассасывание большинства очагов в верхней доле правого легкого. После окончания лечения в верхней доле правого легкого. сохранились только деформация легочного рисунка и единичные мелкие фиброэные очаги. Диагноз: очаговый туберкулез верхней доли правого легкого в фазе рассасывания и уплотнения, МБТ вЂ”. Прогноз течения заболевания подтвердился, после окончания лечения в легких сохранялись малые остаточные изменения, Таким образом, определение у больных активным туберкулезом легких в начале лечения в альвеолярных макрофагах БАС фосфатидилэтаноламиновой (кефалин) фракции фосфолипидов дает воэможность в ранние сроки правильно определять прогноз течения заболевания, в частности формирование характера (величины) остаточных изменений в легких в 88,27ь случаев. Своевременное прогнозирование развития больших остаточных изменений в легких у больных туберкулезом позволяет обосновать выбор адекватного этиотропного и патогенетического лечения, направленного на более совершенное рассасывание туберкулезного процесса в легких и формирование малых остаточных изменений, что в последующем может значительно сократить частоту обострений и рецидивов заболевания, Формула изобретения

Способ прогнозирования течения туберкулеза легких при проведении лекарственной терапии путем клинико-лабораторного обследования, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, определяют содержание фосфатидилэтаноламиновой фракции в альвеолярных макрофагах и при содержании этой фракции менее 0,58 мкг

Р/10 клеток прогнозируют течение заболевания с малыми остаточными изменениями в легких, а при содержании этой фракции 0,6 мкг Р/10 клеток и более прогнозируют те6 чение заболевания с большими остаточными изменениями в легких.