Способ выращивания растений in viтrо

 

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе клонального микроразмножения различных культур. Целью изобретения является уменьшение инфицированности питательной среды и растений, ускорение и упрощение процесса. Поставленная цель достигается тем, что готовят питательную среду и на ее поверхность наносят защитный слой, в качестве которого используют парафин. Толщина слоя 0,09-0,12 мм. Причем слой парафина наносят перед автоклавированием, после которого осуществляют высадку тканей и органов растений и их дальнейшее культивирование. Способ позволяет снизить инфицированность питательной среды с 27% до 0, что дает возможность высаживать эксплантаты в нестериальных условиях и значительно снижает затраты на осуществление способа и ускоряет процесс. 1 з.п. ф-лы, 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 А 01 Н 4/00

ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР 1; З сfgerуд q уч

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ "." "":- ." - .::ы

Я *)Q!1 Ig --,—

* - < - i (Ð;

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4689102/13 (22) 04.05.89 (46) 23.10.91. Бюл, М 39 (71) Научно-исследовательский зональный институт садоводства нечерноземной полоСЫ (72) В.А.Высоцкий и M.Т.Упадышев (53) 581.143.6(088.8) (54) СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ РАСТЕНИЙ

IN VITRO (57) Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе клонального микроразмножения различных культур, Целью изобретения является уменьшение инфицированности питательИзобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе клонального микроразмножения различных культур.

Цель изобретения — уменьшение инфицированности питательной среды и растений, ускорение и упрощение процесса.

Пример. В небольшой объем бидистиллированной воды добавляют макро- и микроэлементы по рецепту Мурасиге-Скуга, мг на 1 л раствора: ИН4МОз 1650, ККОз 1900, СаС!г 2НгО 440, MgSO4 370, КНгРО4 170, .

FeSO4 7НгО 27,8, йагЭДТА 2НгО 37,3, НзВОз 6,2, Мп$04 4НгО 22,2, ZnS04 7НгО

8,6, KJ 0,83, NazMo04 2НгО 0,25, CuS04 5НгО 0,025, СоС!г 6НгО 0,025. Затем в этот же раствор вносят сахарозу в количестве 30 г/л, витамины в количестве мг/л: миоинозит 100, тиамин, пиридоксин, никотиновая кислота — 0,5, аскорбиновая кислота 1, регулятор роста — индолилмасляная кислота в концентрации 0,5, после чего

„„SU „„1685323 А1 ной среды и растений, ускорение и упрощение процесса. Поставленная цель достигается тем, что готовят питательную среду и на ее поверхность наносят защитный слой, в качестве которого используют парафин.

Толщина слоя 0,09 — 0,12 мм. Причем слой парафина наносят перед автоклавированием, после которого осуществляют высадку тканей и органов растений и их дальнейшее культивирование, Способ позволяет снизить инфицированность питательной среды с 2? до О, что дает возможность высаживать эксплантаты в нестериальных условиях и значительно снижает затраты на осуществление способа и ускоряет процесс, 1 з.п, ф-лы, 2 табл, объем раствора доводят до нужной величины, устанавливая рН 5,5 — 5,6, В приготовленный раствор вносят? г/л агар-arapa u прй нагревании добиваются его растворения. Питательную среду разливают по сосудам, в которые вносят навески парафина.

Количество парафина зависит от радиуса сосуда и толщины защитного слоя, При радиусе сосуда 2,5 см и требуемой толщине защитного слоя 0,09 — 0,12 мм навеска парафина составляет 160 — 210 мг на 1 сосуд. Затем сосуды закрывают, автоклавируют при давлении 0,9 атм (температура 119 С) в течение 15 — 20 мин и оставляют до затвердения агара и парафина. Парафин, имея плотность 0,88 г/см, располагается на поверхности питательной среды и формирует защитный слой.

После этого осуществляют высадку эксплантов в нестерильных условиях. Высадка побегов актинидии по предложенному способу полностью исключает инфицироввние

1685323

Табл и ца 1

Таблица 2 среды, s то время как при высадке по известному способу инфицированность составляет 27,3 . (см, табл,1).

Как видно из табл.1, использование парафинового покрытия, исключая инфицирование среды, не ухудшает развитие растений.

Оптимальная толщина слоя. парафина колеблется в пределах 0,09 — 0„12 мм (см.табл.2). Более тонкий слой не обеспечивает равномерного покрытия среды, а более толстый затрудняет посадку зксплантов.

Кроме того, наличие слоя, превышающего

0,15 мм по толщине, приводит к его растрескиванию при посадке, нарушая, таким образом, целостность поверхности защитного слоя.

В табл.2 показана эффективность посадки зксплантов в нестерильных условиях при различной толщине защитного слоя.

Предлагаемый способ выращивания растений In vitro позволяет осуществлять высадку частей растений в культуральные сосуды в нестерильных условиях. Это значительно расширит применение метода культуры тканей и даст воэможность получить гораздо больше посадочного материала.

Формула изобретения

1. Способ выращивания растений In

vItro, включающий приготовление питательной среды, автоклавирование, нанесение

10 защитного слоя на поверхность питательной среды, последующую высадку на нее тканей или органов растений и их культивирование, отличающийся тем,.что, с целью уменьшения йнфицированности пи15 тательной среды, ускорения и упрощение процесса, в качестве защитного слоя используют слой парафина толщиной 0,090,12 мм.

20 2. Способ по п,1, отличающийся тем, что защитный слой парафина наносят на поверхность питательной среды перед автоклавированием.