Способ консервирования гемопоэтических клеток эмбриональной печени человека

 

д) А 01 !! 1/02

«

1

1

1

«Ю« « .< 4 <«"Д ! а

S ф (21) 4 772894/14 .(22) 22. 11,89 (46) 23.01.92. F ë. 3 (71) )He TèòóT f1po ë<" ì криобиологии криоие ицины АН УССР (72) Г. С . Л збынце ва, В. И. Грищенкг,, И,А.Вотякова, С.Т.Олейник, Э.И.Обо"-!i, Г.В.Герасименко и А.А.Э; волока (53) 6 12,015(088.8) (54) .ÏОСОВ КОНСЕРВИРОВАНИЯ ГЕИОПОЭТИЧЕСКИХ КЛЕТОК ЭМБРИОНАЛЬНОЙ, ПЕЧЕНИ ЧЕЛОВЕКА

Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано для низкотеипературного консервирова:. я гемопоэтических клеток эмбриональной печени.

Цель изобретения — псвншение сохранноси гемопоэтических клеток эмбриональной печени, Пример. Суспензию геиопоэги» еских клето <, вылеленную из эмбриональной печени, смешивают 1: 1 с

<0 и 20 -ными растворами криопротектора ДИСО, приготовленньм на растворе

Хенкса, до получения концентрации

ДМСО 5 и 104, затем разливают в цилиндрические пластиковые контейнеры с инициаторами кристаллообразования по 1,5 ил, гериетизируют и помецают в ku. .àðó устр -йства программного охлаждения (УОП 6000 000). Время экспозиции легок при комнатной температуре 20 !-<,н. Взвесь охлаждают г, три -.«тапа. н. первом с0 скоростью

1 С/и.ч! д» -,3,5 С, на втором 0,3 С/ о со.- о

2 (57) Изобретение относится к биологии и медицине, Цель изобретения по:; !шение сохр,.нности гемопоэтических клето » эмбриональной печени . Клетки замораживают в присутствии крио ротекгора 5-104-ного дииетилсульфсксида в три этапа: на первом со cvnростью 1,0-1,4 град/мин до (-3,5)(-4) С, на втором 0,3-0,5 град/иин цо (-7)-(-8) С на третьем 4t о

6 град/мин до (-80) - (-196) С.

/иин до -7 С, на третьем 5оС/иин до

О

-t96 /С отогрев производят в BopR ной бане при 40 С

Сохранность клеток определяют путем эксплуатации в агар 100 000 клеток на чашку Петри и подсчета суммы колоний и кластеров (КОЕ-ГМ), выпосших в культуре на 8- 1О сут.

Способ консервирования гемопоэтических клеток эибриональной печени человека обеспечивает высокую сохранность КОГ-ГМ, которые образуют в агаре колонии и кластеры в таком же количестве, как и натичный материал и в те же сроки на 7 сут. формула изобретения

Споссб консервирования геиопоэтических клеток эмбриональной печени человека путем инкубирования в присутствии криопротектора дииетилсульфоксида, замораживая я с послелуюции оттаиванием, о т л и ч а ю j

1 С ..4z

° ° . ° .

Составитель Jl.!<онюхова

Техрел М. Дидик

Редактор О,Головач корректор H. Ýð/1eé

Заказ 2 1Ъ

ТИраи Подписное

ВНИ11ПИ Государственного комитета по иэобретениям и открытиям при ГКИТ СССР

113 135, москва, <-35, Раушс . эя наб., д. 4/5

Прочэводственно-издательский комбинят "Пате -"„г. Ужгород, ул. Гагар. на,101

qем, то, с < j -. п;:.;".: "" со

З ЪЮ (- ° . - P (° ъ

-.с вл",ю в три э, зп,! и,. .", это: Ihcj

pj=pp a. Эт" g ; »;) .. ия "Т СО СКО; О»

<-е- . ст ь 1 C / è:,.; /О.=3,, > с, н в с,,r. м э . пе

c;j сi:г, стью 0,3 С/мин ДΠ— j С на э тре I j<-i "i j,,пе гО око достаю g С/мин -,о

-106" Ñ.