Аппарат для изотахофореза на пленках

 

Изобретение относится к конструкциям электрофоретических аппаратов, используемых для быстрого и аффективного разделения высокои низкомолекулярных соединений на компоненты в соответствиис их подвижностями с применением в качестве носителя пленок, например, из ацетата целлюлозы, и может быть использовано в химии, биохимии и медицине. Цель изобрё-- тения - повышение разрешающей способности И сокращение времени анализа. Аппарат состоит из корпуса с крышкой, разделенного на два электродных отделения перегородкой, по обе стороны которой расположены опоры для пленки, имеющей зону для размещения исследуемых образгдов. Аппарат снабжен перфоратором с фиксатором и формирователем карманов пленки, например, в виде пуансона с матрицей, которые установлены последовательно на крышке корпуса, а также рамкой, имеющей возможность продольного и поперечного перемещения относительно плоскости указанной крышки и снабженной накладной пластиной с рядом равномерно расположенных впадин, причем указанные опоры выполнены в рамке и имеют ряд выступов. 2 з.п. ф-лы,3мл.

(l9) (11) СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (s1)s G 01 N 27/453

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

4 M

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4619927/25 (22) 26.12.88 (46) 15.02.92., Бюл. hL 6 (71) Московское научно-производственное обьединение "Биофизприбор" и Всесоюзный онкологический научный центр (72) И. В. Кучер, Е. А. Панкратьева, В. Л.

Тюрин„Г. Е. Цимаркина, Г. И. Абелев, Э, P.

Кара мов.а. (53) 543.257(088.8) (56) Абелев Г. И, и др. Методы электрофоретического анализа, Наука, 1980, Гааль Э. Э. и др. Электрофорез в разде.лении биологических макромолекул, М,:

Мир, 1982, с, 237 — 238. (54) АППАРАТ ДЛЯ ИЗОТАХОФОРЕЗА НА

ПЛЕНКАХ (57) Изобретение относится к конструкциям электрофоретических аппаратов, используемых для быстрого и эффективного разделения высоко- и низкомолекулярных соединений на компоненты в соответствии

Изобретение относится к конструкциям электрофоретических аппаратов, используемых для быстрого и эффективного разделе-. ния высокомолекулярных соединений на компоненты s соответствии с их подвижностями с применением в качестве носителя, например, пленок из ацетата целлюлозы, и может быть использовано в химии, биохимии и медицине..

Цель изобретения — повышение разрешающей способности и сокращение времени анализа. ,б

Нз фиг. 1 показан предлагаемый аппарат, разрез; на фиг. 2 — подвижная рамка с с их подвижностями с применением в качестве носителя пленок, например, иэ ацетата целлюлозы, и может быть использовано в химии, биохимии и медицине, Цель изобретения — повышение разрешающей способности и сокращение времени анализа.

Аппарат состоитиз корпуса с крышкой, разделенного на два электродных отделения перегородкой, по обе стороны которой расположены опоры для пленки, имеющей зону для размещения исследуемых образцов..Аппарвт снабжен перфоратором с фиксатором и формирователем карманов пленки, например, в виде. пуансона с матрицей, которые установлены последовательно на крышке корпуса, з также рамкой, имеющей возможность продольного и поперечного перемещения относительно плоскости укаэанной крышки и снабженной накладной пластиной.с рядом равномерно расположенных впадин, причем укаэанные опоры выполнены в рамке и имеют ряд выступов. 2 з.п. ф-лы, 3 ил. расположенной на ней пленкой; на фиг. 3 — © аппарат; аксонометрия. ° ВИВЙ

Аппарат (фиг. 1) состоит из корпуса 1, разделенного перегородкой 2 на два отде- . ления, в каждом из которых установлены электроды 3. На боковых стенках внутри корпуса rio o6e стороны перегородки 2 выполнены направляющие 4,. в которые вставлены перегородки 5 тзк, что между ними и дном корпуса 1 образуются щели 6 для равномерного распределения электрического поля по ширине корпуса 1 и предохранения раствора, находящегося во внешних секциях электродных отделений, от продуктов электролиза, Образующихся на электродах

3. Перегородки 5 являются опорами для размещения на них рамки 7 с пленкой 8, сформированной специальным Образом с карманами 9, 10 и 11 для внесения буферного раствора. раствора амфолинов и разделяемого Препарата соответственно.

Alle8K3 8 распОложена на перемычках

12 рамки 7 (фиг. 2), причем перемычки 12 имеют в верхней части заостренные выступы 13. которыми они касаются пленки 8 для снижения площади контакта пленки 3 с рамкой 7 и предотвращения тем самым нарушения потока жидкости-в пленке, С обеих сторон рамки 7 в нижней ее части выполнеиы выступы 14 и 15, На рамке 7 поверх иванки 3 установлена фиксирующая пленку накладная пластика 16 с рядом равномерно расположенных впадин 17, количество котомироватевь 21 карманов, выполненный, им@имер, из матриц 22 и подпружиненного пуансона 23. На крышке 18 выполнены продольный паэ 24 и два поперечных паза 25 для Однозначного размещения рамки 7 с пленкой 8 при обработке последнай перед 30 проведением электрофореза.

Перфоратор 19 состоит из подпружиненного аерфорирующего элемента 26, установленного над пазом 27 матрицы 28 парфоратора 19, расположенной под пленкой 8 на крышке 18.

На верхней поверхности матрицы 22 формирователя 21 выполнен треугольный в

Сачеиии ааз 29, соответствующий по профивю выступу 30 пуансона.

Аппарат работает следующим образом.

Смоченную буферным. раствором пленку 8 размещают на перемычках 12 рамки 7, 40 фйксируют пленку 8 накладкой пластикой

16 и совмещают выступ 14 рамки 7 с продольным пазом 24 крышки 38, При перемещении рамки 7 вдоль паза 24 фиксатор 20 входит последовательно в .каждую из впадин 17 накладной пластины 16. При этом происходит фиксация, которая является 50 сигналом оператору для нажатия на перфорирующий элемент 26. Последний, входя в паз 27 матрицы 28, пробивает в пленке 8 продольное отверстие.

Рамку снова перемещают вдоль паза 24 до следующего щелчка фиксатора 20. Операцию повторяют до получения необходимого количества отверстий. Затем последующим перемещением совмещают рамку 7 с формирователем 21 карманов и

I рых соответствует количеству подлежащих 20 делению Образцов.

Корпус сеерху закрыт крышкой 18, на которой фиксированко размещены перфоp@Y0p Т9 С Цириковым фиксатором 20 и форнажатием на подпружиненный пуансон 23 совмещают выступ 30 с пазом 29 матрицы

22. При этом в пленке 8 образуется карман

10. Перемещая рамку 7 вдоль поперечного паза 25 на необходимое расстояние, формируют аналогичным образом карман 11.

После извлечения рамки 7 из формирователя 21 карманов ее поворачивают на

180 и устанавливают в формирователь 21 карманов, совмещал выступ 15 с поперечным пазом 25. Нажатием на подпружиненный пуансон 23 формируют карман 9, 8 результате получается с одного конца пленки один по всей ширине рамки карман

9, с другого — несколько карманов 11 для нанесения исследуемых Образцов, разделенных продольными отверстиями, и рядом с ними по всей ширине пленки карман 10 для раствора амфолинов.

Рамку 7 с пленкой 8 помещают в корпус

1 на перегородки 5 так, чтобы конец пленки с карманом 11 размещался вблизи катодного отделения. 8 электродные отделения заливают соответствующие буферные растворы, на концы пленкй накладывают влажные фитили, например, из фильтровальной бумаги, опуская концы в растворы электродных отделений. В карманы 9, 10 и

11 микропипеткой заливают необходимые растворы, камеру закрывают крышкой 18, а электроды 3 подключают к выходным клеммам источника питания (не показан).

Разделяемые компоненты анализируемого образца благодаря электроосмосу, создаваемому потоком раствора из кармана 9 у анодного отделения, концентрируются из

acего объема раствора., внесенного в карман 11 образца, в узкую стартовую зону на границе кармана, распределяясь в этой зоне, благодаря переместившимся в эту зону из кармана 10 амфолинам, в строго опреде- ленной последовательности в соответствии с их подвижностями, После концентрирования компоненты разделяемого образца под действием электрофореза начинают перемещаться в порах пленки в сторону анода со скоростями, соответствующими их зарядам, и в результате распределятся отдельными зонами на горизонтальной части пленки между карманами 9 и 11. Известными методами пленку красят и отмывают от избытка красителя, проявляя тем самым результаты электрофоретического разделения.

Предлагаемый аппарат позволяет осуществлять все методики злектрофореэа, в том числе и изотахофорез на пленке- новый высокоэффективный метод, обеспечивающий анализ белковых компонентов, содержащихся в биологических жидкостях в следовых количествах, что черезвычайно

1712861

5 важно для ранней диагностики многих форм онкологических. заболеваний, при выявлении тяжелых наследственных заболввзний плода человека, для контроля за эффективностью лечения и т. д.

Выполнение нз крышке аппарата устройства для обработки пленки, состоящего из перфоратора и формирователя карманов, позволяет быстро придать пленке необходимую форму, уменьшает количество ручных операций. При этом исключается возможность загрязнения пленки и искажения тем самым результатов анализа, Все операции обработки пленки проводятся непосредственно нв рамке. Наличие паза на крышке обеспечивает.однозначность установки рамки и исключает возможность ошибок оператора, стандареизирует условия электрофореза. Преимуществом аппарата является также снабжение пврфоpampa фиксатором. При этом рзсполэгаемая на рамке накладная пластина, снабженная впадинами, исключает возможность перемещения пленки в процессе обработки и служит устройством подачи сигнала для нажима нз пврфорирующий элемент. Количество впадин накладной пластины выбирается равным количеству одно временно анализируемых образцов.

Удобство в эксплуатации аппарата обусловлено тем. что формирователь карманов установлен за перфоратором в направлении перемещения рамки с пленкой. При этом матрица и пуансон формирователя устзновлены так, что при продвижении рамки с пленкой вдоль паза зона перфорированной пленки размещается между матрицей и пуансоном и простым нажатием на пуансон

5 формирователя в пленке образуются карма, ны одной и той жв формы и размеров, что позволяет получать воспроизводимыв р8зультаты анализа.

1

10 Ф.о р м у л а и з о б р е т е н и я t. Аппарат для изотахофорвза.на пленках. содержащий корпус с крышкой. разделенный нэ два электродных отделения перегородкой, рамку для носителя, установ15 леннуе э корпусе, и перфоратор для о0разования прорезей в носителе, о т л и ч з ешийся тем, что, с целью повышения разрешающей способности и сокращения времени анализа, аппарат снабжен форми20 роввтелвм карманов на носителе. установленном послвдова гельно с перфоратором на крышке корпуса, на которой выполнены направляющие пазы для продольного и по- . перечного перемещения рамки относитель25 но горизонтальной плоскости крышки.

2. Аппарат по и, 1, отличающийся тем, что рамка снабжена поперечными перемычками, имеющими остроконечные выступы. и накладной сменной пластиной с

ЗО рядом равноотстоящих угаублений.

3. Аппарат по и. 1, отличающийся тем, что формирователь выполнен в виде матрицы и пуансона, имеющих взаимодополняющую форму, 1712861

/gal g

Составитель И Рогаль

Редактор А.Лежнина Техред М.Моргентал Корректор Н;.Ревская

Заказ 532 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101