Способ определения состояния иммунитета у женщин

 

Изобретение относится к иммунологии , акушерству и гинекологии. Цель - повышение точности способа исследопания иммунитета у женщин. Для этого выделяют нейтр-офилы из цервикал.ьной слизи, определяют их спонтанную хемилюминесценцию, активируют нейтрофилы полистирольным монодисперсным латексом диаметром 1,5- 1,75 мкм с последующим определением , индуцированной латексом хемилюминесценции, в сравнении с нормой определяют состояние иммунитета у женщин.

СВОЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

jg )g 0 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ИОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОЧНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 46 76 650/14 (22) 11 04 .89 (46) 29.02.92. Бюл. V - .8 (71) Челябинский государственный медицинский институт (72) В .Ф.Долгушина, А.Б .Зурочка, Л.Ф.Телешева и Б.И.Иедведев (53) 618 . 5 (088.8) (56) А. ТГП1: Amer. Т. Peprod ° Immu- .

no1. and licrubiul 1987, 15, ¹ 1 р. 19-23. (54) СПОСОБ ОПРЕДГЛЕНИЯ СОСТОЯНИЯ

1МИУНИТЕТА У ЛКН1 gIH

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, акушерству и гинекологии.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуцествляют следующим об,разом.

Отсасывают цервикальную слизь из цервикального канала в стерильную пипетку. Помещают клетки в сбалансиро- ванный фосфатный буфер с добавлением

1-глютамина, глюкозы и буфера Hepes (можно и просто фосфатный буфер), Клетки отмывают центрифугированием в течение 10 мин при 1500 об/мин, доводят до концентрации 10 кл,/мл (ядросодержащих клеток),,помещают на темновую адаптацию на 40 мин в термостат при 37 С. Определяют в течение 2 мин о спонтанную хемилюминесценцию (люминолзависимую) и в течение 2 мин индуцированную латексом хемилюминесценцию в хемилюминометре. При этом используют полистирольный монодисперсный латекс,.SU„„>71644 . А1

2 (57) Изобретение относится к иммунологии, акушерству и гинекологии.

Цель — повышение точности способа исследования иммунитета у женщин.

Дпя этого выделяют нейтрофилы из цервикальной слизи, определяют их спонтанную хемилюминесценцию, активируют нейтрофилы полистирольным монодисперсным латексом диаметром 1,51,75 мкм с последующим определением индуцированной латексом хемилюминесценции, в сравнении с нормой определяют состояние иьпчунитета у женщин. б 1„5-1,75 мкм, а люминол в конечной концентрации 50 мкг/мл,буфера.

Подсчитывают индекс ХЛ нейтрофилов по формуле

„„„индуцированная .Л спонтанная ХЛ по которому определяют состояние иммунитета (местного) у женцины.

Пример 1. 3-a P.X., 28 лет. ©

Диагноз: неосложненная инфекцией бе- Ф ременность 7-8 недель. 4, У-а С.И., 28 лет. Диагноз: неослож- Ql ненная беременность 25-26 недель.

М-а С.P) 23 года. Неосложненная беременность 36 недель.

Исследовали хемилюминесценцию нейтрофилов цервикальной слизи в со- Э ответствии с заявляемым способом. ° вй

У женщин брали цервикальную слизь из цервикального канала в фосйатный буфер того же состава; однократно отмывали в буфере при 1500 об/мин в течение 10 иин. Подсчитывали. число яд4

1716445 количество импульсов в 1. мин после добавления латекса . к тччество импульсов в 1 мин при спонтанной ХЛ !

В данном примере KKJI вычисляли следующим образом: количество импульсов/мин за

1-ю минуту после индукции количество импlмин за

2-ю минуту после индукции л количество имп/мнн за

2-ю минуту до индукции количество имп/мнн за

1-ю минуту до индукции росодержащих клеток, доводили концентрацию до 10 кл/мл и подвергали темно6 вой адаптации.

Ех сempore гоч.овили раствор люми5 иола на фосфатном буфере того же состава из расчета 50 мкг люминола (фирмы Sipma) на 1 ип раствора. Вносили во флаконы (фирмы Вестап) по 1 мл раствора люминола и подвергали темно- 10 вой адаптации.

Затем после темновой адаптации и стабилизации клеток во флаконы вносили по 0,1 мл раствора клеток в концентрации 10 кл/мл (10 кл/мл раствора люминола) и флаконы с клетками помещали в хемилюминометр — .счетчик

"Бета-1".

В течение первых двух ьщнут провоl дили измерения спонтанной хемилюминес-2р ценции нейтрофилов. Через 2 мин во флаконы вносили 10 мкл взвеси полиПолучили следующие результаты

3-а Г.Х., 7-8 недель. Спонтанная

ХЛ нейтрофилов (CXJI) цервикальной сли" зи 3371,5.имп/мин. Индекс индуцированной ХЛ нейтрофилов цервикальной слизи 0,63.

У-а С.19. 25-26 недель. СХЛ цервикальной слизи 412,0 имп/мин. ИИХЛ нейтрофилов цервикальной слизи 1,2.

М-а С.IO. Спонтанная ХЛ нейтрофилов цервикальной слизи 5849, 0 имп/мин;, Индекс индуцированной ХЛ нейтрофилов цервикальной слизи 13,6 усл.ед.. Полученные результаты показывают„. что в течение беременности у женщин с неосложненной беременностью активность нейтрофилов цервикальной слизи повышаемся от I po III триместра беременности, следовательно, объективно отражает состояние защитных сил беременной женщины.

Изучение состояния ХЛ нейтрофилов цервикальной слизи у беременных женщин с инфекционными осложнениями постирольного монодисперсного латекса

41,7 мкм (концентрация частиц 10 "о на мл), конечная концентрация составила 10 частиц на 1 мл раствора люминола. Латекс вносили в избытке. Необходимость этого обусловлена тем, что частицы должны одновременно реагировать с клетками; с этой же целью суспензия частиц и клеток тщательно перемешивается. флаконы вновь ставили в счетчик и измеряли уровень уже индуцированной.. латексом ХЛ нейтрофилов в течение 2 мин. Затем опреде-". ляли уровень спонтанной ХЛ нейтрофилов за 1 мин путем сложения количестЬ ва импульсов в 1-ю и 2-ю минуту регистрации и деления полученной суммы на 2, получая средний уровень ХЛ нейтрофилов за 1 мин. Вычисляли индекс ипдуцированной ХЛ нейтрофилов по формуле казало большую информативность изучения ХЛ нейтрофилов цервикальной слизи.

Это иллюстрируется следующим примером.

Пример 2. Больная Р., 26 лет.

Диагноз: беременность 36 недель. Цервицит. Угроза преждевременных родов.

Изучение состояния иммунитета проводили- в соответствии с заявляемым способом.

Получили следующие результаты: СХЛ нейтрофилов цервикальной слизи

1556,0 имп/мин; 1ШХЛ нейтрофилов цервикальной слизи 172,4.

Полученные данные -свидетельствуют о резком усиЛении индуцированной ХЛ нейтрофилов цервикальной слизи.

У этой женщины развиваются преждевременные роды (гнойно-септических осложнений у роженицы на было выявлено).

Пример 3. Р-ва Л.Н., 15 лет.

Беременность 38 недель. Кольпит.

Показатели ХЛ нейтрофилов:

СХЛ нейтрофилов цервикальной слизи

528, 0 имп/мин, ИИХЛ нейтройилов .цервикальной слизи .1,54.

5 1 716445 6 одновременно обладай высокой информативностью за счет получения данных о,состоянии местного иммунитета, может найти широкое применение в клинической лабораторной практике.

Формула изобр етения

Составитель Л.Пурьппева

РедактоР N.Öèòêèíà ТехРед A,Кравчу КоРРектоР А ОбРУчаР

° !

Заказ 610 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãoðoä, ул. Гагарина,101

У данной больной отмечена низкая спонтанная и индуцированная ХЛ нейтро- филов цервикальной слизи. Низкие зна чения ХЛ нейтрофилов цервикальной слизи заставляют предположить развитие послеродовой инфекции .

Предлагаемым способом быяо обследовано 48 беременных женщин в различные периоды беременности и 10 небере- 10 менных здоровых женщин.

У 3 из беременных женщин, обследо- ванных в соответствии с предлагаемый способом; при исследовании ХЛ нейтрофилов цервикальной слизи были предсказаны преждевременные роды, а у 4— развитие инфекционных послеродовых осложнений. Все 7 предположений в последующем подтвердились.

Предлагаемьп способ, значительно, сокращая длительность и трудоемкость исследования иммунитета у женщин, Способ определения состояния им-. мунитета у женщин путем выделения нейтрофилов, определения их спон.таиной хемилюминесценции, индукции нейтрофилов латексом с последующим расчетом изменений спонтанной и ин- .:. дуцированной " хемилюминесценции по сравнению с нормой, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения точности, нейтрофилы вьщеляют из цервикальной слизи, а активацию их осуществляют латексом диаметром

1,5-1,75 мкм.