Способ диагностики субклинической остеодистрофии у нетелей

 

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам диагностики субклинической формы остеодистрофии. Целью изобретения является повышение точности диагностики. У животных берут кровь, получают сыворотки, выделяют щелочную фосфатазу, проводят ее разделение на изоферменты. .При показателе активности щелочной фосфатэзы костного происхождения не менее 90 Е/л судят о наличии заболевания . При этом точность диагностики повышается до 100%. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19). (! () (51}5 А 61 В 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4794890/15 (22) 26.02.90 (46) 23.03;92. Бюл. М 11 (71) Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РСФСР (72) Т.Е.Григорьева, Г.И.Иванов и Е.В.Юрьева (53) 616.071(088,8) (56) Патология обмена веществ у высокопродуктивного крупного рогатого скота./Под ред B.Ï.Øèøêîâà, — М.: Колос, 1978, с. 198. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СУБКЛИНИЧЕСКОЙ ОСТЕОДИСТРОФИИ У НЕТЕЛЕЙ

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам диагностики болезней крупного рогатого скота, связанных с нарушением минерального обмена, и может быть использовано для диагностики субклинической остеодистрофии, преимущественно у нетелей второй половины стельности, Целью изобретения является повышение точности диагностики, Пример 1, Кровь берут из яремной вены в обычные пробирки. Сыворотку крови получают центрифугированием после ретракции кровяного сгустка в течение 15 мин при 3000 об/мин. В сыворотке крови определяют общую активность щелочной фосфатазы по гидролизу р-нитрофенилфосфата оптимилиризованным методом с использованием наборов фирмы "Лахема" и изоферменты щелочной фосфатазы. Разделение изоферментов проводят в пластинчатом

1 (57) Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам диагностики субклинической формы остеодистрофии. Целью изобретения является повышение точности диагностики, У животных берут кровь, получают сыворотки, выделяют щелочную фосфатазу, проводят ее разделение на изоферменты. При показателе активности щелочной фосфатаэы костного происхождения не менее 90 Е/л судят о наличии заболевания. При этом точность диагностики повышается до 100%. 3 табл.

7%-ном полиакриламидном геле и трис- а глициновой буферной системе (рН 8,3) методом электрофореэа на аппарате ПЭФА с использованием камеры АВГЭ-1. После окончания злектрофореэа изоферменты проявляют методом одновременного азосочетания. Для этого пластины геля погружают в субстратную смесь следующего 4 состава: 12,5 мг 2-нафтилфосфата растворяют в 14 мл бидистиллированной воды, добавляют 2 мл 0,5 М раствора азотнокислого магния и 10,5 мл 0,2 M раствора трис, затем — 12,5 мг прочного синего РР, взбалтывают до полного растворения всех ингредиентов.

Раствор готовят перед употреблением, Инкубируют в течение 60 мин. После инкубации пластины геля переносят в раствор 5%-ной уксусной кислоты в 70%-ном зтаноле на 60 мин и денситометрируют для количественного определения соотноше1720637

Таблица 1 аблица ния изоферментов на микрофотометре

МФ вЂ” 2, Исходя иэ общей активности, соотношения изоферментов пересчитывают в единицы активности — Е/л.

Электрофоретическая подвижность иэаферментов (по отношению к альбуминам) ЩФ1 0,50-0,52; ШФ2 0,36 — 0,38; ЩФз

0,30 — 0,32.

Пример 2. Определение активности щелочной фосфатазы (ЩФ) и щелочной фосфатазы костного происхождения (ЩФг) в зависимости от заболевания остеодистрофией, Исследования проводят на нетелях черно-пестрой породы второй половины стельности клинически здоровых (группы 1 — 3) и больных остеодистрофией (группы 4-6) в эимнестойловый пеоиод.

Результаты представлены в табл.1.

Данные, приведенные в табл.1, подтверждают специфичность показателя активности ЩФг. Так, в группах 4-6 (остеодистрофия) активность ЩФ составRApT 90 Е/л и выше, тогда как активность

ШФ в группе 3 (клинически здоровые животные) практически не отличается отсоответствующего показателя в группах 4-6 (остеодистрофия).

Пример 3. Заболеваемость остеодистрофией в зависимости от активности щелочной фосфатазы костного происхождения (ЩФг).

Клинически здоровых и больных остеодистрофией нетелей обследуют, как в примере 1. В зависимости от активности ШФг распределяют на 5 групп: 1 группа 5,0-30,0

5 Е/л, 2 группа — 30,0 — 60,0 Е/л, 3 группа—

: 60,0 — 90,0 Е/л, 4 группа — 90,0 — 120,0 Е/л, 5 группа — 120,0 Е/л и выше.

Результаты представлены в табл.2.

Как видно иэ табл.2, при активности

10 ЩФг выше 90,0 Е/л в 100 случаев диагностируется остеодистрофия.

Пример 4. В табл.3 приведены сравнительные данные выявлений субклинической остеодистрофии.

15 Способ позволяет повысить точность диагностики субклинической остеодистрофии до 100,07ь благодаря специфичности показателя активности щелочной фосфатазы костного происхождения (ЩФр).

20 Формула изобретения

Способ диагностики субклинической остеодистрофии у нетелей, включающий взятие крови, получение сыворотки, выделе25 ние щелочной фосфатазы, о т л и ч а ю щ ий с я тем, что, с целью повышения точности диагностики, проводят разделение щелочной фосфатаэы на изоферменты и при показателе активности щелочной фосфатазы

30 костного происхождения не менее 90 Е/л судят о наличии заболевания, 1720637

Таблица 3

Заболевание гол.

Остеодист о ия

100 0

37

Составитель M.Áåëoócoâà

Редактор H.Ëàçàðåíêî Техред М,Моргентал Корректор О.Кравцова

Заказ 906 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

° Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Количество животных, гол.

Известный способ диаг-. ностики гол. %

19 51,3

Предлагаемый способ диагностики