Способ приготовления плоскостных препаратов эндотелия сосудов
Изобретение относится к морфологии и позволяет повысить эндотелиоциты в стенке магистральных сосудов малого диаметра. Цель - расширение возможностей способа за счет приготовления препаратов сосудов малого диаметра. В экспериментах на новорожденных крысятах под внутримышечным нембуталовым наркозом (40 мг/г веса) сосудистое русло перфузируют средой 199 в течение 1,5 мин (для отмывки сосудистого русла от форменных элементов крови), фиксируют в 2,5%-ном растворе глутзрового альдегида в течение 5 мин и затем иссекают инфраренальный участок брюшной аорты (диаметр не более 1 мм). Образец после дегидратации в спиртах восходящей концентрации высушивают на воздухе, укрепляют на подложке (с помощью клея) и срезают под микроскопом лезвием вдоль оси сосуда. После этого срезанный образец инкубируют в смеси этанола и эфира (1:1) в течение 5 мин и абсолютном спирте в течение 5 мин. Затем эндотелий отделяют с помощью целлоидиновой пленки и укрепляют на желатинизированном стекле. После удаления целлоидина препараты окрашивают гематоксилином и исследуют в микроскопе МБИ-15, Применение способа перспективно при изучении развития сосудов, патологических процессов магистральных сосудов малого диаметра, при изучении влияния микрохирургических вмешательств на морфологию сосудистой стенки.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ CCCP) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ .,; — :,,-:;:; —,, К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛ ЬСТВУ - 00 О Ю (21) 4851483/14 (22) 16.07,90 (46) 15.03.93, Бюл, N. 10 (71) Ивановский государственный медицинский институт им. А. С. Бубнова (72) M. Д, Рехтер, В. А. Колпаков и А. А, Миронов (56) Авторское свидетельство СССР N 1180739, кл. А 61 В 10/00. Бобрик И. И., Шевченко Е, А., Черкасов В. Н, Шарахин А. И., Ена Я, Н, Сйособ выявления эндотелиоцитов в стенке:кровеносных сосудов, (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПЛОСКОСТН ЫХ П P Е ПАРАТОВ Э НДОТЕЛ ИЯ СОСУДОВ (57) Изобретение относится к морфологии и позволяет повысить эндотелиоциты в стенке магистральных сосудов малого диаметра. Цель — расширение возможностей способа за счет приготовления препаратов сосудов малого диаметра. B экспериментах на новорожденных крысятах под внутримышечным нембуталовым наркозом (40 мг/г веса) сосуИзобретение относится к медицине, преимущественно к нормальной и патологической морфологии, Целью изобретения является расширение возможности способа за счет приготовления препаратов сосудов малого диаметра, что достигается тем, что вскрытие просвета производят срезанием образца в плоскости оси сосуда, при этом, образец предварительно обезвоживают, высушивают на воздухе и укрепляют на подложке, а затем „„5U„„1802312 Al дистое русло перфузируют средой 199 в течение 1,5 мин (для отмывки сосудистого русла от форменных элементов крови), фиксируют в 2,57,-ном растворе глутарового альдегида в течение 5 мин и затем иссекают инфраренальный участок брюшной аорты (диаметр не более 1 мм). Образец после дегидратации в спиртах восходящей концентрации высушивают на воздухе. укрепляют на подложке (с помощью клея) и срезают под микроскопом лезвием вдоль оси сосуда. После этого срезанный образец инкубируют в смеси этанола и эфира (1;1) в течение 5 мин и абсолютном спирте в течение 5 мин. Затем эндотелий отделяют с помощью целлоидиновой пленки и укрепляют на желатинизированном стекле. После удаления целлоидина препараты окрашивают гематоксилином и исследуют в микроскопе МБИ вЂ” 15. Применение способа перспективно.при изучении развития сосудов, патологических процессов магистральных сосудов малого диаметра, при изучении влияния микрохирургических вмешательств на морфологию сосудистой стенки. инкубируют его в смеси спирта с эфиром и абсолютного спирта, Способ осуществляют следующим образом. В экспериментах на новорожденных крысятах пад внутримышечным нембутало. вым наркозом (40 мг/мг веса) сосудистое русло перфузируют средой 199 в течение 1,5 мин (для отмывки сосудистого русла от форменных элементов крови), фиксируют в 2.57 растворе глутарового альдегида в те1802312 Составитель Ю.Есилевский Техред M,Moðãåíòàë Корректор З.Салко Редактор Заказ 846 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35. Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 чение 5 мин и затем иссекают инфраренальный участок брюшной аорты (диаметр не более 1 мм). Образец после дегидратации в спиртах восходящей концентрации высушивают на воздухе, укрепляют на подложке с помощью клея и срезают под микроскопом лезвием вдоль оси сосуда. После этого срезанный.образец инкубируют в смеси этанола и эфира (1;1) в течение 5 мин и абсолютного спирта в течение 5 мин. Затем эндотелий отделяют с помощью целлоидиновой пленки и укрепляют на желатинизированном стекле. После удаления целлоидина препараты окрашивают гематоксилином и исследуют в микроскопе М БИ-15. Пример, В 12 экспериментах на новорожденных крысятах под внутримы. шечным нембуталовым наркозом (40 мг/кг веса) сосудистое русло перфузировалось средой 199 в течение 1,5 мин (для отмывки сосудистого русла от форменных элементов крови), фиксировалось в 2,5 (,-ном растворе глутарового альдегида в течение 5 мин и затем иссекался инфраренальный участок брюшной аорты (диаметр не более 1 мм). Образец после дегидратации в спиртах восходящей концентрации высушивался на воздухе, укреплялся на подложке (с помощью клея) и срезался под микроскопом образец лезвием вдоль оси сосуда. После этого срезанный образец инкубировался в смеси этанола.и эфира (1:1) в течение 5 мин и абсолютном спирте в течение 5 мин, Затем 5 эндотелий:отделялся с помощью целлоидиновой пленки и укреплялся на желатинизированном стекле, После удаления целлоидина препараты окрашивались гематоксилином и исследовались в микроскопе 10 МБИ-15. Применение предложенного способа перспективно при изучении развития сосудов малого диаметра, при изучении влияния микрохирургических вмешательств на мор"5 фологию сосудистой стенки. Формула изобретения Способ приготовления плоскостных препаратов эндотелия сосудов, включающий вскрытие просвета, обезвоживание, от20 деление эндотелия с последующей окраской, отличающийся тем, что. с целью расширения возможностей способа за счет приготовления препаратов сосудов малого диаметра, вскрытие просвета производят срезанием образца в плоскости оси сосуда. при этом образец предварительно обезвоживают, высушивают на воздухе и укрепляют на подложке, а затем инкубируют его s смеси спирта с эфиром и абсолют30 ного спирта.
