Способ окрашивания гистологических и бактериологических препаратов

 

М 2О741

Клас 22 е, 2 .!ъ ; «ТЬКА (c:, До

ПАТЕНТ HA ИЗОБРЕТЕЙЙЕ .

ОПИСАНИЕ способа окрашивания гистологических и бактериологических препаратов и способа приготовления красильных препаратов для этой цели.

К патенту ffl. И. Гамова, заявленному 2б ноября 1928 года (заяв, свид. И 36007).

О выдаче патента опубликовано 31 мая 1931 года. Действие патента распространяется на 15 лет от 31 мая 1931 года.

Изобретение касается применения для окрашивания гистологических и бактерио-, логических препаратов пигментов, экстра- гируемых в кислой или щелочной среде из плодов жимолости или черники, чер-, ной кислицы, голубики или черной смо- родины.

Предлагаемый способ получения крася-, C щего вещества для микроскопическои техники состоит в том, что свежие или вы-, сс сушенные плоды жимолости („lanicera I. ), черники („voccinium mytaillus"), голубики или черной смородины, разрушенные тем; или другим способом, заливаются одина-, ковым по весу плодов количеством воды смесь подщелачивается нормальным рас-, твором соды из расчета 12 куб. с.и на «

1 л смеси или подкисляется нормальным раствором соляной или фосфорной кис-, лоты из расчета 8 — 10 куо. г.«« на 1 «« смеси. Далее последняя тщательно пере- мешивается и оставляется стоять l час, I после чего протирается через волосяное сито для удаления зерен и мязги, при чем остаток на сите промывается половинным по первоначальному весу плодов количеством горячей воды; вся полученная после процеживания масса кипятится в стеклянной или фарфоровой посуде в течение 40 — 50 минут. Горячий экстракт фильтруется через бумажный фильтр, а остаток на фильтре промывается половинным по первоначальному весу плодов количеством горячей воды. Для уничтожения углеводов, содержащихся в экстракте, последний может бьггь подвергнут биологической обработке дрожжевыми грибками „saccharamyces cerevisiae" или плесневыми грибками „penicillus glaucum".

При желании получить красящее вещество в сухом виде красновато-фиолетовый экстракт выпаривается до густоты тягучей массы и затем высушивается в эксикаторе.

Для применения препарата как ядрокрасящего вещества в гистологической технике последний готовится по прописи гематоксилина Ганзена, Бомера или Деляфильда. Так, для приготовления препарата по Бомеру к основному водному экстракту добавляется при подогревании до кипения 5 — 10 ««квасцов, при чем препарат через 2 — 3 дня годен для работы; для получения же препарата по прописи

Ганзена к 100 куб. сл«горячего основного экстракта с квасцами (как бомеровского) добавляют 1 — 1,5 куб. сл насыщенного раствора марганцевокислого калия. По прописи Дрляфильда готовится препарат . путем добавления всех требуемых для этого ингредиентов к основному экстракту.

Окраска предлагаемым препаратом па рафиновых, целлоидиновых и замороженных углекислотой срезов дает отчетливую картину (ядра окрашиваются в темнофиолетовый или синий цвет, протоплазма в слабо голубоватый цвет) ядер как нормальной животной ткани, так и опухолей, при чем в раковых опухолях отчетливо выступают фигуры кариокинетического деления ядер. Ядерная окраска препаратом допускает все употребительные дополнительные окраски †эоз, пикрофуксин, ауранция и проч.

Предмет па т ент@.

1. Способ окрашивания гистологических и бактериологических препаратов, отличающийся тем, что в качестве красильных материалов применяют красящие вещества плодов жимолости или черники, или голубики, или черной кислицы, или черной смородины.

2. Способ приготовления красильных препаратов для означенного в и. 1 окрашивания гистологических или бактериологических препаратов, состоящий из, извлечения раздробленных плодов водою, I йодщелоченной содой или подкисленной соляной или фосфорной кислотой, отделения от зерен и мязги, кипячения рас твора, фильтрования его, и, в случае надобности, выпаривания и высушивания, а затем обработки квасцами или квасцами с перманганатом по способу Ганзена, Бомера или Деляфильда, применяемому для препаоатов из гематоксилина. !

3. При означенном в п.п. 1 и 2 способе применение сбраживания углеводов в фильтрованной вытяжке из плодов обычным, способом с помощью дрожжей или плес-! невых гоибков.