Микробиологический способ получения б-метил-дз.э-эрголен-в- карбоновой кислоты

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советскик

Социалистических

Республик

Зависимый от ¹

Кл, 12р, 11/01

Заявлено 26,IX.1964 (№ 922635(23-4) с присоединением заявки ¹

МПК С 07d

УД1; 547.94.07(088.8) Приоритет

Опубликовано 02.XII.1967. Бюллетень .хй 24

Дата опубликования описания 23.1.1968

Комитет по делам иэобретеииЯ и сткрытиЯ при Соеете Мииистрое

СССР

Авторы изобретения

Иностранцы

Юрг Ручман, Ганс Кобель и Эмиль 111рейер (Швейцария) Иностра;шая фирма

«Зандоц А. Гс» (Швейцария) Заявитель

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ

6-МЕТИЛ-Лэ о-ЭРГОЛ EH-8-КАРБО НОВОЙ КИСЛОТЫ

Предложен микробиологический спосоо получения 6-метил-Лэ и -эрголен-8-карбоновой кислоты. Способ заключается в том, что ф1!льтрат культуры Claviceps paspali Stevens е(Hall 11(;КК1 3080 пропускают через ионообменные смолы, например Дауекс 50 или Амберлит ИР 120. 6-Метил-Лэо -эрголен-8-карбоновую кислоту элюируют со смолы 5%-пым раствором аммиака и кристаллизуют путем упаривания элюата и доведения значения рН раствора до его изоэлектричсской точки. Выход продукта 80%.

Полученное соединение является новым и может нанти применение в качестве промежуточного продукта в синтезе физиологически активных веществ.

Пример 1. 6-Метил-Лэо -эрголен-8-карбоновая кислота.

5 л фильтрата культуры нового рода С1ам1ceps paspali Stevens et Наll с общим содержанием производны.; эрголина приблизительно

500 лгал (в отношении молекулярного веса

300) и значением pl-1 5,6 колоримстрическим путем фильтруют чсрез взмученную водой колонну, содержащую 500 г Лмберлита 1$ 120 (форма Н+, диаметр колонны 2,8 сл, высота

115 см) . Проходная скорость составляет

500 мл)час. После промывки ко.1онны 1 г воды извлекают 6-метил-Лес -эрголсн-8-карбоновую ислоту. 5%-ным аммиаком. Собранный в фракциях по 500 лтл продукт исследуют на содержание производных эрголина флуоресценцией в ультрафиолетовом свете и цветной реакцией по 1(сллеру (раствор FeC1, в ледяной уксусной кислотс и концентрированная 1-1 SO,). Первые четыре фракции (всего

2 л) упаривают при 13 !1.и торра и при температуре ванны в 30=С до 500 лг.г, регулируют значение рН при помощи ледяной уксусной о кислоты до 5,5, от1рильтровывают от осадивш с и с Я с м О л ы (Ц в e T и а Я р с a K ц и Я и О 1(e:1 л c p y дает отрицательный результат), концентрируют фильтрат в вакууме приблизительно до объема 25 !1.1, прибавляют 20 !1л метанола, 1 дают раствору вскипеть и оставляют отстаиваться несколько часов при 5 С. Выкристаллизованную кислоту после отфильтровывания промывают водо" и метанолом и сушат при

80=С в течение 2 час в вакууме. 11з последую20 щих 7 фракци11 Iloc;Ic такой 21 е обработки можно полуLIIITb д;lльнсйшее 1 О, !и IecTBQ кристаллизованной 6-мстилизованной 6-мстилЛэ9 -эрголен-8-карбоновой кислоты.

Для очищения сырой кислоты объединяют

25 кристаллизованн 1с продукты, растворяют их в 5%-ном спиртовом аммиаке; раствор после ф!!льтрации регулируют до значения pl 1 5,5 двухнормальнои уксусной кислотой II нагревают его в водяной бане. Кристаллизованную

30 кислоту через несколько часов отфильтровы206438

Предмет изобретения

Составитель Иоффе

Редактор Jl. Г. Герасимова Тскред A. A. Камышиикова Корректоры: М, П. Ромашова и Л. В. Наделиева

Заказ 4585, !б Тираж 585 Подписное

ЦИИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапупога, 2 вают, промывают водой и метанолом и сушат в вакууме прн 80 С. Т. пл. 243 — 245 С (с разложе Нсм), (o)I> =-=- — 180 (0,1 í. NaOH).

Цветная реакция по 1 еллеру, ван Урк и

Эр. !иху така!Я жс, к!1 к IIpn л!!зергинОВОЙ кислоте; тонкослО!!няя хромятогряык!я ня I(peìнсвом гслс со спиртом (25 Д -ным аммиа!ком при 9: 1) в качестве жидкост!! Имеет значение

Rf 0,4 — 0,45. Пяп!о прини»ает при опрыскиваци! I pe!! êòèâîà! 3pë!!хя синий ОTTeHОк.

Ультрафиолетовый спектр: макс., !!л! 0,1 н.

Na0I-I 1оп е 217; 5/4,56; 282/3,79; 292/3,74; минимум при 252 лл.

Инфракрасный спектр: характерные полосы при 3340, 2275 (широко), 1674 и 1580 см т (в нуиоле).

Получен хг!Оргидрат из 6-метил-Лаз -эрголен-8-карбоновой кислоты с разбавленной соляной кислотой; гидрохлорид перекристаллизовывают из воды и разбавленной соляной кислоты; т. пл. 257 — 259 С (с разложением); (а)О = — 176 (в О,1 í. ICl).

Ультрафиолетовый спектр такой же, как у

6-метил-Лва -эрголен-8-карбоновой кислоты.

Инфракрасный спектр: характерные полосы при 3380, 2600, 1708, 1660 (слабо) и 1606 (слабо) с,!! (в нуиоле).

6 Метил-Лвв -эргол ен-8-к а р б он о в а я к и сл о та из хлоргидр а та.

К суспензии из 100 лг гидрохлорида в 5 мл воды, размешивая, прибавляют по каплям 2 н. раствор бикарбоната натрия до полного растворения субстанции. Затем значение рН peryлируют до 5,5, дают закипеть, через несколько часов отфильтровывают кристаллизованную кислоту, промывают ее водой и метанолом и высушива!от в вакууме при 80 С, т. пл.

5 245 — 247 C (с разложением), (а)О = — 208 (0,1 н. ХЯОН), тонкослойная хроматограмма на кремневом геле со спиртом (25%-ным а»миаком при 9: 11 одинакова; значение Rf 0.45.

Пятно в ультрафиолетовом свете практически

10 не проявляет флуоресценции и принимает при опрыскивании реактивом Эрлиха синий оттенок.

Пример 2. 6-М е т и л-Лв 9 -э р r о л е н-8кар бои овая кислота. Для получения

15 6-метил-Ла 9 -эрголен-8-кар боновой кислоты из фильтрата культуры нового рода поступают, ка1к QIIIIcaIIO В приз!ере 1, применяя, Одна!ко, вместо Л!!берлита 1Р 120 катионообменник ,Дауекс 50. Получают кристаллизованную сы20 рую 6-мстил-Лв -эрголен-8-карбоновую кислоту с указанными в примере 1 свойствами.

25 Микробиологический способ получения 6метил-Лвв -эрголен-8-карбоновой кислоты, 0Тлича!Ои1айся тем, что культуру Claviceps paspali Stevens et Наll ХКК1 3080 пропускают через кислые ионообменные смолы с последу30 !Ощей элюацией кислоты 5 /в-ным РаствоРом аммиака и кристаллизацией ее путем упаривания элюата и доведения значения рН раствора до его изоэлектрической точки.