Фармацевтическая композиция для лечения глаукомы

 

Фармацевтическая композиция для лечения глаукомы, содержащая в качестве активного компонента 5/1-гидрокси-2-/2-(2-метоксифенокси)этиламино/этил/-2-метилбензолсульфонамид или его кислую соль. Композиция содержит также поливинилпирролидон или α-циклодекстрин. Композиция характеризуется отсутствием побочных эффектов, стабильностью и в низких концентрациях проявляет активность в снижении внутриглазного давления. 3 з.п. ф-лы, 4 табл.

Настоящее изобретение относится к фармацевтическому препарату, предназначенному для лечения глаукомы и характеризующемуся по существу отсутствием побочных эффектов, стабильностью и способностью обеспечить улучшенную активность в снижении при низких концентрациях внутриглазного давления.

Глаукома это болезнь, отличающаяся ненормальным повышением внутриглазного давления, проявляющегося целым рядом симптомов, например утомляемость глаза, затуманенность зрения, боль в глазу и постепенное ухудшение зрения, ведущее в итоге к риску потери зрения. В результате болезни глазное яблоко затвердевает или зрачок на глубине выглядит зеленым.

Внутри глазного яблока постоянно циркулирует водная жидкость (внутриглазная жидкость), поддерживающая в глазу постоянное давление (внутриглазное давление 15 20 мм Hg). Внутриглазная жидкость регулируется циркулированием крови или лимфы, упругостью стенки глазного яблока, действием доминантного нерва и т.д. и когда любой из этих факторов нарушается, внутриглазное давление возрастает и развивается глаукома.

Если причиной нарушения является глазная болезнь, например, ирит, повреждение и кровотечение в стекловидном теле, возникшую болезнь называют вторичной глаукомой. Однако глаукома обычного типа относится к первичной глаукоме, нарушения при которой возникают по неизвестным причинам.

Первичную глаукому классифицируют по трем типам: (1) воспалительная глаукома, развитие которой носит острый характер, (2) простая глаукома, развитие которой носит хронический характер, (3) врожденная глаукома.

Для лечения глаукомы до настоящего времени применялись лекарственные средства, основное назначение которых состояло в предотвращении повышения внутриглазного давления или в снижении повышенного внутриглазного давления. Известные к настоящему времени понижающие внутриглазное давление средства включают симпатомиметические лекарственные средства, например эпинефрин, однако эпинефрин с его мидриатической активностью способствует сужению угла при его применении в случае закрытоугольной глаукомы, что может привести к быстрому повышению внутриглазного давления, а часто ведет к повышению кровяного давления и к пигментами конъюнктивы.

Парасимпатомиметические лекарственные средства, например пилокарпин, с их миотической активностью дают ощущение темноты или приводят к нарушению аккомодации поля зрения.

Кроме того, в последние годы β-адренергические блокирующие агенты, например тимолол, за счет своего действия, подавляющего образование внутриглазной жидкости, нашли широкое применение в лечении глаукомы (Drug Therapy Practical Series, The Drug Treatment of Glaucoma, p. 70 75, 1990). Тем не менее, такие b-адренергические блокирующие агенты, для которых обнаружена способность вызывать системные побочные эффекты, например брадикардию, сердечную недостаточность, приступ астмы, не могут быть прописаны больным с указанными симптомами.

Показано, что a₁-адренергические блокирующие агенты промотируют отток внутриглазной жидкости, и гидрохлорид буназозина способен увеличить ток хороидальной крови, что ведет к предположению о возможности создания нового лечебного средства против глаукомы низкого давления (Journal of Japanese Society of Ophtalmology т. 42, с. 710 714, 1991). Таким образом, считается, что такие лекарственные вещества найдут применение в лечении глаукомы, но с неизбежными конъюнктивальной гиперимией и миозом вследствие сосудорасширяющей активности таких веществ.

В отличие от вышеописанных агентов β-адренергические стимуляторы, как ожидается, могут быть прописаны больным глаукомой, однако обычные b-адренергические стимуляторы, например сальбутамол, не показали удовлетворительной активности, если только не применялись в высоких концентрациях, что приводило впоследствии к заметной конъюнктивальной гиперемии с невозможностью непрерывного введения.

Как показано выше, реально не обнаружено удовлетворительных лекарственных средств для лечения глаукомы, характеризующихся отсутствием вышеупомянутых побочных эффектов, стабильностью и эффективностью в низких концентрациях.

В последние годы появились сообщения о том, что производные фенилэтаноламина или их соли, в том числе 5-/1-гидрокси-2-/2-(20-метоксифенокси)этиламино/этил/-2- метилбензолсульфонамида гидрохлорид (далее называется гидрохлоридом амосулалола), проявляют как a-адренергическую, так и b-адренергическую блокирующую активность, и эффективны в качестве гипертензивных средств и при лечении стенокардии (выкладка заявка Японии N 95544/1979).

Вышеуказанные соединения, проявляющие как a-адренергическую, так и b-адренергическую блокирующую активность, как сообщается, не дают побочных эффектов, возникающих при совместном применении a-адренергических и b-адренергических блокирующих агентов, вследствие чего будут эффективны в качестве a,β-блокирующих агентов, особенно в качестве активных компонентов в антигипертензивных средствах, средствах лечения стенокардии, антиаритмических средств и т.д. (выкладка заявки Японии N 73610/1980).

Авторами изобретения велись непрерывные интенсивные исследования с целью обнаружения лекарственного вещества, характеризующегося полным отсутствием недостатков (побочных эффектов), присущих вышеупомянутым обычным лекарственным средствам, и обладающего совместным механизмом действия в подавлении образования внутриглазной жидкости и промотирования оттока внутриглазной жидкости с проявлением в результате активности в понижении внутриглазного давления в низких концентрациях. В результате создатели изобретения обнаружили, что гидрохлорид амосулалола, описанный в указанной публикации патента Японии, способен проявлять неожиданно высокую активность в снижении внутриглазного давления с незначительными побочными эффектами, наблюдаемыми в случае обычных лекарственных средств, с одновременной стабильностью и эффективностью в низких концентрациях.

Цель изобретения состоит в создании фармацевтического препарата для лечения глаукомы, характеризующегося отсутствием вышеуказанных недостатков (побочных эффектов), стабильностью и высокой активностью в низких концентрациях снижения внутриглазного давления.

Более конкретно, изобретение относится к новому фармацевтическому препарату, предназначенному для лечения глаукомы и содержащему в качестве активного компонента 5-/1-гидрокси-2-/2-(2-метоксифенокси)этиламино/этил-2- метилбензолсульфонамид (далее называется "амосулалол") формулы или его кислую соль. Кислые соли включают, например, соли с неорганическими кислотами, такие как гидрохлорид и сульфат, и соли с органическими кислотами, такие как малеат, тартрат и цитрат, из которых рекомендуется гидрохлорид (т.е. гидрохлорид амосулалола).

Физико-химические свойства амосулалола или его гидрохлорида, применяемые в качестве активного соединения в средстве лечения глаукомы настоящего изобретения, и способ их получения приведены, например, в указанной выкладке заявки Японии N 95544/1979.

Композиция для лечения глаукомы по изобретения, как станет очевидно из приведенных ниже примеров испытаний, проявляет повышенную активность при низких концентрациях в снижении внутриглазного давления при одновременной пониженной токсичности и сохранении стабильности. Соответственно композиция для лечения глаукомы может быть использована в качестве эффективного лекарственного средства в лечении глаукомы различных типов.

При использовании амосулалола или его гидрохлорида в виде фармацевтической композиции для лечения глаукомы указанный активный компонент может быть смешан с известными фармакологически приемлемыми носителями, наполнителями, разбавителями и т. д. с получением препаратов для парентерального введения, например в виде глазных растворов, глазных мазей и инъектируемых растворов, а также в виде препаратов для перорального приема, например таблеток, капсул и гранул.

В случае применения композиции по изобретению для лечения глаукомы в виде глазного раствора в состав раствора могут быть введены, например, буферные системы, тонизаторы, консерванты, способствующие растворению вспомогательные вещества (стабилизаторы), регуляторы pH, загустители, образующие хелат соединения и другие обычные добавки.

Из указанных добавок буферные системы включают, например, фосфатные, боратные, цитратные, тартратные, ацетатные буферные системы и аминокислоты.

В качестве тонизаторов могут быть указаны, например. сахара, такие как маннит, сорбит и глюкоза, многоатомные спирты, такие как глицерин, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль, и соли, такие как хлорид натрия.

Примеры консервантов включают хлорид бензалькония, хлорид бензтония, эфиры п-гидроксибензойной кислоты, например метил и этил-гидроксибензоаты, бензиловый спирт, фенэтиловый спирт, сорбиновую кислоту или ее соли, тимерозаль и хлорбутанол.

В качестве вспомогательных стабилизаторов могут быть упомянуты, например, циклодекстрины и их производные, водорастворимые полимеры, такие как поливинилпирролидон, поверхностно-активные вещества и т.д. из которых рекомендуется применение поливинилпирролидона и циклодекстрина.

Регуляторы pH включают, например, хлористоводородную кислоту, уксусную кислоту, фосфорную кислоту, гидроксид натрия, гидроксид аммония и гидроксид калия.

Примеры загустителей включают гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу и их соли.

В качестве образующих хелат соединений могут быть указаны, например, адеат натрия, цитрат натрия и конденсированные фосфаты натрия.

В случае, если фармацевтическая композиция по изобретению для лечения глаукомы применяется в виде глазной мази, основой такой мази может служить очищенный ланолин, вазелин, пластоснова, жидкий парафин, полиэтиленгликоль и т.д.

Кроме того, композиция для лечения глаукомы по изобретению может быть использована в виде препаратов для перорального приема, например таблеток, капсул или гранул, а также в виде инъектируемых растворов.

Предложенная композиция для лечения глаукомы применяется в различных дозах, зависящих от пути введения, симптомов, возраста и веса больного и т. д. и при использовании препарата в виде глазного раствора при лечении взрослого больного желательно применять, например, глазной раствор, содержащий в качестве активного компонента амосулалол или его соль в концентрации 0,001-5 мас./об. предпочтительно 0,05 1 мас./об. один-четыре раза в день от одной до нескольких капель каждый раз.

В случае, если предложенную композицию применяют в виде глазной мази, желательно применение глазной мази, содержащей активный компонент в интервале 0,001 10 мас./мас. предпочтительно 0,05 1 мас./мас. один-четыре раза в день в зависимости от тяжести симптомов.

Композиция для лечения глаукомы по изобретению может быть смешана с одним или не менее чем с двумя другими препаратами для лечения глаукомы, если это не противоречит целям изобретения.

Композиция для лечения глаукомы может включать другие компоненты с активностью, отличной от активности композиции для лечения глаукомы, если это не противоречит целям изобретения.

Другой аспект изобретения относится к фармацевтической композиции для лечения глаукомы, содержащей гидрохлорид амосулалола и поливинилпирролидон или α-циклодекстрин. Гидрохлорид амосулалола в виде раствора устойчив к действию тепла и света, но при охлаждении раствор замерзает и даже после обратного нагревания до комнатной температуры образовавшиеся при замораживании кристаллы не так легко растворяются. Таким образом, возникает проблема употребления раствора после его хранения в холодном месте.

Создатели изобретения в поисках фармацевтической композиции, не имеющей указанного недостатка, обнаружили, что добавлением к раствору амосулалола поливинилпирролидона или a -циклодекстрина раствор может быть использован без оставшихся кристаллов.

В данном аспекте изобретения в состав глазных растворов также могут быть введены обычные вышеупомянутые буферные системы, тонизаторы, консерванты, способствующие растворению вспомогательные вещества (стабилизаторы), регуляторы pH, загустители, образующие хелат соединения и иные добавки, не оказывающие нежелательного воздействия на композицию изобретения.

Ниже приводятся примеры и примеры испытаний, более подробно раскрывающие настоящее изобретение и разъясняющие его преимущества. Приведенные примеры даются лишь в иллюстративных целях, и их и не следует понимать как ограничивающие объем изобретения.

Пример 1. Глазной раствор.

Глазной раствор получают на основе следующего состава, г: Гидрохлорид амосулалола 0,05 Маннит 5,00 Дигидрофосфат натрия 0,10г Метил-п-гидроксибензоат 0,02 Пропил-п-гидроксибензоат 0,01г Разбавленная соляная кислота Необходимое количество (pH 6) Перечисленные компоненты смешивают в стерильной очищенной воде до полного объема 100 мл.

Пример 2. Глазной раствор.

Глазной раствор получают на основе следующего состава,г:
Гидрохлорид амосулалола 0,10
Борная кислота 2,00
Хлорид бензалькония 0,005
Гидроксид натрия Необходимое количество (pH 6)
Перечисленные компоненты смешивают в стерильной очищенной воде до полного объема 100 мл.

Пример 3. Глазной раствор.

Глазной раствор получают на основе следующего состава, г:
Гидрохлорид амосулалола 0,25
Конц. глицерин 2,6
Ацетат натрия 0,1
a-Циклодекстрин 0,1
Метил-п-гидроксибензоат 0,02
Пропил-п-гидроксибензоат 0,01
Разбавленная соляная кислота Необходимое количество (pH 4,5)
Перечисленные компоненты смешивают в стерильной очищенной воде до полного объема 100 мл.

Пример 4. Глазной раствор.

Глазной раствор получают на основе следующего состава, г:
Гидрохлорид амосулалола 0,5
Конц. глицерин 2,6
Ацетат натрия 0,1
Хлорид бензалькония 0,005
Разбавленная соляная кислота Необходимое количество (pH 5,5)
Перечисленные компоненты смешивают в стерильной очищенной воде до полного объема 100 мл.

Пример 5. Глазной раствор.

Глазной раствор получают на основе следующего состава, г:
Гидрохлорид амосулалола 0,5
Конц. глицерин 2,6
Ацетат натрия 0,1
Поливинилпирролидон 0,5
Хлорид бензалькония 0,005
Разбавленная соляная кислота Необходимое количество (pH 5)
Перечисленные компоненты смешивают со стерильной очищенной водой до полного объема 100 мл.

Пример 6. Глазной раствор.

Глазной раствор получают на основе следующего состава, г:
Гидрохлорид амосулалола 1
Конц. глицерин 2,6
Моногидрофосфат натрия 0,1
Поливинилпирролидон 1
Эдеат натрия 0,05
Хлорид бензалькония 0,005
Гидроксид натрия Необходимое количество (pH 4)
Перечисленные компоненты смешивают со стерильной очищенной водой до полного объема 100 мл.

Пример 7. Глазная мазь.

Глазную мазь получают на основе следующего состава, г:
Гидрохлорид амосулалола 1
Жидкий парафин 1
Белый вазелин Необходимое количество
Полное количество 100
Пример 8. Глазная мазь.

Глазную мазь получают на основе следующего состава, г:
Гидрохлорид амосулалола 0,5
Жидкий парафин 1
Белый вазелин Необходимое количество
Полное количество 100
Примеры испытаний.

Пример испытаний 1. Активность гидрохлорида амосулалола в снижении внутриглазного давления на окрашенных кроликах с нормальным внутриглазным давлением.

Самцов окрашенных кроликов (Датской породы с белой полосой в средней части туловища) весом около 2 кг после подтверждения отсутствия у них глазных нарушений выращивают в крольчатнике, в котором поддерживается температура 24±4^oC и относительная влажность 55±15% Кролики получают твердую пищу (Лабо RG-RO производства Нихон Нохсан Когайо К.К.) в количестве 100 г в день на кролика при свободном доступе к водопроводной воде в качестве воды для питья.

В качестве испытуемого лекарственного средства в испытании применяют 0,05% (далее обозначение "%" соответствует термину "мас./об.") и 1%-ные водные растворы, а в качестве положительного контрольного лекарственного средства и контрольного вещества применяют соответственно 0,5%-ный глазной раствор малеата тимолола (Тимоптор зарегистрированное фирменное название, Бан-ю фармасьютикал Ко.) и физиологический солевой раствор.

(1) Измерение внутриглазного давления.

Тридцать два (32) кролика разбивают на четыре группы, каждая из которых включает 8 животных, и в один глаз каждого отдельного кролика вводят местно 1 мкл испытуемого лекарственного средства, а также контрольного лекарственного средства и физиологического солевого раствора, при этом второй глаз не трогают. Перед инстилляцией и 0,5, 1, 2, 3, 4, 6 и 8 ч введения местно измеряют внутриглазное давление для обеих глаз кролика. Измерения проводят с помощью пневматонографа производства Алькон Ко. (далее сокращенно "ПТГ").

Местное введение 1% -ного водного раствора гидрохлорида амосулалола приводит к заметному понижению внутриглазного давления, отмеченному через 30 мин после инстилляции и до 6 ч, причем максимум падения внутриглазного давления 9 мм Hg падает на 3 ч после инстилляции. Местное введение 0,05%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола дает максимум падения внутриглазного давления 3,6 мм Hg спустя 2 ч после инстилляции.

Инстилляция 0,5-ного глазного раствора малеата тимолола, применяемого в качестве положительного контрольного лекарственного средства, приводит лишь к незначительному падению внутриглазного давления в 2,4 мм Hg спустя 30 мин и 1 ч после инстилляции.

(2) Измерение диаметра зрачка.

У каждого кролика, используемого в вышеприведенном испытании раздела (1), микрометром-кронциркулем измеряют диаметр зрачка каждого глаза до инстилляции и 0,5,1, 2, 3, 4 и 6 ч после введения местно соответственно отдельных лекарственных средств и физиологического солевого раствора. Измерение диаметра зрачка, проведенное для глаз, обработанных каждым испытуемым лекарственным препаратом, показало отклонения в пределах обычного интервала без значительного изменения диаметра зрачка в обеих группах. Это может служить подтверждением того, что гидрохлорид амосулалола не оказывает какого-либо действия на диаметр зрачка.

Пример испытаний 2. Активность гидрохлорида амосулалола в снижении внутриглазного давления на окрашенных кроликах с нормальным внутриглазным давлением.

Сорок (40) самцов окрашенных кроликов (Датская порода с белой полосой в средней части туловища) весом около 2 кг, для которых установлено отсутствие глазных нарушений, выращивают в крольчатнике, где поддерживается температура 24±4^oC и относительная влажность 55±15% Кролики получают твердую пищу (Лабо RG-RO, производства Нихон Нохсан Когайо К.К.) в количестве 100 г в день на кролика при свободном доступе к водопроводной воде в качестве питьевой воды.

В качестве испытуемого лекарственного препарата готовят 0,05, 0,5 и 1% -ные водные растворы гидрохлорида амосулалола, а в качестве положительного контрольного лекарственного препарат и в качестве контрольного вещества в испытании применяют соответственно 0,5%-ный глазной раствор малеата тимолола (Тимоптол зарегистрированное фирменное назазвание, Бан-ю Фармасьютикал Ко.) и физиологический солевой раствор.

(1) Измерение внутриглазного давления.

Сорок (40) кроликов разбивают на пять групп, каждая из которых включает 8 животных, и в один глаз каждого отдельного кролика вносят местно 50 мкл испытуемого лекарственного средства, а также контрольного лекарственного препарата и физиологического солевого раствора, при этом второй глаз не трогают. Перед инстилляцией и 0,5, 1, 2, 3, 4, 6 и 8 ч после местной обработки с помощью ПТГ измеряют внутриглазное давление для обоих глаз каждого кролика.

Введение местно 1%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола дает заметное снижение внутриглазного давления, отмечаемое спустя 30 мин после инстилляции и до 6 ч, причем максимум снижения внутриглазного давления в 9 мм Hg наблюдается через 3 ч после инстилляции. Применение 0,5%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола приводит к значительному падению внутриглазного давления в интервале от 30 мин до 4 ч после введения местно, максимальное уменьшение внутриглазного давления в 6,2 мм Hg возникает 2 ч спустя после введения местно. Применение 0,05%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола дает максимум падения внутриглазного давления, соответствующего 3,6 мм Hg, через 2 ч после инстилляции.

Инстилляция глазного раствора малеата тимолола, применяемого в качестве положительного контроля лекарственного средства, дает лишь незначительное падение внутриглазного давления не более чем в 2,4 мм Hg соответственно через 30 мин и 1 ч после введения местно.

Никаких заметных изменений внутриглазного давления в другом глазе не отмечено в группах, обработанных соответствующими лекарственными средствами, что может служить подтверждением того, что гидрохлорид амосулалола никоим образом не влияет на другой необработанный глаз.

(2) Измерение диаметра зрачка.

У каждого кролика, используемого в испытании раздела (1), микрометром-кронциркулем измеряют диаметр зрачка каждого глаза перед инстилляцией и спустя 0,5, 1, 2, 3, 4 и 6 ч после введения местно соответствующих лекарственных средств и физиологического солевого раствора соответственно.

Измерением диаметра зрачка в группах, обработанных каждым испытуемым лекарственным средством, выявлены отклонения в пределах обычного интервала без значительного изменения диаметра зрачка, отмеченного в обеих группах. Это может служить подтверждением того, что гидрохлорид амосулалола не оказывает какого-либо влияния на диаметр зрачка.

Вышеприведенные результаты показывают, что гидрохлорид амосулалола проявляет значительную активность в снижении внутриглазного давления на нормальных глазах окрашенных кроликов и в низких концентрациях, не превышающих 0,05% развивает более заметную активность в снижении внутриглазного давления, чем 0,5%-ный глазной раствор малеата тимолола. Показано также, что гидрохлорид амосулалола, не влияющий на диаметр зрачка и в концентрациях менее 0,5% вызывающий лишь в незначительной степени гиперемию конъюнктивы, будет клинически безопасным лекарственным средством.

Пример испытаний 3. Активность гидрохлорида амосулалола в снижении внутриглазного давления при его последовательном применении в течение 5 дней на окрашенных кроликах с нормальным внутриглазным давлением.

Восемь (8) самцов окрашенных кроликов весом около 2 кг после подтверждения отсутствия у них глазных нарушений выращивают в крольчатнике, где поддерживается температура 24±4^oC и относительная влажность 55±15% Кролики получают твердый корм (Лабо RG-RO, производство Нихон Нохсан Когайо К.К.) в ежедневном рационе по 100 г на кролика и при свободном доступе к водопроводной воде в качестве воды для питья.

Каждому из 8 окрашенных кроликов, вскармливаемых по вышеприведенной методике, в один глаз вносят 50 мкл 0,5%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола, а в другой глаз вводят местно 50 мкл физиологического солевого раствора. Внутриглазное давление измеряют перед первой инстилляцией и через равные промежутки времени в 1 ч вплоть до 8 ч после инстилляций на 1-й и 5-й день и перед первой инстилляцией и 2 или 3 ч после нее на 2-й, 3-й и 4-й день соответственно, и внутриглазное давление измеряют дополнительно 24 ч спустя после первой инстилляции на 5-й день.

Максимальное падение внутриглазного давления 4,8 мм Hg отмечается через 2 ч после первой инстилляции на 1-й день; вторая инстилляция, проведенная через 4 ч, как найдено, не приводит к дальнейшему понижению внутриглазного давления, но впоследствии ведет к значительному падению внутриглазного давления, при этом внутриглазное давление, как найдено, через 24 ч возвращается к исходной величине. На 2-й день значительное уменьшение внутриглазного давления, как и 1-й день, наблюдается через 2 ч после инстилляции, в то время как на 3-й день никакого значительного падения внутриглазного давления не отмечено. Однако значительное уменьшение внутриглазного давления отмечено также на 4-й день и в любой момент измерения на 5-й день, при этом наблюдается почти такая же степень снижения внутриглазного давления, что и на 1-й день.

Вышеприведенные результаты показывают, что 0,5%-ный раствор гидрохлорида амосулалола при введении последовательно в глаза окрашенных домашних кроликов трижды в день в течение 5 дней понижает внутриглазное давление почти в одинаковой степени в любой день применения лекарственного средства, что может служить подтверждением отсутствия для гидрохлорида амосулалола тахифилаксии.

Пример испытания 4. Активность 0,5%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола в понижении внутриглазного давления на белых кроликах с индуцированным водной нагрузкой повышенным внутриглазным давлением.

В один глаз каждого из 5 самцов белых кроликов весом около 2 кг, служащих подопытными животными, вносят 50 мкл 0,5%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола, а во другой глаз вводят 50 мкл физиологического солевого раствора и через 30 мин с помощью перорального зонда вводят питьевую воду (60 мл/кг, 37^oC). Внутриглазное давление измеряют для обоих глаз применением ПТГ перед инстилляцией, а также после водного вливания и 0,5, 1, 2 и 4 ч после него.

Внутриглазное давление глаза, обработанного физиологическим солевым раствором, возрастает на 8,7 мм Hg через 30 мин после вливания и спустя 2 ч возвращается к исходному уровню. Напротив, в случае применения 0,5%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола внутриглазное давление увеличивается на 3,4 мм Hg через 30 мин после водного вливания, на основании чего сделан вывод о значительном снижении повышения внутриглазного давления 0,5% -ным водным раствором амосулалола по сравнению с физиологическим солевым раствором.

Пример испытания 5. Активность 0,5%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола в снижении внутриглазного давления на окрашенных кроликах с индуцированным лазерным излучением повышенным внутриглазным давлением.

В один глаз 5 самцов окрашенных кроликов весом около 2 кг, используемых в качестве подопытных животных, вводят 50 мкл 0,5%-ного водного раствора гидрохлорида амосулалола, а в другой глаз вводят 50 мкл физиологического солевого раствора. Через 30 мин лазерным лучом облучают 6 различных участков радужки (размер участка 200 мкм, мощность 0,5 В, длительность 0,1 с) обоих глаз таким образом, что участки располагаются на равном расстоянии. С помощью ПТГ измеряют внутриглазное давление в обоих глазах до инстилляции, а также перед лазерным облучением и спустя 15, 30 и 45 мин после облучения.

Внутриглазное давление в группе, обработанной физиологическим солевым раствором, повышается на 7,9 мм Hg примерно через 15 мин после облучения лазером и возвращается до исходного уровня 45 мин спустя, в то время как 0,5% -ный водный раствор гидрохлорида амосулалола снижает внутриглазное давление на 4,5 мм Hg через 30 мин после инстилляции (т.е. непосредственно перед облучением лазером), но давление повышается почти до того же уровня, что и перед инстилляцией, на основании чего можно сделать вывод о том, что 0,5%-ный водный раствор гидрохлорида амосулалола проявляет активность, подавляющую повышение внутриглазного давления.

Вышеприведенные результаты показывают, что амосулалол не только проявляет заметную активность в снижении нормального внутриглазного давления у кроликов, но также проявляет прекрасную активность против повышения у кроликов внутриглазного давления, индуцированного водной нагрузкой и облучением лазером.

Пример испытания 6. Исследования приготовления из гидрохлорида амосулалола глазного раствора. Опыты с замораживанием-оттаиванием (выявление стабилизатора для глазного раствора гидрохлорида амосулалола).

Найдено, что гидрохлорид амосулалола, приготовленный в виде водного раствора, сохраняет стабильность к действию тепла и света. Однако при проведении с 0,5%-ным водным раствором гидрохлорида амосулалола (pH 5,5) опытов с замораживанием-оттаиванием кристаллы, образовавшиеся в однажды замороженном растворе, не растворяются даже при выдерживании раствора при комнатной температуре.

В связи с этим проведены исследования, направленные на поиск стабилизатора, предназначенного для использования в случае замораживания.

Водный раствор гидрохлорида амосулалола (0,5%-ный, pH 5,5) после смешивания с каждым из приведенных в табл. 1 стабилизаторов (N 1-5) заливают в стеклянные ампулы емкостью 5 мл, замораживают до -30^oC и оставляют при комнатной температуре с последующим осмотром на присутствие в растворе кристаллов.

Результаты опытов приведены в табл. 2. Из приведенных в табл. 2 результатов видно, что эффективными стабилизаторами являются поливинилпирролидон К-30 (стабилизатор N 2) и a -циклодекстрин (стабилизатор N 4). Соответственно рекомендуется применять поливинилпирролидон и a -циклодекстрин в качестве стабилизаторов для гидрохлорида амосулалола.

В табл. 2 знаком "+" обозначено осаждение кристаллов; знак "-" означает отсутствие осаждения кристаллов.

Пример испытания 7. Токсичность гидрохлорида амосулалола.

(1) Испытание острой токсичности гидрохлорида амосулалола на мышах.

Исследования острой токсичности гидрохлорида амосулалола проведено на мышах при пероральном или внутривенном введении.

Мышам линии 1CR в возрасте 7 недель вводят амосулалол перорально с помощью перорального зонда или через вену хвоста. Определенные в результате значения 50%-ной летальной дозы (ЛД₅₀) составляют 6500 мг/кг (самцы) и 5700 мг/кг (самки) при пероральном введении 104 мг/кг (самцы) и 134 мг/кг (самки) при введении внутривенно.

(2) Испытание глазной локальной токсичности на кроликах для 1% и 0,5%-ных глазных растворов гидрохлорида амосулалола последовательными инстилляциями в течение 28 дней.

Пятнадцати (15) самцам японских белых кроликов, разбитых на 3 группы, каждая из которых включает 5 животных, в правый глаз закапывают 1 каплю (0,05 мл) в один раз 1% и 0,5%-ные глазные растворы гидрохлорида амосулалола, а также физиологического солевого раствора в качестве контроля, при этом левый глаз не трогают. Закапывание проводят четыре раза в день через равные промежутки времени в 2,5 ч.

Наблюдения проводят по следующим позициям (a) (f):
(a) Общее состояние.

Осмотр общего состояния проводят на мышах раз в неделю.

(b) Измерения веса тела.

Вес тела измеряют раз в неделю.

(c) Визуальный осмотр переднего сегмента глаза.

На основе нижеприведенного критерия оценки повреждения глаза (Gendai no Rinsho (Современная клиника), т. 4, N 4, с. 227 289, 1970) предложена цифровая шкала для 1%-ных и 0,5%-ных глазных растворов гидрохлорида амосулалола перед инстилляцией, а также в день начала (1-й день) инстилляции и на 2, 4, 7, 14, 21 и 28-й день после начала инстилляции, но каждый раз по окончании инстилляции и утром последней инстилляции (29-й день). При ссылке на результаты цифровой шкалы цифровую оценку не менее чем в1 при определении по любой из позиций следует считать как "вредной для глаза", в то время как цифровые оценки 0 и 0,5 рассматриваются, как "невредные для глаза".

Критерий оценки повреждений глаза.

Роговица.

A) Степень помутнения.

Отсутствие помутнения (норма) 0
Рассеивающие или диффузивные области (подробности радужки четко различимы) 1
Легко различимые просвечивающие области, подробности радужки слегка невидимы 2
Опалесцентные области, никаких подробностей радужки не видно, размер зрачка едва различим 3
Помутнение, радужка невидима 4
B) Область помутнения.

Одна четверть (или меньше), но не 0 1
Больше одной четверти, но меньше половины 2
Больше половины, но меньше трех четвертей 3
Больше трех четвертей, вплоть до всей области 4
Радужка.

Оценка:
Норма 0
Складки выше нормы, застой, набухание, гиперемия по окружности роговицы (что-то одно или в комбинации), радужка реагирует на счет (замедленная реакция считается положительной) 1
Отсутствие реакции на свет, кровотечение, общее разрушение (что одно или все вместе) 2
Конъюнктива.

A) Покраснение пальпебральной конъюнктивы.

Отсутствие гипереми 0
Слизистая очень слабо окрашена в красный цвет, небольшое расширение сосудов в пальпебральной границе 0,5
Очевидная гиперемия, превышающая норму, слизистая более явно окрашена красным, заметное набухание 1
Слизистая очень заметно окрашена красным, несколько неразличимые периферийные сосуды 2
Рассеянная красная окраска цвета мяса (большей тяжести, чем при 2).

B) Отек конъюнктивы век.

Отсутствие набухания 0
Небольшая эдематозная тенденция 0,5
Набухание выше нормы 1
Очевидное набухание с частичным выворотом века 2
Набухание с закрыванием наполовину века 3
Набухание с веками, закрытыми примерно наполовину и до полностью закрытых век 4
C) Покраснение конъюнктивы глазного яблока.

Отсутствие гиперемии 0
Небольшое расширение сосудов окружности роговицы 0,5
Более заметное расширение сосудов 1
Заметное расширение сосудов, в направлении к пальцебральной границе сосудов заметное окрашивание в красное 2
D) Третье веко.

Отсутствие гиперемии 0
Тенденция к расширению сосудов и отеку 0,5
Более заметное расширение сосудов, пальпебральный край окрашен в красное
1
Очень заметное расширение сосудов, все третье веко окрашено в красное 2
E) Выделения.

Отсутствие выделений 0
Любые количества, отличные от нормы (не включают небольшие количества, наблюдаемые в углу глазной щели) 1
Выделения с увлажнением век и волос, непоредственно примыкающих к векам
2
Выделения с увлажнением век и волос и значительной области вокруг глаза
3
В табл. 3 и 4 приведены результаты визуального осмотра передней части глаза, охарактеризованные выше под позицией (c) и полученные применением 1% -ных и 0,5%-ных глазных растворов гидрохлорида амосулалола, где каждая проведенная величина является средним значением для 5 случаев.

В табл. 3 и 4 цифровая оценка роговицы относится к величине, полученной умножением величины раздела (A) помутнение на (B) размер домена роговицы, определенный в соответствии с вышеизложенным. Обе величины даются выше в "Критерии для оценки повреждения глаза".

(o) Осмотр окрашенных флуоресцином участков роговицы.

Перед инстилляцией 1% -ного и 0,5%-ного глазных растворов гидрохлорида амосулалола, а также в день начала (1-й день) инстилляции и на 2, 4, 7, 14, 21 и 28-й день после начала инстилляции, но каждый раз по окончании инстилляции и в утро последней инстилляции (29-й день) в глаза каждого подопытного животного вносят местно 10 мкл 0,1%-ного водного раствора флуоресцина, после чего проводят осмотр эпителиальных клеток роговицы на наличие царапин. Осмотр осуществляют с помощью фотощелевой лампы.

(e) Исследование с помощью сканирующего электронного микроскопа эпителиальных и эндотелиальных клеток роговицы.

По окончании инстилляции 1%-ного и 0,5%-ного глазных растворов гидрохлорида амосулалола проводят морфологическую оценку эпителиальных и эндотелиальных клеток 3 глаз в каждой из двух групп.

(f) Исследование с помощью оптического микроскопа сагиттальной части глазного яблока.

По окончании инстилляции 1%-ного и 0,5%-ного глазных растворов гидрохлорида амосулалола готовят образцы для оптической микроскопии, каждый из которых включает сагиттальную часть глазного яблока из 2 глаз каждой из двух групп, с целью проведения исследований под микроскопом века, конъюнктивы, роговицы, переднего сегмента, радужки, кристаллических линз стекловидного тела, ретинохороидной перепонки, склеры и глазного нерва. В результате не обнаружено никаких отклонений в (a) общем состоянии и (b) при определении массы тела как при использовании 1%-ного, так и 0,5%-ного глазного раствора гидрохлорида амосулалола; (c) визуальным осмотром переднего сегмента глаза не выявлено никаких отклонений в обеих группах, отдельно обработанных 1%-ным и 0,5% -ным глазными растворами гидрохлорида амосулалола, о чем свидетельствуют данные, приведенные в табл. 3 и 4; и кроме того, (d) осмотр окрашенных флуоресцином участков роговицы; (e) исследования с помощью сканирующего электронного микроскопа эпителиальных и эндотелиальных клеток роговицы и (f) исследование с помощью оптического микроскопа сагиттальной части глазного яблока не выявили никаких отклонений как при использовании 1%-ного, так и при использовании 0,5%-ного глазного раствора гидрохлорида амосулалола.

Вышеприведенные результаты разнообразных испытаний позволяют сделать вывод о том, что гидрохлорид амосулалола при его использовании для лечения глаукомы в виде глазного раствора характеризуется отсутствием побочных эффектов, например раздражения глаза, т.е. может служит чрезвычайно безопасным лекарственным средством.

Предложенное средство для лечения глаукомы в низких концентрациях отличается прекрасной активностью в снижении внутриглазного давления и характеризуется низкой токсичностью и безопасностью, т.е. может быть с успехом использовано в качестве лечебного средства при глаукоме различного типа.

Формула изобретения

1. Фармацевтическая композиция для лечения глаукомы, включающая действующее средство и носитель, отличающаяся тем, что в качестве действующего средства она содержит 5-(1-гидрокси-2-) -2-(2-метоксифенокси)-этиламино(этил)-2-метилбензолсульфонамид или его кислую соль в эффективном количестве.

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит поливинилпирролидон или α- циклодекстрин.

3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она представлена глазным раствором.

4. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она представлена глазной мазью.

РИСУНКИ

Рисунок 1