Штамм bacillus polymyxa - продуцент антибиотика полимиксина

 

Изобретение относится к биотехнологии. Штамм Bacillus polymyxa 1938 ГНЦА-ВНИИА N 2158 продуцирует антибиотик полимиксин M, применяемый в медицине и ветеринарии для лечения инфекционных заболеваний. Штамм получен путем ступенчатой селекции культуры Bacillus polymyxa АТСС 10401 под воздействием различных мутагенов. Штамм является высокопродуктивным продуцентом, способным образовывать до 25 тыс. ед./мл полимиксина М. 1 табл.

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается штамма - продуцента антибиотика полимиксина M, который может использоваться в медицине и ветеринарии для лечения инфекционных заболеваний.

Известен штамм Bacillus polymyxa Ross, образующий 6400 ед./мл полимиксина M (прототип). Недостатком данного штамма является низкая продуктивность.

Целью изобретения является получение высокопродуктивного штамма, образующего антибиотик полимиксин M.

Указанная цель достигается штаммом Bacillus polymyxa 1938, который был получен путем ступенчатой селекции культуры Bacillus polymyxa АТСС 10401 (Коллекция культур микроорганизмов ГНЦА-ВНИИА) под воздействием различных мутагенов. Предлагаемый штамм при культивировании на специально подобранной среде образует 25000 ед./мл полимиксина M. С помощью тонкослойной хроматографии в системе растворителей н-бутанол:пиридин:уксусная кислота:вода 15:10: 3:12 образуемый предлагаемым штаммом антибиотик был идентифицирован как полимиксин M. Методом бумажной хроматографии продуктов гидролиза антибиотического вещества, продуцируемого штаммом, в нем было определено наличие 1 остатка D-лейцина, 3 остатков L-треонина и 6 остатков α, γ -диаминомасляной кислоты. Указанное соотношение остатков аминокислот подтверждает, что накапливаемый штаммом Bacillus polymyxa 1938 антибиотик является полимиксином M.

Штамм Bacillus polymyxa 1938 хранится в коллекции культур микроорганизмов ГНЦА-ВНИИА под номером 2158. Культурально-морфологические и физиолого-биохимические характеристики предлагаемого штамма и штамма-прототипа представлены в таблице.

Сопоставление признаков предлагаемого штамма и штамма-прототипа подтверждает их отличие по культурально-морфологическим и физиологическим свойствам. Особенно важно, что предлагаемый штамм продуцирует 25000 ед./мл полимиксина M.

Получение полимиксина M с помощью Bac. polymyxa 1938 на специально разработанной среде иллюстрируется следующим примером.

Пример. Состав посевной и ферментационной среды, г/л: мука пшеничная 50,0; NH₄SO₄ 4,0; KH₂PO₄ 0,3; NaCl 1,0; кукурузный экстракт (по сырой массе) 1,0; мел 0,8; остальное - вода водопроводная; pH 7,0 Агаровым блоком культуры штамма Bacillus polymyxa 1938 засевают посевную среду. Выращивание инокулума проводят в колбах объемом 750 мл с объемом среды 50 мл на встряхивателе при 220-240 об/мин в течение 18-24 ч. Выращенную культуру в количестве 2-3% по объему засевают в ферментационную среду и также проводят при 28 ± 1^oC ферментацию в течение 48 ч.

В данных условиях штамм Bacillus polymyxa 1938 продуцирует 25000 ед/мл полимиксина M в культуральной жидкости.

Формула изобретения

Штамм Bacillus polymyxa 1938 (ГНЦА-ВНИИА N 2158) - продуцент антибиотика полимиксина М.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2