Штамм pseudomonas species 78г, предназначенный для деградации продуктов деструкции фосфорорганических отравляющих веществ

 

Изобретение относится к биотехнологии, в частности микробиологической очистке окружающей среды от продуктов деструкции ФОВ (продуктов деструкции фосфорорганических отравляющих веществ) при различных технологиях их уничтожения. Новый штамм бактерий Pseudomonas sp. 78Г способен активно разлагать широкий спектр продуктов деструкции ФОВ. Штамм непатогенен, хранится и поддерживается на МПА при 5 ± 1^oС. Штамм позволяет эффективно уничтожать остаточные продукты деструкции ФОВ, не нарушая экологического состояния окружающей среды. 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности микробиологической очистке окружающей среды от продуктов деструкции ФОВ, может быть использовано для деградации остаточных количеств продуктов деструкции ФОВ при различных технологиях их уничтожения.

Цель изобретения - получение штамма, способного активно разлагать широкий спектр продуктов деструкции ФОВ. Штамм непатогенен, хранится и поддерживается на МПА при температуре (5±1)^oC с пересевами через 6 мес.

Уровень техники. Изобретение относится к области биотехнологии, в частности микробиологической очистке продуктов деструкции ФОВ при различных технологиях их уничтожения, и представляет собой штамм бактерий, который имеет высокую C-P-лиазную активность и может найти применение для разложения остаточных количеств продуктов деструкции ФОВ, таких как метилфосфоновая кислота, эфиры метилфосфоновой кислоты и другие.

Аналогом изобретения являются штаммы микроорганизмов, предназначенные для деструкции различных ксенобиотиков. Наиболее близок изобретению по совокупности существенных признаков штамм бактерий Bacillus megaterium 501 из коллекции Всесоюзного научно-исследовательского института сельскохозяйственной микробиологии, предназначенный для деструкции фосфорорганических пестицидов [1]. Штамм 501 способен разлагать широкий спектр фосфорорганических пестицидов, но нет сведений о наличии у него C-P-лиазной активности, и отсутствуют данные о возможности его использования для деградации продуктов разложения ФОВ.

Сущность изобретения. Сущность изобретения заключается в получении штамма, обладающего C-P-лиазной активностью и способного активно разлагать широкий спектр продуктов деструкции ФОВ. В качестве такого штамма предлагается штамм Pseudomonas species 78Г из коллекции Центра военно-технических проблем биологической защиты научно-исследовательского института микробиологии Министерства oбороны РФ.

Штамм имеет следующие морфологические и физиолого-биохимические характеристики.

Морфологические признаки. Бактерии представляют собой подвижные палочки с закругленными концами размером 0,7-1,0х3,0-4,0 мкм. Неспорообразующие. Грамотрицательные. Колонии на МПА размером 2-4 мм, круглые, куполообразные, блестящие, серо-белого цвета.

Физиолого-биохимические признаки. Аэроб. Оптимум роста (27,5±2,5)^oC. Пределы роста 5-40^oC. Растет при pH 5,0-8,5. Оптимум pH (7,0±0,2).

Усваивает глюкозу, сахарозу, маннит, кислоты не образует.

Каталазная активность положительная, оксидазная активность отрицательная.

Использует минеральные и органические источники азота. Нитраты не восстанавливает. Индол, аммиак не выделяет. Желатину не разжижает. Маркерных признаков штамм не имеет.

Признаки штамма устойчивы. Штамм непатогенен.

Штамм выделен из лесного серозема Саратовской области. Хранится и поддерживается на мясопептонном агаре при (5±1)^oC с пересевами через 6 мес.

Штамм выращивают на питательной среде следующего состава, г/л: MgSO₄·7H₂O по ГОСТ 4523-77 - 0,20; (NH₄)₂SO₄ по ГОСТ 3769-78 - 2,00; KNO₃ по ГОСТ 4217-77 - 0,50; трис(оксиметил)-аминометан по ТУ 6-09-4992-76 - 6,05; натрий лимоннокислый трехзамещенный по ГОСТ 22280-76 - 10,00; лимонная кислота, 1-водная, по ГОСТ 3652-69 - 0,20; глюкоза по ГОСТ 975-88 - 0,50; вода водопроводная до 1000 мл, pH 7,2±0,05.

Пример. Изучалась деградация продуктов деструкции фосфорорганических отравляющих веществ под действием штамма Pseudomonas species 78Г в лабораторных условиях.

Микроорганизмы выращивали в питательной среде описанного состава в конических колбах объемом 250 см³, заполненных 50 см³ среды, на термостатируемой качалке УВМТ-12-250 при 100 об/мин^-1 и температуре (30±2)^oC в течение суток. Затем переносили в такую же среду, содержащую один из следующих продуктов деструкции ФОВ, г/л: метилфосфоновую кислоту 0,1; диизопропиловый эфир метилфосфоновой кислоты 1,0; пинаколиловый эфир метилфосфоновой кислоты 1,0. Культивировали в течение 7 суток. Концентрацию продуктов деструкции ФОВ определяли газохроматографическим методом и вычисляли степень их разложения.

Результаты опыта представлены в таблице.

Из результатов опыта, представленных в таблице, следует, что штамм Pseudomonas species 78Г весьма активно разлагает исследованные продукты деструкции ФОВ. Степень разложения исследованных продуктов составляет 90% через 7 суток. При этом наблюдается значительное увеличение оптической плотности культуры, что свидетельствует об использовании микроорганизмом изученных продуктов деструкции ФОВ в качестве единственного источника фосфора.

Источники информации 1. Патент 1735359 Россия, кл. C 12 N 1/20, C 02 F 3/34. - Штамм бактерий Bacillus megaterium, предназначенный для деструкции фосфорорганических пестицидов/Е. А. Гаврилова, Т.О. Лисина, Ю.В. Круглов; Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии. - N 4781535/13; Заявл. 11.01.90; Опубл. 23.05.92. -Бюл. N 19.

Формула изобретения

Штамм бактерий Pseudomonas species 78Г (коллекция Центра военно-технических проблем биологической защиты Научно-исследовательского института микробиологии Министерства обороны РФ), предназначенный для деградации продуктов деструкций фосфорорганических отравляющих веществ.

РИСУНКИ

Рисунок 1