Способ иммунокорригирующей терапии заболеваний

 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в терапии, для иммуннокоррекции. Для этого больному вводят препарат протеоселенового комплекса (ПСК), представляющего собой спиртовой раствор, содержащий в 1 мл 3-6 мкг селена. При этом перед введением к препарату ПСК добавляют раствор, содержащий ионы селена и/или кальция. Способ позволяет повысить эффективность терапии и снизить дозу вводимого препарата. 4 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии и может быть использовано в клинической практике для достижения оптимального лечебного эффекта и усиления действия основных лекарственных веществ.

Как известно, иммунная система организма обеспечивает его защитные свойства, в том числе и реактивность, что приводит к защите организма от инфекционных заболеваний, обеспечивает нормальное внутриутробное развитие плода, апоптоз, элиминацию и утилизацию отмирающих тканевых структур, а также играет определенную роль при таких физиологических процессах, как старение (Беклемишев Н. Д. "Иммунопатология и иммунорегуляция". М.: Медицина, 1986, стр. 9-18).

При помощи тканевого и клеточного иммунитета осуществляется регуляция разнообразных процессов, происходящих в тканях и органах тела человека. Благодаря опосредованному влиянию тканевых фагоцитов, гистиоцитов, плазмоцитов и лимфоцитов, а также системы комплемента и антител, осуществляется надзор за регенерацией тканей, выведением продуктов распада и жизнедеятельностью клеток. При этом необходимо отметить, что со стороны иммунной системы происходит жесткий контроль в отношении структур и функций всех тканей и органов человека, в том числе и микроциркуляторной системы.

Проведенные в течение последних десятилетий теоретические и клинические исследования показали тесную связь иммунной и микроциркуляторной систем с жизнеобеспечением различных структур, тканей и функций тела человека. Все большее подтверждение получает концепция стимулирования иммунной системы и микроциркуляции для устранения различных патологических процессов (М.М. Дейл, Т-П.Д. Фан в кн. Руководство по иммунофармакологии. М.: Медицина. 1998. стр. 87-102).

В настоящее время накоплен большой фактический материал, иллюстрирующий снижение активности иммунокомпетентных клеток, их иммунорегуляторных свойств при многих хронических и рецидивирующих заболеваниях. Важную проблему в современной медицине представляют больные с дефектами защитных механизмов. Вторичные иммунодефициты являются результатом утраты организмом иммунокомпетенции при инфекциях, злокачественном росте, массовых потерях белка.

Известно использование в клинической практике для иммунокоррекции как синтетических, так и органических средств природного происхождения. Это, как правило, препараты из экстрактов зобной железы, лимфатических узлов, соединительной ткани и селезенки. К таким препаратам относятся хорошо известные в клинической практике средства, например тимоген, Т-активин, миелопид, тимоптин и т. д. (Машковский М.Д. "Препараты, корригирующие процессы иммунитета" - в кн. "Лекарственные средства, Харьков "Торсинг", т.2, 1997, стр. 199-207).

Неспецифичность воздействия современных препаратов на иммунную систему обусловлена тем, что подобные вещества не обладают синергическим действием на рецепторный аппарат мембран клеток и тканей, что не приводит к оптимальной и адекватной стимуляции лимфоцитарной и гистиоцитарной систем. В то же время принцип сенситизации, то есть адекватного синергичного воздействия вещества на рецепторы мембран и клеток с одновременным синтезом АТФ, является основным в стимуляции жизнедеятельности всех тканей тела человека, в том числе иммунной системы.

В последнее время всеобщее внимание исследователей и клиницистов привлек селен как кофактор Se-зависимой глутатионпероксидазы, негемовый железосеропротеид X и антиканцерогенный фактор (Авцын А.П. и др. 1991).

Эффект селена в организме определяется его участием в функции клеточных мембран и не связан только с антиоксидатной функцией этого микроэлемента, Селен входит в состав субъединицы (27,5 Да) глутатионпероксидазы, форматдегидрогеназы, селенопротеинов Р/57- 58 кДа); 14 кДа селенопротеина, связывающего жирные кислоты; селенопротеина спермы; Se-зависимой 5-дейодиназы 1 типа.

Недостаточность селена вызывает снижение активности селенозависимой дейодиназы в гипофизе, обеспечивающей биотрансформацию T4 в T3. Поскольку в гипофизе есть рецепторы лишь к T3, то при дефиците селена начинает страдать обратная связь, регулирующая продукцию тиреотропного гормона (ТТГ). Гиперпродукция ТТГ при недостаточности селена становится причиной гиперплазии щитовидной железы.

При помощи селена и его соединений в организме осуществляется биосинтез иммуноглобулинов, особенно типа G; происходит коррекция клеточных компонентов иммунитета, возрастает количество хелперов (СД4) и уменьшается количество супрессоров (СД8), в связи с чем нормализуется коэффициент иммунорегуляции. Кроме того, активная роль селена и его органических соединений в осуществлении антиоксидантных процессов приводит к нормализации клеточного дыхания и восстановлению метаболических энергетических процессов.

Так для поддержания функции иммунной системы в качестве микроэлемента селен вводят в комплексы витаминных препаратов, например Центрум (Справочник ВИДАЛЬ "Лекарственные препараты в России", М.: АстраФармСервис, 1997, стр. Б-654). Известны также селеносодержащие препараты, полученные на основе биомассы водорослей (патент GB 2203043, 1988 или патент RU 2096037), обладающие общетонизирующим действием, реализация которого связана с активным воздействием на иммунную систему соединений селена. Однако указанные препараты имеют недостаточно высокое содержание органического селена, а технология их получения сложна и требует длительного времени.

Одним из перспективных методов иммунокоррекции является способ, описанный в патенте RU 2138271, который рассмотрен в качестве ближайшего аналога.

В указанном способе для иммунокоррекции используют протеоселеновый комплекс (ПСК), который вводят в дозе 6-150 мг. ПСК является пептидным селеносодержащим препаратом. Его молекула содержит 15 основных аминокислот, из которых 11,5% принадлежит аланину, 24,0% лейцину, 10,5% пролину, 27% глютаминовой кислоте, и связанный селен, т.е. 1,0 мл ПСК содержит 3-6 мкг селена.

Известный способ является эффективным для коррекции нарушений иммунной системы при различных патологических процессах, обеспечивает энергетическую стимуляцию клеток, нормализацию функции микроциркуляторного русла, что приводит к восстановлению нормальной структуры ткани человека и адекватных метаболических энергетических процессов. Однако, учитывая размер молекулы ПСК (молекулярный вес 3-4 тысячи), ее проникновение через гисто-гематический и гемато-энцефалический барьер ограничено.

Известно, что в клинической фармакологии и медицине большое значение принадлежит фактору проницаемости, то есть проникновению лекарственных препаратов через капилляры микроциркуляторного русла непосредственно в ткани и интерстициальное пространство. Применение разнообразных способов введения лекарственных препаратов - перорального, внутримышечного или внутривенного должно сопровождаться трансэндотелиальным поступлением препарата непосредственно в ткань, где происходит взаимодействие вещества с различными тканевыми иммунными элементами. В смысле достижения клинического эффекта усиление проницаемости капилляров является важным для уменьшения или устранения патологического процесса.

Наряду с известными способами повышения проницаемости капилляров микроциркуляторного русла, такими как пирогенный и химиотерапевтический, немаловажная роль принадлежит биотикам, то есть макро- и микроэлементам, участвующим в механизме трансэндотелиальной проницаемости и способствующим проникновению лекарственных веществ в ткани тела человека. Следует отметить, что микро- и макроэлементы представляют собой компоненты очень древней и сложной физиологической системы, участвующей в регулировании жизненных функций организма на всех стадиях его развития.

Сами биотики, то есть макро- и микроэлементы, одновременно содержатся в организме человека в очень малых количествах - в пределах 10^-3 - 10^-12% и могут самостоятельно повышать проницаемость капилляров микроциркуляторного русла при помощи двух процессов - антиоксидантного и адгезивного. В осуществлении механизма трансэндотелиальной проницаемости основная роль принадлежит кальцию, селену, магнию, стронцию и другим металлам. Особенно важную роль в антиоксидантном эффекте играет селен. В настоящее время твердо установлено, что такие макро- и микроэлементы, как селен, кальций, медь и другие, способствуют нормализации ферментативной продукции и активности эндогенных антиоксидантов ("Иммунофармакология микроэлементов". Кудрин А.В., Скальный А. В. , Жаворонков А.А., Скальная М.Г., Громова О,А. Изд. КМК, М., 2000, стр. 62-131). Наряду с осуществлением антиоксидантного эффекта селену в то же время принадлежит значительная роль в стимуляции Т-хелперов и киллеров.

Основную роль в увеличении проницаемости капилляров терминального русла играют такие макро- и микроэлементы, которые одновременно активизируют иммунные клетки и связанные с ними молекулы адгезии ("Иммунофармакология микроэлементов". Кудрин А.В., Скальный А.В., Жаворонков А.А., Скальная М.Г., Громова О. А. Изд. КМК, М., 2000, стр. 144-152). Установлено, что полиэлектролитные белки межклеточного матрикса служат усилителями других активаторов. Доказано также, что матриксные белки характеризуются особой биологической ионофороподобной активностью, отличной от других ионофоров. В этом отношении биотики усиливают и контролируют эффект адгезии, которая обеспечивает физический контакт между клетками, миграцию лейкоцитов и взаимодействие клеток в процессе иммунной реакции. В адгезивном процессе основную роль в направлении проведения сигналов через молекулу адгезии играет тот сигнал, который при помощи биотиков проводится внутрь клетки через рецептор при его взаимодействии с лигандом и вызывает секрецию цитокинов.

Адгезия жизненно необходима для организма человека. Она обеспечивает физический контакт между клетками, поддерживая целостность тканей, миграцию лейкоцитов, взаимодействие клеток в процессе иммунных реакций. Обширное семейство молекул адгезии в настоящее время насчитывает пять подсемейств, классифицируемых по структурному сходству: суперсемейство иммуноглубулинов, интегрины, селектины, кадхерины, протеогликаны и более 50 индивидуальных молекул, число которых продолжает увеличиваться (Александров А.В. и др., 1997). Главной функцией молекул адгезии (или, как их еще называют, вспомогательных молекул) является обеспечение физического контакта между клетками.

Следует отметить, что модулирующие и иммуноактивирующие сигналы одновременно могут получать как клетка, несущая биосенсор, так и клетка, несущая лиганд, то есть активную молекулу. Любые межклеточные взаимодействия, в том числе и трансэндотелиальная проницаемость, являются сложным комплексным процессом, в котором одновременно и последовательно принимают участие разные молекулы адгезии. Например, миграция лейкоцитов через эндотелий состоит из нескольких фаз: касания, роллинга, активации, "ареста" и непосредственного усиления самой адгезии, что приводит к трансэндотелиальной миграции, в которой последовательно участвуют различные молекулы адгезии из семейств селектинов, иммуноглобулинов и интегринов (Александров А.В. и др., 1997).

В частности, интегрины: ab₁ (VLA), ab₂ (LFA; Mac-1; p150, 95) и ab₃ участвуют в Ca₂₊/Mg₂₊ зависимой адгезии (Татаринцев и др., 1991). Адгезия, обеспечиваемая LFA-1, Mac-1, p150 и p95, является Mg-зависимой.

Таким образом, в настоящее время установлено, что некоторые биотики (микро- и макроэлементы) непосредственно участвуют в регуляции процесса проницаемости капилляров. Воздействие селена, кальция, магния и др. приводит к одновременному сочетанию антиоксидантного процесса с активацией адгезивной молекулярной матрицы.

Этот факт, по нашему мнению, может быть использован для повышения эффективности воздействия ПСК на ткани организма.

Задачей настоящего изобретения явилась разработка такого способа терапии с использованием ПСК, который обладал бы высоким терапевтическим эффектом при более низких дозах вводимого препарата.

При этом было проведено исследование различных биотиков, которые наиболее эффективно повышают трансэндотелиальную проницаемость капилляров для проникновению молекул ПСК в ткани организма. Также были отработаны необходимые дозы биотиков для их совместного с ПСК применения в клинической практике.

Способ осуществляют следующим образом.

Препарат ПСК представляет собой раствор активного вещества в 60-90% спирте, 1 мл которого содержит 10-12 мг лекарственной субстанции. ПСК вводят перорально, внутримышечно, внутривенно, внутриартериально, а также наружно в виде суспензии в масляном растворе или в виде мази с масляно-спиртовым наполнителем.

При пероральном введении необходимую дозу рассчитывают следующим образом: - в 20 каплях раствора содержится 10-12 мг лекарственной субстанции; - в 10 каплях (1/2 мл) содержится 5-6 мг препарата; - в 5 каплях (1/4 мл) содержится 2,5-3,0 мг препарата; - в 3 каплях (1/7 мл) содержится 1,5-1,7 мг препарата.

При внутримышечном, внутривенном или внутриартериальном введении препарат растворяют в физиологическом растворе для лучшей диссоциации в соотношении 1:10 при использовании 60 % спирта или 1:15 - при 90% спирте.

Согласно предложенному способу перед введением в организм ПСК обогащают несвязанными ионами селена и/или кальция.

Для получения ионизированного селена используют водный раствор селеномочевины, который подвергают электролизу. Под действием электрического тока ионы селена проходят через мембрану и концентрируются в области катода. Таким образом, при растворении 1 мг селеномочевины в 29 мл воды получают 435 мкг ионов селена (1 мл воды содержит 15 мкг селена).

Ионизированный кальций получают с помощью электролиза гидросульфита кальция. При электролизе раствора, содержащего 1,0 г гидросульфита кальция в 9,9 мл воды, получают в области катода 198 мг ионизированного кальция (0,99 мл воды содержит 20 мг кальция).

Лечение осуществляют обогащенным ПСК. Для этого к 1,0 мл ПСК добавляют 10-15 мкг селена и/или 20 мг кальция в виде ионизированного водного раствора.

Пример 1. Больная М.О.Ю. 1932 года рождения (наблюдение "Центра биотехнологических проблем", г. Москва). Диагноз: Хронический панкреатит с болевым синдромом, абдоминальный свищ верхней трети живота с постоянным истечением жидкости.

Считает себя больной с 1997 г., когда была оперирована по поводу остро развившегося панкреатита. Во время операции была удалена некротизированная часть хвоста поджелудочной железы и наружу был выведен дренаж для нормализации оттока жидкости. С момента операции до конца 1998 г. постоянно в течение суток выделялось до 100 мл прозрачной жидкости. Предпринятое лечение у хирурга и терапевта по месту жительства клинического эффекта не дало. С января 1999 г. с согласия больной было начато лечение протеоселеновым препаратом, причем доза препарата при пероральном введении менялась от 3 мл до 10-15 капель. Выраженного клинического эффекта, однако, не наступило. С 30.03 1999 г. были назначены инъекции протеоселена - внутримышечно вводилось каждый день от 0,5 мл протеоселена до 1,25 мл с водой для инъекций. Ультразвуковая диагностика, проведенная по месту жительства, не обнаружила дефекта брюшины тела поджелудочной железы, однако выделение жидкости продолжалось по-прежнему. Было принято решение о назначении протеоселена с одновременным добавлением к нему селена и кальция из расчета 20 мг кальция и 15 мкг селена на 1 мл препарата. Больная применяла этот препарат в течение 3-х месяцев. С середины января 2000 г. выделение жидкости резко сократилось с 80 мл в сутки до 2 мл. В феврале за сутки выделялось уже 0,5 мл жидкости. 3 марта 2000 г. у больной был вынут дренаж, заживление раны произошло в течение 2-х недель и сопровождалось полным прекращением выделения жидкости, нормализацией аппетита и восстановлением функции кишечника. Иммунограмма до лечения: Т-хелперы СД4-35,1; Т-супрессоры - СД8 - 30,1; СД25 (альфа-цепь рецептора интерлейкина 2-1,7); СД50 молекула адгезии - 70; иммунорегуляторный индекс - 1,16. После окончания лечения: СД4 Т-хелперы - 44,2; СД8-супрессоры - 28,1; СД25 (альфа-цепь рецептора интерлейкина 2-4,1); СД50 молекула адгезии - 96,5; иммунорегуляторный индекс -1,6.

В приведенном наблюдении положительный эффект был достигнут сочетанием протеоселенового вещества с биотиками - селеном и кальцием, что привело к увеличению количества Т-хелперов, возрастанию молекул интерлейкина-2 и молекул адгезии, и одновременному повышению трансэндотелиальной проницаемости капилляров гисто-гематического барьера. Следовательно, повышение проницаемости терминального микроциркуляторного русла может быть осуществлено введением в организм биотиков, оказывающих непосредственное влияние на активацию молекулярных адгезивных структур.

Пример 2. Больной А.В. (наблюдение "Центра биотехнологических проблем") обратился в 17 центральную поликлинику Министерства обороны по поводу предгангренозного состояния тканей левой стопы. Больной страдает инсулинозависимым диабетом и облитерирующим атеросклерозом сосудов ног.

Одновременно с жалобами на боли и трофические нарушения в левой стопе отмечал регулярное повышение температуры до 37,5^oC.

При объективном исследовании обнаружено следующее: в области тканей ногтевой фаланги мизинца левой стопы отмечается очаг некроза черного цвета, под основанием мизинца глубокий свищевой ход; левая стопа отечна, холодна на ощупь, багрово-синего цвета. В центре подошвы определяется глубокая трофическая язва грязно-сероватого цвета с неприятным запахом, размерами 1,5х2,5 см, а также две язвы по наружному краю левой стопы размерами 1х1,5 см. Из-за сильных болей в области левой стопы самостоятельно передвигаться не может.

Пальпация окружающих тканей вызывает резкую боль. Проводимое лечение у хирурга и ортопеда эффекта не дало. С согласия больного начато лечение ИСК в виде нанесения мази на раневые поверхности. Проводимое лечение улучшило состояние больного, однако регенерации трофических нарушений не наступило. Было принято решение о введении в мазь дополнительных количеств селена в виде ионизированного раствора. Мазь готовили следующим образом: к 25 см³ вазелина добавляли 5 мл ПСК и 75 мкг селена, полученного при электролизе селеномочевины. Смесь тщательно размешивали и использовали для лечения.

Через три недели больной отметил следующие изменения: нога слегка потеплела, уменьшился ее отек и значительно ослабели боли в тканях подошвы левой стопы. Прежнего повышения температуры, наблюдавшейся по вечерам, не отмечалось. Мазь, содержащая ПСК с добавками селена, вводилась также в свищевой ход под мизинцем и наносилась в течение 3-х раз на трофические язвы подошвы левой стопы. В конце мая отметил значительное улучшение трофики тканей подошвы левой стопы: исчез отек, температура тканей левой стопы была аналогично температуре тканей правой ноги, исчезла болезненность при наступании на подошву. К концу июня отмечал почти полное заживление трофических язв, исчезновение болей и нормализацию кровообращения. К середине сентября 2000 г. произошла почти полная регенерация тканей левой подошвы, исчезли боли, восстановился нормальный цвет тканей стопы.

Иммунологические показатели до лечения были следующими: Т-хелперы 24, Т-супрессоры 32, Т-лимфоциты 47. После завершения лечения - Т-хелперы 37,8, Т-супрессоры 25,7, Т-лимфоциты 78.

В приведенном наблюдении показано действие микроэлемента селена на процесс проникновения селеновых органических веществ в ткани подошвы через капилляры микроциркуляторного сосудистого русла. Повышение проницаемости капилляров в региональных участках подошвы гисто-гематического барьера тела человека привело к регенерации тканей стопы и одновременно сопровождалось коррекцией и стимуляцией иммунной системы, что является прямым подтверждением проникновения селеновых органических веществ в ткани тела человека.

Формула изобретения

1. Способ иммунокорригирующей терапии заболеваний путем введения препарата протеоселенового комплекса (ПСК), представляющего собой спиртовой раствор, содержащий в 1 мл 3 - 6 мкг селена, отличающийся тем, что перед введением к препарату ПСК добавляют раствор, содержащий ионы селена и/или кальция.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что препарат используют в дозе 0,5 - 3,0 мл.

3. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что раствор, содержащий ионы селена, получают электролизом водного раствора селеномочевины.

4. Способ по пп. 1 - 3, отличающийся тем, что раствор содержащий ионы кальция, получают электролизом водного раствора гидросульфита кальция.

5. Способ по пп.1 - 4, отличающийся тем, что к 1 мл препарата ПСК добавляют 10 - 15 мкг ионов селена и/или 20 мг ионов кальция.