Препарат и способ профилактики и лечения диареи у телят

 

Изобретение относится к области ветеринарии. Препарат включает раствор гипохлорита натрия и вирусно-бактериальную поливалентную сыворотку крови против диареи с титром антител 1:300-1:600 в эффективном количестве. Данный препарат вводят телятам с профилактической целью и с целью лечения диареи. 2 с. и 5 з.п. ф-лы, 5 табл.

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к комплексному биологическому препарату, содержащему экологически и эпизоотологически детерминированный набор специфических антител против эндемичных (эпизоотических) бактериальных и вирусных инфектов, детоксифицирующего (эндо- и экзогенных токсинов) компонента. Препарат может быть использован для профилактики и лечения телят при диарее вирусно-бактериальной этиологии. Особо эффективно в условиях регионов с неблагополучной экологической ситуацией.

Известна сыворотка крови аллогенной иммунной (СКАИ) для профилактики и лечения желудочно-кишечных болезней новорожденных телят (Утверждено Главным управлением ветеринарии с государственной ветеринарной инспекцией от 19.01.1989 г.). СКАИ вводится из расчета 5-20 мг на 1 кг живой массы теленка, что составляет от 200 до 1200 мл на голову.

Такой большой объем введения СКАИ тяжело переносится больными телятами, при этом на фоне экологического неблагополучия и ассоциированной формы болезни достигается относительно низкая эффективность. Трудоемок для ветспециалистов, приходится вводить препарат в 6-8 местах. Кроме того, в данной сыворотке содержатся балластные белки, вызывающие анафилактических и агглютиногенных реакций организма рецепиента (сывороточная болезнь).

Известна лекарственная форма раствора гипохлорита натрия, применяемая при лечении инфицированных ран, ожогов, эндогенной и экзогенной интоксикации организма, при лечении диареи телят и поросят, атонии и гипотонии рубца коров (Временное наставление по применению раствора активного гипохлорита натрия в ветеринарии. Утверждено Главным управлением ветеринарии с государственной ветеринарной инспекцией, 1991. - М., 1991 - прототип). Однако активный раствор гипохлорита натрия, вводимый в больших дозах (500 мл на голову) и высокой концентрации (500-600 мг/л), не обеспечивает высокую лечебную эффективность при ассоциативных инфекционных началах (грибы, криптоспоридии и др.). Кроме этого, являясь мощным окислителем в больших дозах, снижает лечебный эффект симптоматических средств.

Необходима разработка препарата и способа профилактики и лечения при диарее вирусно-бактериальной этиологии у телят на фоне экологического неблагополучия хозяйств региона, обеспечивающих высокую эффективность лечения, способствующих повышению сохранности телят, сокращению сроков лечения при минимальных дозах введения препарата, что ведет к снижению побочных и отдаленных их негативных эффектов, экономически оправдано.

Указанный технический результат достигается тем, что заявленный препарат для профилактики и лечения при диарее у телят, включающий раствор гипохлорита натрия, дополнительно содержит гипериммунную поливалентную сыворотку крови с титром детерминированных антител 1:300-1:1200 конкретного неблагополучного региона, при этом раствор гипохлорита натрия берется в концентрации 300-350 мг/л при соотношении ингредиентов, мас.%: раствор гипохлорита натрия 30-40, гипериммунная поливалентная сыворотка - остальное.

Способ профилактики и лечения диареи у телят заключается в введении заявленного препарата по схеме: - с профилактической целью новорожденным телятам в первый день жизни однократно, подкожно или внутримышечно из расчета 3 мл на 10 кг живой массы или перорально за 20-30 мин до первой выпойки молозива в дозе не менее 50 мл на голову, а телятам профилакторного возраста (с живой массой свыше 50 кг) препарат вводят внутримышечно в дозе 15 мл/гол; - с лечебной целью заявленный препарат вводят телятам внутримышечно в дозе 3 мл на 10 кг живой массы двукратно с интервалом 48-72 ч, при тяжелых формах болезни - препарат вводят телятам внутривенно один раз в сутки по 20-50 мл/гол в сочетании со 150 мл гемодеза в течение 2-3 дней.

Заявленный препарат готовят следующим образом. В базовых хозяйствах, стационарно благополучных по заразным болезням, готовят группу животных-доноров (продуцентов). В качестве доноров (продуцентов) может быть взят малопродуктивный крупный рогатый скот, лошади. Отбирают только клинически здоровых животных, предварительно проверенных на инварированность гельминтами. Лошадей проверяют на сап, трипаноземоз, бруцеллез, туберкулез, пироплазмидозы и инфекционную анемию. Крупный рогатый скот соответственно на туберкулез, бруцеллез, лептоспироз и лейкоз. При отборе животных-продуцентов учитывают также их физиологические и иммунобиологические показатели.

На следующем этапе доноров-продуцентов иммунизируют 3-4-5-6-кратно с интервалами по 7 дней в нарастающих дозах с использованием вакцин, содержащих антигенов инфекции, которые циркулируют в условиях ферм хозяйств конкретного региона.

Например, для антигенов сальмонеллеза и колибактериоза вводят от 3 до 8 доз, а для вирусной диареи - от 10 до 30 доз. При этом взятие гипериммунной крови (без стабилизатора) осуществляют на 28, 35, 55 и 65 дни, чем в целом обеспечивается заявленный титр антител.

Такая привязка необходима для эффективной борьбы с конкретными антигенными детерминантами бактерий и вирусов, максимально приближением к конкретной эпизоотологической ситуации неблагополучного хозяйства.

"Поливалентность" сыворотки заявленного препарата обеспечивается включением ассоциации вирусно-бактериальных возбудителей, как вирусной диареи - болезни слизистых оболочек (ВД-БС), Э.Коли, сальмонелл, диплококков и стафилококк.

Заявленную гипериммунную поливалентную сыворотку готовят на I этапе технологии производства согласно требованиям получения активных лечебно-профилактических и диагностических иммунных сывороток (Ветеринарные препараты. Справочник под ред. Д.Ф.Осидзе. - М.: Колос, 1981. - С.49-60).

Забор крови (без стабилизатора) от животных-доноров осуществляют на 7-10 дни (после 3-кратно, 4, - 5- и 6-кратных) гипериммунизации продуцентов (доноров) при максимальных уровнях выработки специфических антител (от 1:300 до 1:1200 и выше) в зависимости от вида инфекции. Количество забираемой крови от крупного рогатого скота - 2,5-3 л, от лошадей в количестве 5 л от одного продуцента.

Полученную кровь с соблюдением асептики и антисептики отслаивают на водяной бане (37-38^oС) в течение 30-40 мин, или при комнатной температуре, в темном месте в течение 12-15 ч. С момента образования сгустков и начала ретракции образцы крови переносят в рефрижератор (холодильники) при 4-5^oС, где они находятся до наступления максимальной ретракции.

Отстоявшуюся сыворотку из емкостей объединяют методом отсоса (слива), отделяя от сгустков в одну стерильную емкость.

Для отжатия оставшихся сгустков крови добавляют часть раствора гипохлорита натрия в концентрации 350-300 мг/л из расчета 300 мл на 1 л (кг) сгустка крови. Оставляют на сутки в темном прохладном помещении. После чего сливают и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 30 мин.

Далее с целью активизации препарата проводят его облучение ультрафиолетовыми лучами в режиме "холодного свечения" с основным диапазоном излучения 254 нм. При этом сыворотка течет через облучатель УРО типа "Спектр", МД-73-В или ОКЖ-100 (Люксом) самотеком. Аппараты экстракор-порального облучения аутокрови, а также донорской крови описаны в методических рекомендациях: "Облученная ультрафиолетовым светом кровь в профилактике и лечении новорожденных телят с желудочно-кишечными заболеваниями". - М.: ЦНТИ, пропаганды и рекламы, 1992.

Объединение всех порций сыворотки, которые были получены методом отсоса(слива) - основная партия и отжатая из сгустков крови с добавлением гипохлорита натрия, осуществляют после центрифугирования и консервирования карболовой кислотой (0,25-0,30% раствором фенола) из расчета 50 мл 5% раствора на каждый литр сыворотки (при этом конечная концентрация фенола 0,25%).

Готовый препарат - гипериммунную поливалентную сыворотку разливают по стерильным флаконам емкостью 50, 100, 250 и 500 мл. Срок хранения в холодильнике до 2-х лет. Контроль за качеством препарата осуществляется на всех стадиях его приготовления. Каждая серия проверяется на ее физические качества (цвет, консистенция), стерильность, безвредность, а также на специфическую активность после 20-дневной выдержки при (37±1)^oС. Проводят контроль препарата на содержание общего белка, гамма-глобулинов, апирогенность.

Пример: В хозяйствах, стационарно благополучных по заразным болезням (ПСХ "Блиновское" Алтайкокс и АОЗТ "Гоя" Алтайского района были отобраны группы клинически здоровых животных-доноров (продуцентов), исключая бруцеллез, туберкулез, лептоспироз, лейкоз. Доноров иммунизировали методом 3-4-5-6-кратной иммунизации с использованием вакцин, содержащих антигенов инфекций, которые циркулировали среди животных в условиях данных хозяйств (Э. Коли с адгезивными антигенами А20, К99, К88, F41, серотипов О18, О20 и О33; антитела сальмонелл, пастерелл, вирусной диареи (ВД-БС)).

Гипериммунную поливалентную сыворотку и заявленный препарат для профилактики и лечения при диарее у телят получали согласно описанию изобретения. В таблице 1 отражен выбор оптимального соотношения компонентов заявленного препарата (раствор гипохлорита натрия и гипериммунной поливалентной высоротки) на примере лечения диареи у телят (внутримышечное двукратное введение с интервалом 48 ч).

Оптимальным соотношением ингредиентов препарата, как видно из опыта, является 30:70 и 40:60, где 30 и 40 - мас.% гипохлорита натрия, 60 и 70 - мас. % гипериммунной поливалентной сыворотки. Как видно из таблицы, результат лечения четвертой группы (при последующем увеличении доли раствора гипохлорита натрия в препарате (до 45%) незначительно отличался от результата по 3 группе.

Исследование эффективности лечения (в/мышечное двукратно по 3 мл/10 кг, при тяжелых формах болезни с интервалом 72 ч) показало результат, очень близкий к эффективности лечения (с введением препарата через 48 часов). Однако дальнейшее увеличение периода между инъекциями заметно снижало результаты лечения. Так, при интервале между инъекциями препарата в 4 суток и более наблюдали увеличение падежа телят до 12% со средней продолжительностью болезни до 5 суток.

Для установления профилактической эффективности и способа введения заявленного препарата было организовано и отобрано 9 групп телят (табл.2): 1 группа - обрабатывалась раствором гипохлорита натрия (NaOCl^-) согласно наставлению по его применению; 2 группа подопытных телят была подвергнута профилактической обработке с применением сыворотки крови аллогенной иммунной (СКАИ) согласно наставлению по применению; 3, 4, 5, 6 группам подопытных животных вводили внутримышечно заявленный препарат в дозах 1,2,3,4 мл на 10 кг живой массы соответственно; 7, 8, 9 группам подопытных телят вводится заявленный препарат перорально за 25 минут до первой выпойки молозива в дозах 40, 50,70 мл на голову соответственно.

Как видно из таблицы 2, самый низкий процент заболеваемости наблюдался в 5 и 6 подгруппах, т.е. при дозах внутримышечного введения - 3 и 4 мл препарата на 10 кг живой массы. При этом разница в результатах была практически недостоверна. Оптимальной дозой заявленного препарата следует считать 3 мл на 10 кг живой массы. Самая высокая сохранность подопытных среди телят 7, 8, 9 групп была в 8 подгруппе, которым перорально вводили 50 мл препарата.

Для установления лечебной эффективности заявленного препарата и способа лечения было организовано и отобрано 7 групп больных животных: при легкой тяжести течения болезни (табл.3).

1, 2, 3, 4 подгруппы больных телят были подвергнуты лечению с использованием известных препаратов в дозах согласно наставлению по их применению при диарее телят.

5, 6, 7 подгруппы заболевших телят подвергнуты лечению путем внутримышечного введения заявленного препарата в дозах 2, 3, 4 мл на 10 кг живой массы соответственно.

Оптимальной дозой при лечении диареи, как показали опыты на телятах, оказалось внутримышечное введение 3 мл на 10 кг живой массы, как по сохранности, средней продолжительности лечения и по среднесуточному приросту живой массы в течение 30 дней после курса лечения.

Результаты лечебной эффективности заявленного препарата и способа лечения с применением препарата при тяжелых формах (токсической формы) проявления диареи у телят отражены в таблице 4.

Из таблицы 4 видно, что лечение при тяжелых формах (токсическое течение) проявления диареи у телят посредством применения доз и способа лечения заявленного препарата, аналогичному лечению легкой тяжести течения диареи, привело к гибели 10% подопытных телят (1 группа), в то время как во 2 подгруппе пало всего 2% телят. Попытка уменьшить количество гемодеза в сочетании с заявленным препаратом (группа 3) привела к снижению лечебной эффективности на 4,8%. Поисковые исследования по применению минимальных доз заявленного препарата (меньше 50 мл на голову) в таблице не приведены, они обеспечивали сравнительно низкую сохранность подопытных телят при 20 мл/гол - 91,2%, при 10 мл/гол - 89%.

Сокращение кратности лечения до разовой дозы(однократное введение препарата) также отразилось на результативности эффекта лечения (92%).

Об эффективности применения оптимальных доз заявленного препарата подтверждают данные таблицы 5, свидетельствующие о повышении защитных и иммунобиологических показателей у подопытных телят на фоне профилактического и лечебного его применения. Так, например, содержание общего белка в крови подопытных телят 5 группы (подвергшихся профилактической обработке) на 7 и 14 сутки оказалось на 0,6-1,2 г/% выше, гамма-глобулинов соответственно на 9,2-14,8% и титр-интерферона на 26 ед., чем у телят на фоне применения СКАИ. У подопытных телят 2 и 6 группы, подвергшихся лечению заявленным препаратом, содержание общего белка на 14 сутки оказалось выше на 0,9-1,05 г/%, гамма-глобулинов на 10%, титр интерферона на 16 ед. Это свидетельствует о значительном повышении показателей неспецифической и специфической иммунной защиты организма телят на фоне применения заявленного препарата. Следует особо подчеркнуть, что содержание метгемоглобина подопытных животных 5 (профилактической) группы по сравнению с исходными показателями за счет детоксифицирующего компонента уменьшилось на 27,3%, у телят 2 и 6 подгрупп (с лечебными обработками) соответственно на 39 и 37%. У телят на фоне использования СКАИ за аналогичный период содержание метгемоглобина оставалось на высоком уровне даже на 14 день (12,8....14,2%), Морфобиохимические иммунобиологические показатели резистентности у телят на фоне профилактического и лечебного применения заявленного препарата приведены в таблице 5.

Таким образом, в экологически неблагополучных регионах при ассоциативных формах этиологии диареи (обусловленные как E.coli, сальмонеллами, пастереллами, корона- и ротавирусами, вирусной диареей), использование заявленного препарата и способа лечения внутримышечно в дозе 3 мл на 10 кг массы или внутрь по 50 мг/гол профилактирует заболевание подопытных животных диареей у 69,8-71,4%, в контроле только у 35,6%. Сохранность подопытных телят, подвергшихся профилактической обработке, составляет 95,9-95,7%, в контроле - 71-73%.

Лечебное применение оптимальных доз заявленного препарата сократило длительность болезни с 5-7 дней до 2-3 дней, снизился падеж телят от диареи по сравнению с контрольными группами на 9,8-28,45% (с 30,65% до 2,2%). При тяжелых (токсических) формах течения заболевания сочетанное применение заявленного препарата внутривенно из расчета 50 мг на голову со 150 мл гемодеза 1 раз в сутки 2-3 дня подряд способствует повышению сохранности среди заболевших телят до 98%.

Полученные результаты позволяют рекомендовать заявленный препарат как экологически обоснованное и высокоэффективное средство для профилактики и терапии различных форм диареи у молодняка крупного рогатого скота в ветеринарной медицине.

Формула изобретения

1. Препарат для профилактики и лечения диареи у телят, включающий раствор гипохлорита натрия, отличающийся тем, что дополнительно содержит гипериммунную вирусно-бактериальную поливалентную сыворотку крови против диареи с титром антител 1: 300 - 1: 600 в эффективном количестве.

2. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что раствор гипохлорита натрия берут в концентрации 300 - 350 мг/л и гипериммунную поливалентную сыворотку крови при следующем соотношении ингредиентов, мас. %: Раствор гипохлорита натрия - 30 - 40
Гипериммунная поливалентная сыворотка - Остальное
3. Способ профилактики и лечения диареи у телят, включающий введение биологически активного заявленного препарата, отличающийся тем, что в качестве биологически активного препарата телятам вводят препарат по пп. 1 и 2 в эффективном количестве.

4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что с профилактической целью заявленный препарат инъецируют новорожденным телятам однократно в дозе 3 мл на 10 кг живой массы или задают внутрь (per os) за 20-30 мин до первой выпойки молозива в дозе не менее 50 мл/гол.

5. Способ по п. 3, отличающийся тем, что с профилактической целью телятам с живой массой свыше 50 кг препарат следует вводить в дозе 15-18 мл на голову.

6. Способ по п. 3, отличающийся тем, что с лечебной целью препарат вводят телятам внутримышечно в дозе 3 мл на 10 кг живой массы двух-трехкратно с интервалами 48-72 ч (в зависимости от тяжести процесса).

7. Способ по п. 3, отличающийся тем, что при тяжелых (токсических) формах болезни препарат вводят телятам внутривенно по 50 мл/гол в сочетании с 150 мл гемодеза один раз в сутки в течение 2-3 дней.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5