Способ моделирования аппендикулярного инфильтрата

 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования аппендикулярного инфильтрата. Проводят перевязку слепой кишки ниже баугиниевой заслонки. Ниже места перевязки в просвет кишки поочередно вводят 10%-ный раствор хлористого кальция и 1,5 млрд/мл взвесь суточной культуры золотистого стафилококка штамма 209Р из расчета 2,5 мл на кг массы животного. Способ позволяет создать плотный неосложненный аппендикулярный инфильтрат.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано в разработке методов профилактики, диагностики и лечения этого хирургического заболевания.

Известны способы создания модели аппендикулярного инфильтрата путем перевязки отростка у его основания и введения в его брыжейку раствора адреналина (Забегальская З. К. Патогенез и лечение аппендикулярного инфильтрата. Автореф. докт.дисс. - Оренбург, 1969; Лопухин Ю.М. Экспериментальная хирургия. - М., 1971.-344с. После перевязки основания аппендикулярного отростка и введения в его брыжейку 0,2 мл 0,1% раствора адреналина подшивают сальник к слепой кишке и аппендикулярному отростку. На 7 сутки после операции - спайки мало оформлены, четкого осумкования процесса нет, участки сальника имбибированы гноем, при разделении петель тонкой кишки вскрывается абсцесс. Аппендикулярный отросток флегмонозно изменен с явлениями некроза стенки и прободения. Через две недели - инфильтрат незначительный, при разделении спаек вскрывается межпетельная гнойная полость.

Однако при указанных способах процесс развивается по типу острого деструктивного аппендицита (язвенно-некротического или прободного) с формированием осложненного аппендикулярного инфильтрата и последующим развитием разлитого гнойного перитонита (Забегальская З.К., 1969; Локтев Н.А. К вопросу о патогенезе острого аппендицита. Автореф.канд.дисс. - Ставрополь, 1966; Ховрина М. П. К патогенезу острого аппендицита в свете экспериментальных данных. Сб. трудов курского мед.ин-та, 1957, вып.XII.- С. 129-131; Ховрина М.П. О роли кишечной палочки в этиологии и патогенезе острого аппендицита. Автореф. канд.дисс. - Хабаровск, 1964; Черевашенко И.В. О некоторых экспериментальных моделях острого аппендицита. Тез.докл.ХХХVII итог.науч.конф.- Алма-Ата, 1965.- С.71-72). При этих моделях имеет место высокий процент гибели животных в результате прогрессирования осложненного аппендикулярного инфильтрата и развития картины разлитого перитонита. В то же время известно, что неосложненный аппендикулярный инфильтрат (без картины абсцедирования и прободения аппендикулярного отростка) не может непосредственно являться причиной летального исхода. Такой неосложненный инфильтрат может перейти в форму осложненного, а может подвергнуться и обратному развитию с последующим исчезновением воспалительного конгломерата.

Цель изобретения - получение неосложненной формы аппендикулярного инфильтрата.

Поставленную цель достигают за счет того, что осуществляют перевязку слепой кишки ниже баугиниевой заслонки, ниже места перевязки в кишку поочередно вводят 10% раствор хлористого кальция и 1,5 млрд/мл взвесь суточной культуры золотистого стафилококка штамма 209Р в количестве по 2,5 мл на кг массы животного.

Способ осуществляют следующим образом: Под эфирным масочным наркозом у белой беспородной крысы массой 200 г стерильно производят срединную послойную лапаротомию длиной 4 см. В рану выводят слепую кишку, просвет которой закрывают с помощью шелковой лигатуры 4. В просвет перевязанного сегмента кишки путем прокола вводят 0,5 мл 10% раствора хлористого кальция и 0,5 мл 1,5 млрд/мл взвеси суточной культуры золотистого стафилококка штамма 209Р. Слепую кишку с аппендикулярным отростком погружают в правую подвздошную область брюшной полости, брюшную стенку зашивают наглухо тонким шелком 1/0 послойно двумя рядами: брюшина+мышечный слой, кожа+подкожная клетчатка. Через 7 суток после операции формируется плотный аппендикулярный инфильтрат, занимающий до 20% объема брюшной полости. При вскрытии брюшной полости попытка выделить слепую кишку из кишечного конгломерата сопровождается разрывами кишечной стенки, кровотечением, межпетельные гнойные полости отсутствуют.

Результаты, полученные на 50 крысах, показали, что изменения слепой кишки и аппендикулярного отростка соответствуют апостематозному воспалению, инфильтративный воспалительный процесс увеличивает толщину стенки кишки в 5-7 раз. На микросрезах кишки слизистая оболочка имеет очаги некроза, в подслизистом и мышечном слоях - микроскопические множественные гнойные очаги (апостематоз). Серозная оболочка гиперемирована с легким налетом фибрина. Имеется прочное спаяние петель кишки с сальником в области инфильтрата без признаков абсцедирования. В брюшной полости вне пределов конгломерата признаки перитонита отсутствуют. В период до 7 суток аппендикулярный инфильтрат наблюдается без признаков апостематоза. Летальность животных нулевая (100% выживаемость) независимо от времени наблюдения. Через 25 суток после операции аппендикулярный инфильтрат подвергается обратному развитию у всех животных. Признаки активной воспалительной реакции исчезают, наступает реканализация слепой кишки. Слепая кишка с отростком расположены в брюшной полости свободно и легко доступны для осмотра. Таким образом, сочетание 10% раствора хлористого кальция и суточной культуры золотистого стафилококка создает апостематозное воспаление слепой кишки и отростка, а не абсцесс, что не позволяет сформироваться тотальному некрозу стенки кишки и ее прободению, развитию осложненного инфильтрата и разлитого перитонита. Модель формирует плотный аппендикулярный инфильтрат с вовлечением в спаечный процесс сальника.

Изолированная перевязка слепой кишки, введение в просвет слепой кишки только раствора хлористого кальция (или концентрации, меньшей чем 10% раствор) или только взвеси стафилококка не приводит к формированию неосложненного аппендикулярного инфильтрата. Только сочетание трех факторов: перевязки слепой кишки, поочередного введения 10% раствора хлористого кальция и 1,5 млрд/мл суточной культуры золотистого стафилококка штамма 209Р создает новое качество - формирование плотного неосложненного аппендикулярного инфильтрата на 7 сутки моделирования без признаков прободения кишки и картины разлитого перитонита.

Пример Двум крысам (контроль и опыт) массой по 250 г после подачи эфирного масочного наркоза в стерильных условиях произведена срединная послойная лапаротомия длиной 4 см. В рану выведена слепая кишка с аппендикулярным отростком. Слепая кишка перевязана шелковой лигатурой 4 ниже баугиниевой заслонки без вовлечения в лигатуру сосудов брыжейки. С помощью инъекционных игл 64 без излишней травматизации стенки кишки поочередно введены 0,5мл 10% раствора хлористого кальция и 0,5 мл 1,5 млрд/мл взвеси суточной культуры золотистого стафилококка штамма 209Р. Слепая кишка с отростком уложена в правую подвздошную область брюшной полости. Брюшная стенка зашита послойно (брюшина+мышечный слой, кожа+подкожная клетчатка) двумя рядами тонких шелковых швов. Спиртовый раствор йода на шов. Срок наблюдения составил 7 суток. Опытной крысе с 3 по 7 сутки внутрибрюшинно вводили по 0,5 мл лейкоцитарного человеческого интерферона, разведенного на бидистиллированной воде с целью коррекции со стороны крови и морфологии воспалительного конгломерата. Контрольная крыса получала в те же сроки внутрибрюшинно 0,5 мл бидистиллированной воды. При наблюдении контрольного и опытного животного отмечается лишь незначительное снижение двигательной активности. Через 7 суток животные выведены из опыта. В контроле 20% объема брюшной полости занимает плотный инфильтрат. Свободной жидкости в брюшной полости нет. Брюшина вне пределов конгломерата без признаков воспаления. При попытке разъединить петли тонкой кишки наступает их разрыв. В центре инфильтрата - резко увеличенная слепая кишка с аппендикулярным отростком. На разрезе стенка кишки и отростка утолщена в 6 раз (0,6 см против 0,1 в норме), мясиста, просвет резко сужен. Признаков абсцедирования, некроза всех слоев и прободения стенки кишки и отростка нет. Лигатура слепой кишки сохранена. На гистологическом срезе (окраска гематоксилин-эозином) картина микроабсцедирования в подслизистом и мышечном слоях. У опытного животного отмечается меньший по объему инфильтрат и слабо выраженные признаки апостематозного воспаления. Со стороны картины крови (контроль) - воспалительная реакция: лейкоцитоз 12000, сдвиг формулы белой крови влево, угнетение фагоцитарной реакции нейтрофилов, падение активности миелопероксидазы в полиморфно-ядерных лейкоцитах. У опытного животного характерна резкая активация фагоцитарных показателей нейтрофилов (фагоцитарного числа, индекса, емкости, завершенности фагоцитоза).

Таким образом, если при анализе базового объекта модель демонстрирует образование инфильтрата, где к 7 суткам после операции возникает осложненный аппендикулярный инфильтрат (абсцедирующая полость, гнойный карман, аппендикулярный отросток деструктивно изменен, некротизирован с участками прободения, сальник имбибирован гноем, спайки мало оформлены, рыхлые, четкого осумкования процесса нет), имеет место летальность части популяции животных, то предлагаемая модель воспроизводит неосложненный аппендикулярный инфильтрат (микроабсцедирование подслизистого и мышечного слоев, слабый фибринозный налет на серозной оболочке, признаков тотального некроза всех слоев кишки и отростка, а также прободения стенок нет, отсутствие межпетельных абсцессов, спайки плотные, брюшная полость вне конгломерата свободна - без признаков воспаления, сальник участвует в формировании конгломерата без признаков имбибиции гноем).

Предлагаемая экспериментальная модель воспроизводит редкую патологию, встречающуюся в клинике у пациентов и позволяет детально исследовать диагностику, проводить профилактику и разрабатывать новые схемы лечения этого заболевания.

Формула изобретения

Способ моделирования аппендикулярного инфильтрата, включающий перевязку слепой кишки, отличающийся тем, что перевязку осуществляют ниже баугиниевой заслонки, ниже места перевязки в просвет кишки поочередно вводят 10%-ный раствор хлористого кальция и 1,5 млрд/мл взвесь суточной культуры золотистого стафилококка штамма 209Р в объеме из расчета по 2,5 мл на кг массы животного.