Средство, обладающее иммуномодулирующей, энтеросорбционной, антитоксической и противовоспалительной активностью и способ его получения

 

Изобретение относится к области медицины. Средство содержит стерильные отруби, выращенные на них микробные клетки штамма Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511, биологически-активные вещества и микроэлементы, содержит микробные клетки штамма Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511 в количестве 2,55•10¹⁰-2,65•10¹⁰ микробных тел на 1 г отрубей, в качестве отрубей средство содержит отруби пшеничные - пищевые, стерильные, красно-желтого цвета, без постороннего запаха с количеством микроэлементов 4,8 - 5,5%, при этом в качестве микроэлементов средство содержит 0,10 - 0,15 мас.% кальция, 1,00 - 1,40 мас.% фосфора, 0,08 - 0,10 мас.% натрия, (106 - 109)•10^-6 мас.% цинка и (114 - 118)•10^-6 мас.% железа. Способ получения средства включает культивирование Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511 на отрубях путем их предварительного увлажнения водой и последующей тепловой обработки среды, стерилизации конечного продукта, при этом отруби увлажняют перед культивированием водой без привкуса и запаха, с мутностью менее 0,1, рН 8,7, не содержащей хлора, и окисляемостью перманганата мгО/дм³ не более 1,6 мг/дм³, жесткостью 1,5 мг/дм³, общей минерализацией не более 384 мг/дм³, а тепловую обработку при культивировании ведут путем равномерного прогрева всей культивируемой среды. 2 c.п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к медицине, более точно к фармакологии, и может быть использовано при разработке препаратов, обладающих иммуномодулирующей, энтеросорбционной, антитоксической и противовоспалительной активностью Ранее было установлено, что комплекс, состоящий из винных дрожжей. ферментированных в процессе их роста, пшеничных отрубей и минералов. обладает широким спектром оздоровительных эффектов. Так, данный препарат восстанавливает микрофлору кишечника, обладает детоксицирующим действием, активирует гуморальный иммунитет при тяжелом инфекционном процессе патент РФ 2102903.

Известное средство получают путем культивирования микроорганизма на съедобном растительном (зерновом или соевом сырье), или молочном сырье, в качестве микроорганизма используют дрожжи Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511, культивирование ведут при температуре 20-40^oС, причем съедобное растительное или молочное сырье для культивирования используют в жидком или твердом увлажненном виде, после культивирования полученную культуру инактивируют и подвергают сушке.

На основании данного патента был разработан препарат с торговым наименованием Фервитал (см. регистрпионное Удостоверение 000624. Р.643.12.98, ТУ 9118-003-46812619-98).

Однако это известное средство оказывается недостаточно эффективным при использовании его в качестве иммуномодулятора, энтеросорбента, детоксиканта и противовоспалительного агента. Мы предполагаем, что это объясняется низким содержанием микроорганизмов - всего 4-6 млрд/куб. см.

Технической задачей заявленного изобретения является создание средства. обладающего более высокой иммуномодулирующей, детоксикационной и противовоспалительной активностью.

Техническая задача достигается за счет того что средство, обладающее иммуномодулирующей, энтеросорбционной, антитоксической и противовоспалительной активностью и содержащее стерильные отруби, выращенные на них микробные клетки штамма Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511, биологически-активные вещества и микроэлементы, согласно изобретению содержит микробные клетки штамма Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511 в количестве 2,55•10¹⁰--2,65•10¹⁰ микробных тел на 1 г отрубей, в качестве отрубей средство содержит отруби пшеничные - пищевые. стерильные, красно-желтого цвета, без постороннего запаха с количеством микроэлементов 4,8-5,5%, а в качестве микроэлементов оно содержит 0,10-0.15 мас.% кальция, 1,00-1.40 мас. % фосфора, 0,08-0,10 мас. % натрия, (106-109)•10^-6 мас.% цинка и (114-118)•10^-6 мас.% железа.

Средство указанного состава получают при купировании Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511 на отрубях путем их предварительного увлажнения водой и последующей тепловой обработки среды, стерилизации конечного продукта, при этом отруби увлажняют перед культивированием водой без привкуса и запаха, с мутностью менее 0,1, рН-8.7, не содержащей хлора, и окисляемостью перманганата мгO/дм³ не более 1,6 мг/дм³, жесткостью 1,5 мг/дм³, общей минерализацией не более 384 мг/дм³, а тепловую обработку при культивировании ведут путем равномерного прогрева всей культивируемой среды.

Реализация признаков и приемов заявленного изобретения позволяет в отличие от прототипа получить препарат, обладающий иммуномодулирующей. детоксикационной и противовоспалительной активностью.

Средство обладающее иммуномодулирующей, детоксикационной и противовоспалительной активностью получают следующим образом.

1. Проводят культивирование микроорганизма на зерновом сырье - отрубях.

2. В качестве отрубей используют отруби пшеничные-пищевые, стерильные, красно-желтого цвета, без постороннего запаха с количеством микроэлементов 4,8-5,5%, а в качестве которых отруби содержат 0,10-0,15 маc.% кальция, 1,00-1,40 маc.% фосфора, 0,08-0,10 мас.% натрия, (106-109)•10^-6 маc.% цинка и (114-118)•10^-6 мас.% железа.

3. Отруби увлажняют перед культивированием водой без привкуса и запаха, с мутностью менее 0,1, рН-8,7, не содержащей хлора, и окисляемостью перманганата мгО/дм³ не более 1,6 мг/дм³, жесткостью 1,5 мг/дм³, общей минерализацией не более 384 мг/дм³.

4. В качестве микроорганизма используют дрожжи Saccharamyces cerevisae (vini) BKMП Y-511.

5. Культивирование ведут при температуре 20-40^oС.

6. Тепловую обработку при культивировании ведут путем равномерного прогрева всей культивируемой среды.

7. После культивирования полученную культуру инактивируют и подвергают сушке.

Пример получения средства заявленного состава 1. Проводят культивирование микроорганизма на зерновом сырье - отрубях.

5 кг отрубей пшеничные - пищевые, стерильные, красно желтого цвета, без постороннего запаха с количеством микроэлементов 5,0%, а в качестве которых отруби содержат 0,12 мас.% кальция, 1,2 мас.% фосфора, 0,09 мас.% натрия, 108•10^-6 мас.% цинка и 116•10^-6 мас.% железа, помещают на поддон и увлажняют водой без привкуса и запаха, с мутностью менее 0,1, рН-8,7, не содержащей хлора, и окисляемостью перманганата мгО/дм³ не более 1,6 мг/дм³, жесткостью 1,5 мг/дм³, общей минерализацией не более 384 мт/дм³. На субстрат помещают культуру дрожжей Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511 в количестве около 250 млрд. клеток. Культивирование ведут при температуре 25-30^oС при постоянном перемешивании его, обеспечивая тем самым равномерный прогрев среды, в течение 10 часов. После окончания культивирования, о чем судят после достижения в среде требуемого количества микроорганизмов, производят их инактивирование путем прогрева всей среды лпи температуре более 100^oС. Далее полученный субстрат подвергают сушке до содержания воды не более 10%. В полученном субстрате после микроскопии определено количество дрожжевых клеток. Оно составило 2,6•10¹⁰ микробных тел на 1 г отрубей.

Доказательства наличия у средства по заявленному изобретению иммуномодулирующей, энтеросорбционной, антитоксической и противовоспалительной активности.

Исследование иммунотропных и противовоспалительных эффектов (на базе кафедры патофизиологии Кировской медицинской академии) Эти свойства были изучены при заболеваниях, основу которых составляет часто рецидивирующий воспалительный процесс различной локализации. При этих заболеваниях проводилось комплексное изучение влияния предлагаемого средства на состояние лимфатической системы, показатели иммунного статуса и количественные параметры провоспалительных цитокинов. Что и явилось целью настоящего исследования.

Эффекты Средства 1. Восстанавливает микрофлору кишечника.

2. Обладает детоксицирующим действием.

3. Восстанавливает углеводный и липидный обмен.

4. Оказывает иммуномодулирующие эффекты при аллергическом и инфекционном процессе.

5. Восстанавливает пищеварительный гомеостаз.

Материалы и методы. Исследование проведено у 19 пациентов с часто рецидивирующими воспалительными процессами различной локализации (у 10 чел. - это частые ОРЗ и герпетические высыпания на лице, у 3 чел. - это хронический тонзиллит, у 3 чел. - это пиодермия, у 1 чел. - это наличие выраженной лимфаденопатии, у 1 - хронический гастрит, у 1 - остеохондроз). В 2 случаях представленные варианты патологии сочетались с урогенитальным хламидиозом и длительной субфебрильной температурой. Возраст обследуемых колебался с 13 до 54 лет.

У обследуемых осуществляли пальпаторную оценку лимфатических узлов (затылочных, передне- и заднешейных, подчелюстных, надключичных и подключичных, подмышечных и паховых). С помощью общепринятых методик в крови определяли количество лимфоцитов, нейтрофилов, эозинофилов, моноцитов, Т-лимфоцитов (Е-РОК, CD2+), В-лимфоцитов (ЕАС-РОК), концентрацию сывороточных IgG, IgA, IgM. Фагоцитарную активность нейтрофилов исследовали с помощью оригинального теста исследования (Кузнецов В.Ф., Обернебесова Т.П., 1995) с использованием низко- и высокофагоцитируемых ОФ. В качестве низкофагоцитируемых объектов фагоцитоза использовали формалинизированные эритроциты барана, нагруженные антигенными субстанциями кишечных иерсиний, а в качестве высокофагоцитируемых ОФ использовали формалинизированные эритроциты барана, нагруженные антигенными субстанциями шигелл Флекснера (диагностику мы для реакции непрямой гемагглютинации производства С.-Пб. -НИИВС). Фагоцитарную активность нейтрофилов исследовали в условиях адгезии нейтрофилов на поверхности аутологичных клеток крови (ФАН1) и во взвеси клеток крови (ФАН2). Определяли процент фагоцитоза (% Ф), фагоцитарное число (ФЧ) и фагоцитарный индекс (ФИ). В сыворотке крови определяли концентрации интерлейкина (ИЛ)-1, бета и ИЛ-4 с помощью иммуноферментных тестов (Протеиновый контур, Санкт-Петербург).

Представленный комплекс клинических и лабораторных тестов исследовали до и после энтерального использования Средства по 1 столовой - десертной ложке 3 раза в день за 30 мин до еды в течение 20 дней.

Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью пакета статистических программ Exell.

Полученные результаты. Полученные результаты приведены в табл.1. Как видно из таблицы, у пациентов до использования Средства отмечаются явления абсолютного и относительного лимфоцитоза с увеличением количества В-лимфоцитов, а также относительная нейтропения при нормальном абсолютном содержании нейтрофилов. Отмечается также снижение концентрации IgA.

Представленные материалы свидетельствуют о наличии хронического воспалительного процесса с преимущественной активацией механизмов гуморального иммунитета. Активация закономерностей гуморального иммунитета сочетается с недостаточностью его эффекторных звеньев. Представленные материалы подтверждаются и изменениями цитокинового баланса. Так, увеличение концентрации ИЛ-1 бета, являющегося одним из важнейших провоспалительных цитокинов, составило более, чем в 7 раз. А о напряженности механизмов гуморального иммунитета свидетельствует существенное увеличение концентрации ИЛ'4, который вырабатывается Т-хелперами второго вида.

Приведенные данные свидетельствуют о наличии воспалительного процесса, вызванного преимущественно внеклеточными инфекционными агентами. Определение концентрации провоспалительных цитоки-нов является чувствительным тестом для диагностики явлений воспаления.

После энтерального использования Средства отмечено достоверное снижение количества пальпируемых лимфоузлов. При этом следует отметить, что при наличии 3 и более пальпируемых лимфоузлов у всех обследуемых пациентов было отмечено уменьшение их количества. Если количество пальпируемых лимфоузлов было 2 и менее, то уменьшение их количества выявлено у одной трети пациентов.

Общее количество лейкоцитов, а также количество нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов и эозинофилов не изменилось. Не выявлено и изменения количества Т- и В- лимфоцитов. Отмечается достоверное снижение удельной поглотительной активности нейтрофилов (ФИ) в отношении низкофагоцитируемых ОФ, а также тенденция к снижению % Ф и ФЧ. Установлено снижение до нормы концентрации ИЛ-1 бета (Р<0,03), при этом концентрация ИЛ-4 существенно не изменилась.

Приведенные материалы свидетельствуют о том, что Средство обладает ярко выраженным противовоспалительным потенциалом. На наш взгляд, это связано со снижением выработки под его влиянием ИЛ-1 бета. Уменьшение концентрации этого провоспалительного цитокина определяет и снижение удельной поглотительной активности нейтрофилов, что наиболее ярко установлено при использовании низкофагоцитируемых ОФ при исследовании фагоцитоза на поверхности аутологичных клеток крови. Тот факт, что выработка ИЛ-4 существенно не изменяется, указывает на по-прежнему усиленный антителогенез.

Приведенные материалы свидетельствуют о необходимости широкого использования Средства при всем спектре заболеваний, в основе которого лежит воспалительный процесс.

Исследование антитоксической активности и сорбционной емкости Средства (на базе отдела токсикологии НИИ микробиологии МОРФ) Испытаниям были подвергнуты три серии Средства с условными обозначениями С-1, С-2, С-3.

Для определения антитоксической активности использовали специально приготовленные опаспортизованные препараты следующих токсинов: ботулинического токсина типа и с удельной активностью 2•10 ЛД₅₀ белка, рабочее разведение 100 ЛД₅₀/мл; шигеллезного токсина c удельной активностью 1,3•10 ЛД₅₀/мл. рабочее разведение 1000 ЛД₅₀/мл; термолабильного энтеротоксина кишечной палочки (по механизму действия аналогичный холерному токсину) с удельной активностью 1,8•10 ЕД₅₀/мг белка, рабочее разведение 1000 ЕД₅₀/мл.

Определение величин ЛД₅₀ для ботулинического и шигеллеэного токсинов проводили в опытах белых мышах при внутрибрюшинном заражении с шагом разведения, равным для термолабильного энтеротоксина кишечной палочки, величину ЕД₅₀ определяли на белых мышах в тесте отека задней конечности (шаг разведения равен 5). Расчет величин ЛД₅₀ и ЕД₅₀ соответствующих токсинов осуществляли по методу Кербера в модификации Ашмарина. Рабочие разведения препаратов токсинов готовили непосредственно перед проведением исследований. Для определения сорбционной емкости Средства использовали краситель конго-рот (квалификации "Ч"), предварительно эксперйментално подобрав его концентрацию.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ СРЕДСТВА Навеску (1,0±0,001)г Средства вносили в пробирку с 10 мл рабочего разведения соответствующего токсина и тщательно перемешивали. В контрольную пробу вместо Средства добавляли (1,0±0,1)мл физиологического раствора. Пробы инкубировали в водяном ультратермостате течение 1 часа при температуре (37,0•0,1)град. С. Затем производили центрифугирование проб на рефрижераторной центрифуге при 5000 об/мин и температуре (10±1)град.С в течение 30 мин. Надосадочную жидкость отбирали и определяли титр токсинов в опытной и контрольной пробах в экспериментах на белых мышах. Пробы, содержащие ботулинический и шигеллезный токсины, разводили с шагом 2 физиологическим раствором и вводили внутрибрюшинно белым мышам в объеме 0,5 мл. За животными наблюдали в течение 7 суток, регистрируя их гибель. При использовании термолабильного энтеротоксина кишечной палочки пробы разводили с шагом = 5 и вводили животным в подошвенную поверхность одной задней конечности в объеме 0,05 мл. В противоположную конечность вводили такое же количество физиологического раствора (контроль). Через 48 часов животных умерщвляли эфиром и производили ампутацию опытной и контрольной лапок по коленному суставу. Ампутированные конечности взвешивали на торсионных весах с точностью до 1 мг. Разница веса опытной и контрольной лапок более 65 мг свидетельствует о наличии в пробе термолабильного энтеротоксина. Вся работа проводилась в асептических условиях. По результатам титрования на животных рассчитывали показатели относительной (по сравнению с контролем) токсичности опытной пробы по следующей формуле:

где ОТ - относительная токсичность;
Со - концентрация (титр) токсина в опытной пробе;
Ск - концентрация (титр) токсина в контрольной пробе.

Таким образом, в условиях проведения анализа 1 г Средства нейтрализовал около 900 мышиных ЛД₅₀ ботулинического токсина типа и 9000 ЛД₅₀ шигеллезного токсина и 8600 ЕД₅₀ термолабильного токсина кишечной палочки.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОРБЦИОННОИ ЕМКОСТИ СРЕДСТВА
Сорбционную емкость Средства исследовали в отношении красителя конго-рот. Концентрацию красителя определяли фотометрическим способом на спектрофотометре СФ-26. Для этого предварительно строили калибровочный график зависимости экстинции от концентрации красителя в диапазон от 10 мкг/мл до 136 мкг/мл.

Предварительно экспериментально подбирали рабочую концентрацию красителя, при которой получались наиболее информативные и воспроизводимые результаты. Она составила 90 мкг/мл.

Навеску Средства смешивали с 10 мл рабочего разведения красителя. Выдерживали в ультратермостате в течение 1 часа при температуре (37,0±0,1)град.С, периодически перемешивая. Затем пробы центрифугировали при 6000 об/мин в течение 30 минут. Надосадочную жидкость переливали в другие пробирки и определяли в ней концентрацию красителя на спектрофотометре. По разнице концентрации красителя в контрольной и опытной пробах определяли коэффициент сорбции (Кс). который измеряли в единицах поглощения (ЕП). Одна ЕП соответствует одному мкг сорбированного красителя. Результаты анализа представлены в табл. 2.

Таким образом, в результате проведенных исследований комиссия пришла к следующим выводам:
1. Средство обладает выраженной неспецифической токсиннейтрализующей активностью в отношении ботулинического типа и, шигеллезного (дизентерийного) токсинов, а такве термолабильного диарейного энтеро-токсина кишечной палочки.

2. Антитоксические свойства Средства, очевидно, обусловлены его способностью связывать (сорбировать) белковые токсины, что подтверждается результатами анализа сорбционной активности Средства в отношении красителя конго-рот (Кс=59,6±4,95).

3. Полученные в ходе исследований результаты дают основание предположить, что Средство будет обладать антитоксической активностью и в отношении других белковых токсинов биологического происхождения.

4. С учетом того, что термолабильный токсин кишечной палочки сходен по строению и свойствам с холерогеном. энтеротоксинами сальмонелл и некоторых других кишечных бактерий, препарат Средство может оказаться эффективным средством профилактики и лечения пищевых отравлений различными белковыми токсинами. Для подтверждения этого предположения целесообразно провести дополнительные эксперименты на лабораторных животных. получающих корм, содержащий добавки токсинов и Средства.

Были проведены также испытания эффективности использования Средства при попадании в организм ботулинического токсина типа А энтеральным путем.

В работе использованы следующие материалы и методы:
- препарат Средства, приготовленный методом твердофазного культивирования на растительном субстрате специального отселекционированного штамма Saccharamyses cervisille (vini) ВКПМ Y-511; 1,0 г сухого продукта содержит 1,0•10¹⁰ - 1,2•10¹⁰ клеток;
- глицериновый препарат ботулинического токсина типа А с концентрацией 1•10⁸ УЕ /мл (1УЕ соответствует 1 LD₅₀ токсина при внутрибрюшинном введении белым мышам).

Показатель LD₅₀ рассчитывали по формуле Кербера Ашмарина. Показатель ST₅₀ рассчитывали по формуле:

где ST₅₀ - среднее время до гибели n число павших животных за время t,
N - общее количество животных, взятых в опыт.

На первом этапе проводилась оценка сорбционной емкости Средства. Исследования выполнены в соответствии с ГОСТ 4453-74 "Уголь активированный осветляющий древесный порошкообразный" с использованием красителя метиленового синего. Сорбционная емкость составила 4,2 мг красителя на 1,0 г препарата.

На следующем этапе проведен анализ токсинсвязывающей активности Средства in vitro. С этой целью навеску 1,0 г препарата вносили в емкость, содержащую 10 мл ботулинического токсина типа А. разведенного до концентрации (1000•1,4) УЕ в 1 мл. Смесь тщательно перемешивали и выдерживали при температуре 37^oС в течение 45 минут, После чего проводили центрифугирование при 4000 об/мин в течение 20 минут. Надосадочную жидкость отбирали с целью определения в ней концентрации ботулотоксина при внутри-брюшинном введении белым мышам.

В качестве контроля использован полученный аналогичным образом препарат токсина, в который вместо Средства добавлялся 1,0 г талька.

Результаты анализа представлены в табл. 3.

На заключительном этапе проведен анализ токсиннейтрализующего действия Средства в опытах in vivo на белых мышах при пероральном способе введения препаратов.

Для этого белых мышей предварительно в течение 24 часов не кормили, после чего перорально вводили препарат ботулинического токсина типа А и сразу давали корм. Опытная группа животных получала смесь равных частей зерна и Средства, контрольная группа - только зерно. Потребленная доза Средства определялась по остатку корма через каждые 24 часа и составляла примерно 1,5.. . 2,0 грамма в сутки на 1 мышь. За животными наблюдали в течение 4 суток, из которых первые 2 суток - каждые 4 часа. По результатам гибели животных определялась величина LD₅₀ токсина для опытной и контрольной групп, а также показатель ST₅₀ (среднее время до гибели). Результаты данных исследований обобщены в табл.4.

Таким образом по результатам работы можно сделать следующие выводы:
1. Средство обладает сорбционной активностью в отношении ботулинического токсина типа А.

2 Средство, потребляемое непосредственно после введения ботулотоксина через рот, способено частично связывать и нейтрализовать его с эффективностью примерно 3000...5000 УЕ на 1,0 г препарата и увеличивать среднее время до гибели животных на 11...15 часов.

Ниже представлены данные об использовании Средства в схемах лечения при медико-экологической реабилитации детей г, Перми и области.

При медико-экологической реабилитации детей, страдающих экологически обусловленной хронической патологией ЛОР-органов и респираторными аллергозами, апробировано 5 схем лечения, являющихся базовыми в эли-минационной терапии:
I Средство + аевит
II. Карбактин + аевит
III. Средство + неоселен
IV. Карболонг + унитиол + аевит
V. Нутри-клинз
Средство - пищевая добавка, изготовленная из пшеничных отрубей, ферментированных специальным штаммом винныд дрожжей и обогащенных микроэлементами, витаминами Bi, Bg, В, РР, Оз, пектином и др.

Карбактин, карболонг - энтеросорбенты, созданные на основе активированного угля ФМ. Карбактин обладает большей угольной поверхностью и сорбционной способностью по сравнению с карболонгом.

Нутри-клинз - ферментированный пищевой очиститель с добавлением хлореллы (100% растительный препарат).

Неоселен - пищевая минеральная добавка на основе селена. Аевит - комплекс витаминов А и Е. Унитиол ~ антидотный препарат.

Способ применения.

Средство - по 1 ч.л. 3 раза в день за 30 мин до еды, в течение 14 дней.

Карбактин, карболонг - по 1 ч.л. (2 г) 3 раза в день в 0,5 стакане воды за 30 мин до еды, в течение 14 дней.

Нутри-клинз - детям 2-7 лет - по 1 кофейной ложке детям 7-12 лет- по 1 ч.л. на 1 стакан воды утром натощак, в течение 14 дней.

По окончании курса приема очищающих пищевых добавок и энтеросорбентов вводился в схему лечения аевит или неоселен в течение 14 дней, в общепринятых дозировках. Общая длительность курса медико-экологической реабилитации составляла 28 дней.

Всего обследовано 125 детей (5 групп по 25 человек) в возрасте от 6 до 10 лет, проживающих в г. Перми, характеризующемся многокомпонентной химической аэрогенной нагрузкой на население.

Анализ результатов апробации 5 схем лечения показал, что схемы лечения с использованием Средства более эффективны для выведения из организма избыточных количеств токсичных металлов (свинец, хром, марганец), по сравнению со схемами лечения II, IV и V. При этом снижение концентрации всех трех металлов после лечения зарегистрировано в среднем по группе на уровне 47,8-56,1% (схемы I и III) и на уровне 28,0-64,0% по отдельным металлам (схемы II, IV, V). Необходимо отметить, что схемы лечения со Средством эффективны и для нормализации баланса микроэлементов, находящихся в дефиците в организме. Так, при дефиците цинка использование схемы лечения III (Средство + неоселен) обусловило увеличение данного компонента в волосах на 23,6%, тогда как при схеме лечения IV (карболонг + унитиол + аевит) - на 17,4%, а при схеме лечения V (нутри-клинз) - дефицит цинка усугубился на 24%.

Для стимуляции выведения из организма ксенобиотиков (бензол, бутанол) эффективность использования схем лечения со Средством является сопоставимой с эффективностью других схем и соответствует 91-100%.

Такие компоненты, как толуол, м-, п-ксилол, формальдегид, более эффективно выводятся под воздействием энтеросорбентов на основе активированного угля. Использование Средства при данном способе применения является нецелесообразным, так как необходимо увеличение дозы и длительности приема.

Таким образом, обобщение результатов исследований позволяет оценить эффективность использования Средства преимущественно для выведения избыточных количеств токсичных металлов из организма и восстановления баланса микроэлементов и рекомендовать включение Средства в схемы лечения детей с экопатологией, обусловленной преимущественным воздействием металлов на организм.

ЦНИИ стоматологии проведены клинические испытания на добровольцах - больных и сотрудниках отделения врожденных и приобретенных дефектов и деформаций, страдающих различной выраженностью расстройства желудочно-кишечного тракта.

Средство принимали 3 раза в день по 2-3 ст. ложке до еды в течение 3-х дней. К концу первых суток приема отмечалось улучшение общего состояния, нормализовывался стул, исчезали приступы тошноты и рвоты. Уменьшалась или полностью проходила головная боль.

Препарат был испытан на 12 добровольцах и показал свою эффективность также при различного рода длительно текущих воспалительных процессах челюстно-лицевой области.

Желательно, чтобы препарат производился в виде различного рода сиропов и жидкостей.

Эффективность применения Средства в комплексной терапии аллергодерматозов.

Проводили лечение больных, страдающих аллергическими заболеваниями, назначая Средство вместо традиционно используемых энтеросорбентов (энтеродеза, полифепана, карболена и других). Средство является растительно-дрожжевым препаратом, который обладает выраженными абсорбционными свойствами, уникальным адаптогенным системным эффектом, обеспечивает коррекцию микробиоценоза кишечника за счет повышения представительства главной микрофлоры, обеспечивает профилактику холелитиаза.

За период с 1999-2001 г. под нашим наблюдением находилось 160 стационарных больных. Основную группу составили больные экземой - 67 пациентов, атопическим дерматитом страдали 54 чел., токсикодермией - 30, крапивницей - 9 чел. Продолжительность курса лечения составила от 2 до 4 недель, дозировка - по 1 столовой ложке 3 раза/сут. С целью получения отчетливого терапевтического эффекта от Средства мы не вводили в этой группе инфузионные дезинтоксикационные препараты (гемодез, мафусол). Сравнительная оценка эффективности терапии проводилась на основании клинической динамики кожного процесса. Наиболее выраженный эффект наблюдался у больных токсидермией. Эту группу, преимущественно, составили пациенты, страдающие медикаментозной, реже алиментарной токсидермией легкой и средней степени тяжести. Регресс высыпаний на фоне лечения Средством отмечался на 5-7 сутки. У больных крапивницей эффект был также положительным, тем более что у большинства из них при обследовании выявлялись заболевания ЖКТ (гастродуоденит, дискинезия желчевыводящих путей, хронический холецистит и т.д.). Обращает на себя внимание, что у больных экземой отмечалось уменьшение островоспалительных явлений, ограничение распространения высыпаний. В группе больных атопическим дерматитом отмечалась положительная динамика кожного процесса, а главное - уменьшение зуда. Лечение Средством положительно влияло на микрофлору кишечника. Таким образом, можно судить об эффективности данного препарата в комплексной терапии аллергодерматозов и рекомендовать расширить его использование в дерматологической практике.

Формула изобретения

1. Средство, обладающее иммуномодулирующей, энтеросорбционной, антитоксической и противовоспалительной активностью, содержащее стерильные отруби, выращенные на них микробные клетки штамма Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511, биологически-активные вещества и микроэлементы, отличающееся тем, что средство содержит микробные клетки штамма Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y - 511 в количестве, 2,55•10¹⁰ - 2,65•10¹⁰ микробных тел на 1 г отрубей, в качестве отрубей средство содержит отруби пшеничные - пищевые, стерильные, красно-желтого цвета, без постороннего запаха с количеством микроэлементов 4,8 - 5,5%, при этом в качестве микроэлементов средство содержит 0,10 - 0,15 мас.% кальция, 1,00 - 1,40 мас.% фосфора, 0,08 - 0,10 мас. % натрия, (106 - 109) • 10^-6 мас.% цинка и (114 - 118)•10^-6 мас.% железа.

2. Способ получения средства, обладающего иммуномодулирующей, энтеросорбционной, антитоксической и противовоспалительной активностью, включающий культивирование Saccharamyces cerevisae (vini) ВКМП Y-511 на отрубях путем их предварительного увлажнения водой и последующей тепловой обработки среды, стерилизации конечного продукта, отличающийся тем, что отруби увлажняют перед культивированием водой без привкуса и запаха, с мутностью менее 0,1, рН 8,7, не содержащей хлора, и окисляемостью перманганата мгО/дм³ не более 1,6 мг/дм³, жесткостью 1,5 мг/дм³, общей минерализацией не более 384 мг/дм³, а тепловую обработку при культивировании ведут путем равномерного прогрева всей культивируемой среды.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5

NF4A Восстановление действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение

Дата, с которой действие патента восстановлено: 20.01.2008

Извещение опубликовано: 20.01.2008        БИ: 02/2008

NF4A Восстановление действия патента

Дата, с которой действие патента восстановлено: 27.09.2011

Дата публикации: 27.09.2011

---