Способ инактивации вируса спида

 

Изобретение относится к медицине и предназначено для инактивации вируса СПИДа. Вирусный материал облучают модулированным светом на длинах волн 516,7; 517,2; 636,2 нм с частотой модуляции 9,4-9,5 Гц. Способ позволяет повысить эффективность инактивации вируса СПИДа.

Изобретение относится к вирусологии, в частности к средствам лучевой нейтрализации вируса СПИД.

Известен способ инактивации вируса СПИДа с помощью облучения его светом [1] . Сущность изобретения заключается в том, что вирусный материал облучают комбинированным светом, соответствующим электронным переходам атомов магния 516,7; 517,2; 518,2 нм и атомов цинка 632,2 нм в течение 30-60 мин, в результате чего у вируса СПИДа происходят существенные изменения как в нуклеиновых кислотах, так и в ферменте обратной транскриптазы (ревертазы), что приводит к инактивации вируса.

Недостатком указанного способа является низкая инактивация вируса СПИДа.

Задачей изобретения является большая инактивация ферментной системы вируса.

Известно, что в качестве генетического материала вируса СПИД является молекула РНК, содержащая, как известно, пять атомов магния.

Известно также, что фермент обратная транскриптаза содержит в своем активном центре атом цинка. Было установлено, что успешное функционирование как молекулы РНК, так и фермента обратной транскриптазы будет только в том случае если электронные оболочки атомов магния и цинка будут находиться в спокойном (невозмущенном) состоянии.

В этой связи можно полагать, что при действии света с длиной волны, соответствующей электронным переходам атомов магния и цинка, произойдут существенные нарушения нормальной работы как обратной транскриптазы, так и самой молекулы РНК. Причем инактивация будет эффективнее, если облучение производить не сплошным светом, как это осуществлялось в [1], а прерывистым (модулированным) с определенной частотой.

Это позволит сильнее "расшатать" систему обратная транскриптаза - РНК, что приведет к большей инактивации вируса.

В этой связи был выполнен сравнительный эксперимент.

На модели клеточных лимфобластоидных клеточных линий СЕМ и МТ-4, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) - штамм ВИЧ-1/В RU (острая инфекция) исследована возможность лучевой нейтрализации вируса.

Использовались следующие материалы и методы.

Клетки. Клетки МТ-4 выращивали в виде суспензии 100 мкг/мл гентамицина в концентрации 300000-500000 клеток в 1 мл.

Вирус. Штамм ВИЧ - 1/В RU получен из музея штаммов института вирусологии РАМП.

Перед инфицированием чувствительных к ВИЧ-1 клеток вирусный материал облучался (сплошным) светом на длинах волн 516,7; 517,2; 518,2; 636,2 нм, а затем этот же вирусный материал на этих же длинах волн облучался модулированным светом. Частота модуляции находилась в диапазоне от 1,0 до 10,0 Гц.

В качестве контроля использовали необлученный вирус (множественность инфекции 0,1lg ТЦЦ/50 клетка) отрицательно незаряженные клетки.

Инфицированные культуры инкубировали в течение 4-7 суток в атмосфере с 5% СО₂ и 98% влажности при температуре 37^oС.

В результате выполненного эксперимента оказалось, что облучение вирусного материала модулированным светом на указанных длинах волн существенно снизило образование вирусиндуцированных синцитиев и уровня вирусного агента.

Сравнительный анализ показал, что облучение вирусного материала модулированным светом повышает инактивацию на 20-25% по сравнению с инактивацией, вызванной сплошным светом.

Причем наилучшие результаты были получены при частоте модуляции 9,4-9,5 Гц.

Источник информации 1. Федченко П. П. , Туев В.В. Способ ннактивацни вируса СПИД. Патент 2097427 от 27.09.1997 г.

Формула изобретения

Способ инактивации вируса СПИДа, включающий воздействие света на вирусный материал, отличающийся тем, что вирусный материал облучают модулированным светом на длинах волн 516,7; 517,2; 636,2 нм, с частотой модуляции 9,4-9,5 Гц.