Способ производства иммунотропного стерильного апирогенного толерантного препарата на основе натриевой соли низкомолекулярной нативной дезоксирибонуклеиновой кислоты

 

Изобретение относится к новым высокопроизводительным технологиям, позволяющим получать иммунотропные стерильные высококачественные безопасные лекарственные препараты на основе натрия дезоксирибонуклеата, полученного из обезжиренных молок осетровых рыб, лососевых рыб, тимуса теленка, крови цыплят. Изобретение обеспечивает повышение терапевтической эффективности препарата, а также снижение экологической нагрузки от производства заявленного препарата. 1 табл., 1 ил.

Изобретение относится к новым технологиям получения биологически-активных веществ из животного сырья и может быть использовано в биотехнологии и химико-фармацевтической промышленности, а получаемый иммунотропный стерильный апирогенный толерантный натрия дезоксирибонуклеат - в медицине, ветеринарии, парфюмерии, косметологии и научно-исследовательской практике.

Современные экологические требования к биологическим производствам накладывают ограничения на содержание биологически активных веществ в сточных водах, что требует создания дополнительных очистных сооружений с удорожанием процесса, либо использования технологий, основанных на замкнутом цикле или рецикле.

Производство фармацевтических субстанций должно проводиться в условиях, которые требуют использования нейтральных стойких материалов при контакте с получаемым продуктом. Конструкция и материал оборудования должны допускать тщательную обработку и быть устойчивыми к дезинфицирующим реагентам, схема процесса должна включать стерилизующее оборудование, а также другие условия, не являющиеся предметом заявляемого способа.

Использование типовых магнитострикторных излучателей ультразвука в производстве низкомолекулярной ДНК ограничивается материалом используемой мембраны. Современный материал мембраны - нержавеющая сталь с повышенным содержанием никеля - не имеет разрешения к применению в фармацевтической промышленности. При работе мембрана подвергается эрозии и частицы металла могут попадать в конечный продукт, поэтому при современных требованиях к препаратам необходима разработка новых условий ультразвуковой обработки.

Известен ряд способов получения натрия дезоксирибонуклеата. Основными недостатками большинства из них является то, что эти способы, как правило, маломасштабные, а получение целевого продукта в промышленных масштабах не учитывает повышенные современные требования, предъявляемые к фармацевтическим производствам и к медицинскому оборудованию, а также к лекарственным препаратам.

Международные правила производства фармацевтических субстанций и готовых лекарственных форм на их основе жестко ограничивают содержание балластных и примесных веществ в них.

Известен способ выделения натриевой соли ДНК (Патент RU 61 К 35/60, С 07 Н 21/04 №2017496, 1990 г.), сущность которого заключается в увеличении выхода целевого продукта. Однако получаемая натриевая соль ДНК содержит высокие примеси белка (1,5%) и полисахаридов (2%), что вызывает опасность пирогенных реакций в организме, при использовании ее в лекарственных препаратах и не соответствует современным требованиям, предъявляемым к лекарственным средствам.

Известен способ получения порошка нативной натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты (Патент RU С 07 Н 21/04 №2041885, 1996 г.). Предлагаемый способ необоснованно осложнен повторными технологическими операциями, что ведет к увеличению длительности технологического процесса, дополнительным затратам на энергоносители, к существенным потерям целевого продукта, выход которого составляет всего 3,9% от исходного сырья, т.е. 50% от содержания ДНК в сырье, подобный процесс приводит к выбросу загрязненных сточных вод и получению продукта с пониженной биологической активностью.

Таким образом, предлагаемый способ является дорогостоящим, длительным и низкопроизводительным. Кроме того, качество получаемого продукта не соответствует современным требованиям, предъявляемым к субстанциям, используемым в производстве лекарственных средств.

Известен способ получения стерильного раствора нативной натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты в растворе натрия хлорида (Патент RU С 07 Н 21/04 №2055837, 1996 г.). Предлагаемый способ в функциональной схеме установки производства целевого продукта предполагает двукратное использование ультразвуковой обработки в стриктерах из нержавеющей стали, что значительно уменьшает выход годного (по мол. массе) конечного продукта с повышенным содержанием примесей. Конечный продукт характеризуется высоким содержанием белков (0,09 г/л) и других балластных веществ, что препятствует его использованию в медицинской практике.

Наиболее близкими к предлагаемому изобретению являются способ производства натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты из животного сырья и установка для его осуществления (Патент RU С 07 Н 21/04 №2005724, 1993 г.).

Однако современные требования, предъявляемые к производству фармацевтических субстанций, диктуют более жесткие условия как к осуществлению технологического процесса (использование инертных материалов оборудования, асептических условий производства, минимизация отходов и т.д.), так и к качеству целевого продукта (высокое содержание основного вещества, минимально-допустимые примеси) для использования его в фармацевтической промышленности для производства лекарственных препаратов.

Задачей настоящего изобретения является разработка промышленного, высокопродуктивного способа производства фармацевтического препарата на основе натрия дезоксирибонуклеата, соответствующего современным, повышенным требованиям по терапевтической эффективности и безопасности, предъявляемым к фармацевтическим препаратам, на оборудовании, соответствующем современным требованиям фармацевтических производств: с минимальными потерями, оптимальными расходами реагентов, позволяющими снизить экологическую нагрузку от данного производства на окружающую среду, с учетом современных требований к организации соответствующих производств, касающихся защиты продукта от микробной контаминации в ходе ведения процесса.

Поставленная задача достигается следующими новыми техническими решениями.

1. Введением 2-х стадий гомогенизации:

а) на первой стадии: очистка гомогената, центрифугированием в отстойной центрифуге с отделением и удалением надосадочной жидкости, содержащей балластные вещества и жиры,

б) на второй стадии: повторное гомогенизирование очищенного субстрата с последующей обработкой 3% раствором ДДЦ в 45% этиловом спирте (уменьшение концетрации ДДЦ в 2 раза); значительное охлаждение реакционной массы (до 15°С) и использование меньшего количества ССЦ.

2. а) Ультразвуковой обработкой охлажденной реакционной массы с амплитудой колебаний 4-10 мкм в ваннах с пьезокерамическими излучателями, установленными в днище, с равномерным распределением по всей площади.

б) Конструкцией днища ультразвуковой ванны, не имеющей выступающих частей и углублений. Материал ванны - полированная пищевая нержавеющая сталь, разрешенная к применению в фармацевтических производствах.

3. Введением дополнительной промывки кизельгура пермеатом (со стадии концентрирования) с последующим его возвратом на стадию концентрирования.

4. Введением процедуры стерилизующей фильтрации (поры 0,04 мкм полученного концентрата для отделения микробов и механических примесей от концентрата готового продукта перед стадией выделения этиловым спиртом.

5. Сокращением срока сушки осадка в асептических условиях до 4 ч.

6. Приготовлением стерильных растворов и стерильным розливом в терапевтических дозах лекарственных препаратов.

Технический результат, достигаемый изобретением, заключается в разработке способа промышленного производства лекарственного препарата на основе натрия дезоксирибонуклеата, соответствующего современным требованиям фармацевтического производства с оптимальным расходом реагентов и сырья, с минимальными отходами, с повышенным выходом иммунотропного продукта повышенного качества со сниженным негативным воздействием на экологию окружающей среды.

Способ осуществляют следующим образом: животное сырье (молоки осетровых или лососевых рыб, тимус теленка, эритроциты цыплят и т.д.) в измельченном состоянии гомогенизируют в цитратно-солевом растворе, затем гомогенат центрифугируют в отстойной центрифуге, далее надосадочную жидкость декантируют и удаляют, полученный субстрат повторно гомогенизируют, обрабатывают гомогенат детергентом и концентрированным раствором натрия хлорида, при повышенной температуре; затем реакционную смесь охлаждают до 15°С, обрабатывают ультразвуком, в ваннах с пьезокерамическими излучателями в течение 10-80 минут с обычной частотой и интенсивностью тока, с амплитудой колебаний 4-10 мкм, ″озвученную″ массу смешивают с кизельгуром в соотношении соответственно 5:1-25:1 (мас.), жидкую фазу отделяют фильтрованием, фильтрующий осадок дополнительно промывают пермеатом (со стадии концентрирования), суммарный фильтрат концентрируют баромембранной фильтрацией и концентрат фильтруют через стерилизующий фильтр; натрия дезоксирибонуклеат осаждают из концентрата этиловым спиртом и осадок высушивают в асептических условиях при 20-60°С, в течение 4 ч, при непрерывной подаче в сушильную камеру стерильного воздуха/азота.

Выход стерильной фармацевтической субстанции натрия дезоксирибонуклеата в виде аморфного белого порошка без запаха, хорошо растворимого в воде, составляет до 7% от загруженного сырья и имеет следующие физико-химические характеристики:

- содержание основного вещества не менее 105,5%, остаточная влажность 7-10%;

- содержание балластных веществ:

белок не более 0,5%,

РНК не более 0,5%,

- полисахариды не более 0,1%;

- гипохромный эффект не менее 40%.

Субстанция используется для производства стерильных растворов 0,25% и 1,5% натрия дезоксирибонуклеата в 0,1% водном растворе натрия хлорида.

Производство натрия дезоксирибонуклеата в промышленных масштабах реализуется посредством предлагаемой установки, показанной на чертеже.

Ниже изобретение поясняется на конкретных примерах его выполнения.

Пример 1. 1 кг молок лососевых рыб измельчают на мясорубке, гомогенизируют в 2 литрах цитратно-солевого раствора, гомогенат центрифугируют в отстойной центрифуге при 2500 об/мин, надосадочную жидкость декантируют и удаляют, осадок гомогенизируют повторно в 2 литрах цитратно-солевого раствора; гомогенат помещают в реактор с подогретым цитратно-солевым раствором (7 литров), добавляют 1,9 кг 3% раствора додецилсульфата натрия в 45% этиловом спирте и выдерживают массу при 60°С в течение 1,5 часов с перемешиванием. Затем добавляют 14.1 кг 5М раствора натрия хлорида и продолжают перемешивание при той же температуре 1,5 часа. После этого реакционную массу охлаждают до температуры не выше 15°С. Охлажденную массу (26 кг) обрабатывают ультразвуком в течение 80 мин, с амплитудой колебаний 8 мкм. Озвученную массу смешивают с кизельгуром в соотношении 8:1 (мас.), далее отделяют жидкую фазу на нутч-фильтре осадок промывают пермеатом (10 л) и объединяют с фильтратом. После дополнительной микрофильтрации фильтрат концентрируют (баромембранным методом) на мембране с размером пор 0,04 мкм. Получают 5 кг концентрата, содержащего 1,1 мас.% натриевой соли дезоксирибонуклеата. Целевой продукт осаждают из концентрата этиловым спиртом. Полученный осадок отделяют центрифугированием и сушат при 20-40°С в течение 4 часов.

Получают 65 г натриевой соли дезоксирибонуклеата, имеющей следующие характеристики: мол. масса 480 кД, содержание белка 0,2%, содержание (РНК+полисахариды) - 0,2%, влажность 8%, гиперхромный эффект 44%. Расчетное количество порошка отвешивают в асептических условиях, растворяют в 0,1% стерильном растворе натрия хлорида и стерильно разливают в терапевтических дозах.

Аналитический паспорт полученного препарата:

Подлинность - соответствует;

Цветность - бесцветный;

Прозрачность - соответствует;

Стерильность - стерилен;

Токсичность - нетоксичен;

Пирогенность - апирогенен;

Содержание натрия дезоксирибонуклеата - 0,015 г/мл;

рН - 6,8;

Содержание натрия хлорида 0,08%;

Гиперхромный эффект 42%;

Содержание РНК 0,2%;

Содержание белка 0,2%.

Пример 2. 1 кг молок осетровых рыб измельчают на мясорубке, гомогенизируют в 2 литрах цитратно-солевого раствора, гомогенат центрифугируют в отстойной центрифуге при 2500 об/мин, надосадочную жидкость декантируют и удаляют, осадок гомогенизируют повторно в 2 литрах цитратно-солевого раствора; гомогенат помещают в реактор с подогретым цитратно-солевым раствором (7 литров), добавляют 1,9 кг 3% раствора додецилсульфата натрия в 45% этиловом спирте и выдерживают массу при 60°С в течение 1,5 часов при перемешивании. Затем добавляют 14.1 кг 5М раствора натрия хлорида и продолжают перемешивание при той же температуре 1,5 часа; далее реакционную смесь охлаждают до температуры не выше 15°С, далее в течение 80 мин обрабатывают ультразвуком с амплитудой колебаний 7 мкм. Озвученную массу смешивают с кизельгуром в соотношении 8:1 (мас.), и отделяют жидкую фазу на нутч-фильтре. Осадок на фильтре промывают пермеатом (10 кг), промывную жидкость объединяют с фильтратом.

После дополнительной микрофильтрации фильтрат концентрируют (баромембранным методом) на мембране с размером пор 0,04 мкм. Получают 5 кг концентрата, содержащего 1,3 мас.% натриевой соли дезоксирибонуклеата. Натрия дезоксирибонуклеат выделяют осаждением из концентрата этиловым спиртом. Полученный осадок отделяют центрифугированием и сушат при 20-40°С, в течение 4 часов.

Получают 66 г натриевой соли дезоксирибонуклеата, имеющей следующие характеристики: мол. масса 420 кД, содержание белка 0,3%, содержание (РНК+полисахариды) 0,4%, влажность 7%, гиперхромный эффект 44%. Расчетное количество порошка (для приготовления 1,5% раствора) отвешивают в асептических условиях, растворяют в 0,1% стерильном растворе натрия хлорида и стерильно разливают в терапевтических дозах.

Аналитический паспорт полученного препарата:

Подлинность - соответствует;

Цветность - бесцветный;

Прозрачность - соответствует;

Стерильность - стерилен;

Токсичность - нетоксичен;

Пирогенность - апирогенен;

Содержание натрия дезоксирибонуклеата 0,014 г/мл;

рН 7,0;

Содержание натрия хлорида 0,12%;

Гиперхромный эффект 44%;

Содержание РНК 0,4%;

Содержание белка 0,3%.

Пример 3. 1 кг тимуса теленка измельчают на мясорубке, гомогенизируют в 2 литрах цитратно-солевого раствора, гомогенат центрифугируют в отстойной центрифуге при 2500 об/мин, надосадочную жидкость декантируют и удаляют, осадок гомогенизируют повторно в 2 литрах цитратно-солевого раствора; гомогенат помещают в реактор с подогретым цитратно-солевым раствором (7 литров), добавляют 1,9 кг 3% раствора додецилсульфата натрия в 45% этиловом спирте и выдерживают массу при 60°С в течение 1,5 часов с перемешиванием. Затем добавляют 14.1 кг 5М раствора натрия хлорида и продолжают перемешивание при той же температуре 1,5 часа. После этого реакционную смесь охлаждают до температуры не выше 15°С. Охлажденную массу (26 кг) обрабатывают ультразвуком в течение 80 мин с амплитудой колебаний 10 мкм. Озвученную массу смешивают с кизельгуром в соотношении 8:1 (мас.), далее отделяют жидкую фазу на нутч-фильтре, осадок промывают пермеатом 10 л и объединяют с фильтратом. После дополнительной микрофильтрации фильтрат концентрируют (баромембранным методом) на мембране с размером пор 0,04 мкм. Получают 5 кг концентрата, содержащего 1,1 мас.% натриевой соли дезоксирибонуклеата. Целевой продукт осаждают из концентрата этиловым спиртом. Полученный осадок отделяют центрифугированием и сушат при 20-40°С в течение 4 часов.

Получают 70 г натриевой соли дезоксирибонуклеата, имеющей следующие характеристики: характерист. мол. масса 380 кД, содержание белка 0,4%, содержание (РНК+полисахариды) 0,8% влажность 9%, гиперхромный эффект 44%. Расчетное количество порошка отвешивают в асептических условиях, растворяют в 0,1% стерильном растворе натрия хлорида и стерильно разливают в терапевтических дозах (1,5% раствор).

Аналитический паспорт полученного препарата:

Подлинность - соответствует;

Цветность - бесцветный;

Прозрачность - соответствует;

Стерильность - стерилен;

Токсичность - нетоксичен;

Пирогенность - апирогенен;

Содержание натрия дезоксирибонуклеата 0,015 г/мл;

рН 7,0;

Содержание натрия хлорида 0,09%;

Гиперхромный эффект 45%;

Содержание РНК 0,3%;

Содержание белка 0,4%.

Пример 4. 1 кг крови цыплят гомогенизируют в 2 литрах цитратно-солевого раствора, гомогенат центрифугируют в отстойной центрифуге при 2500 об/мин, надосадочную жидкость декантируют и удаляют, осадок гомогенизируют повторно в 2 литрах цитратно-солевого раствора; гомогенат помещают в реактор с подогретым цитратно-солевым раствором (7 литров), добавляют 1,9 кг 3% раствора додецилсульфата натрия в 45% этиловом спирте и выдерживают массу при 60°С в течение 1,5 часов при перемешивании. Затем добавляют 14.1 кг 5М раствора натрия хлорида и продолжают перемешивание при той же температуре 1,5 часа; далее реакционную смесь охлаждают до температуры не выше 15°С, далее в течение 80 мин обрабатывают ультразвуком с амплитудой колебаний 4 мкм. Озвученную массу смешивают с кизельгуром в соотношении 8:1 (мас.) и отделяют жидкую фазу на нутч-фильтре. Осадок на фильтре промывают пермеатом (10 кг), промывную жидкость объединяют с фильтратом. После дополнительной микрофильтрации фильтрат концентрируют (баромембранным методом) на мембране с размером пор 0,04 мкм. Получают 5 кг концентрата, содержащего 1,3 мас.% натриевой соли дезоксирибонуклеата. Натрия дезоксирибонуклеат выделяют осаждением из концентрата этиловым спиртом. Полученный осадок отделяют центрифугированием и сушат при 20-40°С в течение 4 часов.

Получают 69 г натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты, имеющей следующие характеристики: мол.масса 450 кД, содержание белка 0,2%, содержание (РНК+полисахариды) 0,3%, влажность 8,5%, гиперхромный эффект 40%. Расчетное количество порошка дезоксирибонуклеата натрия отвешивают в асептических условиях, растворяют в 0,1% стерильном водном растворе натрия хлорида и стерильно разливают в терапевтических дозах (1,5% раствор).

Аналитический паспорт полученного препарата:

Подлинность - соответствует;

Цветность - бесцветный;

Прозрачность - соответствует;

Стерильность - стерилен;

Токсичность - нетоксичен;

Пирогенность - апирогенен;

Содержание натрия дезоксирибонуклеата 0,016 г/мл;

рН 6,7;

Содержание натрия хлорида 0,11%;

Гиперхромный эффект 46%;

Содержание РНК 0,3%;

Содержание белка 0,3%.

Пример 5. До стадии концентрирования, как в примере 3.

После дополнительной микрофильтрации фильтрат концентрируют (баромембранным методом) на мембране с размером пор 0,04 мкм. Получают 5 кг концентрата, содержащего 1,3 мас.% натриевой соли дезоксирибонуклеата. Концентрат фильтруют через стерилизующую мембрану 0,2 мкм и передают в емкость - кристаллизатор, находящийся в асептических условиях. Целевой продукт выделяют путем смешения концентрата со стерильным этиловым спиртом. Полученный осадок отделяют центрифугированием и сушат при 20-40°С в течение 4 часов в асептических условиях при непрерывной подаче стерильного осушенного воздуха в камеру - сушку. (Асептические условия - герметичное помещение с контролируемыми параметрами воздуха: кратность воздухообмена не мене 20, температура 21-24°С, запыленность - не более 350000 частиц/м³ (зона С) и не более 3500 ч/м³ (зона А), содержание микробов не более 100 КОЕ/м³ (зона С) и менее 1 КОЕ/м³ (зона А)).

Получают 66 г стерильной натриевой соли дезоксирибонуклеата, имеющей следующие характеристики: мол. масса 450 кД, содержание белка 0,4%, содержание РНК и полисахаридов 1,2%, влажность 9%, гиперхромный эффект 44%. Расчетное количество порошка отвешивают в асептических условиях, растворяют в 0,1% стерильном растворе натрия хлорида и стерильно разливают в терапевтических дозах (0,5% раствор).

Аналитический паспорт полученного препарата:

Подлинность - соответствует;

Прозрачность - соответствует;

Стерильность - стерилен;

Содержание натрия дезоксирибонуклеата - 0,245-0,255%;

рН 6,8;

Содержание натрия хлорида 0,08%.

Таким образом, заявленный способ производства стерильной фармацевтической субстанции натрия дезоксирибонуклеата позволяет получать продукт более высокого качества очистки (снижение содержания балластного белка не более 0,5%, РНК+полисахариды до 2,0%, влаги до 10%) без ухудшения общих физико-химических свойств, снизить потребление дорогостоящих и экологически небезопасных реагентов (додецилсульфата натрия в два раза, кизельгура на 20%), увеличить технологичность оборудования и облегчить его обслуживание (ванны с пьезокерамическими излучателями не выделяют токсичные примеси, дольше служат, меньше греются, лучше моются и дезинфицируются), получить продукт, соответствующий современным повышенным требованиям к фармацевтическим субстанциям и препаратам (использование стерилизующего оборудования и помещений с асептическими условиями исключает возможность микробной контаминации готового продукта и увеличивает срок хранения субстанции и срок действия препарата). Предлагаемая установка позволяет осуществить заявленный способ производства иммунотропного стерильного препарата.

На представленном чертеже изображена функциональная схема предложенной установки.

Установка для производства стерильного апирогенного препарата натрия дезоксирибонуклеата из животного сырья включает разделочный стол с весами 1, мясорубку 2 с электроприводом, микроизмельчитель ткани 3, отстойную центрифугу 4, реактор для варки реакционной массы 5, реактор охлаждения 6, устройство для ультразвуковой обработки 7, смеситель для перемешивания реакционной массы с кизельгуром 8, устройство для отделения жидкой фазы 9, мембранное устройство для осветляющей микрофильтрации 10, мембранное устройство для концентрирования жидкой фазы 11, мембранное устройство для стерилизующей фильтрации 12, реактор для осаждения целевого продукта этиловым спиртом 13, оборудование для отделения и высушивания осадка, отстойная центрифуга 14, воронка Шотта 15, сушильный шкаф 16, емкость для 0,1% раствора натрия хлорида, емкости стерильных растворов 22, 23, 24 расчетных концентраций с дозаторами розлива.

Кроме того, установка содержит мерные емкости 17 (на схеме 6 шт) для отмеривания жидкостей, смесители для приготовления растворов и суспензий при комнатной температуре 18, реакторы для приготовления растворов и смесей при температуре, отличной от комнатной 19, и емкости для сбора промежуточных продуктов и отходов производства 20.

Аппаратурное и технологическое усовершенствование производства натрия дезоксирибонуклеата позволяют повысить объем выпуска технологической линии с проектной мощностью 10 кг/год до 20 кг/год.

Контролируемая молекулярная масса, сохранность вторичной структуры и высокая степень очистки гарантируют высокую биологическую активность, высокую иммунотропность и пролонгированную стабильность лекарственного препарата.

В таблице представлены сравнительные данные субстанций по прототипу и предлагаемому изобретению. Из таблицы следует, что качество препарата по предлагаемому изобретению превосходит прототип.

Формула изобретения

Способ производства иммунотропного апирогенного толерантного препарата на основе натриевой соли низкомолекулярной дезоксирибонуклеиновой кислоты, заключающийся в том, что обезжиренные молоки осетровых рыб, лососевых рыб, тимуса теленка, крови цыплят гомогенизируют в цитратно-солевом растворе, гомогенат центрифугируют в отстойной центрифуге при 2500 об/мин, надосадочную жидкость удаляют, субстрат повторно гомогенезируют, далее очищенный гомогенат инкубируют в присутствии 3% детергента, в процессе непрерывного перемешивания при повышенной температуре, в реакционную массу добавляют концентрированный раствор натрия хлорида, реакционную массу охлаждают до температуры ниже комнатной (15°С), обрабатывают ультразвуком, в ваннах с пьезокерамическими излучателями при амплитуде колебаний 4-10 мкм; далее сорбентом, отделяют жидкую фазу, сорбент элюируют пермеатом, элюат, объединенный с жидкой фазой, микрофильтруют, концентрируют, спиртом выделяют осадок натрия дезоксирибонуклеата, центрифугируют, отделяют от жидкой фазы, высушивают в течение 4 ч в асептических условиях при 40°С, аморфный белый порошок с молекулярной массой 270-500 кД, гиперхромным эффектом не ниже 40%, содержанием белка до 0,5%, суммарным содержанием полисахаридов и РНК не более 2%, растворяют в 0,1%-ном водном растворе натрия хлорида в заданных концентрациях и стерильно разливают в терапевтических дозах, с содержанием Na-ДНК для 1,5% концентрации 0,14-0,16 г/мл; рН 6,2-7,2, гиперхромизмом 40-46%, содержанием белка 0,2-0,5%, содержанием натрия хлорида 0,08-012%.

РИСУНКИРисунок 1