Композиция для инъекций на основе кристаллической -модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2н-1,4-бензодиазепин-2-она, обладающая транквилизирующим действием и способ ее получения
Владельцы патента RU 2440120:
Государственное учебно-научное учреждение Химический факультет Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова (RU)
Сергеев Глеб Борисович (RU)
Группа изобретений относится к области медицины, в частности к фармации. Композиция для инъекций, обладающая транквилизирующим действием, содержит компоненты при следующем соотношении, мас.%: кристаллическая β-модификация 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она - 0,05-0,15, поливинилпирролидон - 0,50-1,20, «Твин-80» - 2,00-10,00, глицерин - 5,00-15,00, натрий пиросернистокислый - 0,30-1,20, раствор натра едкого - до рН 6,0-7,5, вода - остальное. Способ получения композиции заключается в том, что «Твин-80» и глицерин смешивают, нагревают до 70-90°С и растворяют кристаллическую β-модификацию 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она. Полученную смесь приливают в нагретый до 40-90°С смешанный водный раствор натрия пиросернистокислого и поливинилпирролидона, охлаждают до комнатной температуры, фильтруют, доводят рН до 6,0-7,5 раствором натра едкого, разливают и стерилизуют. Данная группа изобретений обеспечивает композицию, обладающую увеличенным анксиолитическим действием и уменьшенным седативным эффектом по сравнению с композицией на основе фармакопейного феназепама. 2 н.п. ф-лы, 2 табл.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и может быть использовано в медицине в качестве лекарственного средства, обладающего выраженным миорелаксантным, снотворным, противосудорожным и анксиолитическим действием.
Известна твердая композиция на основе 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она (феназепама) при следующем соотношении компонентов, мас.%: феназепам 0,3-1,0; крахмал картофельный 20,0-40,0; желатин 0,1-1,0; кальций стеариново-кислый и/или кислота стеариновая 0,3-1,0; сахар молочный - остальное (патент РФ №2224521 С2 от 12.03.2002). Однако известно, что биодоступность действующего вещества из твердых лекарственных форм значительно хуже, чем из растворов или эмульсий.
Наиболее близкой по технической сущности и достигаемому результату является композиция (раствор для инъекций) на основе 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она (феназепам) и способ ее получения. Композиция содержит действующее вещество - феназепам, поливинилпирролидон, «Твин-80», глицерин, натрий пиросернистокислый, раствор натра едкого и воду, при следующем соотношении компонентов, мас.%: феназепам 0,05-0,15; поливинилпирролидон 0,5-1,2; «Твин-80» 2,0-10,0; глицерин 5,0-15,0; натрий пиросернистокислый 0,3-1,2; раствор натра едкого до рН 6,0-7,5; вода - остальное (патент РФ №2224522 С2 от 12.03.2002). Способ получения этой композиции заключается в том, что действующее вещество - феназепам смешивают с «Твин-80», полученную смесь перемешивают с глицерином при температуре 70-90°С, добавляют натрий пиросернистокислый, поливинилпирролидон, раствор едкого натра в количестве, обеспечивающим рН 6,0-7,5, и воду, повторно перемешивают и фильтруют, причем предпочтительно используют 0,1-1,0 М раствор натра едкого.
Однако в этой композиции используют фармакопейный феназепам, который кроме транквилизирующего действия обладает побочными эффектами и, в частности, седативным эффектом - угнетением поведения и подавлением сознания пациента, вызванным лекарственным средством.
Задачей настоящего изобретения является получение композиции для инъекций на основе 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она с увеличенным анксиолитическим действием и уменьшенным седативным эффектом.
Технический результат, который может быть получен при использовании указанной композиции и способа ее получения, является увеличение транквилизирующего действия без угнетающего седативного эффекта.
Поставленная задача решается предложенной композицией для инъекций, обладающей транквилизирующим действием, содержащей кристаллическую β-модификацию 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она, характеризующуюся следующим набором межплоскостных расстояний d, (Е) и соответствующих им интенсивностей I/I100 (%): 14,719-5,6%; 8,308-2,8%; 7,388-20,9%; 6,878-1,3%; 6,334-3,5%; 5,840-19,1%; 5,424-1,4%; 5,227-3,3%; 4,808-66,3%; 4,574-15,9%; 4,530-11,8%; 4,480-6,8%; 4,354-2,8%; 4,221-14,3%; 4,098-100%; 3,994-15,9%; 3,900-18,9%; 3,772-39,9%; 3,570-6,8%; 3,502-49,5%; 3,417-14,2%; 3,317-15,0%; 3,257-1,3%; 3,172-10,7%; 3,109-2,8%; 3,052-1,5%; 2,875-14,3%; 2,789-4,5%; 2,739-3,9%; 2,662-3,7%; 2,622-5,2%; 2,523-9,5%; 2,477-4,6%; 2,428-4,4%; 2,355-3,4%; 2,306-2,0%; 2,290-1,2%; 2,158-3,7%; 2,110-2,5%; 2,075-2,2%; 2,037-1,2%; 1,951-1,7%; 1,936-1,3%; 1,898-2,9%; 1,715-0,5%; 1,776-1,4%; 1,763-1,5%; 1,622-1,5% при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| Кристаллическая β- | |
| модификация 7-бром-1,3-дигидро-5- | |
| (2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она | 0,05-0,15 |
| Поливинилпирролидон | 0,50-1,20 |
| «Твин-80» | 2,00-10,00 |
| Глицерин | 5,00-15,00 |
| Натрий пиросернистокислый | 0,30-1,20 |
| Раствор натра едкого | до рН 6,0-7,5 |
| Вода | Остальное |
Поставленная задача решается также предложенным способом получения композиции для инъекций, обладающей транквилизирующим действием, содержащей кристаллическую β-модификацию 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она, характеризующуюся вышеперечисленным набором межплоскостных расстояний и соответствующих им интенсивностей, смешиванием «Твина-80» и глицерина, нагреванием до 70-90°С, растворением кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она, приливанием полученной смеси при интенсивном перемешивании в предварительно приготовленный и нагретый до 40-90°С смешанный водный раствор натрия пиросернистокислого и поливинилпирролидона, с последующим охлаждением до комнатной температуры, фильтрованием, доведением рН до 6,0-7, 5 (0,1-1,0) М раствором едкого натра, розливом и стерилизацией.
Действующим веществом в данной композиции является вновь синтезированная кристаллическая β-модификация 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она, которую предварительно получали испарением исходной субстанцию феназепама при температуре 80…200°С в вакууме 5…5×10-4 Торр в токе инертного газа со скоростью потока от 10 до 100 мл/мин и конденсировали на охлажденную до -196°С…+25°С поверхность.
Кристаллическая β-модификация 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она представляет собой легкий пушистый порошок белого цвета, практически не растворимый в воде, малорастворимый в этиловом спирте (95-96%) и умеренно растворимый в хлороформе и характеризуется ИК-спектрами, результатами термоаналитических исследований и данными РФА: набором межплоскостных расстояний и их интенсивностей (см. выше).
Размеры частиц препарата, полученного указанным способом, лежат в нанометровом диапазоне: по данным рентгеновской дифракции и адсорбции аргона средний размер частиц составляет 55±12 нм и 50±20 нм, соответственно, согласно данным просвечивающей электронной микроскопии размеры частиц лежат в пределах от 30 до 120 нм.
Выбор концентрации кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она в предлагаемой композиции для инъекций обусловлен тем, что увеличение содержания кристаллической β-модификации феназепама больше 0,15 мас.% приводит к неполному растворению действующего вещества. Это приводит к появлению твердой фазы в получаемой композиции и, как следствие, к невозможности использования ее для инъекций в медицинской практике. При содержании кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она в композиции ниже 0,05 мас.% транквилизирующий эффект резко снижается.
«Твин-80» (Полисорбат 80) в предлагаемой композиции необходим для растворения действующего вещества - кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она и в качестве солюбилизатора.
«Твины» являются неионогенными поверхностно-активными веществами, получаемыми взаимодействием сорбитанов (сложных эфиров ангидросорбита и жирных кислот) с этиленоксидом. Основными компонентами «Твинов» являются оксиэтилированные эфиры пентаэритрита лауриновой, стеариновой или олеиновой кислот со степенью этерифицирования 1,50-1,65 и степенью оксиэтилирования 20. Поверхностно-активное вещество TWEEN-80 - это полиоксиэтилен (20) сорбитанмоноалеат с молярной массой 1226 г/моль. В структуру его молекулы входит шестичленное кольцо, к которому присоединены две полярные цепочки (C2H4O)n и (C2H4O)m, где n+m=20. В состав молекулы НПАВ TWEEN-80 входит также неполярный углеводородный радикал, содержащий 11 атомов углерода.
Увеличение содержания «Твина-80» в композиции более 10,00 мас.% нецелесообразно из-за того, что это не приводит к увеличению растворимости действующего вещества в получаемой композиции больше 0,15 мас.%. Излишек кристаллической β-модификации феназепама выше 0,15 мас.% выпадает в осадок, т.е. появляется твердая фаза в получаемой композиции и, как следствие, к невозможности использования ее для инъекций в медицинской практике. Уменьшение количества «Твина-80» до концентраций менее 2,00 мас.% приводит к неполному растворению кристаллической β-модификации феназепама, появлению твердой фазы в получаемой композиции и, как следствие, к невозможности использования ее для инъекций в медицинской практике.
Глицерин в предлагаемой композиции наряду с «Твином-80» необходим для растворения действующего вещества -кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она.
Увеличение содержания глицерина в композиции более 15,00 мас.% нецелесообразно из-за того, что это не приводит к увеличению растворимости действующего вещества в получаемой композиции больше 0,15 мас.%. Излишек кристаллической β-модификации феназепама выше 0,15 мас.% выпадает в осадок, т.е. появляется твердая фаза в получаемой композиции и, как следствие, к невозможности использования ее для инъекций в медицинской практике. Уменьшение количества глицерина до концентраций менее 5,00 мас.% приводит к неполному растворению кристаллической β-модификации феназепама, появлению твердой фазы в получаемой композиции и, как следствие, к невозможности использования ее для инъекций в медицинской практике.
Поливинилпирролидон в предлагаемой композиции необходим для повышения стабильности предлагаемой композиции для инъекций за счет увеличения вязкости композиции.
Увеличение количества поливинилпирролидона больше 1,2 мас.% приводит к резкому увеличению вязкости композиции и, как следствие, к невозможности использования ее для инъекций в медицинской практике. Уменьшение количества поливинилпирролидона меньше 0,5 мас.% приводит к уменьшению вязкости композиции и, как следствие, к уменьшению ее стабильности. Это затрудняет использование предлагаемой композиции для инъекций в медицинской практике.
Натрий пиросернистокислый (натрий метабисульфит, пиросульфит натрия, пищевая добавка Е 223) в предлагаемой композиции используют в качестве консерванта и антиоксиданта.
Увеличение количества натрия пиросернистокислого в композиции больше 1,2 мас.% нежелательно из-за того, что существуют ограничения на количество пиросульфита натрия в препаратах. Уменьшение количества натрия пиросернистокислого в композиции меньше 0,3 мас.% не позволяет обеспечить антиоксидантного и консервирующего действия пиросульфита натрия.
Раствор натра едкого с концентрацией (0,1-1,0) М необходим для доведения рН предлагаемой композиции для инъекций до значений 6,0-7,5 для снижения вероятности возникновения аллергических реакций пациентов из-за кислой или щелочной среды препарата. Концентрации растворов едкого натра 0,1 М-1,0 М были выбраны из-за того, что они широко используются в фармацевтической промышленности для доведения рН растворов до необходимых значений.
Способ получения предлагаемой композиции заключается в том, что определенные количества «Твина 80» и глицерина смешивают, нагревают до 70-90°С и растворяют в полученном растворе необходимые количества кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она при перемешивании. Значения граничных температур при получении раствора феназепама в смеси «Твин 80» - глицерин выбирали из имеющихся в литературе данных (патент РФ №2224522 С2 от 12.03.2002).
В дальнейшем полученный раствор кристаллической β-модификации феназепама в «Твине 80» и глицерине при интенсивном перемешивании приливают в предварительно нагретый до 40-90°С смешанный водный раствор натрия пиросернистокислого и поливинилпирролидона.
Смешивание раствора кристаллической β-модификации феназепама в «Твине 80» - глицерине и водного раствора натрия пиросернистокислого-поливинилпирролидона при 40-90°С необходимо для получения воспроизводимых результатов синтеза предлагаемой композиции для инъекций.
Нагревание водного раствора натрия пиросернистокислого и поливинилпирролидона до температур выше 90°С приводит к частичному разложению пиросульфита натрия. Это не позволяет использовать предлагаемую композицию для инъекций в медицинской практике. При температурах водного раствора натрия пиросернистокислого и поливинилпирролидона ниже 40°С получаемая композиция для инъекций нестабильна, что приводит к частичному расслоению предлагаемой композиции и делает невозможным ее использования в медицинской практике.
Полученную композицию для инъекций охлаждают до комнатной температуры, фильтруют, доводят рН композиции до 6,0-7,5 раствором натра едкого с концентрацией (0,1-1,0) М, разливают и стерилизуют.
Стерилизацию предлагаемой композиции для инъекций, содержащей кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она, проводят любым из известных методов, например стерилизующим фильтрованием, кратковременным нагреванием в автоклаве при температурах выше 100°С и другими.
Хранят предлагаемую композицию для инъекций в защищенном от света месте при температуре не выше 25°С.
Для пояснения сущности заявляемого технического решения к описанию приложены следующие таблицы (см. в конце описания изобретения).
Таблица 1. Влияние состава композиций на основе феназепама на количество наказуемых взятий воды в конфликтной ситуации (анксиолитическая активность композиции).
Таблица 2. Влияние состава композиции на двигательную активность беспородных белых крыс-самцов в открытом поле (седативное действие композиции).
Возможность осуществления предлагаемого изобретения иллюстрируется следующими примерами, но не ограничивается ими.
Пример 1. 30,0 г «Твин-80» и 45,0 г глицерина смешивают, нагревают до 90°С и растворяют в полученном растворе 0,45 г кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она. В 217,35 г воды для инъекций растворяют 3,6 г поливинилпирролидона и 3,6 г натрия пиросернистокислого. Приготовленный водный раствор нагревают до температуры 40°С и к нему, при интенсивном перемешивании, приливают полученный ранее раствор феназепама в «Твине-80» и глицерине. Смешанный раствор охлаждают до комнатной температуры, фильтруют, доводят его рН 0,1 М раствором натра едкого до 6,5-7,0, разливают по 5 мл в сухие стерильные флаконы вместимостью 10 мл, укупоривают их стерильными пробками, обжимают колпачками алюминиевыми и стерилизуют при 120°С в течение 8 мин. По аналогичной методике готовят композицию представленного выше состава, но на основе фармакопейного феназепама. Обе композиции подвергают биологическим испытаниям на анксиолитическую активность и седативное действие.
Анксиолитическую активность образцов феназепама изучали в тесте конфликтной ситуации, основанной на столкновении питьевой и оборонительной мотивации (Руководство по экспериментальному изучению новых фармакологических веществ. - Изд.2. / Под редакцией Хабриева Р.У. - М.: 2005, с.253-262). Исследования проводили на белых беспородных крысах-самцах возраста 2-2,5 месяца и массой 220-250 г.
Предварительно животных лишали воды и сочных кормов на 24 ч, а затем вырабатывали навык взятия воды из поилки, помещая крысу в камеру, где она находила поилку с водой и начинала пить. Камера имела размер 275×275×450 мм, электродный пол и поилку с водой (сосуд с соском на стене), расположенную на высоте 5 см от пола. Для проведения конфликтной ситуации использовали четырехкамерную установку, разработанную в ГУ НИИ фармакологии им. В.В.Закусова РАМН (Молодавкин Г.М., Воронина Т.А. Многоканальная установка для поиска транквилизаторов и изучения механизмов их действия по методу конфликтной ситуации. Экспериментальная и клиническая фармакология, 1995, т.58, №2, с.54-56).
Тренировку проводили в течение 5 мин, что позволяло развить навык взятий воды у крыс и не дать животным напиться перед опытом, т.е. сохранить питьевую мотивацию. На следующий день крысу помещали в камеру на 10 мин и через 10 секунд после начала питья каждое взятие воды наказывали электроболевым раздражением. В эксперименте использовали ток силой 0,25 мА. В результате, чтобы удовлетворить питьевую мотивацию, крыса должна преодолеть чувство страха перед наказанием. Число наказуемых взятий воды за 10 мин нахождения в камере являлось мерой анксиогенного состояния. Транквилизаторы устраняют чувство тревоги и страха и увеличивают число наказуемых взятий воды.
Для получения надежных результатов в параллельных сериях опытов использовали не менее 10 крыс. Предлагаемую композицию на основе кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она и композицию на основе фармакопейного феназепама вводили интергастрально. Во всех случаях количество вводимого действующего вещества составляло 2 мг/кг. Полученные в экспериментах результаты представлены в таблице 1. Там же для сравнения приведены данные по контрольной группе крыс, которым вводили не композиции, а дистиллированную воду, а также результаты по группе животных, которым вводили аналогичные композиции на основе фармакопейного феназепама. Установлено, что анксиолитическая активность предлагаемой композиции на основе кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она достоверно превышает активность контрольной группы и активность аналогичных композиций на основе фармакопейного феназепама в тесте конфликтной ситуации.
Седативное действие композиции изучали в тесте открытого поля, основанной на визуальной оценке поведения животных. Эксперименты проводили на беспородных белых крысах-самцах массой 220-250 г.
Открытое поле представляет собой ящик размером 1 × 1 м со стенками высотой 0,5 м. Пол прибора расчерчен на квадраты размерами 10×10 см, в вершинах которых имеются отверстия диаметром 4 см. Открытое поле освещали двумя лампами дневного света мощностью 20 Вт, установленными на высоте 0,5 м над уровнем пола. Животных помещали в центр прибора и в течение 3 мин визуально оценивали горизонтальную активность - число пересечений границ квадратов (ГА), вертикальную активность - число вставаний на задние лапы (ВА), исследовательскую активность - число обследований отверстий в поле (ИсА) и число актов грумминга или очесываний (Гр). Регистрацию активности животных производили во время опыта на компьютере с помощью специальной программы, в которой каждому визуально отмечаемому виду активности соответствовало нажатие на определенную клавишу (Г.М.Молодавкин, Т.А.Воронина. Компьютерные программы для регистрации результатов поведенческих экспериментов. Экспериментальная и клиническая фармакология, 2005, т.68, №6, с.55-58). Программа автоматически вычисляет средние и стандартные отклонения, которые в дальнейшем использовали для определения достоверности различий между группами животных с помощью дисперсионного анализа.
Животных случайным образом разбивали на 3 группы по 10 особей, из которых одна служила контролем, которым вводили дистиллированную воду, а крысам в других группах вводили предлагаемую композицию на основе кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она или на основе феназепама фармакопейного в дозе 2 мг/кг животного. Композиции вводили крысам интрагастрально.
Полученные экспериментальные результаты приведены в таблице 2. Установлено, что композиция на основе фармакопейного феназепама вызывает выраженное достоверное снижение двигательной активности животных, по сравнению с контрольной группой крыс, наиболее заметное при оценке ее горизонтального и вертикального компонента, а предлагаемая композиция на основе кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она не вызывает снижения двигательной активности, а наоборот, повышает ее, хотя и недостоверно.
Таким образом, проведенные эксперименты показали, что композиция на основе кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она обладает большей анксиолитической активностью и не оказывает седативного действия по сравнению с композицией на основе фармакопейного феназепама.
Пример 2. 20,0 г «Твин-80» и 50,0 г глицерина смешивают, нагревают до 70°С и растворяют в полученном растворе 0,5 г кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она. В 921,5 г воды для инъекций растворяют 5,0 г поливинилпирролидона и 3,0 г натрия пиросернистокислого. Приготовленный водный раствор нагревают до температуры 90°С и к нему при интенсивном перемешивании приливают полученный ранее раствор феназепама в «Твине-80» и глицерине. Смешанный раствор охлаждают до комнатной температуры, фильтруют, доводят его рН 0,1 М раствором натра едкого до 7,0-7,5, подвергают стерилизующей фильтрации, разливают по 5 мл в сухие, стерильные флаконы вместимостью 10 мл, укупоривают их стерильными пробками и обжимают колпачками алюминиевыми. По аналогичной методике готовят композицию представленного выше состава, но на основе фармакопейного феназепама. Обе композиции подвергают биологическим испытаниям на анксиолитическую активность и седативное действие. Полученные данные приведены в таблицах 1 и 2. Видно, что композиция на основе кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она обладает большей анксиолитической активностью и оказывает меньшее седативное действие по сравнению с композицией на основе фармакопейного феназепама.
Пример 3. 30,0 г «Твин-80» и 50,0 г глицерина смешивают, нагревают до 80°С и растворяют в полученном растворе 0,5 г кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она. В 412,0 г воды для инъекций растворяют 4,0 г поливинилпирролидона и 3,5 г натрия пиросернистокислого. Приготовленный водный раствор нагревают до температуры 60°С и к нему при интенсивном перемешивании приливают полученный ранее раствор феназепама в «Твине-80» и глицерине. Смешанный раствор охлаждают до комнатной температуры, фильтруют, доводят его рН 0,1 М раствором натра едкого до 6,0-6,5, разливают по 5 мл в сухие стерильные флаконы вместимостью 10 мл, укупоривают их стерильными пробками, обжимают колпачками алюминиевыми и стерилизуют при 120°С в течение 8 мин. По аналогичной методике готовят композицию представленного выше состава, но на основе фармакопейного феназепама. Обе композиции подвергают биологическим испытаниям на анксиолитическую активность и седативное действие. Полученные данные приведены в таблицах 1 и 2. Видно, что композиция на основе кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она обладает большей анксиолитической активностью и не оказывает седативного действия по сравнению с композицией на основе фармакопейного феназепама.
Пример 4. 24,0 г «Твин-80» и 36,0 г глицерина смешивают, нагревают до 85°С и растворяют в полученном растворе 0,15 г кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она. В 235,35 г воды для инъекций растворяют 3,0 г поливинилпирролидона и 1,5 г натрия пиросернистокислого. Приготовленный водный раствор нагревают до температуры 70°С и к нему при интенсивном перемешивании приливают полученный ранее раствор феназепама в «Твине-80» и глицерине. Смешанный раствор охлаждают до комнатной температуры, фильтруют, доводят его рН 0,1 М раствором натра едкого до 6,5-7,0, подвергают стерилизующему фильтрованию, разливают по 5 мл в сухие стерильные флаконы вместимостью 10 мл, укупоривают их стерильными пробками и обжимают колпачками алюминиевыми. По аналогичной методике готовят композицию представленного выше состава, но на основе фармакопейного феназепама. Обе композиции подвергают биологическим испытаниям на анксиолитическую активность и седативное действие. Полученные данные приведены в таблицах 1 и 2. Видно, что композиция на основе кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она обладает большей анксиолитической активностью и не оказывает седативного действия по сравнению с композицией на основе фармакопейного феназепама.
Таким образом, проведенные биологические эксперименты показали, что композиция на основе кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она при введении животным повышает их анксиолитическую активность при снижении побочного эффекта - седативного действия. Другими словами, использование в композициях кристаллической β-модификации 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она вызывает положительное изменение спектра его фармакологического действия.
| Таблица 1 | ||||||
| № п/п | Исследуемая композиция | Доза, мг/кг | Число наказуемых взятий воды* | |||
| - | Контрольная группа | - | 369 | |||
| Пример 1 | β-модифик. феназепама | 2 | 943** | |||
| Феназепам фармакопейный | 2 | 826** | ||||
| Пример 2 | Кристаллическая β-модифик. | 2 | 935** | |||
| Феназепам фармакопейный | 2 | 814** | ||||
| Пример 3 | Кристаллическая β-модифик. | 2 | 956** | |||
| Феназепам фармакопейный | 2 | 828** | ||||
| Пример 4 | Кристаллическая β-модифик. | 2 | 949** | |||
| Феназепам фармакопейный | 2 | 833** | ||||
| * Ошибка определения составила не более 12%. | ||||||
| **Различие с контрольной группой достоверно при Р<0,05. | ||||||
| Таблица 2 | ||||||
| № п/п | Исслед. Композ. | Доза, мг/кг | Число ГА | Число ВА | Число ИсА | Число Гр |
| - | Контроль | - | 22,3±2,4 | 11,9±2,3 | 11,2±3,1 | 2,2±0,7 |
| Пример 1 | β-модифик. феназепама | 2 | 23,8±1,8 | 15,4±1,4 | 8,7±1,5 | 1,7±0,7 |
| Феназепам фармакоп. | 2 | 12,4±2,1* | 6,7±1,6* | 8,9±1,6 | 1,6±0,7 | |
| Пример 2 | β-модифик. феназепама | 2 | 23,5±1,8 | 15,1±1,4 | 8,9±1,5 | 1,8±0,7 |
| феназепам фармакоп. | 2 | 12,2±2,1* | 6,5±1,6* | 8,7±1,6 | 1,9±0,7 | |
| Пример 3 | β-модифик. феназепама | 2 | 22,9±1,8 | 15,6±1,4 | 9,2±1,5 | 1,9±0,7 |
| феназепам фармакоп. | 2 | 12,6±2,1* | 6,8±1,6* | 8,5±1,6 | 1,6±0,7 | |
| Пример 4 | β-модифик. Феназепама | 2 | 23,7±1,8 | 15,3±1,4 | 8,8±1,5 | 1,7±0,7 |
| феназепам фармакоп. | 2 | 12,5±2,1* | 6,7±1,6* | 9,1±1,6 | 1,5±0,7 | |
| *Различие с контролем достоверно при Р<0,05. |
1. Композиция для инъекций, обладающая транквилизирующим действием, содержащая действующее вещество 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он, поливинилпирролидон, «Твин-80», глицерин, натрий пиросернистокислый, раствор натра едкого и воду, отличающаяся тем, что в качестве действующего вещества она содержит кристаллическую β-модификацию 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она, характеризующуюся следующим набором межплоскостных расстояний d, (А) и соответствующих им интенсивностей I/I100 (%): 14,719-5,6%; 8,308-2,8%; 7,388-20,9%; 6,878-1,3%; 6,334-3,5%; 5,840-19,1%; 5,424-1,4%; 5,227-3,3%; 4,808-66,3%; 4,574-15,9%; 4,530-11,8%; 4,480-6,8%; 4,354-2,8%; 4,221-14,3%; 4,098-100%; 3,994-15,9%; 3,900-18,9%; 3,772-39,9%; 3,570-6,8%; 3,502-49,5%; 3,417-14,2%; 3,317-15,0%; 3,257-1,3%; 3,172-10,7%; 3,109-2,8%; 3,052-1,5%; 2,875-14,3%; 2,789-4,5%; 2,739-3,9%; 2,662-3,7%; 2,622-5,2%; 2,523-9,5%; 2,477-4,6%; 2,428-4,4%; 2,355-3,4%; 2,306-2,0%; 2,290-1,2%; 2,158-3,7%; 2,110-2,5%; 2,075-2,2%; 2,037-1,2%; 1,951-1,7%; 1,936-1,3%; 1,898-2,9%; 1,715-0,5%; 1,776-1,4%; 1,763-1,5%; 1,622-1,5% при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| Кристаллическая β-модификация 7-бром-1,3-дигидро-5- | |
| (2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она | 0,05-0,15 |
| Поливинилпирролидон | 0,50-1,20 |
| «Твин-80» | 2,00-10,00 |
| Глицерин | 5,00-15,00 |
| Натрий пиросернистокислый | 0,30-1,20 |
| Раствор натра едкого | до рН 6,0-7,5 |
| Вода | Остальное |
2. Способ получения композиции для инъекций по п.1 смешиванием феназепама с «Твином-80», перемешиванием полученной смеси с глицерином при температуре 70-90°С, добавлением натрия пиросернистокислого, поливинилпирролидона, 0,1-1,0 М раствором едкого натра в количестве, обеспечивающем рН 6,0-7, 5, и воду, фильтрованием, отличающийся тем, что «Твин-80» и глицерин смешивают, нагревают до 70-90°С, растворяют кристаллическую β-модификацию 7-бром-1,3-дигидро-5-(2-хлорфенил)-2Н-1,4-бензодиазепин-2-она и полученную смесь при интенсивном перемешивании приливают в предварительно приготовленный и нагретый до 40-90°С смешанный водный раствор натрия пиросернистокислого и поливинилпирролидона с последующим охлаждением до комнатной температуры, фильтрованием, доведением рН до 6,0-7,5 (0,1-1,0) М раствором натра едкого, розливом и стерилизацией.
