Средство, обладающее антиоксидантным, фотопротекторным и геропротекторным действием, и способ его получения

Изобретение относится к области медицины, а именно к средству, обладающему антиоксидантным, фотопротекторным и геропротекторным действием, и может быть использовано для создания фармакологических препаратов, нейтрализующих вредное воздействие на организм света УФ и видимого диапазонов и инактивирующих токсическое действие липофусцина. Средство представляет собой продукт взаимодействия эквимолярных количеств 6-гидрокси-2-аминобензотиазола и N-ацетил-L-цистеина при кипячении в растворе этилового спирта. Изобретение обеспечивает высокую антиоксидантную активность и высокую устойчивость под действием света видимого и УФ диапазонов. 7 ил.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к средству, обладающему антиоксидантным, фотопротекторным и геропротекторным действием, и может быть использовано для создания фармакологических препаратов, нейтрализующих вредное воздействие на организм света УФ и видимого диапазонов и инактивирующих токсическое действие липофусцина.

Как известно, процесс старения сопровождается накоплением в клетках организма (кожа, мозг, сердце, глаз и др.) «старческого пигмента» липофусцина, который, являясь токсичным для клеток веществом, служит одним из главных факторов, приводящим к возникновению различных старческих патологий, [Sparrow J.R., Boulton M.E. RPE lipofuscin and its role in retinal pathobiology. Exp. Eye Res., 2005, v.80, pp.595-606; Nowak J.Z. Age-related macular degeneration (AMD): pathogenesis and therapy. Pharmacological Reports, 2006, v.58, pp.353-363]. Установлена, например, прямая корреляция между концентрацией липофусцина в различных областях сетчатки глаза и развитием в них дегенеративных процессов, в частности, макулярной дегенерации сетчатки - распространенного глазного заболевания, развивающегося у людей в возрасте старше 60 лет. [Holz F.G., Bellman С., Staudt S., et al. Fundus autofluorescence and development of geographic atrophy in age-related macular degeneration. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 2001, v.42 (5), pp.1051-1056].

Известно, что липофусцин является сенсибилизатором фотоиндуцированного перекисного окисления липидов (ПОЛ) и, благодаря своему прооксидантному действию, инициирует свободно радикальные процессы ПОЛ, сопровождающие старение.

Дополнительными факторами, усугубляющими процессы ПОЛ и оказывающими токсическое действие на клеточные структуры, являются воздействие видимого света и УФ излучения. В связи с этим, поиск средств, способных ингибировать процессы ПОЛ, связанные с фототоксическим действием липофусцина и воздействием на клетки таких повреждающих факторов, как видимый свет и УФ-излучение, является актуальной задачей.

Исследования биологической активности антиоксидантов гетероароматической природы показали, что они могут быть использованы в качестве защитных агентов при действии на организм различных повреждающих факторов и проявлять радио-, фото-, гепато- и геропротекторное действие [Л. Д. Смирнов «Структура, фармакологические свойства и медицинское применение гетероароматических антиоксидантов». В книге «Химическая и биологическая кинетика. Новые горизонты», М.: Изд-во «Химия», 2005, с.102-129].

Известны антиоксидантные препараты мексидол (2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат) и эмоксипин (2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина гидрохлорид), которые широко применяют для лечения различных заболеваний, в том числе, в офтальмологии. Например, известно средство, предназначенное для лечения патологических состояний, связанных с ослаблением естественного уровня антиоксидантной защиты оболочек и внутренних сред глаза [RU 2070010, С1, опубл. 10.12.1996], содержащее эмоксипин и пиридоксина гидрохлорид.

Известно, что мексидол обладает геропротекторным действием, оказывает корригирующее влияние на нарушенные при старении процессы обучения и памяти, способствует восстановлению эмоционального и вегетативного статуса, уменьшает проявления неврологического дефицита, а также снижает в мозге и крови уровень конечных продуктов ПОЛ - малонового диальдегида и липофусцина [Воронина Т. А. Антиоксидант мексидол. Основные нейропсихотропные эффекты и механизм действия. Психофармакол. Биол. Наркол., 2001, т.1, №1, с.2-12]. В комплексе с другими препаратами мексидол применяют для лечения различных заболеваний, в том числе, офтальмологических заболеваний [RU 2367386, С1, опубл. 20.09.2009, RU 2270025, С1, опубл. 20.02.2006 и др.].

В качестве прототипа использовано средство, обладающее антиоксидантными, гипогликемическими, гиполипидемическими и противошоковыми свойствами, представляющее собой N-ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина [RU 2357955, С2, опубл. 10.06.2009].

Исследование свойств соединений, взятых в качестве аналогов и прототипа, показывает, что они проявляют недостаточно высокую антиоксидантную активность (АОА) в отношении фотоиндуцированных процессов ПОЛ и характеризуются недостаточной стабильностью по отношению к видимому свету и УФ-излучению, что ограничивает возможности их применения в качестве антиоксидантных фотопротекторов.

Задачей настоящего изобретения является разработка нового средства, сочетающего высокую антиоксидантную активность с высокой устойчивостью под действием света видимого и УФ диапазонов, и проявляющего фотопротекторное и геропротекторное действие.

Поставленная задача решается применением средства, представляющего собой продукт взаимодействия 6-гидрокси-2-аминобензотиазола и N-ацетил-L-цистеина (в дальнейшем - 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат), обладающего высокой антиоксидантной активностью и высокой устойчивостью под действием света видимого и УФ диапазонов, и проявляющего фотопротекторное и геропротекторное действие.

Под фотопротекторным действием понимается способность заявляемого средства ингибировать процессы ПОЛ, индуцированные УФ и видимым светом и, таким образом, нейтрализовать повреждающее действие света указанного диапазона.

Под геропротекторным действием понимается способность заявляемого средства ингибировать фотоиндуцированные процессы ПОЛ, сенсибилизированные «старческим пигментом» липофусцином, накапливающимся в тканях организма в пожилом возрасте, и, таким образом, нейтрализовать его токсическое, в том числе фототоксическое, действие.

6-Гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат получают взаимодействием эквимолярных количеств 6-гидрокси-2-аминобензотиазола и N-ацетил-L-цистеина в растворе низшего спирта при кипячении, с последующей частичной отгонкой растворителя, охлаждением реакционной массы, отделением выпавших кристаллов и перекристаллизацией полученного продукта из этилового спирта с добавкой активированного угля.

6-Гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат представляет собой растворимое в спирте и в воде белое кристаллическое вещество с температурой плавления 148-150°С.

Нами проведено сравнительное изучение антиоксидантной активности 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината, мексидола, широко применяемого в настоящее время в медицинской практике, и N-ацетилцистеината 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина, взятого в качестве прототипа. С этой целью определены величины констант тушения хемилюминесценции, а также степень ингибирования процесса пероксидации липидов, индуцированного ионами двухвалентного железа в присутствии аскорбиновой кислоты. Константы тушения хемилюминесценции измеряют в системе, состоящей из гемоглобина, пероксида водорода и люминола [Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., Любицкий О.Б., Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Измерение антиоксидантной активности плазмы крови в системе гемоглобин - пероксид водорода - люминол. Вопросы мед. химии, 1997, т.43, с.87-92]. В качестве измеряемых параметров служат максимальная интенсивность свечения (амплитуда хемилюминесценции) и время от момента введения инициатора - пероксида водорода до начала развития свечения (латентный период). Оба этих параметра характеризуют величину антиоксидантной активности исследуемого препарата. Интенсивность хемилюминесценции и величина латентного периода были измерены на спектрофлуорофотометре Shimadzu RF 5301 PC (Япония) при длине волны люминесценции 470 нм. На Фиг.1 показаны зависимости отношения интенсивности свечения в контроле (без добавления антиоксидантов) к интенсивности свечения в присутствии антиоксидантов от концентрации последних. Тангенс угла наклона прямой пропорционален константе тушения люминесценции и тем больше, чем выше величина антиоксидантной активности вводимого препарата. Полученные значения констант тушения для 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината - (2,4±0,4)×10⁵ М^-1, для мексидола - (3,6±0,5)×10⁴ М^-1 и для N-ацетилцистеината 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина - (7,5±1,2)×10⁴ М^-1 показывают, что антиоксидантная активность заявляемого продукта более чем в 6 раз превышает АОА мексидола и в 3-3,5 раза превышает АОА прототипа.

Степень ингибирования процессов пероксидации липидов оценивают по скорости накопления продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-активных продуктов) в образцах суспензии наружных сегментов фоторецепторных клеток глаза (НСФ) в процентах к контролю в темноте в присутствии аскорбиновой кислоты в зависимости от концентрации антиоксидантов. ТБК-активные продукты - конечные продукты пероксидации, главным образом, альдегиды и диальдегиды, дающие с тиобарбитуровой кислотой окрашенные продукты, определяют спектрофотометрически при длине волны 532 нм.

Результаты, представленные на Фиг.2, показывают, что ингибирующая процессы ПОЛ активность 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината в отношении свободно радикального окисления НСФ значительно выше, чем ингибирующая активность известного антиоксиданта мексидола. Так, уже в концентрации 0,3 мМ (образец 4) 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат практически на 100% подавляет процесс пероксидации, тогда как мексидол, даже в концентрации 1,0 мМ (образец 6), ингибирует процесс только, примерно, на 50%.

N-Ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина является лишь немного более сильным ингибитором по сравнению с мексидолом, но также значительно уступает N-ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридину в отношении ингибирования ПОЛ в темноте, в присутствии аскорбиновой кислоты.

Таким образом, приведенные результаты свидетельствуют о более высокой антиоксидантной активности заявляемого средства в отношении темновых свободно радикальных процессов окисления по сравнению с аналогом и прототипом.

Изучение устойчивости заявляемого средства в сравнении с мексидолом и N-ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридином под действием света видимого и УФ диапазонов проводят при облучении образцов сфокусированным полным белым светом дуговой ртутно-кварцевой лампы ДРК-120 (мощность 120 W, световой поток 3900 Лм) на расстоянии 15 см от объекта при постоянном перемешивании в течение 10, 30 и 60 мин. Свет этого источника включает как УФ составляющие полосы, начиная с 190 нм, так и видимую область спектра. Объектами облучения служат 10 мМ растворы заявляемого средства, мексидола и N-ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина в 0,1 М калий-фосфатном буфере pH 7,4. Спектральные измерения проводят на спектрофотометре Shimadzu UV-1601 PC (Япония). Результаты, представленные на Фиг.3, показывают, что уже в течение 10-минутного облучения мексидол и N-ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина претерпевают фотодеструкцию, распадаясь на неактивные компоненты, в то время как 6-гидрокси-2-аминобензотиазола ацетилцистеинат в этих условиях остается стабильным и не претерпевает каких-либо значительных изменений. Было показано, что даже в течение часовой экспозиции 6-гидрокси-2-аминобензотиазола ацетилцистеинат проявляет устойчивость под действием облучения в описанных условиях. Высокая фотостабильность 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината в сравнении с мексидолом и N-ацетилцистеинатом 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина является предпосылкой того, что средство должно обладать более эффективным фотопротекторным действием, чем мексидол и N-ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина, что и было подтверждено экспериментально (см. примеры).

Сочетание высокой антиоксидантной активности 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината с высокой фотостабильностью позволяет эффективно нейтрализовать фотоиндуцированные и сенсибилизированные липофусцином процессы ПОЛ.

На Фиг.1 показано изменение отношения интенсивности свечения продуктов окисления люминола в контроле без добавления антиоксиданта (I₀) к интенсивности свечения в присутствии антиоксиданта (I) минус единица в зависимости от концентрации оксиданта; 1 - в присутствии 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината; 2 - в присутствии мексидола; 3 - в присутствии N-ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина.

На Фиг.2 показана зависимость скорости накопления ТБК-активных продуктов от концентрации антиоксидантов в образцах суспензии НСФ (в процентах к контролю) в темноте в присутствии аскорбиновой кислоты. Образец 1 - контроль, не содержащий антиоксидантов; образцы 2, 3 и 4 содержат 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат в концентрациях, соответственно 0,05 мМ, 0,1 мМ и 0,3 мМ; образцы 5 и 6 содержат мексидол в концентрациях 0,3 мМ и 1,0 мМ, соответственно.

На Фиг.3 показаны дифференциальные спектры поглощения 0,1 мМ водных растворов 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината (1) после 30-минутного облучения, а также и мексидола (2) и N-ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина (3) после 10-минутного облучения светом лампы ДРК-120.

На Фиг.4 показан абсорбционный спектр водного раствора 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината.

На Фиг.5 показана кинетика накопления ТБК-активных продуктов в образцах НСФ под действием УФ-видимого облучения (лампа ДРК-120) в присутствии различных концентраций антиоксидантов; 1 - контроль, не содержащий антиоксидантов; 2 и 3 - к контролю добавлены 1,5 мМ и 6,0 мМ мексидола, соответственно; 4,5 и 6 - к контролю добавлены 0,3 мМ, 1,0 мМ и 2,0 мМ 6-гидрокси-2-аминобензотиазола ацетилцистеината, соответственно.

На Фиг.6 показана зависимость скорости накопления ТБК-активных продуктов от природы и концентрации антиоксиданта в образцах НСФ под действием УФ-видимого облучения (лампа ДРК-120). 1 - контроль, не содержащий антиоксидантов (100%); 2 - к контролю добавлено 0,2 мМ N-ацетилцистеинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина; 3 - к контролю добавлено 1,5 мМ мексидола; 4 - к контролю добавлено 0,2 мМ 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината.

На Фиг.7 показана зависимость скорости накопления ТБК-активных продуктов от концентрации антиоксидантов в образцах суспензии НСФ в присутствии липофусцина под действием видимого света (лампа КГМ 24-150, мощность 150 ватт, энергия облучения 100 мВт/см²). Образец 1 - контроль, содержащий только НСФ и липофусцин; образцы 2 и 3 содержат 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат в конечных концентрациях 0,12 мМ и 0,36 мМ, соответственно; образцы 4 и 5 содержат мексидол в конечных концентрациях 0,5 мМ и 1,0 мМ, соответственно.

Получение 6-гидрокси-2-аминобензотиазола ацетилцистеината.

К раствору 0,83 г (0,005 М) 6-гидрокси-2-аминобензотиазола в 30 мл этилового спирта при нагревании и перемешивании добавляют порциями раствор 0,82 г (0,005 М) N-ацетил-L-цистеина в 20 мл этилового спирта. Реакционную массу перемешивают при температуре кипения 1 час в колбе с обратным холодильником, растворитель отгоняют в вакууме до 1/3 объема. Остаток охлаждают, выпавшие кристаллы отделяют, перекристаллизовывают из этилового спирта с добавкой активированного угля, фильтруют, охлаждают. Выпавший осадок отделяют, промывают ацетоном, сушат, получают 1,56 г (94,5%) 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината, представляющего собой белое кристаллическое вещество с Т. пл.=148-150°С.

Брутто-формула: C₁₂H₁₅N₃O₄S₂.

Рассчитано, %: С, 43,77; Н, 4,56; N 12,77.

Найдено, %: С, 43,63; Н 4,67; N, 12,88.

Абсорбционный спектр водного раствора полученного 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината (спектрофотометр UV-1601 PC ("Shimadzu", Япония) показан на Фиг.4.

В качестве модели для изучения геропротекторных и фотопротекторных свойств 6-гидрокси-2-аминобензотиазола ацетилцистеината использованы НСФ, выделенные из сетчатки глаза быка по модифицированной методике, описанной в [McDowell J. H. Preparing rod outer segment membranes, regenerating rhodopsin, and determining rhodopsin concentration. Methods in Neurosciences (Ed. Hargrave P.A.), N.Y., Academ. Press., 1993, v.15, p.123-130]. 30 сетчаток помещают в 100 мл 40%-ного раствора сахарозы, приготовленного на фосфатном буфере, и интенсивно встряхивают в течение 15 мин. Полученную суспензию центрифугируют при 120000xg в течение 1 часа при 4°С. Осадок отбрасывают, а всплывшую часть промывают в фосфатном буфером. Полученную суспензию НСФ вновь заливают 40%-ным раствором сахарозы, приготовленным на фосфатном буфере, мягко встряхивают в течение 5 минут, затем центрифугируют при 120000xg в течение 1 часа. Очищенные НСФ промывают фосфатным буфером для удаления сахарозы; осадок суспендируют в фосфатном буфере и хранят при -20°С. Концентрацию препарата выражают в мг белка на 1 мл раствора.

Приведенные ниже примеры иллюстрируют фотопротекторное и геропротекторное действие 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината.

Для исследования используют модельные образцы, представляющие собой суспензию НСФ в 0,1 М калий-фосфатном буфере с исходной концентрацией 5 мг белка/мл, полученные из сетчатки глаза быка, как описано выше.

Влияние 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината на индуцированный УФ-видимым светом процесс пероксидации липидов НСФ клеток глаза.

Для измерения кинетики фотоиндуцированной УФ-видимым светом пероксидации НФС в отсутствии антиоксидантов готовят контрольную смесь, содержащую 300 мкг/мл белка модельного образца НСФ в 0,1 М калий-фосфатном буфере pH 7,4 (образец 1), и подвергают ее облучению УФ-видимым светом (лампа ДРК-120) при постоянном перемешивании. Общий объем пробы - 3,0 мл. Через 3 мин, 6 мин и 9 мин отбирают пробы в количестве 0,5 мл для определения концентрации ТБК-активных продуктов пероксидации липидов НСФ по известной методике [Buege J.A., Aust S.D. Microsomal lipid peroxidation. In: Methods in Enzymology, 1978, v.52, pp.302-310].

Для приготовления опытных образцов к смеси, содержащей 300 мкг/мл белка НСФ в 3,0 мл калий-фосфатного буфера, прибавляют водный раствор 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината до конечных концентраций 0,3 мМ (образец 4), 1,0 мМ (образец 5) и 2,0 мМ (образец 6), а также для сравнения - водный раствор мексидола до конечных концентраций 1,5 мМ (образец 2) и 6,0 мМ (образец 3). Опытные образцы подвергают облучению УФ-видимым светом в тех же условиях, что и контрольный образец, и определяют концентрацию ТБК-активных продуктов. Полученные результаты иллюстрирует Фиг.5, из которой видно, что 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат проявляет высокую способность к подавлению индуцированной УФ-видимым светом пероксидации фоторецепторных клеток в модельной системе, практически полностью ингибируя процесс в концентрации 2,0 мМ (кривая 6) и, таким образом, проявляет свойства эффективного фотопротектора.

На Фиг.6 показана фотопротекторная активность 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината (4) в концентрации 0,2 мМ в сравнении с N-ацетилцистеинатом 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина (2), взятым в той же концентрации, а также с мексидолом (3), взятым в концентрации, более чем в 7 раз превышающей концентрацию производных N-ацетилцистеиновой кислоты. Эти данные показывают, что 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат является гораздо более эффективным фотопротектором по сравнению с N-ацетилцистеинатом 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина и мексидолом. Фотопротекторная активность заявляемого средства в 4 раза превышает фотопротекторную активность прототипа.

Фотопротекторные свойства 6-гидрокси-2-аминобензотиазола ацетилцистеината обусловлены сочетанием высокой антиоксидантной активности с высокой устойчивостью под действием УФ-видимого света. В то же время, мексидол, даже в концентрации 6,0 мМ, не способен к полному подавлению процесса ПОЛ, что, по всей видимости, связано с его недостаточной фотостабильностью.

Влияние 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината на фотоиндуцированную пероксидацию липидов НСФ клеток глаза, сенсибилизированную липофусцином.

Образец липофусциновых гранул выделяют из ткани ретинального пигментного эпителия (РПЭ) глаза человека, по модифицированной методике, описанной в [Boulton М., Marshall J. Re-pigmentation of human retinal pigment epithelial cells in vitro // Exp. Eye Res., 1985, v.41, p.209-218]. Биоматериал предоставлен Банком МНТК. Фракцию липофусциновых гранул получают из клеток РПЭ биоматериала путем двукратного центрифугирования в градиенте плотности сахарозы. Для этого клетки РПЭ разрушают обработкой ультразвуком в течение 60 сек при 4°С, частоте 22 кГц и максимальном резонансе. Неразрушенные стенки клеток удаляют центрифугированием при 60xg в течение 10 мин. Супернатант центрифугируют при 6000xg в течение 10 мин. Осадок ресуспендируют в 0,3 М сахарозе, наносят на градиент плотности сахарозы (2:1,8:1,6:1,55:1,5:1,4:1,2) и центрифугируют при 103000xg в течение 1 часа. Полосу, содержащую липофусциновые гранулы, расположенную между 1,2 М и 1,4 М внутренними слоями сахарозы, изолируют и подвергают повторному центрифугированию в том же градиенте плотности сахарозы. Полученные гранулы 3 раза отмывают от сахарозы 0,1 М фосфатным буфером и хранят при температуре -20°С. Концентрацию гранул выражают в количестве штук, подсчитанных в камере Горяева, на 1 мл объема.

Для определения средней скорости, сенсибилизированной липофусцином, фотоиндуцированной видимым светом пероксидации НСФ, в отсутствии 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината (в контроле), готовят контрольную, смесь, содержащую 200 мкг/мл белка модельного образца НСФ и 5×10⁶ штук/мл липофусциновых гранул, подвергают ее облучению видимым светом при постоянном перемешивании (лампа КГМ 24-150, интенсивность 100 мватт/см², тепловой фильтр) и через 10, 20 и 30 минут определяют концентрацию ТБК-активных продуктов пероксидации липидов НСФ. Среднюю скорость пероксидации (скорость накопления ТБК-активных продуктов) определяют как усредненную по всем измерениям концентрацию ТБК-активных продуктов, отнесенную к 1 мг белка НСФ и к 1 мин облучения.

Для приготовления опытных образцов к образцам, содержащим 200 мкг/мл белка модельного образца НСФ и 5×10⁶ штук/мл липофусциновых гранул контрольной смеси, полученных, как описано выше, прибавляют водные растворы 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината в конечных концентрациях 0,12 мМ и 0,36 мМ, а также для сравнения - водные растворы мексидола в конечных концентрациях 0,5 мМ и 1,0 мМ. Опытные образцы подвергают облучению видимым светом в тех же условиях, что и контрольный образец, и определяют среднюю скорость накопления ТБК-активных продуктов, как описано выше.

Результаты, представленные на Фиг.7, показывают, что 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат в концентрации 0,36 мМ (образец 3) практически полностью подавляет процессы ПОЛ, индуцированные видимым светом в присутствии сенсибилизатора липофусцина. Ингибирующая активность мексидола, даже в более высоких концентрациях, существенно ниже.

Таким образом, эти результаты свидетельствуют о высоком защитном эффекте 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеината в отношении фототоксического действия «старческого пигмента» липофусцина.

Приведенные примеры показывают, что, по сравнению с известными N-ацетилцистеинатом 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина и мексидолом заявляемое средство 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат проявляет намного более высокую антиоксидантную активность как в отношении фотоиндуцированной пероксидации липидов, так и в отношении липофусцин-сенсибилизированной пероксидации липидов. Это свидетельствует о том, что 6-гидрокси-2-аминобензотиазол ацетилцистеинат способен эффективно нейтрализовать прооксидантное действие УФ-видимого облучения, а также нейтрализовать фототоксическое действие «старческого пигмента» липофусцина.

Средство, обладающее антиоксидантным и фотопротекторным действием, а также способностью нейтрализовать фототоксическое действие липофусцина, представляющее собой продукт взамодействия эквимолярных количеств 6-гидрокси-2-аминобензотиазола и N-ацетил-L-цистеина при кипячении в растворе этилового спирта.