Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-р линестренолом в эксперименте

Авторы патента:

Владельцы патента RU 2553362:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-Р линестренолом в организме. Для этого при проведении эксперимента in vivo вводят препарат-ингибитор линестренол кроликам внутрижелудочно в суточной дозе 110 мкг/кг массы тела животного курсом 14, 21 или 28 дней. Изобретение позволяет использовать линестренол в качестве положительного контроля пониженной активности гликопротеина-Р для прогнозирования принадлежности изучаемых лекарственных веществ к субстратам белка-транспортера. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и клинической фармакологии, и предназначено для внедрения в практику фармаколога и клинического фармаколога с целью прогнозирования возможной принадлежности изучаемых лекарственных препаратов к субстратам мембранного белка - транспортера гликопротеина-Р (Pgp), а также использования линестренола в качестве положительного контроля пониженной активности Pgp при поиске веществ аналогичного действия.

Гликопротеин-Р (Pgp) представляет собой эффлюксный АТФ-зависимый белок-транспортер, участвующий в переносе субстратов из клетки, а также препятствующий их всасыванию в кишечнике [1]. Pgp локализован на мембране энтероцитов, в гепатоцитах, эпителиоцитах почечных канальцев и коры надпочечников, эндотелиоцитах гистогематических барьеров. Известно, что многие гормональные вещества, например половые стероиды, глюкокортикоиды, тиреоидные гормоны, способны модулировать функциональную активность и экспрессию Pgp [2, 3, 4, 5].

Известно, что для определения локализации Pgp в организме, а также обнаружения потенциальных субстратов белка-транспортера в качестве ингибиторов Pgp в настоящее время предложено значительное количество веществ, таких как верапамил, циклоспорин, кетоконазол, тариквидар, хинидин и др. [6, 7].

Известен способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности Pgp верапамилом в дозе 9 мг/кг, предложенный в эксперименте на кроликах, для анализа участия его в фармакокинетике омепразола [8]. Но верапамил является препаратом с выраженным влиянием на сердечно-сосудистую систему: обладает гипотензивным действием, снижает ЧСС, т.е. применяется по строгим показаниям. Назначение его пациентам без данных показаний может приводить к выраженной гипотензии, брадикардии, AV-блокаде, сонливости, аллергическим реакциям и т.д. Кроме того, в присутствии более сильного ингибитора Pgp, например тариквидара, верапамил ведет себя как субстрат и проникает через гематоэнцефалический барьер [9].

Известен способ моделирования состояния селективного ингибирования функциональной активности Pgp в гематоэнцефалическом барьере с использованием тариквидара. Вещество применялся на культурах клеток с повышенной экспрессией гена MDR1 (человеческого) и Mdr1a (мышиного) [10] и на крысах линии Wistar Unilever в дозе 15 мг/кг с последующей оценкой проницаемости гематоэнцефалического барьера для субстратов белка-транспортера методом позитронно-эмиссионной томографии [9].

Известен способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности Pgp циклоспорином, например, при оценке распределения, фармакокинетики и метаболизма глибенкламида [11]. В исследовании на ВИЧ-инфицированных взрослых добровольцах показано, что циклоспорин в дозе 4 мг/кг ингибирует Pgp Т-лимфоцитов крови. Однако циклоспорин не может использоваться в терапии ВИЧ-инфекции в качестве ингибитора Pgp из-за своих иммуносупрессорных свойств [12]. Также циклоспорин как ингибитор, применяемый в клинической практике, характеризуется значительной токсичностью [13], а именно нежелательным действием на печень, почки, желудочно-кишечный тракт, систему кроветворения, развитием аллергических реакций.

Известен способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности Pgp кетоконазолом (400 мг один раз в день в течение 4 дней) на здоровых добровольцах [14]. Однако в исследовании Choo и соавт. [15] ингибирующее действие кетоконазола объясняется главным образом СУР3А-опосредованным ингибированием, и в меньшей степени влиянием на гликопротеин-Р. Кроме того, исследования на добровольцах должны проходить в соответствии с правилами Good clinical practices (GCP), они требуют получения разрешения в этическом комитете, госпитализации добровольцев в стационар для круглосуточного наблюдения за их состоянием и многократного забора крови через каждый час в течение всего периода действия лекарственного средства. Крысы как объект исследования (тест-система) не пригодны для оценки функциональной активности Pgp по фармакокинетике маркерных субстратов из-за невозможности многократного забора крови (в связи с малым ее количеством у данного животного).

Изучение ингибиторов Pgp в настоящее время проводится с помощью флуорометрического анализа с использованием кальцеин-АМ как субстрата Pgp и двух различных клеточных систем: L-MDR1 клеток (модель человеческого гликопротеина-Р) и эндотелиальных клеток капилляров свиного мозга (pBCECs, модель для гематоэнцефалического барьера). Обе клеточные системы пригодны для оценки ингибирующего действия препаратов на функционирование белка-транспортера [16]. Активно используется для оценки ингибирующей активности препаратов и клеточная линия раковых клеток кишечника Сасо-2, а в качестве субстратов применяют родамин-123 или кальцеин-АМ [17]. Однако работа с культурой клеток сопряжена со значительными техническими и методическими сложностями, требует дорогостоящего лабораторного оборудования, поэтому методика не доступна большинству лабораторий. Следует отметить, что для подтверждения результатов принадлежности веществ к субстратам или модуляторам функциональной активность транспортного белка Pgp после их изучения in vitro на следующем этапе необходимо выполнять исследования на целостном организме.

Моделирование состояния ингибирования активности Pgp у кроликов с использованием линестренола на настоящий момент в литературе не описано. Линестренол - синтетический прогестин, является пролекарством, после приема внутрь быстро всасывается и превращается в фармакологически активный метаболит норэтистерон (НЭТ). Максимальный уровень НЭТ в плазме крови достигается через ~2-4 часа после приема внутрь в дозе 0,5 мг. Он связывается с рецепторами прогестерона в органах-мишенях.

Норэтистерон (НЭТ) на 96% связывается с белками плазмы, преимущественно с альбуминами (61%) и в меньшей степени с глобулинами, связывающими половые гормоны (35%). Выведение линестренола и его метаболита происходит почками и через кишечник в соотношении 1,5:1.

В своих исследованиях Kim W.Y. с коллегами изучали влияние на модуляцию Pgp различных стероидных гормонов, в том числе и норэтистерона. Исследование проводилось на культуре клеток карциномы ободочной кишки человека - LSI 80. Результаты показали, что норэтистерон не является субстратом белка-транспортера и не изменяет АТФазной каталитической активности. По мнению авторов, необходимы дальнейшие исследования в условиях целостного организма [18].

Целью изобретения является создание такой модели ингибирования функциональной активности Pgp, которая соответствовала бы этическим принципам и нормам, не сопровождалась проявлением побочных эффектов вводимого вещества при исследовании на добровольцах, а при изучении на животных была бы методически обоснована и не требовала дорогостоящего лабораторного спецоборудования, материалов и комплектующих для проведения исследований на культурах клеток.

Поставленная задача достигается тем, что в качестве ингибитора Pgp выбран синтетический прогестаген - линестренол, относительно безопасный и экономически доступный препарат, который вводится перорально один раз в день курсом 14, 21 или 28 дней в дозе 110 мкг/кг массы, а в качестве адекватной и удобной тест-системы используются кролики.

Описание способа

Для решения поставленной задачи авторами выполнен эксперимент на 10 половозрелых кроликах-самках породы шиншилла, массой 4500±200 г, находящихся в состоянии течки. Линестренол (препарат «Экслютон» (0,5 мг линестренола) производитель: «Organon», Нидерланды) вводили животным per os в дозе 110 мкг/кг массы линестренола 1 раз в сутки в 12 часов дня. За сутки до начала эксперимента, через 14, 21 и 28 дней введения препарата у кроликов определяли функциональную активность Pgp по фармакокинетике его маркерного субстрата - фексофенадина. Фексофенадин (препарат «Телфаст» 180 мг; производитель: Aventis Pharma, Италия) вводили животным перорально с помощью металлического зонда в дозе 67,5 мг/кг массы [19, 20]. Фексофенадин был выбран в качестве примера субстратов Pgp в связи с тем, что его фармакокинетика зависит исключительно от функционирования Pgp. Через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 12 и 24 часа от момента введения препарата из ушной вены кроликов забирали кровь в объеме 5 мл. Для получения плазмы пробы центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 минут и хранили до анализа при температуре -29°C. Содержание фексофенадина в плазме крови определяли методом ВЭЖХ на хроматографе «Стайер» с ультрафиолетовым детектором и колонке «Beckman Coulter» 4,6×250 мм, зернением 5 мкм. Экстракцию и хроматографирование маркерного субстрата осуществляли по методу Раменской Г.В. с соавт. [21] в модификации Черных И.В. [22]. Анализ выполняли при длине волны 220 нм и скорости подвижной фазы 1 мл/мин.

Количественное определение фексофенадина выполняли по методу абсолютной калибровки по высоте пиков с использованием стандарта фексофенадина (Strasbourg cedex). Примененный метод хроматографического анализа обладал следующими характеристиками: время удерживания - 13,1 мин; предел обнаружения фексофенадина в плазме крови 50 нг/мл.

Расчет концентрации фексофенадина осуществляли с помощью программы «Мультихром». Фармакокинетические параметры - максимальную концентрацию (C_max, нг/мл), время достижения максимальной концентрации (T_max, ч), период полувыведения (Т_1/2, ч), площадь под фармакокинетической кривой концентрация-время (AUC_0-t, нг·ч/мл; AUC_0-∞, нг·ч/мл), среднее время удерживания (МКТ₂₄, ч; MRT, ч), константу элиминации (K_e1, 17 ч), общий клиренс (Cl, л/ч) объем распределения (Yd, л) рассчитывали модельно-независимым методом с использованием программы Kinetica 5.0. Коэффициент абсорбции (C_max/AUC_0-∞) рассчитывали с помощью офисного пакета «Microsoft Excel 2010».

Статистическая обработка полученных данных осуществлялась с использованием программы Statistica 8.0. Характер распределения данных определяли по критерию Шапиро-Уилка. Наличие статистически достоверных межгрупповых различий определяли по критерию Ньюмена-Кейлса после проведения дисперсионного анализа повторных измерений (тест ANOVA - для показателей, имеющих нормальное распределение, критерий Фридмана - для показателей, распределение которых отличалось от нормального).

Полученные данные представлены в виде среднего арифметического значения (М) и стандартной ошибки средней арифметической (m) в случае нормального распределения признака или в виде медианы, верхнего и нижнего квартиля - при распределении признака, отличном от нормального (Таблица 1)

Таблица 1
Основные фармакокинетические параметры фексофенадина при введении линестренола (M±m - при нормальном распределении признака; медиана, нижний и верхний квартиль - при распределении признака, отличном от нормального)
Изучаемые параметры	Исходные значения n=10	Линестренол 14 дней n=10	Линестренол 21 день n=10	Линестренол 28 день n=10
C_max, нг/мл	292,40±29,95	746,89±163,81*	891,12±142,48*	962,81±114,04*
T_max, ч	4,0±0,15	3,9±0,1	3,8±0,13	3,7±0,26
T_1/2, ч	4,29 (2,50; 8,55)	14,65 (9,22; 21,42)*	10,31 (5,96; 16,22)	14,21 (8,06; 23,03)*
AUC_0-24, нг·ч/мл	2362,75±414,53	6618,68±898,45 *	7380,95±1147,1 3	10014,86±866,7
AUC_0-∞, нг·ч/мл	2177,09 (1378,56; 3456,15)	10177,50* (7080,77; 13611, 02)	10080,41* (4209,44; 15756, 40)	15476,25* (11012,71; 19846,4)
C_max/AUC_0-24	0,14 (0,11;0,21)	0,08 (0,03;0,1)*	0,12 (0,09; 0,17)	0,09 (0,07; 0,12)
C_max/AUC_0-∞	0,11 (0,099;0,15)	0,04 (0,02;0,07)*	0,09 (0,06;0,16)	0,05 (0,04;0,11)*
MRT₂₄, ч	8,95±0,59	10,62±0,41*	9,35±0,54	10,46±0,48*
MRT, ч	9,60 (8,11; 15,51)	22,77 (14,54; 31,11)*	17,52 (9,96; 24,28)*	23,21 (19,18; 31,51)*
Cl, л/ч	137,58 (77,86; 209,59)	9,60 (8,11; 15,51)*	9,60 (8,11; 15,51)*	9,60 (8,11; 15,51)*
Vd, n	1202,11 (1025,58; 2231,12)	724,13 (355,31; 1259,72)*	483,8 (361,6; 694,71)*	410,20 (316,25; 596,51)*
K_el, 1/4	0,175±0,031	0,051±0,008*	0,080±0,015*	0,055±0,01*
Примечание:
* - p<0,05 - достоверные различия со значениями у интактных животных (исходные значения);

Введение кроликам линестренола в дозе 110 мкг/кг в течение 14 дней приводило к достоверному (р<0,05) повышению C_max фексофенадина на 155,4%, AUC_0-24 на 180,1%, AUC_0-∞ на 367,5%, T_1/2 на 241,5%, MRT₂₄ на 18,7%, MRT на 137,2%, снижению Cl на 82,2%, Vd на 39,8%, K_el на 70,9%, C_max/AUC_0-24 на 42,9% и C_max/AUC_0-∞ на 63,6% по сравнению с исходными показателями.

Применение исследуемого линестренола в течение 21 дня сопровождалось достоверным (р<0,05) изменением изучаемых фармакокинетических показателей: наблюдалось повышение C_max фексофенадина на 204,8%, AUC_0-∞ на 363,0%, MRT на 82,5%, снижение Cl на 80,3%, Vd на 59,7%, K_el на 54,3% в сравнении с данными интактных животных.

После введения изучаемого препарата курсом 28 дней наблюдалось достоверное (р<0,05) увеличение C_max фексофенадина на 229,3%, AUC_0-∞ на 610,9%, T_1/2 на 231,2%, MRT₂₄ на 16,9%, MRT на 141,8%, снижению С1 на 86,8%, Vd на 65,9%, K_el на 68,9% и C_max/AUC_0-∞ на 54,5% по сравнению с фармакокинетическими параметрами фексофенадина полученными до введения препарата.

В проведенном исследовании изучено влияние вещества линестренола на функциональную активность Pgp. Достоверное повышение значений C_max, AUC_0-24, AUC_0-∞, T_1/2, MRT, MRT₂₄, а также снижение значений Cl, K_el и Vd фексофенадина могут служить доказательством ингибирующего влияния норэтистерона на функциональную активность белка-транспортера Pgp в печени и почках - органах, ответственных за выведение фексофенадина.

Использование предлагаемого способа моделирования состояния ингибирования функциональной активности Pgp на кроликах позволяет применять линестренол в качестве положительного контроля пониженной функциональной активности белка-транспортера при поиске веществ аналогичного действия, а также для прогнозирования потенциальных субстратов Pgp при изучении лекарственных веществ на этапе доклинических исследований.

Источники информации

1. Schinkel A.H. The physiological function of drug-transporting P-glycoproteins / A.H. Schinkel // Cancer Biology. - 1997. - №8. - P.161-170.

2. The structure and functions of P-glycoprotein / Y. Li [et al.] // Curr. Med. Chem. - 2010. - Vol.17, №8. - P.786-800.

3. Метаболизм лекарственных средств. Научные основы персонализованной медицины: руководство для врачей / В.Г. Кукес [и др.]. - М.: ГЭОТАР - Медиа, 2008. - 304 с.

4. Якушева Е.Н. Дозозависимое влияние тироксина на функциональную активность гликопротеина-Р в эксперименте / Е.Н. Якушева, А.В. Щулькин, А.С. Бирюкова // Биомедицина. - 2012. - №2. - С.53-60.

5. In vitro and ex vivo evidence for modulation of P-glycoprotein activity by progestins / M. Fröhlich [et al.] // Biochem Pharmacol. - 2004. - Vol.68, №12. - P.2409-2416.

6. Machavaram K.K. Effect of ketoconazole and rifampicin on the pharmacokinetics of ranitidine in healthy human volunteers: a possible role of P-glycoprotein / K.K. Machavaram, J. Gundu, M.R. Yamsani // Drug Metabol. Drug Interact. - 2006. - Vol.22, №1. - P.47-65.

7. Fox E. Tariquidar (XR9576): a P-glycoprotein drug efflux pumpinhibitor / E. Fox, S.E. Bates // Expert Rev. Anticancer Ther. - 2007. - Vol.7, №4. - p.447-459.

8. Involvement of cytochrome P450 3A4 and P-glycoprotein in first-pass intestinal extraction of omeprazole in rabbits. / H.M. Fang [et al.] // Acta Pharmacol Sin. - 2009. - Vol.30. - P.1566-1572.

9. Tariquidar-induced P-glycoprotein inhibition at the rat blood-brain barrier studied with (R)-11C-verapamil and PET / J.P. Bankstahl [et al.] // J Nucl Med. - 2008. - Vol.49. - P.1328-1335.

10. (R)-[(11)C]verapamil is selectively transported by murine and human P-glycoprotein at the blood-brain barrier, and not by MRP1 and BCRP / K. Romermann [et al.] // Nucl Med Biol. - 2013. - Vol.40, №7. - P.873-878.

11. Effects of Selected OATP and/or ABC Transporter Inhibitors on the Brain and Whole-Body Distribution of Glyburide / N. Toumier [et al.] // AAPS J. - 2013. - Vol.15, №4. - P.1082-1090.

12. Oral cyclosporin A inhibits CD4 Т cell P-glycoprotein activity in HIV-infected adults initiating treatment with nucleoside reverse transcriptase inhibitors / T. Hulgan [et al.] // J Clin Pharmacol. - 2009. - Vol.65, №11 - P.1081-1088.

13. Cyclosporine Nephrotoxicity / By Emmanuel [et al.] // Bennett Seminars in Nephrology. - 2003. - Vol.23, №5. - P.465-476.

14. Inhibitory effect of ketoconazole on the pharmacokinetics of a multireceptor tyrosine kinase inhibitor BMS-690514 in healthy participants: assessing the mechanism of the interaction with physiologically-based pharmacokinetic simulations / Z. Yang [et al.] // J. Clin Pharmacol. - 2013. - Vol.53, №2. - P.217-227.

15. Pharmacological inhibition of P-glycoprotein transport enhances the distribution ofHIV-1 protease inhibitors into brain and testes. / E.F. Choo [et al.] // Drug Metab Dispos. - 2000. - Vol.28, №6. - P.655-660.

16. Inhibition of P-glycoprotein by newer antidepressants. / J. Weiss [et al.] // J Pharmacol Exp Ther.- 2003. - Vol.305, №1. - P.197-204.

17. Influence of combinations of digitonin with selected phenolics, terpenoids, and alkaloids on the expression and activity of P-glycoprotein in leukaemia and colon cancer cells. / S.Y. Eid [et al.] // Phytomedicine. - 2013. - Vol.21, №1. - P.47-61

18. Kim W.Y. P-glycoprotein (P-gp/MDR1)-mediated efflux of sex-steroid hormones and modulation of P-gp expression in vitro / W.Y. Kim, L.Z. Benet // Pharm Res. - 2004. - Vol.21, №7. - P.1284-1293.

19. Колхир С.В. Клиническое значение изучения активности транспортера лекарственных средств гликопротеина-Р для оптимизации фармакотерапии: автореф. дис. канд. мед. наук: 14.00.25 / С.В. Колхир; ГОУ ВПО ММА им. И.М. Сеченова. - М., 2007. - 21 с.

20. Скуридина Е.А. Особенности фармакокинетики фексофенадина при совместном применения с верапамилом и негрустином: автореф. дис. канд. фармац. наук: 15.00.02 / Е.А. Скуридина; ГОУ ВПО ММА им. И.М. Сеченова. - М., 2007. - 24 с.

21. Раменская Г.В. Разработка методики количественного определения маркера активности P-гликопротеина фексофенадина в плазме крови / Г.В. Раменская, Е.А. Скуридина, Л.М. Красных // Хим.-фармац. журн. - 2006. - Т.40, №12. - С.47-50.

22. Черных И.В. Разработка методики определения концентрации фексофенадина в плазме крови методом ВЭЖХ на хроматографе Stayer / И.В. Черных // Материалы межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых «Аспирантские чтения 2012». - Рязань, 2012. - С.96-98.

Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-Р линестренолом в организме, представляющий собой введение препарата-ингибитора, отличающийся тем, что в качестве такого препарата используют линестренол, который при проведении эксперимента in vivo вводят кроликам внутрижелудочно в суточной дозе 110 мкг/кг массы тела животного курсом 14, 21 или 28 дней.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной онкологии, и может быть использовано для изучения механизмов лимфатического канцерогенеза и разработки новых методов лечения лимфом.

Средство для коррекции патологических изменений у жизнеспособного потомства, вызванных цитостатическим воздействием на организм матери // 2552612

Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии, и касается расширения арсенала средств для коррекции патологических изменений состояния жизнеспособного потомства при цитостатическом воздействии.

Способ восстановления селезенки после лучевой нагрузки // 2551937

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности разработке способов лечения лучевой болезни. Способ осуществляют путем проведения лабораторным мышам через час после облучения внутривенной аллогенной трансплантации мультипотентных мезенхиальных стромальных клеток (ММСК) и гемопоэтических стволовых клеток (ГСК).

Способ профилактики и лечения острой лучевой болезни в эксперименте // 2551619

Изобретение относится к медицине, ветеринарии и предназначено для профилактики и лечения острой лучевой болезни. Животным после облучения в дозах, вызывающих костномозговую форму радиационного поражения, перорально вводят меланин с водорастворимостью не менее 80% и концентрацией парамагнитных центров не менее 8·1017 спин/г, в растворенном виде в дистиллированной воде в эффективной концентрации.

Способ оценки пространственной ориентировки и когнитивных нарушений у экспериментальных животных // 2551308

Изобретение относится к области медицины, а именно к физиологии поведения животных. Ориентировочно-исследовательское и двигательное поведение крыс исследуют на фоне выработки пищедобывательного навыка посредством дифференциации траектории движения животных в Ж-образном лабиринте.

Способ оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте // 2550974

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, патологической анатомии, патологической физиологии и может быть использовано для оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте.

Способ оперативного доступа к лопатке в эксперименте на крысе // 2550938

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, патологической анатомии и патологической физиологии. Выполняют общее обезболивание.

Способ экспресс-моделирования износа полиэтиленового вкладыша металлической чашки или полиэтиленовой чашки в динамических условиях при разных углах горизонтальной инклинации в экспериментальном модуле эндопротеза тазобедренного сустава // 2550730

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Способ экспресс-моделирования износа полиэтиленового вкладыша металлической чашки или полиэтиленовой чашки в динамических условиях при разных углах горизонтальной инклинации в экспериментальном модуле эндопротеза тазобедренного сустава заключается в проведении в условиях эксперимента долговременных и многократных циклических движений в модуле эндопротеза тазобедренного сустава.

Интерактивный тренажер для отработки навыков по оказанию первой помощи человеку при закупорке верхних дыхательных путей // 2550665

Изобретение относится к средствам для обучения медицинского персонала и населения приемам первой помощи человеку при тяжелой обструкции верхних дыхательных путей инородным телом.

Модифицированный способ оперативного доступа к лопатке в эксперименте на крысе // 2550129

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, патологической анатомии и патологической физиологии. Проводят общее обезболивание.

Способ экспериментального моделирования коркового вида катаракты in vivo // 2553577

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и касается моделирования коркового вида катаракты in vivo. Для этого у экспериментального животного проводят хирургическую двустороннюю десимпатизацию путем иссечения верхнего шейного симпатического ганглия. При простоте и экономичности моделирования способ обеспечивает формирование коркового помутнения хрусталика, которое по клиническим, морфологическим и иммуногистохимическим характеристикам идентично изменениям клеток хрусталика при возрастном его помутнении у человека. 6 ил., 2 табл.

Способ создания экспериментальной модели острого панкреатита у животного // 2553940

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии, патофизиологии, и касается моделирования острого панкреатита. Для этого способ включает лигирование основного ствола выводного протока поджелудочной железы, введение в систему протоков поджелудочной железы агрессивного раствора для проявления панкреатита, удаление лигатуры. При этом в качестве агрессивного раствора используют 1% раствор хенодеоксихолевой кислоты с 5% раствором натрия гидрокарбоната в равных соотношениях и в объеме 0,3-0,5 мл из расчета 10-15 мг/кг массы тела животного. Способ обеспечивает создание модели острого жирового, геморрагического или смешанного панкреатита у животного, что позволяет использовать его для усовершенствования известных способов консервативных и оперативных методов лечения. 15 ил.

Тест-фантом // 2555129

Изобретение относится к рентгеноскопии, а именно к элементам медицинской рентгенодиагностики. Тест-фантом состоит из двух частей, образующих единое целое. Одна часть имеет постоянную высоту в продольном направлении, а другая часть имеет непрерывно меняющуюся высоту в этом же направлении, образуя клин. На боковой стороне клиновой части выполнены калиброванные вырезы. Использование изобретения обеспечивает повышение точности определения минеральной плотности костной ткани по рентгеновским снимкам, получаемым с помощью рентгеновских аппаратов общего применения, и упрощение конструкции. 7 ил.

Способ моделирования экспериментальной амилоидной кардиопатии у крыс // 2556571

Изобретение относится к медицине, экспериментальной биологии и может быть использовано для моделирования экспериментальной амилоидной кардиопатии у животных. Способ заключается в однократном введении старым крысам-самцам смеси, состоящей из гомогенезированной ткани миокарда крыс - 25%, яичного альбумина - 25% и адъюванта Фрейнда - 50%. Введение осуществляют по 0,3 мл в 5 точек инъекции: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области подкожно слева и справа. Способ, являясь легко воспроизводимым и экономически выгодным, эффективен в отношении создания модели с целью получения возможности изучения патогенеза, профилактики и лечения кардиопатии. 2 ил., 1 табл., 1 пр.

Способ лечения хронической ишемии конечности в эксперименте // 2556606

Изобретение относится к медицине, а именно к сосудистой хирургии, и может быть использовано при разработке способов лечения хронических облитерирующих заболеваний артерий нижних конечностей. Для этого моделируют ишемию конечности у крысы-самца породы Вистар путем иссечения бедренной, подколенной артерий и начальных отделов артерий голени под наркозом хлоралгидратом в дозе 250-300 мг/кг. Затем вводят предварительно полученную мононуклеарную фракцию аутологичного костного мозга в дозе 4×106 клеток в объеме 200 мкл. Введение осуществляют в ишемизированную конечность из двух точек, в каждую по 100 мкл. Одна точка - это непосредственно под паховой связкой паравазально в зоне анатомического расположения коллатералей внутренней подвздошной артерии и ее ветвей. Другая точка - в икроножной мышце переднелатеральной поверхности средней трети голени. Способ обеспечивает повышение эффективности лечения в эксперименте за счет стимуляции развития коллатерального кровотока в ишемизированной конечности и улучшения артериального притока крови из проксимальных отделов конечности в дистальные. 1 пр., 1 табл.

Способ стимуляции регенерации резецированной печени l-норвалином // 2556609

Изобретение относится к экспериментальной фармакологии и экспериментальной хирургии и может быть использовано для стимуляции регенерации резецированной печени. Для этого лабораторному животному на вторые сутки эксперимента осуществляют резекцию печени в объеме 70%. В качестве стимулятора регенерации печени вводят L-норвалин внутрижелудочно в суточной дозе 10,0 мг/кг каждые 46 часов первые 7 суток эксперимента. Способ обеспечивает эффективную стимуляцию регенерации резецированной печени, подтверждаемую снижением летальности животных, улучшением микроциркуляции в печени, уменьшением выраженности цитолиза, улучшением синтетической функции печени. 2 табл., 1 пр.

Способ диагностирования эндопротезов суставов с металлической парой трения // 2556789

Изобретение относится к области испытаний изделий медицинской техники, а именно к вопросу производственных испытаний эндопротезов суставов с металлической парой трения, состояние которой в процессе испытаний оценивается с применением электрических (электрорезистивных) методов диагностирования. Способ диагностирования эндопротезов суставов с металлической парой трения заключается в том, что эндопротез закрепляют в испытательном стенде, нагружают осевой силой, формируют смазочный слой между поверхностями компонентов эндопротезов и определяют физические характеристики поверхностного слоя компонентов в зоне трения. При этом пропускают через зону трения эндопротеза малый по значению переменный электрический ток, регистрируют временную функцию комплексного сопротивления трибосопряжения эндопротеза, по параметрам активной и реактивной составляющих которой судят о фактической толщине смазочного слоя и о доминирующем в трибосопряжении виде смазки и режиме трения. По отношению временных отрезков, в которых активная часть комплексного сопротивления больше реактивной части, к общему времени измерения оценивают фактическое техническое состояние трибосопряжения эндопротеза сустава. Изобретение обеспечивает сокращение времени испытаний, оценку реального времени контактного взаимодействия поверхностей трения, повышение мощности выделяемого полезного сигнала, его помехоустойчивость в формировании объективной исходной диагностической информации из зоны трения для последующего прогнозирования долговечности эндопротеза сустава с металлической парой трения. 5 ил.

Способ лечения химического ожога пищевода и желудка в эксперименте // 2557136

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается разработки тактики лечения химических ожогов пищевода и желудка. Для этого у лабораторных крыс моделируют химический ожог. Начиная с 5-х суток после создания модели осуществляют внутрибрюшное введение лекарственных средств. При этом вводят цефатаксим в дозе 100 мг/кг в течение 7 суток. Преднизолон вводят в дозе 1 мг/кг в течение 3 суток. Введение 3%-ного раствора ксимедона осуществляют в дозе 30 мг/кг 1 раз в течение 40 суток. Способ обеспечивает эффективное лечение ожогов пищевода и желудка за счет быстрого восстановления толщины мышечной пластинки слизистой оболочки и предупреждения образования рубцов. 1 табл., 16 ил.

Способ моделирования посттрансплантационных изменений в почке // 2557701

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной патофизиологии и трансплантологии, и касается моделирования посттрансплантационных изменений почки. Для этого лабораторному животному - крысе выполняют одностороннюю нефрэктомию, денервацию и делимфатизацию второй почки. Затем пережимают почечные артерию и вену на 40-60 минут. После выполнения хирургического вмешательства проводят трехкратную иммунизацию лабораторного животного почечным антигеном, полученным из удаленной почки, адъювантным методом. При этом за 5 недель до хирургического вмешательства у лабораторного животного производят забор клеток костного мозга, получают из них in vitro культуру мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток. Денервацию и делимфатизацию оставшейся почки выполняют путем удаления адвентиции и клетчатки, окутывающих мочеточник, почечные артерию и вену, в области ворот почки на протяжении 7-10 мм и декапсуляции почки в области ее медиального края шириной 7-10 мм, протяженностью от одного полюса почки до другого с захватом области ее ворот. Для получения почечного антигена используют целую почку и доводят содержание белка в нем до 70 мг/мл. На 35-40 сутки после выполнения хирургической операции вводят полученную культуру мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток тому же животному внутривенно в дозе 1,5-3,0 млн клеток в 1 мл физиологического раствора. Способ позволяет создать адекватную, доступную для выполнения модель хронического отторжения в аутологичных почках у мелких лабораторных животных с ускоренным развитием визуализируемых деструктивных посттрансплантационных процессов. 1 пр., 1 табл., 9 ил.

Способ экспериментального хирургического лечения травматических повреждений спинного мозга с одновременным ускорением его регенерации // 2557890

Изобретение относится к экспериментальной медицине, травматологии и ортопедии, хирургическому лечению травматических повреждений спинного мозга с одновременным ускорением его регенерации. По задней поверхности травмированного спинного мозга экспериментального животного (ЭЖ) без его компрессии размещают биосовместимый имплантат (БИ) из магнитного материала в биосовместимой матрице (БМ). Затем периодически помещают ЭЖ в постоянное магнитное поле. Вектор напряженности его воздействия совпадает с кранио-каудальной ориентацией проводящих путей спинного мозга. В качестве БМ БИ используют желатин животного или растительного происхождения, в котором иммобилизованы в качестве магнитного материала БИ наполнитель в виде наночастиц ферромагнитного магнетита или ферромагнитного феррита в количестве 18-42 мас.% с размером наночастиц 2,0-38 нм и с напряженностью магнитного поля (Н) 5-10 мТл. Магнитное воздействие на травматические повреждения спинного мозга проводят сочетанным воздействием магнитного поля БИ и внешнего вращающегося постоянного магнитного поля с магнитной индукцией 0,15-0,35 Тл. Периодичность внешнего магнитного воздействия 1-2 раза в сутки, длительность 2-8 мин за один сеанс, количество сеансов 2-4. В качестве желатина животного происхождения БМ БИ можно использовать агар-агар, желатина растительного происхождения - пектин. В БМ БИ могут быть дополнительно введены способствующие росту и пролиферации клеток полиамины, например спермин или спермидин, в количестве 1-5 мас.%. Способ обеспечивает достаточно полное восстановление функции спинного мозга дистальнее зоны его повреждения, обеспечение благоприятных условий для достаточного роста нейроглии с прорастанием аксонов реципиента из неповрежденного проксимального отдела спинного мозга в дистальный для восстановления его проводящей функции, обеспечение уменьшения образования рубцовой ткани в области травмы спинного мозга, устранение отека мозговой ткани. 2 з.п. ф-лы, 8 пр.