Способ оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций: безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции

Авторы патента:

Миноранская Наталья Сергеевна (RU)

Сарап Павел Владимирович (RU)

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Владельцы патента RU 2647450:

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "КРАСНОЯРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ ПРОФЕССОРА В.Ф. ВОЙНО-ЯСЕНЕЦКОГО" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано в клинической практике для оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций: безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции Для этого определяют значения лабораторных показателей пациента в остром периоде заболевания (в сроки 10-14 дней от начала заболевания): доли CD4+, CD8+ лимфоцитов, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов, уровни IgM, ИЛ-8, гамма-глобулинов, фагоцитарный индекс (ФИ), количество фагоцитирующих нейтрофилов (ФН), индекс Кердо; определяют значения лабораторных показателей пациента в периоде реконвалесценции (в сроки 21-25 дней от начала заболевания): долю CD3+ лимфоцитов, абсолютное количество CD8+ лимфоцитов, уровень IgM, индекс Кердо. В остром периоде заболевания оценивают значения лабораторных показателей пациента в баллах: долю CD4+ лимфоцитов при значениях ≤34,1% - 4 балла, долю CD8+ лимфоцитов при значениях ≤24,01% - 1 балл, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов при значениях ≤678,07 мкл^-1 - 3 балла, уровни IgM при значениях >7,66 г/л - 6 баллов, ИЛ-8 при значениях >97,4 пг/мл - 6 баллов, гамма-глобулинов при значениях ≤16,88% - 4 балла, показатели ФИ при значениях >35,6% - 1 балл, ФН при значениях >1892,68 мкл^-1 - 1 балл, индекс Кердо при значениях ≤-7,14 - 4 балла; иные значения показателей оценивают как 0 баллов; подсчитывают сумму баллов; при сумме >11 баллов оценивают вероятность развития сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции равной 82,25±0,06%; при сумме ≤11 баллов оценивают вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза равной 84,81±0,05%. В периоде реконвалесценции оценивают значения лабораторных показателей пациента острого периода заболевания в баллах: долю CD4+ лимфоцитов при значениях ≤34,1% - 4 балла, долю CD8+ лимфоцитов при значениях ≤24,01% - 1 балл, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов при значениях ≤678,07 мкл^-1 - 3 балла, уровни IgM при значениях >7,66 г/л - 6 баллов, ИЛ-8 при значениях >97,4 пг/мл - 6 баллов, гамма-глобулинов при значениях ≤16,88% - 4 балла; ФИ при значениях >35,6% - 1 балл, ФН при значениях >1892,68 мкл^-1 - 1 балл, индекс Кердо при значениях ≤-7,14 - 4 балла; оценивают значения лабораторных показателей пациента периода реконвалесценции в баллах: долю CD3+ лимфоцитов при значениях ≤74,11% - 2 балла, абсолютное количество CD8+ лимфоцитов при значениях ≤480,45 мкл^-1 - -1 балл, уровень IgM при значениях >1,59 г/л - 3 балла, индекс Кердо при значениях ≤-11,15 - 2 балла; иные значения показателей оценивают как 0 баллов. Подсчитывают сумму баллов; при сумме >14 баллов оценивают вероятность развития сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции равной 88,53±0,05%; при сумме ≤14 баллов оценивают вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза равной 86,80±0,05%. Использование данного способа позволяет проводить дифференцированную диагностику безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции. 6 табл., 2 ил.

Иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ) представляют собой трансмиссивные природно-очаговые заболевания, характеризующиеся полиморфизмом клинической симптоматики с поражением кожных покровов, опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой систем [3, 4]. Одной из особенностей иммунного ответа при боррелиозе является позднее образование специфических антител [9, 10, 12]. Манифестация заболевания протекает в виде эритемной или безэритемной формы ИКБ. Микст-инфицированность иксодовых клещей - основных резервуаров и переносчиков инфекции, обусловливает сочетанное течение клещевых инфекций [2, 3]. Наиболее часто встречается сочетанное инфицирование возбудителями ИКБ и клещевого энцефалита (КЭ).

В природных очагах отмечается большой удельный вес безэритемных форм боррелиоза и микст-инфекции ИКБ с КЭ. Эти формы заболевания требуют различной этиотропной и патогенетической терапии [2, 6].

Отсутствие своевременного адекватного лечения приводит к удлинению инфекционного процесса и формированию хронического течения ИКБ с развитием органных поражений, нередко приводящих к инвалидности лиц молодого трудоспособного возраста [3, 9].

Трудности своевременной диагностики ИКБ связаны с обширным спектром неспецифических клинических проявлений и медленным антителогенезом, что в совокупности не позволяет верифицировать безэритемные и микст-формы в остром периоде заболевания [6, 10, 12]. Поэтому актуальным представляется разработка алгоритмов ранней дифференциальной диагностики этих клинических форм в остром периоде заболевания.

Известны методы диагностики форм ИКБ, включающие серологическое исследование сыворотки крови для выявления антител классов IgM и IgG к боррелиям, а также молекулярно-генетическое (ПЦР) исследование биологического материала (ликвор, кровь, околосуставная жидкость, кожный лоскут) для определения ДНК боррелий. Однако последний является малоинформативным, что обусловлено большим количеством геновидов боррелий [8, 11]. Широко распространен иммуноферментный анализ сыворотки крови для определения антител к боррелиям [10, 11, 12]. Недостатком которого является невозможность верификации заболевания на ранних сроках инфекционного процесса [10, 12].

Ближайшими аналогами изобретения являются регрессионные модели, предназначенные для дифференциальной диагностики безэритемных форм ИКБ и сочетанного течения ИКБ с КЭ, описанные в диссертационном исследовании [5]. Они учитывают показатели пациента в период разгара заболевания: индекс работы сердца, индекс стресса, лейкоцитарные индексы интоксикации по Я.Я. Кальф-Калифу и В.К. Островскому, наличие IgM к Borrelia burgdorferi sensu lato, С-реактивный белок, сиаловые кислоты, серомукоид, α1-, α2-, β-, γ-глобулины, CD3+, CD4+, фагоцитарный индекс, фагоцитарное число, интерлейкины-1β, 4, 8, фактор некроза опухоли-α, индекс Кердо, CD4+ (абсолютное количество), CD4+ (%), CD8+ (%), число фагоцитирующих нейтрофилов, содержание общих IgG, интерлейкин-8; в период реконвалесценции, помимо перечисленных показателей в разгар заболевания, дополнительно учитывают показатели: индекс стресса, лейкоцитарные индексы интоксикации по Я.Я. Кальф-Калифу, В.К. Островскому и С.Ф. Химичу.

Основными недостатками аналогов являются: трудоемкость вычисления промежуточных значений (индексов работы сердца, стресса, лейкоцитарных индексов интоксикации по Я.Я. Кальф-Калифу, В.К. Островскому и С.Ф. Химичу), необходимость вычисления результатов сложного регрессионного уравнения.

Задачей предлагаемого способа является оценка вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций: безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции.

Поставленную задачу решают за счет того, что определяют значения лабораторных показателей пациента в остром периоде заболевания (в сроки 10-14 дней от начала заболевания): доли CD4+, CD8+ лимфоцитов, абсолютное количество CD4+лимфоцитов, уровни IgM, ИЛ-8, гамма-глобулинов, фагоцитарный индекс (ФИ), количество фагоцитирующих нейтрофилов (ФН), индекс Кердо; определяют значения лабораторных показателей пациента в периоде реконвалесценции (в сроки 21-25 дней от начала заболевания): долю CD3+ лимфоцитов, абсолютное количество CD8+ лимфоцитов, уровень IgM, индекс Кердо;

в остром периоде заболевания оценивают значения лабораторных показателей пациента в баллах: долю CD4+ лимфоцитов при значениях ≤34,1% - 4 балла, долю CD8+ лимфоцитов при значениях ≤24,01% - 1 балл, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов при значениях ≤678,07 мкл^-1 - 3 балла, уровни IgM при значениях >7,66 г/л - 6 баллов, ИЛ-8 при значениях >97,4 пг/мл - 6 баллов, гамма-глобулинов при значениях ≤16,88% - 4 балла, показатели ФИ при значениях >35,6% - 1 балл, ФН при значениях >1892,68 мкл^-1 - 1 балл, индекс Кердо при значениях ≤-7,14 - 4 балла; иные значения показателей оценивают как 0 баллов; подсчитывают сумму баллов; при сумме >11 баллов оценивают вероятность развития сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции равной 82,25±0,06%; при сумме ≤11 баллов оценивают вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза равной 84,81±0,05% (табл. 1);

в периоде реконвалесценции оценивают значения лабораторных показателей пациента острого периода заболевания в баллах: долю CD4+ лимфоцитов при значениях ≥34,1% -4 балла, долю CD8+ лимфоцитов при значениях ≤24,01% - 1 балл, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов при значениях ≤678,07 мкл^-1 - 3 балла, уровни IgM при значениях >7,66 г/л - 6 баллов, ИЛ-8 при значениях >97,4 пг/мл - 6 баллов, гамма-глобулинов при значениях ≤16,88% - 4 балла; ФИ при значениях >35,6% - 1 балл, ФН при значениях >1892,68 мкл^-1 - 1 балл, индекс Кердо при значениях ≤-7,14 - 4 балла; оценивают значения лабораторных показателей пациента периода реконвалесценции в баллах: долю CD3+ лимфоцитов при значениях ≤74,11% - 2 балла, абсолютное количество CD8+ лимфоцитов при значениях ≤480,45 мкл^-1 - -1 балл, уровень IgM при значениях >1,59 г/л - 3 балла, индекс Кердо при значениях ≤-11,15 - 2 балла; иные значения показателей оценивают как 0 баллов; подсчитывают сумму баллов; при сумме >14 баллов оценивают вероятность развития сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции равной 88,53±0,05%; при сумме ≤14 баллов оценивают вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза равной 86,80±0,05% (табл. 2).

Примечание: острый период - сроки в течение 10-14 дней от начала заболевания.

Информативность предлагаемого способа оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций была оценена в период разгара заболевания и в период реконвалесценции у 242 пациентов с безэритемной формой иксодового клещевого боррелиоза и 226 пациентов с сочетанным течением боррелиозно-энцефалитной инфекции.

Первое обследование проводили в остром периоде заболевания - в сроки 10-14 дней от начала заболевания. Второе обследование проводили в периоде реконвалесценции - в сроки 21-25 дней от начала заболевания.

Диагноз подтверждали выявлением специфических антител к Borrelia burgdorferi sensu lato и вирусу КЭ методом ИФА с применением тест-систем «Вектор-Бест» (г. Кольцово Новосибирской области). Диагностически значимым считали количество антител свыше 20 ЕД/мл. При отсутствии специфических антител проводили исследования в периоде реконвалесценции: в начале четвертой недели болезни (21-25 дней от начала заболевания) и позднее - спустя 1,5 месяца, 3 и 6 месяцев после манифестации заболевания. Для оценки катамнеза серологическое исследование сыворотки крови с целью выявления IgM и IgG к боррелиям проводили спустя 12, 18, 24 месяца.

Примечание: острый период - сроки в течение 10-14 дней от начала заболевания; период реконвалесценции - сроки в течение 21-25 дней от начала заболевания.

Долю лимфоцитов (%), экспрессирующих молекулы: CD3, CD4, CD8, определяли с использованием моноклональных антител. Оценивали абсолютные количества CD4+ лимфоцитов (CD4+ абс) и CD8+ лимфоцитов (CD8+ абс) в мкл крови. Фагоцитарную активность нейтрофилов изучали с помощью латекс-теста. Учитывали фагоцитарный индекс (ФИ) и количество фагоцитирующих нейтрофилов в мкл крови.

Концентрацию сывороточных иммуноглобулинов IgM определяли методом простой радиальной иммунодиффузии по G. Mancini с соавт. (1965) [7].

Уровень IL-8 в сыворотке крови определяли методом ИФА с применением реагентов моноклональных антител ООО «Вектор-Бест» (г. Кольцово Новосибирской области).

Индекс Кердо, характеризующий тонус вегетативной нервной системы, определяли по формуле:

Индекс Кердо = (1-d/p)⋅100,

где d - диастолическое артериальное давление, p - частота сердечных сокращений [1].

Содержание в сыворотке крови гамма-глобулинов определяли на универсальном автоматическом биохимическом анализаторе "Hitachi 912" фирмы "Roche Diagnostics" (Швейцария).

Чувствительность и специфичность предложенного способа оценивали методами ROC-анализа с вычислением величины площади под кривой (AUC). При вычислении AUC использовали шаг интервала значений 0,01 (1,0%).

Статистическую обработку полученных результатов исследования проводили с применением пакета статистических программ «Statistica for Windows`6.0». Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в исследовании принимали равным 0,05. При p<1,0⋅ 10^-29 (ниже предела измерений достоверности различий "Statistica for Windows`6.0") принимали p=0,00.

Построены две регрессионные модели, позволяющие оценить вероятность развития у пациента вариантов клещевых инфекций в остром периоде заболевания (модель-1) и в периоде реконвалесценции (модель-2).

Предложенный способ оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций в остром периоде заболевания основывается на математической модели-1, имеющей следующие характеристики: коэффициент аппроксимации R²=0,719; значение критерия Фишера F(9,458)=54,467; достоверность модели р=0,000.

У пациентов с сочетанным теченим боррелиозно-энцефалитной инфекции средние значения составили 17,05±0,37 баллов, а у пациентов с безэритемной формой иксодового клещевого боррелиоза средние значения составили 6,78±0,28 баллов (табл. 4). При этом интервалы значений, лежащие в пределах квартилей 25%-75%, не пересекались, достоверность различий показателей пациентов с различными формами ИКБ составила р=0,00 (табл. 4). По результатам ROC-анализа предлагаемый Способ прогноза развития клинических форм клещевых инфекций в остром периоде заболевания характеризуется значением AUC=0,91, что соответствует «отличному» качеству прогнозирования (табл. 3). Значение точки отсечения (COV) - порогового значения, разделяющего варианты клещевых инфекций, составляет 11 баллов. При сумме баллов выше этого значения вероятность развития микст-формы боррелиозно-энцефалитной инфекции составляет 82,25±0,06%; при сумме ≤11 баллов вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза составляет 84,81±0,05%.

Предложенный способ оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций в периоде реконвалесценции учитывает показатели пациентов как в остром периоде заболевания, так и в периоде реконвалесценции, что позволило повысить прогностическое качество для математической модели-2: коэффициент аппроксимации R²=0,749; F(13,454)=44,754; р=0,000 (табл. 3).

Примечания: AUC - (area under curve) значение площади под кривой; COV - (cut-off value) значение оптимального порога отсечения; БЭФ - безэритемная форма иксодового клещевого боррелиоза; МФ - сочетанное течение (микст-форма) боррелиозно-энцефалитной инфекции; острый период - сроки в течение 10-14 дней от начала заболевания; период реконвалесценции - сроки в течение 21-25 дней от начала заболевания.

Примечания: МФ - сочетанное течение (микст-форма) боррелиозно-энцефалитной инфекции; БЭФ - безэритемная форма иксодового клещевого боррелиоза; M±m - значения среднего арифметического и стандартной ошибки; мин.-макс. - минимальные и максимальные значения показателей; qu25-qu75 - интервалы значений, лежащие в пределах квартилей 25%-75%; острый период - сроки в течение 10-14 дней от начала заболевания; период реконвалесценции - сроки в течение 21-25 дней от начала заболевания; при p<1,0⋅10^-29 принимали р=0,00.

У пациентов с сочетанным течением боррелиозно-энцефалитной инфекции средние значения составили 20,24±0,36 баллов, а у пациентов с безэритемной формой иксодового клещевого боррелиоза средние значения составили 8,77±0,30 баллов (табл. 4). Интервалы значений, лежащие в пределах квартилей 25%-75%, также не пересекались, достоверность различий показателей пациентов с различными формами ИКБ составила р=0,00 (табл. 4). Значение точки отсечения (COV) - порогового значения, разделяющего варианты клещевых инфекций, составляет 14 баллов. При сумме баллов выше этого значения вероятность развития микст-формы боррелиозно-энцефалитной инфекции составляет 88,53±0,05%; при сумме ≤14 баллов вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза составляет 86,80±0,05%.

Графики характеристик качества моделей для прогнозирования развития безэритемной формы ИКБ или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции в координатах «Чувствительность - 100-Специфичность» приведены на фигурах 1 и 2. Показательно, что массивы данных, относящихся к разным вариантам заболеваний, разделены для модели 2 существеннее (фиг. 2), чем для модели 1 (фиг. 1). Этому соответствует большая площадь под кривой графика (величина AUC).

Пример 1. Пациентка Т., 64 лет, поступила на 14 день после присасывания клеща с клиникой интоксикационного синдрома, мононеврита лицевого нерва, артралгиями в области коленного и голеностопного суставов. На основании клинико-эпидемиологических сведений диагностирована безэритемная форма ИКБ. В период разгара заболевания регистрировался серонегативный специфический иммунный ответ: отрицательные титры IgM и IgG к боррелиям. Обследование клеща не проводилось. На протяжении 13 дней находилась на стационарном лечении. Выписана с выздоровлением. Специфический иммунный ответ сформировался через 3 месяца от начала присасывания клеща: обнаружены положительные титры IgM и IgG к боррелиям. Диагноз клещевого энцефалита не подтвердился.

При оценке показателей в острый период заболевания сумма составила 7 баллов (табл. 5), что позволяет при сумме ≤11 баллов прогнозировать развитие безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза с вероятностью 84,81±0,05% (табл. 3). Результат дифференциальной диагностики клещевых инфекций с использованием предложенного способа подтвержден серологически обнаружением антител к боррелиям, а также отсутствием антител к возбудителю клещевого энцефалита.

Примечание: острый период - сроки в течение 10-14 дней от начала заболевания.

Пример 2. Пациент С., 58 лет, поступил с клиникой лихорадочной формы клещевого энцефалита средней степени тяжести через 5 дней после присасывания клеща. В момент поступления в сыворотке крови обнаружены IgM к вирусу клещевого энцефалита. Регистрировался серонегативный специфический иммунный ответ: отрицательные титры IgM и IgG к боррелиям. Обследование клеща не проводилось. На протяжении 11 дней находился на стационарном лечении. Выписан с выздоровлением. Специфический иммунный ответ сформировался на 3 месяц от начала заболевания: обнаружены положительные титры IgM к боррелиям, что позволило на диспансерном этапе диагностировать микст-инфекцию ИКБ с КЭ. Диагноз клещевого энцефалита подтвержден серологически на 7 сутки от начала заболевания.

При оценке показателей в период реконвалесценции на 21 сутки от начала заболевания сумма составила 21 балл (табл. 6), что позволяет при сумме >14 баллов прогнозировать развитие сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции с вероятностью 88,53±0,05% (табл. 3). Результат дифференциальной диагностики клещевых инфекций с использованием предложенного способа подтвержден серологически обнаружением антител к возбудителям обеих инфекций в диагностически значимых титрах.

Полученные клинические результаты подтверждают высокую информативность предложенного способа оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций: безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции как в периоде разгара заболевания, так и в периоде реконвалесценции.

Преимуществами предлагаемого способа являются: высокая информативность и простота расчетов балльных показателей, не требующих использования вычислительной техники.

Предлагаемый способ может быть рекомендован для использования в медицине, а именно в клинической практике инфекционных болезней, для оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций: безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции.

Используемые источники

1. Заболевания вегетативной нервной системы / А.М. Вейн, Т.Г. Вознесенская, Л.В. Голубев и др. - М.: Медицина, 1991. - 624 с.

2. Клинические варианты микст-инфекций (клещевой энцефалит и Лайм-боррелиоз) / С.О. Вельгин, В.В. Щерба, С.А. Дракина [и др.] // Эпидемиология и инфекц. болезни. - 2007. - №3. - С. 38-41.

3. Коренберг, Э.И. Изучение и профилактика микст-инфекций, передающихся иксодовыми клещами / Э.И. Коренберг // Вестн. РАМН. - 2001. - №1. - С. 41-45.

4. Лобзин, Ю.В. Лайм-боррелиоз (иксодовые клещевые боррелиозы) / Ю.В. Лобзин, А.Н. Усков, С.С. Козлов. - СПб.: Фолиант, 2000. - 160 с.

5. Миноранская, Н.С. Иксодовые клещевые боррелиозы: клиника, иммунологические аспекты, прогноз исходов заболевания: дисс. … д-ра мед. наук: 14.01.09 / Миноранская Наталья Сергеевна. - СПб., 2014. - 304 с.

6. Hofmann, Н. Early diagnosis of Lyme borreliosis. Do not look only for erythema migrans / H. Hofmann // MMW Fortschr. Med. - 2002. - Vol. 144, №22. - P. 24-28.

7. Manchini, G. Immunochemical quantitation of antigens by single radical immunodiffusion / G. Manchini, A.O. Carbonara, J.F. Heremas // Immunochemistry. - 19 65. - Vol. 2, №3. - p. 235-254.

8. The role of PCR in diagnostics of Lyme borreliosis / J. Dunaj, A. Moniuszko, J. Zajlodska, S. Pancewicz // Przegl Epidemiol. - 2013. - Vol. 67, №1. - p. 119-123.

9. Santino, I. Clinical and serological features of patients with suspected Lyme borreliosis / I. Santino, V. Longobardi // Int. J. Immunopathol. Pharmacol. - 2011. - Vol. 24, №3. - P. 797-801.

10. Significance of specific antibody determination in Lyme borreliosis diagnosis / S. Bazovska, M. Kondas, M. Simkovicova [et al.] // Bratisl. Lek. Listy. - 2001. - Vol. 102, №10. - P. 454-457.

11. Wilske, B. Diagnosis of Lyme borreliosis in Europe / B. Wilske // Vector Borne Zoonotic Dis. - 2003. - Vol. 3, №4. - P. 215-227.

12. Wilske, B. Microbiological and serological diagnosis of Lyme borreliosis / B. Wilske, V. Fingerle, U. Schulte-Spechtel // FEMS Immunol. Med. Microbiol. - 2007. - Vol. 49, №1. - P. 13-21.

Способ оценки вероятности развития у пациента вариантов клещевых инфекций: безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза или сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции, включающий определение значений лабораторных показателей пациента в остром периоде заболевания (в сроки 10-14 дней от начала заболевания): долей CD4+, CD8+ лимфоцитов, абсолютного количества CD4+ лимфоцитов, уровней IgM, ИЛ-8, гамма-глобулинов, фагоцитарного индекса (ФИ), количества фагоцитирующих нейтрофилов (ФН), индекса Кердо; определение значений лабораторных показателей пациента в периоде реконвалесценции (в сроки 21-25 дней от начала заболевания): доли CD3+ лимфоцитов, абсолютного количества CD8+ лимфоцитов, уровня IgM, индекса Кердо;

отличающийся тем, что в остром периоде заболевания оценивают значения лабораторных показателей пациента в баллах: долю CD4+ лимфоцитов при значениях ≤34,1% - 4 балла, долю CD8+ лимфоцитов при значениях ≤24,01% - 1 балл, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов при значениях ≤678,07 мкл^-1 - 3 балла, уровни IgM при значениях >7,66 г/л - 6 баллов, ИЛ-8 при значениях >97,4 пг/мл - 6 баллов, гамма-глобулинов при значениях ≤16,88% - 4 балла, показатели ФИ при значениях >35,6% - 1 балл, ФН при значениях >1892,68 мкл^-1 - 1 балл, индекс Кердо при значениях ≤-7,14 - 4 балла; иные значения показателей оценивают как 0 баллов; подсчитывают сумму баллов; при сумме >11 баллов оценивают вероятность развития сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции равной 82,25±0,06%; при сумме ≤11 баллов оценивают вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза равной 84,81±0,05%; в периоде реконвалесценции оценивают значения лабораторных показателей пациента острого периода заболевания в баллах: долю CD4+ лимфоцитов при значениях ≤34,1% - 4 балла, долю CD8+ лимфоцитов при значениях ≤24,01% - 1 балл, абсолютное количество CD4+ лимфоцитов при значениях ≤678,07 мкл^-1 - 3 балла, уровни IgM при значениях >7,66 г/л - 6 баллов, ИЛ-8 при значениях >97,4 пг/мл - 6 баллов, гамма-глобулинов при значениях ≤16,88% - 4 балла; ФИ при значениях >35,6% - 1 балл, ФН при значениях >1892,68 мкл^-1 - 1 балл, индекс Кердо при значениях ≤-7,14 - 4 балла; оценивают значения лабораторных показателей пациента периода реконвалесценции в баллах: долю CD3+ лимфоцитов при значениях ≤74,11% - 2 балла, абсолютное количество CD8+ лимфоцитов при значениях ≤480,45 мкл^-1 - -1 балл, уровень IgM при значениях >1,59 г/л - 3 балла, индекс Кердо при значениях ≤-11,15 - 2 балла; иные значения показателей оценивают как 0 баллов; подсчитывают сумму баллов; при сумме >14 баллов оценивают вероятность развития сочетанного течения боррелиозно-энцефалитной инфекции равной 88,53±0,05%; при сумме ≤14 баллов оценивают вероятность развития безэритемной формы иксодового клещевого боррелиоза равной 86,80±0,05%.

Изобретение относится к медицине и касается способа выделения подклассов иммуноглобулина G (IgG) аутоантител к иммунорегуляторному цитокину фактору некроза опухоли (TNF), заключающегося в получении общей фракции IgG аффинной хроматографией с использованием сорбента Protein G Sepharose с последующей нейтрализацией, объединением и диализом IgG, очистке полученной фракции IgG от примеси TNF.

Способ дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы // 2646800

Изобретение используется в патологической анатомии, эндокринологии, хирургии. Способ дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы заключается в том, что проводят гистоэнзиматическое исследование фермента тиреопероксидазы (ТПО) в щитовидной железе и по активности ТПО диагностируют диффузный токсический зоб, многоузелковый токсический зоб, фолликулярную аденому в состоянии эутиреоза, аденокарциному.

Способ количественного определения серебряной соли сульфадимидина // 2646786

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано для количественного определения серебряной соли сульфадимидина для стандартизации и контроля качества лекарственных средств.

Способ прогнозирования прогресса папилломавирусной инфекции у пациенток с хроническим рецидивирующим впч - ассоциированным цервицитом // 2646785

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано в гинекологических стационарах и амбулаторных условиях женских консультаций и поликлиник для прогнозирования прогресса папилломавирусной инфекции у пациенток с хроническим рецидивирующим ВПЧ-ассоциированным цервицитом.

Способ оценки состояния здоровья человека с помощью иммунологического исследования крови // 2646503

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки состояния здоровья человека. В периферической крови обследуемого с помощью метода проточной цитофлюорометрии определяют процентное содержание Th17-лимфоцитов, а именно процент лимфоцитов с фенотипом CD3+CD4+CD161+CD45R0+ от гейта CD3+CD4+лимфоцитов.

Способ дифференциальной диагностики абстинентного синдрома при опийной наркомании, сочетанной с вич-инфекцией // 2646478

Изобретение относится к области медицины, а именно к наркологическим и инфекционным болезням, и может быть использовано для диагностики абстинентного синдрома при опийной наркомании, сочетанной с ВИЧ-инфекцией.

Способ прогнозирования эндометриопатии у женщин с репродуктивными нарушениями // 2646473

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования эндометриопатии, отличающийся тем, что в образце менструальной крови определяют концентрации интерлейкина-6 (ИЛ-6), глутатионпероксидазы-1 (ГТП 1) и растворимой формы Е-селектина и определяют коэффициент вероятности эндометриопатии (Р) по формуле: гдеа=0,0002782; b=0,0381529; с=-0,1205126; d=-1,1189533; e - экспонента (константа) = 2,7; X3 - значение концентрации ИЛ-6, пг/мл; Х2 - значение концентрации растворимой формулы Е селектина, нг/мл; X1 - значение концентрации ГТП 1, нг/мл; и при значении Рэ > 0,29 прогнозируют наличие эндометриопатии.

Способ оценки эффективности терапии инфекции вызванной вирусом герпеса человека 6 типа у детей // 2646472

Изобретение относится к области медицины, педиатрии, инфекционным болезням и касается способа оценки эффективности терапии инфекции, вызванной вирусом герпеса человека 6 типа (ВГЧ-6), у детей.

Способ оценки нейропротекторных свойств веществ in vitro и тест-система для его осуществления // 2646446

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для оценки нейропротекторных свойств веществ in vitro. Для этого используют дифференцированные в нейрональном направлении индуцированные плюрипотентные стволовые клетки человека путем репрограммирования фибробластов кожи человека в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки.

Клеточная культура конъюнктивы человека chang conjunctiva атсс - ccl 20.2 для предупреждения феномена усиления токсичности глазных инстилляций при совместном применении комбинации лекарственных препаратов // 2646100

Изобретение относится к биотехнологии. Конкретно, изобретение относится к предупреждению феномена усиления токсичности глазных инстилляций при совместном применении комбинации лекарственных препаратов.

Способ анализа клеточно-опосредованного иммунного ответа с повышенной чувствительностью // 2647468

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для измерения активности клеточно-опосредованного иммунного ответа у субъекта. При этом проводят совместную инкубацию образца, включающего лимфоциты от субъекта, по меньшей мере, с двумя наборами пептидов, полученных из белкового антигена. Первый набор, распознающийся CD8+ лимфоцитами, содержит один пептид длиной от 7 до 14 аминокислотных остатков. Второй набор, распознающийся CD4+ лимфоцитами, содержит один пептид длиной от 16 аминокислотных остатков или больше. При этом пептиды охватывают весь указанный белковый антиген или его часть. Измеряют присутствие или повышение уровня иммунной эффекторной молекулы из эффекторных Т-клеток. Присутствие или уровень иммунной эффекторной молекулы для Т-клеток является показателем уровня клеточно-опосредованной отвечаемости субъекта. Также предложены применение и способ определения статуса активности клеточно-опосредованного иммунного ответа у субъекта. Группа изобретений позволяет измерить общий клеточно-опосредованный иммунный ответ от CD4+ и от CD8+ лимфоцитов, за счет повышения чувствительности и специфичности способа измерения. 3 н. и 21 з.п. ф-лы, 9 табл., 2 ил.,5 пр.

N,n’-диэтил- n,n’-ди(2-бром-4-r-фенил)диамиды 2,2’-бипиридил-6,6’-дикарбоновой кислоты и способ их получения, циклизация полученных амидов с образованием 6,6’-диэтил-9,9’-диr-дибензо[f]-1,7-нафтиридин-5,5’(6н,6’h)-дионов // 2647578

Изобретение относится к новым соединениям N,N'-диэтил-N,N'-ди(2-бром-4-R-фенил)амидам 2,2'-бипиридил-6,6'-дикарбоновой кислоты и 6,6'-диэтил-9,9'-диR-3,3'-дибензо[ƒ]-1,7-нафтиридин-5,5'(6H,6'H)-дионам формулы (1) и (2) соответственно: .Изобретение также относится к способу их получения. Технический результат – получены новые соединения, которые могут найти применение в качестве органических лигандов для комплексообразования с ионами f-элементов, что может быть использовано во времяразрешенном иммунофлуоресцентном и других видах флуоресцентного анализа. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 табл., 25 пр.

Способ определения результата реакции агглютинации и микропланшет для определения продуктов реакций агглютинации // 2648471

Группа изобретений относится к способу определения результата реакции агглютинации, а также к микропланшету и устройству, используемым при осуществлении указанного способа. Способ определения реакции агглютинации включает этап реакции пробы с реагентом в лунке микропланшета, этап центрифугирования микропланшета, причем на этапе центрифугирования агглютинированный материал пробы отделяют от неагглютинированного материала пробы посредством сепарирующего материала, этап получения по меньшей мере одного изображения верхней стороны микропланшета и по меньшей мере одного изображения нижней стороны микропланшета и этап определения, на котором определяют положительный или отрицательный статус пробы в отношении реакции агглютинации путем сравнения интенсивности цвета и/или уровня серого на изображениях верхней стороны и нижней стороны микропланшета. Также раскрыты микропланшет для определения продуктов реакций агглютинаций и тестирующая установка для определения реакции агглютинации. Группа изобретений обеспечивает высокую надежность и высокую производительность определения результатов реакции агглютинации. 3 н. и 18 з.п. ф-лы, 9 ил.

Способ прогнозирования неблагоприятных перинатальных исходов при синдроме задержки внутриутробного роста плода у женщин с реактивацией хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности, осложненной ретроплацентарной гематомой // 2648472

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается прогнозирования неблагоприятных перинатальных исходов при синдроме задержки внутриутробного роста плода у женщин с реактивацией хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности, осложненной ретроплацентарной гематомой. Предлагаемый способ отличается тем, что у беременных определяют титр антител IgM к ЦМВ и рост титров антител IgG к ЦМВ при авидности IgG к ЦМВ более 65% в баллах (1 балл - титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:200; 2 балла - титры антител IgG к ЦМВ 1:400-1:400; 3 балла - титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:800; 4 балла - титры антител IgG к ЦМВ 1:400-1:1600) (А), концентрацию суммарных антифосфолипидных антител (Ед/мл) (В), количество ретроплацентарных гематом в плаценте в баллах: (1 балл - 1 гематома; 2 балла - 2 гематомы; 3 балла - 3 и более гематомы) (С). Затем с помощью дискриминантного уравнения рассчитывают величину дискриминантной функции D: D=-2,454×А-1,217×В-3,404×С, где D - дискриминантная функция с граничным значением равным -21,55. При D, равной или больше граничного значения дискриминантной функции, прогнозируют отсутствие неблагоприятных перинатальных исходов, а при D, меньшей граничного значения дискриминантной функции, прогнозируют развитие неблагоприятных перинатальных исходов при синдроме задержки внутриутробного роста плода у женщин с реактивацией хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности, осложненной ретроплацентарной гематомой. Изобретение обеспечивает возможность обоснованного и своевременного проведения лечебных мероприятий, направленных на профилактику неблагоприятных перинатальных исходов при синдроме задержки внутриутробного роста плода у женщин с реактивацией хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности, осложненной ретроплацентарной гематомой. Вероятность правильного прогноза составляет 88,5%. 2 пр.

Прогнозирование течения и исхода комы и посткоматозных бессознательных состояний (в том числе вегетативных) с помощью гемотестов // 2648515

Группа изобретений относится к медицине и касается способа прогнозирования выхода из бессознательного состояния травматического или метаболического генеза у субъекта, включающего получение биологического образца от указанного субъекта; по меньшей мере однократный анализ указанного биологического образца для определения уровня антител к одному или нескольким фрагментам каинатных рецепторов GluR6 и/или GluR7; сравнение этого уровня с уровнем соответствующих антител в образцах, взятых у здоровых субъектов; при низком уровне антител в образце субъекта, находящегося в бессознательном состоянии, не превышающем контрольный уровень, зафиксированный в образцах здоровых субъектов, прогнозирование благоприятного выхода из бессознательного состояния; при повышенном уровне антител в образце субъекта, находящегося в бессознательном состоянии, превышающем контрольный уровень, зафиксированный в образцах здоровых субъектов, прогнозирование неблагоприятного исхода развития болезни. Группа изобретений также касается способа прогнозирования выхода из бессознательного состояния травматического или метаболического генеза у субъекта, включающего получение по крайней мере двух биологических образцов от указанного субъекта в интервале от 1 часа до 90 дней; анализ указанных биологических образов для определения уровня антител к одному или нескольким фрагментам каинатных рецепторов GluR6 и/или GluR7; сравнение уровней соответствующих антител, определенных в разных образцах одного субъекта, друг с другом и с уровнем соответствующих антител в образцах, взятых у здоровых субъектов. Группа изобретений обеспечивает прогнозирование как восстановления сознания субъекта при благоприятном исходе, так и вероятности перехода в хроническое вегетативное состояние или летального исхода. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 пр.

Способ оценки психического состояния пациентов с эндогенными психическими расстройствами при их клиническом обследовании и способ комплексной оценки состояния иммунной системы таких пациентов // 2648745

Группа изобретений относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использована для мониторинга состояния пациентов с эндогенными психозами, а также для оценки остроты психического состояния. Способ оценки психического состояния пациентов с эндогенными психическими расстройствами включает клиническое наблюдение и психометрическое обследование. Дополнительно осуществляют комплексную оценку состояния иммунной системы, при этом в качестве иммунологических показателей используют энзиматическую активность лейкоцитарной эластазы (ЛЭ), функциональную активность α1-протеиназного ингибитора (α1-ПИ) и уровень аутоантител к нейроантигенам - основному белку миелина (ОБМ) и белку S100B. Оценку психического состояния пациентов осуществляют путем сравнения степени отклонения определяемых иммунологических показателей сыворотки крови от аналогичных показателей образцов сыворотки крови здоровых лиц. Группа изобретений относится также к оценки состояния иммунной системы пациентов с эндогенными психическими расстройствами. Диапазон активности лейкоцитарной эластазы (ЛЭ) -(201-250) нмоль/мин × мл характеризуют как слабое повышение, диапазон - (251-300) нмоль/мин × мл - умеренное повышение, а повышение активности (ЛЭ) более 300 нмоль/мин × мл - выраженное повышение при нормальной активности ЛЭ в сыворотке крови человека - (150-200) нмоль/мин × мл. Сниженная или нормальная активность α1-протеиназного ингибитора (α1-ПИ) при повышенной активности ЛЭ свидетельствует о недостаточности антипротеолитической активности сыворотки крови при нормальной активности α1-ПИ -(28 - 32) ИЕ/мл; а повышение уровня аутоантител (аАТ) к основному белку миелина (ОБМ) и белку S100B, при норме (0,6-0,9) ед. опт. пл. характеризует наличие аутоиммунного компонента патологического процесса в мозге. Использование данной группы изобретений позволяет проводить комплексную оценку психического состояния пациентов с эндогенными психическими расстройствами с учетом патологического процесса в головном мозге на определенном временном отрезке развития заболевания, отражая степень активности (остроты) психотического состояния. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 пр., 1 табл., 2 ил.

Способ качественного определения стоматологического статуса пациента с воспалением слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости // 2648765

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии, и предназначено для качественного определения стоматологического статуса пациента с воспалением слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти. Для качественного определения стоматологического статуса пациента с воспалением слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти осуществляют исследование ротовой жидкости пациента. Забор ротовой жидкости у пациента производят до или не ранее чем через 30 мин после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 мин, разбавляют физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 мин. Готовый для исследования материал ротовой жидкости размещают в кювету и выполняют стандартный метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с количественным определением матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2/tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2/TIMP 2). В группе клинического контроля уровень ММП 8/ММР 8 составляет 16,28-27,28 нг/мл, а ТИМП 2/TIMP 2 составляет 5,59-9,31 нг/мл. При содержании ММП 8/ММР 8 в количестве 167,2-276,8 нг/мл и ТИМП 2/TIMP 2 в количестве 21,9-39,8 нг/мл диагностируют гингивит слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти. При этом содержании ММП 8/ММР 8 в количестве 55,6-80,4 нг/мл и ТИМП 2/TIMP 2 в количестве 12,4-15,3 нг/мл диагностируют пародонтит слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти. По полученным результатам определения содержания указанных биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. Использование изобретения позволяет значительно повысить точность определения стоматологического статуса пациента с воспалением слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти, значительно повысить чувствительность дифференциальной экспресс-диагностики с достижением высокой вероятности выявления процессов, определяющих стоматологического статуса пациента с воспалением слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.

Способ экспресс-диагностики нодулярного дерматита крс // 2648773

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к способу экспресс-диагностики нодулярного дерматита крупного рогатого скота (КРС). Способ экспресс-диагностики вируса нодулярного дерматита КРС включает отбор проб патологического материала из очага инфекционного заболевания от всех животных, находящихся в очаге инфекционного заболевания, и проведение экспресс-диагностики полученного патологического материала в течение суток методом ПЦР с флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени с применением термоциклера типа RotorGene для выявления животных-носителей вируса нодулярного дерматита на начальной стадии инфицирования, при этом учет результатов ПЦР проводят по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией, если наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают положительным - вирус нодулярного дерматита КРС присутствует, при этом значения контрольных образцов находятся в пределах нормы, если не наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают отрицательным - вирус нодулярного дерматита крупного рогата скота отсутствует, и значения контрольных образцов также находятся в пределах нормы. 3 табл., 1 ил.

Способ экспресс-диагностики оспы овец и коз // 2648845

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к способу диагностики оспы овец и коз. Способ экспресс-диагностики вируса оспы коз и овец включает отбор проб патологического материала из очага инфекционного заболевания, экстракцию ДНК бактерий инфекционного заболевания из полученных проб, идентификацию видовой принадлежности возбудителя болезни методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени с применением термоциклера типа RotorGene на основании наличия/отсутствия пересечения кривой флуоресценции с пороговой линией. В качестве патологического материала используют пробы из очага инфекционного заболевания оспы, при этом отбор проб патологического материала осуществляют от всех животных, находящихся в очаге инфекционного заболевания, и проводят экспресс-диагностику полученного патологического материала в течение суток для выявления животных-носителей вируса оспы на начальной стадии инфицирования. Учет результатов полимеразной цепной реакции проводят по наличию или отсутствию пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией, если наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают положительным - вирус оспы овец и коз присутствует, при этом значения контрольных образцов находятся в пределах нормы, если не наблюдают рост специфического сигнала, то образец считают отрицательным - вирус оспы овец и коз отсутствует и значения контрольных образцов также находятся в пределах нормы. Способ позволяет расширить функциональные возможности способа диагностики оспы овец и коз. 3 табл., 1 ил.