Амидное соединение и его применение в качестве средства для лечения и профилактики заболеваний, вызываемых рнк-содержащими вирусами

Авторы патента:

КРОМОВА Татьяна Александровна (RU)

НЕБОЛЬСИН Владимир Евгеньевич (RU)

A61P31/12 - противовирусные средства

A61K31/415 - 1,2-диазолы

Владельцы патента RU 2665638:

ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "ФАРМИНТЕРПРАЙСЕЗ" (RU)

Группа изобретений относится к медицине и касается профилактики или лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов. Для этого пациенту вводят эффективное количество соединения формулы

Формула

или его фармацевтически приемлемой соли. Также предложена фармацевтическая композиция, набор для профилактики или лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов, и применение соединения для производства лекарственного средства. Группа изобретений обеспечивает предоставление нового средства, эффективного в лечении заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, которые принадлежат роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов. 4 н. и 16 з.п. ф-лы, 7 табл., 3 пр.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к медицине, в частности, к применению соединений общей формулы I или их фармацевтически приемлемых солей для профилактики и лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами.

Уровень техники

Вирусные инфекции являются огромной проблемой для здравоохранения. Антивирусные препараты в отношении большинства опасных и особо опасных вирусных инфекций не разработаны, а существующие нередко являются токсичными для человека или обладают недостаточной эффективностью. Большинство существующих или находящихся в разработке препаратов действуют через специфическое взаимодействие с определенными вирусными белками. Такие препараты имеют ограниченный спектр действия и способствуют быстрому появлению резистентных вариантов вирусов. В системе классификации вирусов по Балтимору к IV и V классам относятся вирусы, содержащие одноцепочечную (+) или (-) РНК. К классу IV принадлежат представители рода энтеровирусов из семейства пикорнавирусов и семейство коронавирусов, а к классу V относятся респираторно-синцитиальный вирус (РСВ) и метапневмовирус семейства парамиксовирусов.

Перечисленные группы вирусов выработали эффективную стратегию подавления антивирусных программ клетки. Столь агрессивная стратегия подавления системы клеточной противовирусной защиты приводит к высокой контагиозности и патогенности данных групп вирусов, подтверждаемой списком заболеваний, вызываемых представителями рода энтеровирусов (полиомиелит, вирусный ринит (риновирусная простуда). Среди представителей рода энтеровирусов в настоящее время наибольшую проблему составляют человеческие риновирусы. Риновирусы вызывают у человека и животных воспалительные заболевания верхних дыхательных путей, размножаясь в клетках слизистой оболочки носоглотки. Риновирусы ответственны за как минимум 80% простудных заболеваний. Помимо огромного экономического ущерба (20 млн человек/часов в США ежегодно), риновирусные инфекции вызывают большое количество осложнений, таких как синусит и воспаление среднего уха и часто обнаруживаются при вирусологическом обследовании детей, больных пневмонией. Также у детей-астматиков риновирусная инфекция является причиной обострения в 80% случаев. У взрослых, риновирусы могут вызывать как обострение астмы, так и хронической обструктивной болезни легких, хронического бронхита, муковисцидоза. Риновирусы были изолированы у больных пневмонией при иммунодефицитных состояниях.

В связи с тем, что существует более 100 антигенных разновидностей риновирусов, создание эффективной вакцины не представляется возможным (Palmenberg, A. C.; Spiro, D; Kuzmickas, R; Wang, S; Djikeng, A; Rathe, JA; Fraser-Liggett, CM; Liggett, SB (2009). "Sequencing and Analyses of All Known Human rhinovirus Genomes Reveals Structure and Evolution". Science 324 (5923): 55-9. doi:10.1126/science.1165557. PMID 19213880.). Кроме того, не существует эффективного химиотерапевтического средства для лечения риновирусной инфекции.

Энтеровирус типа 71 (EV71) был впервые выделен в 1970-1972 гг. от больных асептическим менингитом и больного энцефалитом в Калифорнии. Важно отметить, что в тяжелых случаях вирус приводит к развитию неврологических нарушений, таких как менингит, паралич и энцефалит. Вирус распространяется в условиях антисанитарии. При заражении вирусом EV71 поднимается температура, появляется сыпь на коже рук и ног, на ладонях, стопах, отек конечностей, возникают язвы в ротовой полости. В тяжелой форме энтеровирус может привести к летальному исходу. Как отмечается, энтеровирус-71 - один из наиболее «тяжелых» из общего числа энтеровирусов человека. Этот вирус может вызывать крупные вспышки с летальными исходами. Вакцины против энтеровируса-71 не существует, а неспецифическая терапия не разработана.

Коксакивирусная инфекция (НСХV) представляет собой большую группу заболеваний, характеризующихся выраженным клиническим полиморфизмом. Манифестация Коксакивирусной инфекции может выражаться менингитом, параличами, острыми респираторными расстройствами, пневмонией, геморрагическим конъюнктивитом, миокардитом, гепатитом, диабетом и другими синдромами. В соответствии с современной классификацией вирусов - энтеровирусы человека в составе рода Enterovirus разделены на пять видов (14): 1) полиовирус; 2) энтеровирус человека А; 3) энтеровирус человека В; 4) энтеровирус человека С; 5) энтеровирус человека D. Различные серотипы вируса Коксаки вошли в следующие виды энтеровирусов: энтеровирус человека А (Коксаки А2-8, 10, 12, 14, 16); энтеровирус человека В (Коксаки А9, Коксаки В1-6); энтеровирус человека С (Коксаки А1, 11, 13, 15, 17-22, 24).

Вирусы Коксаки, как и другие энтеровирусы человека, распространены повсеместно на земном шаре. Для стран умеренного климата характерен максимум их циркуляции в летне-осенний сезон. Вирусы обладают высокой степенью инвазивности, что обусловливает их быстрое распространение в человеческой популяции. Вирусы Коксаки часто являются причиной «внезапного» возникновения вспышек в организованных детских коллективах, больницах, наблюдается также внутрисемейное распространение инфекции. В эпидемиологии Коксакивирусной и других энтеровирусных инфекций человека важную роль играет высокий уровень изменчивости вирусного генома. Следствием этого является способность тех или иных серотипов вызывать в определенных обстоятельствах различную патологию. С другой стороны, один и тот же клинический синдром может быть обусловлен разными серотипами и разными видами энтеровирусов. В результате генетической изменчивости, селекции и быстрого распространения измененных вирусов возникают крупные вспышки заболеваний, в этиологии которых ранее данные вирусы не принимали участия, либо их циркуляция не наблюдалась в течение длительного времени.

Первичное размножение вируса Коксаки происходит в лимфоидной ткани носоглотки и кишечника. Он вызывает локальные поражения, выражающиеся симптоматикой ОРЗ, герпангины, фарингита и др. В глотке вирус определяется до 7-х суток, а с фекалиями он экскретируется 3-4 нед (при иммунодефицитах - несколько лет). Вслед за первичным размножением наступает стадия виремии, в результате которой возбудитель проникает в органы-мишени. Для вирусов Коксаки это могут быть головной и спиной мозг, мягкие мозговые оболочки, верхние дыхательные пути, легкие, сердце, печень, кожа и др. Вирусы Коксаки В могут вызывать тяжелые генерализованные патологические процессы у новорожденных. При этом в сердце, головном и спином мозге, печени, почках возникают очаги некрозов. Вирусы вызывают развитие следующих клинических синдромов: серозный менингит (Коксаки А2, 3, 4, 6, 7, 9, 10, Коксаки В1-6); острое системное заболевание детей с миокардитом и менингоэнцефалитом (Коксаки В1-5); параличи (Коксаки А1, 2, 5, 7, 8, 9, 21, Коксаки В2-5); герпангина (Коксаки А2, 3, 4, 5, 6, 8, 10); острый фарингит (Коксаки А10, 21); контагиозный насморк (Коксаки А21, 24); поражение верхних дыхательных путей и пневмония (Коксаки А9, 16, Коксаки В2-5) (16); перикардит, миокардит (Коксаки В1-5); гепатит (Коксаки А4, 9, 20, Коксаки В5); диарея новорожденных и детей младшего возраста (Коксаки А18, 20, 21, 24); острый геморрагический конъюнктивит (Коксаки А24); ящуроподобное заболевание (Коксаки А5, 10, 16); экзантема (Коксаки А4, 5, 6, 9, 16); плевродиния (Коксаки В3, 5); сыпь (Коксаки В5); лихорадка (Коксаки В1-6). Для лечения Коксакивирусной инфекции специфические химиотерапевтические препараты отсутствуют. Осуществляется патогенетическая и симптоматическая терапия, зависящая от клинической формы болезни.

К семейству Парамиксовирусов относятся представители родов респировирусов (вирус парагриппа человека 1, 2, 3, 4 и 5 типов), пневмовирусов (респираторно-синтициальный вирус) и метапневмовирусов (метапневмовирус человека).

Парамиксовирусы являются важным классом вирусов, которые связаны с респираторными заболеваниями. Респираторно- синцитиальный вирус (РСВ), как известно, является доминирующим патогеном нижних дыхательных путей во всем мире.

РСВ является важным патогеном новорожденных и детей раннего возраста и ответственен за ~ 70% тяжелых вирусных бронхиолитов и/или пневмоний, большая часть из которых характеризуется свистящим дыханием и одышкой. Данные бронхиолиты являются наиболее распространенной причиной госпитализации в зимний сезон в течение первого года жизни ребенка. Также РСВ вызывает бронхиолит, пневмонию и хроническую обструктивную болезнь легких у людей всех возрастов и в значительной степени способствует избыточной смертности в зимний сезон.

РСВ занимает лидирующее место по количеству смертельных исходов среди вирусных инфекций. Только в США более 2,4 млрд. долларов расходуется на лечение вирусных заболеваний нижнего респираторного тракта у детей. К первому году жизни 50-65% детей заражаются этим вирусом, и к двум годам заражаются почти 100% детей. К группе повышенного риска, помимо недоношенных новорожденных и пожилых относятся люди, имеющие заболевания сердечно-сосудистой, дыхательной и иммунной систем. Основываясь на опубликованных и неопубликованных данных было подсчитано, что в мире РСВ вызывает 33,8 млн случаев эпизодических острых инфекций нижнего респираторного тракта (ИНРТ), 3,4 млн тяжелых случаев ИНРТ, требующих госпитализации и 66000-99000 смертельных случаев среди детей в возрасте до 5 лет (Nair H, Nokes DJ, Gessner BD, Dherani M, Madhi SA, Singleton RJ, O'Brien KL, Roca A, Wright PF, Bruce N, Chandran A, Theodoratou E, Sutanto A, Sedyaningsih ER, Ngama M, Munywoki PK, Kartasasmita C, Simoes EA, Rudan I, Weber MW, Campbell H. Global burden of acute lower respiratory infections due to respiratory syncytial virus in young children: a systematic review and meta-analysis. Lancet; 375:1545-55). Только в США ежегодно в лечении нуждаются 90000 недоношенных новорожденных, 125000 госпитализированных новорожденных, более 3,5 млн детей в возрасте до 2 лет и 175000 госпитализированных взрослых (Storey S. Respiratory syncytial virus market. Nat Rev Drug Discov 2010; 9:15-6.). Примерно у трети детей госпитализированных с острым бронхиолитом в первый год жизни возникает эпизодическая отдышка, и отмечается повышенная чувствительность к общим аллергенам (Schauer U, Hoffjan S, Bittscheidt J, Kochling A, Hemmis S, Bongartz S, Stephan V. RSV bronchiolitis and risk of wheeze and allergic sensitisation in the first year of life. Eur Respir J 2002; 20:1277-83). Эти симптомы могут повторяться в последующие годы (Sigurs N, Gustafsson PM, Bjarnason R, Lundberg F, Schmidt S, Sigurbergsson F, Kjellman B. Severe respiratory syncytial virus bronchiolitis in infancy and asthma and allergy at age 13. Am J Respir Crit Care Med 2005; 171:137-41). Бронхиолит может быть вызван также риновирусом, коронавирусом, вирусом гриппа, парагриппа и аденовирусом, однако РСВ является наиболее частой причиной госпитализации по поводу бронхиолита среди всех перечисленных вирусов. Адаптивный иммунитет, формирующийся в результате перенесенной РСВ инфекции как у детей (с еще незрелой иммунной системой), так и у взрослых, является краткосрочным и не обеспечивает полную противовирусную защиту. Этот факт приводит к появлению реинфекций, наблюдаемых на протяжении всей жизни. В крови новорожденных в первые месяцы жизни содержатся материнские анти-РСВ антитела, однако они не защищают ребенка.

Наиболее близко к респираторно-синцитиальному вирусу расположен метапневмовирус человека (HMPV). Этот вирус был впервые выявлен в 2001 году в Нидерландах у детей с бронхиолитом. HMPV также содержит геномную (-) ssРНК и относится к роду пневмовирусов. HMPV циркулирует по всему миру и вызывает почти универсальную инфекцию у детей. Подобно гриппу и респираторно-синцитиальному вирусу, активность HMPV наиболее высока в зимний период в умеренном климате. Большинство имеющихся данных о клинических проявлениях HMPV инфекции свидетельствуют о том, что вирус вызывает инфекции верхних дыхательных путей, бронхиолит и пневмонию. Реинфекции с HMPV происходят на протяжении всей взрослой жизни. Болезнь, как правило, протекает мягко, а у молодых взрослых часто бессимптомно. К группе повышенного риска относятся престарелые, взрослые с заболеваниями легких и с неполноценной иммунной системой. Вспышки HMPV были зарегистрированы в стационарах, при этом смертность достигала 50% среди ослабленных пожилых людей. Кроме того наблюдалось 6-12% обострений хронической обструктивной болезни легких. У реципиентов трансплантатов кроветворных стволовых клеток HMPV был связан с тяжелыми идиопатическими пневмониями.

Следует отметить, что единственным химиотерапевтическим средством, оказывающим некоторый положительный эффект при инфекциях, вызываемых (+) и (-) РНК-содержащими вирусами, является рибавирин. Однако рибавирин является относительно токсичным средством, часто вызывающим анемию. Основной его особенностью является длительное депонирование в эритроцитах. В результате, следы рибавирина обнаруживаются даже через 6 месяцев после окончания курса терапии. Упоминается также о тератогенном действии рибавирина.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к новым соединениям общей формулы I или их фармацевтически приемлемым солям для профилактики и лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, причем общая формула I имеет следующий вид:

где

R¹ представляет собой

, , , , , , , , или ;

m представляет собой целое число 0 или 1;

n представляет собой целое число 0 или 1;

R² представляет собой H или С₁-С₆ алкил;

R³ и R⁴каждый независимо представляет собой H, С₁-С₆ алкил, -NH₂, -NHС(=O)CH₃, OH и -NHCH(O)CH₂COOH;

R⁵ представляет собой -COOH, -C(O)NH₂, , -NH₂, HN=C(NH₂)NH-, NH₂S(O)₂-, (NH₂)₂CНNH- или CH₃C(O)NH-;

где R⁵ может быть необязательно замещен заместителем, выбранным из группы состоящей из бензила, бензил-ОС(О)-, С₁-С₆ алкила, OH и -NH₂;

Q представляет собой ,

Q и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать цикл ;

Q и R¹ вместе с фрагментом -C(O)N-, к которому они присоединены, могут образовывать цикл , необязательно замещенный по аминогруппе группой -C(O)CH₃;

о представляет собой целое число 0 или 2;

p представляет собой целое число от 0 до 3;

R⁶ и R⁷ каждый независимо представляет собой H, -C(O)NH₂, -COOH, -CH₂OH или C₁-C₆ алкил-NH₂;

где R⁶ и R⁷ могут быть необязательно замещены C₁-C₆ алкилом, -CH(CH(OH)CH₃)(C(O)OC₂H₅), -CH(CH(OH)CH₃)(COOH), -CH(CH(CH₃)₂)(C(O)OCH₃), -CH(CH(CH₃)₂)(C(O)NH₂), -CH(CH₃)C(O)OCH₃, -CH(CH₃)C(O)NH₂, -CH(CH₂CH(CH₃)₂)(C(O)OCH₃), -CH(CH₂CH(CH₃)₂)(C(O)ONH₂), -CH(CH₂OH)(COOH), -CH(CH(OH)CH₃)(C(O)OCH₃), -CH(CH₂(OH))(C(O)OCH₃), -CH(C(O)NH₂)(COOH), -CH₂CH(OH)CH₃, -(CH₂)₂OH, -(CH₂)₃OH, -CH₂C(O)NH₂, -CH₂C(O)OCH₃, -CH₂COOH или -C(O)OCH₃, -COOH или NH₂;

R⁸ представляет собой

или ;

где R⁸ может быть необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ алкокси, галогена, бензила, -COOH, пиридила и -О-бензила;

при условии, что соединение не выбрано из следующих соединений:

Номер по заявке	Формула
211
212
213
214
215
216
217
218
219
220
221
222
223
224
225
226
227
228
229
230
231
232
233
234
235
236
237
238
239
240
241
242
243
244
245
246
247
248
249
250
251
252
253
254
255
256
257
258
259
260
261
262
263
264
265
266
267
268
269
270
271
272
273
274
275
276
277
278
279
280
281
282
283
284
285
286
287
288
289
290
291
292
293
294
295
296
297
298
299
300
301
302
303
304
305
306
307
308
309
310
311
312
313
314
315
316
317
318
319
320
321
322
323
324
325
326
327
328
329
330
331
332
333
334
335

Кроме того, настоящее изобретение относится к применению ряда соединений формулы I, раскрытых ранее и подпадающих под общую структурную формулу соединений, раскрытых в публикации международной заявки WO 99/01103, по новому назначению. Более конкретно, авторами изобретения неожиданно обнаружено, что соединения общей формулы I могут использоваться в качестве нетоксичных противовирусных средств при инфекциях, вызываемых вирусами, относящимися к роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов (без ограничения перечисленными). В частности, этими соединениями являются следующие соединения:

Номер по заявке	Формула
211
212
213
214
215
216
217
218
219
220
221
222
223
224
225
226
227
228
229
230
231
232
233
234
235
236
237
238
239
240
241
242
243
244
245
246
247
248
249
250
251
252
253
254
255
256
257
258
259
260
261
262
263
264
265
266
267
268
269
270
271
272
273
274
275
276
277
278
279
280
281
282
283
284
285
286
287
288
289
290
291
292
293
294
295
296
297
298
299
300
301
302
303
304
305
306
307
308
309
310
311
312
313
314
315
316
317
318
319
320
321
322
323
324
325
326
327
328
329
330
331
332
333
334

С учетом изложенного, настоящее изобретение относится к средству для лечения и/или профилактики заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов, представляющему собой соединение общей формулы I.

Изобретение далее относится к способам получения соединений общей формулы I или их фармацевтически приемлемых солей, охватывает способ профилактики и лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов, предусматривающий введение пациенту эффективного количества соединения общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.

Изобретение также относится к набору для лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов, включающему композицию по изобретению и инструкции по ее применению.

Кроме этого, изобретение относится к применению соединений общей формулы I или их фармацевтически приемлемых солей для производства лекарственного средства для лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими к роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов.

Изобретение также включает применение соединений общей формулы I или их фармацевтически приемлемых солей для лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов.

Осуществление изобретения

Настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы I, которое соответствует следующей формуле

или их фармацевтически приемлемым солям,

где

R¹ представляет собой

, , , , , , , , или ;

m представляет собой целое число 0 или 1;

n представляет собой целое число 0 или 1;

R² представляет собой H или С₁-С₆ алкил;

R³ и R⁴каждый независимо представляет собой H, С₁-С₆ алкил, -NH₂, -NHС(=O)CH₃, OH и -NHCH(O)CH₂COOH;

R⁵ представляет собой -COOH, -C(O)NH₂, , -NH₂, HN=C(NH₂)NH-, NH₂S(O)₂-, (NH₂)₂CНNH- или CH₃C(O)NH-;

Q представляет собой ,

Q и R² вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать цикл ;

о представляет собой целое число 0 или 2;

p представляет собой целое число от 0 до 3;

R⁶ и R⁷ каждый независимо представляет собой H, -C(O)NH₂, -COOH, -CH₂OH или C₁-C₆ алкил-NH₂;

R⁸ представляет собой

или ;

при условии, что соединение не выбрано из следующих соединений:

Номер по заявке	Формула
211
212
213
214
215
216
217
218
219
220
221
222
223
224
225
226
227
228
229
230
231
232
233
234
235
236
237
238
239
240
241
242
243
244
245
246
247
248
249
250
251
252
253
254
255
256
257
258
259
260
261
262
263
264
265
266
267
268
269
270
271
272
273
274
275
276
277
278
279
280
281
282
283
284
285
286
287
288
289
290
291
292
293
294
295
296
297
298
299
300
301
302
303
304
305
306
307
308
309
310
311
312
313
314
315
316
317
318
319
320
321
322
323
324
325
326
327
328
329
330
331
332
333
334
335

Наиболее предпочтительными соединениями настоящего изобретения являются соединения, представленные в таблице 1

Таблица 1
Номер по заявке	Формула
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
79
80
81
82
83
84
85
86
87
88
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
103
104
105
106
107
108
109
110
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
162
163
164
165
166
167
168
169
170
171
172
173
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
203
204
205
206
207
208
209
210

Соединения общей формулы I, согласно изобретению, вводятся в твердой лекарственной форме.

Настоящее изобретение так же относится к способам получения соединений общей формулы I или их фармацевтически приемлемых солей.

В частности, настоящее изобретение относится к способу получения соединений общей формулы I, относящихся к моноамидам дикарбоновых кислот или их фармацевтически приемлемым солям, включающему взаимодействие соответствующего ангидрида с амином или дипептидом в подходящем органическом растворителе необязательно в присутствии органического основания.

Настоящее изобретение относится к способу получения соединений общей формулы I, относящихся к глутарильным производным дипептидов или их фармацевтически приемлемым солям по п.1, включающему:

(а) синтез дипептидов исходя из ди-Boc-защищенного гистидина и соответствующей аминокислоты методом активированных пара-нитрофениловых эфиров в N,N-диметилформамиде;

(b) снятие Boc-защиты обработкой защищенного дипептида трифторуксусной кислотой; и

(с) добавление глутарового ангидрида к трифторацетатному производному дипептида в N,N-диметилформамиде в присутствии 2 эквивалентов N-метилморфолина.

Настоящее изобретение относится к способу получения соединений общей формулы I, относящихся к производным γ-аминомаслянной кислоты и соответствующего амина или их фармацевтически приемлемым солям, включающему:

(а) получение имидазолида N-Boc-γ-аминомасляной кислоты путем взаимодействия N-Boc-γ-аминомаслянной кислоты с 1,1'-карбонилдиимидозолом в среде безводного органического растворителя; и

(b) введение имидазолида N-Boc-γ-аминомасляной кислоты во взаимодействие с соответствующим амином при нагревании в среде безводного органического растворителя.

Настоящее изобретение относится к способу получения соединений общей формулы I, относящихся к производным пироглутаминовой кислоты, N-ацетил- глутаминовой килоты по α-карбоксильной группе или глутаминовой кислоты по γ-карбоксильной группе и соответствующего амина или их фармацевтически приемлемым солям методом активированных N-оксисукциимидных эфиров, включающему взаимодействие N-оксисукцинимидного эфира соответствующей кислоты с соответствующим амином в среде безводного органического растворителя при комнатной температуре.

Настоящее изобретение относится к способу получения соединений общей формулы I, относящихся к амидам, образованных 3-(4-имидазолил)акриловой кислотой и 3-(4-имидазолил)пропионовой кислотой и соответствующей аминокислотой: 2-аминопентановой кислотой, 4-аминомаслянной кислотой и 6-аминогексановой кислотой хлорангидридным методом, включающему:

(а) получение хлорангидридов соответствующих кислот с использованием преимущественно тионилхлорида,

(b) введение во взаимодействие полученного хлорангидрида без дополнительной очистки с соответствующей аминокислотой в среде безводного органического растворителя при комнатной температуре.

Изобретение далее охватывает способ профилактики и лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов, предусматривающий введение пациенту эффективного количества соединения общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.

Вирус, принадлежащий роду энтеровирусов, может быть выбран из группы, включающей риновирусы, вирусы Коксаки и энтеровирус типа 71. Вирус, принадлежащий к роду пневмовирусов, представляет собой респираторно-синцитиальный вирус, а к роду метапневмовирусов - метапневмовирус человека. Доза соединения общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли может составлять приблизительно 0,1-30 мг/кг массы тела пациента. При этом разовая доза соединения общей формулы I может составлять приблизительно 2-300 мг. Предпочтительная длительность приема соединения общей формулы I составляет от 5 дней до 10 дней. В одном из вариантов изобретения, осуществляют профилактику или лечение обострений астмы, хронической обструктивной болезни легких, бронхита и муковисцидоза, вызванных риновирусом, респираторно-синцитиальным вирусом и метапневмовирусом.

Далее, изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов, содержащей эффективное количество соединения общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемые носители и наполнители. Эффективное количество соединения общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, предпочтительно, составляет 0,1-30 мг/кг массы тела. При этом доза соединения общей формулы I может составлять 2-300 мг при введении 1 раз в день.

Кроме этого, изобретение относится к применению соединений общей формулы I или их фармацевтически приемлемых солей для производства фармацевтической композиции для лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими к роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов. Изобретение также включает применение соединений общей формулы I или их фармацевтически приемлемых солей для лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов.

В качестве фармацевтически приемлемых солей соединений общей формулы I в настоящем изобретении могут быть использованы их соли с щелочными и щелочноземельными металлами, предпочтительно натриевая, калиевая, литиевая соли.

Кроме того, в качестве фармацевтически приемлемых солей соединений по настоящему изобретению могут быть использованы аддитивные соли органических кислот (например, формиат, ацетат, малеат, тартрат, метансульфонат, бензолсульфонат, толуолсульфонат и др.), аддитивные соли неорганических кислот (например, гидрохлорид, гидробромид, сульфат, фосфат и др.), соли с аминокислотами (например, соль аспарагиновой кислоты, соль глутаминовой кислоты и т.д.), предпочтительно хлоргидраты и ацетаты.

Соединения общей формулы I или его соли вводят в эффективном количестве, которое обеспечивает желаемый терапевтический результат.

Соединения общей формулы I или их соли могут быть введены пациенту в дозах, составляющих от 0,1 до 30 мг/кг веса тела человека в день, предпочтительно в дозах от 0,3 до 1,5 мг/кг один или более раз в день.

При этом следует отметить, что конкретная доза для каждого конкретного пациента будет зависеть от многих факторов, таких как возраст, вес тела, пол, общее состояние здоровья и режим питания пациента, время и способ введения лекарственного средства, скорость его выведения из организма, а также тяжесть заболевания у данного индивида, подвергаемого лечению.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат соединения общей формулы I или их фармацевтически приемлемую соли в количестве, эффективном для достижения желаемого результата, и могут быть приготовлены в виде стандартных лекарственных форм (например, в твердой, полутвердой или жидкой формах), содержащих соединения общей формулы I или их соли в качестве активного ингредиента в смеси с носителем или наполнителем, пригодным для внутримышечного, внутривенного, перорального, сублингвального, ингаляционного, интраназального, интраректального и трансдермального применения. Активный ингредиент может быть включен в композицию вместе с обычно используемыми нетоксичными фармацевтически приемлемыми носителями, пригодными для изготовления растворов, таблеток, пилюль, капсул, драже, суппозиториев, эмульсий, суспензий, мазей, гелей, пластырей и любых других лекарственных форм.

В качестве наполнителей могут быть использованы различные вещества, такие как сахариды, например глюкоза, лактоза или сахароза, маннит или сорбит, производные целлюлозы и/или фосфаты кальция, например, трикальций фосфат или кислый фосфат кальция; в качестве связующего компонента могут быть использованы такие, как крахмальная паста, например, кукурузный, пшеничный, рисовый, картофельный крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы и/или поливинилпирролидон. При необходимости могут быть использованы разрыхляющие агенты, такие как вышеупомянутые крахмалы и карбоксиметилкрахмал, поперечно сшитый поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия.

Могут быть использованы необязательные добавки, такие как агенты, регулирующие текучесть, и смазывающие агенты, такие как диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота и ее соли, такие как стеарат магния или стеарат кальция, и/или пропиленгликоль.

В качестве добавок могут быть также использованы стабилизаторы, загустители, красители и отдушки.

В качестве мазевой основы могут быть использованы углеводородные мазевые основы, такие как вазелин белый и желтый (Vaselinum album, Vaselinum flavum), вазелиновое масло (Oleum Vaselini), мазь белая и жидкая (Unguentum album, Unguentum flavum), а в качестве добавок для придания более плотной консистенции - такие как твердый парафин и воск; абсорбтивные мазевые основы, такие как гидрофильный вазелин (Vaselinum hydrophylicum), ланолин (Lanolinum), кольдкрем (Unguentum leniens); мазевые основы, смываемые водой, такие как гидрофильная мазь (Unguentum hydrophylum); водорастворимые мазевые основы, такие как полиэтиленгликолевая мазь (Unguentum Glycolis Polyaethyleni), бентонитовые основы и другие.

В качестве основы для гелей могут быть использованы метилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, оксипропилцеллюлоза, полиэтиленгликоль или полиэтиленоксид, карбопол.

В качестве основы для суппозитория могут быть использованы основы, не растворимые в воде, такие как масло какао; основы, растворимые в воде или смешиваемые с водой, такие как желатино-глицериновые или полиэтиленоксидные; комбинированные основы - мыльно-глицериновые.

При приготовлении стандартной лекарственной формы количество активного ингредиента, используемого в комбинации с носителем, может варьироваться в зависимости от реципиента, подвергающегося лечению, от конкретного способа введения лекарственного средства.

Так, например, при использовании соединений общей формулы I или их солей в виде растворов для инъекций, содержание активного агента в них составляет 0,1-5%. В качестве разбавителей могут быть использованы 0,9% раствор хлорида натрия, дистиллированная вода, раствор новокаина для инъекций, раствор Рингера, раствор глюкозы, специфические добавки для растворения. При введении в организм соединений общей формулы I или их солей в виде таблеток и суппозиториев их количество составляет 10-300 мг на стандартную лекарственную форму.

Лекарственные формы настоящего изобретения получают по стандартным методикам, таким как, например, процессы смешивания, гранулирования, формирования драже, растворения и лиофилизации.

Определения

Термин ʺалкилʺ, используемый в настоящем описании, означает насыщенный прямой или разветвленный углеводород. В некоторых вариантах осуществления, алкильные группы содержат 1-6 атомов углерода. В других вариантах осуществления, алкильные группы содержат 1-5 атомов углерода. В еще других вариантах осуществления, алкильные группы содержат 1-4 атомов углерода, и в еще других вариантах осуществления, алкильные группы содержат 1-3 атома углерода.

Термин ʺалкоксиʺ, используемый в настоящем описании, относится к алкильной группе, определенной выше, присоединенной к молекуле посредством атома кислорода (ʺалкоксиʺ, например, -О-алкил).

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Методики синтеза

Индивидуальность полученных соединений проверяли методом ТСХ на пластинках ʺKieselgel 60 F254ʺ (фирмы ʺMerckʺ, Германия). Хроматограммы проявляли хлор-тетраметилбензидиновым реактивом и реактивом Паули.

ЖХ МС-система анализа многокомпонентных смесей UPLC/MS Shimadzu 2020, включающая: хроматограф Analytical HPLC CBM-20A, насосы LC-30AD, автосамплер SIL-30AC, детекторы SPD-M20A, ELSD-LTII (evaporative light scattering detector) и масс-спектрометр LCMS-20.

Колонка - Waters ACQUITY UPLC BEH C18 1.7um 2.1×50mm; гадиент элюирования в системе растворителей: растворитель А - вода с 0,1% HCOOH, растворитель B - ацетонитрил с 0,1% HCOOH (условия А).

Колонка YMC-UltraHT Hydrosphere C18 2.0 мкм 50×2.0 мм; гадиент элюирования в системе растворителей: растворитель А - вода с 0,1% HCOOH, растворитель B - ацетонитрил с 0,1% HCOOH (условия Б).

Колонка Synergi Fusion-RP 150×2 мм, 4 мкм, 80Å; гадиент элюирования в системе растворителей: растворитель А - вода с 0,1% HCOOH, растворитель B - ацетонитрил с 0,1% HCOOH (условия В).

Колонка Shim-pack XR-ODS II 75×3 мм; гадиент элюирования в системе растворителей: растворитель А - вода с 0,1% HCOOH, растворитель B - ацетонитрил с 0,1% HCOOH (условия Г).

Аналитическую обращенно-фазовую ВЭЖХ проводили с помощью системы анализа многокомпонентных смесей органического происхождения HPLC Shimadzu, включающей: хроматограф Analytical HPLC CBM-20A, насосы LC-20AD, автосамплер SIL-20A, UV-детектор SPD-20A.

Колонка Symmetry C18 150×4,6 мм 5мкм; градиент элюирования в системе: растворитель А - водный раствор с 1-гексилсульфонатом натрия 0,0025М рН=3, растворитель B - ацетонитрил (условия 1).

Колонка Luna C18 (2) 100A 250×4,6 мм (сер.599779-23), градиент элюирования в системе фосфатный буферный раствор рН 3,0 - метанол (условия 2).

Колонка X-Bridge C 18, 150×4,6 мм (3,5 мкм), градиент элюирования в системе: растворитель А - водный раствор с 1-гексилсульфонатом натрия 0,0025М рН=3, растворитель B - ацетонитрил (условия 3).

Колонка Symmetry C18 150×4,6 мм 5мкм; градиент элюирования в системе фосфатный буферный раствор рН 3,0 - метанол (условия 4).

Колонка Merk.LiChroCART 250*4mm 5mkm. LiChrospher 100RP-8E 5 mkm.C8. Serial number 1.50837.0001; градиент элюирования в системе ацетатно-аммиачный рН 7.5буфер:ацетонитрил (условия 5).

¹Н-ЯМР спектры регистрировали на приборе Bruker DPX-400 (Германия).

Моноамиды дикарбоновых кислот получали путем взаимодействия соответствующего ангидрида с амином или дипептидом в органическом растворителе при разных температурных режимах в присутствии или без органического основания. В некоторых случаях использовали защищенные по NH-группе гетероцикла производные аминов. Преимущественно использовали Boc-защиту. Предпочтительными органическими растворителями для проведения реакции конденсации являются тетрагидрофуран, хлороформ, хлористый метилен, N,N-диметилформамид, дихлорметан, ацетонитрил и смесь диоксана с N,N-диметилформамидом в соотношении 3:1. Реакцию предпочтительно проводят при охлаждении до 0°С или 3-5°С, при комнатной температуре или при нагревании до 45°С или 60°С, а также при температуре кипения растворителя.

При получении глутарильных производных дипептидов сначала осуществляли синтез дипептидов исходя из ди-Boc-защищенного гистидина и соответствующей аминокислоты методом активированных пара-нитрофениловых эфиров в N,N-диметилформамиде. Boc-защиту снимали обработкой защищенного дипептида трифторуксусной кислотой. Глутарильное производное дипептида получали добавлением глутарового ангидрида к трифторацетатному производному дипептида в N,N-диметилформамиде в присутствии 2 эквивалентов N-метилморфолина.

Производные γ-аминомаслянной кислоты и соответствующего амина синтезировали с использованием конденсирующий агентов, преимущественно с использованием 1,1'-карбонилдиимидозола. В качестве исходного соединения используют защищенное производное γ-аминомаслянной кислоты, преимущественно N-Boc-γ-аминомаслянную кислоту. При реакции N-Boc-γ-аминомаслянной кислоты с 1,1'-карбонилдиимидозолом получают активированное производное - имидазолид N-Boc-γ-аминомасляной кислоты, которое вводят взаимодействие с соответствующим амином. Обе реакции проводят в безводных органических растворителях, преимущественно в безводном ацетонитриле. Реакцию конденсации проводят при нагревании, преимущественно при 45°С.

Производные пироглутаминовой кислоты, N-ацетил- глутаминовой килоты по α-карбоксильной группе или глутаминовой кислоты по γ-карбоксильной группе и соответствующего амина получали методом активированных N-оксисукциимидных эфиров, включающему взаимодействие N-оксисукцинимидного эфира соответствующей кислоты с соответствующим амином в среде безводного органического растворителя при комнатной температуре.

Синтез амидов 3-(4-имидазолил)акриловой кислоты и 3-(4-имидазолил)пропионовой кислоты предпочтительно с 2-аминопентановой кислотой, 4-аминомаслянной кислотой и 6-аминогексановой кислотой осуществляют хлорангидридным методом. Получают хлорангидрид соответствующей кислоты с использованием преимущественно тионилхлорида, полученный хлорангидрид без дополнительной очистки вводят во взаимодействие с соответствующей аминокислотой в среде безводного органического растворителя при комнатной температуре.

Остальные соединения были синтезированы с применением стандартных методов органической химии.

1. Синтез производных моноамидов дикарбоновых кислот на примере синтеза соединения 196

Раствор глутарового ангидрида (2) (2,850 г, 25 ммоль) в дихлорметане (25 мл) добавляли по каплям к раствору N-[1-(2-аминоэтил)-1Н-пиразол-5-ил]ацетамида дигидрохлорида (1) (3,588 г, 15 ммоль) и триэтиламина (3,440 г, 4,8 мл, 34 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при перемешивании при комнатной температуре. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов до полного исчезновения исходного амина (контроль ТСХ, LCMS). Выпавший осадок соли триэтиламина отфильтровывали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток обрабатывали ацетоном. Образовавшийся осадок отфильтровывали, промывали ацетоном, диэтиловым эфиром и сушили на воздухе и при пониженном давлении. Соединение 3 было получено в виде белого твердого вещества (1,101 г, 26%). Rf (3) 0,52 (ДХМ/изо-пропиловый спирт, 5:1+2 капли уксусной кислоты). ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,06 мин, [М+Н]⁺=265 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,4 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,81 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=6,5 Гц); 1,97 (с, 3H, Me), 2,55 (т, 4H, CH₂CH₂CH₂,J=6,5 Гц), 3,96 (т, 2H, CH₂NCO, J=6,3 Гц), 4,05 (т, 2H, CH₂Pyr, J=6,3 Гц), 6,38 (с, 1H, CH), 7,52 (с, 1H, CH=N), 10,35 (с, 1H, NH).

2. Синтез глутарильных производных дипептидов на примере синтеза соединения 94

К раствору 10 г (28,4 ммоль) паранитрофенилового эфира БОК-лейцина в 20 мл диметилформамида прибавляли 4 мл 25% водного раствора аммиака, реакционную смесь выдерживали 3 часа при комнатной температуре, упаривали досуха, остаток растирали в эфире, отфильтровывали, промывали эфиром, получили 2,5 г (10,87 ммоль) Бок-лейцинамида (R-f0,6 хлороформ:метанол:32% уксусная кислота 15:4:1). Осадок растворяли в 25 мл трифторуксусной кислоты, выдерживали 1 час, упаривали, остаток растирали в эфире, отфильтровывали, растворяли в 50 мл диметилформамида, добавляли NMM до pH-8,5, к раствору прибавляли 5,14 г (10,8 ммоль) паранитрофенилового эфира ди-БОК-L-гистидина, реакционную смесь оставляли на ночь при комнатной температуре, диметилформамид упаривали, остаток растворяли в 10 мл смеси этилацетат-гексан 8+2 мл и пропускали через колонку размерам 3×17 см заполненную суспензией силикагеля в той же смеси. Продукт элюировали этилацетатом, фракции, содержащие целевое вещество объединяли, упаривали досуха. Получили 3,95 г (9,6 ммоль) продукта с Rf-0,8 (хлороформ:метанол:32% уксусная кислота 15:4:1). Амид дипептида растворяли в 25 мл трифторуксусной кислоты, выдерживали 1 час при комнатной температуре, упаривали, остаток растирали в эфире, отфильтровывали, растворяли в 25 мл диметилформамида, добавляли NMM до рH -8,5, к полученному раствору прибавляли тремя порциями с интервалом 15-20 минут 1,14 г (10 ммоль) глутарового ангидрида, реакционную смесь выдерживали 2 часа при комнатной температуре, упаривали, к остатку прибавляли 100 мл этилацетата, оставляли на ночь, выпавший осадок отфильтровывали, растворяли в100 мл воды экстрагировали 50 мл этилацетата, водный слой упаривали до половины объема, обрабатывали активированным углем, упаривали, растворяли в 100 мл 2% уксусной кислоты, лиофилизировали. Получили 3,5 г. (91%) целевого продукта Rf-0,75 (хлороформ:метанол:32% уксусная кислота 5:3:1). ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,2 мин, [М+Н]⁺=382 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,8 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,82, 0,87 (д, 6H, CH₂CH(CH₃)₂, J=6,1 Гц); 1,51 (м, 3H, CH₂CH(CH₃)₂); 1,67 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,15 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,86, 2,98 (м, 2H, CCH₂CH); 4,19 (м, 1H, NCH,); 4,52 (м, 1H, CCH₂CH); 7,02, 7,51 (ушир.с, 2H, NH₂); 7,07 (с, 1H, CCH); 7,90 (д, 1H, NH, J=8,2 Гц); 8,08 (д, 1H, NH, J=7,9 Гц); 8,23 (с, 1H, NCHN)

3. Синтез амидов γ-аминомасляной кислоты на примере синтеза соединения 103

К раствору 1,36 г (0,01 моль) 2-(3-аминопропил)пиридина в 25 мл безводного ацетонитрила прибавляли раствор имидазолида N-Boc-γ-аминомасляной кислоты полученный из 2,23 (0,011 моль) N-Boc-γ-аминомасляной кислоты и 1,95 г (0,012 моль) карбонилдиимидазола в 10 мл безводного ацетонитрила. Реакционную смесь перемешивали 4 часа при 45°С, растворитель удаляли в вакууме, остаток растворяли в 300 мл эфира, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (3×100 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, растворитель удаляли в вакууме, остаток сушили в вакууме масляного насоса до постоянного веса. Остаток растворяли в 80 мл безводного эфира и прибавляли 35 мл 5% раствора хлористого водорода в безводном метаноле. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до исчезновения (по данным ТСХ) исходного соединения (около 4 часов), растворители удаляли в вакууме, остаток растирали с безводным эфиром, эфир декантировали после чего повторяли процедуру. Остаток под эфиром оставляли при 0°С на 8 часов. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали безводным эфиром (3×10 мл) и сушили в вакууме. Выход 1,62 г (63%) R_f (хлороформ - метанол 4/1) 0,48. ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,5 мин, [М+Н]⁺=222 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 4,00 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,78 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂NH₂,J=7,5 Гц); 1,87 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂NH, J=7,3 Гц); 2,20 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,77 (м, 2H, CH₂NH₂); 3,01 (т, 2H, CH₂-Pyr, J=7,5 Гц); 3,09 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 7,80 (м, 1H, 5-Pyr); 7,89 (д, 1H, 3-Pyr, J=7,8 Гц); 8,15 (м, 1H, 4-Pyr); 8,39 (ушир.т, 1H, NH); 8,74 (д, 1H, 6-Pyr, J=4,1 Гц).

4. Синтез амидов пирроглутаминовой кислоты на примере синтеза соединения 178

К охлажденному до 0°С раствору 3,5 г (27,1 ммоль) пироглутаминовой кислоты в 25 мл ДМФА добавляли 3,4 г (29,8 ммоль) HONSu и раствор 6,4 г (29,8 ммоль) DCC в 10 мл ДМФА. Реакционную смесь перемешивали 1 ч при 0°С и 16 ч при комнатной температуре. Осадок отделяли фильтрованием и промывали 3×10 мл этилацетатом. Растворитель из объединенных фильтратов удаляли в вакууме до образования устойчивой пены. Выход 5,8 г (95%). Rf 0,6 (хлороформ-метанол (1:1))

К раствору 2,2 г (9,7 ммоль) N-оксисукцинимидного эфира пироглутаминовой кислоты в 20 мл ДМФА добавляли 2,35 г (9,7 ммоль) дигидрохлорида гистидина и 2,87 мл (19,4 ммоль) триэтиламина. Реакционную смесь перемешивали 30 мин. при комнатной температуре. Растворитель удаляли в вакууме, остаток растворяли в 20 мл этилацетата и промывали 3×10 мл 1% лимонной кислотой, водой до нейтральной реакции и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой высушивали над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли в вакууме. Выход 2,36 г (80%), Rf 0,3 (хлороформ - метанол (4:1)). ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,23 мин. [М+Н]⁺=281 (условия В). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 7,0 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,83-2,23 (м, 4H, CH₂CH₂CH), 2,93 (м, 2H, CH₂CH), 3,61 (с, 3H, OCH₃); 4,02 (м, 1H, CH₂CH₂CH); 4,50 (м, 1H, CH₂CH); 6,84 (с, 1H, CCH); 7,60 (с, 1H, NCHN); 7,78 (с, 1H, NH), 8,05 (д, 1H, NH, J=7,8 Гц).

5. Синтез амидов 3-(4-имидазолил)акриловой кислоты и 3-(4-имидазолил)пропионовой кислоты на примере синтеза соединения 85

К 5 мл холодного тионилхлорида небольшими порциями при интенсивном перемешивании добавляли кислоту 1 (1 г, 0,007 моль). После добавления всего количества кислоты 1 реакционную смесь перемешивали при кипении в течение 3-4 часов, затем охлаждали до комнатной температуры. Отгоняли при пониженном давлении тионилхлорид. Полученный продукт 2 тщательно промывали на фильтре Шотта абс. толуолом (3×20 мл). Выход технического продукта 2 составил 1,4 г (99%). Продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Суспендировали исходный хлорангидрид кислоты 2 (1,4 г, 0,009 моль) в сухом ДМФА и при перемешивании добавляли гидрохлорида амина 3 (1,34 г, 0,0098 моль) и триэтиламин (4 мл, 0,036 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 часов при комнатной температуре. По завершении реакции отфильтровывали гидрохлорид триэтиламина, растворитель удаляли в вакууме при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью метода колоночной хроматографии на силикагеле, система растворителей хлористый метилен - метанол (15:1). Выход чистого полупродукта 4 составил 0,65 г (35%).

Растворяли исходный эфир 4 (0,65 г, 0,0026 моль) в 10 мл 50% этанола и при перемешивании добавляли КОН (0,18 г, 0,0032 моль). Перемешивание продолжали в течение 5-6 часов при комнатной температуре. По завершении реакции (ТСХ-контроль в системе хлористый метилен - метанол (10:1)), раствор фильтровали через небольшой слой целита, растворитель удаляли в вакууме. Полученную калиевую соль кислоты промывали на фильтре ацетоном, перерастворяли в абс. этаноле и высаживали целевой продукт 5 добавлением конц. HCl (1 экв). Выход продукта 5 0,55 г (90%). ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,2 мин, [М+Н]⁺=238 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,8 мин.

Аналогично с приведенными методиками получены следующие соединения (без ограничения перечисленными), приведенные в таблице 2:

Таблица 2
Номер по заявке	Формула	Константы
1		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=229 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 9,8 мин.
2		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=229 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 12,1 мин.
3		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 2,1 мин, [М+Н]⁺=228 (условия Г). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,7 мин.
5		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,7 мин, [М+Н]⁺=243 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,6 мин.
6		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,7 мин, [М+Н]⁺=243 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,8 мин.
7		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,7 мин, [М+Н]⁺=243 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 5,02 мин.
9		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 2,2 мин, [М+Н]⁺=245 (условия Г). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 8,6 мин.
15		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 2,6 мин, [М+Н]⁺=226 (условия Г). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,5 мин.
32		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,8 мин, [М+Н]⁺=240 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 12,0 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,69 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂,); 2,07 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,19 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,59 (т, 2H, CH₂C, J=7,6 Гц); 3,06 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,6 Гц); 6,09 (м, 1H, фуран); 6,33 (м, 1H, фуран); 7,50 (м, 1H, фуран); 7,84 (ушир.т, 1H, NH)
34		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 2,0 мин, [М+Н]⁺=256 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 3, индивидуальный пик, время удерживания 10,2 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,63 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂COOH, J=7,3 Гц); 1,72 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂NH, J=7,5 Гц); 1,85 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,3 Гц); 2,03 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,79 (т, 2H, CH₂C, J=7,5 Гц); 3,06 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 6,86 (м, 1H, тиофен); 6,93 (м, 1H, тиофен); 7,28 (д, 1H, тиофен); 8,11 (ушир.т, 1H, NH)
35		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=251 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 16,0 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,70 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂COOH, J=7,3 Гц); 1,78 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂NH, J=7,5 Гц); 2,09 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,20 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,3 Гц); 2,71 (т, 2H, CH₂C, J=7,5 Гц); 3,03 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 7.19 (м, 1H, 5-Pyr); 7,25 (д, 1H, 3-Pyr, J=7,8 Гц); 7,68 (м, 1H, 4-Pyr); 7,82 (ушир.т, 1H, NH); 8,46 (д, 1H, 6-Pyr, J=4,1 Гц)
36		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,5 мин, [М+Н]⁺=271 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 8,9 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,04 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,15 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,71 (т, 2H, CH₂C, J=7,0 Гц); 3,28 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,0 Гц); 7,42 (д, 1H, 5-Pyr, J=7,4 Гц); 7,68 (дд, 1H, 4-Pyr, J=7,4, 2,2 Гц); 7,86 (ушир.т, 1H, NH); 8,23 (д, 1H, 2-Pyr, J=2,2 Гц); 12,02 (ушир.с, 1H, -COOH)
37		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,5 мин, [М+Н]⁺=261 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 8,9 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,68 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,08 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,18 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,91 (т, 2H, CH₂C, J=7,3 Гц); 3,32 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,3 Гц); 6,61 (с, 1H, CH); 8,00 (ушир.т, 1H, NH); 12,02 (ушир.с, 1H, -COOH)
39		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,7 мин, [М+Н]⁺=275 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 11,4 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,63 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂COOH, J=7,3 Гц); 1,74 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂NH, J=7,5 Гц); 1,84 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,3 Гц); 2,03 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,78 (т, 2H, CH₂C, J=7,5 Гц); 3,07 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 6,64 (с, 1H, CH); 8,18 (ушир.с, 1H, NH)
40		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,8 мин, [М+Н]⁺=274 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 15,6 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 1,90 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,06 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,84 (т, 2H, CH₂C, J=7,2 Гц); 3,38 (м, 2H, CH₂NH); 6,13 (с, 1H, 3-индол); 6,90 (т, 1H, 5-индол, J=7,4 Гц); 6,97 (т, 1H, 6-индол, J=7,4 Гц); 7,28 (д, 1H, 7-индол, J=7,4 Гц); 7,38 (д, 1H, 4-индол, J=7,7 Гц); 8,25 (ушир.т, 1H, NH); 11,43 (ушир.с, 1H, -COOH)
41		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=251 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 16,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,71 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,09 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,20 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,58 (т, 2H, CH₂C, J=7,3 Гц); 3,04 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,3 Гц); 7,23 (д, 2H, 2-pyr, J=5,2 Гц); 7,83 (ушир.т, 1H, NH); 8,44 (д, 2H, 3-pyr, J=5,2 Гц)
43		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,75 мин, [М+Н]⁺=254 (условия В). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,3 мин.
52		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,9 мин, [М+Н]⁺=259 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 13,3 мин.
54		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 2,5 мин, [М+Н]⁺=243 (условия Г). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 7,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,69 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,08 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,18 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 3,11 (т, 2H, CH₂C, J=7,5 Гц); 3,40 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 7,58 (д, 1H, SCH, J=3,2 Гц); 7,71 (д, 1H, NCH, J=3,2 Гц); 7,98 (ушир.т, 1H, NH); 11,91 (с, 1H, -COOH).
55		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,4 мин, [М+Н]⁺=316 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 4, индивидуальный пик, время удерживания 18,2 мин.
56		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,2 мин, [М+Н]⁺=225 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 5,4 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,69 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,03 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,59 (м, 2H, CH₂N); 3,26 (м, 2H, CH₂N); 6,61, 6,84 (ушир.с, 1H, CCH); 6,65,7,23 (ушир.с, 2H, NH₂); 7,51 (ушир.с, 1H, NCHN); 7,86 (ушир.с, 1H, NH); 11,8 (ушир.с, 1H, NH)
57		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=253 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 16,4 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,69 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,07 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,4 Гц); 2,23 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,4 Гц); 2,59 (м, 2H, CH₂N); 2,80, 2,92 (с, 6H, NCH₃); 3,25 (м, 2H, CH₂N); 6,63, 6,84 (ушир.с, 1H, CCH); 7,50 (ушир.с, 1H, NCHN); 7,82 (ушир.с, 1H, NH); 11,8 (ушир.с, 1H, NH)
58		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=281 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 22,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,99, 1,07 (т, 6H, CH₂CH₃, J=7,3 Гц); 1,70 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,07 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,4 Гц); 2,23 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,4 Гц); 2,59 (м, 2H, CH₂N); 2,80, 2,92 (с, 6H, NCH₃); 3,24 (м, 6H, CH₂N, CH₂CH₃); 6,76 (с, 1H, CCH); 7,49 (с, 1H, NCHN); 7,82 (ушир.т, 1H, NH); 11,8 (ушир.с, 1H, NH)
59		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,2 мин, [М+Н]⁺=241 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 4,4 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,70 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 1,91 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,03 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,59 (м, 2H, CH₂N); 3,23 (м, 2H, CH₂N); 6,62, 6,84 (ушир.с, 1H, CCH); 7,52 (ушир.с, 1H, NCHN); 7,83 (ушир.с, 1H, NH); 8,68 (ушир.с, 1H, NHOH); 10,37 (ушир.с, 1H, NHOH); 11,8 (ушир.с, 1H, NH)
60		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=281 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 22,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,69 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,03 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,59 (м, 2H, CH₂N); 3,26 (м, 2H, CH₂N); 4,13 (ушир.с, 2H, NH₂); 6,63, 6,84 (ушир.с, 1H, CCH); 7,51 (ушир.с, 1H, NCHN); 7,86 (ушир.с, 1H, NH); 8,94 (ушир.с, 1H, NHNH₂); 11,8 (ушир.с, 1H, NH)
62		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=266 (условия А). ВЭЖХ в условиях 3, индивидуальный пик, время удерживания 15,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,18 (д, 6H, CH₃CH, J=6,3 Гц), 1,71 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,07 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,4 Гц); 2,22 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,4 Гц); 2,60 (т, 2H, CH₂N, J=7,1 Гц); 3,24 (м, 2H, CH₂N); 4,87 (h, 1H, CH₃CH, J=6,3 Гц), 6,77 (с, 1H, CCH); 7,49 (с, 1H, NCHN); 7,83 (ушир.с, 1H, NH); 11,8 (ушир.с, 1H, NH)
73		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,2 мин, [М+Н]⁺=298 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 18,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,95 (s. 6H. CH₃); 2,14, 2,19 (AB-syst, 4H, CH₂); 2,84, 2,96 (м, 2H, CH₂CH),; 4,39 (м, 1H, CH₂CH),; 6,79 (с, 1H, CCH); 7,53 (с, 1H, NCHN); 8,04 (д, 1H, NH, J=7,3 Гц)
77		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=284 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 5, индивидуальный пик, время удерживания 2,0 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,82 (д, 3H, Me, J=6,5 Гц); 1,98, 2,08, 2,19 (м, 2H+1H+2H, CH₂CH CH₂); 2,83, 2,92 (м, 2H, CH₂CH); 4,41 (м, 1H, CH₂CH); 6,80 (с, 1H, CCH); 7,56 (с, 1H, NCHN); 8,06 (д, 1H, NH, J=7,8 Гц)
84		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,43 мин, [М+Н]⁺=226 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 7,9 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,69 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,08 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,18 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,72 (т, 2H, CH₂C, J=7,8 Гц); 3,32 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,8 Гц); 6,86 (с, 2H, NCH); 7,90 (ушир.т, 1H, NH)
85		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=237 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 12,0 мин.
86		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=252 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,4 мин.
87		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=399 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,33 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,04 (д, 3H, CCH₃, J=6,3 Гц); 1,17 (т, 3H, OCH₂CH₃, J=7,1 Гц); 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,15 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,75, 2,94 (м, 2H, CCH₂CH); 4,08 (м, 3H, OCHCH₃, OCH₂CH₃); 4,22 (м, 1H, NCH); 4,58 (м, 1H, CCH₂CH); 6,76 (с, 1H, CCH); 7,51 (с, 1H, NCHN); 7,79 (д, 1H, NH, J=8,0 Гц); 8,07 (д, 1H, NH, J=8,5 Гц)
88		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=371 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 9,7 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,91 (д, 3H, CCH₃, J=6,0 Гц); 1,69 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,7 Гц); 2,14 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,87 (м, 2H, CCH₂CH); 3,91 (м, 2H, OCHCH₃, NCH); 4,43 (м, 1H, CCH₂CH); 6,73 (с, 1H, CCH); 7,46 (д, 1H, NH, J=6,9 Гц); 7,51 (с, 1H, NCHN); 8,08 (д, 1H, NH, J=7,8 Гц)
89		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,8 мин, [М+Н]⁺=383 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 12,2 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,85 (м, 6H, CH(CH₃)₂); 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,03 (м, 1H, CHCH₃); 2,13 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,73, 2,89 (м, 2H, CCH₂CH); 3,62 (с, 3H, OCH₃); 4,15 (м, 1H, NCH); 4,56 (м, 1H, CCH₂CH); 6,76 (с, 1H, CCH); 7,53 (с, 1H, NCHN); 8,04 (д, 1H, NH, J=8,0 Гц); 8,10 (д, 1H, NH, J=8,2 Гц); 11,9 (ушир.с, 1H, -COOH)
90		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=368 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,9 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,81 (м, 6H, CH(CH₃)₂); 1,67 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 1,99 (м, 1H, CHCH₃); 2,14 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,78, 2,92 (м, 2H, CCH₂CH); 4,09 (м, 1H, NCH); 4,54 (м, 1H, CCH₂CH); 6,85 (с, 1H, CCH); 7,06, 7,53 (ушир.с, 2H, NH₂); 7,59 (д, 1H, NH, J=8,7 Гц); 7,72 (с, 1H, NCHN); 8,10 (д, 1H, NH, J=7,9 Гц); 12,19 (ушир.с, 1H, -COOH)
91		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=355 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,12 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1.26 (д, 3H, CHCH₃, J=7,3 Гц); 1,65 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,11 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,72, 2,91 (м, 2H, CCH₂CH); 3,60 (с, 3H, OCH₃); 4,26 (p, 1H, NCHCH₃, J=7,3 Гц); 4,50 (м, 1H, CCH₂CH); 6,78 (с, 1H, CCH); 7,57 (с, 1H, NCHN); 7,98 (д, 1H, NH, J=8,2 Гц); 8,35 (д, 1H, NH, J=7,2 Гц)
92		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=340 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 9,7 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,20 (д, 3H, CHCH₃, J=7,2 Гц); 1,67 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,15 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,78, 2,91 (м, 2H, CCH₂CH); 4,26 (p, 1H, NCHCH₃, J=7,2 Гц); 4,43 (м, 1H, CCH₂CH); 6,78 (с, 1H, CCH); 7,00, 7,64 (ушир.с, 2H, NH₂); 7,50 (с, 1H, NCHN); 7,97 (м, 2H, NH); 11,9 (ушир.с, 1H, -COOH)
93		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,9 мин, [М+Н]⁺=397 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 12,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,82, 0,87 (д, 6H, CH₂CH(CH₃)₂, J=6,1 Гц); 1,53 (м, 3H, CH₂CH(CH₃)₂); 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,3 Гц); 2,12 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,72, 2,89 (м, 2H, CCH₂CH); 3,60 (с, 3H, OCH₃); 4,27 (м, 1H, NCH,); 4,51 (м, 1H, CCH₂CH); 6,75 (с, 1H, CCH); 7,51 (с, 1H, NCHN); 8,00 (д, 1H, NH, J=8,2 Гц); 8,23 (д, 1H, NH, J=7,7 Гц); 11,9 (ушир.с, 1H, -COOH)
94		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=382 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,8 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,82, 0,87 (д, 6H, CH₂CH(CH₃)₂, J=6,1 Гц); 1,51 (м, 3H, CH₂CH(CH₃)₂); 1,67 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,15 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,86, 2,98 (м, 2H, CCH₂CH); 4,19 (м, 1H, NCH,); 4,52 (м, 1H, CCH₂CH); 7,02, 7,51 (ушир.с, 2H, NH₂); 7,07 (с, 1H, CCH); 7,90 (д, 1H, NH, J=8,2 Гц); 8,08 (д, 1H, NH, J=7,9 Гц); 8,23 (с, 1H, NCHN)
95		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,2 мин, [М+Н]⁺=357 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 8,6 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,14 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,87 (м, 2H, CCH₂CH); 3,66 (м, 2H, CHCH₂OH); 4,20 (м, 1H, NCH,); 4,54 (м, 1H, CCH₂CH); 6,87 (с, 1H, CCH); 7,74 (с, 1H, NCHN); 7,94 (д, 1H, NH, J=8,0 Гц); 8,05 (д, 1H, NH, J=7,6 Гц)
96		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=356 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 8,8 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,67 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,15 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,87 (м, 2H, CCH₂CH); 3,60 (м, 2H, CHCH₂OH); 4,14 (м, 1H, NCH,); 4,46 (м, 1H, CCH₂CH); 6,82 (с, 1H, CCH); 7,09, 7,61 (ушир.с, 2H, NH₂); 7,52 (с, 1H, NCHN); 7,83 (д, 1H, NH, J=7,7 Гц); 7,97 (д, 1H, NH, J=7,6 Гц); 11,9 (ушир.с, 1H, -COOH)
100		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,1 мин, [М+Н]⁺=227 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 3, индивидуальный пик, время удерживания 7,4 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,74 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,19 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,79 (м, 4H, CH₂NH₂, CH₂C); 3,08 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 6,85 (м, 1H, тиофен); 6,93 (м, 1H, тиофен); 7,30 (д, 1H, тиофен); 7,94 (ушир.с, 2H, NH₂); 8,04 (ушир.т, 1H, NH)
103		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,2 мин, [М+Н]⁺=222 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 4,0 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,78 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂NH₂,J=7,5 Гц); 1,87 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂NH, J=7,3 Гц); 2,20 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,77 (м, 2H, CH₂NH₂); 3,01 (т, 2H, CH₂-Pyr, J=7,5 Гц); 3,09 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 7,80 (м, 1H, 5-Pyr); 7,89 (д, 1H, 3-Pyr, J=7,8 Гц); 8,15 (м, 1H, 4-Pyr); 8,39 (ушир.т, 1H, NH); 8,74 (д, 1H, 6-Pyr, J=4,1 Гц)
104		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,8 мин, [М+Н]⁺=222 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 12,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,77 (п, J=7,2 Гц, 2H, CH₂), 2,18 (т, J=7,2 Гц, 2H, CH₂), 2,46-2,54 (м, 2H, CH₂), 2,66-2,78 (м, 4H, -CH₂CH₂-), 3,28 (дд, J₁=13,1 Гц, J₂=6,1 Гц, CH₂), 6,15 (д, 1H, H-фурана), 6,34 (т, 1H, H-фурана), 7,51 (с, 1H, H-фурана), 8,06-8,22 (м, 4Н, NH₃⁺+NH)
121		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=243 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 27,7 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,69 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,6 Гц); 2,07 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,6 Гц); 2,17 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,87 (т, 2H, CH₂C, J=7,2 Гц); 3,34 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,2 Гц); 7,36 (д, 1H, NCHS, J=2,0 Гц); 7,88 (ушир.т, 1H, NH); 9,01 (д, 1H, CCHS, J=2,0 Гц)
125		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=226 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 21,05 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,70 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,08 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,19 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,54 (т, 2H, CH₂C, J=7,3 Гц); 3,18 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,3 Гц); 7,41 (с, 2H, NCH); 7,85 (ушир.т, 1H, NH); 12,15 (ушир.с, 1H, -COOH)
127		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=227 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 16,8 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,63 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 1,88 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,03 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,82 (т, 2H, CH₂C, J=7,2 Гц); 3,30 (м, 2H, CH₂NH); 7,88 (с, 1H, NCH); 8,35 (ушир.т, 1H, NH)
131		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=238 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 23,2 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,05 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,15 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,89 (т, 2H, CH₂C, J=7,5 Гц); 3,41 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 7,88 (ушир.т, 1H, NH); 8,47 (с, 1H, CH); 8,52 (с, 1H, CH); 8,56 (с, 1H, CH)
139		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=276 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 18,0 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,70 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,08 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,19 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,80 (т, 2H, CH₂C, J=7,3 Гц); 3,38 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,3 Гц); 6,81 (т, 1H, 6-ImPyr, J=6,4 Гц); 7.16 (т, 1H, 7-ImPyr, J=8,0 Гц); 7,44 (д, 1H, 8-ImPyr, J=8,0 Гц); 7,70 (с, 1H, 3-ImPyr); 7,89 (ушир.т, 1H, NH); 8,44 (д, 1H, 5-ImPyr, J=6,4 Гц)
149		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=385 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,6 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,03 (д, 3H, CCH₃, J=6,5 Гц); 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,13 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,75, 2,93 (м, 2H, CCH₂CH); 3,61 (с, 3H, OCH₃); 4,10 (м, 1H, OCHCH₃); 4,26 (м, 1H, NCH); 4,58 (м, 1H, CCH₂CH); 6,76 (с, 1H, CCH); 7,51 (с, 1H, NCHN); 7,80 (д, 1H, NH, J=8,5 Гц); 8,10 (д, 1H, NH, J=8,0 Гц)
149		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=371 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,4 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,67 (м, 2H, CH₂CH₂CH₂,); 2,10 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,74, 2,93 (м, 2H, CCH₂CH); 3,60, 3,72 (м, 2H, OCH₂CH); 3,61 (с, 3H, OCH₃); 4,28 (м, 1H, OCH₂CH); 4,54 (м, 1H, CCH₂CH); 6,74 (ушир.с, 1H, CCH); 7,50 (с, 1H, NCHN); 8,03 (д, 1H, NH, J=7,8 Гц); 8,33 (д, 1H, NH, J=7,5 Гц)
150		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=370 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 9,4 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,99 (д, 3H, CCH₃, J=6,2 Гц); 1,68 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,15 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,80, 2,93 (м, 2H, CCH₂CH); 4,05 (м, 2H, OCHCHN); 4,51 (м, 1H, CCH₂CH); 6,79 (с, 1H, CCH); 7,08,7,39 (ушир.с, 2H, NH₂); 7,50 (м, 2H, NCHN, NH); 8,09 (д, 1H, NH, J=7,5 Гц); 11,9 (ушир.с, 1H, -COOH)
155		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,4 мин, [М+Н]⁺=214 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 2, индивидуальный пик, время удерживания 14,6 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,75 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,6 Гц); 2,17 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,6 Гц); 2,74 (м, 2H, CH₂NH2); 2,89 (т, 2H, CH₂C, J=7,3 Гц); 3,38 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,2 Гц); 7,38 (д, 1H, CCHS, J=1,8 Гц); 7,86 (ушир.с, 3H, NH₂+HCl); 8,05 (ушир.т, 1H, NH); 9,02 (д, 1H, NCHS, J=1,8 Гц)
178		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,2 мин, [М+Н]⁺=281 (условия В). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 7,0 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,83-2,23 (м, 4H, CH₂CH₂CH), 2,93 (м, 2H, CH₂CH), 3,61 (с, 3H, OCH₃); 4,02 (м, 1H, CH₂CH₂CH); 4,50 (м, 1H, CH₂CH); 6,84 (с, 1H, CCH); 7,60 (с, 1H, NCHN); 7,78 (с, 1H, NH), 8,05 (д, 1H, NH, J=7,8 Гц)
181		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=327 (условия В). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,15 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 0,96 (д, 3H, CCH₃, J=6,2 Гц); 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,13 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,75-3,06 (м, 4H, CCH₂CH, CHCH₂NH); 3,61 (м, 1H, CHCH₂NH); 4,48 (м, 1H, CCH₂CH); 6,92 (с, 1H, CCH); 7,79 (т, 1H, NH, J=5,8 Гц); 7,94 (с, 1H, NCHN); 7,99 (д, 1H, NH, J=8,2 Гц)
182		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,2 мин, [М+Н]⁺=313 (условия Б). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 9,7 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,67 (м, 2H, CH₂CH₂CH₂,); 2,08 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,74 (дд, 1H, CCH₂CH, J=14,7, 8,6 Гц), 2,90 (дд, 1H, CCH₂CH, J=14,8, 5,1 Гц), 3,09 (м, 2H, OCH₂CH₂N), 3,36 (м, 2H, OCH₂CH₂N), 4,38 (м, 1H, CCH₂CH); 6,72 (с, 1H, CCH); 7,48 (с, 1H, NCHN); 8,05 (ушир.с, 1H, NH)
183		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=327 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 9,7 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,51 (пент., 2H, OCH₂CH₂CH₂N, J=6,4 Гц); 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,14 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,75-3,06 (м, 4H, CCH₂CH, OCH₂CH₂CH₂N); 3,36 (т, 2H, OCH₂CH₂CH₂N, J=6,4 Гц); 4,52 (м, 1H, CCH₂CH); 7,26 (с, 1H, CCH); 7,95 (т, 1H, NH, J=5,7 Гц); 8,16 (д, 1H, NH, J=8,2 Гц); 8,83 (с, 1H, NCHN)
184		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=326 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 8,9 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,67 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,15 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,79, 2,92 (м, 2H, CCH₂CH); 3,60 (м, 2H, CCH₂NH); 4,38 (м, 1H, CCH₂CH); 6,80 (с, 1H, CCH); 7,08, 7,49 (ушир.с, 2H, NH₂); 7,51 (с, 1H, NCHN); 7,99 (д, 1H, NH, J=7,4 Гц); 8,17 (т, 1H, NH, J=5,9 Гц); 11,9 (ушир.с, 1H, -COOH)
188		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 3,6 мин, [М+Н]⁺=290 (условия Г). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,6 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,85-2,23 (м, 4H, CH₂CH₂CH), 3,26 (м, 2H, CCH₂CH₂N); 3,55 (м, 2H, CCH₂CH₂N); 3,95 (м, 1H, CH₂CH₂CH); 7,41 (т, 2H, бензотиазол, J=7,6 Гц), 7,49 (т, 2H, бензотиазол, J=7,6 Гц), 7,77 (с, 1H, NH), 7,95 (д, 2H, бензотиазол, J=8,0 Гц), 8,06 (д, 2H, бензотиазол, J=8,1 Гц); 8,19 (т, 1H, NH, J=5,7 Гц)
193		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=341 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 2,11 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,73, 2,93 (м, 2H, CCH₂CH); 3,60 (с, 3H, OCH₃); 3,82 (м, 2H, CCH₂NH); 4,49 (м, 1H, CCH₂CH); 6,75 (с, 1H, CCH); 7,50 (с, 1H, NCHN); 8,01 (д, 1H, NH, J=8,2 Гц); 8,29 (т, 1H, NH, J=5,9 Гц)
194		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,3 мин, [М+Н]⁺=327 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 9,2 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,66 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,13 (м, 4H, CH₂CH₂CH₂); 2,79, 2,95 (м, 2H, CCH₂CH); 3,74 (м, 2H, CCH₂NH); 4,50 (м, 1H, CCH₂CH); 6,86 (с, 1H, CCH); 7,73 (с, 1H, NCHN); 7,98 (д, 1H, NH, J=8,2 Гц); 8,21 (т, 1H, NH, J=5,9 Гц)
195		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,0 мин, [М+Н]⁺=286 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,5 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,84 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=6,5 Гц); 2,58 (т, 4H, CH₂CH₂CH₂,J=6,5 Гц), 2,91 (т, 2H, CH₂C, J=7,3 Гц), 3,98 (т, 2H, CH₂N, J=7,3 Гц), 7,49 (дд, 1H, 5-Pyr, J=4,9, 7,8 Гц), 8,29 (dt, 1H, 4-Pyr, J=1,9, 7,9 Гц), 8,60 (д, 1H, 6-Pyr, J=4,7 Гц), 9,14 (д, 1H, 2-Pyr, J=1,5 Гц), 14,01 (с, 1H, COOH)
196		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,06 мин, [М+Н]⁺=265 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,4 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,81 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=6,5 Гц); 1,97 (с, 3H, Me), 2,55 (т, 4H, CH₂CH₂CH₂,J=6,5 Гц), 3,96 (т, 2H, CH₂NCO, J=6,3 Гц), 4,05 (т, 2H, CH₂Pyr, J=6,3 Гц), 6,38 (с, 1H, CH), 7,52 (с, 1H, CH=N), 10,35 (с, 1H, NH).
197		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,15 мин, [М+Н]⁺=257 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 11,2 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,63 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,1 Гц); 1,86 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,0 Гц); 2,04 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,2 Гц); 2,32 (с, 3H, Me), 3,03 (т, 2H, CH₂C, J=7,3 Гц); 3,33 (кв., 2H, CH₂NH, J=6,9 Гц); 7,08 (с, 1H, CH), 8,21 (т, 1H, NH, J=5,7 Гц).
198		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,3 мин, [М+Н]⁺=281 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 16,6 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,26 (с, 9H, t-Bu), 1,81 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=6,5 Гц); 2,58 (т, 4H, CH₂CH₂CH₂,J=6,5 Гц), 3,06 (т, 2H, CH₂C, J=7,3 Гц), 3,95 (т, 2H, CH₂N, J=7,3 Гц), 7,09 (с, CH, 1H).
199		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,15 мин, [М+Н]⁺=282 (условия А). ВЭЖХ в условиях 3, индивидуальный пик, время удерживания 11,2 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,61 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,3 Гц); 1,84 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,3 Гц); 2,01 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,03 (с, 3H, Me), 2,10 (с, 3H, Me), 2,37 (т, 2H, CH₂C, J=7,5 Гц); 2,98 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 3,58 (с, 3H, NMe), 8,01 (ушир.т, 1H, NH, J=5,7 Гц).
200		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,3 мин, [М+Н]⁺=303 (условия А). ВЭЖХ в условиях 3, индивидуальный пик, время удерживания 15,0 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,64 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 1,85 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,3 Гц); 2,03 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,33 (с, 3H, Me), 2,76 (т, 2H, CH₂C, J=7,5 Гц); 3,15 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 3,63 (с, 3H, NMe), 6,96 (т, 2H, 5-индол, J=7,3 Гц), 7,04 (т, 2H, 6-индол, J=7,4 Гц), 7,32 (д, 2H, 7-индол, J=8,0 Гц), 7,46 (д, 2H, 4-индол, J=7,6 Гц).8,05 (ушир.т, 1H, NH, J=5,7 Гц).
201		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,25 мин, [М+Н]⁺=272 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 17,3 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,70 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,08 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,20 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 3,03 (т, 2H, CH₂S, J=7,1 Гц); 3,26 (кв., 2H, CH₂NH, J=6,4 Гц), 3,56 (с, 3H, NMe), 6,93 (с, 1H, CH); 7,22 (с, 1H, CHNMe); 8,05 (ушир.т, 1H, NH, J=5,7 Гц), 12,02 (с, 1H, COOH).
202		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,29 мин, [М+Н]⁺=302 (условия А). ВЭЖХ в условиях 3, индивидуальный пик, время удерживания 13,7 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,65 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 1,87 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,3 Гц); 2,08 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,61 (т, 2H, CH₂C, J=7,5 Гц); 3,26 (кв., 2H, CH₂NH, J=7,5 Гц); 7,26 (т, 1H, p-Ph, J=7,4 Гц), 7,47 (т, 2H, m-Ph, J=7,8 Гц), 7,59 (с, CHN, 1H), 7,79 (д, 2H, o-Ph, J=8,0 Гц), 8,17 (ушир.т, 1H, NH, J=5,7 Гц), 8,33 (с, CH=N, 1H).
203		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,35 мин, [М+Н]⁺=252 (условия А). ВЭЖХ в условиях 3, индивидуальный пик, время удерживания 11,1 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,64 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 1,86 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,3 Гц); 2,05 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 3,17 (т, 2H, CH₂NHCO, J=6,4 Гц); 3,26 (кв., 2H, CH₂NHPyr, J=6,4 Гц); 6,45 (м, 2H, 3-Pyr, 5-Pyr), 7,33 (т, 1H, 4-Pyr, J=7,7 Гц), 7,94 (д, 1H, 6-Pyr, J=4,9 Гц).
204		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,27 мин, [М+Н]⁺=290 (условия А). ВЭЖХ в условиях 3, индивидуальный пик, время удерживания 12,1 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,64 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 1,93 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,3 Гц); 2,06 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 2,99 (т, 2H, CH₂C, J=7,5 Гц); 3,47 (м, 2H, CH₂NH); 3,74 (с, 3H, NMe), 7,14 (т, 1H, бензимидазол, J=7,5 Гц), 7,19 (т, 1H, бензимидазол, J=7,4 Гц), 7,48 (д, 1H, бензимидазол, J=7,9 Гц), 7,55 (д, 1H, бензимидазол, J=7,8 Гц). 8,20 (ушир.т, 1H, NH, J=5,7 Гц).
205		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,27 мин, [М+Н]⁺=240 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,1 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,68 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,08 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,18 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц); 2,24 (с, Me, 3H), 3,29 (кв., 2H, CH₂NH, J=6,1 Гц), 3,90 (т, 2H, CH₂N, J=6,2 Гц), 6,70 (с, CHN, 1H), 6,98 (с, CHNCH₂, 1H), 7,96 (т, 1H, NH, J=5,7 Гц).
206		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,3 мин, [М+Н]⁺=304 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 16,1 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,61 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,4 Гц); 1,83 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,3 Гц); 2,03 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,3 Гц); 3,12 (т, 2H, CH₂C, J=6,8 Гц); 3,49 (кв., 2H, CH₂NH, J=6,8 Гц); 7,57 (м, Ph, 3H), 8,01 (д, o-Ph, 2H, J=6,0 Гц), 8,38 (т, 1H, NH, J=5,9 Гц).
207		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,36 мин, [М+Н]⁺=227 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 4,8 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,67 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,5 Гц); 2,06 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,5 Гц); 2,17 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,5 Гц), 3,42 (кв., 2H, CH₂NH, J=6,0 Гц), 4,22 (т, 2H, CH₂N, J=6,0 Гц), 7,91 (с, 1H, NH), 7,95 (с, 1H, NCHNCH₂), 8,43 (с, 1H, NCHN), 12,01 (с, 1H, COOH).
208		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 1,23 мин, [М+Н]⁺=293 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 14,2 мин. Спектр ¹H-ЯМР (400,13 МГц, ДМСО-d₆,δ, м.д., J/Гц): 1,65 (пент., 2H, CH₂CH₂CH₂, J=7,1 Гц); 1,88 (т, 2H, CH₂COOH, J=7,0 Гц); 2,05 (т, 2H, CH₂CONH, J=7,2 Гц); 2,76 (т, 2H, CH₂C, J=7,3 Гц); 3,27 (кв., 2H, CH₂NH, J=6,9 Гц); 6,88 (т, 1H, 6-индол, J=9,2 Гц), 7,22 (с, 1H, 2-индол), 7,26 (д, 1H, 4-индол, J=10,6 Гц), 7,32 (дд, 1H, 7-индол, J=4,6, 8,8 Гц), 8,09 (т, 1H, NH, J=5,7 Гц), 11,10 (с, 1H, COOH).
209		ЖХ МС, индивидуальный пик, время удерживания 0,36 мин, [М+Н]⁺=243 (условия А). ВЭЖХ в условиях 1, индивидуальный пик, время удерживания 10,47 мин. ¹H ЯМР (ДМСО-d₆, 400 MГц) δ_H, 1,22-1,44 (м, 2Н, CH₂CH₂CH₂), 1,54-1,74 (м, 5Н, CH₂), 1,81-2,05 (м, 7Н, CH₂), 2,17 (с, 3Н, NCH₃), 2,88 (м, 1Н, CH), 2,97-3,08 (м, 2Н, CH₂CH₂NH), 7,80 (уш. с, 1Н, NH).

Тесты на биологическую активность

Далее приведено детальное описание экспериментальных примеров, подтверждающих эффективность соединений общей формулы I для профилактики и лечения заболеваний в соответствии с данным изобретением, где приведенные примеры не предназначены для ограничения объема изобретения.

Пример 1

Противовирусное действие соединений общей формулы I в отношении вируса Коксаки in vivo

Для проведения исследований был использован трипсинзависимый штамм HСXV А2, предварительно адаптированный и вызывающий гибель мышей от коксаки-вирусной инфекции.

Эксперимент проводили на белых мышах самцах, весом 6-7 г. Животных инфицировали вирусом внутримышечно в объеме 0,1 мл/мышь. В опыте использовали дозу для заражения 10LD₅₀, вызывающую летальность у мышей.

О способности соединений оказывать лечебный эффект судили по гибели инфицированных вирусом HCXV А2 мышей в опытной группе по сравнению с группой животных, не получавших лечение.

Исследуемые соединения и плацебо вводили животным перорально по лечебной схеме. В качестве плацебо мышам вводили физиологический раствор. Отрицательным контролем служили интактные животные, которые содержались в тех же условиях, что и опытные группы в отдельном помещении.

Для проведения эксперимента были сформированы группы по 14-15 мышей в каждой. Соединения вводились в дозах 30, 3 и 0,3 мг/кг массы тела. Исследуемые вещества вводили перорально, 1 раз в сутки, в течение 7 дней (первое введение - через 24 часа после инфицирования). Наблюдение за животными осуществляли на протяжении 15 дней, ежедневно взвешивая и регистрируя смертность животных.

В ходе опыта по определению эффективности исследуемых соединений при НСХV А2 вирусной инфекции случаев неспецифической смертности в контрольной группе интактных животных зарегистрировано не было.

Соединения общей формулы I оказали защитное действие в отношении экспериментальной Коксаки-вирусной инфекции, снижая гибель животных и увеличивая среднюю продолжительность жизни животных (Таблица 3). При этом активность соединений проявлялась в широком диапазоне доз от 0,3 до 30 мг/кг.

Противовирусная активность иследованных соединений, описанная в примере свидетельствует о том, что данные химические соединения могут быть использованы в качестве эффективных лекарственных средств при HCXV А2 энтеровирусной инфекции.

Таблица 3 Эффективность соединений общей формулы I в отношении Коксаки A2-вирусной инфекции на модели у мышей
Исследуемые соединения и препарат сравнения	Доза исследуемых соединений и препарата сравнения Мг/кг	Летальность (сутки после заражения)	Всего Животных В группе	Общая леталь-ность, %	Средняя продолжительность жизни (сутки)	Индекс защиты (%)
Исследуемые соединения и препарат сравнения	Доза исследуемых соединений и препарата сравнения Мг/кг	6	Всего Животных В группе	Общая леталь-ность, %	7	Индекс защиты (%)	8	9	10	11	12	13	14	15	16
Относи тельная	По сравнению с контролем
Соединение 193	30				1		2	1	1	1			15	40,1	24,9	+14,2	45,3
	3				3	2	1	2					15	53,3	19,6	+8,9	27,2
	0,3				3	2	2	2					15	60,0	18,0	+7,3	18,2
Соединение 149	30			3	3	2	2						15	66,7	10,1	+0,6	7,7
	3				3	2	2	1					15	53,3	19,6	+8,9	27,2
	0,3			3	2	1	1						15	46,7	19,0	+8,3	36,3
Рибавирин				2	1	1	1	1	1				15	50,0	23,8	+13,1	36,3
Контроль вируса		3	6	2								15	73,3	10,7
Соединение 251	30			2		2	2						14	42,9	22,2	+10,0	33,3
Соединение 251	3				3	3	2		1				14	64,3	15,7	+3,5	0,0
0,3			3	3	1		1					14	57,1	15,7	+3,5	11,1
Соединение 2	30			3	3	3							14	64,3	13,9	+1,7	0,0
Соединение 2	3				3	1							14	28,6	32,3	+20,1	55,6
0,3				4	2	1						14	50,0	19,0	+6,8	22,2
Соединение 34	30				3		3		1				14	50,0	20,5	+8,3	22,2
Соединение 34	3				2	2	2	1					14	50,0	20,4	+8,2	22,2
0,3		1		2	2	2	1					14	57,1	16,9	+4,7	11,1
Контроль вируса		4	2	2	1							14	64,3	12,2	0,0	0,0

Пример 2

Противовирусное действие соединений общей формулы I в отношении адаптированного к мышам РС вируса

Для определения противовирусной эффективности химических соединений в отношении РСВ на экспериментальной модели мышей in vivo использовали вирус человека hRSV, предварительно адаптированный к росту в легких мышей. Животных инфицировали вирусом в дозе 5,0 log TCID₅₀ интраназально под легким эфирным наркозом в объеме 0,05 мл/мышь. Исследуемые соединения вводили животным перорально 1 раз в сутки в течение 5 дней по лечебной схеме в дозе 30, 3 и 0,3 мг/кг. Первое введение осуществляли через 24 часа после инфицирования. В качестве плацебо мышам вводили физиологический раствор. Отрицательным контролем служили интактные животные, которые содержались в отдельном помещении в тех же условиях, что и опытные группы. Экспериментальные группы содержали по 15 мышей. Препаратом сравнения служил Рибавирин, взятый в дозе 40 мг/кг.

Оценку противовирусной активности исследуемого соединения проводили по эффективности предотвращения снижения массы тела и увеличения веса легких, а также по подавлению репродукции hRSV в легких инфицированных мышей путем измерения вирусного титра в опытных группах по сравнению с контрольной на 3, 5 и 7-е сутки после инфицирования.

Результаты определения массы тела животных представлены в таблице 4.

В группе вирусного контроля отмечали достоверное снижение массы тела мышей по сравнению с интактными животными. Противовирусная активность соединений общей формулы I проявилась в увеличении массы тела мышей по сравнению с контрольными животными.

Таблица 4 Влияние соединений общей формулы I на массу тела мышей, инфицированных hRSV
Исследуемое соединение	Доза (мг/кг)	Масса тела мышей после инфицирования hRSV (M±SD) (граммы)
3 сутки	5 сутки	7 сутки
Соединение 149	0,3	14,14±0,35 *	16,24±0,14 *#	16,72±0,24 *#
Соединение 149	3	14,2±0,18	16,54±0,23 *#	16,3±0,23 *#
30	14,86±0,19	15,44±0,31 #	17,32±0,59 *#
Рибавирин	40	16±0,28 #	15,44±0,27 #	16,58±0,35 *#
Вирусный контроль		14,24±0,21	13,46±0,29	14,3±0,28 *
Интактные		14,48±0,17	15,32±0,23 #	17,9±0,11 #
* - различия статистически значимы по сравнению с интактной группой (р<0,05, t - критерий Стьюдента); # - различия статистически значимы по сравнению с контрольной группой (р<0,05, t - критерий Стьюдента).

Исследование легких мышей показало, что вес легких контрольных не леченых мышей после инфицирования hRSV превышал вес легких интактных животных, свидетельствуя об активно текущем инфекционном процессе. У мышей, леченых соединениями общей формулы I, противовирусный эффект проявлялся в снижении массы легких по сравнению с контрольной группой (таблица 5).

Таблица 5 Влияние соединений общей формулы I на вес легких мышей, инфицированных hRSV
Исследуемое соединение и препарат сравнения	Доза (мг/кг)	Вес легких мышей после инфицирования hRSV (M±SD) (милиграммы)
3 сутки	5 сутки	7 сутки
Соединение 149	0,3	148,4±1,85 *#	155,2±2,66 *#	143,6±3,5 *#
Соединение 149	3	158,6±1,5 *#	126,4±2,06 #	124,6±2,61 #
30	193,6±2,42 *#	144±2,61 *#	158,0±3,74 *#
Рибавирин	40	153±2,28 *#	150,2±2,79 *#	135±3,22 *#
Вирусный контроль		167,4±2,06 *	170,2±3,76*	172±1,41 *
Интактные		123,4±2,42 #	124±2,45 #	125,0±1,9 #
1 - * - различия статистически значимы по сравнению с интактной группой (р<0,05, t - критерий Стьюдента); 2 - # - различия статистически значимы по сравнению с контрольной группой (р<0,05, t - критерий Стьюдента).

Кроме того, терапевтическое действие соединений общей формулы I оценивали по способности подавлять репродукцию вируса hRSV в легких мышей через 3, 5 и 7 суток после инфицирования. Титр вируса определяли титрованием 10%-ой суспензии легких на культуре клеток Hep-2. Результат учитывали через 2 суток инкубации при 37°C по ЦПД. Результаты определения инфекционной активности hRSV в суспензиях легких мышей в культуре клеток Hep-2 после применения исследуемых соединений и препарата сравнения представлены в таблице 6.

Введение соединений общей формулы I животным приводило к снижению инфекционной активности hRSV.

Изучение противовирусного действия соединений общей формулы I на модели hRSV-инфекции у мышей показало, что заявляемые соединения подавляют репродукцию вируса в легких мышей, предотвращают снижение массы тела и увеличение массы легких до значений, наблюдаемых в группе интактных животных, а также снижают репродукцию вируса.

Таблица 6 Подавление репродукции hRSV в легких мышей, леченых соединениями общей формулы I
Исследуемое соединение	Доза исследуемого соединения и препарата сравнения, мг/кг	Инфекционный титр вируса в легких lg TCID ₅₀	Подавление репродукции вируса в легких мышей Δ lg	Коэффициент ингибирования	Инфекционный титр вируса в легких lg TCID ₅₀	Подавление репродукции вируса в легких мышей	Коэффициент ингибирования	Инфекционный титр вируса в легких lg TCID ₅₀	Подавление репродукции вируса в легких мышей	Коэффициент ингибирования
Исследуемое соединение	Доза исследуемого соединения и препарата сравнения, мг/кг	3 сутки после инфицирования	5 сутки после инфицирования	7 сутки после инфицирования
Lg	Δ lg	КИ	lg	Δ lg	КИ	lg	Δ lg	КИ
Соединение 149	0,3	0,2±0,2 *	2,4±0,2	94±7,8*	1,9±0,4 *	2,6±0,4	5 8±9,0*	0,6±0,2 *	3,0±0,2	85±5,3 *
Соединение 149	3	0,3±0,2*	2,3±0,2	90±8,8 *	2,3±0,3 *	2,2±0,3	59±20,7 *	1,4±0,3 *	2,2±0,3	61±7,2 *
30	0,8±0,2 *	1,8±0,2	71±8,8*	2,6±0,1 *	1,9±0,1	54±14,9 *	2,3±0,4 *	1,4±0,4	38±10,4 *
Рибавирин	40	0, 5±0,3 *	2,1±0,3	82±13,0 *	2,1±0,1 *	2,4±0,1	73±20, 7 *	1,2±0,1 *	2,4±0,1	68±3,4
Контроль		2,6±0,1	0	0	4,5±0,2	0	0	3,6±0,2	0	0

Пример 3

Противовирусное действие соединений общей формулы I в отношении РС вируса на модели мышей с угнетенной иммунной системой

Противовирусную активность химических соединений в отношении респираторно-синцитиального вируса человека (штамм А2, ATCC VR-1540 с инфекционным титром 5×10⁶ TCID₅₀/мл) оценивали на модели вирусной пневмонии у мышей линии Balb/c. Вирус вводили животным интраназально в объеме 50 мкл под легким эфирным наркозом. Для угнетения иммунной реакции против РС вируса за 5 дней до инфицирования животным вводили внутрибрюшинно циклофосфан в дозе 100 мг/кг. Изучаемые соединения применяли по лечебной схеме 1 раз в сутки в дозе 30 мг/кг в течение 5 дней, начиная через 24 часа после инфицирования. Активность соединений оценивали по снижению отека инфицированного респираторно-синцитиальным вирусом легкого по сравнению с контролем на пятый день после инфицирования.

Как видно из приведенных результатов в таблице 7, инфицирование животных вирусом приводило к формированию тяжелого отека легких (3,15-3,35 балла из 4-х возможных). Применение Рибавирина достоверно снижало этот показатель на 1,40-1,55 балла в зависимости от проведенного эксперимента. Используемые соединения общей формулы I в различной степени оказывали нормализующее воздействие на структуру легочной ткани.

Таблица 7 Степень отека легких при РС- вирусной пневмонии у мышей Balb/c на 5 сутки после инфицирования в условиях применения исследуемых соединений и препарата сравнения (M±SD, n=5)
Исследуемые соединения и препарат сравнения	Доза, мг/кг	Степень отека легких на 5 сутки после инфицирования, баллы
Контроль вируса	0	2,70±0,25
Соединение 148	30	2,00±0,31*
Рибавирин	50	1,85±0,42*
Контроль вируса	0	2,05±0,23
Соединение 35	30	1,48±0,17*
Контроль вируса	0	3,15±0,22
Соединение 121	30	1,30±0,60*
Соединение 139	30	1,75±0,77*
Рибавирин	50	1,75±0,59*
Контроль вируса	0	1,70±0,17
Соединение 193	30	0,80±0,17*
Соединение 184	30	1,00±0,19*
Соединение 96	30	0,35±0,11*
Рибавирин	50	1,75±0,47*
Контроль вируса	0	1,90±0,12
Соединение 89	30	0,75±0,17*
Соединение 91	30	0,40±0,11*
Рибавирин	50	1,75±0,47*
* Отмечены значения, отличающиеся от контрольных каждом опыте по t-критерию Стьюдента (p<0,05).

Изготовление лекарственных форм

Лекарственные формы соединений общей формулы I для использования в соответствии с настоящим изобретением получают по стандартным методикам, таким как, например, процессы смешивания, гранулирования, формирование драже, растворение и лиофилизация.

Таблетированная форма

Таблетированную форму получают, используя приведенные ниже ингредиенты:

Соединение общей формулы I или его фармацевтически приемлемая соль	100 мг
Крахмал картофельный	20-50 мг
Магния стеарат	3 мг
Аэросил	1 мг
Лактоза	до 300 мг

Компоненты смешивают и прессуют для образования таблеток весом 300 мг каждая.

Желатиновые капсулы

Соединение общей формулы I или его соль - 90 мг,

Лактоза (сахар молочный), крахмал картофельный, кремния диоксид коллоидный (аэросил), магния стеарат - до получения массы содержимого капсулы 220 мг

Указанные выше ингредиенты смешивают, гранулируют, гранулы помещают в твердые желатиновые капсулы в количестве 220 мг.

Суппозитории

Пример состава суппозитория:

Соединение общей формулы I или его фармацевтически приемлемая соль	10-100 мг
Масло какао	количество, необходимое для получения суппозитория

При необходимости возможно изготовление ректальных, вагинальных и уретральных суппозиториев с соответствующими наполнителями.

Раствор для инъекций

Пример состава раствора для инъекций:

Соединение общей формулы I или его фармацевтически приемлемая соль	10-100 мг
Вода для инъекций	2 мл

В качестве растворителя при приготовлении раствора для инъекций могут быть использованы - 0,9% раствор натрия хлорида, дистиллированная вода, раствор новокаина. Форма выпуска - ампулы, флаконы, шприц-тюбики, «insert».

Состав 1 раствора для инъекций:

Соединение общей формулы I или его соль - 100 мг

Вода дистиллированная - 5 мл

В качестве растворителя при приготовлении раствора для инъекций могут быть использованы - 0,9% раствор натрия хлорида, изотонический фосфатный буфер, НЕРЕS. Форма выпуска - ампулы, флаконы, шприц-тюбики, «insert».

Возможно изготовление различных лекарственных форм для инъекций - стерильных растворов, стерильных порошков и таблеток.

1. Способ профилактики или лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов, включающий введение пациенту эффективного количества следующего соединения:

Формула

или его фармацевтически приемлемой соли.

2. Способ по п. 1, где вирус, принадлежащий роду энтеровирусов, выбран из группы, включающей риновирусы, вирусы Коксаки и энтеровирус типа 71.

3. Способ по п. 1, где вирус, принадлежащий роду пневмовирусов, представляет собой респираторно-синцитиальный вирус, и вирус, принадлежащий роду метапневмовирусов, представляет собой метапневмовирус человека.

4. Способ по п. 1, где заболевания представляют собой обострения астмы, хронической обструктивной болезни легких, бронхита и муковисцидоза, вызванных риновирусом, респираторно-синцитиальным вирусом, метапневмовирусом.

5. Способ по п. 1, где указанное соединение вводят в твердой лекарственной форме.

6. Способ по п. 1, где эффективное количество указанного соединения или его фармацевтически приемлемой соли составляет 0,1-10 мг/кг массы тела.

7. Способ по п. 1, где эффективное количество представляет собой разовую дозу указанного соединения, составляющую 2-300 мг.

8. Способ по п. 1, где указанное соединение вводят от 5 дней до 10 дней.

9. Фармацевтическая композиция для профилактики или лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов, содержащая эффективное количество следующего соединения:

Формула

или его фармацевтически приемлемой соли

и фармацевтически приемлемые носители и наполнители.

10. Композиция по п. 9, где вирус, принадлежащий роду энтеровирусов, выбран из группы, включающей риновирусы, вирусы Коксаки и энтеровирус типа 71.

11. Композиция по п. 9, где вирус, принадлежащий роду пневмовирусов, представляет собой респираторно-синцитиальный вирус, и вирус, принадлежащий роду метапневмовирусов, представляет собой метапневмовирус человека.

12. Композиция по п. 9, где заболевания представляют собой обострения астмы, хронической обструктивной болезни легких, бронхита и муковисцидоза, вызванных риновирусом, респираторно-синцитиальным вирусом, метапневмовирусом.

13. Набор для профилактики или лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов, включающий композицию по любому из пп. 9-12 и инструкции по ее применению.

14. Набор по п. 13, где вирус, принадлежащий роду энтеровирусов, выбран из группы, включающей риновирусы, вирусы Коксаки и энтеровирус типа 71.

15. Набор по п. 13, где вирус, принадлежащий роду пневмовирусов, представляет собой респираторно-синцитиальный вирус, и вирус, принадлежащий роду метапневмовирусов, представляет собой метапневмовирус человека.

16. Набор по п. 13, где заболевания представляют собой обострения астмы, хронической обструктивной болезни легких, бронхита и муковисцидоза, вызванных риновирусом, респираторно-синцитиальным вирусом, метапневмовирусом.

17. Применение следующего соединения:

Формула

или его фармацевтически приемлемой соли,

для производства лекарственного средства для профилактики или лечения заболеваний, вызываемых РНК-содержащими вирусами, принадлежащими роду энтеровирусов, метапневмовирусов или роду пневмовирусов.

18. Применение по п. 17, где вирус, принадлежащий роду энтеровирусов, выбран из группы, включающей риновирусы, вирусы Коксаки и энтеровирус типа 71.

19. Применение по п. 17, где вирус, принадлежащий роду пневмовирусов, представляет собой респираторно-синцитиальный вирус, и вирус, принадлежащий роду метапневмовирусов, представляет собой метапневмовирус человека.

20. Применение по п. 17, где заболевания представляют собой обострения астмы, хронической обструктивной болезни легких, бронхита и муковисцидоза, вызванных риновирусом, респираторно-синцитиальным вирусом, метапневмовирусом.

Похожие патенты:

Способы лечения гепатита с // 2665365

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для лечения вируса гепатита С. Используют пан-генотипические ингибиторы ВГС, в частности метил {(2S,3R)-1-[(2S)-2-{5-[(2R,5R)-1-{3,5-дифтор-4-[4-(4-фторфенил)пиперидин-1-ил]фенил}-5-(6-фтор-2-{(2S)-1-N-(метоксикарбонил)-O-метил-L-треонил]пирролидин-2-ил}-1H-бензимидазол-5-ил)пирролидин-2-ил)-6-фтор-1H-бензимидазол-2-ил}пирролидин-1-ил]-3-метокси-1-оксобутан-2-ил}карбамат совместно с ингибитором протеазы HCV или полимеразы HCV.

Тритерпеновые амиды лупанового типа с фрагментом 2-аминобутан-1-ола, проявляющие вирусингибирующую и вирулицидную активность // 2664804

Изобретение относится к лупановым и 2,3-секолупановым С28 амидам с фрагментом 2-аминобутан-1-ола общей формулы: в которой R1=(R)-(-)-2-бутан-1-ол, или R1=(S)-(+)-2-бутан-1-ол, или R1=(R,S)-(+/-)-2-бутан-1-ол, или R1=(R)-(-)-2-бутан-1-ол, или R1=(S)-(+)-2-бутан-1-ол, или R1=(R,S)-(+/-)-2-бутан-1-ол, или R1=(R)-(-)-2-бутан-1-ол, или R1=(S)-(+)-2-бутан-1-ол, или R1=(R,S)-(+/-)-2-бутан-1-ол.

Пролекарственная форма тенофовира и ее фармацевтические применения // 2664534

Изобретение относится к соединению для лечения вирусных заболеваний общей формулы (I), его энантиомеру, диастереомеру или его фармацевтически приемлемой соли: ,где R1 и R2 представляют собой C1-6-алкил соответственно, или R1 и R2 вместе с присоединенным атомом углерода формируют С3-7-циклоалкил, R3 представляет собой Н или C1-6-алкил, Аr представляет собой замещенный или незамещенный С6-10-арил, или 6-10-членный гетероарил, причем заместитель независимо выбран из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, алкилтио, алкиламино, галогена, тиола, гидроксила, нитро, циано, С3-7-циклоалкила, C1-6-арила, 6-10-членного гетероарила, включающего О, S или N в качестве атома в кольце.

6,13,13-триметил-6,8,9,12-тетрагидро-6,9-метаноазепино[2,1-b]хиназолин-10(7н)-он в качестве ингибитора вирусов гриппа а // 2664331

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новому соединению 6,13,13-триметил-6,8,9,12-тетрагидро-6,9-метаноазепина[2,1-b]хинозалин-10(7Н)-ону формулы I. Технический результат: получено новое гетероциклическое соединение, обладающее полезной биологической активностью, заключающейся в ингибировании репродукции вируса гриппа.

Комбинированный лекарственный препарат для терапии вирусных инфекций // 2662160

Изобретение относится к новому комбинированному лекарственному препарату, для использования в виде твердой пероральной лекарственной формы, содержащему в качестве одного из трех активных компонентов элсульфавирин натрия.

Комплексный назальный спрей на основе аминокапроновой кислоты и сополимера 2-метил-5-винилпиридина и n-винилпирролидона // 2662089

Настоящая группа изобретений относится к области медицины и раскрывает фармацевтическую композицию (варианты) в виде раствора для местного применения, который содержит аминокапроновую кислоту и сополимер 2-метил-5-винилпиридина с N-винилпирролидоном, компоненты фосфатно-буферного раствора, консервант и очищенную воду, а также способ профилактики гриппа и ОРВИ при помощи указанных композиций.

Фармацевтическая композиция для пассивной иммунизации против бешенства, фармацевтический набор, способ применения фармацевтического набора // 2661028

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для получения фармацевтического набора для пассивной иммунизации против бешенства.

Фармацевтическая композиция ингибитора папилломавируса // 2661007

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к композиции для лечения или профилактики инфекции, связанной с папилломавирусом. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики инфекции, связанной с папилломавирусом, или поражения или заболевания, связанного с папилломавирусной инфекцией, включающая соединение общей формулы (I): или его фармацевтически приемлемую соль, в комбинации с растворителем и усиливающим вязкость агентом, где указанным растворителем является пропиленгликоль и указанным усиливающим вязкость агентом является гидроксипропилцеллюлоза, где указанная композиция имеет форму геля, и где гель имеет вязкость от 5000 до 50000 мП.

Композиции и способы применения форболовых сложных эфиров // 2659684

Настоящая группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и касается применения сложного форболового эфира. Для этого вводят эффективное количество 12-О-тетрадеканоилфорбол-13-ацетата (ТРА) или композиции, содержащей ТРА.

Фармацевтическая композиция, включающая дисульфид глутатиона и глутатион дисульфид s-оксид // 2659161

Группа изобретений относится к области фармацевтической промышленности, а именно к фармацевтической композиции (и к ее применению) для устранения дозозависимой токсичности и повышения терапевтической активности фармакологически активного соединения в терапии инфекционных и неинфекционных заболеваний, включающей дисульфид глутатиона или его фармацевтически приемлемую органическую или неорганическую соль и глутатион дисульфид S-оксида или его фармацевтически приемлемую органическую или неорганическую соль; а также к фармакологической комбинации (и к ее применению), содержащей указанную композицию и фармакологически активное соединение, выбранное из антикоагулянта, ингибитора фактора Ха, антимикробного или противовирусного средства, ингибитора кальциевых каналов; к лекарственному средству, включающему терапевтически эффективное количество указанных композиции или комбинации совместно с фармацевтически приемлемыми эксципиентами.

Агонисты рецептора окситоцина для лечения заболеваний центральной нервной системы // 2664705

Группа изобретений включает новые производные бензолсульфонамида, фармацевтические композиции заявленных соединений и применение соединения формулы (I) в качестве агониста рецептора окситоцина и их применение для производства лекарственного средства с активностью агониста рецептора окситоцина.

Бициклические соединения мочевины, тиомочевины, гуанидина и цианогуанидина, пригодные для лечения боли // 2664541

Изобретение относится к соединениям формулы I или их стереоизомерам, таутомерам или фармацевтически приемлемым солям, в которых кольцо А, кольцо С и X являются такими, как определено в формуле изобретения.

Пиразоламидное соединение и его применения в медицине // 2664532

Изобретение относится к соединению формулы [I], где n составляет 1 или 2, или к его соответствующим фармацевтически приемлемым солям. Изобретение также относится к соединениям, представленным формулами [II], [IIh] и [III].

Ингибиторы неприлизина // 2663618

Изобретение относится к соединениям, характеризующимся формулой XII, где значения Ra, Rb, R2, R7 и X определены в формуле изобретения, или к их фармацевтически приемлемой соли.

Ингибиторы неприлизина // 2663618

Новый ингибитор глутаминилциклаз и его применение для лечения заболеваний легких и дыхательных путей // 2662559

Группа изобретений относится к химико-фармацевтической промышленности и включает в себя фармацевтические композиции и их применение для модулирования активности глутаминилциклазы, для лечения расстройства, связанного с активностью глутаминилциклазы, а также для предупреждения и/или лечения расстройства, связанного с аберрантной активностью клеток иммунной системы, содержащие терапевтически эффективное количество соединения формулы: или его фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

Средство для лечения кератоконъюнктивальных заболеваний // 2659203

Группа изобретений относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использована для снижения образования шрамов у субъекта с кератоконъюнктивальным расстройством.

Амидное производное пиразола // 2658827

Настоящее изобретение касается нового соединения, формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, которое обладает способностью подавлять активность RORγ. В формуле (I) радикалы и символы имеют значения, указанные в формуле изобретения.

Амидное производное пиразола // 2658827

Диазольные лактамы // 2666730

Описаны соединения формулы I, где n представляет собой целое число от 0 до 3; каждый A независимо выбран из группы, состоящей из N и CH; A1 представляет собой N или C(R5); A2 представляет собой N или C(R7); R1 и R2 каждый независимо выбраны из группы, состоящей из H, галогена и -ORa; R3 является представителем, выбранным из группы, состоящей из H, C1-8 алкила, C3-8 циклоалкила, C2-8 алкенила, C1-8 галогеналкила, -ORa, -NRaRb, фенила и 5- или 6-членного гетероарила; R4 является представителем, выбранным из группы, состоящей из H и C1-8 алкила; R5, R6, R7 и R8 каждый независимо выбран из группы, состоящей из H, галогена, C1-8 алкила, C1-8 галогеналкила, C1-8 гидроксиалкила и 5- или 6-членного гетероарила; R9 является представителем, выбранным из группы, состоящей из H и C1-8 алкила; и каждый Ra и Rb независимо выбраны из группы, состоящей из атома водорода, C1-8 алкила; где каждый гетероарил имеет от одного до пяти гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, или их фармацевтически приемлемые соли. Соединения выступают в роли потенциальных антагонистов CCR1 рецептора и обладают in vivo противовоспалительной активностью. Описаны также фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I, а также способ лечения заболеваний путем введения соединения формулы I. 4 н. и 24 з.п. ф-лы, 2 табл., 46 пр. Формула I