Способ оценки агрегационной способности эритроцитов
Владельцы патента RU 2667009:
Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Нижегородская Государственная Сельскохозяйственная Академия" (ФГБОУ ВО НГСХА) (RU)
Изобретение относится к медицине и касается способа оценки агрегационной способности эритроцитов. Способ включает выделение эритроцитов из крови и регистрацию их агрегационной способности, где в качестве индуктора агрегации используют трихлорид железа, при этом эритроциты помещают в кювету агрегометра, добавляют трихлорид железа в финальной концентрации 200-400 мкМ и регистрируют степень агрегации фотометрическим методом. Способ включает использование нового агрегирующего агента в указанной концентрации, который изменяет форму эритроцитов от дискоцитов к стоматоцитам и стимулирует выраженную агрегацию эритроцитов человека. 2 ил.
Изобретение относится к области медицины, а именно к исследованию биологической жидкости, в частности крови, и может быть использовано при лабораторных исследованиях.
Известны способы оценки агрегационной способности эритроцитов с помощью высокомолекулярного декстрана (Rampling et al. Biorheology. - 2004. - V. 41. - P. 91-112), полилизина (Danon. Bibl. Anat. - 1973. - V. 11. - P. 289-295).
Известны также способы оценки агрегационной способности эритроцитов при использовании в качестве индуктора агрегации катионного красителя акридинового оранжевого (см. патент РФ №2390778, 2010) и хлористого цинка (см. патент РФ №2452958, 2012).
Однако механизм их действия на эритроциты остается до настоящего времени не изученным.
Поэтому задача создания способов оценки агрегационной способности с использованием новых агрегантов с известным механизмом действия на эритроциты является актуальной.
Известно, что железо играет существенную роль во многих процессах, происходящих в организме. В организме двухвалентный Fe (II) освобождается в свободной форме и окисляется с образованием трехвалентного Fe(III) (Lipinski, Pretorius. Polskie Arh. Med. Wew. J. - 2012. - V. 122. - P. 115-122). Установлено, что трихлорид железа индуцирует артериальный тромбоз в эксперименте in vivo (Eckly et al. J.Thrombosis and Haemostasis. - 2011. - V. 9. - P. 779-789).
Нами показано, что трихлорид железа изменяет форму эритроцитов от дискоцитов к стоматоцитам и стимулирует выраженную агрегацию эритроцитов человека.
Задачей предлагаемого изобретения является использование нового индуктора агрегации эритроцитов.
Поставленная задача решается тем, что предлагаемый способ оценки агрегационной способности эритроцитов включает выделение эритроцитов из крови и регистрацию их агрегации, при этом трихлорид железа добавляют в финальной концентрации 200-400 мкМ.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом. Эритроциты трижды отмывают от плазмы и белых клеток центрифугированием в 10-кратном объеме физиологического раствора. Отмытые эритроциты ресуспендируют в соотношении 1:200 в забуференном физиологическом растворе (10 мМ трис-НCI, 150 мМ NaCI, рН 7.4), после чего 0.9 мл суспензии клеток помещают в кювету для изучения агрегационной способности и добавляют 0.1 мл трихлорида железа в финальной концентрации 200-400 мкМ.
Регистрацию агрегационной способности эритроцитов осуществляют фотометрическим методом на лазерном агрегометре ЛА 230-2 НПФ «Биола». На рисунке 1 представлена агрегатограмма эритроцитов человека после добавления трихлорида железа в финальной концентрации 200 мкМ. На рисунке 2 представлена агрегация эритроцитов человека после добавления трихлорида железа в финальной концентрации 200 мкМ.
Способ оценки агрегационной способности эритроцитов, включающий выделение эритроцитов из крови и регистрацию их агрегационной способности, отличающийся тем, что в качестве индуктора агрегации используют трихлорид железа, при этом эритроциты помещают в кювету агрегометра, добавляют трихлорид железа в финальной концентрации 200-400 мкМ и регистрируют степень агрегации фотометрическим методом.
