Композиции и способы применения холинового эфира липоевой кислоты
Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, в частности к фармацевтической композиции для улучшения амплитуды аккомодации хрусталика или для лечения или профилактики пресбиопии у субъекта, которая включает (в мас.% от массы композиции): холиновый эфир липоевой кислоты (1-10%), неводный эксципиент, выбранный из глицерина (0,1-5%) или смеси глицерина и пропиленгликоля (0,5-5%), и аланин (0,1-5%), где указанные компоненты смешаны с водным раствором, имеющим pH от 4 до 6. Также предложены способ улучшения амплитуды аккомодации хрусталика и способ лечения или профилактики пресбиопии у субъекта, включающие стадию, на которой соответственно в хрусталик или в глаз субъекта вводят эффективное количество заявленной фармацевтической композиции. Группа изобретений обеспечивает стабильность композиции при хранении (по меньшей мере 95% от исходного количества холинового эфира липоевой кислоты присутствует в композиции по данным ВЭЖХ после хранения при 25°C и относительной влажности 40% в течение 3 месяцев). 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 10 пр., 13 табл., 5 ил.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение главным образом относится к фармацевтическим композициям, включающим холиновый эфир липоевой кислоты или его производное и неводный эксципиент, а также к их применению для лечения глазных заболеваний или расстройств (например, пресбиопии).
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Пресбиопия и амплитуда аккомодации
По мере старения, глаза людей подвергаются физиологическим изменениям, которые затрудняют фокусировку на близко расположенных объектах. Это является причиной того, что почти всем людям, начиная с возраста 35-40 лет, требуются очки для чтения. Способность глаза менять оптическую силу, известная также как амплитуда аккомодации, значительно снижается с возрастом. Амплитуда аккомодации составляет 20 диоптрий у детей и молодежи, но она снижается до 10 диоптрий в возрасте 25 лет и до ≤1 диоптрии в возрасте 60 лет. Возрастная неспособность фокусироваться на близко расположенных объектах именуется пресбиопией (старческой дальнозоркостью). Пресбиопия будет развиваться у всех людей и им придется пользоваться корректирующими очками, если не будут найдены новые способы лечения.
Развитию пресбиопии способствуют многие факторы. В пресбиопию вовлечен жидкий слой в клетках волокон хрусталика, сформированный аквапорином-0 при аккомодации (смотрите фиг.1). Как видно из диаграммы, при сокращении цилиарной мышцы (теория аккомодации Гельмгольца), снимается напряжение на цилиарных связках, и потенциальная энергия, накопленная в мембране хрусталика, высвобождается и создает динамическое усилие в экваториальной плоскости хрусталика. Как показано при анализе хрусталика по методике конечных элементов, это усилие возникает вблизи от участков крепления хрусталика в экваториальном положении относительно хрусталика. Хрусталик состоит из вытянутых клеток волокна, причем «новые» клетки образуются на поверхности. Эти клетки волокон формируют микрожидкостный путь, который напоминает «трубки». Они способствуют сохранению способности хрусталика к аккомодации. Нефункциональные «старые» клетки волокон замещаются новыми по направлению от периферии к центру хрусталика. Это обеспечивает эффективное средство перемещения внешней жидкости из «жидкостной ячейки» при снятии зонального напряжения, по направлению к центру (центральной оптической оси) хрусталика для увеличения геометрической кривизны (оптической силы). Это перемещение жидкости облегчается особым явлением, аналогичным описанному для тока крови через микрокапилляры (<10 мкм). Вокруг периферии кровеносных сосудов формируется тонкий слой плазмы (явление, описанное Фареусом и Линдквистом). Это снижает кажущуюся или измеренную эффективную вязкость гематокрита и улучшает кровоток при понижении противодавления.
В клетках волокон хрусталика (также имеющих диаметр около 10 мкм), по-видимому наблюдается аналогичное явление. Широко распространенный аквапорин-0, выстилающий клеточную стенку/мембрану клеток волокон хрусталика, обеспечивает поток воды из клеток при аккомодации для фокусировки на близком расстоянии. Растворенные микронутриенты (включая фармацевтические лекарственные средства) поступают к хрусталику через те же самые внутритканевые водные каналы. Кроме того, часть присущих им неописанных функций способствует увеличению амплитуды аккомодации, для чего требуется упомянутое выше перемещение жидкости ведущее к изменению геометрии хрусталика. Слой воды, сформировавшийся вдоль межклеточной мембраны клеток волокон, уменьшает импеданс или сопротивление и обеспечивает «смазку» белку цитозоля внутреннего ядра; явление, которому ранее не придавали значения. Хотя белковое ядро (находящееся во внутренней части клеток волокон хрусталика) может иметь более высокую собственную вязкость, «фактор смазки» или микрослой (<1 нм), сформированный между ядром и внутренней мембраной, значительно снижает фактически проявляющуюся вязкость (как и кажущуюся вязкость гематокрита крови). Это позволяет цитозолю хрусталика двигаться к центральной зрительной оси, в которой локализовано ограниченное зональное усилие, направленное на увеличение оптической силы.
Утрата этого водного слоя означает, что для перемещения жидкости из экваториальной плоскости в оптический путь (для повышения геометрической кривизны-оптической силы) потребуется большее усилие. Аналогично, если структура и функция аквапорина-0 нарушена за счет образования дисульфидных связей с белком ядра в результате возрастного окислительного стресса, этот функциональный слой нарушается и становится неработоспособным.
КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы изобретения обнаружили, что холиновый эфир липоевой кислоты («LACE») (смотрите, например, патент США №8 410 462) способен восстанавливать этот важный жидкий слой, ответственный за движение жидкости, восстанавливать ближнее зрение и уменьшить модуль цитозоля ядра хрусталика, на который влияет образование поперечных дисульфидных связей. Таким образом, составы LACE подходят для лечения глазных заболеваний или расстройств (например, пресбиопии), в при которых утрачен граничный жидкий слой или проблемой стало образование дисульфидных связей.
В различных вариантах осуществления, изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество холинового эфира липоевой кислоты или его производного и неводный эксципиент. В некоторых вариантах осуществления, терапевтически эффективное количество холинового эфира липоевой кислоты и неводный эксципиент смешаны с водным раствором, имеющим pH от 4 до 8 (например, 4,0, 4,2, 4,4, 4,6, 4,8, 5,0, 5,2, 5,4, 5,6, 5,8, 6,0, 6,2, 6,4, 6,6, 6,8, 7,0, 7,2, 7,4, 7,6, 7,8, 8,0 или находящемся в любом диапазоне, ограниченном указанными числовыми значениями). В некоторых вариантах осуществления, водный раствор включает буферный агент. В некоторых вариантах осуществления композиция не содержит буферного агента.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция включает терапевтически эффективное количество холинового эфира липоевой кислоты и неводный эксципиент, смешанные с водным раствором, имеющим pH от 4 до 6, где в фармацевтической композиции по данным ВЭЖХ присутствует как минимум 95% холинового эфира липоевой кислоты после хранения при 25°C и относительной влажности 40% в течение 3 месяцев. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция отличается тем, что разрушается менее 2% имеющегося в композиции холинового эфира липоевой кислоты, после хранения при 25°C и относительной влажности 40% в течение трех месяцев. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция отличается тем, что она содержит в общей сложности менее 12% примесей, связанных с действующим веществом, исходя из площадей под кривой по данным ВЭЖХ, после хранения при 25°C и относительной влажности 40% в течение 3 месяцев. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция отличается тем, что она содержит менее 7% примесей, связанных с действующим веществом, исходя из площадей под кривой по данным ВЭЖХ, после хранения при 25°C и относительной влажности 40% в течение 3 месяцев, где примеси, связанные с действующим веществом, характеризуются относительным временем удерживания от 1,12 до 1,14. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция отличается тем, что она содержит 4% примесей, связанных с действующим веществом, исходя из площадей под кривой по данным ВЭЖХ, после хранения при 25°C и относительной влажности 40% в течение 3 месяцев, где примеси, связанные с действующим веществом, характеризуются относительным временем удерживания от 0,65 до 0,66.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция характеризуется одной или несколькими из следующих особенностей:
(a) концентрация холинового эфира липоевой кислоты составляет от 1 до 10 масс.% от массы композиции;
(b) концентрация консерванта составляет от 0,005% до 0,1 масс.% от массы композиции;
(c) содержание биохимического источника энергии составляет от 0,1 до 5 масс.% от массы композиции; и
(d) концентрация глицерина составляет от 0,5 до 5 масс.% от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, консервант представляет собой бензалкония хлорид, и биохимическим источником энергии является аланин. В некоторых вариантах осуществления, холиновый эфир липоевой кислоты имеет противоион, выбранный из группы, состоящей из хлорида, бромида, йодида, сульфата, метансульфоната, нитрата, малеата, ацетата, цитрата, фумарата, гидрофумарата, тартрата (например, (+)-тартрата, (-)-тартрата или их смеси), сукцината, бензоата, а также анионов аминокислот, например, глутаминовой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическую композицию получают путем смешивания терапевтически эффективного количества холинового эфира липоевой кислоты и неводного эксципиента, последовательно или одновременно осуществляя смешивание с водным раствором. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическую композицию получают, во-первых, смешиванием терапевтически эффективного количества холинового эфира липоевой кислоты с неводным эксципиентом с образованием неводной композиции, и затем смешиванием этой неводной композиции с водным раствором. В некоторых вариантах осуществления, упомянутая неводная композиция может являться раствором, эмульсией или суспензией, которая образуется при смешивании холинового эфира липоевой кислоты и неводного эксципиента. Смешивание можно проводить при нагревании в течение продолжительного периода времени. Фармацевтическая композиция, полученная любым из описанных способов может иметь срок хранения не менее 3 месяцев (например, 3 месяца, 6 месяцев, 9 месяцев, 1 год или более 1 года).
В некоторых вариантах осуществления, изобретение относится к неводной композиции, включающей холиновый эфир липоевой кислоты или его производное и неводный эксципиент. В некоторых вариантах осуществления, этот неводный эксципиент способен в основном смешиваться в водой. В некоторых вариантах осуществления, неводный эксципиент представляет собой не гидролизующий растворитель. В некоторых вариантах осуществления, неводный эксципиент является спиртом. В некоторых вариантах осуществления, спирт является полиолом, например, глицерином или пропиленгликолем. В некоторых вариантах осуществления, неводный эксципипент представляет собой частично фторированный алкан.
В некоторых вариантах осуществления, неводная композиция включает неводный раствор, полученный путем смешивания холинового эфира липоевой кислоты с неводным эксципиентом. В некоторых вариантах осуществления, смешивание проводят при температуре от 20°C до 100°C. В некоторых вариантах осуществления, смешивание проводят при температуре от 37°C до 80°C.
В некоторых вариантах осуществления, концентрация холинового эфира липоевой кислоты или его производных в неводной композиции находится в пределах от 0,1 до 40 масс.%. В некоторых вариантах осуществления, холиновый эфир липоевой кислоты имеет противоион, выбранный из группы, состоящей из хлорида, бромида, йодида, сульфата, метансульфоната, нитрата, малеата, ацетата, цитрата, фумарата, гидрофумарата, тартрата (например, (+)-тартрата, (-)-тартрата или их смеси), сукцината, бензоата, а также анионов аминокислот, например, глутаминовой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления, изобретение относится к глазному составу, включающему неводную композицию, смешанную с водным раствором. В некоторых вариантах осуществления, этот водный раствор включает буфер. В некоторых вариантах осуществления, глазной состав имеет pH от 4 до 8. В некоторых вариантах осуществления, глазной состав имеет pH 4,5. В некоторых вариантах осуществления, глазной состав включает как минимум один ингредиент, выбранный из группы, состоящей из биохимически приемлемых источников энергии, консервантов, буферных агентов, регуляторов тоничности, ПАВ, модификаторов вязкости и антиоксидантов. В некоторых вариантах осуществления, неводную композицию подвергают стерилизации перед смешиванием с водным раствором. В некоторых вариантах осуществления, водный раствор является стерилизованным раствором.
В некоторых вариантах осуществления, глазной состав характеризуется одной или несколькими из следующих особенностей:
(a) концентрация холинового эфира липоевой кислоты или его производного составляет от 1 до 10 масс.% от массы состава;
(b) концентрация консерванта составляет от 0,005 до 0,1 масс.% от массы состава;
(c) значение pH находится в диапазоне от 4 до 6;
(d) содержание биохимического источника энергии составляет от 0,1 до 5 масс.% от массы состава;
(e) концентрация глицерина составляет от 0,5% до 5% от массы состава; и
(f) срок хранения превышает 3 месяца. В некоторых вариантах осуществления, консервант представляет собой бензалкония хлорид, и биохимический источник энергии представляет собой аланин.
В некоторых вариантах осуществления, изобретение относится также к системе или способу долговременного хранения фармацевтической композиции, который заключается в хранении неводной композиции отдельно от водного раствора, например, в устройстве с двумя отсеками (например, описанном в настоящей заявке) или в виде набора. Сохраняемую отдельно неводную композицию можно затем смешать с водным раствором перед применением.
В некоторых вариантах осуществления, указанная система включает первый отсек, второй отсек и непроницаемую перегородку, разделяющую первый и второй отсеки, где первый отсек содержит неводную композицию, состоящую из действующего ингредиента и неводного эксципиента, второй отсек содержит водный раствор, и где систему активируют разрушением перегородки и смешиванием неводного раствора с водным раствором. В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент представляет собой холиновый эфир липоевой кислоты или его производное, и неводный эксципиент представляет собой офтальмологически приемлемый эксципиент. В некоторых вариантах осуществления, водный раствор включает буфер. В некоторых вариантах осуществления, как неводная композиция, так и водный раствор являются стерилизованными. В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент в системе сохраняет устойчивость при хранении более 3 месяцев. В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент в системе сохраняет устойчивость при хранении более 6 месяцев. В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент в системе после активации сохраняет устойчивость при хранении более 3 месяцев.
В некоторых вариантах осуществления, изобретение относится к способу хранения действующего ингредиента, который чувствителен к гидролизу в водном растворе, где указанный способ включает (a) помещение действующего ингредиента в первый отсек; (b) помещение водного раствора во второй отсек; и (c) разделение первого и второго отсека непроницаемой перегородкой, где действующий ингредиент в первом отсеке не находится в контакте с водным раствором до момента применения, когда осуществляется разрушение перегородки. В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент в первом отсеке представляет собой лиофилизированный порошок или смешан с не гидролизующим растворителем. В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент представляет собой холиновый эфир липоевой кислоты или его производное, или пептид.
В некоторых вариантах осуществления, изобретение также относится к способу лечения или профилактики пресбиопии у субъекта, которому это необходимо, где указанный способ включает введение в хрусталик или глаз субъекта эффективного количества любой из фармацевтических композиций по настоящему изобретению.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА/ЧЕРТЕЖЕЙ
На Фиг.1 показано формирование аквапорином-0 жидкого слоя в клетках волокон хрусталика при аккомодации.
На Фиг.2A показано распределение метаболитов холинового эфира в глазах кролика после введения в глаза кролика 1 капли 3% состава холинового эфира липоевой кислоты в течение 45 минут. Фиг.2B представляет собой схематическое изображение метаболизма и выведения холинового эфира липоевой кислоты.
На Фиг.3 показано сравнение доставки липоевой кислоты после введения состава липоевой кислоты и состава холинового эфира липоевой кислоты.
На Фиг.4 показана конструкция бутыли для глазных капель с двумя отсеками со вставкой, которая может применяться для длительного хранения составов холинового эфира липоевой кислоты.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Определения
Если не указано конкретно, и в явном виде не следует из контекста, предполагается, что приведенные в настоящем описании числовые значения находятся в пределах нормальной погрешности, принятой в технике, например, в пределах 10% от указанного значения.
В настоящем описании имеется в виду, что термины «EV06», «LACE» или «холиновый эфир липоевой кислоты» означают следующую химическую структуру
ее оптический изомер или их смесь. Противоион (т.е. Z-) LACE может быть любым фармацевтически приемлемым анионом. Неограничивающие примеры противоионов включают хлорид, бромид, йодид, сульфат, метансульфонат, нитрат, малеат, ацетат, цитрат, фумарат, гидрофумарат, тартрат (например, (+)-тартрат, (-)-тартрат или их смесь), сукцинат, бензоат, а также анионы аминокислот, например, глутаминовой кислоты. В некоторых вариантах осуществления, противоион представляет собой хлорид. В некоторых вариантах осуществления, противоион является тартратом.
В настоящем описании, наименование «DioptinTM» относится к составам холинового эфира липоевой кислоты. Например, «3% состав DioptinTM» относится к составу, содержащему 3 масс.% холинового эфира липоевой кислоты от массы состава.
В настоящем описании под «производным» холинового эфира липоевой кислоты понимается любое соединение или смесь соединений, исключая липоевую кислоту и холин, образующиеся при взаимодействии холинового эфира липоевой кислоты с неводным фармацевтическим эксципиентом. В некоторых вариантах осуществления, производное является продуктом, образовавшимся при взаимодействии холинового эфира липоевой кислоты с пропиленгликолем. В некоторых вариантах осуществления, производное является продуктом, образовавшимся при взаимодействии холинового эфира липоевой кислоты с глицерином.
Если не указано конкретно, и из контекста явно не следует иное, в настоящем описании термин «эксципиент» относится к фармацевтически приемлемому эксципиенту.
Открытые термины, такие как «включать», «включающий», «содержать», «содержащий» и т.п. означают «включающий».
Термин «лечение» относится к назначению терапии в количестве, пути или форме введения, эффективной для улучшения состояния, симптома или параметра, связанного с заболеванием или расстройством.
Термины «предупреждение», «предотвращение», «профилактика» относятся к предотвращению расстройства у пациента, действиям, которые позволяют пациенту избегать расстройства в течение более продолжительного времени или к остановке прогрессирования заболевания, в любой статистически достоверной степени или в степени, обнаружимой для специалиста в данной области техники.
Термин «терапевтически эффективное количество» относится к такому количеству действующего ингредиента (например, LACE или его производного), которое приводит к предотвращению или отсрочке начала, или облегчению симптомов заболевания или расстройства глаз (например, пресбиопии) у субъекта, или достижению желаемого биологического результата, например, улучшения амплитуды аккомодации или другого желаемого параметра, показывающего степень развития заболевания. Способы определения терапевтически эффективного количества при лечении глазных заболеваний известны и описаны, например, в патенте США № 8 410 162, содержание которого в полном объеме включено в настоящую заявку посредством ссылки. Например, терапевтически эффективное количество для лечения или профилактики пресбиопии можно определить путем измерения клинических параметров, включая, но не ограничиваясь этим, эластичность, жесткость, вязкость, плотность или непрозрачность хрусталика.
В настоящем описании термин «стабильность при хранении», «стабильный при хранении», «срок хранения» понимаются, как свойство или характеристика композиции или действующего ингредиента (например, LACE или его производного), которые остаются практически неизменными при хранении при 25°C и относительной влажности (RH) 40% в течение определенного периода времени (например, 3 месяцев). Способы определения срока хранения известны, например, срок хранения можно определить с помощью ВЭЖХ, измеряя процентную долю композиции или действующего ингредиента (например, холинового эфира липоевой кислоты) в составе, которая осталась неизменной или подверглась разрушению после хранения состава в течение определенного периода времени. Например, фармацевтическая композиция может считаться стабильной при хранении, если после хранения при 25°C и RH 40% в течение 3 месяцев в композиции по данным ВЭЖХ сохранилось не менее 90% (например, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или более 99%) действующего ингредиента (например, холинового эфира липоевой кислоты). Фармацевтическая композиция может также считаться стабильной, если после хранения при 25°C и RH 40% в течение 3 месяцев наблюдалось разрушение 5% или менее (например, менее 4%, менее 3%, менее 2%, менее 1% или менее 0,5%) действующего ингредиента (например, холинового эфира липоевой кислоты) по данным ВЭЖХ.
В настоящей заявке, «относительное время удерживания» или «RRT» соединения можно вычислить согласно уравнению RRT=(t2-t0)/(t1-t0), где t0=время выхода неудерживаемого компонента, t1=время удерживания холинового эфира липоевой кислоты и t2=время удерживания соединения.
Термин «субъект» в настоящей заявке главным образом относится к животным (например, домашним любимцам) или людям, включая здоровых людей или пациентов с определенными заболеваниями или расстройствами (например, с пресбиопией).
Составы LACE
В различных вариантах осуществления, изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество холинового эфира липоевой кислоты или его производных. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция включает лиофилизированный порошок, содержащий терапевтически эффективное количество холинового эфира липоевой кислоты или его производного. В некоторых вариантах осуществления, лиофилизированный порошок включает также неводный эксципиент. В некоторых вариантах осуществления, лиофилизированный порошок получают лиофилизацией любой из фармацевтических композиций, описанных в настоящей заявке.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция включает терапевтически эффективное количество холинового эфира липоевой кислоты или его производных, и неводный эксципиент. В некоторых вариантах осуществления, терапевтически эффективное количество холинового эфира липоевой кислоты и неводный эксципиент смешивают с водным раствором, имеющим pH от 4 до 8 (например, 4,0, 4,2, 4,4, 4,6, 4,8, 5,0, 5,2, 5,4, 5,6, 5,8, 6,0, 6,2, 6,4, 6,6, 6,8, 7,0, 7,2, 7,4, 7,6, 7,8, 8,0 или находящемся в любом диапазоне, ограниченном указанными числовыми значениями). В некоторых вариантах осуществления, водная композиция включает буферный агент. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция не содержит буферного агента. В некоторых вариантах осуществления, водный раствор практически свободен от кислорода.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическую композицию получают смешиванием терапевтически эффективного количества холинового эфира липоевой кислоты и неводного эксципиента последовательно или одновременно со смешиванием с водным раствором. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическую композицию получают, во-первых, смешиванием терапевтически эффективного количества холинового эфира липоевой кислоты с неводным эксципиентом, с образованием неводной композиции, и затем смешиванием этой неводной композиции с водным раствором.
Фармацевтическая композиция, полученная любым из способов может иметь срок хранения не менее 3 месяцев (например, 3 месяца, 6 месяцев, 9 месяцев, 1 год или более 1 года). В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция после хранения при 25°C и RH 40% в течение 3 месяцев содержит не менее 90% (например, не менее 91%, не менее 92%, не менее 93%, не менее 94%, не менее 95%, не менее 96%, не менее 97%, не менее 98%, не менее 99% или более 99%) холинового эфира липоевой кислоты или его производных по данным ВЭЖХ. В некоторых вариантах осуществления, после хранения фармацевтической композиции при 25°C и RH 40% в течение 3 месяцев происходит разрушение 5% или менее (например, менее 4%, менее 3%, менее 2%, менее 1% или менее 0,5%) холинового эфира липоевой кислоты или его производного по данным ВЭЖХ.
Фармацевтическая композиция может также иметь благоприятный профиль продуктов разрушения, связанных с действующим веществом (например, общее содержание примесей, связанных с действующим веществом, или количество конкретных примесей, связанных с действующим веществом) после хранения при 25°C и RH 40% в течение определенного периода времени. Известны способы анализа (например, ВЭЖХ) для измерения количества продуктов разрушения, связанных с действующим веществом, присутствующих в составе. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция характеризуется присутствием в общей сложности 12% или менее (например, менее 10%, менее 8%, менее 6%, менее 4%, менее 2% или менее 1%) примесей, связанных с действующим веществом, исходя из данных по площадям под кривой, полученных способом ВЭЖХ, после хранения при 25°C и RH 40% в течение 3 месяцев. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция характеризуется присутствием 7% или менее (например, менее 6%, менее 5%, менее 4%, менее 3%, менее 2% или менее 1%) примесей, связанных с действующим веществом, исходя из данных по площадям под кривой, полученных способом ВЭЖХ, после хранения при 25°C и RH 40% в течение 3 месяцев, где примеси, связанные с действующим веществом, характеризуются относительным временем удерживания от 1,12 до 1,14. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция характеризуется присутствием 4% или менее (например, менее 3%, менее 2% или менее 1%) примесей, связанных с действующим веществом, исходя из данных по площадям под кривой, полученных способом ВЭЖХ, после хранения при 25°C и RH 40% в течение 3 месяцев, где примеси, связанные с действующим веществом, характеризуются относительным временем удерживания от 0,65 до 0,66.
Концентрация холинового эфира липоевой кислоты или его производных в фармацевтической композиции может принимать любое значение от 1 до 10 масс.% (например, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10% или находиться в любом диапазоне, основанном на указанных числовых значениях) от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, концентрация холинового эфира липоевой кислоты в фармацевтической композиции составляет 1%. В некоторых вариантах осуществления, концентрация холинового эфира липоевой кислоты в фармацевтической композиции составляет 3%. В некоторых вариантах осуществления, концентрация холинового эфира липоевой кислоты в фармацевтической композиции составляет 4%.
Неводный эксципиент может являться офтальмологически приемлемым эксципиентом. В некоторых вариантах осуществления, этот неводный эксципиент является не гидролизующим. В некоторых вариантах осуществления, неводный эксципиент в значительной степени способен смешиваться с водой. В некоторых вариантах осуществления, неводный эксципиент при смешивании с водой образует эмульсию. В некоторых вариантах осуществления, неводный эксципиент является ионной жидкостью (например, глицерин-холин).
В некоторых вариантах осуществления, неводный эксципиент, который в значительной степени способен смешиваться с водой, представляет собой спирт (например, этанол, сорбит, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, глицерин или их смесь). В некоторых вариантах осуществления, спирт является полиолом (например, пропиленгликолем, глицерином, этиленгликолем, диэтиленгликолем, эритритом, лактитом, мальтитом, маннитом, сорбитом, ксилитом, пентаэритритом или сахарозой). В некоторых вариантах осуществления, полиол является глицерином. В некоторых вариантах осуществления, полиол является пропиленгликолем.
В некоторых вариантах осуществления, неводный эксципиент представляет собой частично фторированный алкан. В технике известны частично фторованные алканы, которые описаны, например, в опубликованной Заявке на Патент США 2013/0046014, содержание которой в полном объеме включено в настоящую заявку посредством ссылки. Частично фторированные алканы представляют собой линейные или разветвленные алканы, в которых некоторые из атомов водорода замещены атомами фтора. В некоторых вариантах осуществления, частично фторированные алканы состоят из как минимум одного нефторированного углеводородного сегмента и как минимум одного полностью фторированного (перфторированного) углеводородного сегмента. В некоторых вариантах осуществления, частично фторированные алканы включают один не фторированный углеводородный сегмент, присоединенный к одному перфторированному углеводородному сегменту, в соответствии с общей формулой F(CF2)n(CH2)mH, или два перфторированных углеводородных сегмента, разделенных одним не фторированным углеводородным сегментом в соответствии с общей формулой F(CF2)n(CH2)m(CF2)oF, где коэффициенты n, m и o независимо выбраны в диапазоне от 3 до 20.
Концентрация упомянутого неводного эксципиента (например, глицерина) в фармацевтической композиции может составлять от 0,1% до 10 масс.% (например, 0,1%, 0,2%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10% или находиться в любом диапазоне, основанном на указанных числовых значениях) от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, неводный эксципиент представляет собой глицерин, и концентрация глицерина находится в диапазоне от 0,1% до 5 масс.% (например, 0,1%, 0,2%, 0,5%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3%, 3,5%, 4%, 4,5%, 5% или в любом диапазоне, основанном на указанных числовых значениях) от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, концентрация глицерина составляет 0,1%, 0,4%, 1,3% или 2,7 масс.% от массы композиции.
Фармацевтическая композиция может также содержать другие подходящие ингредиенты. Неограничивающие примеры таких подходящих ингредиентов включают один или несколько ингредиентов, выбранных из группы, состоящей из биохимически приемлемого источника энергии, консерванта, буферного агента, регулятора тоничности, ПАВ, модификатора вязкости и антиоксиданта.
Подходящий биохимически приемлемый источник энергии может являться любым источником, известным в технике. Например, биохимически приемлемый источник энергии может быть любым источником, который может способствовать восстановлению, принимая участие в качестве интермедиата в метаболических путях, связанных с выработкой энергии, в т.ч. метаболических путях глюкозы. Неограничивающие примеры подходящего биохимически приемлемого источника энергии включают аминокислоты или их производные (например, аланин, глицин, валин, лейцин, изолейцин, 2-оксоглутарат, глутамат, глутамин и т.д.), сахара или их метаболиты (например, глюкозу, глюкоза-6-фосфат (G6P), пируват (например, этилпируват), лактозу, лактат или их производные), липиды (например, жирные кислоты или их производные, такие как моно-, ди- и триглицериды и фосфолипиды), и другие продукты (например, NADH). Подходящее количество биохимически приемлемого источника энергии может находиться в диапазоне от 0,01% до 5% (например, 0,05%, 0,1%, 0,2%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5% или в любом диапазоне, основанном на данных конкретных числовых значениях) от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, биохимический источник энергии представляет собой этилпируват. В некоторых вариантах осуществления, биохимический источник энергии представляет собой аланин. В некоторых вариантах осуществления, количество этилпирувата или аланина находится в диапазоне от 0,05% до 5% (например, 0,05%, 0,1%, 0,2%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5% или в любом диапазоне, основанном на указанных числовых значениях) от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, количество аланина составляет 0,5 масс.% от массы композиции. В любом из вариантов осуществления, описанных в заявке, биохимически приемлемый источник энергии входит в состав в количестве, которое является офтальмологически приемлемым.
Подходящий консервант может являться любым из консервантов, известных в технике. Неограничивающие примеры включают бензалкония хлорид (BAK), цетримоний, хлорбутанол, динатрия эдетат (EDTA), поликватерний-1 (Polyquad®), полигексаметилена бигуанид (PHMB), стабилизированный оксихлоридный комплекс (PURITE®), перборат натрия и SofZia®. Подходящее количество консерванта в фармацевтической композиции может находиться в диапазоне от 0,005% до 0,1% (например, 0,005%, 0,01%, 0,02%, 0,05%, 0,1% или в любом диапазоне, основанном на данных конкретных числовых значениях) от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, консервант представляет собой бензалкония хлорид. В некоторых вариантах осуществления, бензалкония хлорид присутствует в количестве от 0,005% до 0,1% (например, 0,005%, 0,01%, 0,02%, 0,05%, 0,1% или в любом диапазоне, основанном на данных конкретных числовых значениях) от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, бензалкония хлорид присутствует в количестве 0,01 масс.% от массы композиции. В любом из вариантов осуществления, описанных в данной заявке, консервант входит в состав в количестве, которое является офтальмологически приемлемым. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция не содержит консерванта. Хотя холиновый эфир липоевой кислоты или его производное и может действовать в качестве консерванта, в рамках настоящего изобретения его не относят к числу консервантов.
Подходящий буферный агент может являться любым буферным агентом, известным в технике, который позволяет достичь желаемого значения pH (например, указанного в тексте заявки) фармацевтической композиции. Неограничивающие примеры включают фосфатные буферы (например, моногидрат монозамещенного фосфата натрия, безводный дизамещенный фосфат натрия), ацетатный буфер, цитратный буфер, боратные буферы и HBSS (сбалансированный солевой раствор Хэнкса). Подходящее количество буферного агента можно легко вычислить, исходя из желаемого значения pH. В любом из вариантов осуществления, описанных в настоящей заявке, буферный агент присутствует в количестве, которое является офтальмологически приемлемым. Однако, в некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция не содержит буферного агента. В некоторых вариантах осуществления, значение pH водного раствора конечной фрамацевтической композиции регулируют добавлением кислоты (например, хлористоводородной кислоты) или основания (например, гидроксида натрия) до достижения желаемого диапазона pH (например, указанного в настоящей заявке). Хотя некоторые соединения, которые обычно не применяются в качестве буферных агентов, например, аланин, все-таки могут иметь свойства буферного агента; но в настоящей заявке их не относят к числу буферных агентов.
Подходящий регулятор тоничности может являться любым из регуляторов, известных в технике. Неограничивающие примеры включают хлорид натрия, хлорид калия, маннит, декстрозу, глицерин, пропиленгликоль и их смеси. Подходящее количество регулятора тоничности в фармацевтической композиции является таким количеством, которое позволяет достичь осмоляльности 200-460 мОсм (например 260-360 мОсм или 260-320 мОсм). В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция является изотонической композицией. В некоторых вариантах осуществления, количество регулятора тоничности (например, хлорида натрия) составляет от 0,1% до 5% (например, 0,1%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5% или находится в любом диапазоне, основанном на указанных числовых значениях) от массы композиции. В любом из вариантов осуществления, описанном в тексте заявки, регулятор тоничности присутствует в количестве, которое является фармацевтически приемлемым.
Подходящее ПАВ может быть любым ПАВ, известным в технике, в т.ч. ионным ПАВ и неионным ПАВ. Неограничивающие примеры ионных ПАВ включают лаурилсульфат аммония, лаурилсульфат натрия, лауретсульфат натрия, миретсульфат натрия, диоктилсульфосукцинат натрия, перфтороктансульфонат, перфторбутансульфонат, (линейный алкил)бензолсульфонаты, лауроилсаркозинат натрия, перфторнонаноат, перфтороктаноат, октенидина дигидрохлорид, цетилтриметиламмония бромид, цетилтриметиламмония хлорид, цетилпиридиния хлорид (CPC), бензалкония хлорид (BAC), бензетония хлорид (BZT), диметилдиоктадециламмония хлорид, цетримония бромид, диоктадецилдиметиламмония бромид, сультаины (например, кокоамидопропил гидроксисультаин), фосфаты (например, лецитин) и бетаины (например, кокоамидопропил бетаин).
Неограничивающие примеры подходящих неионных ПАВ включают эфиры полиоксиэтилена и жирных кислот (например, полисорбат 80 [поли(оксиэтилен)сорбитана моноолеат], полисорбат 60 [поли(оксиэтилен)сорбитана моностеарат], полисорбат 40 [поли(оксиэтилен)сорбитана монопальмитат], поли(оксиэтилен)сорбитана монолаурат, поли(оксиэтилен)сорбитана триолеат или полисорбат 65 [поли(оксиэтилен)сорбитана тристеарат]), полиоксиэтилен гидрированные касторовые масла (например, полиоксиэтилен гидрированное касторовое масло 10, полиоксиэтилен гидрированное касторовое масло 40, полиоксиэтилен гидрированное касторовое масло 50 или полиоксиэтилен гидрированное касторовое масло 60), полиоксиэтилен полиоксипропилен гликоли (например, полиоксиэтилен (160) полиоксипропилен (30) гликоль [Pluronic F681], полиоксиэтилен (42) полиоксипропилен (67) гликоль [Pluronic P123], полиоксиэтилен (54) полиоксипропилен (39) гликоль [Pluronic P85], полиоксиэтилен (196) полиоксипропилен (67) гликоль [Pluronic F1271] или полиоксиэтилен (20) полиоксипропилен (20) гликоль [Pluronic L-441], полиоксил 40 стеарат, эфиры сахарозы и жирных кислот, а также их комбинации. В некоторых вариантах осуществления, ПАВ представляет собой полисорбат 80. Подходящее количество ПАВ в фармацевтической композиции может находиться в диапазоне от 0,01% до 5% (например, 0,05%, 0,1%, 0,2%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5% или в любом диапазоне основанном на указанных числовых значениях) от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, ПАВ представляет собой полисорбат 80, и количество полисорбата 80 находится в диапазоне от 0,05% до 5% (например, 0,05%, 0,1%, 0,2%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5% или в любом диапазоне основанном на указанных числовых значениях) от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, количество полисорбата 80 составляет 0,5 масс.% от массы композиции. В любом из описанных в заявке вариантов осуществления, ПАВ присутствует в количестве, которое является офтальмологически приемлемым. Однако, в некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция свободна от ПАВ. Несмотря на то, что холиновый эфир липоевой кислоты или его производное может действовать в качестве ПАВ, в рамках настоящего изобретения он не рассматривается в качестве ПАВ.
Подходящий модификатор вязкости может являться любым из модификаторов, известных в технике. Неограничивающие примеры включают гели карбопола, целлюлозные модификаторы (например, гидроксипропилметилцеллюлозу), поликарбофил, поливиниловый спирт, декстран, желатин глицерин, полиэтиленгликоль, полоксамер 407, поливиниловый спирт и поливинилпирролидон, а также их смеси. Подходящее количество модификатора вязкости может находиться в диапазоне от 0,1% до 5% (например, 0,1%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5% или в любом диапазоне, основанном на указанных числовых значениях) от массы композиции. В любом из описанных в заявке вариантов осуществления, модификатор вязкости присутствует в количестве, которое является офтальмологически приемлемым. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция не содержит модификатора вязкости (например, полимерного модификатора вязкости, такого как гидроксипропилметилцеллюлоза).
Подходящий антиоксидант может являться любым из антиоксидантов, известных в технике. В некоторых вариантах осуществления, окислительно-восстановительный потенциал антиоксиданта составляет менее 0,5 мВ (например, менее 0,4 мВ, менее 0,3 мВ, менее 0,2 мВ или менее 0,1 мВ). В некоторых вариантах осуществления, окислительно-восстановительный потенциал антиоксиданта составляет менее 0,28 мВ, т.е. окислительно-восстановительного потенциала дигидролипоевой кислоты (DHLA). Неограничивающие примеры включают аскорбиновую кислоту, стеарат L-аскорбиновой кислоты, альфа-тиоглицерин, этилендиаминтетрауксусную кислоту, эритробиновую (изоаскорбиновую) кислоту, цистеина гидрохлорид, N-ацетилцистеин, L-карнитин, лимонную кислоту, токоферола ацетат, калия дихлоризоцианурат, дибутилгидрокситолуол, 2,6-ди-т-бутил-4-метилфенол, соевый лецитин, натрия тиогликолят, натрия тиомалат, природный витамин E, токоферол, аскорбилпальмитат, натрия пиросульфит, бутилгидроксианизол, 1,3-бутиленгликоль, пентаэритрил тетракис[3-(3,5-ди-т-бутил-4-гидроксифенил)] пропионат, пропилгаллат, 2-меркаптобензимидазол и оксихинолина сульфат. Подходящее количество антиоксиданта может находиться в диапазоне от 0,1% до 5% (например, 0,1%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5% или в любом диапазоне, основанном на указанных числовых значениях) от массы композиции. В любом из описанных в заявке вариантов осуществления, антиоксидант присутствует в количестве, которое является офтальмологически приемлемым.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция характеризуется одной или несколькими из следующих особенностей:
(a) концентрация холинового эфира липоевой кислоты составляет от 1 до 10 масс.% (например, 1%, 1,5%, 3%, 4%, 5% или находится в любом диапазоне между указанными числовыми значениями) от массы композиции;
(b) концентрация консерванта (например, бензалкония хлорида) составляет от 0,005% до 0,1 масс.% (например, 0,01%) от массы композиции;
(c) содержание биохимического источника энергии (например, аланина) составляет от 0,1 до 5 масс.% (например, 0,5%) от массы композиции; и
(d) концентрация глицерина составляет от 0,5 до 5 масс.% (например, 2,7 масс.%) от массы композиции.
В некоторых вариантах осуществления, у холинового эфира липоевой кислоты в фармацевтической композиции имеется противоион, выбранный из группы, состоящей из хлорида, бромида, йодида, сульфата, метансульфоната, нитрата, малеата, ацетата, цитрата, фумарата, гидрофумарата, тартрата (например, (+)-тартрата, (-)-тартрата или их смеси), сукцината, бензоата, а также анионов аминокислот, например, глутаминовой кислоты. В некоторых вариантах осуществления, противоион представляет собой хлорид.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция содержит неводный эксципиент, который представляет собой глицерин, в концентрации 2,7 масс.% от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, концентрация глицерина составляет 3 масс.% от массы композиции.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция состоит в основном из 0,025 масс.% дигидрата динатрий эдетата, 1,3 масс.% глицерина, 0,5 масс.% аланина, 0,01 масс.% бензалкония хлорида, 1 масс.% холинового эфира липоевой кислоты и воды, где pH фармацевтической композиции составляет от 4,3 до 4,7.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция состоит в основном из 0,025 масс.% дигидрата динатрий эдетата, 0,4 масс.% глицерина, 0,5 масс.% аланина, 0,01 масс.% бензалкония хлорида, 3 масс.% холинового эфира липоевой кислоты и воды, где pH фармацевтической композиции составляет от 4,3 до 4,7.
В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция состоит в основном из 0,025 масс.% дигидрата динатрий эдетата, 0,1 масс.% глицерина, 0,5 масс.% аланина, 0,01 масс.% бензалкония хлорида, 4 масс.% холинового эфира липоевой кислоты и воды, где pH фармацевтической композиции составляет от 4,4 до 4,6.
Смешивание LACE с неводным эксципиентом
Как указано выше, фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно получать путем предварительного смешивания терапевтически эффективного количества холинового эфира липоевой кислоты с неводным эксципиентом с получением неводной композиции. Эту неводную композицию затем можно смешать с водным раствором, например, для получения глазного состава. В некоторых аспектах, изобретение относится также к системе или способу продолжительного хранения фармацевтической композиции, путем хранения неводной композиции отдельно от водного раствора, например, в устройстве с двумя отсеками (например, которое описано в тексте заявки) или в виде набора. Неводная композиция, которая хранилась отдельно, впоследствии перед применением может быть смешана с водным раствором с получением «активированного» состава.
Неводная композиция может представлять собой раствор, эмульсию или суспензию, полученную путем смешивания холинового эфира липоевой кислоты и неводного эксципиента. Смешивание можно проводить при нагревании в течение продолжительного периода времени. В некоторых вариантах осуществления, смешивание проводят при температуре от 20°C до 100°C (например, 20°C, 30°C, 40°C, 50°C, 60°C, 70°C, 80°C, 90°C, 100°C или находящейся в любых диапазонах, ограниченных указанными числовыми значениями) в течение периода от 1 часа до 24 часов (например, 1 часа, 2 часов, 4 часов, 6 часов, 8 часов, 10 часов, 12 часов, 14 часов, 16 часов, 18 часов, 20 часов, 22 часов, 24 часов или находящемся в любом диапазоне, ограниченном указанными числовыми значениями). В некоторых вариантах осуществления, смешивание проводят при температуре от 37°C до 80°C. В некоторых вариантах осуществления, смешивание проводят в течение 8 часов.
В некоторых вариантах осуществления, неводная композиция является раствором. В некоторых вариантах осуществления, этот раствор содержит холиновый эфир липоевой кислоты. В некоторых вариантах осуществления, раствор содержит производное холинового эфира липоевой кислоты (например, продукт реакции, образовавшийся из холинового эфира липоевой кислоты и неводного эксципиента (например, пропиленгликоля или глицерина)). Концентрация холинового эфира липоевой кислоты или его производного в растворе может достигать предела растворимости в неводном эксципиенте (например, пропиленгликоле или глицерине). В некоторых вариантах осуществления, концентрация холинового эфира липоевой кислоты или его производного находится в диапазоне от 0,1% до 40% (например, 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40% или в любых диапазонах, ограниченных указанными числовыми значениями) от массы композиции.
Смешивание неводной композиции с водным раствором
Описанную выше по тексту неводную композицию можно смешать с водным раствором, имеющим pH от 4 до 8 (например, 4,2, 4,4, 4,6, 4,8, 5,0, 5,2, 5,4, 5,6, 5,8, 6,0, 6,2, 6,4, 6,6, 6,8, 7,0, 7,2, 7,4, 7,6, 7,8, 8,0 или находящемся в любом диапазоне, ограниченном указанными числовыми значениями) для получения глазного состава. В некоторых вариантах осуществления, смешивание с неводной композицией не меняет в значительной степени pH водного раствора, т.е. глазной состав также имеет значение pH от 4 до 8. В некоторых вариантах осуществления, глазной состав имеет значение pH от 4 до 6 (например, 4,2, 4,4, 4,6, 4,8, 5,0, 5,2, 5,4, 5,6, 5,8, 6,0 или находящееся в любых диапазонах, ограниченных указанными числовыми значениями). В некоторых вариантах осуществления, глазной состав имеет значение pH от 4,2 до 4,7 (например, 4,5).
Глазной состав можно подвергнуть стерилизации. В некоторых вариантах осуществления, неводную композицию стерилизуют перед смешиванием с водным раствором. В некоторых вариантах осуществления, водный раствор также стерилизован. В некоторых вариантах осуществления, неводную композицию смешивают с водным раствором (например, стерилизованным водным раствором или не стерилизованным водным раствором) и затем стерилизуют.
Глазной состав может включать один или несколько ингредиентов, выбранных из группы, состоящей из биохимически приемлемого источника энергии, консерванта, буферного агента, регулятора тоничности, ПАВ, модификатора вязкости и антиоксиданта. Подходящими биохимически приемлемыми источниками энергии, консервантами, буферными агентами, регуляторами тоничности, ПАВ, модификаторами вязкости и антиоксидантами являются продукты, описанные в тексте настоящей заявки. В некоторых вариантах осуществления, один или несколько ингредиентов смешивают с водным раствором перед смешиванием с неводной композицией. В некоторых вариантах осуществления, один или несколько ингредиентов смешивают с неводной композицией перед смешиванием с водным раствором. Подходящие количества биохимически приемлемого источника энергии, консерванта, буферного агента, регулятора тоничности, ПАВ, модификатора вязкости и антиоксиданта также указаны в тексте настоящей заявки. Однако в любом из описанных в заявке вариантов осуществления глазной состав может также не содержать буферного агента, ПАВ, модификатора вязкости, консерванта или их комбинации.
В некоторых вариантах осуществления, глазной состав характеризуется одной или несколькими из следующих особенностей:
(a) концентрация холинового эфира липоевой кислоты или его производного составляет от 1 до 10 масс.% (например, 1%, 1,5%, 3%, 4%, 5% или находится в любом диапазоне между указанными числовыми значениями) от массы состава;
(b) концентрация консерванта (например, бензалкония хлорида) составляет от 0,005% до 0,1 масс.% (например, 0,01%) от массы состава;
(c) значение pH композиции находится в пределах от 4 до 6 (например, 4,2, 4,4, 4,6, 4,8, 5,0, 5,2, 5,4, 5,6, 5,8, 6,0 или в любом диапазоне между указанными числовыми значениями);
(d) содержание биохимического источника энергии (например, аланина) составляет от 0,1 до 5 масс.% (например, 0,5%) от массы состава;
(e) концентрация глицерина составляет от 0,5 до 5 масс.% (например, 2,7 масс.%) от массы состава; и
(f) срок хранения состава превышает 3 месяца (например, 3 месяца, 6 месяцев, 9 месяцев или 12 месяцев).
В некоторых вариантах осуществления, глазной состав содержит неводный эксципиент, который является глицерином, в концентрации 2,7 масс.% от массы композиции. В некоторых вариантах осуществления, концентрация глицерина составляет 3 масс.% от массы состава.
В некоторых вариантах осуществления, глазной состав состоит в основном из 0,025 масс.% дигидрата эдетата динатрия, 1,3 масс.% глицерина, 0,5 масс.% аланина, 0,01 масс.% бензалкония хлорида, 1 масс.% холинового эфира липоевой кислоты или его производных, а также воды, где pH глазного состава находится в пределах от 4,3 до 4,7.
В некоторых вариантах осуществления, глазной состав состоит в основном из 0,025 масс.% дигидрата эдетата динатрия, 0,4 масс.% глицерина, 0,5 масс.% аланина, 0,01 масс.% бензалкония хлорида, 3 масс.% холинового эфира липоевой кислоты или его производных, а также воды, где pH глазного состава находится в пределах от 4,3 до 4,7.
В некоторых вариантах осуществления, глазной состав состоит в основном из 0,025 масс.% дигидрата эдетата динатрия, 0,1 масс.% глицерина, 0,5 масс.% аланина, 0,01 масс.% бензалкония хлорида, 4 масс.% холинового эфира липоевой кислоты или его производных, а также воды, где pH глазного состава находится в пределах от 4,4 до 4,6.
Хранение состава LACE
Поскольку холиновый эфир липоевой кислоты может оказаться чувствительным к гидролизу и окислению, инициированному светом, в некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу хранения холинового эфира липоевой кислоты в неводной среде, бескислородной среде и/или при ослабленном действии света. В некоторых вариантах осуществления, холиновый эфир липоевой кислоты хранят в неводной среде. В некоторых вариантах осуществления, холиновый эфир липоевой кислоты хранят в неводной среде в виде лиофилизированного порошка. В некоторых вариантах осуществления, холиновый эфир липоевой кислоты хранят в неводной среде в виде неводной композиции (например, описанной в данной заявке). В некоторых вариантах осуществления, холиновый эфир липоевой кислоты хранят в неводной среде в непрозрачном контейнере. В некоторых вариантах осуществления, неводная среда практически свободна от кислорода.
В некоторых вариантах осуществления, холиновый эфир липоевой кислоты хранят в водной среде (например, после смешивания неводной композиции с водным раствором), где водная среда свободна от кислорода. В некоторых вариантах осуществления, холиновый эфир липоевой кислоты хранят в водной среде при ослабленном действии света (например, в непрозрачном контейнере).
В некоторых вариантах осуществления, изобретение относится также к системе для хранения фармацевтической композиции, включающей действующий ингредиент в водном растворе, где этот действующий ингредиент (например, холиновый эфир липоевой кислоты или его производное) чувствителен к гидролизу в водном растворе.
В некоторых вариантах осуществления, указанная система включает первый отсек, второй отсек и непроницаемую перегородку, разделяющую первый и второй отсеки, где первый отсек содержит неводную композицию, включающую действующий ингредиент (например, холиновый эфир липоевой кислоты или его производное), и второй отсек содержит водный раствор. В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент в первом отсеке находится в твердой форме (например, в форме порошка, например, лиофилизированного порошка). В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент в первом отсеке смешан с неводным эксципиентом (например, указанным в настоящей заявке). В некоторых вариантах осуществления систему активируют путем разрушения перегородки и смешивания неводного раствора с водным раствором.
Примером такой системы является модифицированная бутыль для глазных капель, показанная на Фиг.4. Бутыль для глазных капель включает две части, а именно часть 1 (включает первый отсек и перегородку, показанную под наименованием «вставка» на Фиг.4) и часть 2 (включает второй отсек) (смотрите Фиг.4), где отсеки отделены друг от друга вплоть до активации пациентом с образованием конечного состава при применении. В некоторых вариантах осуществления, часть 1 бутыли для глазных капель содержит любую из неводных композиций, описанных в настоящей заявке (например, холиновый эфир липоевой кислоты или его производное, смешанное с глицерином). В некоторых вариантах осуществления, часть 1 бутыли для глазных капель содержит неводную композицию, включающую действующий ингредиент (например, пептид), который чувствителен к гидролизу в водном растворе.
В некоторых вариантах осуществления, часть 1 бутыли для глазных капель содержит холиновый эфир липоевой кислоты или его производное в глицерине (например, 150 мг LACE/1,03 мкл глицерина). В некоторых вариантах осуществления, часть 2 бутыли для глазных капель содержит водный раствор (4,8 мл), включающий следующие эксципиенты: 0,01 масс.% бензалкония хлорида; 2,6 масс.% глицерина USP; и 0,5 масс.% аланина USP, где pH раствора составляет 4,5±0,2.
Вставка отделяет неводную композицию от части 2 вплоть до активации, что обеспечивает возможность долговременного хранения перед началом непродолжительного лечения глаз. В некоторых вариантах осуществления, вставка включает несъемный держатель основной вставки; внутреннюю трубку; и нижнюю перегородку, где внутренняя трубка предназначена для помещения неводной композиции и нижняя перегородка предназначена для предотвращения контакта неводной композиции с водным раствором. В некоторых вариантах осуществления, бутыль для глазных капель включает насадку-капельницу, которая плотно закрывает вставку. В некоторых вариантах осуществления, бутыль для глазных капель спроектирована таким образом, чтобы давления или нажатия на бутыль было достаточно, чтобы подвинуть вверх нижнюю перегородку, после чего через перфорации во внутренней трубке неводная композиция поступает в водный раствор.
В любом из описанных выше вариантов осуществления, неводная композиция, включающая действующий фармацевтический ингредиент (например, холиновый эфир липоевой кислоты или его производное), перед попаданием в водный раствор обладает устойчивостью при хранении не менее 3 месяцев (например, 6 месяцев, 9 месяцев, 12 месяцев, 2 года или более 2 лет). В некоторых вариантах осуществления, неводная композиция характеризуется присутствием 2% или менее (например, 1,5%, 1%, 0,5% или 0,2%) разрушенного действующего фармацевтического ингредиента. В некоторых вариантах осуществления, неводная композиция характеризуется наличием 10% или менее (например, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5% или 0,2%) разрушенного действующего фармацевтического ингредиента. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическая композиция, полученная при введении неводной композиции в водный раствор, устойчива при хранении в течение как минимум 3 месяцев (например, 6 месяцев, 9 месяцев или 12 месяцев).
В некоторых вариантах осуществления, изобретение относится также к способу хранения действующего ингредиента, который чувствителен к гидролизу в водном растворе, где указанный способ включает (a) помещение действующего ингредиента в первый отсек; (b) помещение водного раствора во второй отсек; и (c) разделение первого и второго отсеков, например, непроницаемой перегородкой, где действующий ингредиент в первом отсеке не вступает в контакт с водным раствором вплоть до применения, например, в результате разрушения перегородки. В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент в первом отсеке смешан с неводным эксципиентом (например, описанным в настоящей заявке). В некоторых вариантах осуществления, действующий ингредиент представляет собой холиновый эфир липоевой кислоты или его производное, или пептид. Подходящие конструкции первого отсека и второго отсека включают решения, описанные в тексте заявки.
Способы лечения
Фармацевтические композиции, включающие холиновый эфир липоевой кислоты или его производные (например, описанные в настоящей заявке), могут применяться в способе лечения или профилактики заболевания или расстройства, связанного с оксидативным поражением. В технике известны заболевания или расстройства, вызванные оксидативным поражением.
В некоторых вариантах осуществления, изобретение относится к способу лечения глазных заболеваний у субъекта, которому это необходимо, включающему введение в хрусталик или глаз субъекта терапевтически эффективного количества любой из фармацевтических композиций, описанных в настоящей заявке. В некоторых вариантах осуществления, глазные заболевания представляют собой пресбиопию, катаракту, дегенерацию желтого пятна (в т.ч. возрастную дегенерацию желтого пятна), ретинопатии (включая диабетическую ретинопатию), глаукому или воспаления глаз. В некоторых вариантах осуществления, глазное заболевание представляет собой пресбиопию.
Количество фармацевтической композиции, подходящее для способов лечения или профилактики глазных заболеваний по настоящему изобретению, может быть любым терапевтически эффективным количеством. В некоторых вариантах осуществления, способ включает введение в хрусталик или глаз субъекта такого количества фармацевтической композиции, которое эффективно для увеличения амплитуды аккомодации хрусталика как минимум на 0,1 диоптрии (D) (например, 0,1, 0,2, 0,5, 1, 1,2, 1,5, 1,8, 2, 2,5, 3 или 5 диоптрий). В некоторых вариантах осуществления, способ включает введение в хрусталик или глаз субъекта 1-5 капель (примерно по 40 мкл в каждой капле) фармацевтической композиции по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления, хрусталик или глаз субъекта подвергают действию фармацевтической композиции 1, 2, 3, 4, 5 или более 5 раз в день, каждый раз осуществляя введение 1-5 капель (примерно по 40 мкл в каждой капле). В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию вводят в хрусталик или глаз субъекта в количестве 1, 2, 3, 4, 5 или более 5 капель за одно введение. В некоторых вариантах осуществления, фармацевтическую композицию вводят в хрусталик или глаз субъекта два или три раза в день, каждый раз по 1 или 2 капли (примерно по 40 мкл в каждой капле).
Способы по настоящему изобретению включают способы профилактики, которые могут применяться к пациентам любого возраста. Способы по настоящему изобретению включают также способы лечения, которые могут применяться к пациентам любого возраста, в частности к пациентам, которые имеют возраст 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 52, 55, 52, 60, 70, 75 или 80 лет, или более.
Приведенные ниже по тексту примеры являются иллюстративными и не ограничивают объем вариантов осуществления, заявленных в формуле изобретения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Синтез хлорида LACE
Ниже описан двухстадийный синтез хлорида холинового эфира липоевой кислоты
R-липоевую кислоту(5 г, 24,3 ммоль), диметиламиноэтанол (2,37 г, 26,7 ммоль) и DMAP (0,9 г, 7,3 ммоль) суспендировали в MTBE (40 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и добавляли DIC (3,36 г, 26,7 ммоль) в MTBE (20 мл). После добавления, смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение минимум 12 часов. За ходом реакции следили с помощью ТСХ (5% MeOH/CH2Cl2). Реакционную смесь фильтровали, промывали MTBE и очищали флэш-хроматографией, получая желтое масло (3,3 г, 10,1 ммоль).
Полученный выше липоат (0,5 г, 1,8 ммоль) суспендировали в ацетоне (1,8 мл) и добавляли CH3Cl (1,8 мл, 1,0 в MTBE). Реакционную смесь нагревали в атмосфере азота при 50°C в плотно закрытой пробирке в течение ночи. ВЭЖХ продемонстрировала 95% превращение.
Пример 2: исследование стабильности составов LACE
Исследовали стабильность различных составов холинового эфира липоевой кислоты.
Оборудование
Системы ВЭЖХ, которые использовали при проведении ВЭЖХ-анализов, получали аттестацию IQ, OQ и PQ. Каждая из использованных систем состояла из модуля разделения Waters 2695 Separation Module и детектора поглощения Waters 2487 Dual λ Absorbance Detector.
В экспериментах использовалось следующее дополнительное оборудование:
весы Mettler AE163 Balance, E-000 902
весы Mettler AE200 Balance, E-000 903
весы Mettler PB3002 Balance, E-000 904
pH-метр Fisher ARSO Accumet pH Meter, E-000 726
осмометр Precision Systems 5004 J.-LOsmette Osmometer, E-000 705, E-000 800
система очистки воды Milipore A-10 Advantage Purified Water System, E-000 723.
Подготовка контейнеров
3 мл бутыли белого цвета:
3 куб.см. круглые цилиндрические бутыли из LDPE (полиэтилена низкой плотности); полимер: Dupont 20-6064; цвет: белый; PCC PEC 17030 (WX in Mix); Alcan Packaging: PN:20319-137 (BPN-000 688);
3 куб.см. круглые цилиндрические бутыли из LDPE; полимер: Chevron PE 5104; цвет: белый WX0200; Alcan Packaging: PN:20319-007 (BPN-000 441);
3 мл неокрашенные бутыли:
3 куб.см. круглые цилиндрические бутыли; полимер: LDPE Chevron Philips PE 5104; цвет: естественный; добавка: PCC Lube-ZnSt 110445 S068; Alcan Packaging: PN:20319-006 (BPN-000 653);
Наконечники:
8 мм регулируемая насадка-капельница 0,020 игла; неокрашенная; полимер: LLDPE Dow Dowlex 2517; Alcan Packaging, PN: 12208-0AA (BPN-000443);
8 мм регулируемая насадка-капельница 0,020 игла; неокрашенная; полимер: LDPE Dupont 20-6064; Alcan Packaging, PN: 12208-015 (BPN-000492B);
Колпачки:
08/425 колпачок на насадку-капельницу; полимер: PP Sunoco FT-120-W2; цвет: белый PCC C10054C; Alcan Packaging, PN: 15055-201 (BPN-000442).
Методики
pH измеряли, следуя указаниям USP/NF<791> и SOP-00273. Осмоляльность измеряли, следуя указаниям USP/NF<785> и SOP-00084.
В методике исследования хлорида LACE способом ВЭЖХ использовали колонку Phenomenex Luna CN с частицами размером 5 мкм и размером пор 100A, внутренним диаметром 2,0 мм и длиной 50 мм (PN:00B-4255-B0). Подвижная фаза состояла из 50% 0,1М ацетата натрия и 50% ацетонитрила. Скорость потока составляла 1,0 мл/мин, длина волны, на которой работал детектор, составляла 225 нм, температура колонки составляла 40°C, объем впрыска составлял 20 мкл и время хроматографирования равнялось 50 минутам. Рабочая концентрация хлорида LACE составляла 0,1 мг/мл и для анализа использовали пластмассовые флаконы для ВЭЖХ.
Для окончательного сравнения стабильности составов хлоридов LACE (BCL457-180, BCL471-189, BCL483-079, BCL483-165, BCL489-027) ошибочно использовали концентрацию 0,01М ацетата натрия в подвижной фазе. Это привело к образованию широких пиков LACE при более продолжительном времени удерживания, но, по-видимому, не повлияло на результаты. Стандарт LACE совпадал с LACE в образцах.
Составы BCL442-110 B-H
В таблице 1 подробно показаны ингредиенты глазных составов хлорида LACE с pH 5,5 и 7,0 (BCL442-110).
Таблица 1: глазные составы хлорида LACE в фосфатном буфере
| Компонент | BCL442-110B | BCL442-110C | BCL442-110D | BCL442-110F | BCL442-110G | BCL442-110H |
| Натрия фосфат одноосновный | 0,07% | 0,07% | 0,07% | 0,07% | 0,07% | 0,07% |
| Натрия фосфат двухосновный | 0,13% | 0,13% | 0,13% | 0,13% | 0,13% | 0,13% |
| Глицерин | 1,5% | 0,8% | 0% | 1,5% | 0,8% | 0% |
| Эдетат динатрия | 0,10% | 0,10% | 0,10% | 0,10% | 0,10% | 0,10% |
| Бензалкония хлорид | 0,01% | 0,01% | 0,01% | 0,01% | 0,01% | 0,01% |
| Аланин | 0,10% | 0,10% | 0,10% | 0,10% | 0,10% | 0,10% |
| хлорид LACE | 1,5% | 3,0% | 5,0% | 1,5% | 3,0% | 5,0% |
pH, осмоляльность, внешний вид и концентрацию хлорида LACE измеряли в растворах, содержащих хлорид LACE в концентрациях 1,5%, 3,0% и 5,0% при pH 5,5 или pH 7,0. Измерение содержания хлорида LACE проводили через 4 дня после приготовления. Исследование растворов показало, что хлорид LACE не продемонстрировал значительной стабильности при pH 7 в течение четырех дней, прошедших с момента приготовления до проведения анализа. Но растворы с pH 5,5 продемонстрировали повышение сохранности действующего вещества в процентах с 86% до 109%, и это показывает, что низкие значения pH приводят к большей стабильности составов хлорида LACE.
Составы BCL448-053 C и D
Компоненты глазных составов хлорида LACE в цитратном буфере (BCL448-053) приведены в таблице 2:
Таблица 2: глазные составы хлорида LACE в цитратном буфере
| Компонент | BCL448-053 C (DA-000 207) |
BCL448-053 В (DA-000 208) |
| Лимонная кислота | 0,50% | 0,50% |
| Глицерин | 0,75% | 0,40% |
| Эдетат динатрия, дигидрат | 0,10% | 0,10% |
| Бензалкония хлорид | 0,01% | 0,01% |
| Пропиленгликоль | 0,75% | 0,40% |
| Аланин | 0,10% | 0,10% |
| Хлорид LACE | 1,5% | 3,0% |
| Целевое значение pH | 5,5 | 5,5 |
Растворы исследовали в момент получения и после хранения при 5°C (естественная влажность), 25°C (40% RH), 40°C (не более (NMT) 25% RH) и 57°C (естественная влажность) в течение трех месяцев. Растворы исследовали для определения содержания хлорида LACE с целью определения стабильности LACE со временем. Раствор хлорида LACE с концентрацией 1,5%, который хранился при 5°C, оказался единственным раствором, который не продемонстрировал значительных изменений при сохранности LACE 97,0% после 3 месяцев хранения.
Составы BCL457-180 D и E
Ингредиенты глазных составов хлорида LACE, не содержащих буфера, а также содержащих или не содержащих полисорбат 80 (BCL457-180) показаны в таблице 3.
Таблица 3: глазные составы хлорида LACE, не содержащие буфера
| Компонент | BCL457-180 D (DA-000 294) |
BCL457-180 E (DA-000 295) |
| Глицерин | 2,0% | 2,0% |
| Эдетат динатрия, дигидрат | 0,025% | 0,025% |
| Бензалкония хлорид | 0,01% | 0,01% |
| Полисорбат 80 | 0,0% | 0,5% |
| Аланин | 0,5% | 0,5% |
| Хлорид холинового эфира липоевой кислоты | 1,0% | 1,0% |
Растворы подвергали исследованию сразу после получения и после хранения при 5°C (естественная влажность), 25°C (40% RH), 40°C (NMT 25% RH) и 57°C (естественная влажность) в течение трех месяцев.
Результаты показывают, что составы являются стабильными с точки зрения активности хлорида LACE в течение 3 месяцев при 5°C и 25°C/40% RH. При 40°C/NMT 25% RH растворы демонстрируют активность менее 90% от исходной после двух месяцев хранения. Не наблюдалось значимой разницы в стабильности между составами, содержащими и не содержащими полисорбат 80.
Пример 3: составы LACE с пропиленгликолем
Готовили раствор хлорида LACE в пропиленгликоле для определения его стабильности. Получали 1% раствор хлорида LACE в пропиленгликоле и хранили его при -20°C (естественной RH), 5°C (естественной RH) и 25°C (40% RH). Растворы исследовали на активность хлорида LACE после хранения в течение 3 месяцев.
Результаты показали, что хлорид LACE оказался нестабилен в пропиленгликоле при хранении в течение 3 месяцев при 5°C и 25°C. При исследовании этих образцов способом ВЭЖХ (с использованием методики, описанной в примере 2) был обнаружен пик с относительным временем удерживания (RRT) 0,73. Для раствора, который хранился при комнатной температуре, хлорид LACE полностью превратился в этот пик. Других пиков обнаружено не было. Пик с RRT 0,73 не был обнаружен в растворах хлорида LACE в цитратном буфере.
Пример 4: результаты исследования стабильности при трехмесячном хранении
Составы
Получали и исследовали стабильность трех глазных составов LACE, а именно 10 мг/мл (1%), 30 мг/мл (3%) и 40 мг/мл (4%).
1% раствор LACE:
0,025 масс.% дигидрата эдетата натрия,
1,3 масс.% глицерина,
0,5 масс.% аланина,
0,01 масс.% бензалкония хлорида,
1 масс.% холинового эфира липоевой кислоты,
вода, и
гидроксид натрия (1н) и/или HCl (1н) до достижения pH от 4 до 5.
3% раствор LACE:
0,025 масс.% дигидрата эдетата натрия,
0,4 масс.% глицерина,
0,5 масс.% аланина,
0,01 масс.% бензалкония хлорида,
3 масс.% холинового эфира липоевой кислоты,
вода, и
гидроксид натрия (1н) и/или HCl (1н) до достижения pH от 4 до 5.
4% раствор LACE:
0,025 масс.% дигидрата эдетата натрия,
0,1 масс.% глицерина,
0,5 масс.% аланина,
0,01 масс.% бензалкония хлорида,
4 масс.% холинового эфира липоевой кислоты,
вода, и
гидроксид натрия (1н) и/или HCl (1н) до достижения pH от 4 до 5.
Методики ВЭЖХ
Оборудование:
Модуль разделения Waters 2695 Separation Module или эквивалентный, включающий насос, способный обеспечивать скорость градиентного потока 1,0 мл/мин или эквивалентную, и автоматическое устройство подачи образцов.
Мультиволновой детектор Waters 2987 Multi wavelendth Detector или детектор, работающий на одной длине волны, способный осуществлять детектирование на 225 нм, или эквивалентный.
Колонка: YMC Pack ODS AQ, 250×4,6 мм, PN: AQ125052546WT
Реагенты:
Ацетонитрил, категории для ВЭЖХ или эквивалентный,
Метанол, категории для ВЭЖХ или эквивалентный,
Одноосновного фосфата натрия моногидрат, категории USP или эквивалентный,
1-гептансульфоновой кислоты натриевая соль, категории для ВЭЖХ или эквивалентная,
Триэтиламин, категории ВЭЖХ или эквивалентный,
Фосфорная кислота категории NF или эквивалентная,
Очищенная вода,
Аналитические весы,
Различные мерные лабораторные колбы класса A,
Различные пипетки класса A
Различные градуированные цилиндры, ВЭЖХ флаконы
Параметры системы ВЭЖХ:
Колонка: YMC Pack ODS AQ, 250×4,6 мм, PN: AQ125052546WT
Подвижная фаза:
A: 0,05M фосфат натрия, 0,005М натриевая соль 1-гептансульфоновой кислоты, 0,2% триэтиламин, pH 4,5(±0,2) (регулировался добавлением фосфорной кислоты)
D: ацетонитрил
Градиент:
| Время (мин) | %A | %D |
| 0 | 90 | 10 |
| 29,0 | 50 | 50 |
| 30,0 | 50 | 50 |
| 30,5 | 90 | 10 |
| 50,0 | 90 | 10 |
Скорость потока: 1,0 мл/мин
Длина волны: 225 нм
Температура колонки: 60°C
Объем впрыска: 10 мкл (активность), 50 мкл (RS)
Приблизительная
продолжительность
хроматографирования*: 50 мин
Приблизительное
время удерживания*: 21 мин
* продолжительность хроматографирования и время удерживания могут меняться в зависимости от возраста колонки и от типа используемого прибора
Промывание иглы: вода:ацетонитрил (90:10)
Разбавитель: 0,05М фосфат натрия
Результаты
Составы хранили в четырех разных условиях, а именно, 5°C при естественной влажности (RH); 25°C при 40% RH; 40°C RH не более 25%; и -20°C при естественной влажности. Образцы отбирали в моменты времени 0, 1 месяц и 3 месяца для определения содержания EDTA, содержания BAK, pH и активности LACE. Результаты показаны ниже в таблицах 4-7. Обследование внешнего вида препаратов также выполнялось в моменты времени 0, 1 месяц и 3 месяца (смотрите Таблицу 8). Примеси, связанные с действующим веществом, исследовали с помощью ВЭЖХ. В таблицах 9A-9D показаны количества примесей, связанных с действующим веществом, которые были зафиксированы в моменты времени 0, 1 месяц и 3 месяца (в таблицах отражены только примеси, содержание которых превышает 0,05%).
Таблица 4: результаты определения EDTA
| Состав | EV06 глазной раствор, плацебо | EV06 глазной раствор, 10 мг/мл | EV06 глазной раствор, 30 мг/мл | EV06 глазной раствор, 40 мг/мл | |
| Номер партии | BCL545-129A | Lot BCL545-129B | Lot BCL545-129C | Lot BCL545-129D | |
| Спецификация | 80,0%-120,0% | 80,0%-120,0% | 80,0%-120,0% | 80,0%-120,0% | |
| 5°C/естеств. RH | 0 | 97,8% | 98,9% | 98,5% | 98,20% |
| 1 | 101,0% | 100,4% | 100,1% | 99,10% | |
| 3 | 99,3% | 98,2% | 99,7% | 98,3%, 101,0% | |
| 25°C/40%RH | 1 | 102,8% | 100,5% | 100,1% | 98,80% |
| 3 | 99,5% | 96,5% | 93,9% | 85,4%, 85,1% | |
| 40°C/NMT 25%RH | 1 | 100,8% | 93,1% | 91,3% | 88,80% |
| 3 | 101,1% | 54,5% | 16,3% | 7,5%, 6,0% | |
| -20°C/ естеств. RH | 1 | IP | IP | IP | IP |
Таблица 5: результаты определения BAK
| Состав | EV06 глазной раствор, плацебо | EV06 глазной раствор, 10 мг/мл | EV06 глазной раствор, 30 мг/мл | EV06 глазной раствор, 40 мг/мл | |
| Номер партии | BCL545-129A | Lot BCL545-129B | Lot BCL545-129C | Lot BCL545-129D | |
| Спецификация | 80,0%-120,0% | 80,0%-120,0% | 80,0%-120,0% | 80,0%-120,0% | |
| 5°C/естеств. RH | 0 | 96,9% | 94,4% | 95,0% | 95,6% |
| 1 | 96,3% | 93,4% | 94,5% | 96,0% | |
| 3 | 96,5% | 93,5% | 93,5% | 94,3% | |
| 25°C/40%RH | 1 | 96,6% | 94,4% | 94,3% | 95,9% |
| 3 | 96,6% | 93,1% | 93,5% | 93,6% | |
| 40°C/NMT 25%RH | 1 | 98,2% | 94,0% | 92,8% | 94,8% |
| 3 | 96,4% | 94,0% | 38,3% | 164,5% | |
| -20°C/ естеств. RH | 1 |
Таблица 6: результаты измерения pH
| Состав | EV06 глазной раствор, плацебо | EV06 глазной раствор, 10 мг/мл | EV06 глазной раствор, 30 мг/мл | EV06 глазной раствор, 40 мг/мл | |
| Номер партии | BCL545-129A | Lot BCL545-129B | Lot BCL545-129C | Lot BCL545-129D | |
| Спецификация | от 4,0 до 5,0 | от 4,0 до 5,0 | от 4,0 до 5,0 | от 4,0 до 5,0 | |
| 5°C/естеств. RH | 0 | 4,6 | 4,6 | 4,5 | 4,5 |
| 1 | 4,6 | 4,5 | 4,9 | 4,4 | |
| 3 | 4,6 | 4,5 | 4,5 | 4,4 | |
| 25°C/40%RH | 1 | 4,5 | 4,5 | 4,4 | 4,3 |
| 3 | 4,7 | 4,7 | 4,6 | 4,1 | |
| 40°C/NMT 25%RH | 1 | 4,5 | 4,3 | 4,2 | 4,1 |
| 3 | 4,6 | 4,5 | 4,7 | 3,8 | |
| -20°C/ естеств. RH | 1 | 4,6 | 4,4 | 4,4 | 4,3 |
Таблица 7: результаты измерения активности LACE
| Номер тестируемого образца | STA-000 325 | STA-000 326 | STA-000 327 | ||||
| Состав | EV06 глазной раствор, 10 мг/мл | EV06 глазной раствор, 30 мг/мл | EV06 глазной раствор, 40 мг/мл | ||||
| Номер партии | Lot BCL545-129B | Lot BCL545-129C | Lot BCL545-129D | ||||
| Спецификация | 90,0-110,0% от исходного | 90,0-110,0% от исходного | 90,0-110,0% от исходного | ||||
| Результаты | % от заявл. содерж. | % от исходн. | % от заявл. содерж. | % от исходн. | % от заявл. содерж. | % от исходн. | |
| 5°C/естеств. RH | 0 | 98,1% | N/A | 94,0% | N/A | 91,5% | N/A |
| 1 | 98,9% | 100,8% | 98,0% | 104,3% | 100,8% | 110,2% | |
| 3 | 99,4% | 101,3% | 95,9% | 102,0% | 94,5% | 103,3% | |
| 25°C/40%RH | 1 | 102,2% | 104,2% | 97,3% | 103,5% | 98,4% | 107,5% |
| 3 | 94,2% | 96,0% | 92,8% | 98,7% | 89,8% | 98,1% | |
| 40°C/NMT 25%RH | 1 | 93,5% | 95,3% | 92,5% | 98,4% | 94,2% | 103,0% |
| 3 | 79,3% | 80,8% | 73,6% | 78,3% | 68,1% | 74,4% | |
| -20°C/ естеств. RH | 1 | 92,3% | 94,1% | 91,6% | 97,4% | 80,0% | 87,4% |
Таблица 8: результаты обследования внешнего вида
| Состав | EV06 глазной раствор, плацебо | EV06 глазной раствор, 10 мг/мл | EV06 глазной раствор, 30 мг/мл | EV06 глазной раствор, 40 мг/мл | |
| Номер партии | BCL545‐129A | Lot BCL545‐129B | Lot BCL545‐129C | Lot BCL545‐129D | |
| Спецификация | Прозрачный бесцветный раствор | Прозрачный бесцветный-желтый раствор | Прозрачный бесцветный-желтый раствор | Прозрачный бесцветный-желтый раствор | |
| 5°C/ естеств.RH | 0 | Прозрачный бесцветный раствор | Прозрачный желтый раствор Munsell: 5Y 9/1 |
Прозрачный желтый раствор Munsell: 5Y 9/2 |
Прозрачный желтый раствор Munsell: 5Y 9/2 |
| 1 | Прозрачный бесцветный раствор 99,9% Tat 500 нм |
Прозрачный желтоватый раствор 99,7% Tat 500 нм Munsell: 10YR9/0,5 |
Прозрачный желтоватый раствор 98,7% Tat 500 нм Munsell: 5Y9/1 |
Прозрачный желтоватый раствор 98,0% Tat 500 нм Munsell: 5Y9/1,5 |
|
| 3 | Прозрачный бесцветный раствор 100,6% T |
Прозрачный желтоватый раствор 100,1% T Munsell: 10YR9/0,5 |
Прозрачный желтоватый раствор 99,5% T Munsell: 5Y9/1 |
Прозрачный желтоватый раствор 99,1% T Munsell: 5Y9/1 |
|
| 25°C/ 40% RH |
1 | Прозрачный бесцветный раствор 100,1% T при 500 нм |
Прозрачный желтоватый раствор 99,7% Tat 500 нм Munsell: 10YR9/0,5 |
Прозрачный желтоватый раствор 98,7% Tat 500 нм Munsell: 5Y9/1 |
Прозрачный желтоватый раствор 98,9% Tat 500 нм Munsell: 5Y9/1,5 |
| 3 | Прозрачный бесцветный раствор 100,7% T |
Прозрачный желтоватый раствор 100,3% Tat 500 нм Munsell: 10YR9/0,5 |
Прозрачный желтоватый раствор 99,7% T Munsell:10YR9/1 |
Прозрачный желтоватый раствор 99,3% T Munsell: 5Y9/1 |
|
| 40°C/ NMT 25% RH | 1 | Прозрачный бесцветный раствор 99,8% Tat 500 нм |
Прозрачный желтоватый раствор 99,6% Tat 500 нм Munsell: 10YR9/0,5 |
Прозрачный желтоватый раствор 99,1% Tat 500 нм Munsell: 5Y9/1 |
Прозрачный желтоватый раствор 98,1% Tat 500 нм Munsell: 5Y9/1,5 |
| 3 | Прозрачный бесцветный раствор 100,6% T |
Прозрачный желтоватый раствор 100,1% T Munsell: 10YR9/1 |
Прозрачный желтоватый раствор 13,4% T Munsell: 5Y9/1 |
Мутный желтоватый раствор 3,0% T Munsell: 5Y9/1 |
|
| -20°C/ естеств.RH | 1 | Прозрачный бесцветный раствор 99,6% T |
Прозрачный бледно-желтый раствор 98,4% Tat 500 нм Munsell: 5Y 9/0,5 |
Прозрачный бледно-желтый раствор 96,3% Tat 500 нм Munsell: 5Y 9/1 |
Прозрачный бледно-желтый раствор 96,8% Tat 500 нм Munsell: 5Y 9/1 |
| Таблица 9A: примеси, связанные с действующим веществом, в контрольном растворе | ||||||||||||
| Номер партии | BCL545‐129A | |||||||||||
| Спецификация | Информация по RRT для каждой индивидуальной примеси ≥ 0,05% Суммарные данные |
|||||||||||
| 0,65-0,66 | 0,67-0,68 | 0,68 | 0,80-0,81 | 1,08-1,09 | 1,12 | 1,17 | 1,19 | 1,21-1,22 | 1,29 | Итого | ||
| 5°C/ естеств.RH | 0 | |||||||||||
| 1 | ||||||||||||
| 3 | ND | ND | ND | ND | ND | ND | ND | ND | ND | 0,08% | 0,08% | |
| 25°C/ 40% RH |
1 | |||||||||||
| 3 | ||||||||||||
| 40°C/NMT 25% RH | 1 | |||||||||||
| 3 | ND | ND | ND | 0,15% | ND | ND | ND | ND | ND | ND | 0,15% |
| Таблица 9B: примеси, связанные с действующим веществом, в 1% растворе LACE | ||||||||||||
| Номер партии | Lot BCL545‐129B | |||||||||||
| Спецификация | Информация по RRT для каждой индивидуальной примеси ≥ 0,05% Суммарные данные |
|||||||||||
| 0,65- 0,66 |
0,67-
0,68 |
0,68-
0,69 |
0,80-
0,81 |
1,08-
1,09 |
1,12-
1,14 |
1,17 | 1,19 |
1,20-
1,22 |
1,29 | Итого | ||
| 5°C/ естеств.RH | 0 | 0,44% | 0,38% | ND | ND | 0,13% | ND | ND | ND | ND | ND | 0,95% |
| 1 | 0,65% | 0,25% | 0,42% | ND | 0,33% | ND | ND | ND | 0,05% | ND | 1,70% | |
| 3 | 1,68% | 1,36% | ND | 0,14% | ND | 0,89% | ND | ND | 0,24% | ND | 4,31% | |
| 25 C/40% RH | 1 | 1,48% | 0,15% | ND | ND | 0,82% | ND | ND | ND | ND | ND | 2,45% |
| 3 | 1,46% | 1,57% | ND | ND | 0,09% | 2,49% | ND | ND | 0,30% | ND | 5,91% | |
| 40 C/NMT 25% RH |
1 | 4,26% | 0,22% | 0,10% | ND | 2,59% | ND | ND | ND | 0,06% | ND | 7,23% |
| 3 | 4,23% | 1,85% | ND | ND | 0,27% | 7,25% | ND | ND | 0,37% | ND | 13,97% | |
| -20°C/естеств.RH | 1 | ND | 0,34% | 0,06% | ND | ND | 0,49% | ND | ND | 0,11% | ND | 1,00% |
| Таблица 9C: примеси, связанные с действующим веществом, в 3% растворе LACE | ||||||||||||
| Номер партии | Lot BCL545‐129C | |||||||||||
| Спецификация | Информация по RRT для каждой индивидуальной примеси ≥ 0,05% Суммарные данные |
|||||||||||
|
0,65-
0,66 |
0,67-
0,68 |
0,68-
0,69 |
0,80-
0,81 |
1,08-
1,09 |
1,12-
1,14 |
1,17 | 1,19 |
1,20-
1,22 |
1,29 | Итого | ||
| 5°C/ естеств.RH | 0 | 0,24% | 0,31% | ND | ND | 0,11% | ND | ND | ND | ND | ND | 0,65% |
| 1 | 0,56% | 0,12% | 0,11% | ND | 0,30% | ND | ND | ND | 0,05% | ND | 1,14% | |
| 3 | 0,54% | 1,20% | ND | ND | ND | 0,69% | ND | ND | 0,27% | ND | 2,70% | |
| 25°C/40% RH | 1 | 1,40% | 0,14% | ND | ND | 0,83% | ND | ND | ND | ND | ND | 2,37% |
| 3 | 1,28% | 1,10% | ND | ND | ND | 1,56% | ND | ND | 0,16% | ND | 4,10% | |
| 40°C/NMT 25% RH |
1 | 3,97% | 0,14% | ND | ND | 2,75% | ND | ND | ND | ND | ND | 6,86% |
| 3 | 3,56% | 0,81% | ND | 0,09% | ND | 3,10% | ND | ND | 0,13% | ND | 7,69% | |
| -20°C/естеств.RH | 1 | 0,06 | 0,30% | 0,08% | ND | ND | 0,28% | ND | ND | 0,10% | ND | 0,81% |
| Таблица 9D: примеси, связанные с действующим веществом, в 4% растворе LACE | ||||||||||||
| Номер партии | Lot BCL545‐129D | |||||||||||
| Спецификация | Информация по RRT для каждой индивидуальной примеси ≥ 0,05% Суммарные данные |
|||||||||||
| 0,65-0,66 | 0,67-0,68 | 0,68-0,69 | 0,80-0,81 | 1,08-1,09 | 1,12-1,14 | 1,17 | 1,19 | 1,20-1,22 | 1,29 | Итого | ||
| 5°C/ естеств.RH | 0 | 0,21% | 0,28% | ND | ND | 0,11% | ND | ND | ND | ND | ND | 0,60% |
| 1 | 0,53% | 0,17% | ND | ND | 0,33% | ND | ND | ND | 0.10% | ND | 1,13% | |
| 3 | 0,47% | 1,13% | ND | 0,14% | 0,24% | 0,57% | 0,05% | 0,05% | 0,11% | ND | 2,76% | |
| 25°C/40% RH | 1 | 1,32% | 0,15% | ND | ND | 0,78% | ND | ND | ND | ND | ND | 2,25% |
| 3 | 1,25% | 1,01% | ND | 0,14% | 0,14% | 1,07% | ND | ND | 0,13% | ND | 3,74% | |
| 40°C/NMT 25% RH |
1 | 3,72% | 0,16% | ND | ND | 2,67% | ND | ND | ND | ND | ND | 6,55% |
| 3 | 3,20% | 0,63% | ND | 0,06% | 0,22% | 2,62% | ND | ND | 0,09% | ND | 6,82% | |
| -20°C/естеств.RH | 1 | ND | 0,27% | 0,05% | ND | ND | 0,39% | ND | ND | 0,08% | ND | 0,80% |
Пример 5: глазные капли Dioptin™ уменьшают эластичность хрусталика у мышей
Методики
Тест in vitro: хрусталики мышей в возрасте восьми месяцев (C57BL/6J) инкубировали в течение 12 часов в среде с добавкой определенного количества (0-500 мкМ) липоевой кислоты (LA). Эластичность хрусталиков измеряли с использованием известной методики с покровным стеклом. После измерения эластичности хрусталики гомогенизировали в среде для диссоциации, содержащей алкилирующий агент 1 (для модификации свободных групп SH). Гомогенат фильтровали и промывали, повторно суспендировали, ретентат обрабатывали восстанавливающим агентом (TCEP) и алкилирующим агентом 2 (модификация S-S SHs). После фильтрования и промывания, определяли уровни алкилированных SH групп в ретентате 2. Положительным контролем при анализе сульфгидрильных групп служил альбумин бычьей сыворотки.
Тест in vivo: мышам C57BL/6J в возрасте восьми месяцев вводили 2,5 мкл состава, включающего 5% LACE (DioptinTM), три раза в день с восьмичасовыми интервалами в правый глаз (OD) в течение 5 недель. После последнего введения состава хрусталики удаляли и помещали в кювету, содержащую HBSS. Эластичность определяли на приборе с компьютерным управлением, который обеспечивал перемещение площадки вверх по оси Z с шагом 1 мкм с одновременным измерением усилия с помощью изометрического преобразователя силы Harvard Apparatus F10. Для сравнения определяли эластичность хрусталиков, извлеченных у мышей C57BL/6J в возрасте 8 недель.
Результаты
Обработка LA приводила к зависимому от концентрации уменьшению количества дисульфидных связей в белках, которое сопровождалось повышением эластичности хрусталика. Изменение количества дисульфидных связей и эластичности находится в отрицательной корреляции (R=0,87, p=0,006). [LA]50 для обоих эффектов составляла 50±10 мкМ с максимальным эффектом при концентрации LA 100 мкМ. После местного введения в глаза состава DioptinTM хрусталики глаз старых мышей, получавших состав, становились более эластичными, чем необработанные хрусталики, т.е. относительное усилие, требуемое для аналогичного перемещения по оси Z было выше для необработанных хрусталиков глаз. В большинстве случаев, обработанные хрусталики глаз обладали даже большей эластичностью, чем хрусталики мышей в возрасте 8 недель.
Поскольку перицентральная эластичность зрачков человека снижается с возрастом, люди теряют способность к аккомодации. Полученные результаты позволяют предположить, что местное введение в глаза препарата, который повышает эластичность хрусталика за счет восстановления дисульфидов, приводит к сопутствующему восстановлению амплитуды аккомодации.
Пример 6: тест Драйза на безопасность глазных капель EV06 для глаз
Безопасность состава EV06 оценивали с помощью теста Драйза для выявления возможности его применения при таких высоких концентрациях, как 5%. Тест Драйза представляет собой тест на острую токсичность, разработанный в 1944 году токсикологами Управления по пищевым продуктам и лекарственным средствам (FDA) John H.Draize и Jacob M.Spines. Методика, которая первоначально применялась для тестирования косметики, включает нанесение 0,5 мл или 0,5 г тестируемого вещества на глаз или кожу обездвиженного, бодрствующего животного, после чего вещество оставляют на определенное количество времени с последующим смыванием и регистрацией его действия. Реакции роговицы, радужной оболочки и конъюнктивы оценивали с использованием шкалы, описанной Draize et al., J.Pharmacol.&Exp.Therapeutics, 82:377-390(1944). В силу важности роговой оболочки для зрения, 73% баллов в тесте Драйза связано с повреждением роговицы. Нормальной суммой баллов считался 0, увеличение количества поражений приводит к увеличению суммы баллов, причем максимально возможный результат равен 110. Баллы теста Драйза вычисляли в момент каждого осмотра, путем усреднения общих результатов для всех обследованных кроликов. Осмотры осуществляли и фиксировали результаты через 24, 48 и 72 часа после обработки исследуемым препаратом.
Тест заключался в закапывании 30-50 мкл продукта в один глаз 6 новозеландских белых кроликов и наблюдении за ними для выявления любых аномальных клинических симптомов, таких как краснота конъюнктивы, опухание или учащенное моргание, что может указывать на раздражение. Тестирование состава EV06 в концентрациях 3%-5% продемонстрировало отсутствие нежелательных эффектов (результат теста Драйза для глаз кролика составил 2,0+/-0,6), в результате чего состав не считается «агрессивным или раздражающим».
Пример 7: состав Dioptin™ для восстановления аккомодации у людей, страдающих пресбиопией
Методики
Проводили скрининговые исследования для определения наибольшей переносимой концентрации при местном введении в глаза кроликов, в сочетании с биологическим анализом концентрации EV06 и его метаболитов в роговице, внутриглазной жидкости и хрусталике. В ходе исследований на кроликах согласно GLP (надлежащей практике проведения лабораторных исследований), животным осуществляли местное введение растворов Dioptin 0, 1, 3 и 4% три раза в день в течение 90 дней подряд. Перед началом эксперимента и через 1, 30 и 90 дней применения препарата осуществляли исследование щелевой лампой и фундоскопию (обследование глазного дна). Проводили ежедневный клинический осмотр, регистрировали потребление пищи, массу тела, клиническую патологию и токсикокинетику. Осуществляли полную некропсию и гистопатологию глаз.
Результаты
Глазные составы DioptinTM обладали хорошей переносимостью для глаз кролика. В любой момент времени GLP исследования не наблюдалось дозозависимых симптомов токсичности для глаз. Исследования глаз показали нормальные результаты, за исключением незначительной (1+) гиперемии конъюнктивы и (1+) выделений, которые наблюдались у некоторых животных, получавших 3% или 4% DioptinTM, в первый день введения, которые сохранялись весь период введения, но не усиливались. Сообщения о системных эффектах или нежелательных явлениях отсутствовали. Уровни EV06 в плазме находились на пределе или ниже предела обнаружения, что указывало на быстрый метаболизм.
DioptinTM является перспективным новым препаратом против пресбиопии, который дает возможность восстановить несколько диоптрий аккомодации. В доклинических исследованиях было показано, что EV06 эффективно увеличивает эластичность хрусталика за счет восстановления дисульфидных фрагментов белков хрусталика. Этот глазной состав является не раздражающим, его системная безопасность и безопасность для глаз была продемонстрирована в ходе 90-дневного GLP исследования глазной токсикологии при местном введении раствора с концентрацией до 4% три раза в день.
Пример 8: глазные капли Dioptin™ для лечения пресбиопии: проникновение в роговицу и глазная фармакокинетика
Методики
Проводили оценку проникновения эфиров липоевой кислоты в роговицу у кроликов. Кроликов также использовали для исследования метаболизма, абсорбции и распределения LACE (пролекарства LA), используя ВЭЖХ-ESI/МС/МС (LOD>2 нг/мл).
Результаты
Было обнаружено, что LACE улучшает проникновение по сравнению с липоевой кислотой. Проводили тестирование препарата DioptinTM, который являлся прототипом состава глазных капель на основе LACE. Под действием эндогенных биохолинэстераз LACE быстро разрушается и обеспечивает повышенные уровни LA в глазных тканях. Уровни DHLA (измерено в форме LA) и LACE были значительно повышены [P<0,05] при введении 3% DioptinTM по сравнению с необработанным противоположным глазом, а именно 22,6+/-9,1(5) и 142,3+/-31,9(5) нМ/л, соответственно.
Как показано на Фиг.2A DioptinTM повышает уровни LACE (пролекарство) и LA (действующее вещество) в образцах глазной ткани (ESI/ЖХ/МС/МС) и, что важно, в хрусталике. LA может выводиться в форме 6,8-бисметилтиооктановой кислоты (BMOA).
Схематическое изображение метаболизма LACE показано на Фиг.2B. Абсорбированная в роговице молекула LACE под действием псевдохолинэстераз (PCHE) превращается в продукты, не обладающие поверхностной активностью (липоевую кислоту и холин), что минимизирует повреждение роговицы при переходе во внутриглазную жидкость. Важно, что этот процесс расщепления в роговице затем делает возможным перенос указанных интермедиатов во внутриглазную жидкость. Это быстрое разрушение до липоевой кислоты позволяет вводить в глаз высокие концентрации LACE по сравнению с неразрушающимися катионными ПАВ, например, безопасный предел для глазного применения BAK составляет <0,01%.
Для сравнения, у людей поглощение в % (площадь под кривой или суммарное в течение 4-часового периода) составляет только 0,37% (Cagini) после введения в глаза состава липоевой кислоты; в то же время при исследовании введения состава EV06 отдельным животным (кролики и мыши), во внутриглазную жидкость проникало 2,2% введенного состава (измерено в форме LA). Смотрите Фиг.3.
В заключении, DioptinTM обеспечивает удобную платформу для улучшенной доставки дитиольных соединений в водной среде с целью восстановления дисульфидных групп белков для уменьшения жесткости хрусталиков и восстановления амплитуды аккомодации, что подходит для лечения пресбиопии.
Пример 9: состав LACE с глицерином
Холиновый эфир липоевой кислоты смешивали с чистым глицерином (не содержащим воды) при кратковременном нагревании до 80°C в течение 8 часов. В полученном прозрачном растворе была обнаружена высокая концентрация холинового эфира липоевой кислоты. Полученный прозрачный раствор являлся стабильным.
Пример 10: система доставки в форме одной бутыли, состоящей из 2-х частей
Система доставки в форме одной бутыли, состоящей из 2-х частей, описана для стабильного при долговременном хранении состава, включающего два компонента. В этой системе доставки применяются коммерчески доступные бутыль, насадка-капельница и колпачок. В коммерчески доступную стандартную бутыль (Фиг.4 слева вверху) помещают вставку, которая разделяет два компонента препарата до момента применения.
Емкость: 4 мл; горлышко 15-415;
Материал: неокрашенная прозрачная бутыль из LDPE с белым колпачком;
Обеспечивает надежное воспроизводимое дозирование реагентов эластичная прозрачная бутыль обеспечивает легкую идентификацию компонентов;
Отличная химическая стойкость; материал подходит для большинства биотехнологических, фармацевтических и фармацевтических применений;
Обеспечивает получение отдельных капель 40 мкл (для водных составов, на размер капель влияет вязкость);
Производитель: Thermo Fisher Nalgene®;
Номер по каталогу производителя: 2750-9125;
Составы компонента 1 и компонента 2 показаны ниже по тексту в таблице 10:
Таблица 10: составы компонентов 1 и 2
| LACE 3,00% | |
| Компонент 1 | 1454 мг/мл |
| LACE/глицерин | |
| LACE | 150 мг |
| глицерин | 130 мг |
| глицерин | 0,103 мл |
| Компонент 2 | 5 мл |
| аланин | 12,5 мг |
| BAK | 0,35 мг |
| Компоненты 1+2 «Активированный состав» | ||
| мг/мл | % | |
| LACE | 30,00 | 3,00 |
| глицерин | 26,00 | 2,60 |
| аланин | 2,50 | 0,250% |
| BAK | 0,07 | 0,007 |
Получение компонента 1
150 мг твердого хлорида холинового эфира липоевой кислоты помещали в 103 мкл глицерина медицинской степени чистоты и нагревали до 80°C в течение 6 часов. Формировалась аморфная мицелла.
Вставка, показанная на Фиг.4 (левый рисунок), состоит из следующих элементов: несъемного держателя основной вставки 1; внутренней трубки 2, которая содержит не гидролизующий растворитель и фильтр для удержания мелких частиц; нижней перегородки 3, которая удерживает жидкость во внутренней трубке; и насадки-капельницы 5, которая герметично закрывает вставку перед стерилизацией. Действующий агент компонента 1 композиции помещают во внутреннюю трубку 2, как показано на Фиг.4. Затем надевают насадку-капельницу. Часть 1 бутыли стерилизуют с помощью гамма-излучения.
Сборка части 1 и части 2
Часть 2 бутыли содержит водный раствор, который стерилизован отдельно. Поскольку вставка и водный раствор стерилизованы надлежащим образом, их смешивают (удаляют перегородку) в стерильных условиях, которые обеспечиваются во время производства (Фиг.4, средний рисунок). Часть 1 (вставку) помещают в часть 2 (контейнер). После соединения частей, возможно долговременное хранение без необходимости тщательного контроля за температурными условиями (<45°C).
Активация
Как показано на Фиг.4 (правый рисунок), для активации пациенту нужно лишь сжать или «сдавить» бутыль, для высвобождения компонента-1 в компонент-2 (водный раствор). Это действие позволяет сдвинуть нижнюю перегородку 3 (Фиг.4) вверх, открывая систему отверстий во внутренней трубке 2 (Фиг.4). После чего композиция, находящаяся в части 1, попадает в водный раствор, находящийся в части 2. Растворение компонента 1 легко происходит при кратковременном встряхивании. Во время активации перегородка по-прежнему остается на месте. Полученный в результате активации состав (примерно 5 мл) содержит:
3% холинового эфира липоевой кислоты;
0,01% бензалкония хлорида;
2,7% глицерина, USP; и
0,5% аланина, USP;
и pH состава приблизительно равен 4,5±0,2.
После активации образуется достаточное количество состава для введения в течение 60 дней два раза в сутки (BID) (40 мкл/капля).
Конечный состав является достаточно стабильным, чтобы обеспечить предсказуемый результат. Полученный состав стабилен при охлаждении (5°C) в течение 30 дней, без разрушения >0,5% действующего соединения.
Раздельное хранение компонентов 1 и 2 в бутыли, состоящей из 2-х частей, обеспечивает продолжительный срок хранения при устойчивости к термическому разрушению ниже 45°C в течение 2 лет.
Приведенное выше описание конкретных вариантов осуществления настолько полно раскрывает общую природу изобретения, что другие рядовые специалисты в данной области техники, применяя имеющиеся у них знания, способны легко модифицировать и/или приспособить данные конкретные варианты осуществления к различным приложениям без слишком большой экспериментальной работы, не отступая от общей концепции настоящего изобретения. Таким образом предполагается, что эти адаптации и модификации находятся в ряду эквивалентов раскрытых вариантов осуществления, исходя из идей и принципов, изложенных в настоящей заявке. Следует понимать, что фразеология или терминология настоящей заявке предназначены для целей описания, а не ограничения, так что терминологию или фразеологию настоящего описания специалист в данной области техники должен интерпретировать в свете идей и принципов настоящего изобретения.
Объем и область настоящего изобретения не должен ограничиваться любым из описанных выше типовых вариантов осуществления, и его следует определять только в соответствии с приведенной ниже формулой изобретения и ее эквивалентов.
Все из различных аспектов, вариантов осуществления и альтернативных вариантов, описанных в настоящей заявке, могут быть скомбинированы во всех без исключения вариантах.
Все публикации, патенты и заявки на патенты, упомянутые в настоящем описании, включены в заявку посредством ссылки в той же степени, как если бы в отношении каждой индивидуальной публикации, патента или заявки на патент было конкретно и индивидуально указано, что она включена в заявку посредством ссылки.
1. Фармацевтическая композиция для улучшения амплитуды аккомодации хрусталика или для лечения или профилактики пресбиопии у субъекта, включающая холиновый эфир липоевой кислоты в концентрации от 1% до 10 мас.% от массы композиции, неводный эксципиент, выбранный из глицерина в концентрации от 0,1% до 5 мас.% от массы композиции или смеси глицерина и пропиленгликоля в концентрации от 0,5% до 5 мас.% от массы композиции, аланин в концентрации от 0,1% до 5 мас.% от массы композиции, смешанные с водным раствором, имеющим pH от 4 до 6, где как минимум 95% от исходного количества холинового эфира липоевой кислоты присутствует в фармацевтической композиции по данным ВЭЖХ после хранения при 25°C и относительной влажности 40% в течение 3 месяцев.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой менее 2 мас.% от массы композиции холинового эфира липоевой кислоты подверглось разрушению после хранения при 25°C и относительной влажности 40% в течение 3 месяцев.
3. Фармацевтическая композиция по п.1 или 2, содержащая менее 4 мас.% от массы композиции примесей, связанных с холиновым эфиром липоевой кислоты, исходя из площадей под кривой по данным ВЭЖХ, после хранения при 25°C и относительной влажности 40% в течение 3 месяцев, где примеси, связанные с холиновым эфиром липоевой кислоты, характеризуются относительным временем удерживания от 0,65 до 0,66.
4. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-3, дополнительно содержащая:
консервант в концентрации, которая составляет от 0,005% до 0,1 мас.% от массы композиции.
5. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-4, в которой неводный эксципиент представляет собой глицерин.
6. Фармацевтическая композиция по п.5, где концентрация глицерина составляет 0,1%, 0,4%, 1,3% или 2,7% мас.% от массы композиции.
7. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-6, где холиновый эфир липоевой кислоты имеет противоион, выбранный из группы, состоящей из хлорида, бромида, йодида, сульфата, метансульфоната, нитрата, малеата, ацетата, цитрата, фумарата, гидрофумарата, тартрата, сукцината, бензоата, а также аниона глутаминовой кислоты.
8. Способ улучшения амплитуды аккомодации хрусталика, включающий стадию, на которой в хрусталик вводят эффективное количество фармацевтической композиции по любому из пп.1-7.
9. Способ лечения или профилактики пресбиопии у субъекта, включающий стадию, на которой в глаз субъекта вводят эффективное количество фармацевтической композиции по любому из пп.1-7.
