Способ определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с туберкулезом и вич-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии (ваарт)

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

G01N33/00 - Исследование или анализ материалов особыми способами, не отнесенными к предыдущим группам

Владельцы патента RU 2745026:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно фтизиатрии и инфекционным болезням, и может использоваться для определения синдрома восстановления иммунитета у больных туберкулезом и ВИЧ-инфекцией. Способ определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии заключается в том, что в крови больного определяют содержание триглицеридов и при превышении уровня триглицеридов через месяц ВААРТ более чем в 2 раза, по сравнению с уровнем триглицеридов до начала ВААРТ, определяют наличие воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения ВААРТ. Изобретение обеспечивает повышение качества определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии. 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно фтизиатрии и инфекционным болезням, и может использоваться для определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ).

Антиретровирусная терапия (АРВТ), направленная на угнетение репликации ВИЧ, способствует росту количества CD4-лимфоцитов, а также частичному восстановлению или активации функции иммунной системы. Следствием является снижение частоты возникновения оппортунистических заболеваний, увеличение продолжительности и качества жизни людей, живущих с ВИЧ. Однако у некоторых пациентов с выраженной иммуносупрессией это может сопровождаться ухудшением состояния и рисками формирования синдрома восстановления иммунитета (СВИ), который проявляется в виде развития новых или ранее пролеченных оппортунистических, вторичных и обострением неинфекционных заболеваний на фоне вирусологически эффективной АРВТ. Частота развития СВИ колеблется в широких пределах, в случаях туберкулез-ассоциированного проявления может достигать 50% (Матиевская Н.В. Воспалительный синдром восстановления иммунитета у ВИЧ-инфицированных пациентов: факторы риска, клинические проявления, исходы, профилактика // Вестник Балтийского Федерального Университета им. И. Канта. Серия: естественные и медицинские науки. 2012. №7. С. 44-51.). Факторами риска развития СВИ являются низкое исходное количество CD4-лимфоцитов и высокое содержание РНК ВИЧ в крови, наличие оппортунистических инфекций в процессе начала АРВТ (Боева Е.В., Беляков Н.А. Синдром восстановления иммунитета // Инфекция и иммунитет. 2018. Т. 8, №2. С. 139-149).

В 2006 г. достигнут консенсус по формулированию случая синдрома восстановления иммунитета с проявлением туберкулеза. В соответствии с консенсусом определяют туберкулез-ассоциированный воспалительный синдром восстановления иммунитета, который основывается на (А) данных анамнеза и (Б) клинических проявлениях, которые, в свою очередь, можно разделить на большие и малые проявления.

А. Предшествующее состояние: - Наличие диагноза туберкулеза до начала ВААРТ; - Улучшение состояния на фоне противотуберкулезной терапии к моменту начала ВААРТ.

Б. Клинические критерии: - Начало иммунной реактивации в течение первых 3 мес. от начала или возобновления, или изменения схемы ВААРТ; Наличие одного большого или двух малых критериев:

1. Большие критерии: - Появление или прогрессирование локального туберкулезного поражения тканей (инструментальное подтверждение); - Появление или прогрессирование локальных изменений в легочной ткани по данным рентгенологических исследований.

2. Малые критерии: - Появление или прогрессирование клинического ухудшения состояния; - Появление или прогрессирование респираторной и/или абдоминальной симптоматики. Для определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета исключают: - Развитие или прогрессирование других оппортунистических инфекций; - Лекарственную устойчивость микобактерий туберкулеза (МБТ); - Низкую приверженность к противотуберкулезной терапии; - Токсические побочные эффекты или нежелательные взаимодействия препаратов.

Известен способ определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с лекарственно-устойчивым туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ), заключающийся в клинической оценке состояния больного и при ухудшении общего состояния, повышении температуры тела, прогрессировании воспалительного процесса в пораженных органах, проводят преднизолонотерапию в дозе 0,5 мг/кг однократно в сутки в течение 10-12 дней, в течение курса преднизолонотерапии оценивают состояние больного, температуру тела, динамику воспалительного процесса в пораженных органах, и после окончания курса преднизолонотерапии при нормализации температуры, регрессии воспалительного процесса в пораженных органах, улучшении общего состояния определяют наличие воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с лекарственно-устойчивым туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения ВААРТ (Пантелеев A.M., Патент РФ №2468801) прототип).

Недостатками известного способа является то, что определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с лекарственно-устойчивым туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ) касается только больных с лекарственно-устойчивым туберкулезом, то есть имеет узкую направленность.

Диагностика воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с лекарственно-устойчивым туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ) проводится на основании результатов преднизолонотерапии через 10-12 дней, то есть достаточно поздно.

Непонятно какая доза преднизолона использовалась и почему один раз в день, так как известно, что в высоких дозах преднизолон оказывает иммуносупрессивный эффект (1 мг/кг массы тела в сутки и выше). Низкие дозы (30 мг в сутки и ниже) стимулируют иммунные реакции (Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Хорева М.В., Соколова Е.В. Система цитокинов, комплемента и современные методы иммунного анализа. - М. - 2001. - 158 с.), то есть могут усилить клинические проявления воспалительного синдрома восстановления иммунитета и врач может получить обратный (ухудшение состояния) эффект от лечения. К тому же однократное назначение преднизолона не имеет большого клинического смысла, так как известно, что преднизолон выводится из организма через 3-4 часа (https://www.lsgeotar.ru/prednizolon-16115.html).

При создании изобретения решалась задача расширения арсенала, ускорение и повышения качества определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии.

Технический результат - повышение качества определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии.

Указанный результат достигается тем, что в способе определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ), заключающийся в клинической оценке состояния больного и при ухудшении общего состояния, то есть повышении температуры тела, прогрессировании воспалительного процесса в пораженных органах, отличающийся тем, что, согласно изобретению, в крови больного определяют содержание триглицеридов и при превышении исходного уровня более чем в 2 раза, то есть с 0,6±0,04 ммоль/л до начала применения высокоактивной антиретровирусной терапии и 1,4±0,2 ммоль/л и выше через месяц от начала применения высокоактивной антиретровирусной терапии, определяют наличие воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения ВААРТ.

Новыми, ранее неизвестными признаками заявленного способа профилактики анафилактического шока при введении гетерологических сывороток являются:

Способ разработан на основе результатов определения уровня триглицеридов в крови до начала ВААРТ и через месяц от нее у 30 больных с синдромом восстановления иммунитета у больных туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения ВААРТ. Контроль - 30 больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией без токсических проявлений.

Токсический эффект ВААРТ (синдром восстановления иммунитета) проявлялся признаками интоксикации в виде снижения аппетита, тошнотой, рвотой, лихорадочной реакцией фебрильного типа, повышением активности ACT. Антиретровирусная терапия приводила к повышению процентного содержания CD4-лимфоцитов почти на 40%.

Изначальный уровень триглицеридов до применения ВААРТ с 54,2±4,1 мг % повышался с до 110,5±18,4 мг%, то есть с 0,6±0,04 до 1,4±0,2 ммоль/л. Имело место превышение исходного уровня более чем в 2 раза. При отсутствии у больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией токсических проявлений содержание триглицеридов в крови составило 78,4±2,7 мг % (0,8±0,03 ммоль/л), то есть в 1,4 раза.

Предлагаемый способ определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ).

осуществляют в следующей последовательности.

Уровень триглицеридов определяют унифицированным методом (http://studopedia.ru/13_95023_unifitsirovanniy-metod-opredeleniya-obshchego-holesterina-po-reaktsii-s-hlornim-zhelezom-metod-zlatkis-zaka.html).

Унифицированный метод определения триглицеридов.

Ход определения: К 0,5 мл сыворотки или плазмы добавляют 2 мл гептана, 3,5 мл изопропилового спирта и 1 мл 0,08Н серной кислоты, перемешивают и через 5 мин центрифугируют. Из верхнего (гептанового) слоя отбирают 0,4 мл, добавляют 2 мл изопропилового спирта и 1 каплю 6,25Н КОН. Перемешивают, нагревают на водяной бане 10 мин при 70°С. После охлаждения добавляют 0,2 мл перйодатного реактива и 1 мл ацетил ацетонового реактива, после перемешивания вновь нагревают 10 мин при 70°С. Развивается желто-зеленое окрашивание, интенсивность которого измеряют при длине волны 425 нм в кюветах с длиной оптического пути 0,5 см против холостой пробы, которую ставят так же, как и опытную, но вместо исследуемого материала берут 0,5 мл воды.

Калибровочную пробу ставят так же, как и опытную, но вместо сыворотки или плазмы берут 0,5 мл калибровочного раствора и 0,5 мл воды: развивающаяся окраска соответствует окраске опытной пробы, в которую взята плазма с содержанием триглицеридов 2 ммоль/л.

Нормальные величины триглицеридов в плазме крови считают 0,55-1,65 ммоль/л (50-150 мг в 100 мл).

Принцип метода: триглицериды экстрагируются смесью гептана и изопропилового спирта, в которую переходят только неполярные липиды, а более полярные фосфолипиды остаются в водной фазе. Триглицериды омыляются (гидролизуются) щелочью, глицерин окисляется йодной кислотой до формальдегида, который определяется по цветной реакции с ацетилацетоном.

Пример 1. Больной Б., 29 лет, наблюдается в ГБУЗ Тверской области «Областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» с диагнозом: ВИЧ инфекция, стадия 4Б. Инфильтративный туберкулез легких справа.

До начала антиретровирусной терапии уровень триглицеридов 1,0 ммоль/л. Через месяц ВААРТ - 2,3 ммоль/л. У больного наблюдались клинические признаки воспалительного синдрома восстановления иммунитета в виде ухудшении общего состояния, то есть снижения аппетита, тошноты, рвоты, лихорадочной реакции до 38°С, повышения активности ACT.

Превышение значения уровня триглицеридов более, чем в 2 раза от исходного позволило определить и подтвердить клинические признаки наличия у больного синдрома восстановления иммунитета и назначить дезинтоксикационную терапию. Через неделю от проведения дезинтоксикационной терапии уровень триглицеридов составил 1,5 ммоль/л.

Пример 2. Больной В.., 56 лет, наблюдается в ГБУЗ Тверской области «Областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» с диагнозом: ВИЧ инфекция, стадия 4Б. Инфильтративный туберкулез легких.

До начала антиретровирусной терапии уровень триглицеридов 0,4 ммоль/л. Через месяц ВААРТ - 1,8 ммоль/л. У больного наблюдались клинические признаки воспалительного синдрома восстановления иммунитета в виде ухудшении общего состояния, то есть снижения аппетита, тошноты, рвоты, лихорадочной реакции до 38°С, повышения активности ACT.

Пример 3. Больной А, 28 лет, наблюдается в ГБУЗ Тверской области «Областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» с диагнозом: ВИЧ инфекция, стадия 4Б. Инфильтративный туберкулез легких слева.

До начала антиретровирусной терапии уровень триглицеридов 0,8 ммоль/л. Через месяц ВААРТ - 2,1 ммоль/л. У больного наблюдались клинические признаки воспалительного синдрома восстановления иммунитета в виде ухудшении общего состояния, то есть снижения аппетита, тошноты, лихорадочной реакции до 38°С, повышения активности ACT.

Через неделю от проведения дезинтоксикационной терапии уровень триглицеридов составил 1,5 ммоль/л.

Использование заявленного способа определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ) позволяет врачу проводить мониторинг воспалительного синдрома восстановления иммунитета, определиться с вопросом необходимости проведения дезинтоксикационной или иммунокоррегирующей терапии. Способ прост в исполнении, дешев, не требует дорогостоящего оборудования, дает прямой экономический эффект. В рамках обязательного медицинского страхования, может быть применен для пациентов в центральных районных больницах, а не только в областных СПИД центрах.

Способ определения воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных c туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения высокоактивной антиретровирусной терапии, заключающийся в том, что в крови больного определяют содержание триглицеридов и при превышении уровня триглицеридов через месяц ВААРТ более чем в 2 раза, по сравнению с уровнем триглицеридов до начала ВААРТ, определяют наличие воспалительного синдрома восстановления иммунитета у больных туберкулезом и ВИЧ-инфекцией на фоне применения ВААРТ.

Изобретение относится к иммунологии. Для выявления антитоксических антител IgG в количественных показателях (мкг/мл) в лунки микропланшета с сорбированным антигеном (10 мкг/мл) вносят стандартный калибровочный образец с содержанием противодифтерийных антитоксических IgG 80 мкг/мл, исследуемые образцы сывороток крови человека и проводят инкубацию.

Реагентно-программный комплекс для проведения таргетного анализа // 2744443

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен реагентно-программный комплекс для проведения таргетного анализа.

Способ прогнозирования тромбоэмболических осложнений у пациентов при аритмиях высокого риска // 2744312

Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии, и предназначено для прогнозирования возможности развития тромбоэмболических осложнений при различных видах экстрасистолической аритмии и фибрилляции предсердий.

Способ диагностики рецепторного профиля эндометрия в абортном материале беременности раннего срока // 2744025

Изобретение относится к области медицины, а именно к патологической анатомии. Способ диагностики рецепторного профиля эндометрия абортного материала раннего срока беременности заключается в том, что выполняют иммуногистохимическое исследование образцов ткани гравидарного эндометрия с использованием антител соответственно к эстрогенам ER - клон 1D5, разведение 1:40 и прогестерону PR - клон PgR 636, разведение 1:50, с демаскировкой путем высокотемпературной обработки образца ткани эндометрия и при выявлении неравномерного распределения экспрессии и значениий экспрессии эстрогенов в железах и строме эндометрия в компактном и спонгиозном слоях менее 100 баллов H-Score до 0 баллов, экспрессии рецепторов прогестерона в железах эндометрия в компактном и спонгиозном слоях 0 баллов H-Score и значениях экспрессии рецепторов прогестерона в строме компактного и спонгиозного слоев от 250 до 100 баллов H-Score диагностируют нормальное гормональное состояние гравидарного эндометрия, соответствующее референсным значениям, в остальных случаях диагностируют гормональную патологию гравидарного эндометрия.

Комплекс для детекции и направленного разрушения клеток // 2743993

Изобретение относится к области медицинских исследований. Раскрыт комплекс для детекции и направленного разрушения клеток, содержащий активный компонент, состоящий из объединенных молекул фотосенсибилизатора, хотя бы одной плазмонной наночастицы и хотя бы одной биологической распознающей молекулы, отличающийся тем, что активный компонент дополнительно включает хотя бы одну объединенную молекулу органического флуоресцентного красителя, и комплекс включает вспомогательный детектирующий компонент, состоящий из хотя бы одной квантовой точки, объединенной с хотя бы одним однодоменным антителом, причем спектр флуоресценции квантовых точек находится в оптическом диапазоне поглощения молекул фотосенсибилизатора и молекул органического флуоресцентного красителя, при этом биологические распознающие молекулы и однодоменные антитела обладают свойством специфически связывать различные эпитопы заданного онкомаркера, экспрессирующегося клетками, причем активный и вспомогательный детектирующий компоненты являются отдельными компонентами, которые после введения в организм пространственно разделены до связывания с различными эпитопами заданного онкомаркера.

Способ определения частоты и амплитуды модуляции фазы волнового фронта, создаваемого колебаниями мембраны клетки // 2743973

Изобретение относится к области интерферометрии фазовых динамических объектов. Способ определения частоты и амплитуды модуляции фазы волнового фронта, создаваемого колебаниями мембраны клетки, включает разделение излучения когерентного источника на два пучка, один из которых проходит через исследуемый объект и отображается на регистраторе, а второй проходит по опорному каналу и также попадает на регистратор, где оба пучка интерферируют, и по изменению интерференционной картины судят об изменениях фазы волнового фронта.

Способ инициации физиологического обратного ремоделирования миокарда путем индивидуализированного подбора режима интенсивности аэробных тренировок больным хронической сердечной недостаточностью // 2743810

Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии, и может быть использовано для физической реабилитации для больных с хронической сердечно-легочной патологией.

Способ прогнозирования развития инфекционных осложнений и сепсиса у больных с тяжелой черепно-мозговой травмой // 2743806

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для прогнозирования развития инфекционных осложнений и сепсиса у больных с тяжелой черепно-мозговой травмой.

Способ диагностики воспалительных заболеваний мочеполовой системы инфекционного генеза // 2743428

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики воспалительных заболеваний мочеполовой системы инфекционного генеза путем нанесения на ежедневную гигиеническую прокладку после ношения её в течение от одного до четырех часов раствора кислотно-основного индикатора Лакмоид, отличающемуся тем, что сразу после нанесения оценивают изменение цвета индикатора: если цвет не изменился, имеет малиновую с красноватым отливом окраску - риск наличия бактериального вагиноза или иного инфекционного поражения низкий; если цвет индикатора меняется на фиолетовый различной интенсивности - необходимо повторение теста в течение двух последующих дней; если индикатор меняет цвет на синий различной интенсивности, то риск наличия бактериального вагиноза или иной вагинальной инфекции высок, необходимо посетить врача-гинеколога, выполнить лабораторную диагностику видоспецифичности вагинальной микрофлоры и провести углубленное обследование пациентки.

Не относящееся к человеку животное, у которого проявляется снижение функции верхних и нижних моторных нейронов и чувственного восприятия // 2744831

Изобретение относится к области биохимии, в частности к генетически модифицированному грызуну, содержащему в своем геноме модифицированный эндогенный локус DR6, способу его создания, а также к его клетке, эмбриоидному телу грызуна и к моторному нейрону грызуна.