Способ монотерапии гастрита, ассоциированного с инфекцией helicobacter pylori
Владельцы патента RU 2758246:
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ") (RU)
Изобретение относится к клинической медицине и микробиологии, а именно к терапии внутренних болезней и гастроэнтерологии, и может быть использовано для повышения эффективности и безопасности лечения гастроэнтерологических больных, инфицированных Helicobacter pylori, а также для совершенствования стратегии и тактики персонализированного подхода к оказанию медицинской помощи населению. Изобретение касается способа монотерапии гастрита, ассоциированного с инфекцией Helicobacter pylori, путем микробиологической коррекции дисбиоза желудка и эрадикации возбудителя. Способ заключается в том, что у пациента в период ремиссии осуществляют взятие фекалий в количестве не менее 1 мл, из них выделяют клоны индигенных штаммов Enterococcus faecium, используя плотную питательную среду, содержащую азид натрия и краситель кристаллический фиолетовый, затем по характеру окраски осуществляют отбор колоний, получают чистые культуры путем пересева трех колоний розового цвета с бордовым центром на три сектора чашки Петри с такой же средой, после чего инкубируют в термостате в аэробных условиях при t=37°C, проверяют на отсутствие генов патогенности при помощи ПЦР, отбирают клоны, лишенные факторов патогенности, которыми заквашивают соевый гидролизат в объеме не менее 10 мл на литр. Затем выбирают ту из заквасок, которая раньше других изменила структуру гидролизата, и используют ее для приготовления двух литров индивидуального аутопробиотического продукта с содержанием не менее 108 КОЕ на 1 мл, который вводят пациенту перорально по 50 мл 2 раза в день курсом не менее 20 дней. Изобретение обеспечивает лечение гастрита, ассоциированного с хеликобактериозом, при помощи монотерапии аутопробиотиком, вызывающего эрадикацию возбудителя, а также восстановление нарушения кишечного микробиоценоза с последующим исчезновением диспепсических симптомов. 4 табл., 2 ил., 4 пр.
Изобретение относится к клинической медицине и микробиологии, а именно к терапии внутренних болезней и гастроэнтерологии, и может быть использовано для повышения эффективности и безопасности лечения гастроэнтерологических больных, инфицированных Helicobacter pylori, а также для совершенствования стратегии и тактики персонализированного подхода к оказанию медицинской помощи населению.
В качестве отсроченного результата рассматривается снижение распространенности рака желудка как следствие уменьшения частоты встречаемости канцерогена первого порядка - Helicobacter pylori - в популяции.
В настоящее время заболевания, ассоциированные с инфекцией Helicobacter pylori (язвенная болезнь, атрофический гастрит, MALT-лимфома желудка и др.), остаются одной из актуальных проблем гастроэнтерологии в связи с высокой частотой встречаемости, многообразием жалоб, наличием тяжелых осложнений (желудочно-кишечное кровотечение, прободение язвы и др.) трудностями подбора средств терапии, карцерогенностью возбудителя.
Персистенция Helicobacter pylori в организме человека характеризуется не только развитием местного хронического прогрессирующего патологического процесса в слизистой оболочке желудка (воспаление-атрофия-метаплазия-дисплазия-неоплазия), но также и системным действием: развитием нарушения микрофлоры желудочно-кишечного тракта, ростом продукции провоспалительных цитокинов. Helicobacter pylori также рассматривается в качестве триггерного фактора в развитии некоторых внежелудочных, в особенности аутоиммунных, нарушений посредством феномена молекулярной (антигенной) мимикрии. Он относится к механизмам вирулентности микроорганизма и заключается в способности ряда микробов «копировать» антигенную структуру (белки) организма [Ram M, Barzilai О, Shapira Y, Anaya JM, Tincani A, Stojanovich L, Bombardieri S, Bizzaro N, Kivity S, Agmon Levin N, Shoenfeld Y. Helicobacter pylori serology in autoimmune diseases - fact or fiction? Clin Chem Lab Med 2013; 51: 1075-1082].
Необходимость лечения инфекции при ее выявлении объясняется тем, что инвазия микроорганизма в слизистую оболочку желудка приводит к развитию диспепсии и болевого абдоминального синдрома, запускает патологический каскад изменений слизистой оболочки желудка, что повышает риск развития язвенной болезни и аденокарциномы желудка, нарушает микробиоту желудка и нижележащих отделов желудочно-кишечного тракта, а также сопряжена с формированием метаболических и иммунологических нарушений в организме человека.
В лечении заболеваний, ассоциированных с Helicobacter pylori, традиционно используются схемы стандартной эрадикационной терапии, рекомендованные международными и российскими сообществами [Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л., Шептулин А.А., Трухманов А.С., Баранская Е.К., Абдулхаков Р.А., Алексеева О.П., Алексеенко С.А., Дехнич Н.Н., Козлов Р.С., Кляритская И.Л., Корочанская Н.В., Курилович С.А, Осипенко М.Ф., Симаненков В.И., Ткачев А.В., Хлынов И.Б., Цуканов В.В. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori у взрослых. Рос. Журн. гастроэнтерол. Гепатол. Колопроктол. 2018; 28(1). - С. 55-70; Лазебник Л.Б., Ткаченко Е.И., Абдулганиева Д.И., Абдулхаков Р.А., Абдулхаков С.Р., Авалуева Е.Б., Ардашская М.Д., Ахмедов В.А., Бордин Д.С., Бурков С.Г., Бутов М.А., Голованова Е.В., Голофеевский В.Ю., Гриневич В.Б., Джулай Г.С., Добрица В.П., Еремина Е.Ю., Жигалова Т.Н., Иваников И.О., Исаков В.А. и др. VI национальные рекомендации по диагностике и лечению кислотозависимых и ассоциированных с Helicobacter pylori заболеваний (VI московские соглашения) // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2017; №2 (138): 3-21; Malfertheiner P., Megraud F., O'Morain С.А., Gisbert J.P., Kuipers E.J., Axon A.T., Bazzoli F., Gasbarrini А., Atherton J., Graham D.Y., Hunt R., Moayyedi P., Rokkas Т., Rugge M., Selgrad M., Suerbaum S., Sugano K., El-Omar E.M. et al. Management of Helicobacter pylori infection-the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017; 66: 6-30].
В эти схемы входит антисекреторный препарат (как правило, ингибитор протонной помпы) и 2-3 антибиотика в зависимости от схемы на 10-14 дней. Проведение антихеликобатерной терапии по стандартным схемам способствует купированию диспепсических симптомов, абдоминальной боли, ранней профилактике рака желудка, но не оказывает позитивного влияния на микробиоту желудочно-кишечного тракта.
Данный вариант терапии имеет ряд недостатков: формирование антибиотикорезистентности (например, в Санкт-Петербурге резистентность к кларитромицину прогрессивно растет и составляет 25%, что выше допустимых пороговых значений его использования в схемах эрадикации); большое число побочных эффектов, что снижает приверженность пациентов к лечению; повышенный риск развития дисбиоза кишечника и антибиотико-ассоциированной диареи [Симаненков В.И., Захарова Н.В., Жебрун А.Б., Сварваль А.В., Савилова И.В., Фермам Р.С. Резистентность Helicobacter pylori к антимикробным препаратам по результатам бактериологического тестирования // Лечащий врач. 2015 - №4. С. 91; Успенский Ю., Барышникова Н. Lactobacillus reuteri против Helicobacter pylori: эффективность in vitro и in vivo II Врач. - 2019; 30 (12): 37-42].
Отсроченным негативным эффектом проведения массовой эрадикации с использованием антибиотиков может быть формирование перекрестной резистентности к этим антибактериальным препаратам других микроорганизмов, что затруднит лечение многих инфекционных заболеваний.
Предпосылками к разработке альтернативных вариантов лечения Helicobacter pylori-ассоциированных заболеваний являются возрастающая резистентность микроорганизма к антибиотикам и снижение приверженности пациентов к лечению из-за необходимости приема одновременно 3-4 препаратов с комплексом побочных эффектов.
В качестве дополнения к массивной и тяжело переносимой стандартной эрадикационной терапии патогенетически обоснованным является использование пробиотических препаратов, что улучшает переносимость лечения, повышает приверженность пациентов к лечению и, следовательно, повышает эффективность лечения [Malfertheiner P., Megraud F., O'Morain С.A., Gisbert J.P., Kuipers E.J., Axon A.T., Bazzoli F., Gasbarrini A., Atherton J., Graham D.Y., Hunt R., Moayyedi P., Rokkas Т., Rugge M., Selgrad M., Suerbaum S., Sugano K., El-Omar E.M. et al. Management of Helicobacter pylori infection-the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017; 66: 6-30]. Однако, это увеличивает число принимаемых препаратов и не решает проблемы антибиотикорезистентности.
В ряде метаанализов показано, что использование пробиотиков в дополнение к стандартной антихеликобактерной терапии способствует как повышению эффективности эрадикации микроба, так и снижению частоты побочных эффектов (табл. 1) [Szajewska H., Horvath A., Piwowarczyk A. Metaanalysis: the effects of Saccharomyces boulardii supplementation on Helicobacter pylori eradication rates and side effects during treatment. // Aliment. Pharmacol. Ther - 2010; 32: 1069-79; Molina-Infante J., Gisbert J. Probiotics for Helicobacter pylori eradication therapy: not ready for prime time // Rev. Esp. Enferm. Dig. - 2013; 105 (8): 441-4; Tong J., Ran Z, Shen J. et al. Meta-analysis: The effect of supplementation with probiotics on eradication rates and adverse events during Helicobacter pylori eradication therapy // Aliment. Pharmacol. Ther. - 2007; 25: 155-68; Wang Z., Gao Q., Fang J. Meta-analysis of the efficacy and safety of Lactobacillus-containing and Bifidobacterium-containing probiotic compound preparation in Helicobacter pylori eradication therapy // J. Clin. Gastroenterol. - 2013; 47: 25-32; Sachdeva A., Nagpal J. Meta-analysis: Efficacy of bovine lactoferrin in Helicobacter pylori eradication // Aliment. Pharmacol. Ther. - 2009; 29: 720-30; Zou J., Dong J., Yu X. Meta-analysis: The effect of supplementation with lactoferrin on eradication rates and adverse events during Helicobacter pylori eradication therapy // Helicobacter. - 2009; 14: 119-27; Sachdeva A., Nagpal J. Effect of fermented milk-based probiotic preparations on Helicobacter pylori eradication: A systematic review and meta-analysis of randomized-controlled trials // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. - 2009; 21: 45-53; Dinleyici E., Kara A.., Ozen M. et al. Saccharomyces boulardiiCNCM I-745 in different clinical conditions // Expert Opin. Biol. Ther. - 2014; 14: 1593-609].
Использование препаратов для улучшения микробиоты желудочно-кишечного тракта не только повышает процент эффективности эрадикации, но и улучшает состояние кишечной микробиоты: повышается содержание представителей облигатной микрофлоры (бифидобактерий и лактобацилл), снижается уровень условно-патогенных микроорганизмов. Ранее нами рассматривалось влияние комбинации стандартной тройной эрадикационной терапии (ингибитор протонной помпы, амоксициллин, кларитромицин) и Enterococcus faecium L3 на уровень эрадикации и состояние микрофлоры толстой кишки. Получены результаты: повышение эффективности терапии на 15%, более быстрое и полное купирование абдоминальной боли и симптомов диспепсии, улучшение состава кишечной микробиоты (табл. 2) [Барышникова Н.В. Клинико-микробиологическая характеристика микробиоценоза кишечника и коррекция его нарушений у больных хроническим гастродуоденитом, ассоциированным с Helicobacter pylori. Автореферат дис. на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. СПб.: 2006. - 24 с.].
В Пятом Маастрихтском соглашении указано, что некоторые пробиотики могут оказывать положительный эффект на эрадикацию Helicobacter pylori не только за счет уменьшения частоты побочных эффектов антихеликобактерной терапии, но и в результате ингибирования роста микроорганизма за счет выработки антимикробных продуктов или конкуренции за выживание [Malfertheiner P., Megraud F., O'Morain С.et al. On behalf of the European Helicobacter and Microbiota Study Group and Consensus panel. Management of Helicobacter pylori infection - the Maastricht V/Florence Consensus Report // Gut. - 2017; 66: 6-30]. Это послужило началом к проведению исследований по изучению эффективности монотерапии пробиотиками в лечении инфекции Helicobacter pylori.
Монотерапия пробиотиками рекомендована пациентам с Helicobacter pylori-ассоциированными хроническим гастродуоденитом и язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки вне обострения, пациентам, инфицированным низкопатогенными штаммами микроорганизма или с непереносимостью антибиотиков, а также при категорическом нежелании пациента принимать антибиотики, может назначаться лицам, инфицированным Helicobacter pylori без клинических проявлений хеликобактериоза, членам семей пациентов, инфицированных Helicobacter pylori. Длительность монотерапии пробиотиками должна быть не менее месяца.
Существует ряд как российских, так и зарубежных исследований, подтверждающих эффективность пробиотиков в качестве монотерапии для эрадикации Helicobacter pylori. Так, при использовании в качестве монотерапии пробиотика на основе молочнокислых бактерий у больных с хроническим гастродуоденитом, ассоциированным с Helicobacter pylori, в стадии обострения эрадикация была достигнута в 48% случаев [Козлова Д.И. Состояние кишечного микробиоценоза и течение H pylori-ассоциированного гастрита в условиях эрадикационной и синбиотической терапии. Автореф. дис. … канд. мед. наук. СПб, 2004; 21 с.].
Другими авторами были получены данные, свидетельствующие о том, что использование пробиотика на основе Lactobacillus acidophilus приводило к эрадикации у 6 из 14 пациентов [Canducci F., Cremonini F., Armuzzi A. et al. Probiotics and Helicobacter pylori eradication. // Dig. Liver Dis.: official journal of the Italian Society of Gastroenterology and the Italian Association for the Study of the Liver. - 2002; 34 (suppl. 2): 81-3].
Монотерапия двумя разными пробиотиками на основе Bacillus subtilis и Enterococcus fecium L3 обеспечивает достижение уровня успешной эрадикации Helicobacter pylori (39 и 41% соответственно), достоверно превышающего процент спонтанной эрадикации (3-5%) [Суворов А.Н., Барышникова Н.В., Сварваль А.В. и др. Возможности некоторых пробиотических штаммов в эрадикации Helicobacter pylori in vitro и in vivo II Фарматека, 2018; 2 (355): 74-78].
Многообещающим и перспективным с лечебной точки зрения является не только клиническая эффективность пробиотиков, но и результаты исследований in vitro, демонстрирующие ингибирующее действие пробиотических штаммов в отношении Helicobacter pylori.
Например, ингибирующая активность Enterococcus faecium L3 в отношении 14 штаммов Helicobacter pylori in vitro составила 78% [Суворов А.Н., Барышникова Н.В., Сварваль А.В. и др. Возможности некоторых пробиотических штаммов в эрадикации Helicobacter pylori in vitro и in vivo II Фарматека. - 2018; 2 (355): 74-78].
Однако использование монотерапии пробиотиками, несмотря на высокую безопасность, также имеет свои недостатки: относительно низкий процент эффективности эрадикации и длительный курс приема (1 месяц и более).
Кроме того, есть мнение, что некоторые препараты пробиотического ряда, которые можно принимать совместно с антибиотиками, имеют гены устойчивости к антибиотикам и могут их передать другим микроорганизмам [Ботина С.Г., Полуэктова Е.У., Глазова А.А., Захаревич Н.В., Коробан Н.В., Зинченко В.В., Бабыкин М.М., Жиленкова О.Г., Амерханова A.M., Даниленко В.Н. Характеристика устойчивости к антибиотикам потенциальных пробиотических бактерий рода Lactobacillus из гастроинтестинальной микробиомы человека // Микробиология. 2011. Т. 80, № 2. - С. 175-183].
Использование «чужеродных» пробиотических штаммов не оказывает столь значимого антагонистического влияния на Helicobacter pylori и столь выраженного позитивного влияния на микрофлору желудочно-кишечного тракта, т.к. проходят транзитом по кишке.
Инновационным способом повышения эффективности эрадикации при отсутствии негативного влияния на микрофлору стала разработка аутопробиотиков, которые не «калечят» собственную микробиоту и дольше задерживаются в кишке, что позволяет использовать короткие курсы лечения.
Задачей настоящего изобретения является улучшение качества жизни больных страдающих гастритом, ассоциированным с хеликобактериозом, путем введения аутопробиотических энтерококков, приводящих к эрадикации возбудителя, нормализации микробиоты кишечника и исчезновения симптомов диспепсии, что является не только безопасным для пациента (нет риска развития антибиотикоассоциированной диареи, дисбиоза кишечника и других побочных эффектов антибиотиков, не требует учета показателей антибиотикорезистентности, но и в отличие от пробиотиков, ингибирующих рост облигатных представителей микробиоты, в ряде случаев вызывающих инфекционную патологию и дисбиотические состояния, являющихся естественным компонентом микробиоценоза организма хозяина.
Сущность изобретения состоит в том, что у пациента, который в течение не менее 10 дней не принимал антибиотики, пробиотические продукты и препараты, осуществляют взятие фекалий в количестве не менее 1 мл, из них выделяют клоны индигенных штаммов Enterococcus faecium, используя плотную питательную среду, содержащую азид натрия и краситель кристаллический фиолетовый, затем по характеру окраски осуществляют отбор колоний, получают чистые культуры путем пересева трех колоний розового цвета с бордовым центром на три сектора чашки Петри с такой же средой, после чего инкубируют в термостате в аэробных условиях при t=37°C, проверяют на отсутствие генов патогенности при помощи ПЦР, отбирают клоны, лишенные факторов патогенности, которыми заквашивают соевый гидролизат в объеме не менее 10 мл на литр.
Приготовление 5% питательной среды.
Безлактозную сухую белково-витаминную смесь «Супер ЛФ» разводят в небольшом количестве подогретой до 40°С дистиллированной воды в соотношении 1:1 до получения однородной суспензии. Полученную суспензию выливают через фильтр из 4 слоев медицинской марли и разводят оставшимся количеством дистиллированной воды. Соотношение компонентов по весу в конечной суспензии должно быть: ДВ:СЛФ=95:5, где ДВ - дистиллированная вода, СЛФ - «Супер ЛФ». Полученную суспензию разливают в пластиковые бутыли по 1-2 л и автоклавируют при температуре 120°С и давлении 1,2 Атм в течение 15-30 минут, затем остужают до температуры 40°С.
Приготовление посевной дозы.
Стерильно берут навеску массой 50 mg лиофилизированной стартовой культуры и инокулируют 2 мл охлажденной до 40°С 5% питательной среды. Выращивают в суховоздушном термостате в течение 14-16 часов при температуре 37°С.
Выросшую культуру клеток переносят в 300 мл стерильной 5% питательной среды, охлажденной до 40°С и выращивают в суховоздушном термостате в течение 14-16 часов при температуре 37°С. Полученная биомасса является посевной дозой для 1-2 л питательной среды.
Выбирают ту из заквасок, которая раньше других изменила структуру гидролизата, и используют ее для приготовления двух литров индивидуального аутопробиотического продукта с содержанием не менее 108 КОЕ на 1 мл, который вводят пациенту перорально по 50 мл 2 раза в день курсом не менее 20 дней.
Способ получения аутопробиотика на основе Enterococcus faecium, представителя индигенной микрофлоры кишечника-хозяина, был защищен патентом RU № 2460778.
Техническим результатом данного изобретения является лечение гастрита, ассоциированного с хеликобактериозом, при помощи монотерапии аутопробиотиком, вызывающего эрадикацию возбудителя, а также восстановление нарушения кишечного микробиоценоза с последующим исчезновением диспепсических симптомов.
Пример 1
Для изучения эффективности заявленного изобретения было проведено исследование в системе in vitro для сравнения антихеликобактерного эффекта различных пробиотиков и аутопробиотика (индигенных энтерококков, выделенных из кишечника или из желудка больных гастритом, ассоциированным с инфекцией Helicobacter pylori.
На фиг. 1 представлены результаты исследования антагонистической активности пробиотиков и аутопробиотиков (% чувствительных клинических изолятов Helicobacter pylori).
При исследовании 40 клинических изолятов Helicobacter pylori, выделенных из биоптатов желудка (коллекция НИИ им. Пастера, идентификации патогенов), показано, что максимальную эффективность проявили пробиотики ламинолакт, штаммы аутопробиотиков (5 индигенных штаммов Е. faecium). Аутопробитические и пробиотические энтерококки действовали на 78 и 79% клинических изолятов, соответственно. Латобактерин, бактистатин были эффективны только 38 и 58% случаев, а колибактерин не ингибировал рост ни одного штамма Helicobacter pylori.
Пример 2
Пробиотическая или аутопробиотическая закваска, предназначенная для лечения инфекции Helicobacter pylori, была изготовлена для восьми пациентов.
В трех случаях из восьми удалось приготовить закваску на основе индигенных энтерококков. Для пяти пациентов закваска была изготовлена на основе штамма Е. faecium L3. У этих пациентов был проведен контроль эффективности лечения.
Контроль эффективности лечения проводился с использованием иммунохроматографического теста через 2 месяца после окончания терапии. У трех пациентов после приема закваски, изготовленной на основе индигенных энтерококков результат контрольного исследования был отрицательным. У двух пациентов, применявших закваску на основе штамма Е. faecium L3, результат был положительным.
Кроме того, результаты терапии отслеживали при помощи анкетирования до и после терапии. Как видно из данных, представленных в таблицах 3 и 4, все анализируемые симптомы исчезали после проведения терапии пробиотиком и аутопробиотиком.
Также были исследован состав микробиоты кишечника, показано, что после только терапии аутопробиотиком не были обнаружены признаки дисбиотического состояния ни у одного пациента.
Несмотря на то, что на фоне пробиотических энтерококков также исчезали диспепсические симптомы, преимущества при эрадикации и влияния на микробиоту были в случае аутопробиотика более и песрпективными для проведения монотерапии гастритов, ассоциированных с хеликобактериозом. Дополнительным преимуществом является ожидаемое длительное или даже постоянное нахождение аутопробиотических штаммов в организме.
Пример 3. Использование пробиотика
Пациентка Г., 24 года. Консультация 1. Жалобы на: боль в эпигастральной области, беспокоящую натощак, заедаемую, периодически возникающую изжогу, отрыжку воздухом и кислым, урчание в животе, вздутие живота, избыточное отхождение газов через кишечник, которое сопровождается уменьшением чувства вздутия живота, чередование неоформленного и плотного стула, чувство неполного опорожнения кишечника.
Из анамнеза: вышеописанные жалобы беспокоят около двух лет. Ранее обследовалась, выявлялся гастрит при эндоскопическом исследовании, обследование на Н. pylori не проводилось, принимала ранее ингибиторы протонной помпы с непродолжительным положительным эффектом. Ухудшение самочувствия с сентября 2019, когда после психоэмоционального напряжения и погрешностей в питании пациентка стала отмечать усиление болей в эпигастрии, учащение эпизодов изжоги, отрыжки кислым, появление тошноты, урчания в животе, нарушение стула, вздутие в животе, усиление отхождения газов через кишечник. В связи с ухудшением самочувствия пациентка в октябре 2019 года обратилась к гастроэнтерологу в МНЦ «ИЭМ».
Объективно: состояние удовлетворительное. Питание не снижено. Кожные покровы и видимые слизистые чистые, обычной окраски. Язык обложен налетом белого цвета. Дыхание везикулярное, тоны сердца ясные, ритмичные. АД-120/80 мм рт.ст., пульс 72 уд. в мин. При пальпации живот мягкий, болезненный в эпигастральной области, печень, селезенка не увеличены. Слепая и сигмовидная кишка урчат при пальпации. Стул кашицеобразный, без примесей слизи и крови (со слов).
Пациентка обследована в условиях медицинского центра. По результатам ФГДС от 09.10.2019. выявлено: Недостаточность кардии. Эритематозная гастропатия. Проведена комплексная диагностика, направленная на выявление инфекции Helicobacter pylori. Для диагностики инфекции Helicobacter pylori были использованы следующие методы: биохимический (оценка уреазной активности двух биоптатов из антрального отдела желудка, взятых во время проведения ФГДС), молекулярно-генетический (ПЦР 2 биоптатов из антрального отдела желудка), гистологический (анализ 1 биоптата из тела желудка и 1 биоптата из антрального отдела желудка). Инфекция Helicobacter pylori подтверждена всеми используемыми методами. Клинический и биохимический анализы крови, общий анализ мочи и анализ кала без особенностей. ФКС проведена для исключения органической патологии толстой кишки - без изменений. На основании жалоб, анамнеза заболевания, объективных данных и результатов обследования был установлен диагноз: хронический HP-ассоциированный гастрит, обострение. Синдром раздраженной кишки, смешанная форма.
Назначено лечение: пробиотик, содержащий Bacillus subtilis, 2 капсулы 2 раза в день после еды 1 месяц в монотерапии, диета, рекомендации по модификации образа жизни
Консультация 2: ПОСЛЕ применения пробиотика.
После применения пробиотика пациентка отметила улучшение самочувствия: исчезновение боли в животе, тошноты, чувства распирания, переполнения, вздутия в животе, нормализацию стула. При осмотре: состояние удовлетворительное. Кожные покровы чистые, обычной окраски. Слизистые розовые. Язык чистый, влажный. Дыхание везикулярное, тоны сердца ясные, ритмичные. АД-110/70 мм рт.ст., пульс 682 уд. в мин. При пальпации живот мягкий, безболезненный во всех отделах, печень, селезенка не увеличены. Стул оформленный, без патологических примесей (со слов).
Консультация 3. Через два месяца после использования пробиотика.
Пациентка отмечает ухудшение самочувствия со стороны толстой кишки. Жалобы на чувство распирания, переполнения, вздутия в животе, послабление стула. При осмотре: состояние удовлетворительное. Кожные покровы чистые, обычной окраски. Слизистые розовые. Язык чистый, влажный. Дыхание везикулярное, тоны сердца ясные, ритмичные. АД-120/80 мм рт.ст., пульс 66 уд. в мин. При пальпации живот мягкий, безболезненный во всех отделах, печень, селезенка не увеличены, петли толстой кишки урчат при пальпации. Стул полуоформленный, без патологических примесей (со слов).
Проведено контрольное исследование, направленное на выявление Helicobacter pylori. Для контроля эффективности эрадикационной терапии использовался тот же комплекс методов, что и при первичной диагностике инфекции. Результат контрольного исследования отрицательный.
Пример 4. Использование аутопробиотика
Пациентка А., 27 лет. Консультация 1. Жалобы на: сильные боли в верхней части живота, часто возникающую изжогу, отрыжку кислым и горьким, боли в животе натощак, тошноту, урчание в животе, чувство распирания, переполнения, вздутие живота, отхождение газов через кишечник, которое сопровождается уменьшением чувство вздутия живота, чередование неоформленного и жесткого стула, чувство неполного опорожнения кишечника.
Из анамнеза: вышеописанные жалобы беспокоят более трех лет. Последнее ухудшение самочувствия с мая 2019, когда после психоэмоционального напряжения и допущения погрешностей в питании пациентка стала отмечать усиление болей в верхней части живота, учащение эпизодов изжоги, отрыжки кислым и горьким, появление тошноты, урчания в животе, чувство распирания, переполнения, нарушение стула, вздутие в животе, усиление отхождения газов через кишечник. В связи с ухудшением самочувствия пациентка в июне 2019 года обратилась к гастроэнтерологу в МНЦ «ИЭМ».
Объективно: состояние удовлетворительное. Питание нормальное. Кожные покровы чистые, обычной окраски. Слизистые розовые. Язык обложен налетом белого цвета. Дыхание везикулярное, тоны сердца ясные, ритмичные. АД 110/70 мм рт.ст., пульс 68 уд/мин. При пальпации живот мягкий, болезненный в эпигастральной и пилородуоденальной областях, печень, селезенка не увеличены. Стул кашицеобразный, без примесей слизи и крови (со слов).
Пациентка обследована в условиях медицинского центра. По результатам ФГДС от 03.06.2019. выявлено: Недостаточность кардии. Эритематозная гастропатия. Дуодено-гастральный рефлюкс. Проведена комплексная диагностика, направленная на выявление инфекции Helicobacter pylori. Для диагностики инфекции Helicobacter pylori были использованы следующие методы: биохимический (оценка уреазной активности биоптатов, взятых вовремя ФГДС), молекулярно-генетический (ПЦР биоптатов), бактериологический, иммунохроматографический метод (определение антигена Helicobacter pylori в кале проводили с использованием тест-системы H&R Н. pylori Vegal Farmaceutica S.L., Испания).
На фиг. 2 представлены результаты иммунохроматографического исследования у больной А. до и после введения аутпробиотика: «А» - отрицательный результат, «В» - положительный результат. Инфекция Helicobacter pylori подтверждена всеми используемыми методами. Клинический и биохимический анализы крови от 05.06.19. без особенностей. На основании жалоб, анамнеза заболевания, объективных данных и результатов обследования был установлен диагноз: хронический HP-ассоциированный гастрит, обострение. Синдром раздраженного кишечника, смешанная форма.
Существенным преимуществом предлагаемого метода является то, что при использовании индигенных бактерий, выделенных индивидуально из организма и вводимых повторно для коррекции дисбиотических состояний, отсутствует конфликт с иммунной системой и с другими представителями собственной микробиоты пациента.
Способ монотерапии гастрита, ассоциированного с инфекцией Helicobacter pylori, путем микробиологической коррекции дисбиоза желудка и эрадикации возбудителя, заключающийся в том, что у пациента в период ремиссии осуществляют взятие фекалий в количестве не менее 1 мл, из них выделяют клоны индигенных штаммов Enterococcus faecium, используя плотную питательную среду, содержащую азид натрия и краситель кристаллический фиолетовый, затем по характеру окраски осуществляют отбор колоний, получают чистые культуры путем пересева трех колоний розового цвета с бордовым центром на три сектора чашки Петри с такой же средой, после чего инкубируют в термостате в аэробных условиях при t=37°C, проверяют на отсутствие генов патогенности при помощи ПЦР, отбирают клоны, лишенные факторов патогенности, которыми заквашивают соевый гидролизат в объеме не менее 10 мл на литр, затем выбирают ту из заквасок, которая раньше других изменила структуру гидролизата, и используют ее для приготовления двух литров индивидуального аутопробиотического продукта с содержанием не менее 108 КОЕ на 1 мл, который вводят пациенту перорально по 50 мл 2 раза в день курсом не менее 20 дней.
