Способ профилактики язвообразования на слизистой оболочке желудка

Изобретение относится к медицине и касается способа профилактики язвообразования на слизистой оболочке желудка, включающего пероральное применение гомогенного геля, содержащего хитозан, где используют гель в дозе 0,16 мл/100 г массы тела однократно за 1 ч до воздействия ульцерогенного фактора диклофенака натрия в дозе 50 мг/кг, при этом 100 мл геля включает 1 г хитозана высокомолекулярного с молекулярной массой 500-700 кДа и со степенью деацетилирования 80%, 0,437 г декспантенола, 0,25 мл ледяной уксусной кислоты и воду до 100 мл. Изобретение обеспечивает снижение количества язв на 15,0%, площади язв на 62,9%. 1 пр., 3 ил.

 

Лечение язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки до настоящего времени остается актуальной проблемой гастроэнтерологии, что обусловлено широкой распространенностью заболевания.

Для лечения кислотозависимых заболеваний, включая язвенную болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки применяют различные противоязвенные средства: ингибиторы протонной помпы (ИПП) (омепразол [1] и др.), блокаторы Н2-гистаминовых рецепторов (ранитидин) [2], фамотидин и др.), синтетические простагландины (энпростил, мизопростол [3]), стимуляторы выработки слизи (карбеноксолон [4]), М-холиноблокаторы (пирензепин [5]), блокаторы гастриновых рецепторов (проглумид), а также гастропротекторы, такие как сукралфат [6], висмута трикалия дицитрат, антациды (алгельдрат и др.) [7]. Перечисленные группы лекарственных препаратов, кроме гастропротекторов, в основном подавляют секреторную функцию клеток слизистой оболочки желудка, не оказывая при этом гастропротекторного и противовоспалительного действия, а также проявляют ряд серьезных отрицательных эффектов [7]. Кроме того, следует отметить небольшой арсенал лекарственных форм противоязвенных препаратов - в основном это таблетки, капсулы и растворы для инъекций [7].

При этом в настоящее время на фармацевтическом рынке существует большое разнообразие лекарственных форм, такая лекарственная форма, как гель обладает рядом преимуществ, в числе которых удобство, безболезненность и простота применения, способность образовывать на поверхности тонкую пленку, что обеспечивает защиту от микробной контаминации, а также способность пролонгировать действие лекарственных веществ, что важно как при наружном применении при поверхностных повреждениях кожных покровов, так и при лечении заболеваний желудочно-кишечного тракта. Физико-химические особенности гелей позволяют рассматривать их как перспективную лекарственную форму для приема внутрь. Гели для перорального применения сочетают преимущества твердых и жидких пероральных лекарственных форм (ЛФ) [8]. Удобство применения позволяет использовать лекарственную форму гель для приема внутрь для особых категорий пациентов, в том числе в педиатрической и гериатрической практике, а также для пациентов, страдающих хроническими заболеваниями, в том числе связанными с нарушениями глотания [9].

При разработке новых высокоэффективных гелей необходимо учитывать физико-химические свойства вспомогательных веществ, их влияние на терапевтическую эффективность, стабильность и фармакокинетику лекарственных препаратов. Многообразие функций и большой ассортимент вспомогательных веществ, их рациональное сочетание с лекарственными субстанциями, а также использование оптимальной технологической схемы изготовления мягких лекарственных форм, таких как гель, позволяет значительно расширить их терапевтические возможности.

Невзирая на значительные успехи, достигнутые в области создания синтетических противоязвенных средств, природные субстанции продолжают оставаться одним из перспективных источников для разработки новых препаратов, и наряду с высокой эффективностью отличаются от многих синтетических соединений высоким профилем безопасности. Среди природных сырьевых источников, содержащих биологически активные вещества противоязвенного действия, следует выделить хитозан и декспантенол.

Декспантенол (CAS: 81-13-0) - производное пантотеновой кислоты, относящейся к витаминам группы В, по химической структуре декспантенол - это амид монокарбоновой кислоты, который представляет собой 3,3-диметилбутанамид, замещенный гидроксигруппами в положениях 2 и 4 и 3-гидроксипропильной группой в карбомильном азоте. Известно профилактическое использование декспантенола сразу после крупной абдоминальной операции для того чтобы свести к минимуму возможность формирования синдрома паралитического кишечника, атонии, вызывающей вздутие живота; послеоперационной или послеродовой задержки газов, послеоперационной задержки возобновления моторики кишечника; паралитической непроходимости кишечника [10]. Многие данные подтверждают эффективность и высокий профиль безопасности местного наружного применения декспантенола при дерматологических заболеваниях и различных повреждениях кожных покровов, таких как ссадины на коже, мелкие травмы, хронические трофические язвы, пролежни, анальные трещины, при трансплантации кожи, ожогах, пеленочном дерматите, а также для профилактики и лечения трещин молочной железы или реакции раздражения кожных покровов. Недавние доказательства подтверждают эффективность декспантенола на экспериментальных моделях повреждений кожи, наблюдалось значительное улучшение и ускорение заживления ран [11, 12]. Обнаружено, что подобно положительному влиянию на регенерацию кожных покровов, местное применение декспантенола эффективно для лечения или профилактики синдрома раздражающего действия на кожные покровы [13]. В целом, наличие ранозаживляющей активности в сочетании с высокой безопасностью дексапантенола (ЛД50 у мышей перорально 15000 мг/кг [14]) представляется важным преимуществом при использовании данного вещества внутрь в качестве противоязвенного средства. Известно протективное влияние декспантенола при колите, вызванном уксусной кислотой у крыс, было показано, что лечение декспантенолом обеспечивает биохимические и гистопатологические улучшения, оказывая антиоксидантное действие при колите [15]. Известно, что декспантенол в периферических тканях окисляется до пантотеновой кислоты. Известно, что пантотеновая кислота и ее производные повышают уровни глутатиона (GSH) и кофермента А (СоА) и усиливают синтез АТФ, что играет важную роль в защите клеток от окислительного стресса и воспалительной реакции [16-19]. Однако в настоящее время в РФ отсутствуют лекарственные препараты дексапантенола для приема внутрь, декспантенол применяется только местно наружно в форме кремов, мазей, спреев [7], при этом отсутствуют сведения о его доказанной противоязвенной активности, что характеризует научную новизну предлагаемого изобретения.

В качестве гелеобразующей основы в настоящем изобретении предлагается использование природного полисахарида хитозана. Хитозан (CAS: 9012-76-4) - деацетилированное производное хитина, представляющее собой полимер, состоящий из N-ацетил-2-амино-2-дезокси-D-глюкопиранозы, связанной 1-4- гликозидными связями [20]. Известно, что хитозан является нетоксичным, биосовместимым ингредиентом, при пероральном применении мышам LD50 превышает 16 г/кг, что классифицируется как нетоксичное вещество [21]. В дополнение к тому что, хитозан считается вспомогательным веществом гелеобразователем, в ряде исследований российских и зарубежных ученых доказаны его различные биологические свойства, такие как противовоспалительное, ранозаживляющее, антибактериальное, иммуностимулирующее, гемостатическое и др. [22-26], которые позволяют считать хитозан перспективным активным ингредиентом для разработки новых лекарственных препаратов для лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта. При изучении антибактериального действия хитозана и его производных на Helicobacter pylori in vitro показано, что хитозан и его производные обладают активностью против H.pylori. На антибактериальную активность влияют многие факторы, так антибактериальная активность хитозанов возрастает с уменьшением значения рН от рН 6 до рН 4. При степени деацетилирования между 70% (DD 70) для хитозана, 88,5% степени деацетилирования (DD 88,5) хитозана и карбоксиметилхитозана (Р<0,05-0,01) степень бактериостаза варьировалась от высокой до низкой. Структура, химическая модификация и молекулярный вес хитозана также влияют на антибактериальную активность [27]. Использованный в настоящем изобретении хитозан имеет степень деацетилирования 80% образует гель с степенью рН близкой к 5,26, что так же может являться важным компонентом механизмов фармакотерапевтической эффективности хитозана при лечении язв, ассоциированных с Helicobacter pylori.

В отдельных экспериментальных и клинических исследованиях доказано, что хитозан и его производные проявляют противоязвенную активность, но в данных исследованиях не указаны определенные лекарственные формы, и при этом упоминается об использовании хитозана у крыс в дозах, которые при перерасчете для человека являются очень большими и не вполне удобны для клинического применения. Так, в исследовании авторов Ito и др. [28] сравнивали эффекты хитозана с низкой молекулярной массой (LMW) (MW 25000-50000), хитозана с высокой молекулярной массой (HMW) (MW 500000-1000000) и хитина на вызванное этанолом повреждение слизистой оболочки желудка и заживление язв желудка у крыс с использованием в качестве препарата сравнения сукральфата и циметидина, суспендировали эти соединения в 1% гуммиарабике. Сукралфат в пероральных дозах 250 и 500 мг/кг предотвратил язвы на 93% и 99% соответственно. Циметидин в пероральной дозе 100 мг/кг предотвращал повреждение слизистой оболочки на 61%. LMW хитозан в пероральных дозах 250, 500 и 1000 мг/кг предотвратил повреждение слизистой оболочки желудка на 87%, 95% и 99% соответственно. HMW хитозан в пероральных дозах 250 и 500 мг/кг предотвращал повреждение слизистой оболочки на 64% и 83% соответственно.

Другое исследование касается разработки фармацевтической формы, которая максимально прилипает к слизистой оболочке и увеличивает присутствие рантидина в пораженном участке. Предложен гидрогель рантидина, содержащий полимерную смесь хитозана и гидроксипропилметилцеллюлозы (ГПМЦ), получали 9:1 (F1) или смесь карбоксиметилцеллюлозы (натрия) и ГПМЦ 9:1 (F2). 336 мг ранитидина HCl добавляли к каждой формуле через 0,5, 1, 2, 3 и 4 часа в разных группах. Установлено, что оставшееся количество ранитидина через 4 часа после введения мукоадгезивных гидрогелевых формул F1 и F2 составляло 55,8±6,5% и 45,4±3,5% соответственно по сравнению с 5,6±2,1% после приема порошка ранитидина. Исследование показало, что F1 показал большую защитную и терапевтическую активность, чем F2, так как F1 снизил индекс язвы до 0,10±0,10, обеспечив профилактику язв на 96,43%, в то время как F2 снижает язвенный индекс до 1,1±0,24, обеспечив профилактику язв на 60,71%. Кроме того, в обоих экспериментальных группах было выявлено значительное снижение содержания биохимических маркеров ALT, AST и ТАС по сравнению с контрольной группой. Авторы делают вывод о том, что F1 является эффективным составом мукоадгезивного гидрогеля, способным обеспечить адгезию к стенке желудка, сохранение достаточного количества препарата и увеличение его биодоступности и могут быть использованы в качестве пероральной желудочно-кишечной системы контролируемой доставки лекарственного средства, обеспечивающей улучшение его оральной биодоступности [29].

Приведенные данные свидетельствует о высокой перспективности полисахаридов, таких как хитозан, как комплексообразователей с высокой биологической активностью. Известно, что хитозан с низкой молекулярной массой проявляет противоязвенную активность, при этом в доступной патентной и другой научно-технической литературе не обнаружено указания на то, что хитозан с высокой молекулярной массой, в виде геля, в комбинации с декспантенолом, обладает гастропротекторным действием и применяется в качестве лекарственного препарата для лечения и профилактики язвообразования на слизистой оболочке желудка.

Хитозан и декспантенол в комбинации входят в состав некоторых комбинированных изделий медицинского назначения для местного применения. «ЭверсЛайф-СП» производитель ООО «Эвтекс», салфетка противоожоговая, состав на основе хитозан-желатинового полиэлектролитного комлекса с иммобилизованными фармсубстанциями декспантенола, лидокаина и хлоргесидина, нанесенный на салфетку из нетканого полотна размером 18×13 см, применение в качестве обезболивающего, бактерицидного и ранозаживляющего средства [30]

Известны салфетки «Гемостоп-Гель», изготовитель ФГУП Научно-производственный центр «Фармзащита» Федерального медико-биологического агентства, состав: хитозан, аминокапроновая кислота, глицерин, декспантенол, кальция хлорид, лидокаина гидрохлорид, хлоргексидина биглюконат, стерильное средство, применение в качестве перевязочного гемостатического, ранозаживляющего гидрогелевого средства [31].

Известна сыворотка для волос «Schwarzkopf Be Bonacure Q10 Time Restore Rejuvenating Serum - сыворотка для зрелых волос», производитель Schwarzkopf Professional, Германия, жидкость, состав: кератин, пантенол, хитозан, феноксиэтанол и другие вещества, применение для ухода за волосами [32].

Известна стоматологическая гель-паста «Bexident Post», производитель "ISDIN", состав хитозан, хлоргексидин, алантоин, декспантенол, биоадгезивные компоненты, применение для уменьшения воспаления и защиты десны, слизистой оболочки полости рта и пародонта. Изучена активность «Bexident Post» при постинвазивном воспалении, боли и рубцевании у пациентов, подвергшихся стоматологической операции, в течение периода лечения в сравнении с бикарбонатом натрия показано, что «Bexident Post» показал лучшие результаты, чем бикарбонат натрия, в борьбе с болью и воспалением у пациентов, подвергающихся хирургическому вмешательству, обеспечив уменьшение потребления анальгетиков и способствуя лучшему рубцеванию [33].

Известен патент, в котором описан гидрогель для наружного применения в качестве гемостатической, противоожоговой, ранозаживляющей композиции, содержащий водорастворимый гетерополимер соли хитозония в количестве от 1,0 до 10,0 мас. %, субстанцию декспантенола и/или 2-аллилоксиэтанола в количестве от 1,0 до 10,0 мас. %, иммобилизованные лекарственные субстанции аминокапроновой или транексамовой кислоты в количестве от 0,1 до 5,0 мас. % и кальция хлорида в количестве от 0,05 до 2,0 мас. %, иммобилизованные лекарственные субстанции лидокаина или анилокаина в количестве от 0,1 до 5,0 мас. % и хлоргексидина в количестве от 0,005 до 0,1 мас. % и воду. Техническим результатом указанного изобретения по мнению авторов является расширение эксплуатационных возможностей при остановке наружных капиллярных кровотечений, местного лечения поврежденной кожи, незаживающих ран и локальных ожогов [34].

В международной заявке US 2008/0214619 А1 [35] предложено совместное применение препаратов группы ИЛИ и холинергических агонистов для индуцирования быстрого начала действия ИПП, увеличения продолжительности эффективности ИПП и для оптимизации клинической эффективности ИПП, которые могут вводиться в любое время дня и ночи без еды или натощак, на пустой желудок, по мере необходимости или по требованию. ИПП и холинэргический агонист могут вводиться вместе в виде одной разовой дозы в виде жидкости или твердого вещества или вводиться раздельно в виде жидкости или твердого вещества или их комбинации. В качестве холиноэргических агонистов могут быть использованы карбахол, ацеклидин, пилокарпин, ацетилхолин, мускарин, физостигмин, прозерин, пиридостигмин, галантамин, никотин, а так же декспантенол и другие вещества. Авторы указанного патента считают, что предлагаемые способы увеличат продолжительность эффективности ИПП по меньшей мере в 5 раз по сравнению с традиционной эффективностью ИПП, упростят традиционный непрерывный режим ИПП и улучшат комплаентность пациентов [35].

Таким образом, по данным отдельных исследований известна противоязвенная активность хитозана с низкой молекулярной массой и ранозаживляющая активность декспантенола при наружном применении, однако до настоящего времени в России и других странах мира не зарегистрирован лекарственный препарат содержащий хитозан в комбинации с декспантенолом для лечения язв слизистой оболочки желудка, кроме этого применение данной комбинации в лекарственной форме гель для приема внутрь так же является новым, ранее не известным. Известны многокомпонентные композиции различного состава и назначения, содержащие хитозан и декспантенол. Однако, комбинация в форме геля, содержащая хитозан с декспантенолом, имеющая состав хитозан 1 г, декспантенол 0,437 г, ледяная уксусная кислота 0,25 мл, вода дистиллированная до 100 мл, предназначенная для приема внутрь для профилактики язвообразования ранее не известна, что характеризует научную новизну и изобретательский уровень предлагаемого изобретения.

Приведенные данные послужили обоснованием для разработки оптимальной лекарственной формы геля, содержащего хитозан с декспантенолом и изучения его противоязвенных свойств.

Задача настоящего изобретения - расширение арсенала природных средств, обладающих гастропротекторным действием и способных предотвращать ульцерогенное воздействие на слизистую оболочку желудка путем создания на ее поверхности защитного слоя.

Технический результат настоящего изобретения состоит в разработке способа профилактики язвообразования на слизистой оболочке желудка, обеспечивающего при пероральном приеме прозрачного, бесцветного, гомогенного, стабильного при хранении при комнатной температуре, обладающего гастропротекторным действием и способного предотвращать ульцерогенное воздействие на слизистую оболочку желудка, содержащего высокомолекулярный хитозан и декспантенол, геля, в дозе 0,16 мл/100 г массы тела за час до введения ульцерогенного агента диклофенака натрия в дозе 50 мг/кг, обеспечивать снижение количества язв на 15,0%, площади язв на 62,9% и проявляющего противоязвенную активность (отношение индекса Паулса контрольной группы к индексу Паулса опытной группы), равную 2,69.

Включение декспантенола в состав геля, содержащего хитозан, обеспечивает дополнительное протективное влияние на патогенез язвообразования за счет защиты от окислительного стресса и снижения интенсивности воспаления [16, 17, 18, 19].

Технический результат достигается тем, что в способе профилактики язвообразования на слизистой оболочке желудка, включающем пероральное применение гомогенного геля, содержащего хитозан, согласно изобретению используют гель в дозе 0,16 мл/100 г массы тела однократно за 1 ч до воздействия ульцерогенного фактора диклофенака натрия в дозе 50 мг/кг, при этом 100 мл геля включает 1 г хитозана высокомолекулярного с молекулярной массой 500-700 кДа и со степенью деацетилирования 80%, 0,437 г декспантенола, 0,25 мл ледяной уксусной кислоты и воду до 100 мл. На фиг. 1 представлен рисунок 1 - ИК-спектры хитозана, декспантенола и их смеси (хд).

На фиг. 2 приведена таблица 1 - Результаты доклинических исследований по оценке противоязвенной активности геля хитозана с декспантенолом, где: *** - Р<0,001, * - Р<0,05 - достоверность различий при сравнении показателей в опытных группах с контролем.

На фиг. 3. приведен рисунок 2 - Результаты гистологических исследований по оценке противоязвенной активности геля хитозана с декспантенолом, где: 3А) - контрольная группа (язвообразование без лечения), 3Б) - группа гель хитозан с декспантенолом.

Пример 1.

Фармацевтическая разработка состава лекарственной формы гель хитозана с декспантенолом

Разработан и предложен гель для приема внутрь, содержащий хитозан высокомолекулярный с молекулярной массой 500-700кДа и со степенью деацетилирования 80%, уксусную кислоту, декспантенол и воду.

Для добавления в состав геля была выбрана суточная терапевтическая доза декспантенола для взрослых для приема внутрь - 500 мг. Согласно расчетам, добавлено 0,437% декспантенола с уксусной кислотой до добавления хитозана, однако это препятствует полному растворению хитозана, поэтому на следующем этапе исследований сначала приготовлен хитозановый гель и затем добавлен декспантенол, что обеспечило хорошее растворение при перемешивании.

Предлагаемый гель хитозана с декспантенолом имеет следующий состав:

хитозан высокомолекулярный с молекулярной массой 500-700 кДа и

со степенью деацетилирования 80% 1 г

декспантенол 0,437 г

ледяная уксусная кислота 0,25 мл

вода дистиллированная до 100 мл

По внешнему виду гель являлся прозрачным, бесцветным, без примесей и без твердых инородных включений, стабильный при хранении при комнатной температуре в течение 6 месяцев с рН 5,26±0.004.

Физико-химический анализ совместимости компонентов состава геля хитозана с декспантенолом с использованием метода ИК-спектроскопии

Изучен ИК-спектр смеси хитозана и декспантенола. Результаты ИК-спектроскопии представлены на рисунке (Фиг. 1). Согласно ИК-спектрам хитозана, декспантенола и их смеси установлено, что характеристические полосы поглощения, отвечающие валентным колебаниям первичной аминогруппы в области 3400-3300 см^-1 в молекуле хитозана, гидроксильной группы в области 3550-3200 см^-1 и в области 1680 см^-1, отвечающие валентным колебанием связи карбонила в составе карбамидной группы в молекуле декспантенола, присутствуют в их смеси, а отсутствие новых полос поглощения свидетельствует, что указанные группы не участвуют в ковалентном связывании, таким образом компоненты совместимы.

Результаты доклинических исследований по оценке противоязвенной активности геля хитозана с декспантенолом

Исследования по оценке противоязвенной активности предлагаемого геля, содержащего хитозан с декспантенолом, проведены на 50 белых аутбредных крысах самцах массой тела 220-280 г.

В качестве ульцерогенного агента для моделирования язв на слизистой оболочке желудка использовали диклофенак натрия в виде официального 2,5% раствора (25 мг/мл), вводили однократного перорально в известной по литературным данным «ульцерогенной дозе» составляющей 50 мг/кг, что эквивалентно объему 0,2 мл/100 г массы тела животного.

Опытным группам животных однократно перорально через желудочный зонд вводили изучаемые объекты: гель, содержащий хитозан с декспантенолом в 3-х различных дозах, контрольной группе животных вводили препарат сравнения, относящийся к антацидам - алгельдрат (лекарственный препарат Маалокс). Гель, содержащий хитозан с декспантенолом вводили в дозах 0,08, 0,16 и 0,24 мл/100 г массы тела животного однократно перорально за 1 ч до воздействия ульцерогенного фактора. Маалокс вводили в дозе 0,12 мл/100 г массы тела животного однократно перорально за 1 ч до введения ульцерогенного агента. Интактной группе здоровых животных никакие препараты не вводили, осуществляли эвтаназию одновременно с животными контрольной и опытных групп.

Через 3 ч. после введения диклофенака натрия всех животных контрольной, интактной и опытных групп умерщвляли передозировкой хлороформного наркоза и производили патологоанатомические исследования, обязательным элементом которых являлось извлечение желудков для осмотра состояния слизистой оболочки и проведения измерений. Степень поражения желудка оценивали путем подсчета количества и площади язвенных дефектов на слизистой оболочке желудка животных и выражали в виде индекса Паулса (ИП) исходя из площади язв по известной формуле:

где IP_S - Индекс Паулса по критерию площадь язв, S - суммарная площадь язв в среднем из расчета на одно животное, мм², F - процентное количество животных с язвами в группе, %.

На основании полученных значений Индекса Паулса в контрольной и опытной группах определяли Противоязвенную активность по формуле:

где AU - Противоязвенная активность изучаемого препарата, Ip_k - Индекс Паулса в контрольной группе, IP_e - Индекс Паулса в опытной группе.

Противоязвенную активность (ПА) определяли как отношение ИП контрольной группы к ИП опытной группы.

Результаты исследования представлены в таблице (Фиг. 2).

Установлено, что препарат сравнения маалокс в дозе 0,12 мл/100 г массы тела животного уменьшал количество язв 11,8% и площадь язв 28,1%), проявляя расчетную величину противоязвенной активности 1,33.

Гель, содержащий хитозан и декспантенол в наименьшей из испытанных доз 0,08 мл/100 г массы тела, обеспечил уменьшение количества язв на 9,6%, площади язв по сравнению с контролем на 42,9%, расчетное значение противоязвенной активности составило 1,75, что характеризует наличие умеренной противоязвенной активности. Важно, что противоязвенная активность геля хитозана с декспантенолом в наименьшей дозе 0,08 мл/100 г массы тела превышает эффективность маалокса в испытанной средней терапевтической дозе при однократном пероральном применении. В средней из испытанных доз 0,16 мл/100 г противоязвенная активность геля хитозана с декспантенолом оказалась максимально выраженной и составила 2,69, уменьшение количества язв составило 15,0%, площади язв 62,9%, что свидетельствует о высокой противоязвенной активности. Для наибольшей из испытанных доз 0,24 мл/100 г массы тела животного противоязвенная активность составила 1,7, уменьшение количества язв составило 13,7%, площади язв 41,6%, что так же, как и для низкой дозы характеризует наличие умеренной противоязвенной активности.

Результаты гистологических исследований представлены на рисунках (Фиг. 3).

На гистологических срезах слизистой оболочки желудка здоровых животных интактной группы нормальная слизистая на всем протяжении, единичные фигуры митоза и единичные клетки в апоптозе.

В контрольной группе животных на фоне повреждающего воздействия диклофенака натрия у всех животных на протяжении гистологических срезов множественные язвы, от 3 до 9 протяженных плоских язв до 1/2 толщины слизистой, а также единичные глубокие язвы до 2/3 толщины слизистой. Увеличенное количество слизи на поверхности слизистой оболочки, единичные митозы в неповрежденной слизистой, митозы в зоне деструкции отсутствуют, кариопикноз или некроз с лизисом в зоне деструкции, выявлены лимфоциты, эозинофилы, нейтрофилы. Элементы слизистой в зонах деструкции в состоянии некробиоза, гематин. В перифокальной зоне отек, единичные лимфоциты. В целом выявлены гисто-морфологические признаки выраженного язвообразования и воспалительного процесса на слизистой оболочке желудка.

В опытной группе на фоне применения геля, содержащего хитозан с декспантенолом на протяжении гистологических срезов выявлены от 2 до 6 плоских и кратерообразных язв от 1/3 до 1/2 толщины слизистой, либо 1-2 точечные эрозии до 1/3 толщины слизистой с гематином или единичные точечные эрозия в пределах покровно-ямочного эпителия. Зоны деструкции с гематином, некробиотическими изменениями, в окружении язв увеличено количество лимфоцитов и нейтрофилов, либо увеличено количество эозинофилов с примесью нейтрофилов. В эрозиях элементы слизистой в состоянии некробиоза, гематин. Митозы отсутствуют, вокруг язвенного детрита незначительно увеличено количество лимфоцитов. Собственная пластинка с рыхлыми очаговыми смешанными воспалительными инфильтратами. Стенка желудка на большем протяжении с умеренной смешанной воспалительной инфильтрацией, обычного вида либо у части животных отек слизистой оболочки, гиперпродукция слизи. В целом, выявлено значительное снижение интенсивности язвообразования, признаки умеренного снижения интенсивности воспаления и тенденция к активизации процессов регенерации.

Таким образом, в доклинических исследованиях доказано, что предлагаемый гель, содержащий хитозан 1 г, декспантенол 0,437 г, ледяную уксусную кислоту 0,25 мл и воду до 100 мл с рН 5,26 в оптимальной дозе 0,16 мл/100 г массы тела при однократном пероральном применении за 1 ч до повреждающего воздействия диклофенак натрия в дозе 50 мг/кг оказывает выраженное достоверное дозозависимое противоязвенное действие, значительно превышающее эффективность известного препарата сравнения маалокс.

Список литературы:

1. Janos F., С. Robin Ganellin. Analogue-based Drug Discovery. - Weinheim: WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA. - 2006. - 445 p.

2. Патент German № DE 2734070 A1. «Aminoalkylfuranderivate, process for their production and these compounds containing drug». Barry John Price [et al.]. 09.02.1978.

3. Патент USA №20070071814. «Vaginal tablets comprising misoprostol and methods of making and using the same». Salah Ahmed [et al.]. 29.03.2007.

4. Патент USA №3070623 A. «Pharmacological compounds». Gottfried Siegfried [et al.]. 25.12.1962.

5. Патент на изобретение РФ №2014074 С1. «Холинолитическое средство». Гмиро В.Е., Гавровская Л.К., Харчевникова Е.Н. [и др.] Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 30.12.1987 г.

6. Патент USA № US 4990610 A. «Method for preparing high potency sucralfates Nick V. L., Moo K. P., Yousry S. 05.02.1991.

7. Машковский М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2012. - Т. 1. - 1216 с.

8. Анурова М.Н. Разработка состава и технологии перорального пролонгированного геля нимесулида / М.Н. Анурова, Е.О. Бахрушина, Н.Б. Демина // Фармация. - 2016. - №6. - С. 30-34.

9. Satyanarayana D.A. Gels and jellies as a dosage form for dysphagia patients: A Review / D.A. Satyanarayana, P.K. Kulkarni, H.G. Shivakumar // Current Drug Therapy. - 2011. - №6. - P. 79-86.

10. Drug Facts and Comparisons / edited by K.M. Novak. - Wolters Kluwer Health. St. Louis, Missouri, 2008. - P. 1767.

11. Pugliese P.T. Efficacy of dexpanthenol in wound healing: double-blind assessment of excised wound tissue by ultrasound and histologic examination [French] /P.T. Pugliese, J.C. Farina, Y. Chautems //NouvDermatol. - 1995. - №14. - P. 130-138.

12. Presto S. Stimulation of epidermal regeneration by 5% dexpanthenol: results of a placebo-controlled double-blind study / S. Presto, A. Wehmeyer, A.W. Filbry, [et al.] // H& G Zeitschrift fur Hautkrankheiten. - 2001. - 76(2). - P. 86-90.

13. Bielfeldt S. Efficacy of a new hand care system (cleansing oil and cream) in a model of irritation and in atopic hand eczema [in German]/ S. Bielfeldt, A. Wehmeyer, F. Rippke, [et al.] // Derm Beruf Umwelt. - 1998. - 46. - P. 159-165.

14. Jakob H.M. Information und Beratung "Dexpanthenol" / H.M. Jakob, H.P.T. Ammon, E. Mutschler, [et al.] // Dtsch Apoth Ztg. - 1995. - 135. - P. 2102-2104.

15. Cagin Y.F. Effects of dexpanthenol on acetic acid-induced colitis in rats / Y.F. Cagin, H. Parlakpinar, N. Vardi, [et. al.] // Experimental and Therapeutic Medicine. - 2016. - 12(5). - P. 2958-2964.

16. Cagin Y.F. Beneficial effects of dexpanthenol on mesenteric ischemia and reperfusion injury in experimental rat model / Y.F. Cagin, Y. Atayan, N. Sahin, [et. al.] // Free Radic Res.2016. - 50. P. 354-365.

17. Ermis H. Protective effect of dexpanthenol on bleomycin-induced pulmonary fibrosis in rats / H. Ermis, H. Parlakpinar, G. Gulbas [et. al.] // Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. - 2013. - 386. - P. 1103-1110.

18. Li-Mei W. Anti-inflammatory and Anti-oxidative Effects of Dexpanthenol on Lipopolysaccharide Induced Acute Lung Injury in Mice / W. Li-Mei, T. Jie, W. Shan-He [et. al.] // Inflammation. - 2016. - 39. - P. 1757-1763.

19. Uysal H.B. Protective effects of dexpanthenol against acetaminophen-induced hepatorenal damage / H.B. Uysal, B. Dagli, M. Yilmaz [et. al.] // Biomed Res. - 2017. - 28. - P. 740-749.

20. Хитин и хитозан: получение, свойства и применение / Скрябина К.Г., Вихоревой Г.А., Варламова В.П. - Москва: Наука, 2002. - С. 368.

21. Arai K. Toxicity of chitosan / K. Arai, Т. Kinumaki, Т. Fujita // Bulletin Of Tokai Regional Fisheries Research Laboratory. - 1968. - 56. - P. 89-94.

22. Патент на изобретение ВОИС № WO 2016155749 A1 WIPO. «Кровоостанавливающее и ранозаживляющее средство». Корягин А.С., Мочалова А.Е., Смирнова Л.А. [и др.] Зарегистрировано в Всемирная организация интеллектуальной собственности 06.10.2016.

23. Friedman A.J. Antimicrobial and anti-inflammatory activity of chitosan-alginate nanoparticles: a targeted therapy for cutaneous pathogens/ A.J. Friedman, J. Phan, D.O. Schairer [et. al.]// The Journal of Investigative Dermatology. - 2013. - 133. - P. 1231-1239.

24. Pogorielov M.V. Chitosan as a Hemostatic Agent: Current state/ M.V. Pogorielov, V.Z. Sikora// European Journal of Medicine. Series B. - 2015. - 2. - P. 24-33.

25. Buzlama A. Pharmacological and biological effects of chitosan / A. Buzlama, S. Doba, A. Slivkin, S. Daghir // Research J. Pharm. and Tech. - 2020. - 13(2). - P. 1043-1049.

26. Федосов П.А. Доклиническое исследование эффективности и безопасности ранозаживляющего геля, содержащего хитозан, таурин и аллантоин / П.А. Федосов, В.А. Николаевский, Ю.Н. Чернов [и др.]// Научный результат. - 2017. - 3(2). - С. 14-28.

27. Xie Y. The study of antibacterial effect of chitosans and their derivatives on Helicobacter pylori in vitro and influence factor / Y. Xie, Z.X. Xie, N.J. Zhou, X.J. Zhou // National Digital Science Library November. - 2005. - P. 1343-1347.

28. Ito M. Anti-ulcer effects of chitin and chitosan, healthy Foods, in Rats / M. Ito, A. Ban, M. Ishihara // Jpn J. pharmacol. - 2000. - 82. - P. 218-225.

29. Zaki N.I. Evaluation of Newly Formulated Antiulcer Drug on Experimental Ulcer Model / N.I. Zaki, L.A. Hassanin, A.M. Khattab // J. Drug Res. - 2014. - 35(1). - P. 81-92.

30. HEBACEPT, сертификационный центр. [Электронный ресурс]. URL: https://www.nevacert.ru/ (дата обращения: 20.11.2020).

31. Онлайн данные общероссийских реестров РеестрИнформ. [Электронный ресурс]. URL: https://www.reestrinform.ru/ (дата обращения: 20.11.2020).

32. Schwarzkopf Professional. Available at: URL: https://www.schwarzkopf-professional.ru/ (дата обращения: 20.11.2020).

33. Lopez-Lopez J. Efficacy of chlorhexidine, dexpanthenol, allantoin and chitosan gel in comparison with bicarbonate oral rinse in controlling post-interventional inflammation, pain and cicatrization in subjects undergoing dental surgery / J. Lopez-Lopez, E. Jan-Pallí B.G. lez-Navarro [et al.] // Journal Current Medical Research and Opinion. - 2015. - 31(12).

34. Патент на изобретение РФ №2526183 С1. «Гемостатическая противоожоговая ранозаживляющая композиция». Борисович Н.В., Вячеславович Д.А., Сергеевич С.А. [и др.] Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 20.08.2014 г.

35. Патент USA №US 2008/0214619 A «Application Publication. Business method to treat and/or prevent agastric acid disorder with a proton pumpinhibitor (PPI) and acholnergicagonst to induce rapid onset of ppaction with or without food». M. Michael Wolfe. Pub.: 04.09.2008.

Способ профилактики язвообразования на слизистой оболочке желудка, включающий пероральное применение гомогенного геля, содержащего хитозан, отличающийся тем, что используют гель в дозе 0,16 мл/100 г массы тела однократно за 1 ч до воздействия ульцерогенного фактора диклофенака натрия в дозе 50 мг/кг, при этом 100 мл геля включает 1 г хитозана высокомолекулярного с молекулярной массой 500-700 кДа и со степенью деацетилирования 80%, 0,437 г декспантенола, 0,25 мл ледяной уксусной кислоты и воду до 100 мл.