Лечение неврологических расстройств

Авторы патента:

РАЖО, Денис (CH)

ХЕБАЙЗЕН, Пауль (CH)

БОФИЛ, Флоран (FR)

ФАББРО, Дориано (CH)

ХИЛЛЬМАН-ВЮЛЛЬНЕР, Петра (CH)

НГУЙЕН, Хоа Ху Фук (DE)

ЛЁШЕР, Вольфганг (DE)

БРАНДТ, Клаудия (DE)

ЗЕЛЕ, Александр Маркус (CH)

C07D498/08 - мостиковые системы

C07D491/153 - содержащие два кольца с кислородом в качестве гетероатома и одно кольцо с азотом в качестве гетероатома

C07D417/14 - содержащие три или более гетероциклических кольца

C07D413/14 - содержащие три или более гетероциклических кольца

C07D403/14 - содержащие три или более гетероциклических кольца

A61P25/28 - для лечения нейродегенеративных заболеваний центральной нервной системы, например ноотропные агенты, агенты для усиления умственных способностей, для лечения болезни Альцгеймера или других форм слабоумия

A61P25/16 - для лечения болезни Паркинсона

A61P25/14 - для лечения аномального движения, например хореи, дискинезии

A61P25/08 - противоэпилептические средства; противосудорожные средства

A61P25/00 - Лекарственные средства для лечения нервной системы

A61K31/541 - не конденсированные тиазины, содержащие дополнительно гетероциклические кольца

A61K31/5386 - спиро-конденсированные или образующие часть мостиковых циклических систем

A61K31/5377 - не конденсированные и содержащие дополнительно гетероциклические кольца, например тимолол

Владельцы патента RU 2765868:

Торкур АГ (CH)
УНИВЕРСИТАТ БАЗЕЛЬ (CH)

Настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I)

где X¹, X² и X³ независимо друг от друга представляют собой N или CH, при условии, что по меньшей мере два из X¹, X² и X³ представляют собой N; Y представляет собой N или CH; R¹ и R² независимо друг от друга представляют собой (i) морфолинил формулы (II)

где стрелка обозначает связь в формуле (I); и где R³ и R⁴ независимо друг от друга представляют собой H, C₁-C₃алкил, необязательно замещенный одним или двумя OH, C₁фторалкил, C₁-C₂алкокси, C₁-C₂алкоксиC₁-C₃алкил или CN; или R³ и R⁴ вместе образуют двухвалентный остаток -R⁵R⁶-, выбранный из C₁-C₃алкилена, необязательно замещенного 1-2 F, -CH₂-O-CH₂-, -CH₂-NH-CH₂- или любой из структур:

где стрелки обозначают связи в формуле (II); или (ii) насыщенное 6-членное гетероциклическое кольцо Z, выбранное из тиоморфолинила и пиперазинила, необязательно замещенное 1-3 R⁷; где R⁷ в каждом случае независимо представляет собой C₁-C₃алкил, необязательно замещенный одним или двумя ОН, C₁-C₂фторалкил, C₁-C₂алкоксиC₁-C₃алкил, C₃-C₆циклоалкил; или два заместителя R⁷ вместе образуют двухвалентный остаток -R⁸R⁹-, выбранный из C₁-C₃алкилена, необязательно замещенного 1-4 F, -CH₂-O-CH₂- или -O-CH₂CH₂-O-; при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R² представляет собой морфолинил формулы II, или пролекарства, сольвата или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для предупреждения или лечения неврологического расстройства у субъекта, где неврологическое расстройство выбрано из эпилепсии и нейродегенеративного заболевания. Также предложен способ предупреждения или лечения неврологического расстройства у субъекта, где неврологическое расстройство выбрано из эпилепсии и нейродегенеративного заболевания. Соединение формулы (I) является ингибитором протеинкиназы mTOR и может применяться для предупреждения или лечения неврологического расстройства. 2 н. и 28 з.п. ф-лы, 29 ил., 15 табл., 14 пр.

Настоящее изобретение относится к композициям для применения в предупреждении или лечении неврологического расстройства у субъекта.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Протеинкиназа mTOR (мишень рапамицина у млекопитающих) является интегрирующим фактором в энергетическом обмене, дифференцировке, росте и выживании клетки. Кроме того, mTOR выполняет принципиально важные функции в нейрон-специфических механизмах, таких как синаптическая пластичность, обучение и развитие коры головного мозга (Wong, М., Biomed J, 2013.36(2): p. 40-50). Сигнальный путь mTOR активируется при многих заболеваниях. В частности, различные неврологические расстройства, такие как болезнь Хантингтона и эпилептические приступы, были связаны с путем фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K)/mTOR.

На сегодняшний день доступные ингибиторы mTOR, такие как рапамицин - макролидный антибиотик с иммуносупрессивной и противовоспалительной активностью - и близкородственные рапалоги, аллостерически связываются с FKBP-связывающим карманом mTORC1 (Laplante, М. and D.M. Sabatini, Cell, 2012. 149(2): p. 274-93.). Значимыми нижерасположенными эффекторами mTOR являются S6-киназа (S6K), рибосомальный белок S6 (S6rP) и 4Е-связывающий белок (4Е-ВР). Ингибирующие действия, оказываемые на mTORC2, представляются незначительными, вызывая частичное ингибирование действий mTOR при неврологических расстройствах. Кроме того, эти соединения проявляют нежелательные физико-химические свойства. Было разработано первое поколение ингибиторов mTOR, направленных на АТФ-связывающий сайт, таких как INK128. Эти ингибиторы ингибируют mTORC1 и mTORC2 и блокируют все функции mTOR, но, с другой стороны, не имеют высокой специфичности к мишени, что может привести к снижению переносимости. Кроме того, неблагоприятный фармакокинетический профиль ограничивает проникновение через гематоэнцефалический барьер и, следовательно, ингибирование мишеней в ЦНС, что необходимо для лечения расстройств ЦНС.

Агрегация белков может приводить к различным заболеваниям. Некоторые белки токсичны в центральной нервной системе (ЦНС), несмотря на то, что они экспрессируются повсеместно. Эти нейродегенеративные заболевания включают расстройства, при которых патологические белки могут накапливаться в ядре, как это имеет место при заболеваниях с расширением полиглютамина (таких как болезнь Хантингтона и спиноцеребеллярная атаксия), нарушения, характеризующиеся цитоплазматическими включениями (такими как α-синуклеин при болезни Паркинсона), а также нарушения, при которых патологические белки накапливаются вне клетки (например, при прионных болезнях), или как внутри, так и вне клетки (например, тау и амилоид-β (Aβ) при болезни Альцгеймера) (Aguzzi, A. and Т. O'Connor, Nat Rev Drug Discov, 2010. 9(3): p. 237-248).

Болезнь Хантингтона, аутосомно-доминантное расстройство, включает относительно селективную нейродегенерацию в базальных ганглиях и коре головного мозга, связанную с повторным расширением тринуклеотида полиглютамина на белке хантингтине (НТТ). Мутантный белок хантингтин (mHTT) неэффективно выводится из нейронов, что приводит к накоплению токсичных внутриклеточных агрегатов и связанной с этим гибели нейронов. Снижение уровней mHTT или превращение mHTT в менее токсичные виды являются наиболее перспективными стратегиями для разработки эффективных методов лечения. Помимо подходов к сайленсингу гена НТТ, были предприняты попытки улучшить клиренс белка mHTT, в частности, посредством аутофагии (Nopoulos, Р.С., Dialogues Clin Neurosci, 2016. 18(1): p. 91-98).

Аутофагия представляет собой клеточный путь, с помощью которого поврежденные или патологические белки и органеллы поглощаются двухмембранной аутофагосомой, которая сливается с лизосомой, что приводит к расщеплению груза (Nyfeler, В., et al., Methods Mol Biol, 2012. 821: p. 239-250.). Аутофагия может играть ключевую роль в нейродегенеративных протеинопатиях, таких как болезнь Хантингтона, которые характеризуются накоплением неправильно уложенных белков. Было также показано, что нарушения аутофагии и агрегация белков связаны с другими неврологическими расстройствами, такими как болезнь Альцгеймера и Паркинсона.

Известно, что активация сигнального пути мишени рапамицина у млекопитающих (mTOR) уменьшает макроаутофагию (Jung, С.Н., et al., FEBS Lett, 2010. 584(7): p. 1287-95), a mHTT способствует передаче сигналов mTOR (Pryor, W.M., et al., Sci Signal, 2014. 7(349): p. ra103). На головном мозге и в мышиных моделях болезни Хантингтона было показано, что mTOR секвестрируется в полиглютаминовых агрегатах. Кроме того, было показано, что ингибиторы mTOR усиливают аутофагию и, следовательно, уменьшают накопление mHTT и связанную гибель нейронов в клеточных и животных моделях болезни Хантингтона (Ravikumar В. et al., Nat Genet, 2004. 36: p. 585-595.; Floto RA et al., Autophagy, 2007. 3: p. 620-622). Аллостерические ингибиторы mTOR (например, рапамицин/рапалоги) опосредуют клиренс фрагментов mHTT и защищают от токсичности, вызванной mHTT, в ненейронных клетках путем стимуляции аутофагии (Ravikumar, В. et al., Hum Mol Genet, 2002. 11(9): p. 1107-1117). Однако недавние исследования показали, что рапалоги неэффективны в предупреждении нейродегенерации в модели БХ на мышах R6/2 (Fox, J.H., et al., Mol Neurodegener, 2010. 5: p. 26).

Недавно было показано, что по сравнению с аллостерическими ингибиторами mTOR каталитические ингибиторы mTOR, направленные на АТФ-связывающий сайт, более эффективны в индукции аутофагического потока и уменьшении накопления mHTT в ненейронных клетках (Roscic, A., et al., J Neurochem, 2011. 119(2): p. 398-407), а также в уменьшении накопления и токсичности агрегатов mHTT и предотвращении дегенерации средних шипиковых нейронов в кортикостриатальных срезах мозга мышей R6/2 (Proenca, С.С., et al., PLoS One, 2013. 8(7): p. e68357.). К сожалению, существующие в настоящее время ингибиторы каталитической mTOR характеризуются недостаточной проницаемостью в мозг и могут быть слишком токсичными для долгосрочных in vivo исследований для подтверждения концепции (РоС).

Самые современные терапевтические подходы на сегодняшний день основаны на сайленсинге гена НТТ с использованием антисмысловых олигонуклеотидов или миРНК путем центрального введения. В животной модели БХ эти подходы убедительно продемонстрировали сильное снижение прогрессирования заболевания. Ключевыми проблемами подхода с использованием антисмысловых олигонуклеотидов являются его инвазивное центральное введение, а также то, достаточно ли эти антисмысловые молекулы распространяются в мозге человека.

30-40% из 50 миллионов человек со спровоцированной эпилепсией во всем мире являются невосприимчивыми к терапии (, W. et al., Nat Rev Drug Discov, 2013. 12(10): p. 757-776.). Примерами используемого в настоящее время стандартного лечения являются фенобарбитал и леветирацетам. Фенобарбитал - это противоэпилептический препарат первого поколения с выраженной противосудорожной эффективностью, но также с серьезными побочными эффектами, такими как сильное седативное действие на пациентов и в животных моделях. Леветирацетам относится к противоэпилептическим препаратам второго поколения и является одним из наиболее широко используемых препаратов для лечения эпилепсии.

Несколько генетических дефектов, связанных с повышенной передачей сигналов mTOR («TORопатии»), приводят к эпилептическим приступам. Приступы TSC (туберозно-склерозного комплекса) являются формой эпилепсии, вызванной аутосомно-доминантной мутацией инактивации TSC1 или TSC2, которая индуцирует конститутивную активацию mTOR, приводящую к образованию доброкачественных опухолей, умственной отсталости и приступам. В клинических исследованиях лечение эверолимусом снижало частоту приступов у пациентов с TSC и у пациентов с TSC-ассоциированной SEGA (субэпендимальной гигантоклеточной астроцитомой). Другие «TORопатии», вызывающие эпилепсию, представляют собой полигидрамниоз, мегалэнцефалию, синдром симптоматической эпилепсии, PMSE (полигидрамниоз, мегалинцефалия и синдром симптоматической эпилепсии), фокальную кортикальную дисплазию (FCD) и «TORопатии», связанные с мутациями в гене PTEN (Cardamone, М., et al., J Pediatr, 2014. 164(5): p. 1195-200; Sadowski, K., et al., Pharmacol Rep, 2015. 67(3): p. 636-46).

Эпилептогенез - это период между возникновением проэпилептического повреждения (например, черепно-мозговой травмы или генетического дефекта) и первым спонтанным приступом. Было описано много факторов, связанных с различными типами эпилептогенеза, и активация mTOR является одним из факторов, наблюдавшихся во многих типах эпилепсий (Sadowski, K., K. Kotulska-Jozwiak, and S. Jozwiak, Pharmacol Rep, 2015. 67(3): p. 636-46.). Все используемые в настоящее время противоэпилептические средства действуют симптоматично и не изменяют эпилептогенез. Активация mTOR вовлечена в различные процессы в ходе эпилептогенеза: рост нейронов и образование гипертрофированных нервных клеток, ингибирование аутофагии и нейровоспаление. Кроме того, имеются данные, свидетельствующие о том, что ингибитор mTOR рапамицин влияет на эпилептогенез и число/силу приступов в различных животных моделях эпилепсии.

Основным недостатком современных методов лечения является ограниченная способность или даже неспособность зарегистрированных ингибиторов mTOR или двойных ингибиторов mTOR/PI3K пересекать гематоэнцефалический барьер (ГЭБ), не говоря уже о цитотоксическом потенциале соединений, известных из уровня техники, что обуславливает их ограниченный терапевтический эффект для лечения неврологических расстройств.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Неожиданно было обнаружено, что соединения согласно изобретению пригодны для лечения неврологических расстройств. В частности, было обнаружено, что соединения согласно настоящему изобретению являются специфичными ингибиторами mTOR или двойными ингибиторами PI3K/mTOR, и что они способны проникать через гематоэнцефалический барьер, то есть, было обнаружено, что они ингибируют путь PI3K/mTOR в головном мозге. Кроме того, неожиданно было обнаружено, что соединения согласно изобретению являются нецитотоксичными и перорально биодоступными. А именно, неожиданно было обнаружено, что соединения согласно изобретению индуцируют аутофагию in vitro и in vivo. Кроме того, было обнаружено, что соединения согласно изобретению уменьшают образование нейротоксичных агрегатов мутантного хантингтина in vitro и снижают вызванные электрошоком приступы у мышей.

Из-за доказанной эффективности в доклинических моделях из хорошо переносимых и проникающих через гематоэнцефалический барьер ингибиторов mTOR согласно настоящему изобретению могут быть разработаны клинические кандидаты для лечения или предупреждения неврологических расстройств, таких как БХ и эпилепсия, которые на сегодняшний день являются изнуряющими и часто смертельными заболеваниями, для которых не разработано каких-либо вариантов лечения.

Таким образом, в первом аспекте изобретения предложено соединение формулы (I),

где

X¹, X² и X³ независимо друг от друга представляют собой N или СН, при условии, что по меньшей мере два из X¹, X² и X³ представляют собой N;

Y представляет собой N или СН;

R¹ и R² независимо друг от друга представляют собой

(i) морфолинил формулы (II)

где стрелка обозначает связь в формуле (I); и

где R³ и R⁴ независимо друг от друга представляют собой H, C₁-C₃алкил, необязательно замещенный одним или двумя OH, C₁-C₂фторалкил, C₁-C₂алкокси, C₁-C₂алкоксиC₁-C₃алкил, CN или C(O)O-C₁-C₂алкил; или R³ и R⁴ вместе образуют двухвалентный остаток -R⁵R⁶-, выбранный из C₁-C₃алкилена, необязательно замещенного 1-4 F, -СН₂-О-СН₂-, -СН₂-NH-CH₂- или любой из структур

где стрелки обозначают связи в формуле (II); или

(ii) насыщенное 6-членное гетероциклическое кольцо Z, выбранное из тиоморфолинила и пиперазинила, необязательно замещенное 1-3 R⁷; где R⁷ в каждом случае независимо представляет собой C₁-C₃алкил, необязательно замещенный одним или двумя ОН, С₁-С₂фторалкил, С₁-С₂алкоксиС₁-С₃алкил, С₃-С₆циклоалкил; или два заместителя R⁷ вместе образуют двухвалентный остаток -R⁸R⁹-, выбранный из C₁-С₃алкилена, необязательно замещенного 1-4 F, -СН₂-О-СН₂- или -О-СН₂СН₂-О-;

при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R² представляет собой морфолинил формулы II;

и его пролекарства, метаболиты, таутомеры, сольваты и фармацевтически приемлемые соли,

для применения в предупреждении или лечении неврологического расстройства у субъекта.

Дальнейшие аспекты и варианты осуществления настоящего изобретения будут очевидны при дальнейшем изучении настоящего описания.

ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

ФИГ. 1А: Фармакокинетический анализ соединения 3 («соед. 3») у крыс Спрег-Доули (СД). После однократного перорального введения соединения 3 (10 мг/кг) образцы тканей анализировали на уровни соединения в различные моменты времени с помощью ЖХ-МС. n=3

ФИГ. 1В: Фармакокинетический анализ уровней соединения 3 и соединения 8 (соед. 8) у мышей balb 6. После однократного перорального введения соединения 3 или соединения 8 (50 мг/кг) образцы тканей анализировали на уровни соединения в различные моменты времени с помощью ЖХ-МС. n=3

ФИГ. 2А: Фармакодинамический анализ соединения 3, введенного мышам balb 6 за одно пероральное введение в дозе 50 мг/кг. Лизаты мозга анализировали с помощью вестерн-блоттинга. Передача сигналов mTOR ингибировалась соединением 3, на что указывает снижение фосфорилирования S6 в моменты времени от 30 минут до 8 часов. Количественная оценка полос вестерн-блоттинга показывает значимость снижения передачи сигналов по пути mTOR. n=3, дисперсионный анализ (ANOVA), ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

ФИГ. 2В: Фармакодинамический анализ соединения 8, введенного мышам balb 6 за одно пероральное введение в дозе 50 мг/кг. Лизаты мозга анализировали с помощью вестерн-блоттинга. Передача сигналов mTOR ингибировалась соединением 8, на что указывает снижение фосфорилирования S6 в моменты времени от 30 минут до 8 часов. Количественная оценка полос вестерн-блоттинга показывает значимость снижения передачи сигналов по пути mTOR. n=3, дисперсионный анализ (ANOVA), ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

ФИГ. 2С: Фармакодинамический анализ соединения 3, введенного мышам balb 6 за одно пероральное введение в дозе 50 мг/кг. Лизаты мозга анализировали с помощью вестерн-блоттинга. Передача сигналов mTOR ингибировалась соединением 3, на что указывает снижение фосфорилирования S6 в моменты времени от 30 минут до 8 часов. Количественная оценка полос вестерн-блоттинга показывает значимость снижения передачи сигналов по пути mTOR. n=3, дисперсионный анализ (ANOVA), ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

ФИГ. 2D: Фармакодинамический анализ соединения 8, введенного мышам balb 6 за одно пероральное введение в дозе 50 мг/кг. Лизаты мышцы бедра анализировали с помощью вестерн-блоттинга. Передача сигналов mTOR ингибировалась соединением 8, на что указывает снижение фосфорилирования S6 в моменты времени от 30 минут до 8 часов. Количественная оценка полос вестерн-блоттинга показывает значимость снижения передачи сигналов по пути mTOR. n=3, дисперсионный анализ (ANOVA), ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

ФИГ. 3А: Вестерн-блоттинг лизированного мозга мышей с эпилепсией, предварительно получавших пилокарпин, и таких же мышей, не получавших его. Передача сигналов mTOR повышена в пилокарпиновой модели эпилептического статуса (SE). n=9 (наивные мыши), n=8 (мыши с эпилепсией), ANOVA *р<0,05

ФИГ. 3В: Вестерн-блоттинг лизированного мозга мышей от мышей с эпилепсией/предварительно получавших пилокарпин и наивных мышей, получавших одну пероральную дозу соединения 3 и 8, показал значительное ингибирование фосфорилирования S6 в головном мозге. Более сильное действие наблюдалось у наивных мышей. Эверолимус не продемонстрировал значительного ингибирования передачи сигналов mTOR в головном мозге. СРЕДНЕЕ ± SEM, ANOVA, *р<0,05, #р<0,05, n=5

ФИГ. 4: После лечения страдающих и не страдающих эпилепсией мышей ингибиторами mTOR, фенобарбиталом или леветирацетамом, был проведен тест индукции судорог максимальным электрошоком (МЭШ). Наблюдалось противоэпилептическое действие ингибиторов.

ФИГ. 4А, В: МЭШ наивных мышей.

ФИГ. 4С, D: МЭШ получавших пилокарпин мышей с эпилепсией.

Pheno=фенобарбитал, LEV=леветирацетам, Evero=эверолимус, Rapa=рапамицин, скобки: доза, приведенная в мг/кг, время предварительного лечения в ч, способ введения - пероральный (п/о) или внутрибрюшинный (в/б). А, С: СС₅₀ в мА ± стандартная ошибка среднего (SEM); В, D: изменение СС₅₀ в % от носителя СС₅₀, ANOVA и апостериорный критерий Даннетта, *р<0,05

ФИГ. 5: Жизнеспособность клеток и белковый синтез в иммортализованных клетках полосатого тела, полученных из модели на мышах с нокином, экспрессирующей полноразмерный НТТ с 7 (STHdh^Q7/Q7) или 111 CAG-повторами (STHdh^Q111/Q111) после инкубирования с различными концентрациями соединения 3 и соединением 8, и ингибитором mTORC1/2 INK 128 (Sapanisertib) (100 нМ) и рапамицином (400 нМ).

ФИГ. 5 А+В Анализ лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в A: STHdh^Q7/Q7. В: STHdh^Q111/Q111. Как соединение 3, так и соединение 8 снижали продукцию ЛДГ в моменты времени между 24 ч и 48 ч; n=3-6

ФИГ. 5 C+D Анализ PrestoBlue, определяющий митохондриальную активность STHdh^Q7/Q7 и STHdh^Q111/Q111 в различные моменты времени после инкубации с соединением 3, соединением 8 и контрольными соединениями INK128 (100 нМ) и рапамицином (400 нМ). Соединения хорошо переносились, вызывая лишь небольшое ингибирование после 72 часов инкубации с 1230 нМ соединения 3. n=6-9

ANOVA ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

ФИГ. 6: Ингибирование сигнального пути mTOR и индукция аутофагии в клетках STHdh^Q7/Q7 и STHdh^Q111/Q111 после обработки соединением 3 (200 нМ, 400 нМ, 1230 нМ), соединением 8 (130 нМ, 1230 нМ), INK 128 (100 нМ), рапамицином (400 нМ) или контролем ДМСО в течение 4 часов. Вестерн-блоттинг клеточных лизатов.

ФИГ. 6 А+В: Снижение фосфорилирования сигнальных молекул mTOR: mTOR, S6rp и 4Е-РВ, зависит от концентрации. n=3

ФИГ. 6 C+D: индукция аутофагии, выраженная увеличением LC3-II. n=3

ANOVA ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

ФИГ. 7: Снижение образования агрегатов mHTT на человеческих эмбриональных клетках почек (HEK293), трансфицированных экзоном 1 mHTT с расширением Q51 или Q19, соответственно.

ФИГ. 7 А+В: Анализ методом ловушки на фильтре лизированной клетки HEK293, трансфицированной экзоном 1 mHTT с Q51, предварительно обработанной соединением 8 (130 нМ, 1230 нМ), соединением 3 (400 нМ), 1230 нМ), INK128 (100 нМ), рапамицином (400 нМ) или контролем ДМСО, и расширением Q19, обработанной контролем ДМСО. Обработка ингибиторами mTOR значительно уменьшала образование агрегатов. n=3, ANOVA ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

Фиг. 7 C+D: Иммуноокрашивание клетки HEK293, трансфицированной экзоном 1 mHTT, с Q51, предварительно обработанной соединением 8 (130 нМ, 1230 нМ), соединением 3 (400 нМ), 1230 нМ), INK128 (100 нМ), рапамицином (400 нМ) или контролем ДМСО. Агрегаты вручную подсчитывали в 10000 клетках на образец. ANOVA ****р<0,00005, ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

ФИГ. 8А: Индукция аутофагии в мозге мышей BALB/C через 0,5 ч, 4 ч, 8 ч, соответственно, после однократного перорального введения соединения 3,50 мг/кг. Лизаты мозга анализировали с помощью вестерн-блоттинга. Маркеры аутофагии LC3-II и р62 подвергались изменениям в моменты времени от 30 минут до 8 часов. Количественная оценка полос вестерн-блоттинга показывает индукцию аутофагии. n=3, ANOVA, ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

ФИГ. 8В: Индукция аутофагии в мозге мышей BALB/C после однократного перорального введения соединения 8, 50 мг/кг. Лизаты мозга анализировали с помощью вестерн-блоттинга. Маркеры аутофагии LC3-II и р62 подвергались изменениям в моменты времени от 30 минут до 8 часов. Количественная оценка полос вестерн-блоттинга показывает индукцию аутофагии. n=3, ANOVA, ***р<0,0005, **р<0,005, *р<0,05

ФИГ. 9А: Масса тела мышей TSC1 GFAP, получавших лечение носителем, соединением R, соединением 3 и соединением 8 в различные дни постнатального периода до (Р21) и во время (Р22-Р50) лечения. Среднее ± SEM. Поскольку некоторые животные погибли в течение периода наблюдения, n варьировало от 6 до 14.

ФИГ. 9В: Действие определенных режимов лечения на спонтанные электрографические приступы у мышей Tsc1 GFAP. Соединение 3 и соединение 8 сильно уменьшают спонтанные приступы, тогда как референсная молекула соединение R оказывала более слабое действие. Данные представлены как среднее ± SEM (N=27-48 записей/группа) для каждой недели тестирования. Статистическая значимость отмечена р<0,05 с поправкой на множественность с носителем в качестве компаратора (непараметрический тест Вилкоксона).

ФИГ. 10: ИГХ анализ полосатого тела от мышей R6/2 и одного животного дикого типа. Мыши получали лечение носителем, соединением 3 и соединением 8 в течение 11,5 недель, после чего получали срезы полосатого тела. После окрашивания на агрегаты mutHTT подсчитывали количество агрегатов и анализировали площадь агрегатов в 4 образцах. Хотя количество агрегатов mutHTT не изменилось, площадь, охваченная этими агрегатами, была значительно уменьшена после лечения соединением 3, что указывает на то, что агрегаты mutHTT были меньше после проведения лечения. (ANOVA, р<0,05)

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Далее будет приведено подробное описание представленных и дополнительных аспектов изобретения, а также представленные и дополнительные варианты его осуществления, примеры которых проиллюстрированы в сопроводительных структурах и формулах. В то время как изобретение будет описано совместно с перечисленными вариантами осуществления, следует понимать, что они не приведены с целью ограничения изобретения этими вариантами осуществления. Специалисту в данной области техники известно множество способов и материалов, аналогичных или эквивалентных описанным в настоящем документе, которые могут быть использованы при практическом осуществлении настоящего изобретения. Настоящее изобретение никоим образом не ограничивается описанными в настоящем документе способами и материалами.

Следует понимать, что признаки, целые числа и характеристики, описанные совместно с конкретным аспектом, вариантом осуществления или примером изобретения, применимы к любому другому аспекту, варианту осуществления или примеру, описанным в настоящем документе, кроме случаев, когда они с ними несовместимы. Все раскрытые в настоящем документе признаки (включая любую прилагаемую формулу изобретения, реферат и графические материалы) и/или все стадии любого раскрытого в нем способа или процесса могут быть объединены в любую комбинацию, за исключением комбинаций, в которых по меньшей мере некоторые из таких признаков и/или стадий являются взаимоисключающими. Изобретение не ограничивается содержанием любых вышеприведенных вариантов осуществления. Изобретение распространяется на любой новый признак или любую новую комбинацию признаков, раскрытых в настоящем описании (включая любую прилагаемую формулу изобретения, реферат и графические материалы), или на любую новую стадию или любую новую комбинацию стадий любого раскрытого в нем способа или процесса.

Если не указано иное, все технические и научные термины, использованные в настоящем документе, имеют значения, совпадающие с общепринятыми для специалиста в области техники, к которой принадлежит настоящее изобретение.

Для толкования настоящего описания будут применяться следующие определения, при необходимости термины, используемые в единственном числе, также будут включать множественное число и наоборот. Следует понимать, что терминология, используемая в настоящем документе, предназначена только для описания конкретных вариантов осуществления изобретения и не является ограничивающей.

Определения:

Термины «содержащий», «имеющий» и «включающий» следует толковать как неограничивающие термины (т.е. как означающие «включая, но не ограничиваясь перечисленным»), если не указано иное.

Термины «индивидуум», «субъект» или «пациент» в настоящем документе используются взаимозаменяемо. В предпочтительном варианте осуществления субъект представляет собой человека.

В контексте настоящего документа термины «лечение»/»лечить» включают: (1) предупреждение или задержку появления клинических симптомов состояния, расстройства или заболевания, развивающегося у субъекта, который может быть поражен этим состоянием, расстройством или заболеванием, или быть предрасположен к нему, но еще не испытывают или не демонстрирует клинических или субклинических симптомов состояния, расстройства или заболевания; (2) ингибирование состояния, расстройства или заболевания (например, остановка, уменьшение или замедление развития заболевания или его рецидива в случае поддерживающей терапии, или по меньшей мере одного его клинического или субклинического симптома); и/или (3) облегчение заболевания (то есть, обеспечение регрессии состояния, расстройства или заболевания, или по меньшей мере одного его клинического или субклинического симптома). Польза для пациента, подлежащего лечению, является статистически значимой или по меньшей мере ощутимой для пациента или лечащего врача. Тем не менее, следует иметь в виду, что при введении пациенту лекарственного средства для лечения заболевания результатом не всегда может быть эффективное лечение. В одном из вариантов осуществления термины «лечение»/»лечить» в контексте настоящего документа относятся к терапевтическому лечению. В другом варианте осуществления термины «лечение»/»лечить» в контексте настоящего документа относятся к профилактическому лечению.

Термин «хиральный» относится к молекулам, обладающим свойством несовпадения при наложении на их зеркальное отражение, в то время как термин «ахиральный» относится к молекулам, которые совпадают с их зеркальным отражением.

Термин «стереоизомеры» относится к соединениям, имеющим одинаковый химический состав, но различающимся пространственным расположением атомов или групп.

«Диастереомер» относится к стереоизомеру с двумя или более центрами хиральности, в которых соединения не являются зеркальными отражениями друг друга. Диастереомеры имеют разные физические свойства, например, температуры плавления, температуры кипения, спектральные свойства и химическую и биологическую реакционную способность. Смеси диастереомеров могут быть разделены с использованием аналитических процедур высокого разрешения, таких как электрофорез и хроматография.

«Энантиомеры» относятся к двум стереоизомерам соединения, которые являются зеркальными отражениями друг друга, не совпадающими при наложении. Стереохимические определения и условные обозначения, используемые в настоящем документе, обычно соответствуют источникам S.P. Parker, Ed., MeRaw-Hiff Dictionary of Chemical Terms (1984), McGraw-Hill Book Company, New York and Eliel, E. и Wilen, S., «Stereochemistry of Organic Compounds», John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. Соединения согласно изобретению могут содержать асимметрические или хиральные центры и, следовательно, существуют в различных стереоизомерных формах. Подразумевается, что все стереоизомерные формы соединений согласно изобретению, включая, но не ограничиваясь перечисленным, диастереомеры, энантиомеры и атропизомеры, а также их смеси, такие как рацемические смеси, являются частью настоящего изобретения. Многие органические соединения существуют в оптически активных формах, т.е. способны вращать плоскость плоскополяризованного света. При описании оптически активного соединения приставки D и L, или R и S, используются для обозначения абсолютной конфигурации молекулы вокруг ее хирального центра(ов). Приставки d и I или (+) и (-) используются для обозначения знака направления вращения соединением плоскополяризованного света, где (-) или 1 означает, что соединение является левовращающим. Соединение с приставкой (+) или d является правовращающим. Для данной химической структуры эти стереоизомеры идентичны, за исключением того, что они являются зеркальными отражениями друг друга. Конкретный стереоизомер также может называться энантиомером, а смесь таких изомеров часто называют энантиомерной или скалемической смесью. Смесь энантиомеров с соотношением 50:50 называется рацемической смесью или рацематом. Термин «таутомер» или «таутомерная форма» относится к структурным изомерам с разной энергией, взаимопревращаемых при преодолении низкоэнергетического барьера. Например, протонные таутомеры включают взаимопревращения посредством миграции протона, такие как кето-енольная и имин-енаминная изомеризации.

В контексте настоящего документа фраза «фармацевтически приемлемая соль» относится к фармацевтически приемлемым органическим или неорганическим солям соединения согласно изобретению, в частности, к кислотно-аддитивным солям. Примеры солей включают, но не ограничены перечисленным, сульфат, цитрат, ацетат, оксалат, хлорид, бромид, иодид, нитрат, бисульфат, фосфат, кислый фосфат, изоникотинат, лактат, салицилат, кислый цитрат, тартрат, олеат, таннат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкуронат, сахарат, формиат, бензоат, глутамат, метансульфонат (мезилат), этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат и памоат. Фармацевтически приемлемая соль может содержать включение другой молекулы, такой как ацетат-ион, сукцинат-ион или другой противоион. Противоионом может быть любой органический или неорганический фрагмент, стабилизирующий заряд на исходном соединении. Кроме того, фармацевтически приемлемая соль может иметь в своей структуре более одного заряженного атома. В случаях, когда частью фармацевтически приемлемой соли являются несколько заряженных атомов, первая может иметь несколько противоионов. Таким образом, фармацевтически приемлемая соль может иметь один или более заряженных атомов и/или один или более противоионов.

Если соединение согласно изобретению представляет собой основание, требуемая фармацевтически приемлемая соль может быть получена любым подходящим способом, известным в данной области техники, например, обработкой свободного основания неорганической кислотой, такой как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, метансульфоновая кислота, фосфорная кислота и тому подобными, или органической кислотой, такой как уксусная кислота, трифторуксусная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, миндальная кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, пиранозидиловая кислота, такая как глюкуроновая кислота или галактуроновая кислота, альфа-гидроксикислота, такая как лимонная кислота или винная кислота, аминокислота, такая как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота, ароматическая кислота, такая как бензойная кислота или коричная кислота, сульфоновая кислота, такая как п-толуолсульфоновая кислота или этансульфоновая кислота, или тому подобными.

Фраза «фармацевтически приемлемый» означает, что вещество или композиция должны быть химически и/или токсикологически совместимы с другими ингредиентами в составе препарата, и/или с млекопитающим, получающим лечение этим препаратом.

«Сольват» относится к ассоциату или комплексу одной или более молекул растворителя и соединения согласно изобретению. Примеры растворителей, образующих сольваты, включают, но не ограничены перечисленным, воду, изопропанол, этанол, метанол, диметилсульфоксид (ДМСО), этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин. Термин «гидрат» относится к комплексу, в котором молекула растворителя представляет собой воду.

Термин «защитная группа» относится к заместителю, который обычно используется для блокирования или защиты определенной функциональной группы во время реакции других функциональных групп на соединении. Например, «аминозащитная группа» представляет собой заместитель, присоединенный к аминогруппе, который блокирует или защищает функциональную аминогруппу в соединении. Подходящие аминозащитные группы включают ацетил, трифторацетил, трет-бутоксикарбонил (ВОС), бензилоксикарбонил (CBZ) и 9-флуоренилметиленоксикарбонил (Fmoc). Общее описание защитных групп и информацию по их применению см. в Т.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991.

Термины «соединение согласно настоящему изобретению» и «соединения согласно настоящему изобретению», и «соединения формулы (I)» включают их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры, сольваты, фармацевтически приемлемые соли и сольваты их солей.

Термин «млекопитающее» включает, но не ограничен перечисленным, людей, мышей, крыс, морских свинок, обезьян, собак, кошек, лошадей, коров, свиней и овец. В контексте настоящего документа термин «млекопитающее» предпочтительно относится к людям.

Термины «болезнь Альцгеймера» и «morbus Alzheimer» в настоящем документе используются взаимозаменяемо.

Термин «неврологическое расстройство» в общем относится к расстройству, поражающему нервную систему, включая центральную нервную систему и периферическую нервную систему. Неврологические расстройства, в частности, расстройства центральной нервной системы (ЦНС), объединяют множество патологий, включая, в частности, нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Хантингтона, и большое количество нарушений функции центральной нервной системы, таких как эпилепсия.

Термин «нейродегенеративное заболевание» относится к заболеванию, которое вызвано повреждением центральной нервной системы и может быть выявлено по прогрессирующему нарушению функции, дегенерации и гибели специфических популяций нейронов, которые часто взаимосвязаны через синапсы. Нейродегенерация вызывает нарушении двигательной и/или когнитивной функции. Кроме того, термином «нейродегенеративное заболевание» в контексте настоящего документа понимаются нейродегенеративные заболевания, связанные или вызванные неправильной укладкой и/или агрегацией белка. Примерами нейродегенеративных заболеваний являются болезнь Хантингтона, спиноцеребеллярные атаксии, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз (ALS), кистозный фиброз, семейная амилоидная полинейропатия, губчатые энцефалопатии, деменция с телами Леви, лобно-височная деменция с паркинсонизмом, спиноцеребеллярные атаксии, спинальная и бульбарная мышечная атрофия, наследственная денторубропаллидолуизиановая атрофия, семейная британская деменция, семейная датская деменция и прионная болезнь.

В контексте настоящего документа термины «эпилепсия» относятся к любому хроническому неврологическому расстройству, характеризующемуся периодическими приступами. Каждый приступ может казаться неспровоцированным или может быть вызван или спровоцирован стрессом, беспокойством, недостатком сна, болезнью, воздействием химических веществ (например, злоупотреблением наркотиками или употреблением алкоголя), фотостимуляцией (например, мигающим/мерцающим светом) и/или тому подобным. Расстройство может иметь неизвестную причину («идиопатическая эпилепсия») или может быть вызвано, например, травмой головы, опухолью головного мозга, генетической предрасположенностью, инфекцией, дефектом развития или любой их комбинацией («симптоматическая эпилепсия»). Примеры типов эпилептических приступов включают парциальные или фокальные приступы, локализованные (по меньшей мере изначально) в мозге, и генерализованные приступы, широко распространенные в мозге. Парциальные приступы могут быть дополнительно классифицированы на простые парциальные приступы, которые не влияют на сознание, и сложные парциальные приступы, которые влияют на сознание. Генерализованные приступы, которые приводят к потере сознания, могут включать, среди прочего, абсансные, атонические, клонические, миоклонические, тонические и тонико-клонические приступы. Эпилепсия и/или эпилептический приступ могут быть диагностированы с помощью любой подходящей методики или комбинации методик, включая, среди прочего, электроэнцефалографию (ЭЭГ), магнитоэнцефалографию, магнитно-резонансную томографию (МРТ), позитронно-эмиссионную томографию (ПЭТ), однофотонную эмиссионную компьютерную томографию (ОФЭКТ) или видео-ЭЭГ мониторинг.

В контексте настоящего документа термин «приступ» означает неврологическое явление, характеризующееся атипичной электрической активностью в мозге, которая приводит к по меньшей мере одному клиническому симптому. Электрическая активность может характеризоваться гиперсинхронией, гиперактивностью и/или гипервозбудимостью нейронов во всем мозге или его части. Примеры симптомов, вызванных приступами, могут включать внезапное и непроизвольное сокращение мышц (например, судороги), онемение части или всего тела, потерю памяти, потерю сознания, невозможность сосредоточиться, галлюцинации и/или тому подобное. Таким образом, приступы могут влиять, среди прочего, на двигательные, вегетативные, когнитивные, сенсорные (зрительные, слуховые, обонятельные, вкусовые, чувственные) и/или эмоциональные функции. Каждый приступ может быть охарактеризован либо как эпилептический приступ, вызванный эпилепсией, либо неэпилептический приступ с любой другой причиной.

Как указано выше, классификация эпилепсии как «симптоматической» указывает на то, что существует вероятная причина, и можно попробовать провести определенный курс терапии для устранения этой причины, тогда как классификация эпилепсии как «идиопатической» указывает на то, что причина не может быть выявлена.

Термин «TSC» относятся к форме эпилепсии, вызванной аутосомно-доминантной мутацией инактивации TSC1 или TSC2, которая вызывает конститутивную активацию mTOR, приводящую к образованию доброкачественных опухолей, умственной отсталости и судорожным приступам. Таким образом, TSC является моделью эпилепсии для исследования действий ингибиторов mTOR на эпилептогенез и эпилептические приступы. Субэпендимальные гигантоклеточные астроцитомы (SEGA) возникают у 90% пациентов с TSC. Нарушения нормального клеточного развития и функции в мозге могут приводить к эпилепсии и нейрокогнитивным, поведенческим и психическим нарушениям. Эпилепсия встречается у 80-90% пациентов с TSC, при этом часто встречается лекарственная устойчивость (Curatolo, P., R. Moavero, and P.J. de Vries, The Lancet Neurology. 14(7): p. 733-745). Ингибирование mTOR рапамицином оказывает положительное действие на поведение, уменьшает онкогенез и подавляет приступы в мышиных моделях TSC. Раннее лечение рапамицином предотвращает развитие эпилепсии и преждевременную смерть (Meikle, L., et al., J Neurosci, 2008. 28(21): p. 5422-5432). Кратковременное лечение рапамицином у взрослых мышей не только восстановило синаптическую пластичность, но и устранило поведенческое нарушение в модели TSC у гетерозиготного животного (Ehninger, D., et al., Nat Med, 2008. 14(8): p. 843-848.). Кроме того, лечение рапамицином может способствовать устранению клеточных нарушений нейронов с мутацией TSC (Goto, J., et al., Proceedings of the National Academy of Sciences, 2011. 108(45): p. E1070-E1079.).

Другие «TORопатии», то есть, первичные заболевания, вызванные активацией mTOR, вызывающие эпилепсию, представляют собой полигидрамниоз, мегалинцефалию, синдром симптоматической эпилепсии, PMSE, фокальную кортикальную дисплазию (FCD) и «TORопатии», связанные с мутациями PTEN.

Термин «PMSE» относится к полигидрамниозу, мегалинцефалии и симптоматической эпилепсии и представляет собой редкий синдром, диагностируемый у некоторых детей амишей, характеризующийся аномально большим мозгом, нарушением когнитивных функций и тяжелой, устойчивой к лечению эпилепсией.

Термин «PTEN» относится к гомологу фосфатазы и тензина, фосфатазе, дефосфорилирующей 3-фосфат инозитольного кольца PIP3. PTEN является опухолевым супрессором, который часто является мутированным при раке, что приводит к усилению передачи сигналов по пути mTOR. Делеция PTEN в ЦНС может быть связана с приступами.

Термин «эпилептогенез» относится к периоду между возникновением проэпилептического повреждения (например, черепно-мозговой травмы или генетического дефекта) и первым спонтанным приступом. «Эпилептогенез» подразделяется на первичный эпилептогенез (до первого приступа) и вторичный эпилептогенез (прогрессирование эпилепсии после наступления первого приступа). Соединения согласно изобретению могут применяться как во время первичного эпилептогенеза, так и во время вторичного эпилептогенеза (парциальные приступы), а также при полностью развившихся эпилептических расстройствах (генерализованных приступах).

Лечение эпилепсии означает, например, подавление одного или более приступов и/или подавление судорожной активности, т.е. уменьшение частоты приступов; уменьшение тяжести, физического проявления и/или продолжительности по меньшей мере одного приступа; в значительной степени предупреждение по меньшей мере одного приступа; или замедление/уменьшение/препятствование эпилептогенезу; или любую комбинацию вышеперечисленного. Подавление приступа для конкретного субъекта может быть измерено непосредственно у субъекта (например, если приступ происходит во время лечения), и/или, преимущественно, может представлять собой статистически предсказуемый результат на основании результатов контролируемых испытаний или клинических исследований, проведенных на группе субъектов.

Выражение «эффективное количество» означает количество соединения согласно настоящему изобретению, которое (i) лечит или предупреждает конкретное заболевание, состояние или расстройство, (ii) ослабляет, улучшает или устраняет один или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, или (iii) предотвращает или задерживает начало проявления одного или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, описанных в настоящем документе.

В случае эпилепсии эффектное количество лекарственного средства может снижать силу или число приступов, а также явлений во время эпилептогенеза, приводящие к развитию эпилепсии.

В случае нейродегенеративных заболеваний эффективное количество лекарственного средства может уменьшить количество агрегатов белка в нейронах или других клетках, и в ЦНС в целом, а также связанные с ними когнитивные, психологические и двигательные симптомы. Для терапии нейродегенеративных заболеваний эффективность может быть измерена, например, путем оценки количества агрегатов белка, когнитивных и моторных функций.

Термин «максимально переносимая доза» (МПД) относится к самой высокой дозе лекарственного препарата или лечения, которая не вызывает неприемлемых побочных действий. Как правило, максимальная переносимая доза определяется у видов, лечение которых необходимо осуществить, например, у грызунов или у людей, в ходе клинических исследований путем изучения воздействия увеличения дозы на разные группы данного вида до тех пор, пока не будет найдена самая высокая доза с приемлемыми побочными действиями. Было обнаружено, что соединения согласно настоящему изобретению имеют МПД, находящуюся в терапевтическом окне (см. примеры 3 и 4).

В контексте настоящей заявки термин «пролекарство» относится к предшественнику или производной форме соединения согласно изобретению, которое может обладать улучшенными свойствами, такими как лучшая растворимость, уменьшенная цитотоксичность или повышенная биодоступность, по сравнению с исходным соединением или лекарственным средством, и способно активироваться или превращаться в более активную исходную форму. Пролекарства согласно настоящему изобретению включают, но не ограничены перечисленным, производные аминогруппы, связанные с пиридиновым или пиримидиновым ядром, в котором один или два атома водорода заменены подходящим заместителем, или производные кольцевой аминогруппы, если R2 представляет собой пиперазин-1-ил. Примерами таких пролекарств являются соединения, ацилированные аминокислотой, выбранной из 20 наиболее часто встречающихся природных L-альфа-аминокислот, ацилированных дипептидом, таким как L-Ala-L-Ala, угольной кислотой, серной кислотой или фосфорной кислотой, а также их фармацевтически приемлемые соли.

«Метаболит» представляет собой продукт, полученный в результате метаболизма определенного соединения или его соли в организме. Метаболиты соединения могут быть идентифицированы с использованием обычных методов, известных в данной области техники, и их активности определяют с помощью тестов, таких как описанные в настоящем документе. Такие продукты могут быть получены, например, в результате окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, эстерификации, деэстерификации, ферментативного расщепления и т.п. вводимого соединения. В частности, соединения формулы (I), как определено выше в настоящем документе, окисленные или гидроксилированные в любом положении морфолинового, пиперазинового или тиоморфолинового кольца R1 и/или R2, считаются метаболитами. Также рассматриваются метаболиты, представляющий собой S-оксиды тиоморфолина и S,S-диоксиды тиоморфолина. Соответственно, изобретение также направлено на метаболиты соединений согласно изобретению, включая соединения, полученные способом, включающим приведение соединения согласно настоящему изобретению в контакт с млекопитающим в течение периода времени, достаточного для получения продукта его метаболизма.

В первом аспекте настоящего изобретения предложено соединение формулы (I),

где

Y представляет собой N или СН;

R¹ и R² независимо друг от друга представляют собой

(i) морфолинил формулы (II)

где стрелка обозначает связь в формуле (I); и

где R³ и R⁴ независимо друг от друга представляют собой Н, C₁-С₃алкил, необязательно замещенный одним или двумя ОН, C₁-С₂фторалкил, С₁-С₂алкокси, С₁-С₂алкоксиС₁-С₃алкил, CN или С(O)O-С₁-С₂алкил; или R³ и R⁴ вместе образуют двухвалентный остаток -R⁵R⁶-, выбранный из C₁-С₃алкилена, необязательно замещенного 1-4 F, -СН₂-О-СН₂-, -CH₂-NH-CH₂- или любой из структур

где стрелки обозначают связи в формуле (II); или

(ii) насыщенное 6-членное гетероциклическое кольцо Z, выбранное из тиоморфолинила и пиперазинила, необязательно замещенное 1-3 R⁷; где R⁷ в каждом случае независимо представляет собой С₁-С₃алкил, необязательно замещенный одним или двумя ОН, C₁-С₂фторалкил, С₁-С₂алкоксиС₁-С₃алкил, С₃-С₆циклоалкил; или два заместителя R⁷ вместе образуют двухвалентный остаток -R⁸R⁹-, выбранный из С₁-С₃алкилена, необязательно замещенного 1-4 F, -СН₂-О-СН₂- или -О-СН₂СН₂-О-;

при условии, что по меньшей мере один из R¹ и R² представляет собой морфолинил формулы II;

и его пролекарства, метаболиты, таутомеры, сольваты и фармацевтически приемлемые соли, для применения в предупреждении или лечении неврологического расстройства у субъекта.

В другом аспекте изобретения предложено соединение формулы (I),

где

Х¹, Х² и X³ независимо друг от друга представляют собой N или СН, при условии, что по меньшей мере два из Х¹, Х² и X³ представляют собой N; Y представляет собой N или СН;

R¹ представляет собой 4-морфолинил, 2-метил-4-морфолинил, 3-метил-4-морфолинил, октадейтерий-4-морфолинил, 8-аза-3-оксабицикло[3.2.1]окт-8-ил или 3-аза-8-оксабицикло[3.2.1]окт-3-ил; и

R² представляет собой 4-морфолинил, 2-метил-4-морфолинил, 3-метил-4-морфолинил, октадейтерий-4-морфолинил, 8-аза-3-оксабицикло[3.2.1]окт-8-ил, 3-аза-8-оксабицикло[3.2.1]окт-3-ил, пиперазин-1-ил, 4-метилпиперазин-1-ил или 4-тиоморфолинил; для применения в предупреждении или лечении поражения кожи у субъекта.

Каждый алкильный фрагмент, по отдельности или в виде части большей группы, такой как алкокси, представляет собой линейную или разветвленную цепь и предпочтительно представляет собой C₁-С₃алкил, более предпочтительно C₁-С₂алкил. Примеры включают, в частности, метил, этил, н-пропил и проп-2-ил (изопропил). Примеры алкокси включают, в частности, метокси, этокси, н-пропокси и изопропокси. Как описано в настоящем документе, алкокси может включать дополнительные заместители, такие как атомы галогена, обеспечивающие галогеналкоксигруппы.

Термин «алкоксиалкил» относится к группе R-O-R', в которой группы R и R' представляют собой алкильные группы, как определено в настоящем документе. Примеры включают метоксиметил, метоксиэтил, этоксиэтил и метоксипропил.

Каждый алкиленовый фрагмент представляет собой линейную или разветвленную цепь и, в частности, представляет собой, например, -CH₂-, -СН₂-СН₂-, -СН(СН₃)-, -СН₂-СН₂-СН₂-, -СН(СН₃)-СН₂- или -СН(СН₂СН₃)- предпочтительно -СН₂-, -СН₂-СН₂- или -СН(СН₃)-

Каждый галогеналкильный фрагмент, по отдельности или в виде части большей группы, такой как галогеналкоксигруппа, представляет собой алкильную группу, замещенную одним или более одинаковыми или разными атомами галогена. Галоалкильные фрагменты включают, например, от 1 до 5 галогеновых заместителей или от 1 до 3 галогеновых заместителей. Примеры включают, в частности, фторметил, дифторметил, трифторметил, хлордифторметил и 2,2,2-трифторэтил.

Каждый галогеналкенильный фрагмент, по отдельности или в виде части большей группы, такой как галогеналкенилоксигруппа, представляет собой алкенильную группу, замещенную одним или более одинаковыми или разными атомами галогена. Примеры включают 2-дифторвинил и 1,2-дихлор-2-фторвинил. Галогеналкенильные фрагменты включают, например, от 1 до 5 галогеновых заместителей или от 1 до 3 галогеновых заместителей.

Каждый циклоалкильный фрагмент может быть в моно- или бициклической форме, обычно и предпочтительно в моноциклической форме, и предпочтительно содержит от 3 до 6 атомов углерода. Предпочтительные примеры моноциклических циклоалкильных групп включают, в частности, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.

Термин «гетероциклическое кольцо» относится к насыщенному или частично ненасыщенному карбоциклическому кольцу, содержащему в качестве членов кольца от одного до трех гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы. Такие кольца не содержат смежных атомов кислорода, смежных атомов серы или смежных атомов кислорода и серы в кольце. Предпочтительные примеры включают, в частности, тетрагидрофуранил, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, диоксанил, морфолинил, оксазолидинил и изооксазолидинил.

Если указано, что группа является необязательно замещенной, предпочтительно она имеет необязательно 1-3 заместителя, более предпочтительно необязательно 1-2 заместителя.

Некоторые соединения формулы (I) могут содержать один, или два, или более центров хиральности, и такие соединения могут быть представлены в виде чистых энантиомеров или чистых диастереоизомеров, а также в виде их смесей в любом соотношении. Соединения согласно изобретению также включают все таутомерные формы соединений формулы (I).

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предложено соединение формулы (I), как определено в настоящем документе, и его таутомеры, сольваты и фармацевтически приемлемые соли.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предложено соединение формулы (I), где X¹, X² и X³ представляют собой N.

В другом предпочтительном варианте осуществления (i) указанные X¹ и X² представляют собой N, и указанный X³ представляет собой СН; (ii) указанные X¹ и X³ представляют собой N, и указанный X² представляет собой СН; или (iii) указанные X² и X³ представляют собой N, и указанный X¹ представляет собой СН, и предпочтительно его таутомеры, сольваты и фармацевтически приемлемые соли. В другом варианте осуществления (i) указанные X¹ и X² представляют собой N, и указанный X³ представляет собой СН; или (ii) указанные X² и X³ представляют собой N, и указанный X¹ представляет собой СН, и предпочтительно его таутомеры, сольваты и фармацевтически приемлемые соли. В другом предпочтительном варианте осуществления указанные X¹ и X³ представляют собой N, и указанный X² представляет собой СН; и предпочтительно его таутомеры, сольваты и фармацевтически приемлемые соли.

В другом предпочтительном варианте осуществления указанный Y представляет собой N, и предпочтительно его таутомеры, сольваты и фармацевтически приемлемые соли. В другом предпочтительном варианте осуществления указанный Y представляет собой СН, и предпочтительно его таутомеры, сольваты и фармацевтически приемлемые соли.

В другом предпочтительном варианте осуществления указанные R¹ и R² независимо друг от друга выбраны из

В другом предпочтительном варианте осуществления указанное соединение выбрано из

4-(дифторметил)-5-(4,6-диморфолино-1,3,5-триазин-2-ил)пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-(4,6-диморфолино-1,3,5-триазин-2-ил)пиримидин-2-амина;

5-(4-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-6-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-1,3,5-триазин-2-ил)-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-(4-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-6-морфолино-1,3,5-триазин-2-ил)-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-(4-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-6-морфолино-1,3,5-триазин-2-ил)-4-(дифторметил)пиримидин-2-амина;

5-(4,6-бис((S)-3-метилморфолино)-1,3,5-триазин-2-ил)-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-(4,6-бис((S)-3-метилморфолино)-1,3,5-триазин-2-ил)-4-(дифторметил)пиримидин-2-амина;

(S)-4-(дифторметил)-5-(4-(3-метилморфолино)-6-морфолино-1,3,5-триазин-2-ил)пиридин-2-амина;

(S)-4-(дифторметил)-5-(4-(3-метилморфолино)-6-морфолино-1,3,5-триазин-2-ил)пиримидин-2-амина;

5-(4-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-6-((S)-3-метилморфолино)-1,3,5-триазин-2-ил)-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-(4-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-6-((S)-3-метилморфолино)-1,3,5-триазин-2-ил)-4-(дифторметил)пиримидин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-(4-морфолино-6-(пиперазин-1-ил)-1,3,5-триазин-2-ил)пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-(4-морфолино-6-(пиперазин-1-ил)-1,3,5-триазин-2-ил)пиримидин-2-амина;

(S)-4-(дифторметил)-5-(4-(3-метилморфолино)-6-(пиперазин-1-ил)-1,3,5-триазин-2-ил)пиридин-2-амина;

(S)-4-(дифторметил)-5-(4-(3-метилморфолино)-6-(пиперазин-1-ил)-1,3,5-триазин-2-ил)пиримидин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-(2,6-диморфолинопиримидин-4-ил)пиридин-2-амина;

4'-(дифторметил)-2,6-диморфолино-[4,5'-бипиримидин]-2'-амина;

4-(дифторметил)-5-(4,6-диморфолинопиримидин-2-ил)пиридин-2-амина;

4'-(дифторметил)-4,6-диморфолино-[2,5'-бипиримидин]-2'-амина;

4-(дифторметил)-5-(4-морфолино-6-тиоморфолино-1,3,5-триазин-2-ил)пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-(4-морфолино-6-тиоморфолиио-1,3,5-триазин-2-ил)пиримидин-2-амина;

5-(6-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-2-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)пиримидин-4-ил)-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-(2-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-6-морфолинопиримидин-4-ил)-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

2-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-4'-(дифторметил)-6-морфолино-[4,5'-бипиримидин]-2'-амина;

5-(2,6-бис((S)-3-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

4'-(дифторметил)-2,6-бис((S)-3-метилморфолино)-[4,5'-бипиримидин]-2'-амина;

(S)-4-(дифторметил)-5-(6-(3-метилморфолино)-2-морфолинопиримидин-4-ил)пиридин-2-амина;

(S)-4'-(дифторметил)-6-(3-метилморфолино)-2-морфолино-[4,5'-бипиримидин]-2'-амина;

5-(4-(8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)-6-(8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)-1,3,5-триазин-2-ил)-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис(2,2-диметилморфолин-4-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

(S)-4-(дифторметил)-5-(2-(3-метилморфолино)-6-морфолинопиримндин-4-ил)пиридин-2-амина;

(S)-4'-(дифторметил)-2-(3-метилморфолино)-6-морфолино-[4,5'-бипиримидин]-2'-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(2S,6R)-2,6-диметилморфолин-4-ил]-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис[(2R,6S)-2,6-диметилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис(3,7-диокса-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-(3,7-диокса-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)-6-(3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис(3,3-диметилморфолин-4-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис[(3R,5S)-3,5-диметилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-(3,3-диметилморфолин-4-ил)-6-морфолино-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3R,5S)-3,5-диметилморфолин-4-ил]-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-(3,3-диметилморфолин-4-ил)-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3R)-3-(метоксиметил)морфолин-4-ил]-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-(3,7-диокса-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(3-окса-6-азабицикло[3.1.1]гептан-6-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(6-окса-3-азабицикло[3.1.1]гептан-3-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[(1R,4R)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[(1S,4S)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис[(3R)-3-этилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис(8-окса-5-азаспиро[3.5]нонан-5-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис[(3R)-3-изопропилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина

4-(дифторметил)-5-[4-(3,3-диметилморфолин-4-ил)-6-[(3R,5S)-3,5-диметилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-(3,3-диметилморфолин-4-ил)-6-[(3R)-3-(метоксиметил)морфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

[(3R)-4-[4-[6-амино-4-(дифторметил)-3-пиридил]-6-(3,3-диметилморфолин-4-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]морфолин-3-ил]метанола;

4-(дифторметил)-5-[4-(3,3-диметилморфолин-4-ил)-6-(3,7-диокса-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

5-[4-(4-циклопропилпиперазин-1-ил)-6-(3,3-диметилморфолин-4-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-(3,3-диметилморфолин-4-ил)-6-[4-(2-метоксиэтил)пиперазин-1-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

[(3R)-4-[4-[6-амино-4-(дифторметил)-3-пиридил]-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]морфолин-3-ил]метанола;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3R,5R)-3,5-диметилморфолин-4-ил]-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3S,5S)-3,5-диметилморфолин-4-ил]-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-морфолино-6-(3-окса-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-(3,7-диокса-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)-6-(3-окса-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

5-[4,6-бис[(3S,5S)-3,5-диметилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]-4-(дифторметил)пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-(3,7-диокса-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)-6-морфолино-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3S)-3-этилморфолин-4-ил]-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3R)-3-этилморфолин-4-ил]-6-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-l,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина;

4-(дифторметил)-5-[4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(8-окса-5-азаспиро[3.5]нонан-5-ил)-1,3,5-триазин-2-ил]пиридин-2-амина.