Соединение гидрокситриазина и его применение в медицинских целях

Изобретение относится к соединению формулы [I-c] или его фармацевтически приемлемой соли, имеющему ингибирующую активность mPGES-1. Технический результат: получены новые соединения, которые имеют ингибирующую активность mPGES-1 и могут быть использованы для получения ингибитора mPGES-1. 9 н. и 3 з.п. ф-лы, 6 табл., 145 пр.

 

Область техники

[0001]

Настоящее изобретение относится к соединению гидрокситриазина, имеющему ингибирующую активность микросомальной простагландин Е2 синтазы-1 (mPGES-1), или его фармацевтически приемлемой соли, к фармацевтической композиции, содержащей вышеупомянутое, к их фармацевтическому применению и тому подобное.

Предпосылки создания изобретения

[0002]

Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) часто используют для лечения заболеваний, сопровождающихся воспалением, лихорадкой и болью, например, ревматизма, остеоартрита, головной боли и тому подобное. НПВС проявляют противовоспалительное действие, жаропонижающее действие и обезболивающее действие, предотвращая выработку простаноидов путем ингибирования циклооксигеназы (COX).

[0003]

COX включает две изоформы, СОХ-1, которая повсеместно распространена и конститутивно экспрессируется, и СОХ-2, экспрессия которой индуцируется различными провоспалительными стимулами, например, цитокинами, такими как интерлейкин-1β (IL-1β) и тому подобное. COX-1 и COX-2 представляют собой ферменты, которые превращают арахидоновую кислоту, полученную из фосфолипидов клеточной мембраны в простагландин H2 (PGH2), который является предшественником простаноида. Конкретные простагландинсинтазы ответственны за превращение PGH2 в соответствующие простаноиды (простагландин Е2 (PGE2), простагландин F2α (PGF2α), простагландин I2 (PGI2), простагландина D2 (PGD2), тромбоксан А2 (ТХА2) и т.д.). Эти простаноиды имеют различные физиологические активности, например, индукция/подавление воспаления, вазодилатация/вазоконстрикция, бронходилатация/бронхоконстрикция, индукция/пробуждение от сна, развитие лихорадки и тому подобное. PGE2 является наиболее часто существующим простагландином в живых организмах, и, как известно, глубоко вовлечен в воспаление, боль и лихорадку. Таким образом, супрессия продукции PGE2 считается основным механизмом действия НПВП.

[0004]

Ингибирование COX-1 или COX-2 подавляет всю продукцию простаноидов в их прямом направлении. Это, как считают, является причиной побочных эффектов НПВП. Так как НПВП, которые неселективно ингибируют COX, также подавляют продукцию PGE2 СОХ-1 и PGE2 защитно действует на повреждения слизистой желудка, считают, НПВП подавляют секрецию желудочной слизи и кровоток слизистой желудка, тем самым увеличивая риск перфораций желудка, кровотечения и тому подобное. В то время как селективные ингибиторы COX-2 подавляют продукцию PGI2, имеющего вазодилатационное действие и ингибирующее действие на агрегацию тромбоцитов в эндотелиальных клетках сосудов, они не подавляют продукцию TXA2, который является фактором свертывания крови, продуцируемым тромбоцитами COX-1. Поэтому, они, как полагают, разрушают баланс системы свертывания крови, увеличивая риск сердечно-сосудистого заболевания.

[0005]

Микросомальная простагландин Е2 синтаза-1 (mPGES-1) представляет собой фермент, который катализирует конечную стадию биосинтеза PGE2, и относится к семейству связанных с мембраной белков в метаболизме эйкозаноида и глутатиона (семейство MAPEG). Ген mPGES-1 человека был клонирован в 1999 году, и было указано, что конститутивно экспрессируется в плаценте, простате, яичке и молочной железе (непатентный документ 1). В других органах, экспрессия гена mPGES-1 человека индуцируется различными провоспалительными стимулами, конъюгированными с COX-2. Например, воспалительный цитокин IL-1β и фактор некроза опухоли-α (TNF α) индуцирует экспрессию mPGES-1 в синовиальной клетке, остеобластах, клетке эндотелия, орбитальных фибробластах, десневой клетке, хондроцитах, эндотелиальной клетке, клетке миокарда и тому подобное. Например, липополисахарид (LPS), который представляет собой бактериальный эндотоксин, индуцирует экспрессию mPGES-1 в макрофагах, гладких мышцах и тому подобное.

[0006]

Ингибитор mPGES-1, как полагают, селективно подавляет продукцию PGE2 только в локальном участке воспаления или ткани, где mPGES-1 экспрессируется, и не подавляет продукцию простаноидов (PGI2, PGD2, PGF2α, TXA2 и т.д.), отличных от PGE2 (непатентные документы 2, 3). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается лекарственным средством, имеющим эффективность, эквивалентную таковой НПВП, но без побочных эффектов НПВП, полученных из уменьшения продукции простаноидов, отличных от PGE2.

[0007]

Известно также, что, когда один из метаболических путей в прямом направлении от PGH2 перекрывается в каскаде арахидоновой кислоты, PGH2 преобразуется в простаноиды, отличные от закрытого пути, или возникает шунтовый путь. То есть, известно, что в то время как количество продукции PGE2 в макрофагах, полученных от мышей, нокаутированных по mPGES-1, стимулированных LPS, становится ниже, чем количество продукции PGE2 в макрофагах, полученных от мышей дикого типа, стимулированных LPS, количества продукции TXB2, PGI2, PGD2 и PGF2α в макрофагах, полученных от мышей, нокаутированных по mPGES-1, стимулированных LPS, увеличиваются выше количества их продукции в макрофагах, полученных от мышей дикого типа, стимулированных LPS (непатентный документ 4). Поскольку ингибитор mPGES-1 увеличивает продукцию других простаноидов при одновременном подавлении продукции PGE2, он считается эффективным даже при заболеваниях, отличных от тех, которые лечат НПВП.

[0008]

Использование ингибитора mPGES-1 описано ниже.

(1) боль

У мышей, нокаутированных по mPGES-1, количество продукции PGE2 в брюшной полости и ноцицептивная реакция в единицу времени значительно уменьшаются по сравнению с мышами дикого типа, в оценке ноцицептивной реакции стимуляцией LPS, которая является моделью острой воспалительной боли. Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается анальгетиком при острой воспалительной боли (непатентные документы 3, 6).

(2) ревматизм

Ген mPGES-1 шведских женщин содержит несколько однонуклеотидных полиморфизмов, которые увеличивают риск возникновения и тяжесть ревматизма. Увеличение экспрессии mPGES-1 подтверждено иммуногистологическими способами в синовии больных ревматизмом, показывающих однонуклеотидный полиморфизм (ссылочный SNP идентификационный номер: rs23202821), что увеличивает степень тяжести, по сравнению с пациентами без мутации (непатентный документ 5). У мышей, нокаутированных по mPGES-1, внутрисуставная инфильтрация воспалительных клеток, деструкция суставов и опухание всех четырех конечностей в значительной степени подавляются на модели индуцированного коллагеном артрита, который является животной моделью ревматизма, по сравнению с мышами дикого типа (непатентный документ 6). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается терапевтическим лекарственным средством при ревматизме.

(3) остеоартрит

Экспрессия мРНК mPGES-1 увеличивается в клетках мениска пациентов с остеоартритом (непатентный документ 7). Ингибитор mPGES-1 уменьшает ноцицептивные реакции в модели остеоартрита с использованием монойодуксусной кислоты, по сравнению с мышами дикого типа (патентный документ 1). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается терапевтическим лекарственным средством при остеоартрите.

(4) лихорадка

У мышей, нокаутированных по mPGES-1, повышение температуры тела за счет стимуляции LPS подавляется по сравнению с мышами дикого типа (непатентный документ 8). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается жаропонижающим лекарственным средством.

(5) болезнь Альцгеймера

Длительное применение НПВП уменьшает риск возникновения и прогрессирования болезни Альцгеймера. При терапии β-амилоидного пептида, продукция PGE2 в первичной культуре нейронов головного мозга мышей, нокаутированных по mPGES-1, уменьшается, по сравнению с нейронами головного мозга у мышей дикого типа, и гибель нервных клеток не наступает (непатентный документ 9). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается терапевтическим лекарственным средством для лечения болезни Альцгеймера.

(6) рассеянный склероз

Ген EP4 у больных рассеянным склерозом содержит несколько однонуклеотидных полиморфизмов, которые увеличивают риск начала (ссылочные SNP идентификационные номера: rs9292777, rs4613763, rs1044063, rs6896969). В макрофаге, присутствующем в перивентрикулярном очаге демиелинизации больных рассеянным склерозом, экспрессия mPGES-1 белка подтверждена. У мышей, нокаутированных по mPGES-1, продукция PGE2 в спинном мозге модели мыши экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита, которая представляет собой животную модель рассеянного склероза, подавляется, и подавляется прогрессирование паралича, по сравнению с мышами дикого типа (непатентный документ 10). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается терапевтическим лекарственным средством для рассеянного склероза.

(7) артериосклероз

У мышей, нокаутированных по mPGES-1, продукция PGE2 в сосудистых эндотелиальных клетках мышей, дефицитных по рецептору липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), откормленных богатой жиром пищей, которая представляет собой модель атеросклероза, уменьшается, и образование атеросклеротической бляшки замедляется по сравнению с мышами дикого типа. В эндотелиальных клетках сосудов, продукция PGI2, который, как известно, ингибирует тромбогенез, увеличивается (непатентный документ 11). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается профилактическим или терапевтическим лекарственным средством для артериосклероза.

(8) глаукома, глазная гипертензия

Глаукома представляет собой заболевание, показывающее характерное изменение зрительного нерва и поля зрения. Заболевание зрительного нерва можно в большинстве случаев улучшить или подавить путем существенного снижения внутриглазного давления. Глаукому можно разделить на открытоугольную глаукому и закрытоугольную глаукому.

Ген mPGES-1 конститутивно экспрессируется на высоком уровне в конъюнктиве человека (GEO No доступа: GSE2513 (Gene Expression Omnibus:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/)). В сетчатке у пациентов с глаукомой, экспрессия mPGES-1 увеличивается по сравнению со здоровыми индивидами. В сетчатке собак с высоким внутриглазным давлением и мышей с высоким внутриглазным давлением, которые являются моделями глаукомы, экспрессия mPGES-1 увеличивается по сравнению с нормальными животными (GEO No доступа: GSE2378 человека, GSE21879 собаки, GSE3554 мыши).

Когда PGE2 закапывают в глаза здоровых индивидов, внутриглазное давление увеличивается, наряду с расширением кровеносных сосудов, в течение 2 часов после закапывания (непатентный документ 12). Когда PGE2 вводят кроликам субконъюнктивально, внутриглазное давление повышается за счет дилатации цилиарного тела и повышения продукции внутриглазной жидкости (непатентный документ 13). PGF2α и PGD2, которые представляют собой простагландины, которые могут увеличиваться, когда mPGES-1 ингибируется, уменьшают внутриглазное давление кролика (непатентный документ 14). Препараты PGF2α увеличивают отток внутриглазной жидкости и используются в качестве терапевтических лекарственных средств при глаукоме для снижения внутриглазного давления. PGI2 не оказывает четкое действие на внутриглазное давление кроликов. То есть, внутриглазное давление, как полагают, уменьшается, так как уменьшение PGE2 подавляет продукцию внутриглазной жидкости ингибированием mPGES-1, и/или поскольку увеличение PGD2 и PGF2α способствует оттоку внутриглазной жидкости, вследствие шунта. Кроме того, когда ингибитор mPGES-1 вводят путем инстилляции в глаза обезьяны Cynomolgus с нормальным внутриглазным давлением, внутриглазное давление значительно уменьшается (патентный документ 2).

Кроме того, PGE2 стимулирует экспрессию фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) в сетчатке (непатентный документ 15). Так как VEGF, продуцируемый в сетчатке переносится к переднему сегменту глаза, вызывая ангиогенез глаукомы, которая представляет собой повышение внутриглазного давления, которое вызвано обструкцией величины угла из-за ангиогенеза в радужной оболочке глаза, ингибитор mPGES-1, как полагают, показывает положительный или профилактический эффекта на ангиогенез глаукомы, также. Кроме того, принимая во внимание противовоспалительное действие за счет ингибирования продукции PGE2, ингибитор mPGES-1 применим к пациентам, имеющим внутриглазное воспаление, которые требуют осторожного введения существующих составов простагландина (латанопрост и тому подобное). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается терапевтическим лекарственным средством также эффективным при глаукоме, имеющей различные фоновые заболевания.

(9) ишемическое заболевание сетчатки

Повышенная секреция VEGF играет ключевую роль в ишемических заболеваниях сетчатки, таких как диабетическая ретинопатия, диабетический макулярный отек, окклюзия вены сетчатки и тому подобное. Так как PGE2 способствует экспрессии VEGF (непатентный документ 15), считается, что ингибитор mPGES-1 улучшает эти заболевания.

(10) системная склеродермия

Экспрессия mPGES-1 увеличивается в коже пациентов с системной склеродермией, по сравнению со здоровыми индивидами. Аналогичным образом, экспрессия mPGES-1 увеличивается в коже мышиной модель склеродермии, индуцированной блеомицином, которая является моделью системной склеродермии, по сравнению с кожей нормальных мышей. По сравнению с мышами дикого типа, мыши, нокаутированные по mPGES-1, показали уменьшение накопления макрофагов в поражении кожи мышиной модель склеродермии, индуцированной блеомицином, и смягчение кожного утолщения, накопление внеклеточного матрикса и увеличение содержания коллагена (непатентный документ 16). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается терапевтическим лекарственным средством для системной склеродермии.

(11) рак

У мышей, нокаутированных по mPGES-1, количество и размер полипа были в значительной степени подавлены у азоксиметан-индуцированной мышиной модели колоректального рака, которая является животной моделью колоректального рака, по сравнению с мышами дикого типа. У мышей, нокаутированных по mPGES-1, продукция PGE2 в опухолевой ткани толстого кишечника уменьшилась и продуцируемое количество PGI2, который ингибирует адгезию раковых клеток, и PGD2, который индуцирует гибель клеток с помощью γ-рецептора, активируемого пролифератором пероксисом (PPARγ) увеличилось, по сравнению с мышами дикого типа. Когда клетки колоректального рака или рака легкого были пересажены в селезенку мышей, нокаутированных по mPGES-1, масса после трансплантации опухоли селезенки и скорость метастазирования в печени уменьшились по сравнению с мышами дикого типа. Рост раковых клеток легкого был уменьшен, когда их со-культивировали in vitro с макрофагами костного мозга, полученными у мышей, нокаутированных по mPGES-1, по сравнению с тем, когда их со-культивировали с макрофагами костного мозга, полученными у мышей дикого типа, что указывает на то, что PGE2, полученный из макрофага хозяина, участвует в росте раковой клетки (непатентный документ 17). Таким образом, ингибитор mPGES-1 считается противораковым лекарственным средством, которое подавляет рост и метастазирование рака, включая колоректальный рак.

(12) заболевание, для которого супрессия продукции PGE2 является эффективной

В качестве воспалительных симптомов и/или боли, относящихся к таким состояниям, для которых НПВП являются эффективными, могут быть упомянуты, например, артрит, подагра, нефролитиаз, уролитиаз, головная боль, менструальная боль, зубная боль, люмбаго, мышечная боль, плечелопаточный периартрит, цервикальный синдром, височно-нижнечелюстные нарушения, и послеоперационное или посттравматическое воспаление и боль, и воспаление и боль после удаления зуба. Помимо них, может быть упомянуто острое и хроническое небактериальное воспаление глаза и, например, могут быть упомянуты увеит, аллергический конъюнктивит и послеоперационное воспаление, и боль в глазу при внутриглазной операции.

Основным механизмом эффективности НПВП считается супрессия продукции PGE2, который является стимулятором воспаления. Так как ингибитор mPGES-1 также имеет супрессивное действие на продукцию PGE2, он считается терапевтическим лекарственным средством для этих заболеваний.

[0009]

Ингибитор mPGES-1, как полагают, эффективен для профилактики или лечения боли, ревматизма, остеоартрита, лихорадки, болезни Альцгеймера, рассеянного склероза, атеросклероза, глаукомы, глазной гипертензии, ишемического заболевания сетчатки, системной склеродермии, рака, включая колоректальный рак, и/или заболеваний для которых супрессия продукции PGE2 является эффективной.

Перечень документов

Патентный документ

[0010]

Патентный документ 1: WO 2012/161965

Патентный документ 2: WO 2015/125842

Непатентный документ

[0011]

Непатентный документ 1: JAKOBSSON, PJ et al. Identification of human prostaglandin E synthase: a microsomal, glutathione-dependent, inducible enzyme, constituting a potential novel drug target. Proc Natl Acad Sci U S A. Jun 22 1999, Vol.96, No.13, pages 7220-7225.

Непатентный документ 2: SAMUELSSON, B et al. Membrane prostaglandin E synthase-1: a novel therapeutic target. Pharmacol Rev. Sep 2007, Vol.59, No.3, pages 207-224.

Непатентный документ 3: KAMEI, D et al. Reduced pain hypersensitivity and inflammation in mice lacking microsomal prostaglandin e synthase-1. J Biol Chem. Aug 6 2004, Vol.279, No.32, pages 33684-33695.

Непатентный документ 4: TREBINO, CE et al. Redirection of eicosanoid metabolism in mPGES-1-deficient macrophages. J Biol Chem. Apr 29 2005, Vol.280, No.17, pages 16579-16585.

Непатентный документ 5: KOROTKOVA, M et al. Variants of gene for microsomal prostaglandin E2 synthase show association with disease and severe inflammation in rheumatoid arthritis. Eur J Hum Genet. Aug 2011, Vol.19, No.8, pages 908-914.

Непатентный документ 6: TREBINO, CE et al. Impaired inflammatory and pain responses in mice lacking an inducible prostaglandin E synthase. Proc Natl Acad Sci U S A. Jul 22 2003, Vol.100, No.15, pages 9044-9049.

Непатентный документ 7: SUN, Y et al. Analysis of meniscal degeneration and meniscal gene expression. BMC Musculoskelet Disord. 2010, Vol.11, pages 19.

Непатентный документ 8: ENGBLOM, D et al. Microsomal prostaglandin E synthase-1 is the central switch during immune-induced pyresis. Nat Neurosci. Nov 2003, Vol.6, No.11, pages 1137-1138.

Непатентный документ 9: KUROKI, Y et al. Deletion of microsomal prostaglandin E synthase-1 protects neuronal cells from cytotoxic effects of beta-amyloid peptide fragment 31-35. Biochem Biophys Res Commun. Aug 3 2012, Vol.424, No.3, pages 409-413.

Непатентный документ 10: KIHARA, Y et al. Targeted lipidomics reveals mPGES-1-PGE2 as a therapeutic target for multiple sclerosis. Proc Natl Acad Sci U S A. Dec 22 2009, Vol.106, No.51, pages 21807-21812.

Непатентный документ 11: WANG, M et al. Deletion of microsomal prostaglandin E synthase-1 augments prostacyclin and retards atherogenesis. Proc Natl Acad Sci U S A. Sep 26 2006, Vol.103, No.39, pages 14507-14512.

Непатентный документ 12: FLACH, AJ et al. Topical prostaglandin E2 effects on normal human intraocular pressure. J Ocul Pharmacol. Spring 1988, Vol.4, No.1, pages 13-18.

Непатентный документ 13: NAKAJIMA, T et al. [Effects of prostaglandin E2 on intraocular pressure, anterior chamber depth and blood flow volume of the iris and the ciliary body in rabbit eyes]. Nihon Ganka Gakkai Zasshi. Apr 1992, Vol.96, No.4, pages 455-461.

Непатентный документ 14: GOH, Y et al. Prostaglandin D2 reduces intraocular pressure. Br J Ophthalmol. Jun 1988, Vol.72, No.6, pages 461-464.

Непатентный документ 15: YANNI, SE et al. The role of PGE2 receptor EP4 in pathologic ocular angiogenesis. Invest Ophthalmol Vis Sci. Nov 2009, Vol.50, No.11, pages 5479-5486.

Непатентный документ 16: MCCANN, MR et al. mPGES-1 null mice are resistant to bleomycin-induced skin fibrosis. Arthritis Res Ther. 2011, Vol.13, No.1, pages R6.

Непатентный документ 17: SASAKI, Y et al. Microsomal prostaglandin E synthase-1 is involved in multiple steps of colon carcinogenesis. Oncogene. Jun 14 2012, Vol.31, No.24, pages 2943-2952.

Сущность изобретения

[0012]

Настоящее изобретение относится к соединению гидрокситриазина, имеющему ингибирующую активность mPGES-1, или его фармацевтически приемлемой соли, к фармацевтической композиции, содержащей вышеупомянутое, и к их фармацевтическому применению и тому подобное. Примеры целевого заболевания включают боль, ревматизм, лихорадку, остеоартрит, артериосклероз, болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, глаукому, глазную гипертензию, ишемическое заболевание сетчатки, системную склеродермию, рак, включая колоректальный рак, и заболевания, для которых супрессия продукции PGE2 является эффективной.

[0013]

Авторы настоящего изобретения обнаружили соединение гидрокситриазина, имеющее ингибирующую активность mPGES-1, которое представлено следующей формулой [I-a], [I-b] или [I-c], и завершили настоящее изобретение.

[0014]

Соответственно, настоящее изобретение заключается в следующем.

[1] Соединение формулы [I-a], [I-b] или [I-c] или его фармацевтически приемлемая соль:

[0015]

[0016]

где

R¹ представляет собой

(1) формулу:

[0017]

[0018]

где

R^1a представляет собой C_1-4 алкил,

R^1b представляет собой C_1-4 алкил или трифторметил, и

R^1c представляет собой

(a) C_1-4 алкил,

(b) C_1-4 фторалкил,

(c) C_1-4 алкокси, или

(d) C_1-4 алкокси C_1-4 алкил, или

(2) формулу:

[0019]

[0020]

где

n равен 1, 2, 3, 4 или 5, и

R^1d представляет собой

(a) фтор,

(b) C_1-4 алкил,

(c) C_1-4 фторалкил,

(d) C_1-4 алкокси, или

(e) C_1-4 алкокси C_1-4 алкил,

R² представляет собой водород или C_1-4 алкил,

R³ представляет собой

(1) водород,

(2) галоген,

(3) C_1-4 алкил, или

(4) C_1-4 алкокси,

R⁴ представляет собой

(1) формулу:

[0021]

[0022]

где

R^4a представляет собой водород, C_1-4 алкил или C_1-4 алкокси, или

(2) формулу:

[0023]

[0024]

R⁵ представляет собой C_1-6 алкил,

R⁶ представляет собой

(1) C_1-6 алкил,

(2) C_3-5 циклоалкил, или

(3) C_1-4 алкокси C_1-4 алкил, и

X представляет собой CH₂ или O,

при условии, что когда R² в формуле [I-a] представляет собой C_1-4 алкил, тогда R³ представляет собой водород.

[0025]

[2] Соединение или фармацевтически приемлемая соль по пункту [1], где в формуле [I-a],

R² и R³ оба представляют собой водород, и

R⁴ представляет собой

(1) изопропил или трет-бутил, или

(2) формулу:

[0026]

[0027]

[3] Соединение или фармацевтически приемлемая соль по пункту [1], где в формуле [I-a],

R² представляет собой водород,

R³ представляет собой хлор, и

R⁴ представляет собой изопропил.

[0028]

[4] Соединение или фармацевтически приемлемая соль по пункту [1], где X в формуле [I-b] представляет собой O.

[0029]

[5] Соединение или фармацевтически приемлемая соль по пункту [1], где в формуле [I-c],

R² представляет собой водород, и

R⁶ представляет собой 1-метилбутил или н-гексил.

[0030]

[6] Соединение или фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[5], где R¹ представляет собой формулу:

[0031]

[0032]

где

R^1a представляет собой C_1-4 алкил,

R^1b представляет собой C_1-4 алкил или трифторметил, и

R^1c представляет собой

(b) дифторметил или трифторметил, или

(c) метокси.

[0033]

[7] Соединение или фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[5], где R¹ представляет собой формулу:

[0034]

[0035]

где

n равен 3, 4 или 5, и

R^1d представляет собой

(a) фтор,

(c) C_1-4 фторалкил,

(d) метокси, или

(e) метоксиметил.

[0036]

[8] Соединение или фармацевтически приемлемая соль по пункту [7], где

n равен 3 или 4, и

R^1d представляет собой монофторметил, дифторметил или трифторметил.

[0037]

[9] Соединение, выбранное из следующих формул:

[0038]

,

[0039]

или его фармацевтически приемлемая соль.

[0040]

[10] Фармацевтическая композиция, содержащая соединение или фармацевтически приемлемую соль по любому из пунктов [1]-[9], и фармацевтически приемлемый носитель.

[0041]

[11] Ингибитор mPGES-1, содержащий соединение или фармацевтически приемлемую соль по любому из пунктов [1]-[9].

[0042]

[12] Терапевтическое или профилактическое средство при боли, ревматизме, лихорадке, остеоартрите, атеросклерозе, болезни Альцгеймера, рассеянном склерозе, глаукоме, глазной гипертензии, ишемическом заболевании сетчатки, системной склеродермии и/или раке, которое содержит соединение или фармацевтически приемлемую соль по любому из пунктов [1]-[9].

[0043]

[13] Терапевтическое или профилактическое средство при глаукоме и/или глазной гипертензии, которое содержит соединение или фармацевтически приемлемую соль по любому из пунктов [1]-[9] и одно или несколько видов других терапевтических средств для лечения глаукомы в комбинации.

[0044]

[14] Способ ингибирования mPGES-1, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому из пунктов [1]-[9] человеку.

[0045]

[15] Способ лечения или профилактики боли, ревматизма, лихорадки, остеоартрита, артериосклероза, болезни Альцгеймера, рассеянного склероза, глаукомы, глазной гипертензии, ишемического заболевания сетчатки, системной склеродермии и/или рака, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому из пунктов [1]-[9] человеку.

[0046]

[16] Способ лечения или профилактики глаукомы и/или глазной гипертензии, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому из пунктов [1]-[9] и одного или нескольких видов других терапевтических средств для лечения глаукомы человеку.

[0047]

[17] Применение соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому из пунктов [1]-[9] для получения ингибитора mPGES-1.

[0048]

[18] Применение соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому из пунктов [1]-[9] для получения терапевтического или профилактического средства при боли, ревматизме, лихорадке, остеоартрите, атеросклерозе, болезни Альцгеймера, рассеянном склерозе, глаукоме, глазной гипертензии, ишемическом нарушении сетчатки, системной склеродермии и/или раке.

[0049]

Варианты осуществления изобретения

Определения терминов, используемых в настоящем изобретении, являются следующими.

[0050]

ʺГалогенʺ представляет собой фтор, хлор, бром или йод.

[0051]

ʺC_1-4 алкилʺ означает алкил с прямой цепью или разветвленной цепью, имеющий от 1 до 4 атомов углерода. Их примеры включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил и тому подобное. Предпочтительными являются метил, этил, пропил, изопропил, бутил и трет-бутил.

[0052]

ʺC_1-6 Алкилʺ означает алкил с прямой цепью или разветвленной цепью, имеющий 1-6 атомов углерода. Их примеры включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, нео-пентил, 1-этилпропил, гексил, изогексил, 1-метилбутил, 1,1-диметилбутил, 2,2-диметилбутил, 3,3-диметилбутил, 2-этилбутил и тому подобное. Предпочтительными являются метил, этил, пропил, втор-бутил, пентил, гексил, 1-метилбутил и 2,2-диметилбутил.

[0053]

ʺC_1-4 Алкоксиʺ означает алкокси, где алкильная группа представляет собой определенный выше ʺC_1-4 алкилʺ. Их примеры включают метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, втор-бутокси, трет-бутокси и тому подобное. Предпочтительным является метокси.

[0054]

ʺC_1-4 Фторалкилʺ означает алкил с прямой цепью или разветвленной цепью, имеющий 1-4 атома углерода, который замещен 1-3 фтором. Их примеры включают монофторметил, дифторметил, трифторметил, 1,1-дифторэтил, 2,2,2-трифторэтил и тому подобное. Предпочтительными являются монофторметил, дифторметил и трифторметил.

[0055]

ʺC_1-4 Алкокси C_1-4 алкилʺ означает определенный выше ʺC_1-4 алкилʺ, замещенный определенным выше ʺC_1-4 алкоксиʺ. Их примеры включают метоксиметил, 4-метоксибутил, 3-этоксипропил, 2-пропоксиэтил и тому подобное. Предпочтительными являются 4-метоксибутил, 3-этоксипропил и 2-пропоксиэтил.

[0056]

ʺC_3-5 Циклоалкилʺ означает 3-5-членный моноциклический циклоалкил. Их примеры включают циклопропил, циклобутил и циклопентил. Предпочтительным является циклобутил.

[0057]

Среди соединений формул [I-a], [I-b] и [I-c] предпочтительным вариантом осуществления является соединение формулы [I-c].

[0058]

Одним из более предпочтительных вариантов осуществления является соединение формулы [I-c], где

R¹ представляет собой

(1) формулу:

[0059]

[0060]

где

R^1a представляет собой C_1-4 алкил,

R^1b представляет собой C_1-4 алкил или трифторметил, и

R^1c представляет собой

(b) C_1-4 фторалкил,

(c) C_1-4 алкокси, или

(d) C_1-4 алкокси C_1-4 алкил, или

(2) формулу:

[0061]

[0062]

где

n равен 1, 2, 3, 4 или 5, и

R^1d представляет собой

(a) фтор,

(b) C_1-4 алкил,

(c) C_1-4 фторалкил,

(d) C_1-4 алкокси, или

(e) C_1-4 алкокси C_1-4 алкил,

R² представляет собой водород, и

R⁶ представляет собой

(1) C_1-6 алкил,

(2) C_3-5 циклоалкил, или

(3) C_1-4 алкокси C_1-4 алкил.

[0063]

Фармацевтически приемлемой солью соединения, представленного формулой [I-a], [I-b] или [I-c] (в дальнейшем также упоминается как соединение по настоящему изобретению), может быть любая соль, при условии, что она образует нетоксичную соль с соединением по настоящему изобретению, и примеры этих солей включают соли с неорганическими кислотами, соли с органическими кислотами, соли с неорганическим основанием, соли с органическим основанием, соли с аминокислотой и тому подобное.

Различные формы фармацевтически приемлемых солей хорошо известны в данной области и, например, они описаны в следующих документах.

(a) Berge et al., J. Pharm. Sci., 66, p 1-19 (1977),

(b) Stahl et al., ʺHandbook of Pharmaceutical Salt: Properties, Selection, and Useʺ (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002),

(c) Paulekuhn et al., J. Med. Chem., 50, p 6665-6672 (2007)

Примеры солей с неорганической кислотой включают соли с хлористоводородной кислотой, азотной кислотой, серной кислотой, фосфорной кислотой, бромисто-водородной кислотой и тому подобное.

Примеры солей с органической кислотой включают соли с щавелевой кислотой, малеиновой кислотой, лимонной кислотой, фумаровой кислотой, молочной кислотой, яблочной кислотой, янтарной кислотой, винной кислотой, уксусной кислотой, трифторуксусной кислотой, глюконовой кислотой, аскорбиновой кислотой, метансульфоновой кислотой, бензолсульфоновой кислотой, п-толуолсульфоновой кислотой и тому подобное.

Примеры солей с органической кислотой включают соли с адипиновой кислотой, альгиновой кислотой, 4-аминосалициловой кислотой, ангидрометиленлимонной кислотой, бензойной кислотой, эдетатом кальция, камфорной кислотой, камфор-10-сульфоновой кислотой, угольной кислотой, этилендиаминтетрауксусной кислотой, этан-1,2-дисульфоновой кислотой, додецилсерной кислотой, этансульфоновой кислотой, глюкогептоновой кислотой, глюкуроновой кислотой, глюкогептоновой кислотой, гликолиларсаниловой кислоты, гексилрезорциновой кислотой, фтористоводородной кислотой, йодистоводородной кислотой, гидроксинафтойной кислотой, 2-гидрокси-1-этансульфоновой кислотой, лактобионовой кислотой, миндальной кислотой, метилсерной кислотой, метилазотной кислотой, метиленбис(салициловой кислотой), галактаровой кислотой, нафталин-2-сульфоновой кислотой, 2-нафтойной кислотой, 1,5-нафталиндисульфоновой кислотой, олеиновой кислотой, памовой кислотой, пантотеновой кислотой, пектиновой кислотой, пикриновой кислотой, пропионовой кислотой, полигалактуроновой кислотой, салициловой кислотой, стеариновой кислотой, дубильной кислотой, теоклиновой кислотой, тиоциановой кислотой, ундекановой кислотой и тому подобное.

Примеры солей с неорганическим основанием включают соль натрия, соль калия, соль кальция, соль магния, соль аммония и тому подобное.

Кроме того, примеры солей с неорганическим основанием включают соли с алюминием, барием, висмутом, литием или цинком.

Примеры солей с органическим основанием включают соли с метиламином, диэтиламином, триметиламином, триэтиламином, этаноламином, диэтаноламином, триэтаноламином, этилендиамином, трис(гидроксиметил)метиламином, дициклогексиламином, N,N'-дибензилэтилендиамином, гуанидином, пиридином, пиколином, холином, цинхонином, меглумином и тому подобное.

Кроме того, примеры солей с органическим основанием также включают соли с ареколином, бетаином, клемизолем, N-метилглюкамином, N-бензилфенэтиламином или трис(гидроксиметил)метиламином.

Примеры солей с аминокислотой включают соли с лизином, аргинином, аспарагиновой кислотой, глутаминовой кислотой и тому подобное.

Среди вышеуказанных солей предпочтительными являются соли с хлористоводородной кислотой, серной кислотой или п-толуолсульфоновой кислотой.

Различные соли могут быть получены путем взаимодействия соединения по настоящему изобретению с неорганическим основанием, органическим основанием, неорганической кислотой, органической кислотой или аминокислотой в соответствии с известным способом.

[0064]

Соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль может присутствовать в виде сольвата. «Сольват» представляет собой соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, которое координируется с молекулой растворителя, и также охватывает гидраты. Сольват, предпочтительно, представляет собой фармацевтически приемлемый сольват, и его примеры включают гидрат, этанолят, диметилсульфоксидат и тому подобное соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Конкретные примеры включают полугидрат, моногидрат, дигидрат или моноэтанолат соединения по настоящему изобретению, моногидрат соли натрия или 2/3-этанолат дигидрохлорида соединения по настоящему изобретению и тому подобное.

Сольваты могут быть получены известным способом.

[0065]

Кроме того, соединение по настоящему изобретению может быть мечено изотопом (например, ²H, ³H, ¹⁴C, ³⁵S и тому подобное).

[0066]

Соединение по настоящему изобретению может существовать в виде таутомера. В этом случае, соединение по настоящему изобретению, может быть отдельным таутомером или их смесью. Например, соединение, представленное формулой [I-а], может содержать таутомер, показанный ниже

[0067]

[0068]

Такой таутомер также входит в соединение, представленное формулой [I-a].

Соединение по настоящему изобретению может иметь двойную углеродную связь. В этом случае, соединение по настоящему изобретению, может существовать в виде Е-формы, Z-формы или смеси Е-формы и Z-формы.

Соединение по настоящему изобретению может содержать стереоизомеры, которые должны быть признаны как цис/транс-изомер. В этом случае, соединение по настоящему изобретению, может быть представлено в виде цис-формы, транс-формы, или смеси цис-формы и транс-формы.

Соединение по настоящему изобретению может содержать один или несколько асимметричных атомов углерода. В этом случае, соединение по настоящему изобретению может присутствовать в виде единственного энантиомера, единственного диастереомера, смеси энантиомеров или смеси диастереомеров.

Соединение по настоящему изобретению может присутствовать в виде атропоизомера. В этом случае, соединение по настоящему изобретению может присутствовать в виде одного атропоизомера или их смеси.

Соединение по настоящему изобретению может одновременно содержать множественные структурные характеристики, которые продуцируют вышеупомянутые изомеры. Кроме того, соединение по настоящему изобретению может содержать указанные выше изомеры в любом соотношении.

[0069]

Если не указано иное, формулы, химические структуры и названия соединения, указанные в настоящем описании, без указания его стереохимии, охватывают все вышеупомянутые изомеры, которые могут существовать.

[0070]

Диастереомерная смесь может быть разделена на каждый диастереомер обычными способами, такими как хроматография, кристаллизация и тому подобное. Кроме того, каждый диастереомер может быть также получен с использованием стереохимически отдельного исходного вещества, или способом синтеза, использующим стереоселективную реакции.

[0071]

Энантиомерная смесь может быть разделена на каждый отдельный энантиомер способом, хорошо известным в данной области.

Например, диастереомерная смесь может быть получена путем взаимодействия энантиомерной смеси с по существу чистым энантиомером, который известен в качестве хирального вспомогательного реагента. Диастереомерную смесь можно разделить на каждый диастереомер, указанный выше. Отделенный диастереомер может быть превращен в желаемый энантиомер удалением добавленного хирального вспомогательного реагента путем расщепления.

Кроме того, энантиомерная смесь также может быть непосредственно разделена методом хроматографии с использованием хиральной твердой фазы, хорошо известным в данной области.

В качестве альтернативы, один из энантиомеров также может быть получен с использованием в основном чистого оптически активного исходного вещества или путем использования стереоселективного синтеза (асимметричная индукция) прохирального промежуточного соединения с использованием хирального вспомогательного вещества и асимметричного катализатора.

[0072]

Абсолютная стерическая конфигурация может быть определена на основе рентгеноструктурного анализа кристаллического продукта или промежуточного соединения. В этом случае кристаллический продукт или промежуточное соединение, дериватизированные с реагентом, имеющим асимметрический центр с известной стерической конфигурацией, могут быть использованы в случае необходимости.

[0073]

Соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль предпочтительно подвергают очистке, более предпочтительно очищают так, чтобы он имел чистоту 80% или более.

[0074]

Примеры ʺфармацевтической композицииʺ включают пероральные препараты, такие как таблетка, капсула, гранула, порошок, пастилка, сироп, эмульсия, суспензия и тому подобное, и парентеральные агенты, такие как препарат для наружного применения, суппозиторий, инъекция, глазные капли, назальные препараты, легочные препараты и тому подобное.

[0075]

Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению получают согласно способу, известному в области фармацевтических препаратов, смешиванием и т.д. соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, или его сольвата с подходящим количеством по меньшей мере одного типа фармацевтически приемлемого носителя и при необходимости подобного ему компонента. Хотя содержание соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, или его сольвата, в фармацевтической композиции варьирует в зависимости от лекарственной формы, дозы и тому подобного, его содержание составляет, например, 0,00001-100% масс. всей композиции.

[0076]

Примеры ʺфармацевтически приемлемого носителяʺ включают различные органические или неорганические вещества-носители, обычно используемые в качестве компонентов препарата, например, эксципиент, дезинтегрирующее средство, связывающее вещество, вещество, придающее скольжение, смазывающее вещество и тому подобное для твердых препаратов и растворитель, солюбилизирующее средство, суспендирующее средство, изотоническое средство, буферное средство, успокаивающее средство, поверхностно-активное вещество, регулятор pH, средство для сгущения и тому подобное для жидких препаратов. Кроме того, когда необходимо, используют добавки, такие как консервант, антиокислитель, красящее вещество, подсластитель и тому подобное.

[0077]

Примеры ʺэксципиентаʺ включают лактозу, сахарозу, D-маннит, D-сорбит, кукурузный крахмал, декстрин, микрокристаллическую целлюлозу, кристаллическую целлюлозу, кармеллозу, кальциевую соль кармеллозы, натриевую соль карбоксиметилкрахмала, слабозамещенную гидроксипропилцеллюлозу, аравийскую камедь и тому подобное.

[0078]

Примеры ʺдезинтегрирующего средстваʺ включают кармеллозу, кальциевую соль кармеллозы, натриевую соль кармеллозы, натриевую соль карбоксиметилкрахмала, натриевую соль кроскармеллозы, кросповидон, слабозамещенную гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, кристаллическую целлюлозу и тому подобное.

[0079]

Примеры ʺсвязывающего веществаʺ включают гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, повидон, кристаллическую целлюлозу, сахарозу, декстрин, крахмал, желатин, натриевую соль кармеллозы, аравийскую камедь и тому подобное.

[0080]

Примеры ʺвещества, придающего скольжениеʺ включают легкую безводную кремниевую кислоту, стеарат магния и тому подобное.

[0081]

Примеры ʺсмазывающего веществаʺ включают стеарат магния, стеарат кальция, тальк и тому подобное.

[0082]

Примеры ʺрастворителяʺ включают очищенную воду, этанол, пропиленгликоль, макрогол, кунжутное масло, кукурузное масло, оливковое масло и тому подобное.

[0083]

Примеры ʺсолюбилизирующего средстваʺ включают пропиленгликоль, D-маннит, бензилбензоат, этанол, триэтаноламин, карбонат натрия, цитрат натрия и тому подобное.

[0084]

Примеры ʺсуспендирующего средстваʺ включают хлорид бензалкония, кармеллозу, гидроксипропилцеллюлозу, пропиленгликоль, повидон, метилцеллюлозу, моностеарат глицерина и тому подобное.

[0085]

Примеры ʺизотонического средстваʺ включают глюкозу, D-сорбит, хлорид натрия, D-маннит и тому подобное.

[0086]

Примеры ʺбуферного средстваʺ включают гидрофосфат натрия, ацетат натрия, карбонат натрия, цитрат натрия и тому подобное.

[0087]

Примеры ʺуспокаивающего средстваʺ включают бензиловый спирт и тому подобное.

[0088]

Примеры ʺповерхностно-активного веществаʺ включают полиоксиэтиленовое гидрогенизированное касторовое масло (например, полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло 60 и т.д.), моностеарат полиэтиленгликоля, полиоксиэтиленовый эфир сорбита и жирной кислоты (например, полисорбат 80 и т.д.), алкилдиаминоэтилглицин, алкилбензолсульфонат, бензетония хлорид и тому подобное.

[0089]

Примеры ʺрегулятора рНʺ включают соляную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, лимонную кислоту, уксусную кислоту, бикарбонат натрия, карбонат натрия, гидроксид калия, гидроксид натрия, моноэтаноламин, триэтаноламин и тому подобное.

[0090]

Примеры ʺсредства для сгущенияʺ включают поливиниловый спирт, карбоксивиниловый полимер, метилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, декстран и тому подобное.

[0091]

Примеры ʺконсервантаʺ включают этилпарагидроксибензоат, хлорбутанол, бензиловый спирт, дегидроацетат натрия, сорбиновую кислоту и тому подобное.

[0092]

Примеры ʺантиоксидантаʺ включают сульфит натрия, аскорбиновую кислоту и тому подобное.

[0093]

Примеры ʺкрасящего веществаʺ включают пищевые красители (например, пищевой краситель красный No. 2 или 3, пищевой краситель желтый No. 4 или 5 и т.д.), β-каротин и тому подобное.

[0094]

Примеры ʺподсластителяʺ включают сахарин натрия, дикалийглицирризинат, аспартам и тому подобное.

[0095]

Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно вводить перорально или парентерально (например, местным, ректальным, внутривенным введением и тому подобное) человеку, а также млекопитающим, отличным от человека (например, хомячку, морской свинке, кошке, собаке, свинье, корове, лошади, овце, обезьяне и тому подобное). Доза изменяется в зависимости от субъекта введения, заболевания, симптома, лекарственной формы, пути введения и тому подобного. Например, суточная доза для перорального введения взрослому пациенту (масса тела: приблизительно 60 кг) обычно находится в диапазоне приблизительно от 0,1 мкг до 10 г в расчете на соединение по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента. Это количество можно вводить в виде от одной до нескольких порций.

[0096]

Соединение по настоящему изобретения или его фармацевтически приемлемую соль, или его сольват можно использовать в комбинации с одним или несколькими другими лекарственными средствами (в дальнейшем также упоминается как сопутствующее лекарственное средство) согласно способу, обычно используемому в медицинской области (в дальнейшем называемому как комбинированное использование).

[0097]

Период введения соединения по настоящему изобретения или его фармацевтически приемлемой соли и сопутствующего лекарственного средства не ограничивается, и их можно вводить индивиду введения в виде комбинированного препарата или оба препарата можно вводить одновременно или при заданных интервалах в виде отдельных препаратов. Кроме того, фармацевтическую композицию по настоящему изобретению и сопутствующее лекарственное средство можно применять в форме набора. Доза сопутствующего лекарственного средства аналогична клинически применяемой дозе, и ее можно подходящим образом выбрать согласно субъекту введения, заболеванию, симптому, лекарственной форме, пути введения, времени введения, комбинации и тому подобному. Форму введения сопутствующего лекарственного средства конкретно не ограничивают, и требуется только комбинирование соединения по настоящему изобретения или его фармацевтически приемлемой соли, или его сольвата с сопутствующим лекарственным средством.

[0098]

Примеры сопутствующего лекарственного средства включают терапевтические средства для лечения глаукомы, такие как препарат простагландина, β-блокатор, агонист α-рецептора, средство, стимулирующее симпатический нерв, α-блокатор, антихолинэстеразное средство ингибитор карбоангидразы, ингибитор Rho-киназы и тому подобное.

[0099]

Примеры препарата простагландина включают унопростон изопропил, латанопрост, травопрост, тафлупрост, биматопрост и тому подобное.

Примеры β-блокаторов включают малеат тимолола, гидрохлорид бефунолола, гидрохлорид картеолола, гидрохлорид бетаксолола, нипрадилол, гидрохлорид левобунолола и тому подобное.

[0100]

Примеры агониста α-рецептора включают бримонидин тартрат и тому подобное.

[0101]

Примеры средства, стимулирующего симпатический нерв, включают дипивефрин гидрохлорид, пилокарпина гидрохлорид и тому подобное.

[0102]

Примеры α-блокатора включают буназозин гидрохлорид и тому подобное.

[0103]

Примеры ингибитора карбоангидразы включают дорзоламида гидрохлорид, бринзоламид и тому подобное.

[0104]

Примеры антихолинэстеразного средства включают дистигмина бромид и тому подобное.

[0105]

Примеры ингибитора Rho-киназы включают рипасудил гидрохлорид гидрат и тому подобное.

[0106]

Примером конкретной комбинации лекарственных средств является сочетание одного лекарственного средства, выбранного из латанопроста, травопроста, тафлупроста, малеата тимолола, дорзоламида гидрохлорида и бринзоламида, и соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, или его сольвата.

[0107]

Поскольку соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль имеет mPGES-1 ингибирующее действие, оно является полезным для профилактики или лечения различных заболеваний или симптомов, которые, как ожидается, будут улучшены посредством модуляции ингибирующей активности mPGES-1, например, боли, ревматизма, остеоартрита, лихорадки, болезни Альцгеймера, рассеянного склероза, атеросклероза, глаукомы, глазной гипертензии, ишемического заболевания сетчатки, системной склеродермии и рака, включая колоректальный рак.

Как используется в настоящем описании, различные заболевания или симптомы, которые, как ожидается, будут улучшены с помощью ингибирующей активности mPGES-1, предпочтительно представляют собой глаукому и глазную гипертензию.

[0108]

Соединение по настоящему изобретению предпочтительно вводят в виде раствора или суспензии, предпочтительно, в виде раствора.

Соединение по настоящему изобретению предпочтительно вводят путем инстилляции.

Для введения раствора путем инстилляции соединение предпочтительно имеет высокую растворимость. Соединение имеет растворимость предпочтительно 0,03% или более, более предпочтительно 0,07% или более, еще предпочтительнее 0,13% или более, в растворителе, используемом для офтальмологического раствора.

Растворитель, используемый для офтальмологического раствора, представляет собой, предпочтительно, воду. Растворитель, используемый для офтальмического раствора, может содержать добавку, такую как полисорбат 80, моностеарат полиэтиленгликоля, полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло и тому подобное.

Для введения путем инстилляции значение рН раствора соединения предпочтительно составляет 7,0-8,5.

[0109]

Растворимость соединения может быть измерена в соответствии со способом, хорошо известным, например, следующим способом.

(1) Соединение суспендировали в буферном растворе, имеющем рН 7,0-8,0 (например, буферный раствор Бриттона-Робинсона и т.д.). При необходимости можно использовать добавку, такую как полисорбат 80, моностеарат полиэтиленгликоля, полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло и тому подобное.

(2) Суспензию встряхивали при комнатной температуре в течение заранее заданного времени и фильтровали через мембранный фильтр. Фильтрат соответствующим образом разбавляли с получением раствора образца.

(3) Получали стандартный раствор соединения и анализировали с помощью жидкостной хроматографии.

(4) Раствор образца анализировали с помощью жидкостной хроматографии и растворимость соединения рассчитывали по методу внешнего стандарта.

[0110]

Как используется в настоящем описании, выражение «ингибировать(ингибирует) mPGES-1» означает элиминирование или ослабление функции mPGES-1, предпочтительно элиминирование или ослабление функции mPGES-1 человека в соответствии с нижеприведенным условием экспериментального примера 1 или при клиническом показании человека.

[0111]

Как используется в настоящем описании, термин «лечение» включает улучшение, предотвращение обострения, поддержание ремиссии, предотвращение обострения и предупреждение рецидива, симптомов.

Как используется в настоящем описании, термин «профилактика» означает задержку появления симптомов.

[0112]

Одним из других вариантов осуществления настоящего изобретения является предоставление средства, снижающего глазное давление, которое содержит соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль. Еще одним из других вариантов осуществления настоящего изобретения является предоставление средства, снижающего глазное давление, которое содержит соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль и одно или несколько видов других терапевтических средств для лечения глаукомы.

[0113]

Одним из других вариантов осуществления настоящего изобретения является предоставление способа снижения глазного давления, который включает введение человеку соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Еще одним из других вариантов осуществления настоящего изобретения является предоставление способа снижения глазного давления, который включает введение человеку соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и одного или нескольких видов других терапевтических средств для лечения глаукомы.

Как используется в настоящем описании, выражение «снижение глазного давления» означает снижение внутриглазного давления.

[0114]

Настоящее описание может обеспечить предпочтительные варианты осуществления и варианты соединения, способа, использования и композиции по настоящему изобретению. Такое предоставление охватывает комбинации предпочтительных вариантов осуществления и вариантов соединения, способа, использования и композиции по настоящему изобретению, в случае, если такая комбинация возможна без сомнения.

[0115]

Далее объясняются способы получения соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, которые не следует рассматривать как ограничивающие. Соединение, полученное на каждой стадии, может быть выделено или очищено в соответствии с хорошо известным способом, таким как дистилляция, перекристаллизация, колоночная хроматография и т.п., если необходимо, или непосредственно использовать на следующей стадии без выделения или очистки.

[0116]

[Способ получения A]

Соединение [I-a] может быть получено в соответствии со способом получения A.

[0117]

[Способ получения A]

[0118]

где

L¹ представляет собой уходящую группу, такую как бром, йод, трифторметансульфонилокси или тому подобное;

Hal¹ представляет собой хлор или бром;

Z представляет собой борсодержащий заместитель, используемый для реакции сочетания Сузуки, такой как -B(OH)₂, -B(OR⁸)₂ (где R⁸ каждый представляет собой C_1-4 алкил или один из R⁸ необязательно соединен с другим R⁸ с образованием кольца), -BF₃, формулу

[0119]

[0120]

или тому подобное;

R⁷ представляет собой C_1-6 алкил, такой как метил, этил и тому подобное, или бензил, и

R¹, R², R³ и R⁴ имеют значения, как определено в формуле [I-a].

[0121]

(Стадия A-1)

Соединение [2] можно получить, подвергая соединение [1] борированию. Например, соединение [2] может быть получено взаимодействием соединения [1] с борсодержащим реагентом при нагревании в присутствии основания и палладиевого катализатора, в растворителе. При необходимости, может быть добавлен лиганд.

Примеры борсодержащего реагента, который используют для реакции, включают 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би-1,3,2-диоксаборолан, 5,5,5',5'-тетраметил-2,2'-би-1,3,2-диоксаборинан, тетрагидроксидиборон, 4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан и тому подобное.

Примеры палладиевого катализатора, который используют для реакции, включают ацетат палладия, тетракистрифенилфосфин палладий, бис(трифенилфосфин)палладий дихлорид, комплекс (бис(дифенилфосфино)ферроцен)палладий дихлорид-метиленхлорид и тому подобное.

Примеры основания, которое используют для реакции, включают неорганическое основание, такое как соли щелочных металлов (например, фосфат калия, карбонат натрия, гидрокарбонат натрия, карбонат калия, ацетат калия, ацетат натрия, фторид цезия и тому подобное) и тому подобное; и органические основания, такие как триэтиламин и тому подобное.

Примеры лиганда, который используют для реакции, включают фосфорорганические лиганды, такие как трифенилфосфин, трициклогексилфосфин, 2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафталин, 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксибифенил и тому подобное, и тому подобное.

Примеры растворителя, который используют для реакции, включают растворители типа простых эфиров, такие как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, диэтиловый простой эфир, 1,2-диметоксиэтан, циклопентил метиловый эфир и тому подобное; спиртовые растворители, такие как метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол и тому подобное; углеводородные растворители, такие как толуол, ксилол, гексан и тому подобное; полярные растворители, такие как N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, диметилсульфоксид, ацетонитрил и тому подобное; их смешанные растворители и их растворители, смешанные с водой.

Альтернативно, когда L¹ представляет собой бром или иод в соединении [1], соединение [2] также может быть получено добавлением металлоорганического реагента к соединению [1] в растворителе, при температуре от -78°С до комнатной температуры, и затем взаимодействием полученного соединения с соединением бора при -78°С до комнатной температуры.

Примеры металлоорганического реагента, который используют для реакции, включают н-бутиллитий, трет-бутиллитий, хлорид изопропилмагния и тому подобное.

Примеры борсодержащего реагента, который используют для реакции, включают триметилборат, триизопропилборат, 2-изопропокси-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан и тому подобное.

Примеры растворителя, который используют для реакции, включают растворители типа простых эфиров, такие как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, диэтиловый простой эфир, 1,2-диметоксиэтан, циклопентил метиловый эфир и тому подобное; углеводородные растворители, такие как толуол, ксилол, гексан и тому подобное, и их смешанные растворители.

Соединение [1] может быть коммерчески доступным продуктом, таким как 5-бром-2-хлоризопропилбензол, или может быть получено превращением коммерчески доступного продукта, при необходимости, способом, хорошо известным специалистам в данной области.

[0122]

(Стадия A-2)

Соединение [4] можно получить, подвергая соединение [2] и соединение [3] реакции сочетания Сузуки. Например, соединение [4] может быть получено взаимодействием соединения [2] с соединением [3] при нагревании в присутствии основания и палладиевого катализатора в растворителе. При необходимости может быть добавлен лиганд. Для предотвращения реакции сочетания Сузуки полученного соединения (соединение (4)) с соединением (2), соединение [3] предпочтительно используют в количестве 1,5 эквивалента или более на соединение [2].

Примеры палладиевого катализатора, который используют для реакции, включают ацетат палладия, тетракистрифенилфосфин палладий, бис(трифенилфосфин)палладий дихлорид, комплекс (бис(дифенилфосфино)ферроцен)палладий дихлорид-метиленхлорид и тому подобное.

Примеры основания, которое используют для реакции, включают неорганические основания, такие как соли щелочных металлов (например, фосфат калия, карбонат натрия, гидрокарбонат натрия, карбонат калия, ацетат калия, ацетат натрия, фторид цезия и тому подобное) и тому подобное, органические основания, такие как триэтиламин и тому подобное.

Примеры лиганда, который используют для реакции, включают фосфорорганические лиганды, такие как трифенилфосфин, трициклогексилфосфин, 2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафталин, 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксибифенил и тому подобное, и тому подобное.

Примеры растворителя, который используют для реакции, включают растворители типа простых эфиров, такие как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, диэтиловый простой эфир, 1,2-диметоксиэтан, циклопентил метиловый эфир и тому подобное; спиртовые растворители, такие как метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол и тому подобное; углеводородные растворители, такие как толуол, ксилол, гексан и тому подобное; полярные растворители, такие как N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, диметилсульфоксид, ацетонитрил и тому подобное; их смешанные растворители и их растворители, смешанные с водой.

Соединение [2] может быть коммерчески доступным продуктом, таким как 3-изопропилфенилбороновая кислота, 3-трет-бутилфенилбороновая кислота и тому подобное, или может быть получено превращением коммерчески доступного продукта, при необходимости, способом, хорошо известным специалистам в данной области.

Соединение [3] может быть коммерчески доступным продуктом, таким как 2,4-дихлор-6-метокси-1,3,5-триазин, или может быть получено превращением коммерчески доступного продукта, при необходимости, способом, хорошо известным специалистам в данной области.

Что касается реакции сочетания Сузуки, например, известна следующая обзорная статья (SUZUKI, A et al. Palladium-Catalyzed Cross-Coupling Reactions of Organoboron Compounds. Chem Rev. 1995, Vol.95, pages 2457-2483).

[0123]

(Стадия A-3)

Соединение [6] можно получить, подвергая соединение [4] и соединение бора [5] реакции сочетания Сузуки. Например, соединение [6] может быть получено взаимодействием соединения [4] с соединением бора [5] при нагревании в присутствии основания и палладиевого катализатора в растворителе. При необходимости, может быть добавлен лиганд.

Примеры палладиевого катализатора, который используют для реакции, включают ацетат палладия, тетракистрифенилфосфин палладий, бис(трифенилфосфин)палладий дихлорид, комплекс (бис(дифенилфосфино)ферроцен)палладий дихлорид-метиленхлорид и тому подобное.

Примеры основания, которое используют для реакции, включают неорганические основания, такие как соли щелочных металлов (например, фосфат калия, карбонат натрия, гидрокарбонат натрия, карбонат калия, ацетат калия, ацетат натрия, фторид цезия и тому подобное) и тому подобное, и органические основания, такие как триэтиламин и тому подобное.

Примеры лиганда, который используют для реакции, включают фосфорорганические лиганды, такие как трифенилфосфин, трициклогексилфосфин, 2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафталин, 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксибифенил и тому подобное, и тому подобное.

Примеры растворителя, который используют для реакции, включают растворители типа простых эфиров, такие как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, диэтиловый простой эфир, 1,2-диметоксиэтан, циклопентил метиловый эфир и тому подобное; спиртовые растворители, такие как метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол и тому подобное; углеводородные растворители, такие как толуол, ксилол, гексан и тому подобное; полярные растворители, такие как N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, диметилсульфоксид, ацетонитрил и тому подобное; их смешанные растворители и их растворители, смешанные с водой.

Соединение [5] может быть коммерчески доступным продуктом, таким как 2-хлор-5-гидроксиметилфенилбороновая кислота и тому подобное, или может быть получено превращением коммерчески доступного продукта, при необходимости, способом, хорошо известным специалистам в данной области.

[0124]

(Стадия A-4)

Соединение [7] может быть получено путем превращения гидроксигруппы соединения [6] в аминогруппу путем азидирования и восстановления. Например, соответствующий азид может быть получен взаимодействием соединения [6] с азидирующим агентом в присутствии основания в растворителе, и соединение [7] может быть получено взаимодействием полученного азида с фосфином и затем гидролизом полученного соединения при нагревании в воде.

Соединение [7] предпочтительно получают в виде соли неорганической кислоты или соли органической кислоты в соответствии с хорошо известным способом.

Примеры азидирующего агента, который используют для реакции, включают дифенилфосфорилазид, бис(п-нитрофенил)азидофосфонат и тому подобное.

Примеры растворителя, который используют для реакции, включают тетрагидрофуран, толуол, N,N-диметилформамид и тому подобное.

Примеры основания, используемого для азидирования, включают 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен.

Примеры фосфина включают трифенилфосфин, трибутилфосфин и тому подобное.

Примеры кислоты, используемой для образования соли соединения [7] включают хлористоводородную кислоту.

[0125]

(Стадия A-5)

Соединение [9] можно получить, подвергая соединение [7] и соединение [8] реакции образования амидной связи. Например, соединение [9] может быть получено взаимодействием соединения [7] с соединением [8] в присутствии конденсирующего агента и добавки, в растворителе. Основание может быть добавлено по мере необходимости.

Примеры конденсирующего агента, который используют для реакции, включают дициклогексилкарбодиимид (DCC), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид (WSC HCl), диизопропилкарбодиимид, 1,1'-карбонилдиимидазол (CDI), гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (HATU), (бензотриазол-1-илокси)трипирролидинoфосфония гексафторфосфат (PyBOP) или дифенилфосфорилазид и тому подобное.

Примеры добавки, которую используют для реакции, включают 1-гидроксибензотриазол (HOBt), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (HOAt), N-гидроксисукцинимид (HOSu), 4-диметиламинопиридин и тому подобное.

Примеры основания, используемого для реакции, включают органические основания, такие как пиридин, триэтиламин и тому подобное.

Примеры растворителя, который используют для реакции, включают растворители типа простых эфиров, такие как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, диэтиловый простой эфир, 1,2-диметоксиэтан, циклопентил метиловый эфир и тому подобное; углеводородные растворители, такие как толуол, гексан, ксилол и тому подобное; галогенированные растворители, такие как дихлорметан, хлороформ и тому подобное; полярные растворители, такие как N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, диметилсульфоксид, ацетонитрил, пиридин и тому подобное. Они могут использоваться по отдельности или в виде смеси двух или более их видов.

Соединение [8] может быть коммерчески доступным продуктом, таким как 3,3,3-трифторметил-2,2-диметилпропионовая кислота, 1-трифторметилциклопентанкарбоновая кислота, или может быть получено превращением коммерчески доступного продукта, при необходимости, способом, хорошо известным специалистам в данной области.

[0126]

(Стадия A-6)

Соединение [I-a] может быть получено превращением алкоксигруппы соединения [9] в гидроксигруппу путем гидролиза. Например, когда R⁷ представляет собой C_1-6 алкил, соединение [I-a] может быть получено реакцией соединения [9] в присутствии основания в растворителе при комнатной температуре до нагревания, и затем нейтрализации полученного раствора.

Примеры основания, которое используют для реакции, включают гидроксид лития, гидроксид натрия, гидроксид калия, метоксид натрия и тому подобное.

Примеры растворителя, который используют для реакции, включают смешанный растворитель из воды и спиртовых растворителей, таких как метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол и тому подобное; и смешанные растворители вышеупомянутых смешанных растворителей с растворителями типа простых эфиров, такими как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, диэтиловый эфир, 1,2-диметоксиэтан, циклопентил метиловый эфир и тому подобное.

[0127]

[Способ получения B]

Соединение [I-b] может быть получено в соответствии со способом получения B.

[0128]

[Способ получения B]

[0129]

где

R¹, R², R⁵ и X имеют значения, как определено в формуле [I-b], и L¹, Hal¹, Z и R⁷ имеют значения, как определено в способе получения A.

[0130]

(Стадия B-1)

Соединение [11] можно получить, подвергая соединение [10] борированию таким же образом, как на стадии A-1 способа получения A.

Соединение [10] может быть коммерчески доступным продуктом, таким как 3-бромфенил этиловый эфир, или может быть получено превращением коммерчески доступного продукта, при необходимости, способом, хорошо известным специалистам в данной области.

[0131]

(Стадия B-2)

Соединение [12] можно получить, подвергая соединение [11] и соединение [3] реакции сочетания Сузуки таким же образом, как на стадии A-2 способа получения А.

[0132]

(Стадия B-3)

Соединение [13] можно получить, подвергая соединение [12] и соединение бора [5] реакции сочетания Сузуки таким же образом, как на стадии A-3 способа получения A.

[0133]

(Стадия B-4)

Соединение [14] может быть получено путем превращения гидроксигруппы соединения [13] в аминогруппу путем азидирования и восстановления таким же образом, как на стадии A-4 способа получения A.

[0134]

(Стадия B-5)

Соединение [15] можно получить, подвергая соединение [14] и соединение [8] реакции амидирования таким же образом, как на стадии А-5 способа получения А.

[0135]

(Стадия B-6)

Соединение [I-b] может быть получено превращением алкоксигруппы соединения [15] в гидроксигруппу путем гидролиза таким же образом, как на стадии А-6 способа получения A.

[0136]

[Способ получения C]

Соединение [I-c] может быть получено в соответствии со способом получения C.

[0137]

[Способ получения C]

[0138]

где

Hal² представляет собой бром или йод;

Hal³ представляет собой фтор, хлор или бром;

R¹, R² и R⁶ имеют значения, как определено в формуле [I-c], и

R⁷, Z, Hal¹ имеют значения, как определено в способе получения A.

[0139]

(Стадия C-1)

Соединение [18] можно получить, подвергая соединение [16] и соединение [17] реакции ароматического нуклеофильного замещения. Например, соединение [18] может быть получено взаимодействием соединения [16] с соединением [17] в присутствии основания и добавки, в растворителе.

Соединение [16] может быть коммерчески доступным продуктом, таким как 5-бром-2-хлорпиридин, или может быть получено превращением коммерчески доступного продукта, при необходимости, способом, хорошо известным специалистам в данной области.

Соединение [17] может быть коммерчески доступным продуктом, таким как н-гексанол, или может быть получено превращением коммерчески доступного продукта, при необходимости, способом, хорошо известным специалистам в данной области.

Примеры растворителя, который используют для реакции, включают растворители типа простых эфиров, такие как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, диэтиловый простой эфир, 1,2-диметоксиэтан, циклопентил метиловый эфир и тому подобное; углеводородные растворители, такие как толуол, ксилол и тому подобное; полярные растворители, такие как N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, N-метил-2-пирролидон, диметилсульфоксид, ацетонитрил, пиридин и тому подобное.

Примеры основания, который используют для реакции, включают гидрид натрия, гидроксид лития, гидроксид натрия, гидроксид калия, трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия, фосфат калия, карбонат натрия, гидрокарбонат натрия, карбонат калия, натрия и тому подобное.

Примеры добавки, которую используют для реакции, включают тетра-н-бутиламмоний бромид, 18-краун-6, иодид меди и тому подобное.

[0140]

(Стадия C-2)

Соединение [19] можно получить, подвергая соединение [18] борированию таким же образом, как на стадии А-1 способа получения A.

[0141]

(Стадия C-3)

Соединение [20] можно получить, подвергая соединение [19] и соединение [3] реакции сочетания Сузуки таким же образом, как на стадии А-2 способа получения A.

[0142]

(Стадия C-4)

Соединение [21] можно получить, подвергая соединение [20] и соединение бора [5] реакции сочетания Сузуки таким же образом, как на стадии А-3 способа получения A.

[0143]

(Стадия C-5)

Соединение [22] может быть получено путем превращения гидроксигруппы соединения [21] в аминогруппу путем азидирования и восстановления таким же образом, как на стадии А-4 способа получения A.

[0144]

(Стадия C-6)

Соединение [23] можно получить, подвергая соединение [22] и соединение [8] реакции амидирования таким же образом, как на стадии А-5 способа получения A.

[0145]

(Стадия C-7)

Соединение [I-c] может быть получено превращением алкоксигруппы соединения [23] в гидроксигруппу путем гидролиза таким же образом, как на стадии А-6 способа получения A.

Примеры

[0146]

Настоящее изобретение поясняется более подробно ниже со ссылкой на примеры и экспериментальные примеры, которые не следует рассматривать как ограничивающие.

Аббревиатуры в примерах являются следующими.

WSC HCl: 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид

HOBt H₂O: 1-гидрокси-1H-бензотриазол1 гидрат

DMSO: диметилсульфоксид

M: моль/л

н: нормальность

[0147]

[Пример получения 1]: Синтез N-{4-хлор-3-[4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-гидрокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензил}-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамида (Пример No. 48)

[0148]

[0149]

(1) 2-(4-хлор-3-изопропилфенил)-5,5-диметил-1,3,2-диоксаборинан

[0150]

[0151]

Суспензию 4-бром-1-хлор-2-изопропилбензола (0,50 г), 5,5,5',5'-тетраметил-2,2'-би-1,3,2-диоксаборинана (0,77 г), аддукта [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорида дихлорметана (0,087 г) и ацетата калия (0,63 г) в 1,2-диметоксиэтане (5,0 мл) перемешивали при 85°C в течение 16 часов в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли этилацетат (10 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали через целит с этилацетатом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,53 г, выход 93%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,02 (6H, с), 1,27 (6H, д, J=6,9 Гц), 3,35-3,46 (1H, м), 3,76 (4H, с), 7,31 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,53 (1H, дд, J=7,9, 1,5 Гц), 7,72 (1H, д, J=1,5 Гц).

[0152]

(2) 2-хлор-4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин

[0153]

[0154]

Суспензию 2-(4-хлор-3-изопропилфенил)-5,5-диметил-1,3,2-диоксаборинана (полученного в вышеупомянутом (1), 0,53 г), 2,4-дихлор-6-метокси-1,3,5-триазина (1,1 г), тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) (0,23 г) и трикалийфосфата (2,1 г) в 1,2-диметоксиэтане (8,6 мл) и дистиллированную воду (3,2 мл) перемешивали при 85°C в течение 2,5 часа в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат при комнатной температуре, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением неочищенного продукта (0,36 г), содержащего указанное в заголовке соединение.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,32 (6H, д, J=6,7 Гц), 3,41-3,51 (1H, м), 4,17 (3H, с), 7,47 (1H, д, J=8,3 Гц), 8,25 (1H, дд, J=8,3, 2,3 Гц), 8,43 (1H, д, J=2,3 Гц).

[0155]

(3) {4-хлор-3-[4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]фенил}метанол

[0156]

[0157]

Суспензию неочищенного продукта (полученного в вышеупомянутом (2), 0,36 г), содержащую 2-хлор-4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин, 2-хлор-5-гидроксиметилфенилбороновую кислоту (0,27 г), аддукт [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорида дихлорметана (0,050 г) и трикалийфосфат (0,78 г), в ацетонитриле (3,6 мл) и дистиллированную воду (1,8 мл) перемешивали при 85°C в течение 1,5 часа в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат при комнатной температуре и смесь разделяли. Затем органический слой промывали последовательно водой и насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,29 г, выход 35% (2 стадии)).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,34 (6H, д, J=6,7 Гц), 1,76 (1H, т, J=6,0 Гц), 3,42-3,53 (1H, м), 4,22 (3H, с), 4,78 (2H, д, J=6,0 Гц), 7,46-7,50 (2H, м), 7,55 (1H, д, J=8,3 Гц), 8,05 (1H, д, J=1,8 Гц), 8,35 (1H, дд, J=8,3, 2,3 Гц), 8,58 (1H, д, J=2,3 Гц).

[0158]

(4) 4-хлор-3-[4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламин гидрохлорид

[0159]

[0160]

К раствору {4-хлор-3-[4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]фенил}метанола (полученного в вышеупомянутом (3), 0,29 г) в толуоле (1,2 мл) добавляли дифенилфосфорилазид (0,18 мл) и 1,8-диазабицикло[5.4.0]-7-ундецен (0,13 мл) при охлаждении льдом в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (0,35 мл) и дистиллированную воду (0,35 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 1 мин. Водный слой удаляли из реакционной смеси, к этому добавляли дистиллированную воду (0,70 мл) и смесь перемешивали в течение 1 мин. Водный слой удаляли из реакционной смеси и к этому добавляли дистиллированную воду (0,70 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 мин и водный слой удаляли. К реакционной смеси добавляли трифенилфосфин (0,24 г) и дистиллированную воду (0,029 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 64°C в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли ацетонитрил (1,2 мл) и конц. хлористоводородную кислоту (0,075 мл) при охлаждении льдом, и смесь перемешивали в течение 30 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием из суспензии и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,27 г, выход 87%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,30 (6H, д, J=6,9 Гц), 3,36-3,44 (1H, м), 4,16 (2H, с), 4,17 (3H, с), 7,67 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,71 (1H, дд, J=8,3, 2,1 Гц), 7,76 (1H, д, J=8,3 Гц), 8,17 (1H, д, J=2,1 Гц), 8,29 (3H, шир. с), 8,34 (1H, дд, J=8,3, 2,1 Гц), 8,52 (1H, д, J=2,1 Гц).

[0161]

(5) N-{4-хлор-3-[4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензил}-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамид

[0162]

[0163]

К раствору 4-хлор-3-[4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламин гидрохлорида (полученного в вышеупомянутом (4), 0,080 г), 3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионовой кислоты (0,042 г), HOBt H₂O (0,042 г) и WSC HCl (0,052 г) в N,N-диметилформамиде (1,0 мл) добавляли триэтиламин (0,076 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 16 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и этилацетат, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,089 г, выход 90%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,33 (6H, д, J=6,7 Гц), 1,44 (6H, с), 3,43-3,52 (1H, м), 4,21 (3H, с), 4,55 (2H, д, J=5,8 Гц), 6,23 (1H, шир. с), 7,36 (1H, дд, J=8,3, 2,3 Гц), 7,48 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,53 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,94 (1H, д, J=2,3 Гц), 8,34 (1H, дд, J=8,3, 2,2 Гц), 8,57 (1H, д, J=2,2 Гц).

[0164]

(6) N-{4-хлор-3-[4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-гидрокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензил}-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамид

[0165]

[0166]

К раствору N-{4-хлор-3-[4-(4-хлор-3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензил}-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамида (полученного в вышеупомянутом (5), 0,089 г) в метаноле (1,4 мл) добавляли 4 М водный раствор гидроксида натрия (0,25 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали при 65°C в течение 2,5 часа. К реакционной смеси добавляли 2 М хлористоводородную кислоту (0,49 мл) и воду при комнатной температуре, и смесь перемешивали. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,075 г, выход 86%).

[0167]

[Пример получения 2]: Синтез N-(4-хлор-3-{4-гидрокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамида (Пример No. 25)

[0168]

[0169]

(1) 5-бром-2-((R)-1-метилбутокси)пиридин

[0170]

[0171]

К раствору 5-бром-2-хлорпиридина (1,0 г) и (R)-пентан-2-ола (0,69 г) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли гидрид натрия (0,31 г, 60 мас.% масляная дисперсия) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 10 мин, и затем при 80°C в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и этилацетат при комнатной температуре, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (1,3 г, колич.).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,92 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,29 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,33-1,48 (2H, м), 1,50-1,59 (1H, м), 1,66-1,75 (1H, м), 5,10-5,18 (1H, м), 6,59 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,60 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 8,16 (1H, д, J=2,4 Гц).

[0172]

(2) 2-хлор-4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин

[0173]

[0174]

К раствору 5-бром-2-((R)-1-метилбутокси)пиридина (полученного в вышеупомянутом (1), 1,3 г) в смешанном растворителе из толуола (8,5 мл) и тетрагидрофурана (2,0 мл) добавляли по каплям н-бутиллитий (1,6 M н-гексанового раствора, 4,4 мл) при -78°C в атмосфере аргона. Смесь перемешивали в течение 15 мин, и к этому добавляли триизопропилборат (1,6 мл) в двух частях. Смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли 10% водный раствор лимонной кислоты и смесь перемешивали в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли этилацетат и смесь разделяли. Затем органический слой промывали последовательно водой и насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. К раствору полученного остатка в смешанном растворителе 1,2-диметоксиэтана (28 мл) и дистиллированной воды (14 мл) добавляли 2,4-дихлор-6-метокси-1,3,5-триазин (2,8 г), аддукт [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорид дихлорметан (0,21 г) и трикалийфосфата (3,9 г), и смесь перемешивали при 90°C в течение 1,5 часа. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат при комнатной температуре, смесь разделяли и органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением неочищенного продукта (1,1 г, выход приб.60%), содержащего указанное в заголовке соединение.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,94 (3H, т, J=7,4 Гц), 1,35 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,38-1,50 (2H, м), 1,53-1,64 (1H, м), 1,72-1,81 (1H, м), 4,15 (3H, с), 5,31-5,40 (1H, м), 6,76 (1H, д, J=8,8 Гц), 8,54 (1H, дд, J=8,8, 2,1 Гц), 9,27 (1H, д, J=2,1 Гц).

[0175]

(3) (4-хлор-3-{4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}фенил)метанол

[0176]

[0177]

Суспензию неочищенного продукта (полученного в вышеупомянутом (2), 1,1 г), содержащую 2-хлор-4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин, 2-хлор-5-гидроксиметилфенилбороновую кислоту (0,76 г), аддукт [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорида дихлорметана (0,14 г) и трикалийфосфат (2,2 г) в ацетонитриле (11 мл) и дистиллированную воду (6,0 мл), перемешивали при 80°C в течение 1,5 часа в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат при комнатной температуре, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,89 г, выход 64%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,94 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,35 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,39-1,50 (2H, м), 1,57-1,64 (1H, м), 1,73-1,81 (2H, м), 4,19 (3H, с), 4,77 (2H, д, J=6,0 Гц), 5,31-5,40 (1H, м), 6,78 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,47 (1H, дд, J=8,2, 2,2 Гц), 7,54 (1H, д, J=8,2 Гц), 8,03 (1H, д, J=2,2 Гц), 8,66 (1H, дд, J=8,9, 2,1 Гц), 9,39 (1H, д, J=2,1 Гц).

[0178]

(4) N-(4-хлор-3-{4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамид

[0179]

[0180]

К раствору (4-хлор-3-{4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}фенил)метанола (полученного в вышеупомянутом (3), 0,16 г) в тетрагидрофуране (1,6 мл) добавляли дифенилфосфорилазид (0,12 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли 1,8-диазабицикло[5.4.0]-7-ундецен (0,080 мл) при охлаждении льдом, и смесь перемешивали в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли трифенилфосфин (0,22 г) и дистиллированную воду (0,080 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали при 60°C в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли N,N-диметилформамид (1,6 мл), раствор 3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионовой кислоты и N,N-диметилформамида (1,9M, 0,30 мл), HOBt H₂O (0,12 г) и WSC HCl (0,15 г) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 15 мин. Реакционную смесь оставляли стоять при комнатной температуре в течение 15 часов. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат, и смесь разделяли. Затем органический слой промывали последовательно водой и насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной тонкослойной хроматографией (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,19 г, выход 91%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,95 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,35 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,39-1,51 (2H, м), 1,55-1,64 (1H, м), 1,73-1,82 (1H, м), 4,19 (3H, с), 4,54 (2H, д, J=5,8 Гц), 5,32-5,40 (1H, м), 6,22 (1H, шир), 6,78 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,35 (1H, дд, J=8,3, 2,3 Гц), 7,52 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,93 (1H, д, J=2,3 Гц), 8,65 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 9,38 (1H, д, J=2,4 Гц).

[0181]

(5) N-(4-хлор-3-{4-гидрокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамид

[0182]

[0183]

К раствору N-(4-хлор-3-{4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамида (полученного в вышеупомянутом (4), 0,19 г) в метаноле (2,0 мл) добавляли 4 М водный раствор гидроксида натрия (0,35 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали при 65°C в течение 1,5 часа. К реакционной смеси добавляли 2 М хлористоводородную кислоту (0,70 мл) и воду при комнатной температуре, и смесь перемешивали. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,14 г, выход 77%).

[0184]

[Пример получения 3]: Синтез N-(4-хлор-3-{4-гидрокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамида (Пример No. 49)

[0185]

[0186]

(1) 5,5-диметил-2-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,2-диоксаборинан

[0187]

[0188]

Суспензию 1-бром-3-(1-метилциклопропил)бензола (0,50 г), 5,5,5',5'-тетраметил-2,2'-би-1,3,2-диоксаборинана (0,85 г), аддукта [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорида дихлорметана (0,096 г) и ацетата калия (0,70 г) в 1,2-диметоксиэтане (5,0 мл) перемешивали при 85°C в течение 15 часов в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли этилацетат (10 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали через целит с этилацетатом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,56 г, выход 95%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,68-0,71 (2H, м), 0,86-0,89 (2H, м), 1,02 (6H, с), 1,41 (3H, с), 3,77 (4H, с), 7,27 (1H, тд, J=7,5, 0,5 Гц), 7,32-7,35 (1H, м), 7,60 (1H, дт, J=7,5, 1,3 Гц), 7,70-7,72 (1H, м).

[0189]

(2) 2-хлор-4-метокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин

[0190]

[0191]

Суспензию 5,5-диметил-2-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,2-диоксаборинана (полученного в вышеупомянутом (1), 0,56 г), 2,4-дихлор-6-метокси-1,3,5-триазина (1,1 г), тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) (0,26 г) и трикалийфосфата (2,4 г) в 1,2-диметоксиэтане (9,8 мл) и дистиллированную воду (3,7 мл) перемешивали при 85°C в течение 2,5 часа в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат при комнатной температуре, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением неочищенного продукта (0,47 г), содержащего указанное в заголовке соединение.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,77-0,81 (2H, м), 0,91-0,95 (2H, м), 1,46 (3H, с), 4,17 (3H, с), 7,41 (1H, т, J=7,7 Гц), 7,51 (1H, дт, J=7,7, 1,6 Гц), 8,29 (1H, дт, J=7,7, 1,6 Гц), 8,38 (1H, т, J=1,6 Гц).

[0192]

(3) (4-хлор-3-{4-метокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин-2-ил}фенил)метанол

[0193]

[0194]

Суспензию неочищенного продукта (полученного в вышеупомянутом (2), 0,47 г), содержащую 2-хлор-4-метокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин, 2-хлор-5-гидроксиметилфенилбороновую кислоту (0,38 г), аддукт [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорид дихлорметан (0,069 г) и трикалийфосфат (1,1 г) в ацетонитриле (4,7 мл), и дистиллированную воду (2,3 мл) перемешивали при 85°C в течение 1,5 часа в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат при комнатной температуре, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,42 г, выход 48% (2 стадии)).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,77-0,81 (2H, м), 0,93-0,97 (2H, м), 1,47 (3H, с), 1,80 (1H, т, J=6,0 Гц), 4,22 (3H, с), 4,78 (2H, д, J=6,0 Гц), 7,42 (1H, тд, J=7,7, 0,5 Гц), 7,46-7,50 (2H, м), 7,54 (1H, д, J=8,3 Гц), 8,03 (1H, д, J=2,3 Гц), 8,40 (1H, дт, J=7,7, 1,6 Гц), 8,50 (1H, т, J=1,6 Гц).

[0195]

(4) 4-хлор-3-{4-метокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензиламин гидрохлорид

[0196]

[0197]

К раствору (4-хлор-3-{4-метокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин-2-ил}фенил)метанола (полученного в вышеупомянутом (3), 0,42 г) в толуоле (1,9 мл) добавляли дифенилфосфорилазид (0,29 мл) и 1,8-диазабицикло[5.4.0]-7-ундецен (0,20 мл) при охлаждении льдом в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (0,50 мл) и дистиллированную воду (0,50 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 1 мин. Водный слой удаляли из реакционной смеси, к этому добавляли дистиллированную воду (1,0 мл) и смесь перемешивали в течение 1 мин. Водный слой удаляли из реакционной смеси и к этому добавляли дистиллированную воду (1,0 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 мин, и водный слой удаляли. К реакционной смеси добавляли трифенилфосфин (0,38 г) и дистиллированную воду (0,042 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 64°C в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли ацетонитрил (1,7 мл) и конц. хлористоводородную кислоту (0,12 мл) при охлаждении льдом, и смесь перемешивали в течение 30 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием из суспензии и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,41 г, выход 88%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 0,83-0,88 (2H, м), 0,89-0,94 (2H, м), 1,45 (3H, с), 4,16 (2H, с), 4,16 (3H, с), 7,49-7,56 (2H, м), 7,71 (1H, дд, J=8,3, 2,3 Гц), 7,75 (1H, д, J=8,3 Гц), 8,15 (1H, д, J=2,3 Гц), 8,27-8,34 (4H, м), 8,38-8,40 (1H, м).

[0198]

(5) N-(4-хлор-3-{4-метокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамид

[0199]

[0200]

К раствору 4-хлор-3-{4-метокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензиламин гидрохлорида (полученного в вышеупомянутом (4), 0,080 г), 3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионовой кислоты (0,045 г), HOBt H₂O (0,044 г) и WSC HCl (0,055 г) в N,N-диметилформамиде (1,0 мл) добавляли триэтиламин (0,080 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 16 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и этилацетат, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,093 г, выход 93%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,77-0,81 (2H, м), 0,93-0,96 (2H, м), 1,44 (6H, с), 1,47 (3H, с), 4,21 (3H, с), 4,55 (2H, д, J=5,8 Гц), 6,18-6,26 (1H, м), 7,35 (1H, дд, J=8,3, 2,3 Гц), 7,42 (1H, т, J=7,7 Гц), 7,49 (1H, дт, J=7,7, 1,6 Гц), 7,53 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,93 (1H, д, J=2,3 Гц), 8,39 (1H, дт, J=7,7, 1,6 Гц), 8,49 (1H, т, J=1,6 Гц).

[0201]

(6) N-(4-хлор-3-{4-гидрокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамид

[0202]

[0203]

К раствору N-(4-хлор-3-{4-метокси-6-[3-(1-метилциклопропил)фенил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-3,3,3-трифтор-2,2-диметилпропионамида (полученную в вышеупомянутом (5), 0,093 г) в метаноле (1,5 мл) добавляли 4 М водный раствор гидроксида натрия (0,27 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали при 65°C в течение 2,5 часа. К реакционной смеси добавляли 2 М хлористоводородную кислоту (0,54 мл) и воду при комнатной температуре, и смесь перемешивали. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,086 г, выход 94%).

[0204]

[Пример получения 4]: Синтез 1-трифторметилциклопентанкарбоновой кислоты 4-хлор-3-[4-гидрокси-6-(3-изопропилфенил)-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламида (Пример No. 52)

[0205]

[0206]

(1) 2-хлор-4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин

[0207]

[0208]

Суспензию 3-изопропилфенилбороновой кислоты (6,1 г), 2,4-дихлор-6-метокси-1,3,5-триазина (10 г), тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) (1,7 г) и карбонат натрия (12 г) в толуоле (60 мл) и дистиллированную воду (60 мл) перемешивали при 80°C в течение 3 часа в атмосфере аргона. Реакционную смесь фильтровали при комнатной температуре со смешанным растворителем н-гексан:этилацетат=1:1 и водой. К фильтрату добавляли смешанный растворитель н-гексан:этилацетат =1:1, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, и фильтровали для удаления сульфата натрия. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением смеси (11 г), содержащей указанное в заголовке соединение.

[0209]

(2) {4-хлор-3-[4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]фенил}метанол

[0210]

[0211]

Суспензию смеси (полученной в вышеупомянутом (1), 14 г), содержащую 2-хлор-4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин, 2-хлор-5-гидроксиметилфенилбороновую кислоту (12 г), аддукт [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорид дихлорметан (1,3 г) и трикалийфосфата (23 г) в ацетонитриле (98 мл) и дистиллированную воду (42 мл) перемешивали при 80°C в течение 3 часа в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли насыщенный солевой раствор и смешанный растворитель из н-гексана:этилацетата=1:1 при комнатной температуре, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат и хлороформ/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (9,2 г, выход приб. 47% (2 стадии)).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,32 (6H, д, J=6,9 Гц), 2,04 (1H, т, J=6,0 Гц), 2,98-3,08 (1H, м), 4,21 (3H, с), 4,75 (2H, д, J=5,6 Гц), 7,41-7,48 (3H, м), 7,53 (1H, д, J=8,1 Гц), 8,01 (1H, д, J=2,4 Гц), 8,40-8,44 (1H, м), 8,46-8,47 (1H, м).

[0212]

(3) 4-хлор-3-[4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламин гидрохлорид

[0213]

[0214]

К раствору {4-хлор-3-[4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]фенил}метанола (полученного в вышеупомянутом (2), 9,2 г) в толуоле (37 мл) добавляли дифенилфосфорилазид (6,4 мл) и 1,8-диазабицикло[5.4.0]-7-ундецен (4,5 мл) при охлаждении льдом в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (18 мл) и дистиллированную воду (18 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 1 мин. Водный слой удаляли из реакционной смеси, к этому добавляли дистиллированную воду (36 мл) и смесь перемешивали в течение 1 мин. Водный слой удаляли из реакционной смеси и к этому добавляли дистиллированную воду (36 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 мин, и водный слой удаляли. К реакционной смеси добавляли трифенилфосфин (8,5 г) при охлаждении льдом, и смесь перемешивали в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин и к этому добавляли дистиллированную воду (0,92 мл). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли ацетонитрил (37 мл) и конц. хлористоводородную кислоту (2,6 мл) при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение 1 часа. Твердое вещество собирали фильтрованием из суспензии и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (8,4 г, выход 83%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,27 (6H, д, J=6,9 Гц), 3,00-3,09 (1H, м), 4,15 (2H, шир. с), 4,16 (3H, с), 7,54 (1H, т, J=7,7 Гц), 7,58-7,60 (1H, м), 7,72-7,76 (2H, м), 8,16 (1H, шир. с), 8,35 (1H, дт, J=7,7, 1,6 Гц), 8,39 (1H, шир. с), 8,48 (3H, шир. с).

[0215]

(4) 1-трифторметилциклопентанкарбоновой кислоты 4-хлор-3-[4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламид

[0216]

[0217]

К раствору 4-хлор-3-[4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламин гидрохлорида (полученного в вышеупомянутом (3), 0,080 г), 1-(трифторметил)циклопентанкарбоновой кислоты (0,047 г), HOBt H₂O (0,045 г) и WSC HCl (0,057 г) в N,N-диметилформамиде (0,70 мл) добавляли триэтиламин (0,082 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 18 часов. К реакционной смеси добавляли воду и смешанный растворитель н-гексана:этилацетат=1:1, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,094 г, выход 90%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,32 (6H, д, J=6,9 Гц), 1,71-1,75 (4H, м), 1,96-2,06 (2H, м), 2,28-2,35 (2H, м), 2,99-3,08 (1H, м), 4,21 (3H, с), 4,56 (2H, д, J=5,6 Гц), 6,23 (1H, шир. с), 7,35 (1H, дд, J=8,1, 2,4 Гц), 7,42-7,49 (2H, м), 7,52 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,93 (1H, д, J=2,4 Гц), 8,40-8,43 (1H, м), 8,46 (1H, шир. с).

[0218]

(5) 1-трифторметилциклопентанкарбоновой кислоты 4-хлор-3-[4-гидрокси-6-(3-изопропилфенил)-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламид

[0219]

[0220]

К раствору 1-трифторметилциклопентанкарбоновой кислоты 4-хлор-3-[4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламида (полученной в вышеупомянутом (4), 0,093 г) в метаноле (0,80 мл) добавляли 4 М водный раствор гидроксида натрия (0,13 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали при 60°C в течение 3 часов. К реакционной смеси добавляли 2 М хлористоводородную кислоту (0,26 мл) и воду при комнатной температуре, и смесь перемешивали. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,083 г, выход 92%).

[0221]

[Пример получения 5]: Синтез 1-фторметилциклопентанкарбоновой кислоты

[0222]

[0223]

(1) бензил 1-гидроксиметилциклопентанкарбоксилат

[0224]

[0225]

К раствору 1-гидроксиметилциклопентанкарбоновой кислоты (1,1 г) в N,N-диметилформамиде (5,0 мл) добавляли бензилбромид (0,94 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли карбонат калия (1,3 г) при охлаждении льдом и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь оставляли стоять в течение 20 часов. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, и фильтровали для удаления сульфата натрия. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением смеси (2,0 г), содержащей указанное в заголовке соединение.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,60-1,80 (6H, м), 1,95-2,03 (2H, м), 2,45-2,50 (1H, м), 3,59 (2H, д, J=6,9 Гц), 5,16 (2H, с), 7,30-7,39 (5H, м).

[0226]

(2) бензил 1-трифторметансульфонилоксиметилциклопентанкарбоксилат

[0227]

[0228]

К раствору смеси (полученной в вышеупомянутом (1), 0,70 г), содержащему бензил 1-гидроксиметилциклопентанкарбоксилат в хлороформе (3,5 мл), добавляли 2,6-лутидин (0,47 мл) и трифторметансульфоновый ангидрид (0,50 мл) при охлаждении льдом в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли воду, 10% водный раствор лимонной кислоты и хлороформ при комнатной температуре и смесь разделяли. Органический слой промывали 2% водным раствором лимонной кислоты, сушили над сульфатом натрия и фильтровали для удаления сульфата натрия. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением смеси (1,0 г), содержащей указанное в заголовке соединение.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,64-1,88 (6H, м), 2,05-2,23 (2H, м), 4,58 (2H, с), 5,17 (2H, с), 7,29-7,40 (5H, м).

[0229]

(3) бензил 1-фторметилциклопентанкарбоксилат

[0230]

[0231]

К раствору смеси (полученной в вышеупомянутом (2), 1,1 г), содержащей бензил 1-трифторметансульфонилоксиметилциклопентанкарбоксилат в тетрагидрофуране (5,0 мл), добавляли фторид тетрабутиламмония (приб. 1 моль/л раствор тетрагидрофурана, 3,0 мл) при охлаждении льдом в атмосфере аргона. Реакционную смесь оставляли стоять в течение 63 часов, к этому добавляли воду и этилацетат и смесь разделяли. Органический слой промывали последовательно водой и насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и фильтровали для удаления сульфата натрия. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,39 г, выход 62% (3 стадии)).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,60-1,82 (6H, м), 2,06-2,16 (2H, м), 4,47 (2H, д, J=47,4 Гц), 5,17 (2H, с), 7,28-7,40 (5H, м).

[0232]

(4) 1-фторметилциклопентанкарбоновая кислота

[0233]

[0234]

К раствору бензил 1-фторметилциклопентанкарбоксилата (полученного в вышеупомянутом (3), 0,39 г) в тетрагидрофуране (4,0 мл) добавляли ASCA-2 (катализатор 4,5% палладий-0,5% платина, нанесенный на активированный уголь (изготовленный N.E. Chemcat Corporation, см. Finechemical, October 1, 2002, pages 5-14), 0,12 г) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 5 часов под давлением водорода (1 атм). К этому добавляли ASCA-2 (0,20 г) в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 15 часов под давлением водорода (1 атм). Реакционную смесь фильтровали через целит с тетрагидрофураном в атмосфере азота. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением смеси (0,35 г), содержащей указанное в заголовке соединение.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,62-1,81 (6H, м), 2,07-2,14 (2H, м), 4,46 (2H, д, J=47,2 Гц).

[0235]

[Пример получения 6]: Синтез 1-дифторметилциклопентанкарбоновой кислоты

[0236]

[0237]

(1) бензил 1-формил-циклопентанкарбоксилат

[0238]

[0239]

К раствору смеси (полученной в (1) примера получения 5, 0,70 г), содержащей бензил 1-гидроксиметилциклопентанкарбоксилат в смешанном растворителе хлороформа (3,5 мл) и диметилсульфоксида (7,0 мл), добавляли триэтиламин (1,5 мл) в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли комплекс триоксид серы-пиридин (1,3 г) при охлаждении льдом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, к этому добавляли воду и этилацетат и смесь разделяли. Органический слой последовательно промывали 2% водным раствором лимонной кислоты, приб. 2% водным раствором гипохлорита натрия и насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и фильтровали для удаления сульфата натрия. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,58 г, выход приб. 93%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,57-1,79 (4H, м), 2,05-2,20 (4H, м), 5,19 (2H, с), 7,30-7,41 (5H, м), 9,68 (1H, с).

[0240]

(2) бензил 1-дифторметилциклопентанкарбоксилат

[0241]

[0242]

К раствору бензил 1-формил-циклопентанкарбоксилата (полученного в вышеупомянутом (1), 0,10 г) в тетрагидрофуране (1,0 мл) добавляли бис(2-метоксиэтил)аминосеры трифторид (0,32 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали в течение 14 часов, выливали в воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, и фильтровали для удаления сульфата натрия. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (0,094 г, выход 86%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,64-1,79 (4H, м), 1,87-2,13 (4H, м), 5,17 (2H, с), 6,14 (1H, т, J=56,8 Гц), 7,29-7,41 (5H, м).

[0243]

(3) 1-дифторметилциклопентанкарбоновая кислота

[0244]

[0245]

К раствору бензил 1-дифторметилциклопентанкарбоксилата (полученного в вышеупомянутом (2), 0,094 г) в тетрагидрофуране (1,0 мл) добавляли ASCA-2 (0,094 г) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 4 часов под давлением водорода (1 атм). Реакционную смесь фильтровали через целит с тетрагидрофураном в атмосфере азота. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением смеси (0,046 г, выход приб. 75%), содержащей указанное в заголовке соединение.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,65-1,79 (4H, м), 1,92-2,01 (2H, м), 2,04-2,18 (2H, м), 6,13 (1H, т, J=56,5 Гц).

[0246]

[Пример получения 7]: Синтез 2-этил-2-метоксимасляная кислота

[0247]

[0248]

(1) бензил 2-этил-2-гидроксибутират

[0249]

[0250]

К раствору 2-этил-2-гидроксимасляной кислоты (1,0 г) в смешанном растворителе тетрагидрофурана (5,0 мл) и толуола (5,0 мл) добавляли трифенилфосфин (3,4 г) в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли бензиловый спирт (0,78 мл) и бис(2-метоксиэтил) азодикарбоксилат (2,1 г) при охлаждении льдом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли ледяную воду и смешанный растворитель из н-гексана:этилацетата=1:1, смесь разделяли и органический слой промывали водой. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (1,6 г, выход 93%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,82 (6H, т, J=7,5 Гц), 1,62-1,84 (4H, м), 3,16 (1H, с), 5,21 (2H, с), 7,32-7,40 (5H, м).

[0251]

(2) бензил 2-этил-2-метоксибутират

[0252]

[0253]

К раствору бензил 2-этил-2-гидроксибутирата (полученного в вышеупомянутом (1), 1,6 г) в N,N-диметилформамиде (11 мл) добавляли иодметан (0,48 мл) и гидрид натрия (0,31 г, 60 мас.% масляная дисперсия) при охлаждении льдом в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли ледяную воду и смешанный растворитель из н-гексана:этилацетата=1:1, смесь разделяли и органический слой промывали водой. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (1,4 г, выход 81%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,81 (6H, т, J=7,5 Гц), 1,80 (4H, кв, J=7,5 Гц), 3,22 (3H, с), 5,19 (2H, с), 7,29-7,38 (5H, м).

[0254]

(3) 2-этил-2-метоксимасляная кислота

[0255]

[0256]

К раствору бензил 2-этил-2-метоксибутирата (полученного в вышеупомянутом (2), 1,4 г) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли ASCA-2 (0,14 г) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 4 часов под давлением водорода (1 атм). Реакционную смесь фильтровали через целит с тетрагидрофураном в атмосфере азота. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением смеси (0,83 г), содержащей указанное в заголовке соединение.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,85 (6H, т, J=7,5 Гц), 1,72-1,89 (4H, м), 3,29 (3H, с).

[0257]

[Пример получения 8]: Синтез 2-этил-N-(4-хлор-3-{4-гидрокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-2-метоксибутанамида (Пример No. 79)

[0258]

[0259]

(1) N-(4-хлор-3-{4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)амин гидрохлорид

[0260]

[0261]

К раствору (4-хлор-3-{4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}фенил)метанола (полученный в (3) примера получения 2, 84,0 г) в 1,2-диметоксиэтане (420 мл) добавляли по каплям дифенилфосфорилазид (52,4 мл) при охлаждении льдом в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли по каплям 1,8-диазабицикло[5.4.0]-7-ундецен (36,3 мл) при охлаждении льдом. Смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 часов. К реакционной смеси добавляли толуол (210 мл) и 5% водный раствор гидрокарбоната натрия (84 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 10 мин. Водный слой удаляли из реакционной смеси, к органическому слою добавляли дистиллированную воду (168 мл), и смесь перемешивали в течение 10 минут. Водный слой удаляли из реакционной смеси, и к этому добавляли раствор трифенилфосфина (69,0 г) в 1,2-диметоксиэтане (220 мл) по каплям в течение 30 мин при охлаждении водой. Смесь перемешивали в течение 2 часов, внутренняя температура повышалась до 61°С (температура бани: 70°C), и смесь перемешивали в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли по каплям конц. хлористоводородную кислоту (18,6 мл) при охлаждении льдом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение приблизительно 1 часа. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали 1,2-диметоксиэтаном и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (77,6 г, выход 85%). Указанное в заголовке соединение использовали на следующей стадии без очистки.

[0262]

(2) N-(4-хлор-3-{4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-2-этил-2-метоксибутанамид

[0263]

[0264]

К суспензии N-(4-хлор-3-{4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)амин гидрохлорида (полученного в вышеупомянутом (1), 3,5 г) в N,N-диметилформамиде (21 мл) добавляли 2-этил-2-метоксимасляную кислоту (1,32 г), диизопропилэтиламин (1,62 мл), HOBt H₂O (0,60 г) и WSC HCl (1,78 г) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 16 часов. К реакционной смеси добавляли дистиллированную воду (7,0 мл) и смешанный растворитель (35 мл) этилацетат/н-гексан=1/1 при охлаждении льдом, и смесь разделяли. Полученный водный слой экстрагировали смешанным растворителем (10 мл) этилацетат/н-гексан=1/1. Органические слои объединяли и последовательно промывали дистиллированной водой (дважды), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (один раз) и насыщенным солевым раствором (один раз). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (4,1 г, выход 97%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,77 (6H, т, J=7,4 Гц), 0,94 (3H, т, J=7,4 Гц), 1,35 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,39-1,50 (2H, м), 1,57-1,90 (6H, м), 3,19 (3H, с), 4,18 (3H, с), 4,52 (2H, д, J=6,0 Гц), 5,32-5,40 (1H, м), 6,77 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,28 (1H, м), 7,40 (1H, дд, J=8,2, 2,2 Гц), 7,50 (1H, д, J=8,2 Гц), 7,96 (1H, д, J=2,2 Гц), 8,65 (1H, дд, J=8,8, 2,5 Гц), 9,38 (1H, м).

[0265]

(3) 2-этил-N-(4-хлор-3-{4-гидрокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-2-метоксибутанамид

[0266]

[0267]

К раствору N-(4-хлор-3-{4-метокси-6-[6-((R)-1-метилбутокси)пиридин-3-ил]-1,3,5-триазин-2-ил}бензил)-2-этил-2-метоксибутанамида (полученного в вышеупомянутом (2), 4,1 г) в смешанном растворителе метанола (16 мл) и THF (8 мл) добавляли 4 М водный раствор гидроксида натрия (7,77 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона и смесь перемешивали в течение 19 часов. К реакционной смеси добавляли 2 М хлористоводородную кислоту (15,5 мл) и этилацетат (20 мл) при охлаждении льдом, и смесь перемешивали. Смесь разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (16 мл). Органические слои объединяли и последовательно промывали дистиллированной водой (дважды) и насыщенным солевым раствором (один раз). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (4,06 г, 99%). Раствор указанного в заголовке соединения (3,4 г) в этилацетате (6,8 мл) перемешивали при 80°C, и к этому добавляли н-гептан (32 мл). Суспензию перемешивали при 80°C в течение 3 часа, и затем при комнатной температуре в течение 4 часа. Полученное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили с получением кристалла (3,2 г) указанного в заголовке соединения.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 0,66 (6H, т, J=7,4 Гц), 0,89 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,29 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,33-1,45 (2H, м), 1,54-1,75 (6H, м), 3,14 (3H, с), 4,34 (2H, д, J=6,4 Гц), 5,27-5,35 (1H, м), 6,91 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,45-7,53 (1H, м), 7,56-7,76 (2H, м), 8,36 (1H, т, J=6,4 Гц), 8,48 (1H, дд, J=8,8, 2,3 Гц), 9,08 (1H, д, J=2,3 Гц), 13,28 (1H, шир. с).

Суспензию указанного в заголовке соединения (1,0 г) в дистиллированной воде (20 мл) и ацетонитриле (2,0 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. К суспензии добавляли смешанный растворитель (10 мл) дистиллированная вода/ацетонитрил (10/1), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 дней. Полученное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили при комнатной температуре с получением кристалла (1,0 г) моногидрата указанного в заголовке соединения. Полученный кристалл был получен как моногидрат из следующих измерений. Кристалл, который полагают, имеет кристаллическую форму, идентичную кристаллу, полученному выше, из спектра порошковой рентгеновской дифракции, показал быстрое уменьшение массы около 3,2% при увеличении температуры от комнатной до 50°С с помощью измерения термо-гравиметрическим/дифференциальным термическим анализом (TG/DTA) и показал быстрое снижение примерно на 3,3% по массе при снижении относительной влажности от 20% до 5% при измерении адсорбции-десорбции влаги при 25°С. Эти результаты подтверждали, что измеренный кристалл является моногидратом.

[0268]

[Пример получения 9]: Синтез 1-трифторметилциклогексанкарбоновой кислоты 4-хлор-3-[4-гидрокси-6-(3-изопропилфенил)-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламида (Пример No. 71)

[0269]

[0270]

(1) 1-трифторметилциклогексанкарбоновой кислоты 4-хлор-3-[4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламид

[0271]

[0272]

К суспензии 4-хлор-3-[4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламин гидрохлорида (полученному в (3) примера получения 4, 6,00 г) в N,N-диметилформамиде (60 мл) добавляли 1-(трифторметил)циклогексан-1-карбоновую кислоту (4,35 г), триэтиламин (6,19 мл), HOBt H₂O (3,40 г) и WSC HCl (4,25 г) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 15 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (60 мл) и этилацетат (100 мл) при охлаждении льдом и смесь разделяли. Полученный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (три раза). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (7,65 г, выход 94%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,14-1,27 (1H, м), 1,32 (6H, д, J=6,9 Гц), 1,34-1,47 (2H, м), 1,57-1,77 (5H, м), 2,19-2,27 (2H, м), 2,98-3,09 (1H, м), 4,21 (3H, с), 4,60 (2H, д, J=5,8 Гц), 6,19-6,27 (1H, м), 7,37 (1H, дд, J=8,3, 2,3 Гц), 7,42-7,49 (2H, м), 7,53 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,95 (1H, д, J=2,3 Гц), 8,40-8,43 (1H, м), 8,45-8,47 (1H, м).

[0273]

(2) 1-трифторметилциклогексанкарбоновой кислоты 4-хлор-3-[4-гидрокси-6-(3-изопропилфенил)-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламид

[0274]

[0275]

К раствору 1-трифторметилциклогексанкарбоновой кислоты 4-хлор-3-[4-(3-изопропилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензиламида (полученного в вышеупомянутом (1), 7,55 г) в метаноле (69 мл) добавляли 4 М водный раствор гидроксида натрия (13,8 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали при 64°C в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли 2 М хлористоводородную кислоту (27,6 мл) и воду (100 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 3 часов. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (7,05 г, выход 95%). К суспензии указанного в заголовке соединения (1,0 г) в ацетоне (2,0 мл) добавляли н-гексан (8,0 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали при 60°C в течение 20 часов. Полученное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили с получением кристалла (0,813 г) указанного в заголовке соединения.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,08-1,26 (3H, м), 1,25 (6H, д, J=8,0 Гц), 1,41-1,64 (5H, м), 2,35 (2H, д, J=12,5 Гц), 2,96-3,03 (1H, м), 4,42 (2H, д, J=5,9 Гц), 7,42-7,51 (2H, м), 7,56 (1H, д, J=7,7 Гц), 7,62 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,67 (1H, шир. с), 8,15 (1H, д, J=7,7 Гц), 8,22 (1H, шир. с), 8,78 (1H, т, J=5,9 Гц).

[0276]

[Пример получения 10]: Синтез 1-трифторметилциклогексанкарбоновой кислоты 3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-гидрокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензиламида (Пример No. 107)

[0277]

[0278]

(1) 3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензиламин гидрохлорид

[0279]

[0280]

Суспензию 3-трет-бутилфенилбороновой кислоты (6,6 г), 2,4-дихлор-6-метокси-1,3,5-триазина (10,0 г), тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) (0,86 г) и карбоната натрия (11,8 г) в толуоле (66 мл) и дистиллированную воду (66 мл) перемешивали при 80°C в течение 4 часов в атмосфере аргона. К реакционной смеси добавляли смешанный растворитель н-гексан:этилацетат=1:1 и воду при комнатной температуре и смесь разделяли. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, и фильтровали для удаления сульфата натрия. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и к этому добавляли ацетонитрил (70 мл) и дистиллированную воду (30 мл). К суспензии добавляли 2-хлор-5-гидроксиметилфенилбороновую кислоту (8,3 г), аддукт [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорид дихлорметан (0,91 г) и трикалийфосфат (15,7 г), и смесь перемешивали при 80°C в течение 3 часа. К реакционной смеси добавляли насыщенный солевой раствор и смешанный растворитель н-гексан:этилацетат =1:1 при комнатной температуре и смесь разделяли. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат), и фракцию концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли толуол (57 мл) в атмосфере аргона. К раствору добавляли дифенилфосфорилазид (8,0 мл) и 1,8-диазабицикло[5.4.0]-7-ундецен (5,5 мл) при охлаждении льдом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (15 мл) и дистиллированную воду (15 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 1 мин. Водный слой удаляли из реакционной смеси, к этому добавляли дистиллированную воду (30 мл) и смесь перемешивали в течение 1 мин. Водный слой удаляли из реакционной смеси, и к этому добавляли дистиллированную воду (30 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 мин, и водный слой удаляли. К реакционной смеси добавляли трифенилфосфин (10,7 г) при охлаждении льдом при охлаждении льдом, и смесь перемешивали в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, и к этому добавляли дистиллированную воду (2,8 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, и затем при 60°C в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли ацетонитрил (57 мл) и конц. хлористоводородную кислоту (3,3 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 1 часа. Твердое вещество собирали фильтрованием из суспензии и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (11,3 г, выход 73% (3 стадии)). Указанное в заголовке соединение использовали на следующей стадии без очистки.

[0281]

(2) 1-трифторметилциклогексанкарбоновой кислоты 3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензиламид

[0282]

[0283]

К раствору 3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензиламин гидрохлорида (полученного в вышеупомянутом (1), 5,0 г), 1-(трифторметил)циклогексанкарбоновой кислоте (3,50 г), HOBt H₂O (2,74 г) и WSC HCl (3,43 г) в N,N-диметилформамиде (50 мл) добавляли триэтиламин (4,99 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 18 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (50 мл) и этилацетат (80 мл), смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (6,31 г, выход 94%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,14-1,26 (1H, м), 1,34-1,47 (2H, м), 1,40 (9H, с), 1,55-1,76 (5H, м), 2,19-2,26 (2H, м), 4,21 (3H, с), 4,60 (2H, д, J=5,8 Гц), 6,17-6,27 (1H, м), 7,37 (1H, дд, J=8,3, 2,3 Гц), 7,45 (1H, т, J=7,7 Гц), 7,53 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,62-7,65 (1H, м), 7,97 (1H, д, J=2,3 Гц), 8,39-8,43 (1H, м), 8,66 (1H, т, J=1,8 Гц).

[0284]

(3) 1-трифторметилциклогексанкарбоновой кислоты 3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-гидрокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензиламид

[0285]

[0286]

К раствору 1-трифторметилциклогексанкарбоновой кислоты 3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензиламида (полученного в вышеупомянутом (2), 6,21 г) в метаноле (55 мл) добавляли 4 М водный раствор гидроксида натрия (11,1 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали при 64°C в течение 2 часов. К реакционной смеси по каплям добавляли 2 н хлористоводородную кислоту (22,1 мл) и воду (80 мл) при охлаждении льдом, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (5,84 г, выход 96%). К раствору указанного в заголовке соединения (1,0 г) в этаноле (4,0 мл) медленно добавляли н-гексан (40 мл) при комнатной температуре. Полученное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили с получением кристалла (0,78 г) указанного в заголовке соединения.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,11-1,63 (8H, м), 1,34 (9H, с), 2,35 (2H, д, J=13,7 Гц), 4,42 (2H, д, J=6,0 Гц), 7,42-7,50 (2H, м), 7,60 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,66-7,72 (2H, м), 8,15 (1H, д, J=8,1 Гц), 8,38 (1H, шир. с), 8,78 (1H, т, J=5,8 Гц), 13,36 (1H, шир. с).

[0287]

[Пример получения 11]: Синтез (R)-N-{3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-гидрокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензил}-3,3,3-трифтор-2-метокси-2-метилпропионамида (Пример No. 66)

[0288]

[0289]

(1) бензил (R)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропионат

[0290]

[0291]

К суспензии (R)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропионовой кислоты (2,2 г, 14 ммоль) и карбоната калия (2,3 г, 16 ммоль) в N,N-диметилформамиде (30 мл) добавляли бензилбромид (1,8 мл, 15 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 4 часов. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат=6/1) с получением указанного в заголовке соединения (3,0 г, выход 90%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,60 (3H, с), 3,78 (1H, с), 5,31 (2H, с), 7,33-7,42 (5H, м).

[0292]

(2) бензил (R)-3,3,3-трифтор-2-метокси-2-метилпропионат

[0293]

[0294]

К раствору бензил (R)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропионата (полученного в вышеупомянутом (1), 3,4 г, 14 ммоль) в N,N-диметилформамиде (40 мл) добавляли гидрид натрия (0,60 г, 60 мас.% масляная дисперсия) при охлаждении льдом в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли метилйодид (1,3 мл, 20 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и этилацетат, смесь разделяли и органический слой промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат=15/1) с получением указанного в заголовке соединения (2,8 г, выход 78%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,59 (3H, с), 3,40 (3H, с), 5,26 (2H, с), 7,31-7,37 (5H, м).

[0295]

(3) (R)-3,3,3-трифтор-2-метокси-2-метилпропионовая кислота

[0296]

[0297]

К раствору бензил (R)-3,3,3-трифтор-2-метокси-2-метилпропионата (полученного в вышеупомянутом (2), 2,8 г, 11 ммоль) в этилацетате (50 мл) добавляли 10% масс. палладий на угле (0,23 г) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 5 часов в атмосфере водорода (1 атм). Реакционную смесь фильтровали через целит с этилацетатом в атмосфере азота. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,4 г, выход 78%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,68 (3H, с), 3,54 (3H, с).

[0298]

(4) (R)-N-{3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензил}-3,3,3-трифтор-2-метокси-2-метилпропионамид

[0299]

[0300]

К раствору 3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензиламин гидрохлорида (полученному в (1) примера получения 10, 5,2 г), (R)-3,3,3-трифтор-2-метокси-2-метилпропионовой кислоты (полученной в вышеупомянутом (3), 3,2 г), HOBt H₂O (2,85 г) и WSC HCl (3,56 г) в N,N-диметилформамиде (52 мл) добавляли триэтиламин (5,18 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 16 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (50 мл) и этилацетат (80 мл) и смесь разделяли. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (6,55 г, выход 98%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,40 (9H, с), 1,65-1,67 (3H, м), 3,44-3,45 (3H, м), 4,21 (3H, с), 4,47-4,63 (2H, м), 7,10-7,19 (1H, м), 7,37 (1H, дд, J=8,3, 2,3 Гц), 7,45 (1H, т, J=7,7 Гц), 7,53 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,62-7,65 (1H, м), 7,96 (1H, д, J=2,3 Гц), 8,39-8,43 (1H, м), 8,66 (1H, т, J=1,8 Гц).

[0301]

(5) (R)-N-{3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-гидрокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензил}-3,3,3-трифтор-2-метокси-2-метилпропионамид

[0302]

[0303]

К раствору (R)-N-{3-[4-(3-трет-бутилфенил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]-4-хлорбензил}-3,3,3-трифтор-2-метокси-2-метилпропионамида (полученного в вышеупомянутом (4), 6,29 г) в метаноле (58 мл) добавляли 4 М водный раствор гидроксида натрия (11,7 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали при 64°C в течение 3 часа. К реакционной смеси по каплям добавляли 2 н хлористоводородную кислоту (23,4 мл) и воду (80 мл) при охлаждении льдом, и смесь перемешивали. К реакционной смеси добавляли этилацетат (200 мл) и насыщенный солевой раствор и смесь разделяли. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (приб. 6,4 г). К раствору указанного в заголовке соединения (6,15 г) в смешанном растворителе этилацетата (50 мл) и н-гексана (50 мл) добавляли по каплям н-гексан (100 мл) в течение 20 мин при комнатной температуре. Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа, и к этому добавляли по каплям н-гексан (100 мл) в течение 20 мин. Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили с получением кристалла (5,51 г, выход 90%) указанного в заголовке соединения.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 1,34 (9H, с), 1,54 (3H, с), 3,36 (3H, с), 4,33-4,45 (2H, м), 7,46 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,50 (1H, т, J=7,9 Гц), 7,61 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,67-7,72 (1H, м), 7,72 (1H, д, J=7,9 Гц), 8,16 (1H, д, J=7,9 Гц), 8,38 (1H, с), 9,02 (1H, т, J=6,2 Гц), 13,34 (1H, шир. с).

[0304]

[Пример получения 12]: Синтез N-{4-хлор-3-[4-(6-гексилоксипиридин-3-ил)-6-гидрокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензил}-2-метокси-2-метилпропионамида (Пример No. 81)

[0305]

[0306]

(1) 5-бром-2-гексилоксипиридин

[0307]

[0308]

К раствору 5-бром-2-хлорпиридина (15 г) и н-гексанола (11,7 мл) в N,N-диметилформамиде (60 мл) добавляли трет-бутоксид калия (13,1 г) при охлаждении льдом в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часов. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и этилацетат и смесь разделяли. Водный слой экстрагировали смешанным растворителем н-гексан:этилацетат =1:1. Органические слои объединяли и промывали водой и насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (18,8 г, 94%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,88-0,92 (3H, м), 1,29-1,37 (4H, м), 1,39-1,47 (2H, м), 1,71-1,79 (2H, м), 4,24 (2H, т, J=6,7 Гц), 6,64 (1H, дд, J=8,7, 0,6 Гц), 7,62 (1H, дд, J=8,7, 2,6 Гц), 8,17 (1H, дд, J=2,6, 0,6 Гц).

[0309]

(2) [6-(гексилокси)пиридин-3-ил]бороновая кислота

[0310]

[0311]

К раствору 5-бром-2-гексилоксипиридина (полученного в вышеупомянутом (1), 18,8 г) в смешанном растворителе из толуола (124 мл), тетрагидрофурана (30 мл) и триизопропилбората (21,7 мл) добавляли по каплям н-бутиллитий (1,55 M н-гексанового раствора, 61,2 мл) при -73°C в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин, давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 1,5 часа. К реакционной смеси добавляли по каплям 17% водный раствор лимонной кислоты (168 г) при охлаждении льдом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли н-гексан (124 мл) и смесь разделяли. Органический слой промывали водой (30 мл, дважды). Водные слои объединяли, к этому добавляли 4 н водный раствор гидроксида натрия (73 мл) и смесь перемешивали (pH=7). Полученное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили при пониженном давлении с получением смеси (18,1 г), содержащей указанное в заголовке соединение.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 0,87 (3H, т, J=6,7 Гц), 1,25-1,33 (4H, м), 1,35-1,45 (2H, м), 1,65-1,73 (2H, м), 4,25 (2H, т, J=6,7 Гц), 6,73 (1H, д, J=8,2 Гц), 7,98 (1H, дд, J=8,2, 1,8 Гц), 8,08 (2H, с), 8,49 (1H, шир).

[0312]

(3) 2-хлор-4-(6-гексилоксипиридин-3-ил)-6-метокси-1,3,5-триазин

[0313]

[0314]

К суспензии смеси (полученной в вышеупомянутом (2), 9,07 г), содержащей [6-(гексилокси)пиридин-3-ил]бороновую кислоту, 2,4-дихлор-6-метокси-1,3,5-триазин (13,1 г), аддукт [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорид дихлорметан (0,745 г) и фосфат калия (23,2 г) в 1,2-диметоксиэтане (131 мл) добавляли дистиллированную воду (65,6 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона. Смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разделяли при комнатной температуре, и водный слой экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли и промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (8,37 г, 71%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,91 (3H, т, J=7,2 Гц), 1,30-1,39 (4H, м), 1,43-1,51 (2H, м), 1,76-1,83 (2H, м), 4,15 (3H, с), 4,40 (2H, т, J=6,7 Гц), 6,81 (1H, дд, J=8,8, 0,7 Гц), 8,56 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 9,28 (1H, дд, J=2,4, 0,7 Гц).

[0315]

(4) {4-хлор-3-[4-(6-гексилоксипиридин-3-ил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]фенил}метанол

[0316]

[0317]

Суспензию 2-хлор-4-(6-гексилоксипиридин-3-ил)-6-метокси-1,3,5-триазина (полученную в вышеупомянутом (3), 8,37 г), 2-хлор-5-гидроксиметилфенилбороновой кислоты (5,79 г), аддукта [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(II) дихлорида дихлорметана (0,529 г) и трикалийфосфата (8,25 г) в ацетонитриле (59 мл) и дистиллированную воду (25 мл) перемешивали при 90°C в течение 1,5 часа в атмосфере аргона. Реакционную смесь разделяли при комнатной температуре. Полученный водный слой экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли, и промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат), и фракцию концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли смешанный растворитель н-гексан:этилацетат =1:1 (20 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 1 часа. К суспензии добавляли н-гексан (80 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 30 мин. Полученное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили с получением указанного в заголовке соединения (7,26 г, выход 65%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,89-0,93 (3H, м), 1,31-1,40 (4H, м), 1,43-1,52 (2H, м), 1,77-1,84 (3H, м), 4,19 (3H, с), 4,40 (2H, т, J=6,7 Гц), 4,77 (2H, д, J=5,4 Гц), 6,83 (1H, дд, J=8,7, 0,6 Гц), 7,47 (1H, дд, J=8,2, 2,2 Гц), 7,54 (1H, д, J=8,2 Гц), 8,03 (1H, д, J=2,2 Гц), 8,67 (1H, дд, J=8,7, 2,3 Гц), 9,40 (1H, дд, J=2,3, 0,6 Гц).

[0318]

(5) N-{4-хлор-3-[4-(6-гексилоксипиридин-3-ил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензил}-2-метокси-2-метилпропионамид

[0319]

[0320]

К раствору {4-хлор-3-[4-(6-гексилоксипиридин-3-ил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]фенил}метанола (полученного в вышеупомянутом (4), 7,16 г) в толуоле (36 мл) и THF (7 мл) добавляли дифенилфосфорилазид (4,32 мл) и 1,8-диазабицикло[5.4.0]-7-ундецен (3,0 мл) при охлаждении льдом в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, и затем при комнатной температуре в течение 14 часов. Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли трифенилфосфин (5,69 г) и воду (1,43 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 3 часов, и концентрировали при пониженном давлении при комнатной температуре. К остатку добавляли толуол и смесь снова концентрировали при пониженном давлении. К раствору остатка в N,N-диметилформамиде (21 мл) добавляли 2-метокси-2-метилпропионовую кислоту (2,17 г), HOBt H₂O (3,07 г) и WSC HCl (4,80 г) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 18 часов. К реакционной смеси добавляли воду и этилацетат, смесь разделяли и органический слой промывали водой и насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения (8,28 г, выход 94%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,91 (3H, т, J=6,9 Гц), 1,32-1,38 (4H, м), 1,41 (6H, с), 1,43-1,51 (2H, м), 1,77-1,84 (2H, м), 3,27 (3H, с), 4,19 (3H, с), 4,40 (2H, т, J=6,7 Гц), 4,50 (2H, д, J=6,0 Гц), 6,82 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,08-7,11 (1H, м), 7,37 (1H, дд, J=8,2, 2,0 Гц), 7,50 (1H, д, J=8,2 Гц), 7,95 (1H, д, J=2,0 Гц), 8,67 (1H, дд, J=8,8, 2,2 Гц), 9,39 (1H, д, J=2,2 Гц).

[0321]

(6) N-{4-хлор-3-[4-(6-гексилоксипиридин-3-ил)-6-гидрокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензил}-2-метокси-2-метилпропионамид

[0322]

[0323]

К раствору N-{4-хлор-3-[4-(6-гексилоксипиридин-3-ил)-6-метокси-1,3,5-триазин-2-ил]бензил}-2-метокси-2-метилпропионамида (полученного в вышеупомянутом (5), 0,11 г) в метаноле (1,0 мл) добавляли 4 М водный раствор гидроксида натрия (0,21 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали при 65°C в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли 1 н хлористоводородную кислоту (0,84 мл) и воду при комнатной температуре и смесь перемешивали. Осажденное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали водой и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,091 г, выход 84%).

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 0,88 (3H, т, J=6,9 Гц), 1,27 (6H, с), 1,28-1,35 (4H, м), 1,37-1,48 (2H, м), 1,68-1,75 (2H, м), 3,15 (3H, с), 4,30 (4H, т, J=6,9 Гц), 6,81 (1H, д, J=8,4 Гц), 7,25 (1H, д, J=8,1 Гц), 7,40 (1H, д, J=8,1 Гц), 7,54 (1H, с), 8,39-8,45 (2H, м), 8,99 (1H, с).

[0324]

[Пример получения 13]: Синтез 5-бром-2-((R)-1-метилбутокси)пиридина

[0325]

(1) (R)-1-метилбутил н-октаноат

[0326]

[0327]

2-Пентанол (927 г), н-октановую кислоту (910 г), молекулярное сито 4Å (464 г) и Novozyme 435 (9,27 г) смешивали, и смесь перемешивали при внутренней температуре 41°C (температура бани: 45°C) в течение 7,5 часов. К реакционной смеси добавляли целит (232 г) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь фильтровали через целит с толуолом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, к полученному остатку добавляли толуол (1000 мл), и смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли толуол (1000 мл) и смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли толуол (1000 мл) и смесь концентрировали при пониженном давлении с получением остатка (1,15 кг), содержащего указанное в заголовке соединение (795 г, выход 35%) и н-октановую кислоту (309 г). Это непосредственно использовали для следующей реакции.

[0328]

(2) (R)-пентан-2-ол

[0329]

[0330]

К остатку (полученному в вышеупомянутом (1), 1,15 кг), содержащему (R)-1-метилбутил н-октаноат (795 г), добавляли 4 M водный раствор гидроксида натрия (2,39 л) при комнатной температуре (внутренняя температура повышалась до 39°C). Реакционную смесь перемешивали при внутренней температуре 41°C (температура бани: 70°C) в течение 1 часа, и затем при внутренней температуре 75°C (температура бани: 95°C) в течение 16,5 часов. конц. хлористоводородную кислоту (797 мл) добавляли к этому по каплям при охлаждении льдом. К этому добавляли толуол (200 мл), смесь разделяли и водный слой экстрагировали толуолом (200 мл, один раз). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (дважды) и сушили над сульфатом натрия. Полученный раствор фильтровали через целит и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением остатка (1,76 кг), содержащего указанное в заголовке соединение (297 г, выход 91%) и н-октановую кислоту (876 г). Это непосредственно использовали для следующей реакции.

[0331]

(3) (R)-1-метилбутил н-октаноат

[0332]

[0333]

К остатку (полученному в вышеупомянутом (2), 1,76 кг), содержащему (R)-пентан-2-ол (297 г) и н-октановую кислоту (876 г), добавляли молекулярное сито 4Å (149 г) и Novozyme 435 (2,97 г), и смесь перемешивали при внутренней температуре 40°C (температура бани: 45°C) в течение 7 часов. К этому добавляли Novozyme 435 (2,97 г) и смесь перемешивали в течение еще 2 часов. К этому добавляли целит (50 г) и смеси давали остыть до комнатной температуры и фильтровали через целит с толуолом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, к полученному остатку добавляли толуол (700 мл), и смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли толуол (500 мл) и смесь концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли толуол (500 мл) и смесь концентрировали при пониженном давлении с получением остатка (1,09 кг), содержащего указанное в заголовке соединение (612 г, выход 85%) и н-октановую кислоту (449 г). Это непосредственно использовали для следующей реакции.

[0334]

(4) (R)-пентан-2-ол

[0335]

[0336]

К остатку (полученному в вышеупомянутом (3), 1,09 кг), содержащему (R)-1-метилбутил октаноат (612 г), добавляли 4 M водный раствор гидроксида натрия (2,20 л) при комнатной температуре (внутренняя температура повышалась до 41°C). Реакционную смесь перемешивали при внутренней температуре 70°C (температура бани: 95°C) в течение 16 часов. Смеси давали остыть до комнатной температуры и к этому добавляли по каплям конц. хлористоводородную кислоту (530 мл) при охлаждении льдом. Реакционную смесь перегоняли при внутренней температуре 98°C (температура бани: 158°C) при нормальном давлении с получением смеси (приб. 600 мл), содержащей указанное в заголовке соединение и воду. Смесь разделяли отстаиванием и водный слой экстрагировали диизопропиловым эфиром (20 мл, один раз). Органические слои объединяли и последовательно промывали 1% водным раствором гидрокарбоната натрия (44 мл) и насыщенным солевым раствором (приб. 40 мл). Органический слой сушат над сульфатом магния (20 г) и фильтровали через целит с диизопропиловым эфиром. Фильтрат тщательно концентрировали при пониженном давлении с получением раствора толуола (272 г), содержащего указанное в заголовке соединение (186 г, выход 74%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,90-0,96 (3H, м), 1,19 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,28-1,52 (4H, м), 3,77-3,86 (1H, м).

[0337]

(5) 5-бром-2-((R)-1-метилбутокси)пиридин

[0338]

[0339]

К раствору 5-бром-2-хлорпиридина (22 г) и (R)-пентан-2-ола (полученному в вышеупомянутом (4), 12,1 г) в N,N-диметилформамиде (88 мл) добавляли трет-бутоксид калия (16,7 г) при охлаждении льдом в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. К реакционной смеси добавляли трет-бутоксид калия (1,67 г) при охлаждении льдом, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и этилацетат и смесь разделяли. Водный слой экстрагировали смешанным растворителем н-гексан:этилацетат=1:1. Органические слои объединяли и промывали водой и насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали для удаления сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Часть остатка очищали хроматографией на силикагеле (элюент: н-гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ: 0,92 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,29 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,33-1,48 (2H, м), 1,50-1,59 (1H, м), 1,66-1,75 (1H, м), 5,10-5,18 (1H, м), 6,59 (1H, д, J=8,8 Гц), 7,60 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 8,16 (1H, д, J=2,4 Гц).

При анализе с использованием хиральной колонки время удерживания полученного целевого соединения составляло около 10 мин, а его оптическая чистота составляла 99,0% э.и. или более. Условие анализа с использованием хиральной колонки было следующим.

измерительное оборудование; ВЭЖХ система Shimadzu Corporation high-performance liquid chromatogram Prominence

колонка; Daicel CHIRALCEL AS 0,46 смϕ × 15 см (10 мкм)

температура колонки; 25°C

подвижная фаза; н-гексан

скорость потока; 1 мл/5206

обнаружение; УФ (220 нM)

[0340]

Соединения примеров No. 1-145 получали в соответствии с вышеупомянутым способом получения. Структуры и данные MS и данные ЯМР соединений примеров приведены в таблица 1-1 - таблица 1-19. В таблицах примечания 1 и 2 приведены ниже.

[0341]

[0342]

Рацемическую смесь А получали с использованием гидрокси-2-трифторметилмасляной кислоты вместо 2-этил-2-гидроксимасляной кислоты таким же образом, как в (1), (2) и (3) примера получения 7.

Диастереомерную смесь В получали путем амидирования с использованием рацемической смеси А и (1R,2S)-(+)-1-амино-2-инданола таким же образом, как в (5) примера получения 1.

Диастереомерную смесь B очищали колоночной хроматографией на силикагеле (Merck TLC Silica gel 60G F254 25 Glassplates, элюент: н-гексан/этилацетат =1/2) с получением соединения B1 (менее полярный диастереомер) и соединения B2 (более полярный диастереомер).

Соединение C1 получали с помощью гидролиза соединения B1 (одиночный диастереомер) с KOH при нагревании в этиленгликоле.

Соединение примера 132 получали путем амидирования с использованием соединения С1 и соединения D таким же образом, как в (5) примера получения 1, и затем гидролизом таким же образом, как в (6) примера получения 1.

Соединение С2 получали гидролизом соединения В2 (одиночный диастереомер) таким же образом, как при гидролизе соединения В1. Соединение примера 134 получали путем амидирования с использованием соединения С2 и соединения D таким же образом, как в (5) примера получения 1, и затем гидролизом таким же образом, как в (6) примера получения 1.

Соединения примеров 132 и 134 представляют собой каждый отдельный диастереомер, а абсолютные стерические конфигурации на α-углероде амида не определены. В таблицах, «Примечание 1» для соединений примеров 132, 133, 138, 139, 143 и 145 означает, что соединения были получены с использованием менее полярного диастереомера B1, и «Примечание 2» для соединений примеров 134, 135, 136, 137, 142 и 144, что соединения были получены с использованием более полярного диастереомера В2.

[0343]

Таблица 1-1

[0344]

Таблица 1-2

[0345]

Таблица 1-3

[0346]

Таблица 1-4

[0347]

Таблица 1-5

[0348]

Таблица 1-6

[0349]

Таблица 1-7

[0350]

Таблица 1-8

[0351]

[Таблица 1-9]

[0352]

Таблица 1-10

[0353]

Таблица 1-11

[0354]

Таблица 1-12

[0355]

Таблица 1-13

[0356]

Таблица 1-14

[0357]

Таблица 1-15

[0358]

Таблица 1-16

[0359]

Таблица 1-17

[0360]

Таблица 1-18

[0361]

Таблица 1-19

[0362]

Экспериментальный пример 1: Оценка ингибирующей активности фермента mPGES-1 человека

Ингибирующая активность фермента mPGES-1 человека тестируемого препарата оценивали в соответствии с докладом Xu et al. (XU, D et al. MF63 [2-(6-chloro-1H-phenanthro[9,10-d]imidazol-2-yl)-isophthalonitrile], a selective microsomal prostaglandin E synthase-1 inhibitor, relieves pyresis and pain in preclinical models of inflammation. J Pharmacol Exp Ther. Sep 2008, Vol.326, No.3, pages 754-763). Количество PGE2, продуцируемое mPGES-1 человека в присутствии тестируемого препарата измеряли с помощью способа HTRF (гомогенная флуоресценция с временным разрешением), и определяли ингибирующую активность фермента mPGES-1 человека тестируемого препарата.

[0363]

1) Получение микросомной фракции клетки, экспрессирующей mPGES-1 человека

Фрагмент ДНК, содержащий mPGES-1 человека, который добавляли с последовательностью расщепления распознавания BamHI непосредственно перед инициирующим кодоном трансляции и последовательностью расщепления распознавания EcoRI непосредственно после кодона терминации трансляции, амплифицировали методом ПЦР (полимеразной цепной реакции) с использованием плазмиды экспрессии ДНК mPGES-1 человека (pME-18S/iPGES-1), полученной в лаборатории в качестве матрицы. Очищенный фрагмент ДНК расщепляли BamHI и EcoRI, и лигировали с pcDNA3.1(+) (Invitrogen, номер модели V790-20), аналогично получению с BamHI и EcoRI, с помощью набора для лигирования ДНК ver.2.1 (DNA Ligation kit ver.2.1) (Takara Bio, номер модели 6022). Экспрессионную плазмиду ДНК mPGES-1 человека выделили из Escherichia coli DH5α (TOYOBO, номер образца DNA-903), трансформированной с полученным продуктом лигирования. Нуклеотидную последовательность mPGES-1 человека клонировали в вектор с помощью метода Dye Terminator, используя набор для сиквенса BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems, #4337455). Определенная последовательность была идентична последовательности белка области трансляции mPGES-1 человека (номер доступа NM_004878), зарегистрированной в NCBI справочной базе данных.

Экспрессионную плазмиду ДНК mPGES-1 человека трансфицировали в клетки, полученные из яичников китайского хомячка (FreeStyle CHO-S Cell, Invitrogen, #R800-07) с использованием трансгенного реагента (FreeStyle MAX Reagent (Invitrogen, #16447-100)), и культивировали при встряхивании (8% CO₂, 37°C) в среде, содержащей 8 ммоль/л L-глутамина (среда для экспрессии GIBCO FreeStyle CHO Expression Medium, Invitrogen, #12651-022) в течение 48 часов.

Клетки CHO-S суспендировали в буфере гомогената (100 ммоль/л фосфата калия (рН 7,4), 250 ммоль/л сахароза, 100 ммоль/л EDTA, complete EDTA free (Roche, #1873580)). С помощью ультразвукового дезинтегратора UD-201 (Tomy Seiko), суспендированные клетки разрушали на выходе:3, рабочий цикл: 50 в течение 30 секунд. Осадок удаляли центрифугированием (1000×g, 5 минут, 4°C), и супернатант центрифугировали (5000×g, 10 минут, 4°C). Супернатант дополнительно центрифугировали (105000×g, 60 минут, 4°C). Полученный осадок суспендировали в буфере для ресуспендирования (100 ммоль/л фосфата калия (рН 7,4), 250 ммоль/л сахарозы, 100 ммоль/л EDTA, 10% глицерина) с получением микросомальной фракции.

Концентрацию белка в микросомальной фракции измеряли по методу Брэдфорда (Protein Assay Kit, Bio-Rad). Микросомальную фракцию быстро замораживали в жидком азоте и хранили при -80°C. mPGES-1 человека в микросомальной фракции определяли с помощью Вестерн-блоттинга с использованием поликлонального антитела кролика против mPGES-1 (ThermoFisher Scientific, #PA1-10264).

[0364]

2) Оценка ингибирующей активности фермента mPGES-1 человека

Раствор тестируемого препарата разбавляли 0,1 моль/л фосфата калия, pH 7,4 (в дальнейшем упоминается как KPB) или ДМСО (Nacalai Tesque, #13407-45) добавляли при 5 мкл/лунку в 96-луночный V-образный планшет (Corning, #3363). Конечная концентрация ДМСО во время реакции была установлена до 2%(об./об.). Кроме того, микросомную фракцию клеток СНО-S, экспрессирующих mPGES-1 человека, которую разбавляли редуцированным GSH (12,5 ммоль/л раствор KPB, SIGMA, #G6529-25G) таким образом, чтобы концентрация белка составляла 5 мкг/мл, добавляли при 20 мкл/лунку. Количество используемой микросомной фракции находится в пределах диапазона, где количество PGE2, продуцируемое в условиях реакции, показано ниже, и количество используемой микросомной фракции показывает линейность. К пустому раствору добавляли редуцированный GSH (12,5 ммоль/л раствора KPB) при 20 мкл/лунку. После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 минут, PGH2 (PGH2 растворяли в холодном ацетоне при 100 мкг/мл и разбавляли D-PBS(-) (Nikken biomedical laboratory, #CM6201) до 10 мкг/мл, Cayman Chemical, #17020) добавляли 25 мкл/лунку, и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 45 секунд. Дигидрат хлорида олова (II), (2 мг/мл 10 ммоль/л раствора лимонной кислоты, Wako Pure Chemical Industries, Ltd., #204-01562) добавляли 50 мкл/лунку, и планшет осторожно встряхивали для прекращения ферментативной реакции.

Концентрацию PGE2 в указанной выше реакционной смеси фермента измеряли с помощью анализа Prostaglandin E2 (CISbio Bioassays, #62P2APEC) в соответствии с инструкцией. В качестве эталонного стандарта для аналитической кривой, использовали PGE2 (Cayman Chemical, #14010). Используя EnVision 2104 (Perkin Elmer), измеряли флуоресценцию с временным разрешением при 620 нм и 665 нм относительно возбуждающего света при 337 нм. Концентрация PGE2 была экстраполирована из аналитической кривой PGE2. Среднее значение концентраций PGE2 соответственно-обработанных лунок использовали в качестве данных.

Ингибирующую активность фермента mPGES-1 (%) тестируемого препарата рассчитывали в соответствии со следующей формулой 1.

[Формула 1]

ингибирующая активность фермента mPGES-1 (%)=(PGE2_A-PGE2_X)/(PGE2_A-PGE2_B)×100

PGE2_A: концентрация PGE2 лунки, обработанной носителем

PGE2_B: концентрация PGE2 холостой лунки

PGE2_X: концентрация PGE2 лунки, обработанной тестируемым препаратом

Значение IC₅₀ (50% ингибирующая концентрация) тестируемого препарата рассчитывали в соответствии со следующей Формулой 2.

[Формула 2]

Значение IC₅₀₌10^{{log10(D/E)×(50-G)/(F-G)+log10(E)}}

D: концентрация тестируемого препарата, которая показывает активность не менее 50% ингибирования между двумя точками по 50% ингибированию

E: концентрация тестируемого препарата, которая показывает активность не более 50% ингибирования между двумя точками по 50% ингибированию

F: ингибирующая активность фермента mPGES-1 (%), когда концентрация тестируемого препарата представляет собой D

G: ингибирующую активность фермента mPGES-1 (%), когда концентрация тестируемого препарата представляет собой E

Результаты показаны в таблице 2-1 - таблице 2-5.

[0365]

Таблица 2-1

Пример No.	ингибирующая активность фермента mPGES-1 человека (нM)
1	0,9
2	1,1
3	2,1
4	12
5	1,1
6	0,4
7	1,0
8	0,7
9	0,7
10	1,7
11	0,2
12	3,2
13	21
14	1,2
15	0,5
16	0,4
17	67
18	5,3
19	3,3
20	30
21	3,9
22	0,9
23	7,2
24	1,6
25	3,1
26	0,7
27	0,7
28	1,8
29	0,8
30	0,8

[0366]

Таблица 2-2

Пример No.	ингибирующая активность фермента mPGES-1 человека (нM)
31	1,0
32	0,7
33	0,8
34	1,6
35	2,0
36	5,8
37	3,0
38	2,9
39	3,9
40	0,8
41	1,3
42	1,3
43	3,5
44	3,6
45	1,3
46	3,2
47	2,1
48	0,5
49	0,5
50	0,5
51	0,6
52	1,1
53	0,4
54	0,5
55	1,9
56	0,7
57	2,9
58	1,0
59	0,3
60	0,4

[0367]

Таблица 2-3

Пример No.	ингибирующая активность фермента mPGES-1 человека (нM)
61	0,5
62	1,0
63	1,7
64	1,6
65	1,1
66	0,7
67	2,8
68	0,6
69	2,3
70	1,5
71	0,7
72	5,3
73	4,2
74	1,3
75	1,8
76	1,3
77	0,8
78	1,2
79	4,6
80	2,7
81	2,1
82	7,2
83	5,0
84	2,0
85	4,9
86	1,8
87	5,2
88	19
89	3,7
90	2,1

[0368]

Таблица 2-4

Пример No.	ингибирующая активность фермента mPGES-1 человека (нM)
91	4,6
92	0,5
93	1,3
94	1,0
95	1,9
96	0,8
97	3,8
98	1,2
99	1,7
100	0,9
101	2,1
102	1,1
103	2,4
104	5,4
105	1,5
106	3,6
107	2,6
108	2,4
109	3,2
110	3,7
111	1,5
112	3,3
113	1,8
114	3,1
115	1,3
116	1,2
117	1,6
118	0,4
119	1,8
120	1,8

[0369]

Таблица 2-5

Пример No.	ингибирующая активность фермента mPGES-1 человека (нM)
121	3,3
122	1,8
123	4,0
124	2,6
125	6,0
126	3,1
127	2,4
128	2,2
129	5,7
130	3,8
131	2,9
132	0,8
133	1,4
134	1,7
135	2,0
136	1,2
137	4,7
138	1,5
139	5,4
140	10
141	14
142	7,7
143	3,9
144	3,9
145	4,5

[0370]

Экспериментальный пример 2: Оценка ингибирующей активности продукции PGE2 с использованием клетки A549

Клетку A549 (Japan Health Sciences Foundation Research Resources Bank), которая представляет собой клеточну линию, полученную из рака легких человека, суспендировали в среде для количественного определения (Ham's F-12K (Wako, #080-08565), содержащей 2% FBS (Hyclone Laboratories, #SH30910.03), 100 единиц/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина (Invitrogen, #15140-122)), суспензию добавляли при 2,5×10⁴ клеток/100 мкл/лунку в 96-луночный планшет с плоским дном (Corning, #353072), и планшет оставляли стоять в течение 20 часов в CO₂-инкубаторе, установленном при 37°C. Тестируемый препарат последовательно разбавляли DMSO (Nacalai Tesque, #13407-45), и затем в 20 раз разбавляли средой для количественного определения для получения раствора тестируемого препарата, имеющего десятикратную концентрацию конечной концентрации. Конечную концентрацию DMSO во время реакции устанавливали при 0,5% (об./об.). Среду удаляли из планшета, в который добавляли клетку, добавляли новую среду для количественного определения при 160 мкл/лунку в планшет, и планшет оставляли стоять в течение 10 минут в СО₂-инкубаторе. Затем добавляли раствор тестируемого препарата на планшет при 20 мкл/лунку, и планшет оставляли стоять в течение 30 мин в CO₂-инкубаторе. Затем добавляли рекомбинантный IL-1β человека (R&D Systems, #201-LB) в качестве стимулятора для увеличения продуцирования PGE2 в результате увеличения экспрессии мРНК мРGES-1 при концентрации 20 мкл/лунку (конечная концентрация составляла 1 нг/мл) в планшет и планшет оставляли стоять в течение 18 часов в CO₂-инкубаторе. Супернатант собирали при 180 мкл/лунку и концентрацию PGE2 измеряли с использованием анализа простагландина E2 (Prostaglandin E2 assay) (CISbio Bioassays, № 62P2APEC) в соответствии с руководством. В качестве эталонного стандарта для аналитической кривой, использовали PGE2 (Cayman Chemical, #14010). Используя EnVision 2104 (Perkin Elmer), измеряли флуоресценцию с временным разрешением при 620 нм и 665 нм относительно возбуждающего света при 337 нм. Концентрация PGE2 была экстраполирована из аналитической кривой PGE2. Среднее значение концентраций PGE2 соответственно-обработанных лунок использовали в качестве данных.

Ингибирующую активность продукции PGE2 (%) тестируемого препарата рассчитывали в соответствии со следующей Формулой 3.

[Формула 3]

ингибирующая активность продукции PGE2 (%)=(PGE2_A-PGE2_X)/(PGE2_A-PGE2_B)×100

PGE2_A: концентрация PGE2 лунки, обработанной носителем

PGE2_B: концентрации PGE2 холостой лунки (без добавления рекомбинантного IL-1β человека)

PGE2_X: концентрация PGE2 лунки, обработанной тестируемым препаратом

Значение IC₅₀ (50% ингибирующая концентрация) тестируемого препарата рассчитывали в соответствии со следующей формулой 4

[Формула 4]

Значение IC₅₀₌10^{{log10(D/E)×(50-G)/(F-G)+log10(E)}}

D: концентрация тестируемого препарата, которая показывает активность не менее 50% ингибирования между двумя точками по 50% ингибированию

E: концентрация тестируемого препарата, которая показывает активность не более 50% ингибирования между двумя точками по 50% ингибированию

F: ингибирующая активность продукции PGE2 (%), когда концентрация тестируемого препарата представляет собой D

G: ингибирующая активность продукции PGE2 (%), когда концентрация тестируемого препарата представляет собой E

Результаты показаны в таблице 3-1 - таблице 3-5.

[0371]

Таблица 3-1

Пример No.	ингибирующая активность продукции PGE2 в клетке (мкM)
1	0,027
2	0,0086
3	0,027
4	0,0029
5	0,030
6	0,023
7	0,068
8	0,014
9	0,037
10	0,049
11	0,017
12	0,35
13	1,0
14	0,0047
15	0,12
16	0,034
17	1,3
18	0,26
19	0,0017
20	0,15
21	0,0022
22	0,016
23	0,0024
24	0,0082
25	0,0029
26	0,26
27	0,079
28	0,1
29	0,069
30	0,033

[0372]

Таблица 3-2

Пример No.	ингибирующая активность продукции PGE2 в клетке (мкM)
31	0,086
32	0,040
33	0,011
34	1,0
35	0,014
36	0,010
37	0,17
38	0,13
39	0,057
40	0,045
41	0,023
42	0,0079
43	0,0065
44	0,026
45	0,0080
46	0,0041
47	0,10
48	0,0027
49	0,0073
50	0,17
51	0,41
52	0,0060
53	0,0037
54	0,0029
55	0,0026
56	0,0026
57	0,0045
58	0,15
59	0,053
60	0,0083

[0373]

Таблица 3-3

Пример No.	ингибирующая активность продукции PGE2 в клетке (мкM)
61	0,079
62	0,050
63	0,014
64	0,0053
65	0,0097
66	0,0038
67	0,0039
68	0,011
69	0,0081
70	0,056
71	0,0034
72	0,0059
73	>0,03 (47%)
74	0,029
75	0,032
76	0,088
77	0,044
78	0,0092
79	0,0026
80	0,0020
81	0,0050
82	0,0022
83	0,0027
84	0,0060
85	0,0035
86	0,0021
87	0,0029
88	0,0016
89	0,0025
90	0,0039

[0374]

Таблица 3-4

Пример No.	ингибирующая активность продукции PGE2 в клетке (мкM)
91	0,0040
92	0,090
93	0,030
94	0,059
95	0,017
96	0,061
97	0,0090
98	0,043
99	0,011
100	0,043
101	0,0079
102	0,025
103	0,0065
104	0,0049
105	0,015
106	0,0050
107	0,0021
108	0,0024
109	0,0018
110	0,0027
111	0,054
112	0,024
113	0,095
114	0,013
115	0,0066
116	0,0072
117	0,0042
118	0,017
119	0,0030
120	>0,03 (43%)

[0375]

Таблица 3-5

Пример No.	ингибирующая активность продукции PGE2 в клетке (мкM)
121	0,0079
122	0,019
123	0,0015
124	0,0025
125	0,0016
126	0,0025
127	0,0009
128	0,0013
129	0,0022
130	0,0012
131	0,0019
132	0,0048
133	0,0024
134	0,019
135	0,0054
136	0,010
137	0,0026
138	0,0084
139	0,0021
140	0,0008
141	0,0038
142	0,0021
143	0,0016
144	0,0016
145	0,0017

[0376]

Экспериментальный пример 3: Оценка влияния на состав простагландина в водянистой влаге обезьяны Cynomolgus

Тестируемый препарат растворяли в физиологическом растворе, содержащем 0,5% полисорбат 80 (Fluka), для получения офтальмологического раствора (рН 7,0-8,0). Перед инстилляцией офтальмологического раствора тестируемого препарата, самцов обезьяны Cynomolgus анестезировали Escain (зарегистрированная торговая марка) ингаляционным анестетиком (Pfizer Inc., общее название изделия: изофлуран), роговица обоих глаз прокалывали инъекционной иглой 30G, соединенной с силиконовой катетерной трубкой, и собирали водянистую влагу. Сразу же после сбора водянистой влаги, носитель или офтальмологический раствор вводили один раз обезьяне Cynomolgus путем инстилляции (30 мкл на один глаз) с использованием микропипетки, и слезную часть слегка фиксировали, осторожно нажимая на нижнее веко в течение приблизительно 15 секунд. Через 5 мин в переднюю камеру вводили липополисахарид (ЛПС), и водянистую влагу собирали под анестезией. Противоположный глаз обрабатывали таким же образом. Концентрацию простагландинов в водянистой влаге измеряли с помощью системы ЖХ/МС/МС (ультра высокоэффективная жидкостная хроматография: Nexera (зарегистрированная торговая марка) производства Shimadzu Corporation, масс-спектрометр: QTRAP (зарегистрированная торговая марка) 5500 производства AB SCIEX), и рассчитывали отношение концентрации каждой концентрации простагландина относительно общего количества всех концентраций простагландина.

[0377]

Экспериментальный пример 4: Оценка действия ингибитора mPGES-1 на нормальное внутриглазное давление обезьяны Cynomolgus

Этот тест выполняли с использованием самцов обезьяны Cynomolgus.

[0378]

Для того, чтобы исключить влияние оставшегося тестируемого препарата, период вымывания 1-неделя был установлен между тестами. В день теста, обезьян кормили после окончательного измерения.

Тестируемый препарат растворяли в солевом растворе, содержащем 0,5% полисорбат 80 (Fluka), для получения офтальмологического раствора. Группе, получавшей носитель, вводили носитель (0,5% полисорбат-содержащий солевой раствор) способом, аналогичным для тестируемого препарата. В качестве контрольного препарата использовали ксалатан (зарегистрированная торговая марка), офтальмологический раствор 0,005% (Pfizer Inc., общее название: латанопрост). Тестируемый препарат вводили один раз инстилляцией (30 мкл на один глаз) с использованием микропипетки. Каждый из носителя и контрольного препарата вводили 1 раз инстилляцией. После инстилляции слезную часть слегка фиксировали, осторожно нажимая на нижнее веко в течение приблизительно 15 секунд. Противоположный глаз обрабатывали таким же образом. Внутриглазное давление измеряли непосредственно перед введением, и через 2, 4, 8, 12 и 24 часа после введения. Перед измерением внутриглазного давления, животное фиксировали на специальном стуле для обезьян, и анестезировали местно путем закапывания офтальмологического местного анестетика (Беноксил, (зарегистрированная торговая марка) офтальмологический раствор 0,4%, Santen Pharmaceutical Co., Ltd., общее название: оксибупрокаина гидрохлорид). Устанавливали векорасширитель (Handaya Co., Ltd), и измеряли внутриглазное давление обоих глаз с помощью пневматического аппланационного тонометра (Model30 Classic, Reichert Inc.).

Разница внутриглазного давления (Δмм рт.ст.; в первом знаке после запятой) от значения непосредственно перед введением определяли для каждого измерения глаза в каждый момент измерения, рассчитывали среднее для обоих глаз и принимали в качестве оценки данных индивида. Среднее значение и стандартное отклонение (в двух знаках после запятой) разности внутриглазного давления вычисляли для каждой группы.

[0379]

Экспериментальный пример 5: измерение растворимости

(1) Насыщенный буферный раствор Бриттона-Робинсона (pH 8,5)

Тестируемый препарат взвешивали в стеклянной микротрубке и диспергировали в буферном растворе Бриттона-Робинсона (pH 8.5, 1.5 мл) для приготовления суспензии. Суспензию встряхивали при 20°C в течение 18 часов, и фильтровали через мембранный фильтр (0,45 мкм), и фильтрат использовали в качестве образца.

(2) Буферный раствор Бриттона-Робинсона (pH 8,5), содержащий 0,5% масс./об. полисорбата 80

Тестируемый препарат взвешивали в стеклянной микротрубке и диспергировали в буферном растворе Бриттона-Робинсона (pH 8,5, 1,5 мл), содержащем 0,5% масс./об. полисорбата 80, для получения суспензии. Суспензию встряхивали при 20°C в течение 18 часов, и фильтровали через мембранный фильтр (0,45 мкм), и фильтрат использовали в качестве образца.

(3) Получение стандартного раствора и раствора образца, и измерение растворимости

Образец раствора получали соответствующим разбавлением образца смесью воды/ацетонитрила (1:1). Стандартный раствор получали путем точного взвешивания тестируемого препарата и затем разбавления тестируемый препарата смесью воды/ацетонитрила (1:1). Стандартный раствор и раствор образца анализировали с помощью жидкостной хроматографии, и содержание тестируемого препарата в растворе образца рассчитывали в соответствии с методом внешнего стандарта, на основании которого определяли растворимость.

Результаты показаны в таблице 4.

[0380]

Таблица 4

Пример No.	растворимость 0,5% полисорбата 80 (%) при pH 8,5
66	0,136
71	0,057
79	0,157
81	0,071
107	0,032
131	0,109

[0381]

Примеры составов по настоящему изобретению включают следующие составы. Тем не менее, настоящее изобретение не ограничивается такими примерами составов.

[0382]

Пример состава 1 (Получение капсулы)

1) соединение примера No. 48	30 мг
2) микрокристаллическая целлюлоза	10 мг
3) лактоза	19 мг
4) стеарат магния	1 мг

1), 2), 3) и 4) смешивали и наполняли желатиновую капсулу.

[0383]

Пример состава 2 (Получение таблетки)

1) соединение примера No. 48	10 г
2) лактоза	50 г
3) кукурузный крахмал	15 г
4) кармеллоза кальция	44 г
5) стеарат магния	1 г

Общее количество 1), 2), 3) и 30 г 4) замешивали с водой, сушили в вакууме и просеивают через сито. Просеянный порошок смешивали с 14 г 4) и 1 г 5), и смесь таблетировали с помощью таблетировочной машины. Таким образом, получали 1000 таблеток, содержащих 10 мг соединения примера No. 48 на таблетку.

[0384]

Пример состава 3 (получение глазных капель)

в 100 мл глазных капель

1) соединение примера No. 48	100 мг
2) полисорбат 80	500 мг
3) хлорид натрия	900 мг
4) гидроксид натрия	в достаточном количестве
5) стерильная очищенная вода	в достаточном количестве

Вышеуказанные компоненты смешивали в стерильных условиях с рН 7,9-8,1, с получением глазные капель.

[0385]

Пример состава 4 (получение глазных капель)

в 100 мл глазных капель

1) соединение примера No. 48	100 мг
2) полисорбат 80	100 мг
3) дигидрофосфат натрия дигидрат	100 мг
4) хлорид натрия	900 мг
5) бензалконий хлорид	5 мг
6) гидроксид натрия	в достаточном количестве
7) стерильная очищенная вода	в достаточном количестве

Вышеуказанные компоненты смешивали в стерильных условиях с рН 7,9-8,1, с получением глазные капель.

[0386]

Пример состава 5 (получение глазных капель)

в 100 мл глазных капель

1) соединение примера No. 48	100 мг
2) борная кислота	700 мг
3) бура	в достаточном количестве
4) хлорид натрия	500 мг
5) эдетат натрия	0,05 мг
6) бензалконий хлорид	0,0005 мг
7) стерильная очищенная вода	в достаточном количестве

Вышеуказанные компоненты смешивали в стерильных условиях с рН 7,9-8,1, с получением глазные капель.

Промышленная применимость

[0387]

Поскольку соединение по настоящему изобретению и его фармацевтически приемлемая соль, имеют ингибирующую активность mPGES-1, они могут обеспечить лекарственное средство, эффективное для профилактики или лечения боли, ревматизма, остеоартрита, лихорадки, болезни Альцгеймера, рассеянного склероза, атеросклероза, глаукомы, глазной гипертензии, ишемического заболевания сетчатки, системной склеродермии, рака, включая колоректальный рак, и/или заболеваний, для которых супрессия продукции PGE2 является эффективной.

1. Соединение формулы [I-c] или его фармацевтически приемлемая соль:

,

где

R¹ представляет собой

(1) формулу:

,

где

R^1a представляет собой C_1-4 алкил,

R^1b представляет собой C_1-4 алкил или трифторметил, и

R^1c представляет собой

(a) C_1-4 алкил,

(b) C_1-4 фторалкил,

(c) C_1-4 алкокси, или

(d) C_1-4 алкокси C_1-4 алкил, или

(2) формулу:

,

где

n равен 1, 2, 3, 4 или 5, и

R^1d представляет собой

(a) фтор,

(b) C_1-4 алкил,

(c) C_1-4 фторалкил,

(d) C_1-4 алкокси, или

(e) C_1-4 алкокси C_1-4 алкил,

R² представляет собой водород,

R⁶ представляет собой 1-метилбутил или н-гексил.

2. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п.1, где R¹ представляет собой формулу:

,

где

R^1a представляет собой C_1-4 алкил,

R^1b представляет собой C_1-4 алкил или трифторметил, и

R^1c представляет собой

(b) дифторметил или трифторметил, или

(c) метокси.

3. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п.1, где R¹ представляет собой формулу:

,

где

n равен 3, 4 или 5, и

R^1d представляет собой

(a) фтор,

(c) C_1-4 фторалкил,

(d) метокси, или

(e) метоксиметил.

4. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п.3, где

n равен 3 или 4, и

R^1d представляет собой монофторметил, дифторметил или трифторметил.

5. Соединение, выбранное из следующих формул:

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

6. Соединение следующей формулы:

или его фармацевтически приемлемая соль.

7. Соединение следующей формулы:

или его фармацевтически приемлемая соль.

8. Соединение следующей формулы:

или его фармацевтически приемлемая соль.

9. Фармацевтическая композиция, обладающая mPGES-1 ингибирующей активностью, содержащая эффективное количество соединение или фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-8, и фармацевтически приемлемый носитель.

10. Ингибитор mPGES-1, содержащий соединение или фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-8.

11. Способ ингибирования mPGES-1, включающий введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-8 человеку.

12. Применение соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-8 для получения ингибитора mPGES-1.