Применение комбинированного лечения на основе антитела к pd-1 и апатиниба для лечения трижды негативного рака молочной железы

Настоящее изобретение относится к биотехнологии, в частности к применению комбинированного лечения на основе антитела к PD-1 и апатиниба для лечения трижды негативного рака молочной железы. В частности, настоящее изобретение относится к применению антитела к PD-1 в комбинации с апатинибом в получении лекарственного средства против трижды негативного рака молочной железы. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 табл., 1 пр.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к применению антитела к PD-1 (от англ. programmed cell death protein 1 - белок програмируемой клеточной смерти 1) или его антигенсвязывающего фрагмента в комбинации с Апатинибом или его фармацевтически приемлемой солью в изготовлении лекарственного средства для лечения трижды негативного рака молочной железы.

Предшествующий уровень техники

Рак молочной железы является наиболее распространенной злокачественной опухолью, которая угрожает здоровью женщин, имеет самый высокий коэффициент частоты заболеваний среди онкологических заболеваний у женщин в Китае, и число случаев все еще находится на подъеме. Рак молочной железы представляет собой совокупность заболеваний, по меньшей мере может быть подразделен на четыре молекулярных подтипа: люминальный А, люминальный В, HER2-экспрессирующий и трижды негативный. На трижды негативный рак молочной железы приходится примерно 15% общих случаев рака молочной железы, и он характеризуется высокой частотой ранних рецидивов, высокой частотой отдаленных метастазов и неблагоприятным прогнозом. В отсутствии эффективных лекарственных средств таргетной терапии АВС3 в настоящее время только рекомендует низкотоксичную химиотерапию против трижды негативного рака молочной железы. Однако, во время лечения часто встречаются с невосприимчивостью к химиотерапии. Таким образом, нахождение эффективных лекарственных средств направленного действия для лечения трижды негативного рака молочной железы стало актуальной и сложной проблемой.

Апатиниб, низкомолекулярный ингибитор тирозинкиназы, раскрытый в WO 2005000232 A, высоко селективно конкурирует за АТФ-связывающий сайт с внутримолекулярным VEGFR-2 (от англ. vascular endothelial growth factor - фактор роста эндотелия сосудов), блокирует последующую сигнализацию, ингибирует неоваскуляризацию в опухоли и, в конечном итоге, достигает цели лечения опухолей. Структурная формула Апатиниба показана в Формуле (I):

В CN 101676267 A раскрыт целый ряд солей Апатиниба, таких как мезилат, гидрохлорид, малеат и т.п.Доклинические эксперименты на животных, раскрытые в CN 101675930 A, также показывают, что Апатиниб в комбинации с цитотоксическими лекарственными средствами (такими как оксалиплатин, 5-Fu, доцетаксел и доксорубицин) может значимо повышать свою эффективность.

За последние годы прорывного прогресса достигли в иммунотерапии опухолей. Целый ряд клинических исследований показал, что антитела к PD-1/PD-L1 демонстрируют значительную эффективность в случае большого количества распространенных солидных опухолей (таких как меланома, рак почки немелкоклеточный рак легкого и рак молочной железы), с частотой общего ответа (ORR - от англ. Overall Response Rate) примерно 10%-40% против разных солидных опухолей, и являются наиболее эффективными против злокачественной меланомы (примерно 36%-53%). В WO 2015085847 A раскрыто новое антитело к PD-1, которое в настоящее время проходит клинические испытания и показало некоторое противоопухолевое действие. Однако, лечение только лишь антителом к PD-1/PD-L1 не достигало хорошей эффективности в случае многих пациентов с трижды негативным раком молочной железы (Nanda R, Chow LQ, Dees EC et al. Pembrolizumab in Patients with Advanced Triple Negative Breast Cancer: Phase lb KEYNOTE-012 Study. J Clin Oncol 2016; 34: 2460-2467). Таким образом, важно найти лекарственные средства направленного действия, которые могли бы повысить эффективность антител к PD-1/PD-L1 при введении в комбинации с антителами.

Краткое изложение сущности изобретения

Согласно настоящему изобретению предложено применение Апатиниба или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с антителом к PD-1 или его антигенсвязывающим фрагментом в изготовлении лекарственного средства для лечения трижды негативного рака молочной железы.

Согласно настоящему изобретению также предложено применение антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента в изготовлении лекарственного средства для лечения трижды негативного рака молочной железы.

В том виде, в котором он используется в данном документе, термин «трижды негативный рак молочной железы» относится к раку молочной железы, который является негативным по всем из эстрогенового рецептора (ЭР), прогестеронового рецептора (ПР) и протоонкогена Her-2.

В предпочтительном воплощении изобретения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент выбрано из группы, состоящей из АМР-224, GLS-010, IBI-308, REGN-2810, PDR-001, BGB-A317, Пидилизумаба, PF-06801591, Генолимзумаба, СА-170, MEDI-0680, JS-001, TSR-042, Камрелизумаба, Пембролизумаба, LZM-009, AK-103 и Ниволумаба.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения вариабельная область легкой цепи антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента содержит LCDR1, LCDR2 и LCDR3, как показано в SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6, соответственно; и вариабельная область тяжелой цепи содержит HCDR1, HCDR2 и HCDR3, как показано в SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3, соответственно.

Каждая последовательность CDR (от англ. complementary determining region -область, определяющая комплементарность), описанная выше, показана в следующей таблице:

Предпочтительно, антитело к PD-1 представляет собой гуманизированное антитело.

Предпочтительно, последовательность вариабельной области легкой цепи гуманизированного антитела показана в SEQ ID NO: 10 или ее варианте; предпочтительно, указанный вариант имеет 0-10 аминокислотных замен в вариабельной области легкой цепи. Более предпочтительно, аминокислотная замена представляет собой A43S. Последовательность вариабельной области тяжелой цепи гуманизированного антитела показана в SEQ ID NO: 9 или ее варианте; предпочтительно указанный вариант имеет 0-10 аминокислотных замен в вариабельной области тяжелой цепи. Более предпочтительно, аминокислотная замена представляет собой G44R.

Последовательности вариабельных областей тяжелой и легкой цепей гуманизированного антитела выглядят следующим образом:

Вариабельная область тяжелой цепи

Вариабельная область легкой цепи

Предпочтительная последовательность легкой цепи гуманизированного антитела показана в SEQ ID NO: 8 или ее варианте. Предпочтительно, указанный вариант имеет 0-10 аминокислотных замен в вариабельной области легкой цепи. Более предпочтительно, аминокислотная замена представляет собой A43S. Последовательность тяжелой цепи гуманизированного антитела показана в SEQ ID NO: 7 или ее варианте. Предпочтительно, указанный вариант имеет 0-10 аминокислотных замен в вариабельной области тяжелой цепи. Более предпочтительно, аминокислотная замена представляет собой G44R.

В предпочтительном воплощении изобретения последовательность легкой цепи гуманизированного антитела показана в SEQ ID NO: 8, и последовательность тяжелой цепи показана в SEQ ID NO: 7.

Последовательности тяжелой и легкой цепей гуманизированного антитела выглядят следующим образом:

Тяжелая цепь

Легкая цепь

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения пациент с трижды негативным раком молочной железы представляет собой пациента, у которого химиотерапия оказалась неудачной или который не переносит химиотерапию.

В предпочтительном воплощении изобретения химиотерапевтическое средство представляет собой одно или более, выбранных из группы, состоящей из антрациклинов, таксанов, винорелбина, капецитабина, гемцитабина и лекарственных средств на основе платины.

Антрациклины по настоящему изобретению включают доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, даунорубицин и их производные и т.п.

Таксаны по настоящему изобретению включают паклитаксел, доцетаксел, паклитаксел, липосомы, паклитаксел, связанный с альбумином, и т.п.

Лекарственные средства на основе платины по настоящему изобретению включают карбоплатин, цисплатин, оксаплатин, Недаплатин, лобаплатин, сатраплатин, циклоплатин, Мибоплатин, Эндоплатин, Ипроплатин, Дициклоплатин и т.п.

В предпочтительном воплощении изобретения доза антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента составляет от 1 до 10 мг/кг, предпочтительно составляет 1 мг/кг, 2 мг/кг, 3 мг/кг, 4 мг/кг, 5 мг/кг, 6 мг/кг, 7 мг/кг, 8 мг/кг, 9 мг/кг или 10 мг/кг, более предпочтительно составляет 1 мг/кг, 3 мг/кг, 4 мг/кг, 5 мг/кг, 6 мг/кг или 10 мг/кг.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения, где доза антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента составляет от 50 до 600 мг, предпочтительно составляет 50 мг, 60 мг, 70 мг, 75 мг, 100 мг, 125 мг, 150 мг, 175 мг, 200 мг, 225 мг, 250 мг, 375 мг, 400 мг, 425 мг, 450 мг, 475 мг, 500 мг или 600 мг, более предпочтительно составляет 60 мг, 100 мг, 200 мг, 400 мг или 600 мг.

В предпочтительном воплощении изобретения, где доза Апатиниба или его фармацевтически приемлемой соли составляет от 100 до 500 мг, предпочтительно составляет 100 мг, 125 мг, 150 мг, 175 мг, 200 мг, 225 мг, 250 мг, 275 мг, 300 мг, 325 мг, 350 мг, 375 мг, 400 мг или 500 мг, более предпочтительно представляет собой 200 мг, 225 мг, 250 мг, 275 мг, 300 мг, 325 мг, 350 мг или 375 мг.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят с частотой один раз в неделю, один раз в две недели, один раз в три недели или один раз в месяц, и Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят с частотой один раз в сутки, один раз в двое суток, один раз в трое суток, 5 суток введения и 2 суток отмены или 7 суток введения и 7 суток отмены.

В том виде, в котором она используется в данном документе, фраза «в комбинации с» относится к способу введения, в частности, она относится к введению по меньшей мере одной дозы Апатиниба и по меньшей мере одной дозы антитела к PD-1 на протяжении периода времени, при котором оба вещества демонстрируют фармакологическое действие. Период времени может находиться в пределах одного цикла введения, предпочтительно в пределах 4 недель, в пределах 3 недель, в пределах 2 недель, в пределах 1 недели или в пределах 24 часов, более предпочтительно в пределах 12 часов. Апатиниб и антитело к PD-1 могут быть введены одновременно или последовательно. Следующее лечение охватывают такие периоды: Апатиниб и антитело к PD-1 вводят посредством одного и того же пути введения или посредством разных путей введения. Способ совместного введения, описанный в данном документе, выбран из группы, состоящей из одновременного введения, совместного введения независимых композиций и последовательного введения независимых композиций. Путь совместного введения, описанный в данном документе, выбран из группы, состоящей из перорального введения, парентерального введения и трансдермального введения, парентеральное введение включает внутривенную инъекцию, подкожную инъекцию и внутримышечную инъекцию, но не ограничивается ими.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения во время введения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в количестве 60-600 мг, посредством внутривенной инфузии, один раз в одну-три недели; Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве 250 мг - 500 мг, перорально один раз в одни-двое суток.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения во время введения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в количестве 60-600 мг, посредством внутривенной инфузии, один раз в одну-три недели; Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве 250 мг - 500 мг, перорально, 5 суток введения и 2 суток отмены.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения во время введения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в количестве 60-600 мг, посредством внутривенной инфузии, один раз в одну-три недели; Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве 250 мг - 500 мг, перорально, 7 суток введения и 7 суток отмены.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения во время введения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в количестве 200 мг, посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели; Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве 375 мг, перорально, один раз в сутки.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения во время введения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в количестве 200 мг, посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели; Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве 375 мг, перорально, 5 суток введения и 2 суток отмены.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения во время введения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в количестве 200 мг, посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели; Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве 375 мг, перорально, 7 суток введения и 7 суток отмены.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения во время введения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в количестве 200 мг, посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели; Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве 250 мг, перорально, один раз в сутки.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения во время введения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в количестве 200 мг, посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели; Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве 250 мг, перорально, 5 суток введения и 2 суток отмены.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения во время введения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в количестве 200 мг, посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели;

Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль вводят в количестве 250 мг, перорально, 7 суток введения и 7 суток отмены.

В предпочтительном воплощении изобретения антитело к PD-1 водят посредством инъекции, например, подкожной или внутривенной инъекции, и антитело к PD-1 должно быть приготовлено в виде инъецируемой формы перед инъекцией. Особенно предпочтительная инъецируемая форма антитела к PD-1 представляет собой раствор для инъекции или лиофилизированный порошок для инъекции, содержащий антитело к PD-1, буфер, стабилизатор и возможно поверхностно-активное вещество. Буфер может представлять собой один или более, выбранных из группы, состоящей из ацетата, цитрата, сукцината и фосфата. Стабилизатор может представлять собой сахариды или аминокислоты, предпочтительно дисахариды, такие как сахароза, лактоза, трегалоза, мальтоза. Поверхностно-активное вещество выбрано из группы, состоящей из полиоксиэтилен гидрогенизированного касторового масла, сложных эфиров глицерина и жирных кислот и сложных полиоксиэтиленовых эфиров сорбитана и жирных кислот, предпочтительно полиоксиэтиленовые сложные эфиров сорбитана и жирных кислот представляют собой полисорбат 20, 40, 60 или 80, наиболее предпочтительно полисорбат 20. Наиболее предпочтительно, инъецируемая форма антитела к PD-1 включает антитело к PD-1, ацетатный буфер, трегалозу и полисорбат 20.

Согласно настоящему изобретению предложено антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент, как описано выше, в комбинации с Апатинибом или его фармацевтически приемлемой солью в качестве лекарственного средства для уменьшения неблагоприятных воздействий лекарственного средства, причем неблагоприятные воздействия вызваны антителом к PD-1 или его антигенсвязывающим фрагментом или Апатинибом или его фармацевтически приемлемой солью.

В предпочтительном воплощении настоящего изобретения неблагоприятные воздействия лекарственного средства, опосредованные антителом к PD-1 или антигенсвязывающим фрагментом и/или иммунитетом, могут быть уменьшены, когда антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент используют в комбинации с Апатинибом или его фармацевтически приемлемой солью; Предпочтительно, неблагоприятное воздействие представляет собой неблагоприятное воздействие, связанное с сосудами.

Согласно настоящему изобретению также предложен фармацевтический набор или фармацевтическая упаковка, содержащая указанное выше антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент и указанный выше Апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль.

Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения трижды негативного рака молочной железы, включающий введение пациенту указанного выше антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента и указанного выше Апатиниба или его фармацевтически приемлемой соли.

Согласно настоящему изобретению также предложена фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента и Апатиниба или его фармацевтически приемлемой соли, как описано выше, и одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, разбавителей или носителей.

Подробное описание Терминология

Для более легкого понимания изобретения некоторые технические и научные термины конкретно определены ниже. Все другие технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют значения, обычно подразумеваемые одним из рядовых специалистов в области, к которой принадлежит данное изобретение, если не является очевидным, что они имеют четкие определения в данном документе,

Термин «гуманизированное антитело», также известное как антитело с привитыми CDR (CDR-привитое антитело), относится к антителу, полученному посредством прививания мышиных последовательностей CDR в каркасы вариабельных областей человеческого антитела, а именно, полученному в разных типах последовательностей каркаса антитела зародышевой линии человека. Такие гуманизированные антитела могут преодолевать сильные ответы на антитела, вызываемые большими количествами мышиных белковых компонентов, которых несут химерные антитела. Такие последовательности каркаса могут быть получены из общедоступных баз данных ДНК или опубликованных референсных последовательностей, включая нуклеотидные последовательности антител зародышевой линии. Например, ДНК-последовательности вариабельных областей тяжелой и легкой цепей зародышевой линии человека могут быть найдены в «VBase», базе данных последовательностей зародышевой линии человека (доступной в интернете на веб-сайте www.mrccpe.com.ac.uk/vbase), и в Kabat, ЕА, et al, 1991 Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. В предпочтительном воплощении изобретения последовательности CDR гуманизированного антитела к PD-1 выбраны из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5 и 6.

Термин «антигенсвязывающий фрагмент» относится к Fab фрагменту, Fab' фрагменту и F(ab')2 фрагменту, обладающему антигенсвязывающей активностью, а также Fv фрагменту и sFv фрагменту, который связывается с человеческим PD-1. «Антигенсвязывающий фрагмент» содержит одну или более CDR областей, выбранных из SEQ ID NO: 1 - SEQ ID NO: 6 антитела по изобретению. Fv фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи антитела и вариабельную область легкой цепи, без константной области, и представляет собой минимальный фрагмент антитела со всеми антигенсвязывающими сайтами. Обычно, Fv антитело также содержит полипептидный линкер между VH и VL доменами, способный образовывать структуру, требуемую для связывания антигена. Две вариабельные области антитела также могут быть соединены разными линкерами с образованием полипептидной цепи, называемой одноцепочечным антителом или одноцепочечным Fv (sFv). Термин «связывающийся с PD-1», в том виде, в котором он используется в данном документе, означает способный взаимодействовать с человеческим PD-1. Термин «антигенсвязывающие сайты», в том виде, в котором он используется в настоящем изобретении, относится к отдельным трехмерным сайтам на антигене, распознаваемым антителом или антигенсвязывающим фрагментом по настоящему изобретению.

В том виде, в котором он используется в данном документе, термин «лечение оказалось неудачным» означает, что субъект имеет измеримый опухолевый очаг поражения на исходном уровне, и относится к прогрессирующему заболеванию (PD - от англ. progressive disease) или непереносимому в соответствии с критериями оценки эффективности RECIST 1.1 (от англ. Response Evaluation Criteria in Solid Tumors - Критерии оценки ответа солидных опухолей).

Термин «непереносимый», в том виде, в котором он используется в данном документе, означает, что лечение нельзя продолжать вследствие неблагоприятных воздействий, обусловленных лекарственным средством.

Общая выживаемость (OS - от англ. overall survival) относится к времени от момента начала исследования до смерти по любой причине. Для субъектов, которые все еще были живы на момент последнего наблюдения, OS регистрировали как цензурированные данные на момент времени последнего наблюдения. Для субъектов, которые выбыли из наблюдения, OS регистрировали как цензурированные данные в момент времени последнего подтверждения выживаемости, перед выбыванием из наблюдения. OS с цензурированными данными определяется как период от случайного распределения по группам до цензурирования данных.

Частота объективного ответа (ORR - от англ. objective response rate) относится к доли пациентов, чьи опухоли уменьшены до определенной степени и удерживаются на уровне на протяжении определенного периода времени, включая случаи CR и PR. Объективный ответ опухоли оценивается в соответствии с критериями оценки ответа опухолей (критерии RECIST 1.1). Субъекты должны иметь измеримые опухолевые очаги поражения на исходном уровне, и эффективность классифицировали как полный ответ (CR - от англ. complete response), частичный ответ (PR - от англ. partial response), стабильное заболевание (SD - от англ. stable disease) и прогрессирующее заболевание (PD) в соответствии с критериями RECIST 1.1.

Частота контроля заболевания (DCR - от англ. Disease Control Rate) относится к проценту пациентов, у которых подтвержден полный ответ, частичный ответ и стабильное заболевание (8 недель или больше) у пациентов, для которых эффективность поддается оценке.

Полный ответ (CR): все целевые очаги поражения исчезают и все паталогические лимфатические узлы (включая целевые и нецелевые узелки) имеют размер по короткой оси меньше чем 10 мм.

Частичный ответ (PR): сумма диаметров целевых очагов поражений уменьшается по меньшей мере на 30%, по сравнению с исходным уровнем.

Прогрессирующее заболевание (PD): минимальное значение суммы диаметров всех измеренных целевых очагов поражений во время экспериментального исследования используют в качестве референса, сумма диаметров относительно увеличивается по меньшей мере на 20% (значение, измеренное на исходном уровне, будет использоваться в качестве референса, если будет минимальным); Кроме того, абсолютное значение суммы диаметров должно увеличиваться по меньшей мере на 5 мм (развитие одного или более новых очагов поражения также считается прогрессирующим заболеванием).

Стабильное заболевание (SD): степень уменьшения целевых очагов поражения не соответствует PR, и степень увеличения не соответствует PD. SD занимает промежуточное положение между PR и PD. Минимальное значение суммы диаметров можно использовать в качестве референса.

Описание графических материалов

На Фиг. 1 показаны изменения в значениях диаметра целевых очагов поражения между группой непрерывного введения Апатиниба и исходным уровнем.

На Фиг. 2 показаны изменения в значениях диаметра целевых очагов поражения между группой Апатиниба (7 суток введения и 7 суток отмены) и исходным уровнем.

Подробное описание раскрытия

Изобретение дополнительно описано ниже в рамках примеров, но данные примеры не предназначены для ограничения объема изобретения.

Пример 1: Клиническое исследование антитела к PD-1 в комбинации с мезилатом Апатиниба в отношении лечения трижды негативного рака молочной железы

1. Антитела и соединения, подлежащие анализу

Антитело к PD-1 имеет тяжелую цепь и легкую цепь, как показано в SEQ ID NO: 7 и SEQ ID NO: 8 в настоящем изобретении. 20 мг/мл антитела к PD-1 получали из 200 мг/флакон для применения.

Таблетки мезилата Апатиниба имеются в продаже.

2. Критерии отбора: (1) Рецидивирующий и метастатический трижды негативный рак молочной железы патологически подтверждали (ER - негативный (процент ER-позитивных, в соответствии с IHC (от англ. immunohistochemistry -иммуногистохимия), меньше 1%), PR-негативный (процент PR-позитивных, в соответствии с IHC, меньше 1%), HER2-негативный (IHC-/+ или IHC++, но FISH (от англ. fluorescence in situ hybridization - флуоресцентная гибридизация in s/Ya)/CISH (от англ. Chromogenic in situ hybridization - Хромогенная гибридизация in situ)-); (2) Пациентов лечили антрациклинами и таксанами, но лечение оказалось неудачным. В фазе рецидива и метастазирования используемых курсов химиотерапии меньше 3 курсов; (3) Пациенты имеют измеримые очаги поражения; (4) Балл по шкале ECOG составляет 0-1.

3. Иллюстративные схемы дозирования антитела к PD-1 и Апатиниба выглядят следующим образом:

200 мг антитела к PD-1, вводимые посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели плюс 375 мг Апатиниба, перорально, один раз в сутки;

200 мг антитела к PD-1, вводимые посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели плюс 375 мг Апатиниба, перорально, 7 суток введения и 7 суток отмены;

200 мг антитела к PD-1, вводимые посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели плюс 250 мг Апатиниба, перорально, один раз в сутки;

200 мг антитела к PD-1, вводимые посредством внутривенной инфузии, один раз в две недели плюс 250 мг Апатиниба, перорально, 7 суток введения и 7 суток отмены.

4. Схема дозирования

Антитело к PD-1 вводили внутривенно в фиксированной дозе 200 мг, посредством внутривенного капельного введения на протяжении 30 мин (не меньше чем 20 мин, не больше чем 60 мин), один раз в 2 недели, за цикл из 4-х недель, с максимальной продолжительностью введения 2 года.

Апатиниб вводили перорально после еды, один раз в сутки, по одной таблетки каждый раз (250 мг/таблетка или 375 мг/таблетка), 7 суток введения, 7 или 14 суток отмены.

5. Регулирование дозировки

Исходя из токсичных и неблагоприятных воздействий исследуемого лекарственного средства, дозирование исследуемых лекарственны средств может быть приостановлено, снижено и прекращено во время исследования.

Допускали приостановку введения антитела к PD-1 во время исследования на вплоть до 8 недель; когда введение антитела к PD-1 откладывали на более чем 3 суток, введения не осуществляли для текущей точки, и дозу 200 мг вводили до следующего момента введения, по схеме.

Помимо приостановки дозирования, доза антитела к PD-1 может быть снижена до 3 мг/кг, один раз в две недели, для субъектов с недостаточной массой тела.

Из-за токсичности, связанной с Апатинибом, регулирование дозировки включало: приостановку дозирования (не больше чем на 28 суток), снижение дозы (375 мг/сут дозовая группа) и прекращение дозирования. Допускали только снижение дозы Апатиниба во время исследования, и доза Апатиниба может быть снижена с 375 мг/сут до 250 мг/сут. Однако, повышение дозы Апатиниба не допускалось. Когда наблюдали токсичность, связанную с Апатинибом, введение, сперва, должно было быть приостановлено, и затем вводили исходную дозу, снижали дозу или прекращали введение, в зависимости от восстановления от токсичности. После прекращения введения Апатиниба, можно продолжать монотерапию на основе введения субъекту антитела против PD-1.

6. Результаты

Две группы пациентов получали 200 мг антитела к PD-1, в.в. (внутривенно), один раз в две недели; 250 мг Апатиниба, ежесуточно, перорально; и антитело к PD-1, в.в., один раз в две недели; 250 мг Апатиниба, введенных за цикл из 14 суток (включая 7 суток введения, 7 суток отмены), соответственно. Набирали 19 пациентов, 10 пациентов получали непрерывное введение, и 9 пациентам осуществляли введение на протяжении 7 суток с 7 сутками отмены. Оценке поддавались семнадцать пациентов, из которых восемь пациентов находились в группе непрерывного введения, и девять пациентов находились в группе 7 суток введения плюс 7 суток отмены. Первую оценку эффективности проводили в группе непрерывного введения, где PR: 3 пациента, SD: 2 пациента, PD 3 пациента, ORR составляла 37,5%, DCR составляла 62,5%; Как и в случае группы 7 суток введения плюс 7 суток отмены, где SD: 4 пациентов, PD: 5 пациентов, ORR составляла 0%, DCR составляла 44,4%.

Некоторых субъектов впоследствии набирали до общего количества 23 пациента, со следующими результатами:

Совместное введение антитела к PD-1 и Апатиниба в настоящем изобретении являлось переносимым и безопасным у субъектов с трижды негативным раком молочной железы. Большинство субъектов прекращало лечение из-за прогрессирующего заболевания. Капиллярной гемангиомы в группе непрерывного введения по существу не наблюдали, что значимо лучше числа случаев капиллярной гемангиомы, встречающихся при монотерапии на основе антитела к PD-1, используемой на фазе I клинического исследования.

1. Применение антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента в комбинации с апатинибом или его фармацевтически приемлемой солью в изготовлении лекарственного средства для лечения трижды негативного рака молочной железы, где вариабельная область легкой цепи антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента содержит LCDR1, LCDR2 и LCDR3, как показано в SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6, соответственно, и вариабельная область тяжелой цепи антитела к PD-1 содержит HCDR1, HCDR2 и HCDR3, как показано в SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3, соответственно.

2. Применение по п. 1, где антитело к PD-1 представляет собой гуманизированное антитело.

3. Применение по п. 2, где последовательность вариабельной области легкой цепи гуманизированного антитела показана в SEQ ID NO: 10 или ее варианте, при этом, предпочтительно, указанный вариант имеет 0-10 аминокислотных замен в вариабельной области легкой цепи, причем, более предпочтительно, аминокислотная замена представляет собой A43S; последовательность вариабельной области тяжелой цепи показана в SEQ ID NO: 9 или ее варианте, при этом, предпочтительно, указанный вариант имеет 0-10 аминокислотных замен в вариабельной области тяжелой цепи, причем, более предпочтительно, аминокислотная замена представляет собой G44R.

4. Применение по п. 3, где последовательность легкой цепи гуманизированного антитела показана в SEQ ID NO: 8 или ее варианте, при этом, предпочтительно, указанный вариант имеет 0-10 аминокислотных замен в вариабельной области легкой цепи, причем, более предпочтительно, аминокислотная замена представляет собой A43S; последовательность тяжелой цепи показана в SEQ ID NO: 7 или ее варианте, при этом, предпочтительно, указанный вариант имеет 0-10 аминокислотных замен в вариабельной области тяжелой цепи, причем, более предпочтительно, аминокислотная замена представляет собой G44R.

5. Применение по п. 4, где последовательность легкой цепи гуманизированного антитела показана в SEQ ID NO: 8, и последовательность тяжелой цепи показана в SEQ ID NO: 7.

6. Применение по любому из пп. 1-5, где химиотерапия оказалась неудачной в лечении трижды негативного рака молочной железы.

7. Применение по п. 6, где химиотерапевтическое средство представляет собой одно или более, выбранных из группы, состоящей из антрациклинов, таксанов, винорелбина, капецитабина, гемцитабина и лекарственных средств на основе платины.

8. Применение по любому из пп. 1-7, где доза антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента составляет от 1 до 10 мг/кг, предпочтительно составляет 1 мг/кг, 2 мг/кг, 3 мг/кг, 4 мг/кг, 5 мг/кг, 6 мг/кг, 7 мг/кг, 8 мг/кг, 9 мг/кг или 10 мг/кг, более предпочтительно составляет 1 мг/кг, 3 мг/кг, 4 мг/кг, 5 мг/кг, 6 мг/кг или 10 мг/кг.

9. Применение по любому из пп. 1-7, где доза антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента составляет от 50 до 600 мг, предпочтительно составляет 50 мг, 60 мг, 70 мг, 75 мг, 100 мг, 125 мг, 150 мг, 175 мг, 200 мг, 225 мг, 250 мг, 375 мг, 400 мг, 425 мг, 450 мг, 475 мг, 500 мг или 600 мг, более предпочтительно составляет 60 мг, 100 мг, 200 мг, 400 мг или 600 мг.

10. Применение по любому из пп. 1-7, где доза апатиниба или его фармацевтически приемлемой соли составляет от 100 до 500 мг, предпочтительно составляет 100 мг, 125 мг, 150 мг, 175 мг, 200 мг, 225 мг, 250 мг, 275 мг, 300 мг, 325 мг, 350 мг, 375 мг, 400 мг или 500 мг, более предпочтительно составляет 200 мг, 225 мг, 250 мг, 275 мг, 300 мг, 325 мг, 350 мг или 375 мг.

11. Фармацевтическая упаковка для применения в лечении трижды негативного рака молочной железы, содержащая апатиниб или его фармацевтически приемлемую соль и антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-10.

12. Фармацевтическая композиция для применения в лечении трижды негативного рака молочной железы, содержащая эффективное количество антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента и апатиниба или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-10, и один или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, разбавителей или носителей.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, в частности к фармакогенетике, и предназначено для выбора стартовых обезболивающих лекарственных препаратов в послеоперационном периоде после кардиохирургических вмешательств. Определяют полиморфизм rs1057910 гена CYP2C9.

Изобретение относится к области медицинской паразитологии, ветеринарии, биотехнологии. Описан способ диагностики возбудителей дирофиляриоза, включающий ПЦР в режиме реального времени с помощью предлагаемых праймеров, специфичных для каждого вида дирофилярий и состоящих из двух пар видовых праймеров: для Dirofilaria repens (F2690DR) 5’- АAGTGTTGATGGTCAACCTGAA-3’ (R2812DR) 5’- GTAGAACGCATATTCTGAGT-3’ для Dirofilaria immitis(F2690DI) 5’- GAGTGTAGAGGGTCAGCCTGAG-3’(R2812DI) 5’- GTAGAACGTATATTCTGAAC- 3’.Выявление осуществляют автоматически в ходе проведения ПЦР на мониторе компьютера в виде кривых и в численных значениях, отражающих накопление продуктов амплификации специфичных для D.

Заявленное изобретение относится к способу определения интегральной антибиотикорезистентности микроорганизмов после воздействия условий космического полета, включающему расчет показателей антибиотикорезистентности АР по формуле АР=С×Д×П×(М+К), где К – Конъюгация, М – Мобилизация, Д - Детерминанты в трансконъюгантах, П - Приоритетность колонизации, С - Относительная концентрация, с последующим определением интегральной величины антибиотикорезистентности микроорганизмов всех выделенных культур путем раздельного суммирования величин антибиотикорезистентности каждой из культур до и после условий космического полета, а оценку влияния внешних условий на интегральную антибиотикорезистентность (ИАР) микроорганизмов производят путем сравнения полученных интегральных величин антибиотикорезистентности микрорганизмов до и после воздействия условий космического полета, и при снижении или повышении этого интегрального показателя после воздействия условий космического полета выносят суждение соответственно об уменьшении или увеличении интегральной антибиотикорезистентности микроорганизмов.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии, в частности способу мониторинга нагрузки по меньшей мере одним патогеном в популяции птиц, при этом способ включает следующие стадии: отбор и объединение материала образцов экскрементов, полученных от популяции птиц; гомогенизацию материала объединенного образца, полученного на стадии (a); разбавление и необязательно стабилизацию материала объединенного образца, полученного на стадии (b), с использованием водного буферного раствора; лизирование клеточного материала, содержащегося в разбавленном материале образца, полученном на стадии (c); выделение материала, представляющего собой нуклеиновые кислоты, из лизированного материала образца, полученного на стадии (d); выявление и количественное определение по меньшей мере одного патогенспецифического целевого гена или его функционального фрагмента, содержащегося в изоляте нуклеиновых кислот, полученном на стадии (e); повторение стадий (a)–(f) через последовательные промежутки времени и отслеживание изменений количества по меньшей мере одного патогенспецифического целевого гена с течением времени.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены варианты способа получения библиотеки для секвенирования, содержащей нуклеиновые кислоты, происходящие из множества отдельных ядер или клеток.
Изобретение относится к области медицины. Предложен способ преимплантационного генетического тестирования семейной гипертрофической кардиомиопатии, предусматривающий выявление наследования патогенного варианта NC_000011.9:g.19209773C>A, NM_003476.5:c.191G>T, p.Arg64Leu в гене CSRP3.

Изобретение относится к идентификации микроорганизмов. Предложен способ определения наличия или отсутствия микроорганизма в матрице пищевых продуктов.

Изобретение относится к области медицины, онкологии, в частности гематологии. Предложен пул олигонуклеотидных праймеров для специфической амплификации шести микросателлитных локусов интронов гена SESN1, который может быть использован в тест-системе для определения делеций гена SESN1 методом мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР), а также в способе выявления пациентов с неблагоприятным течением фолликулярной лимфомы по наличию значимых делеций гена SESN1 с помощью вышеупомянутой тест-системы.

Изобретение относится к области молекулярной биологии, вирусологии и биотехнологии. Описана тест-система для выявления SARS-CoV линии Омикрон методом одношаговой полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией.
Изобретение относится к области медицины, в частности к терапии и кардиологии, и предназначено для диагностики степени тяжести хронической сердечной недостаточности. Исследуют генотипы полиморфизма rs1799998 гена CYP11B2 при хронической сердечной недостаточности с нарушениями диастолической функции левого желудочка.

Изобретение относится к сельскому хозяйству и биотехнологии и может быть использовано в генетике и селекции пшеницы. Предложен внутригенный ДНК-маркер для отбора сортов пшеницы с повышенным содержанием антоцианов в перикарпе зерновки, синтез которых контролируется генами Рр3 и Рр-1.
Наверх