Способ получения безводной аморфной формы n-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида

Изобретение относится к способу получения безводной аморфной формы N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида, характеризующейся температурой стеклования 198,9°С±3,0°С и ИК-спектром (метод МНПВО), содержащим характерные пики при частоте около 3251,98 и 3188,22 см^-1. Способ включает стадии (а) растворения кристаллического N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида в расплаве фруктозы, лактозы моногидрата и мочевины с массовым соотношением компонентов приблизительно 50:7:40 при температуре приблизительно 60-65°С; (б) охлаждения полученного расплава путем смешивания с холодной водой; (в) выделения аморфной формы N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида фильтрованием. Технический результат - получение безводной аморфной формы дазатиниба, характеризующийся улучшенной масштабируемостью, повышенным выходом целевого продукта, отсутствием зависимости от кристаллической формы исходного сырья, сниженной энергозатратностью и отсутствием специфических требований к оборудованию для интенсивной микронизации субстанции. 6 ил., 2 табл., 5 пр.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к безводной аморфной форме N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкар-боксамида (международное непатентованное название - дазатиниб), способу её получения и применения в фармацевтических композициях, которые могут быть использованы для лечения иммунологических и онкологических заболеваний.

Уровень техники

Аморфное состояние вещества отличается от кристаллического отсутствием дальнего порядка взаимного расположения молекул, более высокой внутренней энергией, большим межмолекулярным расстоянием. Способность химических соединений существовать в нескольких аморфных формах называют полиаморфизмом. В термодинамически строгом смысле под этим следует понимать возможное существование двух аморфных фаз, между которыми имеется четкий фазовый переход. Вместе с тем, известно большое число случаев, когда аморфное вещество не подходит под это определение. Так, стекловидные материалы находятся в термодинамически неравновесном состоянии, но при этом могут оставаться стабильными в течение длительного времени при температурах ниже точки стеклования. Хэнкок и др. предложили для таких случаев термин «псевдополиаморфизм» [J. Pharm. Pharmacol. 2002, 54 (8), 1151-2], который используется в научной литературе довольно редко. Чтобы избежать путаницы в терминологии, далее по тексту мы будем считать аморфные формы одного вещества разными, если эти формы заметно отличаются своими физическими характеристиками.

Аморфные лекарственные субстанции широко используются в фармацевтической технологии. Основным недостатком аморфных субстанций, в большинстве случаев, является низкая стабильность. Не всегда проблему стабильности субстанции в составе готовой лекарственной формы удаётся решить при помощи вспомогательных веществ, таких как поливинилпирролидон.

Полиаморфизм, как явление, пока остаётся малоизученным для подавляющего большинства химических соединений, особенно органических. Истинный полиаморфизм описан лишь для немногих лекарственных веществ, таких как аcпирин [CrystEngComm, 2015, 17, 9029–9036], и вспомогательных фармацевтических ингредиентов, таких как D-маннит [J. Chem. Phys., 2017, 146, 244503]. В настоящий момент отсутствуют какие-либо нормативные требования или рекомендации по выбору физических методов для надёжного описания лекарственных полиаморфов и различения их между собой. Изучение полиаморфизма органических соединений является актуальной задачей современной науки, а создание новых аморфных форм для известных веществ, обладающих улучшенными технологическими, фармакологическими и иными свойствами, представляет собой важное техническое достижение. Отдельным случаем является так называемая “слабо закристаллизованная” форма вещества. В качестве примера слабо закристаллизованной формы можно указать на цефамандола нафат, для которого аморфная субстанция, полученная методом распылительной сушки, отличается от аморфной субстанции, полученной методом лиофилизации узким рефлексом на фоне широкого «гало» в спектре рентгеновской дифракции [E.Y. Shalaev, G.Zogra. The concept of "structure" in amorphous solids from the perspectives of the pharmaceutical sciences. Progress in Amorphous Food and Pharmaceutical Systems, Publisher: The Royal Society of Chemistry, Editors: H Levine, 2002, pp.11-30].

Настоящее изобретение относится к новой, неизвестной ранее безводной аморфной форме известного соединения «дазатиниб», которое характеризуется следующей структурной формулой:

Брутто формулой: C₂₂H₂₆Сl₃N₇O₂S;

Молекулярной массой: 488.

Дазатиниб применяется в медицине как противоопухолевое средство, ингибитор протеинтирозинкиназ: BCR-ABL, семейство SRC (SRC, LCK, YES, FYN), c-KIT, EPHA2 и PDGFR бета. Молекула дазатиниба связывается со многими формами ABL киназы, он активен в лейкозных клеточных линиях, как чувствительных, так и резистентных к иматинибу. Дазатиниб ингибирует рост клеточных линий хронического миелолейкоза и острого лимфобластного лейкоза с гиперэкспрессией BCR-ABL. Известна его способность преодолевать резистентность к иматинибу, связанную с мутациями домена BCR-ABL киназы, активацией альтернативных сигнальных путей, включающих киназы семейства SRC (LYN, НСК) и гиперэкспрессией гена лекарственной полирезистентности.

Известно противоопухолевое лекарственное средство Спрайсел, содержащее дазатиниб, выпускаемое в виде таблеток, покрытых пленочной оболочкой. Спрайсел доступен в широком ассортименте дозировок: 20, 50, 70, 80, 100 и 140 мг активного вещества дазатиниба. Вспомогательные вещества для указанных дозировок: лактозы моногидрат: 27/67,5/94,5/108/135/189 мг; микрокристаллическая целлюлоза: 27/67,5/94,5/108/135/189 мг; гипролоза: 2,4/6/8,4/9,6/12/16,8 мг; кроскармеллоза натрия: 3,2/8/11,2/12,8/16/22,4 мг; магния стеарат: 0,4/1/1,4/1,6/2/2,8 мг; Opadry белый YS-1-18177-A (титана диоксид - 31,2%: 1/2,2/2,65/3,5/3,7/5,24 мг, гипромеллоза-6 cP - 59,8%: 1,9/4,17/5/6,7/7,2/10,05 мг, макрогол 400 - 9%: 0,3/0,63/0,75/1/1,1/1,51 мг): 3,2/7/8,4/11,2/12/16,8 мг. Показаниями к применению являются хронический миелолейкоз в хронической фазе, фазе акселерации, лимфоидного или миелоидного бластного криза (при неэффективности предыдущей терапии, включая иматиниб). Острый лимфобластный лейкоз с положительной филадельфийской хромосомой (при неэффективности предыдущей терапии).

Низкая растворимость в водной среде типична для веществ, относящихся к группе ингибиторов протеинтирозинкиназ. В соответствии с биофармацевтической классификацией лекарств (БФК), дазатиниб относится к классу II, то есть обладает низкой растворимостью и высокой проницаемостью. Низкая растворимость может приводить к неполной или вариабельной абсорбции лекарства в желудочно-кишечном тракте пациента. В таких случаях для улучшения кинетики растворения действующего вещества применяют глубокую микронизацию или превращение вещества из термодинамически стабильной кристаллической в метастабильную или аморфную форму. Поскольку многие аморфные вещества способны менять свою форму на кристаллическую при хранении, стабильность является необходимым требованием, предъявляемым к аморфным активным фармацевтическим субстанциям. Специалист в области химии может легко спрогнозировать возможность получения стабильных аморфных субстанций для некоторых классов органических соединений, таких как сахара и белки, в то время как для других классов, таких как гетероциклические ингибиторы протеинтирозинкиназ, это сделать крайне трудно.

Существование полиаморфизма у органических соединений на сегодняшний день не является предсказуемым, так же как невозможно предсказать число аморфных форм вещества, их стабильность, растворимость в различных растворителях (которая может оказать влияние на технологические процессы, необходимые для включения соединения в состав лекарственного средства), биологическая доступность и другие важные характеристики, определяющие промышленную применимость.

Аморфные формы дазатиниба являлись объектами многих изобретений. Так, в патенте США №7973045 (опубл. 05.05.2011 г., МПК: C07D239/42; C07D401/04) приведено нескольких способов получения аморфного дазатиниба. Пример №24 патента раскрывает способ получения аморфной формы дазатиниба, согласно которому смесь N-(2-гидроксиэтил)пиперазина и N-этилдиизопропиламина в ДМФА перемешивали при 90 °С в течение 2,5 ч, далее раствор охлаждали до 0 °С, продукт отфильтровывали, трижды промывали водой и высушивали на фильтре. Для специалиста в области химии очевидно, что в данном способе пропущена часть исходных веществ, необходимых для того, чтобы дазатиниб мог быть синтезирован. Кроме того, термогравиметрический анализ продукта показывает потерю в массе 48%, говорящую о крайне высоком содержании остаточного растворителя (ДМФА). В примерах № 50 56 и 60 раскрыты способы получения аморфного дазатиниба с использованием кристаллической формы A21 в качестве исходного вещества. Для превращения кристаллической формы дазатиниба в аморфную применяется нагревание в высококипящих органических растворителях, таких как 1,2-дихлорбензол, бензиловый спирт и пропиленгликоль. Использование указанные растворителей в производстве активных фармацевтических субстанций (АФС) является крайне нежелательным по причинам трудного удаления и/или токсичности, что делает способы по примерам 50, 56 и 60 неприменимыми для целей производства АФС. Следует также обратить внимание на спектры порошковой рентгеновской дифракции полученных продуктов, которые представляют собой смесь кристаллической и аморфной форм.

В международной заявке WO2018078392 (опубл. 03.05.2018 г., МПК: C07D277/56) описана аморфная форма дазатиниба, характеризующаяся температурой стеклования 153 °С±3°С, и способы её получения. Согласно формуле изобретения, способ получения такой аморфной формы включает стадии смешения с растворителем или смесью растворителей, обработка кислотой, нагревания в диапазоне от 25 °С до температуры кипения растворителя и обработка основанием. При этом, растворителем может быть как органическая жидкость, так и вода. Аморфная форма подтверждена спектром порошковой рентгеновской дифракции, а температура стеклования определена при помощи дифференциальной сканирующей калориметрии. Описание к заявке содержит 7 примеров, однако не ясно, к какому из них относятся спектр РФА и диаграмма ДСК.

Способ получения аморфной формы дазатиниба заявлен в международной заявке WO2017134617 (опубл. 10.08.2017 г., МПК: C07D417/12). Данный способ, согласно формуле изобретения, содержит следующую последовательность операций:

1) Смешивание дазатиниба с органическим растворителем или смесью органических растворителей;

2) прибавление концентрированной соляной кислоты или раствора хлористого водорода в органической среде;

3) доведение pH до 7-8;

4) выделение аморфной формы дазатиниба.

К недостаткам указанного способа относятся: применение органических растворителей, которые необходимо нормировать и контролировать их содержание в активной фармацевтической субстанции; образование жидких органических отходов; многостадийность процесса; и усложнение внутрипроизводственного контроля параметров процесса, таких как pH и остаточное содержание хлоридов в продукте после стадии нейтрализации.

Рассмотренные выше аморфные формы дазатиниба были получены различными способами. В ряде случаев они характеризуются определёнными физическими свойствами, такими как температура стеклования. Во всех случаях аморфность полученных образцов доказывалась методом порошковой рентгеновской дифракции.

В патенте РФ №2655435 (опубл. 29.05.2018 г. МПК: C07D417/12, A61K31/506, C07D 275/06) раскрываются некоторые соли дазатиниба, а именно сахаринат, глутарат и никотинат, в аморфной форме, фармацевтические композиции на основе этих солей, а также их применение в качестве лекарственного средства для лечения рака.

В качестве наиболее близкого аналога (прототипа) настоящего изобретения выбрана заявка США № 2014343073 (опубл. 20.11.2014 г., МПК: C07D417/12). В заявке раскрываются следующие основные объекты: стабильная аморфная форма дазатиниба, которая при выдерживании при относительной влажности 75% при 40° C или 60% при 25° C в течение как, минимум, трёх месяцев, не меняет кристалличности. Также раскрываются аморфная форма, не содержащая остаточных растворителей, способ получения аморфной формы дазатиниба путём совместного измельчения [кристаллического] дазатиниба и ацетата-сукцината гидроксипропилметилцеллюлозы, лекарственная форма в виде твёрдой дисперсии, содержащей указанную аморфную форму, и способ получения такой лекарственной формы. Примеры 16-24 демонстрируют способы получения аморфного дазатиниба с использованием планетарных шариковых мельниц с рабочим объёмом 125 мл с мелющими шарами из карбида вольфрама. Измельчение производилось на скоростях от 100 до 650 оборотов в минуту в течение 2-8 часов при загрузке дазатиниба 5 г.

Очевидно, что указанный способ является энергозатратным, что снижает его экономическую привлекательность. Кроме того, механический стресс создаёт остаточные напряжения в измельчаемой субстанции, причем эти напряжения исчезают медленно в процессе хранения. Величина этих напряжений влияет на многие физические и технологические свойства субстанции, что может создавать трудности для стандартизации как самой субстанции, так и процессов её дальнейшей переработки.

Сходством аморфного дазатиниба по настоящему изобретению и аморфного дазатиниба по заявке США № 2014343073 является то, что в обоих случаях главным объектом является дазатиниб с одинаковой молекулярной структурой в аморфной форме, не содержащий значимых уровней остаточных органических растворителей.

Отличия настоящего изобретения от заявки США № 2014343073 заключается как в характеристиках самой безводной аморфной формы дазатиниба, так и в способе ее получения. Так, в прототипе заявлена аморфная форма дазатиниба, которая при выдерживании при относительной влажности 75% при 40° C или 60% при 25° C в течение, как минимум, трёх месяцев, не меняет кристалличности. Поскольку срок хранения субстанции определяется исходя из данных о стабильности при хранении, то можно считать срок в три месяца нормативным сроком хранения данной аморфной субстанции. Однако, в практическом плане, этот срок является рискованно коротким даже исходя из сроков, отводимых на государственную экспертизу при регистрации лекарственных средств. По истечении нормативного срока хранения, фармацевтическая субстанция не подлежит использованию, даже если по своему качеству она соответствует нормативной документации. При этом, не существует легального механизма переаттестации субстанции с истекшим сроком годности, который бы позволил продлить её фактический срок хранения. Отсюда очевидным образом следует возможность дополнительных экономических потерь.

Аморфная форма дазатиниба по настоящему изобретению отличается температурой стеклования 198,9 °C ± 3,0 °C и ИК-спектром, зарегистрированным по методу многократно нарушенного полного внутреннего отражения (метод МНПВО), содержащим характерные пики при частоте около 3251,98 и 3188,22 см^-1. Заявленная форма обладает высокой стабильностью при хранении в защищенном от света месте при температуре 25 ± 2 °С в течение, как минимум, 24 месяцев, что делает ее пригодной для использования в производстве лекарственного средства.

Способ получения дазатиниба в соответствии с прототипом характеризуется высокой энергозатратностью на стадии измельчения кристаллического дазатиниба и, очевидно, плохой масштабируемостью.

Способ получения дазатиниба по настоящему изобретению характеризуется улучшенной масштабируемостью, увеличенным выходом целевого продукта, более низкой энергозатратностью, не требует дорогостоящего оборудования для интенсивной микронизации субстанции, не создаёт излишнего количества пыли, и в целом, отличается высокой экономической эффективностью по сравнению с прототипом и другими аналогами настоящего изобретения.

Таким образом, целью настоящего изобретения является создание новой стабильной безводной аморфной формы N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкар-боксамида (дазатиниба), свободной от существенных недостатков известных аморфных форм дазатиниба; разработка улучшенного способа получения новой стабильной безводной аморфной формы дазатиниба и ее применения для приготовления фармацевтической композиции для лечения иммунологических и онкологических заболеваний.

Высокая стабильность новой безводной аморфной формы дазатиниба по изобретению в течение нормативного срока хранения и отсутствие в ней токсичных остаточных органических растворителей являются важными условиями, обеспечивающими возможность её промышленного применения.

Раскрытие изобретения

Настоящее изобретение относится к новой, неизвестной ранее безводной аморфной форме N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкар-боксамида (международное непатентованное название - дазатиниб), способу её получения и применения в фармацевтических композициях, которые могут быть использованы для лечения иммунологических и онкологических заболеваний.

Технический результат изобретения заключается в получении новой, не известной ранее безводной аморфной формы дазатиниба, характеризующейся улучшенными показателями стабильности и увеличенным сроком хранения.

Кроме того, в настоящем изобретении предлагается способ получения безводной аморфной формы дазатиниба, характеризующийся улучшенной масштабируемостью, повышенным выходом целевого продукта, отсутствием зависимости от кристаллической формы исходного сырья, сниженной энергозатратностью и отсутствием специфических требований к оборудованию для интенсивной микронизации субстанции.

Вышеуказанный технический результат в отношении предложенной безводной аморфной модификации дазатиниба достигается тем, что полученная безводная аморфная форма N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида характеризуется температурой стеклования 198,9 °C ± 3,0 °С и ИК-спектром (метод МНПВО), содержащим характерные пики при частоте около 3251,98 и 3188,22 см^-1.

Предлагаемый способ получения безводной аморфной формы N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида включает следующие стадии:

а) растворение кристаллического N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида в расплаве фруктозы, лактозы моногидрата и мочевины с массовым соотношением компонентов приблизительно 50:5:40 при температуре приблизительно 60-65 °С;

б) охлаждение полученного расплава путем смешивания с холодной водой;

в) выделение аморфной формы N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида фильтрованием.

Одним из предпочтительных вариантов изобретения является безводная аморфная форма N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида, полученная вышеуказанным способом.

Другим важным объектом изобретения является применение безводной аморфной формы N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида для приготовления фармацевтической композиции, которая может быть использована для лечения иммунологических и онкологических заболеваний.

Краткое описание чертежей

Для пояснения сущности заявляемого технического решения к описанию приложены Фигуры 1-6:

На Фиг.1 показана дифрактограмма аморфного дазатиниба, полученного по примеру 1 (снизу) и примеру сравнения 2 (сверху).

На Фиг. 2 показана дифрактограмма кристаллического дазатиниба.

На Фиг.3 показана дериватограмма аморфного дазатиниба по примеру 1.

На Фиг.4 приведен спектр ИК аморфного дазатиниба по примеру 1 изобретения.

На Фиг.5 приведен спектр ¹H ЯМР раствора аморфного дазатиниба по примеру 1 (ДМСО-D6, 400,13 МГц).

На Фиг.6 приведен спектр ¹³С ЯМР раствора аморфного дазатиниба по примеру 3 (ДМСО-D6, 100,61 МГц).

Осуществление изобретения

При проведении фармацевтической разработки препарата, содержащего в качестве активной фармацевтической субстанции кристаллический дазатиниб, было обнаружено, что для получения стабильно воспроизводимой кинетики перехода дазатиниба из таблетки в раствор требуется сильное измельчение субстанции. При механическом размоле кристаллов дазатиниба образуется тонкий порошок, который сильно электризуется даже при работе с заземленным оборудованием. Длительное механическое измельчение производит большое количество пыли, что с одной стороны делает производство более опасным для человека и окружающей среды, а с другой стороны, ведёт к технологическим потерям.

В поисках способов получения субстанции дазатиниба, удобной для дальнейшей переработки, авторы настоящей заявки получили свободно сыпучую, практически не пылящую субстанцию, которая имела вид мелкокристаллического порошка. Неожиданно, при исследовании полученного порошка методом рентгеновской дифракции было обнаружено отсутствие в порошке кристаллической структуры (Фиг. 1) по сравнению со спектром исходной кристаллической формы (Фиг. 2). Данная субстанция была получена методом растворения кристаллического дазатиниба в расплаве D-фруктозы, лактозы моногидрата и мочевины при температуре 60-65 °C с последующим растворением расплава в избытке холодной воды, фильтрованием и многократным промыванием отфильтрованного аморфного продукта водой. При этом, кристаллическая форма исходного сырьевого дазатиниба не имела значения с точки зрения качества получаемого продукта. На дериватограмме аморфного дазатиниба по примеру 1 наблюдается характерный перегиб, соответствующий температуре стеклования 198,9 °C ± 3,0 °С (см. Фиг. 3). Для аморфного дазатиниба по примеру 3 аналогичное значение температуры стеклования составляет 197,5 °C ± 3,0 °С.

В качестве одного из методов исследования аморфного дазатиниба по изобретению была использована инфракрасная спектроскопия. Инфракрасный спектр субстанции дазатиниба известен из литературы [H.M. Korashy, A.F.M. M. Rahman, M. G. Kassem in Profiles of Drug Substances, Excipients and Related Methodology, Ed. Harry G. Brittain, Vol. 39, Chapter 4, 2014]. При сравнении этого спектра со спектром аморфной формы дазатиниба по изобретению (см. Фиг. 4), можно увидеть ряд различий. Аморфный дазатиниб по изобретению (по примеру 1) отличается характерным сдвигом в области низких частот полос поглощения, соответствующих валентным колебаниям N-H и O-H. Так, пик с частотой 3417,91 см^-1 сдвинут до 3251,98 см^-1, а пик при 3200,39 см^-1 – до 3188,22 см^-1. Кроме того, можно отметить некоторое уширение сигналов этих связей по сравнению с кристаллической формой. Эти данные согласуются с предположением, что NH- и OH-протоны играют роль в сохранении кристаллической структуры дазатиниба за счёт водородных связей. Методом Карла Фишера в аморфной форме дазатиниба по изобретению было обнаружено массовое содержание воды 0,24%. Таким образом, можно исключить влияние сорбционной воды на положение сигналов N-H и О-H в ИК-спектре.

На основе этой новой аморфной формы авторами изобретения была получена готовая лекарственная форма в виде таблеток, покрытых плёночной оболочкой. В процессе создания таблеток не отмечалось случаев возникновения фармацевтической несовместимости аморфной субстанции дазатиниба и указанных вспомогательных веществ, таких как изменение цвета или запаха, выделения газообразных продуктов, изменений, сопровождающихся выделением тепла. Отсутствие негативного влияния вспомогательных веществ на активную субстанцию аморфного дазатиниба по изобретению также подтверждают данные по изучению стабильности препарата в течение 24 месяцев хранения в нормальных условиях.

Физико-химический анализ полученного аморфного дазатиниба был осуществлен методом ядерной магнитной спектроскопии ¹Н и ¹³C ЯМР, ИК-спектроскопии, дифференциальной сканирующей калориметрии и рентгенофазовым анализом. Спектры ЯМР были зарегистрированы в насыщенном растворе в дейтерированном диметилсульфоксиде (ДМСО-D6) на ЯМР-спектрометре высокого разрешения VXR-400 фирмы “VARIAN” (США) на рабочей частоте 400,13 МГц для протонного спектра и 100,61 МГц для углеродного. Инфракрасный спектр субстанции регистрировали по методу многократно нарушенного полного внутреннего отражения (МНПВО) с преобразованием Фурье в области от 4000 до 580 см^–1 на приборе Shimadzu IRAffinity-1s. Термоаналитические исследования проводили на приборе NETZSCH DSC 204 F1. Измерительную систему калибровали согласно норме ISO 11357-1 по параметрам фазовых переходов стандартных веществ (C6H12, Hg, бензойная кислота, Ga, KNO₃, In, Sn, Bi, CsCl, чистота 99.99%). Систематическая ошибка температурной калибровки (определена по In) составляет 0.1є. Образцы тестировали в стандартных алюминиевых ячейках (V = 56 мм³, d = 6 мм), завальцованных крышкой с отверстием (отношение площади дна ячейки к площади отверстия составляло порядка 40) в потоке (40 мл/мин) азота (ВЧ) в интервале температур 20-80 єС при скорости нагревания 10є/мин. Экспериментальные данные обрабатывали с помощью пакета анализа NETZSCH Proteus Analysis согласно стандарту, ISO/CD 11358. Рентгенофазовый анализ (РФА) проводили на дифрактометре Rigaku D/MAX-2500 (Rigaku, Япония) на CuKб излучении (л = 1,54056 Е).

Возможность осуществления заявленной группы изобретений иллюстрируется следующими примерами, но не ограничивается только ими.

Пример 1. Получение аморфного дазатиниба

В трёхгорлую круглодонную колбу объёмом 250 мл, оснащённую механической якорной мешалкой, загружали 50 г D-фруктозы, 7 г лактозы моногидрата и 40 г мочевины. Смесь нагревали до температуры 60 °С при медленном перемешивании, при этом происходило сплавление компонентов. В полученный полупрозрачный сироп вносили тремя равными порциями с интервалом 5 минут 20 г кристаллического дазатиниба (производства AFINE CHEMICALS LTD, Китай). Перемешивание продолжали в течение не менее 15 минут до получения вязкой однородной массы при температуре не выше 60 °С. Горячий сироп выливали в 1 л охлаждённой до +5 °С воды очищенной и интенсивно перемешивали в течение 20 мин. Выделившийся осадок дазатиниба отфильтровывали на стеклянном пористом фильтре Шотта (S3), повторно суспендировали в 1 л воды очищенной и перемешивали в течение 1 часа при температуре 20-30 °С. Осадок отфильтровывали на стеклянном пористом фильтре Шотта (S3), промывали на фильтре 3x100 мл воды очищенной, и высушивали под вакуумом до постоянной массы. Получили 19,49 г дазатиниба. Выход 97%. Образец был полностью рентгеноаморфен и не содержит заметных рефлексов в спектре порошковой рентгеновской дифракции (см. Фиг. 1). Сохранность молекулярной структуры дазатиниба, отсутствие продуктов деградации и других органических примесей, включая значимые уровни остаточных органических растворителей, подтверждается спектром ¹ H ЯМР полученного продукта (Фиг.5). Это исключает возможность проявления примесями «пластифицирующего» эффекта на полученную аморфную форму дазатиниба. Отсутствие значимых уровней адсорбционной воды подтверждено кулонометрическим титрованием по К. Фишеру (ГФ XIII, Т.1, стр.719) на автоматическом титраторе C20D («Mettler Toledo», Швейцария).

Пример 2. Получение аморфного дазатиниба известным способом (пример сравнения)

15 г кристаллического дазатиниба (производства AFINE CHEMICALS LTD, Китай) измельчали на планетарной мельнице с объёмом размольного стакана 250 мл и шарами из карбида вольфрама, в течение 6 ч. Полученный тонкий порошок использовался в качестве образца сравнения. Как видно на диаграмме РФА (Фиг.1), рентгеноаморфный продукт по примеру 2 отличался от аморфного продукта по примеру 1.

Пример 3. Получение аморфного дазатиниба

В трёхгорлую круглодонную колбу объёмом 2,5 л, оснащённую механической якорной мешалкой, загружали 500 г D-фруктозы, 70 г лактозы моногидрата и 400 г мочевины. Смесь нагревали до температуры 65 °С при медленном перемешивании, при этом происходило сплавление компонентов. В полученный полупрозрачный сироп вносили тремя равными порциями с интервалом 5 минут 200 г кристаллической δ-модификации дазатиниба, полученной по патенту РФ № 2567537. Перемешивание продолжали в течение не менее 15 минут до получения вязкой однородной массы при температуре не выше 60 °С. Горячий сироп выливали в 10 л охлаждённой до +5 °С воды очищенной и интенсивно перемешивали в течение 20 мин. Выделившийся осадок дазатиниба отфильтровывали на стеклянном пористом фильтре Шотта (S3), повторно суспендировали в 10 л воды очищенной и перемешивали в течение 1 часа при температуре 20-30 °С. Осадок отфильтровывали на стеклянном пористом фильтре Шотта (S3), промывали на фильтре 3x1 л воды очищенной, и высушивали под вакуумом до постоянной массы. Получили 197,20 г рентгеноаморфного дазатиниба, аналогичного по данным ДСК продукту по Примеру 1. Выход 98%. Сохранность молекулярной структуры дазатиниба, отсутствие продуктов деградации и других органических примесей, включая значимые уровни остаточных органических растворителей, подтверждается спектром ¹³С ЯМР полученного продукта (Фиг.6).

Пример 4. Получение таблеток на основе аморфного дазатиниба.

Для получения таблеток использовали следующие ингредиенты:

• Дазатиниб аморфный, полученный по Примеру 1.

• Лактозы моногидрат со средним размером частиц 250 мкм марки Lactochem Crystals производства DMV-Fonterra Excipients GmbH &Co KG (Германия)

• Целлюлоза микрокристаллическая марки VIVAPUR 101 с влажностью не более 6 %, средним размером частиц 100 мкм производства JRS PHARMA GmbH & Co KG (Германия)

• Кроскармеллоза натрия марки Solutab^® типа А со средним размером частиц 60 мкм производства Blanver (Бразилия)

• Гипролоза (гидроксипропил целлюлоза) марки производства Shin Etsu Chemical (Япония)

• Магния стеарат NutriMag ST-v производства ЗАО «ФПК ФармВИЛАР» (Россия) / Calmags GmbH (Германия).

В смеситель-гранулятор последовательно загружали предварительно взвешенные и просеянные через сита (0,400 г ± 0,005 мм) компоненты: дазатиниб (252,00 г ±1%), лактозы моногидрат (340,20 г ±1%), микрокристаллическую целлюлозу (340,20 г ±1%), гипролозу (30,24 г ±1%), натрия кроскармеллозу (40,32 г ± 1%). Массу перемешивали в течение 10 минут (скорость мешалки 200 об/мин, скорость чоппера 500 об/мин). Не останавливая перемешивания подавали гранулирующую жидкость (вода очищенная, 356,63 ±1%). Процесс грануляции осуществляли до полного расходования гранулирующей жидкости. После завершения процесса полученную массу выгружали и сушили на установке с кипящим слоем при температуре 60-70ºС до остаточной влажности 1-2 %. Полученный гранулят загрузили в Y-образный смеситель, и перемешивали с предварительно взвешенным и просеянным магния стеаратом (4,914 г ± 1%). Процесс таблетирования осуществляли на роторном таблет-прессе с обеспыливателем. Покрытие таблеток-ядер пленочной оболочкой проводили в установке для тонкослойного покрытия. Процесс нанесения пленкообразующей суспензии продолжали до тех пор, пока не была достигнута требуемая средняя масса таблетки. Получали 9620,52 г ±0,5% круглых, двояковыпуклых таблеток, покрытых пленочной оболочкой желтого цвета (см. состав таблеток в Таблице 1).

Таблица 1. Состав на одну таблетку

Наименование ингредиента	Количество, мг
20 мг	50 мг	70 мг	80 мг	100 мг	140 мг
Активное вещество:
Дазатиниб аморфный по Примеру 1	20,0	50,0	70,0	80,0	100,0	140,0
Вспомогательные вещества:
Лактозы моногидрат (USP)	27,0	67,5	94,5	108,0	135,0	189,0
Целлюлоза микрокристаллическая (USP)	27,0	67,5	94,5	108,0	135,0	189,0
Гипролоза (USP)	2,4	6,0	8,4	9,6	12,0	16,8
Кроскармеллоза натрия (EР)	3,2	8,0	11,2	12,8	16,0	22,4
Магния стеарат (USP)	0,4	1,0	1,4	1,6	2,0	2,8
Теоретическая масса ядра	80,0	200,0	280,0	320,0	400,0	560,0
Пленочная оболочка:
(Каларкон Лтд, Великобритания) поливиниловый спирт – 40,00 %, макрогол – 20,20 %, тальк – 14,80 %, титана диоксид – 11,98 %, краситель хинолиновый желтый (Е104) – 11,69 %, краситель желтый (Е110) – 0,73 %, оксид железа желтый – 0,58 %, краситель индигокармин (Е132) – 0,02 %	4,0	-	11,0	-	16,0	-
(Каларкон Лтд, Великобритания) поливиниловый спирт – 40,00 %, макрогол – 20,20 %, тальк – 14,80 %, краситель желтый (Е110) – 13,91 %, титана диоксид – 10,14 %, оксид железа желтый – 0,91 %, краситель индигокармин (Е132) – 0,04 %	-	8,0	-	13,0	-	23,0
Теоретическая масса таблетки:	84,0	208,0	291,0	333,0	416,0	583,0

Пример 5. Исследование стабильности аморфного дазатиниба при хранении.

Стабильность изучали при хранении в защищенном от света месте при температуре 25 ± 2 °С в полиэтиленовом флаконе, укупоренном полиэтиленовой крышкой. Количественное определение содержания основного вещества дазатиниба проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на жидкостном хроматографе Agilent, снабженном ультрафиолетовым детектором, системой построения градиента и системой обработки данных по известному методу [E. Pirro et al, J. Chromatographic Sci., Vol.49, p.753-757, 2011]. Содержание воды определяли кулонометрическим титрованием по К. Фишеру (ГФ XIII, Т.1, стр.719) на автоматическом титраторе C20D («Mettler Toledo», Швейцария). Определение температуры плавления проводили в соответствии с ГФ РФ, ОФС.1.2.1.0011.15 «Температура плавления», методом 3 (см. результаты в Таблицах 2 и 3).

Таблица 2. Сравнительные данные по стабильности аморфного дазатиниба при хранении.

Показатель	Образец	0 мес.	3 мес.	6 мес.	9 мес.	12 мес.	18 мес.	24 мес.	27 мес.
Температура плавления	A	277,6 °С	-	-	-	-	-	277,5 °С	277,6 °С
	B	277,3 °С	-	-	-	-	-	277,0 °С	276,8 °С
С	277,7 °С	-	-	-	-	-	274,9 °С	274,6 °С
Вода	A	0,24 %	0,23 %	0,22 %	0,22 %	0,21 %	0,20 %	0,22 %	0,20 %
	B	0,25 %	-	-	-	-	-	0,24 %	0,25 %
С	0,25 %	0,25%	0,26 %	0,26 %	0,28 %	0,29 %	0,29 %	0,29 %
Количественное определение	A	99,44 %	99,42 %	99,41 %	99,40 %	99,40 %	99,38 %	99,39 %	99,37 %
	B	99,40 %	-	-	-	-	-	99,37%	99,36%
С	99,32 %	99,01%	98,85%	98,64 %	98,57 %	98,41 %	98,26 %	98,08 %

А – аморфный дазатиниб, полученный по примеру 1, B – аморфный дазатиниб, полученный по примеру 3, С – аморфный дазатиниб, полученный известным способом по примеру 2.

Способ получения безводной аморфной формы N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида, характеризующейся температурой стеклования 198,9°С±3,0°С и ИК-спектром (метод МНПВО), содержащим характерные пики при частоте около 3251,98 и 3188,22 см^-1, характеризующийся тем, что указанный способ включает следующие стадии:

а) растворение кристаллического N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида в расплаве фруктозы, лактозы моногидрата и мочевины с массовым соотношением компонентов приблизительно 50:7:40 при температуре приблизительно 60-65°С;

б) охлаждение полученного расплава путем смешивания с холодной водой;

в) выделение аморфной формы N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-[[6-[4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинил]-2-метил-4-пиримидинил]амино]-5-тиазолкарбоксамида фильтрованием.