Варианты свиного трипсина
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к полипептидным вариантам свиного трипсина, молекулам нуклеиновых кислот, кодирующим эти варианты, и клеткам-хозяевам, содержащим такие молекулы нуклеиновых кислот. Оно также относится к применению этих вариантов в способах получения инсулина. Изобретение позволяет получить эффективный вариант трипсина и получать инсулин с высокой степенью эффективности. 6 н. и 10 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл., 8 пр.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к полипептидным вариантам свиного трипсина, молекулам нуклеиновых кислот, кодирующим эти варианты, и клеткам-хозяевам, содержащим такие молекулы нуклеиновых кислот. Оно также относится к применению этих вариантов в способах получения инсулина. Настоящее изобретение дополнительно относится к применению этих вариантов в качестве лекарственных препаратов, в качестве пищевых ингредиентов или в качестве кормовых ингредиентов, а также к применению этих вариантов в способе изготовления пищевого ингредиента или кормового ингредиента.
Предпосылки изобретения
Трипсин, представляющий собой эндопептидазу, применяют для изготовления человеческого инсулина, аналогов инсулина, а также производных инсулина. Человеческий инсулин, аналог инсулина или производное инсулина получают из препроинсулина (PPI) посредством ферментативного гидролиза с применением трипсина, при этом препоследовательность и C-пептид отщепляются с целью получения соответствующих продуктов (см. фиг. 1). Трипсин является специфичным в отношении расщепления на C-концевой стороне остатков Arg и Lys в полипептидной цепи. В человеческом препроинсулине и полипептиде препроинсулина гларгина присутствуют несколько остатков Arg и Lys, включая B29Lys, B31Arg и B32Arg на участке соединения B-цепи и C-пептида. Следовательно, человеческий препроинсулин и препроинсулин гларгин расщепляются трипсином на C-концевой стороне остатков Arg и Lys, в том числе на C-концевой стороне B29Lys, и B31Arg, и B32Arg. Для изготовления инсулина гларгина расщепление трипсином после B32Arg обеспечивает образование конечного инсулина гларгина. Расщепление трипсином после B29Lys и B31Arg приводит к образованию побочных продуктов, представляющих собой дезB30-Thr ("дез-Thr")-инсулин гларгин и дезB32Arg-инсулин гларгин (также называемый "дез-Arg"). Следовательно, необходимо удалять побочные продукты в процессе изготовления инсулина гларгина.
Для изготовления человеческого инсулина расщепление трипсином после B31Arg приводит к образованию человеческого B31Arg-инсулина (также называемого "моно-Arg"), а после B32Arg - к образованию человеческого B31Arg-B32Arg-инсулина (также называемого "ди-Arg"). Оба являются промежуточными соединениями в указанном процессе изготовления. В последующем процессе изготовления оба из этих двух промежуточных соединений превращаются в конечный человеческий инсулин. Расщепление трипсином после B29Lys приводит к образованию побочного продукта, представляющего собой человеческий дезB30-Thr ("дез-Thr")-инсулин. Следовательно, необходимо удалять побочный продукт в процессе изготовления человеческого инсулина.
В случае изготовления человеческого инсулина и инсулина гларгина расщепление трипсином после B32Arg приводит к образованию конечного инсулина гларгина, а в случае человеческого инсулина это приводит к образованию промежуточного соединения, которое превращается в конечный человеческий инсулин на последующих стадиях способа.
Ранее разработка с целью устранения нежелательного образования дезB30-Thr-промежуточного соединения привела к получению варианта свиного трипсина S172A, который снижает вероятность этого неправильного расщепления за счет повышения селективности в отношении C-концевой стороны Arg по сравнению с Lys. Вариант свиного трипсина S172A описан в международной заявке на патент WO 2007/031187 A1, которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.
В настоящее время в ходе тщательного исследования авторами настоящего изобретения кинетики реакции, катализируемой трипсином S172A, было обнаружено, что образование неправильно расщепленных побочных продуктов будет происходить не только из-за первичного неправильного расщепления PPI трипсином, действующим как эндопротеаза, как описано в литературе, но также из-за побочной активности, присущей свиному трипсину, а также его варианту S172A, действующему как экзопептидаза. Экзопептидазная активность приводит к разрушению инсулина гларгина с образованием также дез-Arg и дез-Thr.
Технические задачи, лежащие в основе настоящего изобретения
Таким образом, в предшествующем уровне техники существовала необходимость получения новых вариантов трипсина с пониженными побочными активностями, особенно с пониженной экзопептидазной активностью. Такие новые варианты трипсина снизят количество побочных продуктов при расщеплении PPI и приведут к более высоким выходам инсулина и производных инсулина при получении инсулина (или производных инсулина) из PPI.
Авторами настоящего изобретения были получены новые варианты свиного трипсина, которые обладают пониженной экзопептидазной активностью и/или демонстрируют пониженное образование побочных продуктов в реакции расщепления PPI.
В приведенном выше обзоре не обязательно описаны все задачи, решаемые настоящим изобретением.
Краткое описание изобретения
В первом аспекте настоящее изобретение относится к варианту свиного трипсина, включающему или состоящему из аминокислотной последовательности, которая характеризуется по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 1, где указанная аминокислотная последовательность отличается от SEQ ID NO: 1 по меньшей мере одной или несколькими аминокислотными заменами в одном или нескольких положениях, соответствующих F24, S44, D56, G78, Y131, S172 и W193 нативного свиного трипсина в соответствии с SEQ ID NO: 1,
при условии, что указанная аминокислотная последовательность не представляет собой нативный свиной трипсин в соответствии с SEQ ID NO: 1; и
при условии, что указанная аминокислотная последовательность не представляет собой вариант свиного трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2.
Во втором аспекте настоящее изобретение относится к молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей вариант свиного трипсина в соответствии с первым аспектом.
В третьем аспекте настоящее изобретение относится к клетке-хозяину, содержащей молекулу нуклеиновой кислоты в соответствии со вторым аспектом.
В четвертом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения варианта свиного трипсина в соответствии с первым аспектом, включающим стадию
культивирования клетки-хозяина в соответствии с третьим аспектом и выделения варианта свиного трипсина из культуральной среды или из клетки-хозяина.
В пятом аспекте настоящее изобретение относится к варианту свиного трипсина в соответствии с первым аспектом, или к молекуле нуклеиновой кислоты в соответствии со вторым аспектом, или к клетке-хозяину в соответствии с третьим аспектом для применения в качестве лекарственного препарата; для применения в качестве пищевого ингредиента; для применения в качестве кормового ингредиента или для применения в способе изготовления пищевого ингредиента или кормового ингредиента.
В шестом аспекте настоящее изобретение относится к применению варианта свиного трипсина в соответствии с первым аспектом в способе получения человеческого инсулина, аналога инсулина или производного инсулина.
В седьмом аспекте настоящее изобретение относится к применению варианта свиного трипсина в соответствии с первым аспектом для расщепления белка или пептида с общей формулой A-Lys-Thr-Arg-Arg-B,
где A представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот; и
где B представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот.
В восьмом аспекте настоящее изобретение относится к композиции, содержащей вариант свиного трипсина в соответствии с первым аспектом, или молекулу нуклеиновой кислоты в соответствии со вторым аспектом, или клетку-хозяина в соответствии с третьим аспектом.
Описание графических материалов
На фиг. 1 показана схема основных сайтов триптического расщепления пропроинсулинов человеческого инсулина и инсулина гларгина. Закрашенные треугольники обозначают сайты расщепления с образованием продукта(продуктов), незакрашенные треугольники обозначают сайты расщепления с образованием побочных продуктов. Дисульфидные связи препреинсулинов не показаны.
На фиг. 2 показано расщепление препроинсулина гларгина вариантом трипсина S172A (SEQ ID NO: 2). На фиг. показан зависящий от времени ход образования инсулина гларгина, а также образование наиболее заметных побочных продуктов расщепления, представляющих собой B31Arg-инсулин гларгин (расщепление после положения 31 в B-цепи инсулина гларгина, сокращенно "дез-Arg" на фиг.) и дезB30Thr-инсулин гларгин (расщепление после положения 29 B-цепи инсулина гларгина, сокращенно "дез-Thr" на фиг.).
На фиг. 3 показано расщепление инсулина гларгина вариантом трипсина S172A (SEQ ID NO: 2) в качестве примера экзопептидазной активности варианта трипсина S172A. На фиг. показано зависящее от времени снижение уровня инсулина гларгина, а также образование основного продукта, представляющего собой B32-дезArg-инсулин гларгин (расщепление после положения 31 в B-цепи инсулина гларгина, сокращенно "дез-Arg" на фиг.) и небольших количеств побочного продукта, представляющего собой B30-дезThr-инсулин гларгин (расщепление после положения 29 B-цепи инсулина гларгина, сокращенно "дез-Thr" на фиг.).
На фиг. 4 показано расщепление препроинсулина гларгина вариантом трипсина № 105 (SEQ ID NO: 105) в качестве примера расщепления оптимизированным вариантом трипсина. На фиг. показан зависящий от времени ход образования инсулина гларгина, а также снижение образования наиболее заметных побочных продуктов расщепления, представляющих собой B31Arg-инсулин гларгин (расщепление после положения 31 в B-цепи инсулина гларгина, сокращенно "дез-Arg" на фиг.) и дезB30Thr-инсулин гларгин (расщепление после положения 29 B-цепи инсулина гларгина, сокращенно "дез-Thr" на фиг.).
Подробное описание изобретения
Определения
Несмотря на то, что настоящее изобретение подробно описано ниже, необходимо понимать, что настоящее изобретение не ограничивается конкретными методиками, протоколами и реагентами, описанными в данном документе, поскольку таковые могут варьироваться. Также необходимо понимать, что терминология, применяемая в данном документе, приведена лишь с целью описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения, который будет ограничиваться лишь прилагаемой формулой изобретения. Если не определено иное, все технические и научные термины, применяемые в данном документе, имеют такое же значение, которое обычно понимается специалистом в данной области техники, к которой принадлежит настоящее изобретение.
При практическом осуществлении настоящего изобретения будут использоваться, если не указано иное, общепринятые способы химии, биохимии, клеточной биологии, иммунологии и методики рекомбинантной ДНК, которые изложены в литературе в данной области техники.
На всем протяжении данного описания и в приведенной далее формуле изобретения, если контекстом не подразумевается иное, слово "содержать" и вариации, такие как "содержит" и "содержащий", будут подразумевать включение указанного представителя, целого числа или стадии или группы представителей, целых чисел или стадий, но не исключение любого другого представителя, целого числа или стадии или группы представителей, целых чисел или стадий, несмотря на то, что в некоторых вариантах осуществления другой такой представитель, целое число или стадия или группа представителей, целых чисел или стадий могут быть исключены, т. е. предмет рассмотрения заключается во включении указанного представителя, целого числа или стадии или группы представителей, целых чисел или стадий. Термины в единственном числе и аналогичная ссылка, применяемые в контексте описания настоящего изобретения (особенно в контексте формулы изобретения), подразумевают включение единственного и множественного числа, если в данном документе не указано иное или это явно не противоречит контексту. Цитирование диапазонов значений в данном документе предназначено лишь для целей сокращенного способа отсылки на каждое отдельное значение, находящееся в пределах диапазона. Если в данном документе не указано иное, то каждое отдельное значение включено в описание таким образом, как если бы оно цитировалось в данном документе индивидуально. Все способы, описанные в данном документе, можно выполнять в любом подходящем порядке, если в данном документе не указано иное или это иным образом не противоречит контексту. Применение любого и каждого из примеров или иллюстрирующих формулировок (например, "такой как"), предусмотренных в данном документе, предназначено лишь для более эффективного описания настоящего изобретения и не ограничивает объем настоящего изобретения, если не указано иное. Никакие формулировки в данном описании не следует толковать как указывающие на какой-либо не заявленный элемент, необходимый для практического осуществления настоящего изобретения.
Несколько документов (например: патенты, заявки на патенты, научные публикации, спецификации производителей, инструкции, представленные последовательности под номером доступа GenBank и т. д.) цитируются на протяжении всего текста данного описания. Ничто в данном документе не следует толковать как признание того, что настоящее изобретение не имеет оснований для противопоставления такому раскрытию, опираясь на более раннее изобретение. Некоторые из документов, процитированных в данном документе, охарактеризованы как "включенные посредством ссылки" или "включенные посредством ссылки во всей своей полноте". В случае противоречия между определениями или идеями таких включенных ссылок и определениями или идеями, изложенными в настоящем описании, текст настоящего описания имеет преимущественную силу.
Последовательности: все упомянутые в данном документе последовательности раскрыты в прилагаемом перечне последовательностей, который со всем своим содержанием и раскрытием является частью настоящего описания.
Термин "встречающийся в природе" при применении в связи с биологическими материалами, такими как молекулы нуклеиновых кислот, (поли)пептиды, клетки-хозяева и т.п., относится к материалам, которые встречаются в природе и не подвергались воздействию со стороны человека.
Применяемый в данном документе термин "аминокислота" или "аминокислотный остаток" относится к встречающимся в природе аминокислотам, не встречающимся в природе аминокислотам, аналогам аминокислот и миметикам аминокислот, которые функционируют аналогичным образом со встречающимися в природе аминокислотами, причем все они находятся в форме D- и L-стереоизомеров, если их структура позволяет существование таких стереоизомерных форм. Аминокислоты обозначены в данном документе своими названиями, своими общеизвестными трехбуквенными обозначениями или однобуквенными обозначениями, рекомендованными Комиссией по биохимической номенклатуре IUPAC-IUB.
При упоминании аминокислот термин "встречающаяся в природе" относится к 20 обычным аминокислотам (т. e., аланину (A), цистеину (C), аспарагиновой кислоте (D), глутаминовой кислоте (E), фенилаланину (F), глицину (G), гистидину (H), изолейцину (I), лизину (K), лейцину (L), метионину (M), аспарагину (N), пролину (P), глутамину (Q), аргинину (R), серину (S), треонину (T), валину (V), триптофану (W) и тирозину (Y)), а также селеноцистеину, пирролизину (PYL) и пирролинкарбоксилизину (PCL). Термины "встречающиеся в природе аминокислоты" и "кодируемые аминокислоты" применяются в данном документе взаимозаменяемо.
Применяемый в данном документе термин "не встречающаяся в природе аминокислота" предназначен для обозначения аминокислот, которые не кодируются в природе или не встречаются в генетическом коде ни одного из организмов.
Применяемый в данном документе термин "аналог аминокислоты" относится к соединениям, которые имеют такую же основную химическую структуру, что и встречающаяся в природе аминокислота.
Применяемый в данном документе термин "миметики аминокислот" относится к химическим соединениям со структурой, которая отличается от общей химической структуры аминокислоты, но функционирует аналогичным встречающейся в природе аминокислоте образом.
Применяемый в данном документе термин "пептид" относится к полимерной форме аминокислот любой длины, например, содержащей две или более, или 3 или более, или 4 или более, или 6 или более, или 8 или более, или 9 или более, или 10 или более, или 13 или более, или 16 или более, или 21 или более аминокислот, ковалентно соединенных пептидными связями. Термин "полипептид" относится к крупным пептидам, в частности к пептидам с более чем 100 аминокислотными остатками. Термины "полипептид" и "белок" применяются в данном документе взаимозаменяемо. В настоящей заявке предусмотрена информация об аминокислотных последовательностях нескольких пептидов и полипептидов, раскрытых в данном документе. Аминокислотные последовательности представлены в данном документе от аминоконца (слева) к карбоксиконцу (справа) пептида или полипептида.
Применяемый в данном документе термин "вариант" (поли)пептида относится к (поли)пептиду, который отличается от соответствующего эталонного (поли)пептида одной или несколькими модификациями аминокислот в его аминокислотной последовательности. В одном варианте осуществления "вариант" проявляет одну или несколько биологических активностей эталонного (поли)пептида. Эталонный (поли)пептид может представлять собой (поли)пептид дикого типа или (поли)пептид, который не встречается в природе. Термины "вариант" и "мутант" применяются в данном документе взаимозаменяемо.
Применяемый в данном документе термин "вариант свиного трипсина" относится к полипептиду, который отличается от свиного трипсина дикого типа, представленного под SEQ ID NO: 1, одной или несколькими модификациями аминокислот в его аминокислотной последовательности. Термин "вариант свиного трипсина", в частности, относится к полипептиду, который отличается от свиного трипсина дикого типа, представленного под SEQ ID NO: 1, одной или несколькими аминокислотными заменами. В соответствии с настоящим изобретением "вариант свиного трипсина" проявляет эндопротеолитическую активность, аналогичную эндопротеолитической активности эталонного трипсина (например, свиного трипсина дикого типа в соответствии с SEQ ID NO: 1 или варианта трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2), но эндопротеолитические активности "варианта свиного трипсина" и эталонного трипсина могут различаться по своей селективности в отношении определенных сайтов расщепления.
Термин "модификации аминокислот" охватывает аминокислотные замены, делеции аминокислот и добавления аминокислот. Термины "аминокислотная замена" и "аминокислотное замещение" применяются в данном документе взаимозаменяемо. Термин "делеции аминокислот" охватывает N-концевые усечения, внутренние делеции и C-концевые усечения. Термин "добавления аминокислот" охватывает N-концевые добавления, вставки аминокислот и C-концевые добавления.
Выражение "Xaa24" (и аналогичные выражения, такие как Xaa44, Xaa56, Xaa78 и т. д.) относится к вариабельной аминокислоте в положении 24 (или 44, 56, 78 и т. д., соответственно) данной аминокислотной последовательности. Перечень последовательностей, прилагаемый к настоящей заявке, содержит одну последовательность белка с вариабельными положениями аминокислот, а именно SEQ ID NO: 3. Вариабельные положения аминокислот в последовательности белка в соответствии с SEQ ID NO: 3 обозначены аминокислотой Xaa (в формате трехбуквенного кода). Число 24 в этом примере указывает на то, что это вариабельное положение представляет собой 24-ю аминокислоту последовательности белка в соответствии с SEQ ID NO: 3. Аналогичным образом, выражение Xaa44 указывает на то, что 44-е положение SEQ ID NO: 3 представляет собой вариабельное положение аминокислоты и т. д.
Применяемый в данном документе термин "человеческий инсулин" относится к человеческому гормону, структура и свойства которого являются хорошо известными. Человеческий инсулин содержит две пептидные цепи (цепи A и B), которые соединены дисульфидными мостиками между остатками цистеина, а именно A-цепь и B-цепь. A-цепь представляет собой пептид из 21 аминокислоты, а B-цепь представляет собой пептид из 30 аминокислот, при этом две цепи соединены тремя дисульфидными мостиками: один между цистеинами в положениях 6 и 11 A-цепи; второй между цистеином в положении 7 A-цепи и цистеином в положении 7 B-цепи; и третий между цистеином в положении 20 A-цепи и цистеином в положении 19 B-цепи.
Применяемые в данном документе термины "производное инсулина" и "инсулиновое производное" относятся к пептиду, который характеризуется молекулярной структурой, которая формально может быть получена из структуры встречающегося в природе инсулина, например, таковой человеческого инсулина, в котором один или несколько органических заместителей (например, жирная кислота) связываются с одной или несколькими аминокислотами. Необязательно, одна или несколько аминокислот, которые присутствуют во встречающемся в природе инсулине, могут быть удалены/или замещены другими аминокислотами, в том числе некодируемыми аминокислотами, или аминокислоты, в том числе некодируемые, могут быть добавлены к встречающемуся в природе инсулину. Примеры производных инсулина включают без ограничения следующие:
(i). 'Инсулин детемир', который отличается от человеческого инсулина тем, что C-концевой треонин в положении B30 удален, а остаток жирной кислоты (остаток миристиновой кислоты) присоединен к эпсилон-аминофункциональной группе лизина в положении B29.
(ii). 'Инсулин деглудек', который отличается от человеческого инсулина тем, что последняя аминокислота удалена из B-цепи и добавлена глутамиловая связь между B29Lys и гексадекандиовой кислотой.
Применяемые в данном документе термины "аналог инсулина" и "инсулиновый аналог" относятся к пептиду, который характеризуется молекулярной структурой, которая формально может быть получена из структуры встречающегося в природе инсулина, например, таковой человеческого инсулина, посредством делеции и/или замены по меньшей мере одного аминокислотного остатка, обнаруженного во встречающемся в природе инсулине, и/или добавления по меньшей мере одного аминокислотного остатка. Добавленный и/или замененный аминокислотный остаток может представлять собой либо кодируемый аминокислотный остаток, либо другой встречающийся в природе остаток, либо полностью синтетический аминокислотный остаток. Примеры аналогов инсулина включают без ограничения следующие:
(i). 'Инсулин аспарт' создают с помощью технологии рекомбинантной ДНК таким образом, что аминокислота B28 в человеческом инсулине (т. е. аминокислота под номером 28 в B-цепи человеческого инсулина), которая представляет собой пролин, замещена аспарагиновой кислотой;
(ii). 'Инсулин лизпро' создают с помощью технологии рекомбинантной ДНК таким образом, что предпоследние остатки лизина и пролина в C-концевом участке B-цепи человеческого инсулина меняют местами (человеческий инсулин: B28Pro-B29Lys; инсулин лизпро: B28Lys-B29Pro);
(iii). 'Инсулин глулизин' отличается от человеческого инсулина тем, что аминокислота аспарагин в положении B3 замещена лизином, а лизин в положении B29 замещен глутаминовой кислотой;
(iv). 'Инсулин гларгин' отличается от человеческого инсулина тем, что аспарагин в положении A21 замещен глицином, а B-цепь удлинена на карбоксиконце на два аргинина.
Применяемый в данном документе термин "выход" относится к соотношению полученного продукта (т. е. инсулина, или производного инсулина, или аналога инсулина), полученного после расщепления трипсином, и препроинсулина (или производного препроинсулина или аналога препроинсулина) перед расщеплением трипсином. Выход зависит от селективности расщепления варианта трипсина в желаемом сайте расщепления и от его экзонуклеазной активности. Чем выше селективность расщепления варианта трипсина только в желаемом сайте расщепления и чем ниже его экзонуклеазная активность, тем выше выход.
Например, "выход инсулина гларгина" или "выход человеческого B31Arg-B32Arg-инсулина" относится к соотношению полученного инсулина гларгина или человеческого B31Arg-B32Arg-инсулина, полученного после расщепления трипсином, и препроинсулина гларгина или человеческого препроинсулина, соответственно, до расщепления трипсином. "Выход инсулина гларгина" и "выход человеческого B31Arg-B32Arg-инсулина" зависит от селективности расщепления варианта трипсина только после B32Arg и от его экзонуклеазной активности. Чем выше селективность расщепления варианта трипсина только после B32Arg и чем ниже его экзонуклеазная активность, тем выше выход.
Применяемый в данном документе термин "повышенная селективность" относится к свойству варианта трипсина расщеплять в меньшей степени нежелательный сайт расщепления и в большей степени желаемый сайт расщепления по сравнению с эталонным трипсином. Повышенная селективность приводит к снижению образования нежелательных побочных продуктов. Эталонный трипсин может представлять собой, например, свиной трипсин дикого типа в соответствии с SEQ ID NO: 1 или вариант трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2.
"Идентичность последовательностей" двух аминокислотных последовательностей указывает на процентное содержание аминокислот, которые являются идентичными в последовательностях. Оптимальное выравнивание последовательностей для сравнения можно выполнять, помимо выполнения вручную, с помощью алгоритма поиска локальной гомологии по Smith and Waterman, 1981, Adv. App. Math. 2, 482-489 (включен в данный документ посредством ссылки), с помощью алгоритма поиска локальной гомологии по Needleman and Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48, 443-453 (включен в данный документ посредством ссылки), с помощью способа поиска сходства по Pearson and Lipman, 1988, Proc. Natl Acad. Sci. USA 85, 2444-2448 (включен в данный документ посредством ссылки) или с помощью компьютерных программ, в которых применяются эти алгоритмы (GAP, BESTFIT, FASTA, BLAST P, BLAST N и TFASTA в пакете программного обеспечения Wisconsin Genetics, Genetics Computer Group, 575 Сайенс-Драйв, Мэдисон, Висконсин).
В контексте настоящего изобретения степень идентичности последовательностей между модифицированной последовательностью и последовательностью, из которой она получена, обычно вычисляется относительно общей длины немодифицированной последовательности, если явно не указано иное. В вариантах осуществления, где ни одна из последовательностей не является модифицированной последовательностью, степень идентичности последовательностей вычисляется относительно общей длины последовательности, определенной как эталонная последовательность, если не указано иное. В вариантах осуществления, где ни одна последовательность не может рассматриваться как эталонная последовательность, степень идентичности последовательностей вычисляется относительно более длинной из двух последовательностей, если не указано иное.
"Молекула нуклеиновой кислоты" в соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения представляет собой дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) или рибонуклеиновую кислоту (РНК). Молекула нуклеиновой кислоты в соответствии с настоящим изобретением может быть в форме молекулы, которая является одноцепочечной или двухцепочечной; и может быть линейной или ковалентно замкнутой с образованием кольца.
Термин "ДНК" относится к молекуле, которая содержит остатки дезоксирибонуклеотидов и которая может полностью или в значительной степени состоять из остатков дезоксирибонуклеотидов. "Дезоксирибонуклеотид" относится к нуклеотиду, который не содержит гидроксильную группу в 2'-положении бета-D-рибофуранозильной группы. Термин "ДНК" включает выделенную ДНК, такую как частично или полностью очищенную ДНК, по существу чистую ДНК, синтетическую ДНК и рекомбинантно созданную ДНК и включает модифицированную ДНК, которая отличается от встречающейся в природе ДНК добавлением, делецией, заменой и/или изменением одного или нескольких нуклеотидов. Такие изменения могут включать добавление ненуклеотидного материала, такое как добавление к концу(ам) ДНК или внутри цепи, например, к одному или нескольким нуклеотидам ДНК. Нуклеотиды в молекулах ДНК также могут включать нестандартные нуклеотиды, такие как не встречающиеся в природе нуклеотиды или химически синтезированные нуклеотиды. Эти измененные ДНК могут упоминаться как аналоги или аналоги встречающихся в природе ДНК. При применении в связи с нуклеотидами термин "встречающиеся в природе" относится к основаниям, представляющим собой аденин (A), цитозин (C), гуанин (G), тимин (T) и урацил (U).
Термин "РНК" относится к молекуле, которая содержит остатки рибонуклеотидов и которая может полностью или в значительной степени состоять из остатков рибонуклеотидов. "Рибонуклеотид" относится к нуклеотиду с гидроксильной группой в 2'-положении бета-D-рибофуранозильной группы. Термин "РНК" включает выделенную РНК, такую как частично или полностью очищенную РНК, по существу чистую РНК, синтетическую РНК и рекомбинантно созданную РНК и включает модифицированную РНК, которая отличается от встречающейся в природе РНК добавлением, делецией, заменой и/или изменением одного или нескольких нуклеотидов. Такие изменения могут включать добавление ненуклеотидного материала, такое как добавление к концу(ам) РНК или внутри цепи, например, к одному или нескольким нуклеотидам РНК. Нуклеотиды в молекулах РНК также могут включать нестандартные нуклеотиды, такие как не встречающиеся в природе нуклеотиды, или химически синтезированные нуклеотиды, или дезоксинуклеотиды. Эти измененные РНК могут упоминаться как аналоги или аналоги встречающихся в природе РНК. В соответствии с настоящим изобретением "РНК" относится к одноцепочечной РНК или двухцепочечной РНК. В одном варианте осуществления РНК представляет собой мРНК, например in vitro транскрибированную РНК (IVT РНК) или синтетическую РНК. РНК также может быть модифицирована, например, одной или несколькими модификациями, повышающими стабильность (например, время полужизни) РНК. Такие модификации известны специалисту в данной области техники и включают, например, 5'-кэпы или аналоги 5'-кэпов.
Молекула нуклеиновой кислоты в соответствии с настоящим изобретением может находиться в векторе/быть включена в вектор. Применяемый в данном документе термин "вектор" включает все векторы, известные специалисту в данной области техники, в том числе плазмидные векторы, космидные векторы, фаговые векторы, такие как векторы на основе фага лямбда, вирусные векторы, такие как аденовирусные или бакуловирусные векторы, или векторы на основе искусственных хромосом, таких как бактериальные искусственные хромосомы (BAC), искусственные хромосомы дрожжей (YAC) или искусственные хромосомы P1 (PAC). Указанные векторы включают векторы экспрессии, а также клонирующие векторы. Векторы экспрессии содержат плазмиды, а также вирусные векторы, и как правило содержат желаемую кодирующую последовательность и соответствующие последовательности ДНК, необходимые для экспрессии функционально связанной кодирующей последовательности в конкретном организме-хозяине (например, бактерии, дрожжах, растении, насекомом или млекопитающем) или в in vitro системах экспрессии. Как правило, клонирующие векторы применяют для разработки и амплификации определенного желаемого фрагмента ДНК и у них могут отсутствовать функциональные последовательности, необходимые для экспрессии желаемых фрагментов ДНК.
В качестве альтернативы, молекула нуклеиновой кислоты в соответствии с настоящим изобретением может быть интегрирована в геном, например, геном клетки-хозяина. Средства и способы интеграции конкретной молекулы нуклеиновой кислоты в геном известны специалисту в данной области техники.
Термин "клетка" или "клетка-хозяин" обычно относится к интактной клетке, т. е. клетке с интактной мембраной, которая не высвобождала свои нормальные внутриклеточные компоненты, такие как ферменты, органеллы или генетический материал. Интактная клетка обычно представляет собой жизнеспособную клетку, т. е. живую клетку, способную выполнять свои нормальные метаболические функции. Применяемый в данном документе указанный термин относится к любой клетке, которую можно трансфицировать или трансформировать экзогенной нуклеиновой кислотой. В некоторых вариантах осуществления клетка при трансфекции или трансформации экзогенной нуклеиновой кислотой и перенесении реципиенту способна экспрессировать нуклеиновую кислоту в реципиенте. Термин "клетка" включает прокариотические клетки, такие как бактериальные клетки, и эукариотические клетки, такие как клетки дрожжей, клетки грибов или клетки млекопитающих. Бактериальные клетки включают клетки от грамотрицательных бактериальных штаммов, таких как штаммы Escherichia coli, Proteus и Pseudomonas, и грамположительных бактериальных штаммов, таких как штаммы Bacillus, Streptomyces, Staphylococcus и Lactococcus. Клетки грибов включают клетки от видов Trichoderma, Neurospora и Aspergillus. Клетки дрожжей включают клетки от видов Saccharomyces (например, Saccharomyces cerevisiae), Schizosaccharomyces (например, Schizosaccharomyces pombe), Pichia (например, Pichia pastoris и Pichia methanolica), Komagataella (например, Komagataella pastoris и Komagataella phaffii) и Hansenula. Клетки млекопитающих включают, например, клетки CHO, клетки BHK, клетки HeLa, клетки COS, HEK293 и т. п. Также можно применять клетки амфибий, клетки насекомых, клетки растений и любые другие клетки, применяемые в данной области техники для экспрессии гетерологичных белков. Клетки млекопитающих особенно подходят для адоптивного переноса, например, клетки от людей, мышей, хомяков, свиней, коз и приматов. Клетки можно получать из большого числа типов тканей, и они включают первичные клетки и линии клеток, такие как клетки иммунной системы, в частности антигенпредставляющие клетки, такие как дендритные клетки и Т-клетки, стволовые клетки, такие как гемопоэтические стволовые клетки и мезенхимальные стволовые клетки, и другие типы клеток. Антигенпредставляющая клетка представляет собой клетку, которая представляет антиген в сочетании с главным комплексом гистосовместимости на своей поверхности. Т-клетки способны распознавать этот комплекс, применяя свой Т-клеточный рецептор (TCR). "Клетка" или "клетка-хозяин" могут быть выделены или представлять собой часть ткани или организма, в частности "организма, отличного от человека".
Предполагается, что применяемый в данном документе термин "организм, отличный от человека", включает отличных от человека приматов или других животных, в частности млекопитающих, таких как коровы, лошади, свиньи, овца, козы, собаки, кошки, кролики или грызуны, такие как мыши, крысы, морские свинки и хомяки.
Применяемый в данном документе термин "лекарственный препарат" относится к веществу/композиции, применяемым в терапии, например для лечения заболевания или нарушения.
В соответствии с настоящим изобретением термин "заболевание или нарушение" относится к любому патологическому или нездоровому состоянию.
Под "лечением" понимается введение соединения, или композиции, или комбинации соединений или композиций субъекту с целью предупреждения или устранения заболевания или нарушения; остановки или замедления течения заболевания или нарушения у субъекта; подавления или замедления развития нового заболевания или нарушения у субъекта; снижения частоты проявления или тяжести симптомов и/или рецидивов у субъекта, который в настоящий момент страдает или ранее страдал заболеванием или нарушением; и/или продления, т. e. увеличения, продолжительности жизни субъекта.
В частности, термин "осуществление лечения/лечение заболевания или нарушения" включает излечение, уменьшение продолжительности, облегчение, предупреждение, замедление или подавление прогрессирования или ухудшения, или предупреждение или замедление начала развития заболевания или нарушения или их симптомов.
Термин "субъект" в соответствии с настоящим изобретением означает субъекта, подлежащего лечению, в частности субъекта, страдающего заболеванием (также называемого "пациентом"), включая людей, отличных от человека приматов или других животных, в частности млекопитающих, таких как коровы, лошади, свиньи, овца, козы, собаки, кошки, кролики или грызуны, такие как мыши, крысы, морские свинки и хомяки. В одном варианте осуществления субъектом/пациентом является человек.
"Композиция" в соответствии с настоящим изобретением содержит эффективное количество варианта свиного трипсина по настоящему изобретению (также упоминается в данном документе как "активное средство"). Композицию в соответствии с настоящим изобретением можно применять (a) в способе изготовления, в частности в способе изготовления для получения пептидов, в частности в способе изготовления для получения человеческого инсулина, производных инсулина и/или аналогов инсулина; (b) в качестве пищевого ингредиента; (c) в качестве кормового ингредиента (d) или для применения в способе изготовления пищевого ингредиента или кормового ингредиента. Композицию в соответствии с настоящим изобретением также можно применять для лечения заболевания или нарушения и, таким образом, она может представлять собой фармацевтическую композицию.
"Фармацевтическая композиция" в соответствии с настоящим изобретением содержит терапевтически эффективное количество варианта свиного трипсина, молекулу нуклеиновой кислоты или клетку-хозяина по настоящему изобретению (также упоминаются в данном документе как "активные средства") для получения желаемой реакции или желаемого эффекта. Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может дополнительно содержать по меньшей мере одно другое активное средство(средства).
В одном варианте осуществления композиции предусмотрены в виде однородной лекарственной формы и их можно получать с помощью известного способа как такового. Композиция может, например, находиться в форме раствора или суспензии.
Композиция или фармацевтическая композиция может дополнительно содержать одно или несколько вспомогательных веществ. В одном варианте осуществления фармацевтической композиции одно или несколько вспомогательных веществ являются все фармацевтически приемлемыми. Применяемое в данном документе выражение "фармацевтически приемлемый" относится к физиологически хорошо переносимому млекопитающим или человеком. В частности оно означает одобренный регуляторным органом федерального правительства или правительства штата или перечисленный в Фармакопее США или другой общепризнанной фармакопее для применения у животных и, более конкретно, у людей.
Композиция или фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может присутствовать в форме композиции, где различные активные средства и вспомогательные вещества (например, разбавители и/или носители) смешаны друг с другом, или может принимать форму комбинированного препарата, где активные средства присутствуют в частично или полностью различной форме. Примером такой комбинации или комбинированного препарата является набор из частей.
Если в контексте не указано иное, термины "активное средство" и "активный ингредиент" относятся к вариантам свиного трипсина по настоящему изобретению, к молекуле нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению и к клетке-хозяину по настоящему изобретению. Термины "активное средство" и "активный ингредиент" применяются в данном документе взаимозаменяемо.
Термин "носитель" относится к органическому или неорганическому компоненту природного или синтетического происхождения, с которым активное средство объединяют с целью облегчения, улучшения или обеспечения возможности использования. В соответствии с настоящим изобретением термин "носитель" также включает один или несколько твердых или жидких наполнителей, разбавителей, вспомогательных средств, вспомогательных веществ, средств-носителей или инкапсулирующих веществ. Такие носители могут представлять собой стерильные жидкости, такие как солевые растворы в воде и маслах, включая масла нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, такие как арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и т. п. Солевые растворы и водный раствор декстрозы, а также растворы глицерина можно также использовать в качестве жидких носителей. Подходящие вспомогательные вещества включают крахмал, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат натрия, моностеарат глицерина, тальк, хлорид натрия, сухое обезжиренное молоко, глицерин, пропилен, гликоль, воду, этанол и т. п. Композиция или фармацевтическая композиция, при необходимости, также может содержать незначительные количества смачивающих или эмульгирующих средств, или буферных средств для доведения pH. Эти композиции могут принимать форму растворов, суспензий, эмульсий, таблеток, пилюль, капсул, порошков, составов с замедленным высвобождением и т. п. Композиция или фармацевтическая композиция может быть составлена в виде суппозитория с общепринятыми связующими веществами и носителями, такими как триглицериды. Соединения по настоящему изобретению могут быть составлены в нейтральной или солевой формах. Фармацевтически приемлемые соли включают соли, образованные со свободными аминогруппами, например, полученные из соляной, фосфорной, уксусной, щавелевой, винной кислот и т. д., и соли, образованные со свободными карбоксильными группами, такие как соли, полученные из гидроксидов натрия, калия, аммония, кальция, железа, изопропиламина, триэтиламина, 2-этиламиноэтанола, гистидина, прокаина и т. д. Такие композиции будут содержать эффективное количество соединения, в некоторых вариантах осуществления в очищенной форме, вместе с подходящим количеством носителя. Состав должен соответствовать способу введения.
Подразумевается что термин "вспомогательное вещество", применяемый в данном документе, включает все вещества, которые могут присутствовать в композиции или в фармацевтической композиции, и которые не являются активными средствами, такие как соли, связующие средства (например, лактоза, декстроза, сахароза, трегалоза, сорбит, маннит), носители, смазывающие средства, загустители, поверхностно-активные средства, консерванты (например, антиоксиданты, лимонная кислота, цитрат натрия, хлорид бензалкония, хлорбутанол, цистеин, метионин, парабены, тимеросал), эмульгаторы, буферные вещества, ароматизаторы или красители.
Соли включены в настоящее изобретение, а также могут представлять собой фармацевтически приемлемые соли. Соли или фармацевтически приемлемые соли этого типа включают без ограничения соли, полученные на основе следующих кислот: соляной, бромистоводородной, серной, азотной, фосфорной, малеиновой, уксусной, салициловой, лимонной, муравьиной, малоновой, янтарной кислот и т. п. Соли и фармацевтически приемлемые соли можно также получать в виде солей щелочных металлов или солей щелочноземельных металлов, таких как соли натрия, соли калия или соли кальция. Соли можно добавлять для корректировки ионной силы или тоничности.
Подходящие буферные вещества для применения в композиции или в фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением включают уксусную кислоту в соли, лимонную кислоту в соли, борную кислоту в соли и фосфорную кислоту в соли.
Композицию или фармацевтическую композицию можно также составлять в виде стабильного лиофилизированного продукта, который восстанавливают подходящим разбавителем, который необязательно содержит одно или несколько вспомогательных веществ, как определено выше.
Активные средства и фармацевтические композиции, описанные в данном документе, можно вводить в терапевтически эффективных количествах. "Терапевтически эффективное количество" относится к количеству, при котором достигается желаемая терапевтическая реакция или желаемый терапевтический эффект отдельно или вместе с дополнительными дозами, в одном варианте осуществления не вызывая неприемлемых побочных эффектов. В случае лечения конкретного заболевания или конкретного состояния желаемая реакция может относиться к подавлению течения заболевания. Это включает замедление прогрессирования заболевания и, в частности, приостановку или обращение прогрессирования заболевания. Желаемая реакция при лечении заболевания или состояния также может заключаться в задержке начала или предупреждении начала указанного заболевания или указанного состояния. Эффективное количество средства или композиции, описанных в данном документе, будет зависеть от состояния, подлежащего лечению, тяжести заболевания, индивидуальных параметров субъекта (включая возраст, физиологическое состояние, размер и вес), продолжительности лечения, типа сопутствующей терапии (при наличии), конкретного пути введения и аналогичных факторов. Соответственно, вводимые дозы средств, описанных в данном документе, могут зависеть от нескольких таких параметров. В случае, если реакция у субъекта является недостаточной при применении исходной дозы, можно применять более высокие дозы (или эффективно более высокие дозы, достигаемые с помощью другого, более локализованного пути введения).
Применяемый в данном документе термин "набор из частей (кратко набор)" относится к изделию, содержащему один или несколько контейнеров и необязательно носитель данных. Указанные один или несколько контейнеров могут быть заполнены одним или несколькими из вышеупомянутых средств или реагентов. В набор могут быть включены дополнительные контейнеры, которые содержат, например, разбавители, буферы и дополнительные реагенты. Указанный носитель данных может представлять собой неэлектронный носитель данных, например носитель графических данных, такой как информационный вкладыш, информационный листок, штрих-код или код доступа, или электронный носитель данных, такой как компакт-диск (CD), цифровой универсальный диск (DVD), микрочип или другой электронный носитель данных на основе полупроводников. Код доступа может обеспечивать доступ к базе данных, например, базе данных в интернете, централизованной или децентрализованной базам данных. Указанный носитель данных может содержать инструкции для применения активных средств по настоящему изобретению. Например, носитель данных может содержать инструкции для применения активных средств (a) в способе изготовления, в частности в способе изготовления для получения пептидов, в частности в способе изготовления для получения человеческого инсулина, производных инсулина и/или аналогов инсулина; (b) в качестве пищевого ингредиента; (c) в качестве кормового ингредиента (d) или для применения в способе изготовления пищевого ингредиента или кормового ингредиента.
Применяемый в данном документе термин "препроинсулин" или аббревиатура "PPI" относится к одноцепочечному предшественнику инсулина, начиная с N-концевой части с препоследовательностью, за которой следуют B-цепь, C-пептид и A-цепь (см. фиг. 1).
Варианты осуществления настоящего изобретения
В нижеследующих абзацах будут описаны определенные элементы настоящего изобретения. Эти элементы могут быть перечислены в определенных вариантах осуществления, однако следует понимать, что их можно комбинировать любым способом и в любом количестве для получения дополнительных вариантов осуществления. Различным образом описанные примеры и варианты осуществления не должны ограничивать настоящее изобретение только явно описанными вариантами осуществления. Это описание следует понимать как поддерживающее и охватывающее варианты осуществления, которые объединяют явно описанные варианты осуществления с любым числом раскрытых элементов. Кроме того, любые перестановки и комбинации всех описанных элементов в данной заявке следует рассматривать как раскрытые с помощью описания настоящей заявки, если в контексте не указано иное.
В первом аспекте настоящее изобретение направлено на вариант свиного трипсина, включающий или состоящий из аминокислотной последовательности, которая характеризуется по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 1, где указанная аминокислотная последовательность отличается от SEQ ID NO: 1 по меньшей мере одной или несколькими аминокислотными заменами в одном или нескольких положениях, соответствующих F24, S44, D56, G78, Y131, S172 и W193 нативного свиного трипсина в соответствии с SEQ ID NO: 1,
при условии, что указанная аминокислотная последовательность не представляет собой нативный свиной трипсин в соответствии с SEQ ID NO: 1; и
при условии, что указанная аминокислотная последовательность не представляет собой вариант свиного трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2.
В одном варианте осуществления первого аспекта
аминокислота в положении, соответствующем F24, не заменена Asp, Glu или Gly;
аминокислота в положении, соответствующем S44, не заменена Tyr;
аминокислота в положении, соответствующем Y131, не заменена Lys или Pro; и/или
аминокислота в положении, соответствующем W193, не заменена Asn или Cys.
В одном варианте осуществления первого аспекта
аминокислота в положении, соответствующем F24, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, Arg, Gln, Ile, Leu, Lys, Met, Ser, Thr и Val;
аминокислота в положении, соответствующем S44, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Leu и Pro;
аминокислота в положении, соответствующем D56, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, His и Trp;
аминокислота в положении, соответствующем G78, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Glu; Pro, Ser и Tyr;
аминокислота в положении, соответствующем Y131, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, Cys, Gln; Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met, Ser, Thr, Trp и Val;
аминокислота в положении, соответствующем S172, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Cys и Thr; и/или
аминокислота в положении, соответствующем W193, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Phe, Ser, Thr и Tyr.
В дополнительном варианте осуществления первого аспекта
аминокислота в положении, соответствующем F24, заменена Arg;
аминокислота в положении, соответствующем S44, заменена Pro;
аминокислота в положении, соответствующем D56, заменена His;
аминокислота в положении, соответствующем G78, заменена Pro;
аминокислота в положении, соответствующем Y131, заменена Met;
аминокислота в положении, соответствующем S172, заменена Ala; и/или
аминокислота в положении, соответствующем W193, заменена Ser.
В одном варианте осуществления первого аспекта указанная аминокислотная последовательность дополнительно отличается от SEQ ID NO: 1 по меньшей мере одной или несколькими аминокислотными заменами в одном или нескольких положениях, соответствующих R99, R107, K125 и K170 нативного свиного трипсина в соответствии с SEQ ID NO: 1.
В одном варианте осуществления первого аспекта
аминокислота в положении, соответствующем R107, не заменена Pro; и/или
аминокислота в положении, соответствующем K170, не заменена Ile или Phe.
В дополнительном варианте осуществления первого аспекта
аминокислота в положении, соответствующем R99, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, Glu, Gly, His, Leu, Phe, Thr, Trp и Tyr;
аминокислота в положении, соответствующем R107, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Asp, Gly, Pro, Ser и Thr;
аминокислота в положении, соответствующем K125, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Leu, Ser и Tyr; и/или
аминокислота в положении, соответствующем K170, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, Gly и Tyr.
В дополнительном варианте осуществления первого аспекта
аминокислота в положении, соответствующем R99, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, His и Asn;
аминокислота в положении, соответствующем R107, заменена Thr;
аминокислота в положении, соответствующем K125, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Cys и Ser; и/или
аминокислота в положении, соответствующем K170, заменена Ala.
В одном варианте осуществления первого аспекта указанная аминокислотная последовательность характеризуется по меньшей мере 91%, или по меньшей мере 92%, или по меньшей мере 93%, или по меньшей мере 94%, или по меньшей мере 95%, или по меньшей мере 96%, или по меньшей мере 97%, или по меньшей мере 98%, или по меньшей мере 99% идентичностью последовательности со свиным трипсином дикого типа в соответствии с SEQ ID NO: 1.
В одном варианте осуществления первого аспекта указанная аминокислотная последовательность отличается от свиного трипсина дикого типа в соответствии с SEQ ID NO: 1 на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 или 23 аминокислотные замены.
В одном варианте осуществления первого аспекта указанная аминокислотная последовательность представляет собой SEQ ID NO: 3, где
Xaa24 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Asn, Arg, Gln, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Ser, Thr и Val;
Xaa44 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Leu, Pro и Ser;
Xaa56 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, His и Trp;
Xaa78 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Glu, Gly, Pro, Ser и Tyr;
Xaa99 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Arg, Asn, Asp, Glu, Gly, His, Leu, Phe, Thr, Trp и Tyr;
Xaa107 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Arg, Asp, Gly, Pro, Ser и Thr;
Xaa125 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Leu, Lys, Ser и Tyr;
Xaa131 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, Cys, Gln; Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr и Val;
Xaa170 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Asn, Gly, Lys и Tyr;
Xaa172 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Cys, Ser и Thr; и/или
Xaa193 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Phe, Ser, Thr, Trp и Tyr;
при условии, что SEQ ID NO: 3 не представляет собой свиной трипсин дикого типа в соответствии с SEQ ID NO: 1; и
при условии, что SEQ ID NO: 3 не представляет собой вариант свиного трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2.
В дополнительном варианте осуществления первого аспекта указанная аминокислотная последовательность представляет собой SEQ ID NO: 3, где
Xaa24 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Phe и Arg;
Xaa44 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ser и Pro;
Xaa56 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Asp и His;
Xaa78 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Gly и Pro;
Xaa99 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Arg, His и Asn;
Xaa107 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Arg и Thr;
Xaa125 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Cys, Lys и Ser;
Xaa131 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Met и Tyr;
Xaa170 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala и Lys;
Xaa172 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala и Ser; и/или
Xaa193 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ser и Trp;
при условии, что SEQ ID NO: 3 не представляет собой свиной трипсин дикого типа в соответствии с SEQ ID NO: 1; и
при условии, что SEQ ID NO: 3 не представляет собой вариант свиного трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2.
В одном варианте осуществления первого аспекта указанная аминокислотная последовательность выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4-119. В одном варианте осуществления указанная аминокислотная последовательность выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97 и SEQ ID NO: 98.
В одном варианте осуществления первого аспекта указанный вариант способен к расщеплению пептида с общей формулой A-Lys-Thr-Arg-Arg-B с получением продукта расщепления с общей формулой A-Lys-Thr-Arg-Arg с выходом, составляющим по меньшей мере 80% (например, по меньшей мере 81%, по меньшей мере 82%, по меньшей мере 83%, по меньшей мере 84%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 86%, по меньшей мере 87%, по меньшей мере 88%, по меньшей мере 89%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%),
где A представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот; и
где B представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот.
В дополнительных вариантах осуществления первого аспекта A представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из 1-105 аминокислот (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, или 105 аминокислот), и B представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из 1-105 аминокислот (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, или 105 аминокислот).
В одном варианте осуществления первого аспекта вариант проявляет повышенную селективность в отношении расщепления человеческого препроинсулина, препроинсулина гларгина, препроинсулина лизпро, препроинсулина аспарта или препроинсулина глулизина в C-концевом положении относительно положения B32-Arg по сравнению с вариантом свиного трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2.
В некоторых вариантах осуществления первого аспекта настоящего изобретения вариант свиного трипсина является лиофилизированным.
Во втором аспекте настоящее изобретение направлено на молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую
- вариант свиного трипсина, определенный в первом аспекте настоящего изобретения; или
- молекулу-предшественника, представляющую собой трипсиноген, варианта свиного трипсина, определенного в первом аспекте настоящего изобретения.
В одном варианте осуществления второго аспекта указанная молекула нуклеиновой кислоты содержится в векторе или интегрирована в геном.
В третьем аспекте настоящее изобретение направлено на клетку-хозяина, содержащую молекулу нуклеиновой кислоты, определенную во втором аспекте. В одном варианте осуществления клетка-хозяин представляет собой рекомбинантную клетку-хозяина.
В четвертом аспекте настоящее изобретение направлено на способ получения варианта свиного трипсина по настоящему изобретению, включающий стадии:
культивирования клетки-хозяина в соответствии с третьим аспектом; и
выделения молекулы-предшественника, представляющей собой трипсиноген, варианта свиного трипсина, из культуральной среды или из клетки-хозяина.
В одном варианте осуществления четвертого аспекта способ включает дополнительную стадию:
активации молекулы-предшественника, представляющей собой трипсиноген, с получением таким образом указанного варианта свиного трипсина.
Активацию молекулы-предшественника, представляющей собой трипсиноген, можно осуществлять химически или ферментативно. Например, pH можно доводить таким образом, чтобы происходила аутоактивация. В другом примере протеазу (например, энтерокиназу) можно добавлять для ферментативной активации трипсинoгена.
В пятом аспекте настоящее изобретение направлено на вариант свиного трипсина по настоящему изобретению, или молекулу нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению, или клетку-хозяина по настоящему изобретению для применения в качестве лекарственного препарата; для применения в качестве пищевого ингредиента; для применения в качестве кормового ингредиента или для применения в способе изготовления пищевого ингредиента или кормового ингредиента.
Один вариант осуществления пятого аспекта направлен на вариант свиного трипсина по настоящему изобретению для применения в качестве пищевого ингредиента; для применения в качестве кормового ингредиента или для применения в способе изготовления пищевого ингредиента или кормового ингредиента.
В одном варианте осуществления пятого аспекта лекарственный препарат предназначен для применения для лечения отека (особенно отека, вызванного травмой), воспаления (особенно воспаления, вызванного травмой), тромбофлебита, активированного артроза, дефицита пищеварительных ферментов (например, вызванного недостаточностью поджелудочной железы) и/или нарушений пищеварения.
Другими словами, настоящее изобретение направлено на вариант свиного трипсина по настоящему изобретению, или молекулу нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению, или клетку-хозяина по настоящему изобретению для применения для лечения отека (особенно отека, вызванного травмой), воспаления (особенно воспаления, вызванного травмой), тромбофлебита, активированного артроза, дефицита пищеварительных ферментов (например, вызванного недостаточностью поджелудочной железы) и/или нарушений пищеварения.
Что касается применения в качестве пищевого ингредиента, в качестве кормового ингредиента или в способе изготовления пятый аспект можно альтернативно сформулировать следующим образом:
применение варианта свиного трипсина по настоящему изобретению в качестве пищевого ингредиента.
Применение варианта свиного трипсина по настоящему изобретению в качестве кормового ингредиента.
Применение варианта свиного трипсина по настоящему изобретению в способе изготовления пищевого ингредиента или кормового ингредиента.
В шестом аспекте настоящее изобретение направлено на применение варианта свиного трипсина по настоящему изобретению в способе получения человеческого инсулина, аналога инсулина или производного инсулина.
Шестой аспект охватывает применение вариантов свиного трипсина по настоящему изобретению как в способах in vitro, так и в способах in vivo для получения человеческого инсулина, аналога инсулина или производного инсулина.
Что касается применения способов in vivo шестой аспект можно альтернативно сформулировать следующим образом:
Вариант свиного трипсина в соответствии с первым аспектом для применения для in vivo получения человеческого инсулина, аналога инсулина или производного инсулина.
В одном варианте осуществления шестого аспекта аналог инсулина выбран из группы, состоящей из инсулина аспарта, инсулина лизпро, инсулина глулизина и инсулина гларгина.
В седьмом аспекте настоящее изобретение направлено на применение варианта свиного трипсина по настоящему изобретению для расщепления белка или пептида с общей формулой A-Lys-Thr-Arg-Arg-B,
где A представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот; и
где B представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот.
В дополнительных вариантах осуществления седьмого аспекта A представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из 1-105 аминокислот (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, или 105 аминокислот), и B представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из 1-105 аминокислот (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, или 105 аминокислот).
В одном варианте осуществления седьмого аспекта расщепление приводит к получению продукта расщепления A-Lys-Thr-Arg-Arg. В дополнительных вариантах осуществления седьмого аспекта расщепление приводит к получению продукта расщепления A-Lys-Thr-Arg-Arg с выходом, составляющим по меньшей мере 80% (например, по меньшей мере 81%, по меньшей мере 82%, по меньшей мере 83%, по меньшей мере 84%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 86%, по меньшей мере 87%, по меньшей мере 88%, по меньшей мере 89%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99%).
В восьмом аспекте настоящее изобретение направлено на композицию, содержащую вариант свиного трипсина по настоящему изобретению, или молекулу нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению, или клетку-хозяина по настоящему изобретению.
В одном варианте осуществления восьмого аспекта композиция дополнительно содержит вспомогательное вещество и/или по меньшей мере одно другое активное средство.
В некоторых вариантах осуществления восьмого аспекта композиция представляет собой фармацевтическую композицию.
В некоторых вариантах осуществления восьмого аспекта композиция или фармацевтическая композиция является лиофилизированной.
В настоящем изобретении также предусмотрена комбинация варианта свиного трипсина по настоящему изобретению (или молекулы нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению или клетки-хозяина по настоящему изобретению) с по меньшей мере одним другим активным фармацевтическим ингредиентом. В одном варианте осуществления комбинацию варианта свиного трипсина по настоящему изобретению и по меньшей мере одного другого активного фармацевтического ингредиента можно применять либо посредством раздельного введения активного фармацевтического ингредиента пациенту, либо в виде комбинации продуктов, в которой множество активных фармацевтических ингредиентов присутствует в одной фармацевтической композиции. При раздельном введении введение может происходить одновременно или последовательно в любом порядке. Количество активного средства по настоящему изобретению и другого(других) активного(активных) фармацевтического(фармацевтических) ингредиента(ингредиентов), а также относительные сроки введения будут выбирать для достижения желаемого комбинированного терапевтического эффекта. Введение комбинации можно осуществлять одновременно в: (1) одной фармацевтической композиции, содержащей все активные фармацевтические ингредиенты; или (2) отдельных фармацевтических композициях, каждая из которых содержит по меньшей мере один из активных фармацевтических ингредиентов. В качестве альтернативы, комбинацию можно вводить отдельно последовательным образом, где одно средство для лечения вводится первым, а другое вводится вторым, или наоборот. Такое последовательное введение может осуществляться с близкими временными промежутками или с отдаленными временными промежутками.
Примеры
Следующие примеры изложены для того, чтобы обеспечить специалистов в данной области техники полным раскрытием и описанием того, как осуществлять и применять соединения, композиции и способы по настоящему изобретению, и они не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения каким-либо образом, как указано в прилагаемой формуле изобретения. Были приложены усилия для обеспечения точности в отношении применяемых чисел (например, количеств, температуры и т. п.), однако необходимо учитывать некоторые экспериментальные ошибки и отклонения. Если не указано иное, то части представляют собой части по весу, молекулярный вес представляет собой средний молекулярный вес, температура представлена в градусах Цельсия, а давление является атмосферным или близким к атмосферному.
Пример 1: Мутагенез и клонирование синтетической нуклеотидной последовательности, кодирующей свиной трипсин
Улучшение ферментов может быть достигнуто с помощью ферментной инженерии. Эта методика включает развитие вариантов исходного фермента с улучшенными свойствами. Для обеспечения вариантов фермента сначала вводили мутации на уровне гена в синтетическую нуклеотидную последовательность, кодирующую свиной панкреатический трипсин, с помощью обычных молекулярно-биологических способов. Гены вариантов фермента клонировали в вектор экспрессии pLE1A17 (производное pRSF-1b, Novagen). Полученные плазмиды применяли для трансформации клеток E. coli BL21 (DE3).
Пример 2: Экспрессия варианта свиного трипсинoгена
Рекомбинантную экспрессию свиного трипсиногена в E. coli проводили посредством аутоиндукции по F.W. Studier (F.W. Studier (2005) Prot. Exp. Pur. 41:207-234) с применением среды ZYM-5052 с добавлением канамицина (50 мг/л) при 30°C. Как только глюкоза в культуре метаболизируется, присутствие лактозы индуцирует экспрессию. Глицерин применяли в качестве C-источника. Экспрессию проводили в микропланшете, а также во встряхиваемой колбе со шкалой.
Для экспериментов со встряхиваемой колбой прекультуру в 20 мл среды ZYM-505 с добавлением канамицина (50 мг/л) с 50 мкл глицерина (36%) инкубировали в течение 24 ч при 30°C и 200 об/мин. Достигали значения OD600, составляющего 12,5-14. Для основной культуры применяли 500 мкл прекультуры для инокуляции 100 мл среды ZYM-5052 с добавлением канамицина (50 мг/л). После инкубации в течение 24 ч при 30°C и 200 об./мин достигали значения OD600, находящегося в диапазоне 6,5-7,5. После центрифугирования осадки клеток хранили при -20°C.
Пример 3: Разрушение клеток и активация трипсиногена
Периплазматический трипсиноген высвобождали посредством осмотического шока. 3,6 г клеток (полученных из примера 2) ресуспендировали в 10 мл лизирующего буфера (10 мM Трис-HCl, pH=8, 25 мM MgCl2, 200 мM NaCl) до получения гомогенной суспензии. Суспензию перемешивали в течение 24 ч при 5°C и 180 об/мин. После центрифугирования супернатант подвергали активации.
Для активации трипсиногена применяли энтерокиназу из свиного кишечника (Sigma, продукт № E0885; 40 единиц; определение единиц: одна единица энтерокиназы будет продуцировать 1,0 наномоль трипсина из трипсиногена в минуту при pH 5,6 при 25°C).
Энтерокиназу добавляли к бесклеточному экстракту до конечной концентрации 17 мЕд/мл. Реакционную смесь инкубировали в течение 16-24 ч при 30°C. Полученный раствор трипсина хранили при -20°C.
Пример 4: Анализ для определения триптической активности очищенного варианта рекомбинантного свиного трипсина
Активность трипсина определяли с применением хромозима TRY (Roche Diagnostics GmbH) в 100 мM Трис, pH 8,0, 20 мM CaCl2 при 25°C. Хромозим TRY представляет собой субстрат (ацетат карбобензокси-L-валил-L-глицил-L-аргинин-4-нитранилида) для надежного фотометрического определения активности протеаз, гидролизующих пептиды на карбоксильной стороне аргинина (трипсин, эндопротеиназа Arg-C и другие). Фотометрическое измерение проводили при 405 нм.
Пример 5: Результаты скрининга с человеческим препроинсулином.
Исходный скрининг всех вариантов трипсина проводили с человеческим препроинсулином (PPI) в качестве модельной системы. PPI растворяли в буферном растворе (pH=8,3) до концентрации 0,75 г/л. Раствор варианта трипсина получали в соответствии с примером 3 и добавляли к реакционной смеси без дополнительной обработки. Периодически отбирали образцы, подкисляли с помощью 1 н. HCl и анализировали с помощью HPLC (пример 7).
Рассматривали два аспекта: (1) проявляет ли вариант трипсина какую-либо активность в отношении расщепления PPI (результаты показаны в таблице 1, столбец A); (2) проявляет ли вариант трипсина активность в отношении расщепления PPI: если селективность расщепления трипсином улучшена по сравнению с SEQ ID NO: 2 (результаты показаны в таблице 1, колонка B). Для оценки селективности ди-Arg вариантов трипсина образование человеческого B31Arg-B32Arg-инсулина отслеживали с помощью HPLC (см. пример 7) и сравнивали с SEQ ID NO: 2. Селективность рассчитывали в соответствии с
где
[диArg] = концентрация человеческого B31Arg-B32Arg-инсулина
[моноArg] = концентрация человеческого дезB32Arg-инсулина
[дезThr] = концентрация человеческого дезB30Thr-инсулина
[UI] = концентрация неизвестного промежуточного продукта расщепления
Таблица 1 - Результаты скрининга с человеческим препроинсулином
| Мутант | A | B |
| SEQ ID NO: | Активность расщепления PPI | Селективность |
| 2 | да | 62,1% |
| 4 | да | >90% |
| 5 | да | >90% |
| 6 | да | >90% |
| 7 | да | >90% |
| 8 | да | >90% |
| 9 | да | >90% |
| 10 | да | >90% |
| 11 | да | >90% |
| 12 | да | >90% |
| 13 | да | >90% |
| 14 | да | >90% |
| 15 | да | >90% |
| 16 | да | >90% |
| 17 | да | >80% |
| 18 | да | >90% |
| 19 | да | >90% |
| 20 | да | >90% |
| 21 | да | >90% |
| 22 | да | >90% |
| 23 | да | >90% |
| 24 | да | >90% |
| 25 | да | >90% |
| 26 | да | >80% |
| 27 | да | >80% |
| 28 | да | >90% |
| 29 | да | >90% |
| 30 | да | >70% |
| 31 | да | >62,1% |
| 32 | да | >90% |
| 33 | да | >90% |
| 34 | да | >90% |
| 35 | да | >90% |
| 36 | да | >90% |
| 37 | да | >90% |
| 38 | да | >80% |
| 39 | да | >90% |
| 40 | да | >80% |
| 41 | да | >90% |
| 42 | да | >90% |
| 43 | да | >80% |
| 44 | да | >80% |
| 45 | да | >65% |
| 46 | да | >70% |
| 47 | да | >90% |
| 48 | да | >80% |
| 49 | да | >80% |
| 50 | да | >65% |
| 51 | да | >70% |
| 52 | да | >90% |
| 53 | да | >90% |
| 54 | да | >90% |
| 55 | да | >90% |
| 56 | да | >90% |
| 57 | да | >90% |
| 58 | да | >90% |
| 59 | да | >90% |
| 60 | да | >90% |
| 61 | да | >80% |
| 62 | да | >90% |
| 63 | да | >90% |
| 64 | да | >90% |
| 65 | да | >80% |
| 66 | да | >90% |
| 67 | да | >90% |
| 68 | да | >70% |
| 69 | да | >70% |
| 70 | да | >70% |
| 71 | да | >62,1% |
| 72 | да | >90% |
| 73 | да | >90% |
| 74 | да | >90% |
| 75 | да | >90% |
| 76 | да | >90% |
| 77 | да | >90% |
| 78 | да | >80% |
| 79 | да | >90% |
| 80 | да | >90% |
| 81 | да | >90% |
| 82 | да | >90% |
| 83 | да | >90% |
| 84 | да | >90% |
| 85 | да | >90% |
| 86 | да | >90% |
| 87 | да | >90% |
| 88 | да | >90% |
| 89 | да | >90% |
| 90 | да | >90% |
| 91 | да | >90% |
| 92 | да | >90% |
| 93 | да | >90% |
| 94 | да | >90% |
| 95 | да | >90% |
| 96 | да | >90% |
| 97 | да | >90% |
| 98 | да | >90% |
| 99 | да | >80% |
| 100 | да | >90% |
| 101 | да | >90% |
| 102 | да | >90% |
| 103 | да | >90% |
| 104 | да | >90% |
| 105 | да | >90% |
| 106 | да | >90% |
| 107 | да | >90% |
| 108 | да | >80% |
| 109 | да | >90% |
| 110 | да | >90% |
| 111 | да | >80% |
| 112 | да | >90% |
| 113 | да | >90% |
| 114 | да | >90% |
| 115 | да | >90% |
| 116 | да | >90% |
| 117 | да | >90% |
| 118 | да | >90% |
| 119 | да | >90% |
| 120 | да | 1,4% |
| 121 | да | 4,6% |
| 122 | да | 59,4% |
| 123 | да | 60,7% |
| 124 | да | 27,6% |
| 125 | да | 12,2% |
| 126 | да | 7,2% |
| 127 | да | 20,5% |
| 128 | да | 57,1% |
| 129 | да | 44,8% |
| 130 | да | 33,8% |
Пример 6: Расщепление препроинсулина гларгина с применением рекомбинантной SEQ ID NO: 2 (вариант трипсина S172A) и ее оптимизированных вариантов
Эти эксперименты проводили при 20°C и значении pH, составляющем 8,3 (буферный раствор), и объем доводили до 1000 мл по шкале.
Раствором препроинсулина гларгина наполняли соответствующий термостатируемый реакционный сосуд и реакцию запускали добавлением раствора варианта свиного трипсина. Образцы отбирали через определенные промежутки времени; ферментативную реакцию немедленно останавливали посредством подкисления раствора образца с применением 1 н. или 2 н. раствора HCl. Образцы анализировали с помощью HPLC (см. пример 7).
На фигуре 2 показана кинетика реакции SEQ ID NO: 2. На фигуре показан зависящий от времени ход образования инсулина гларгина, а также образование наиболее заметных побочных продуктов расщепления B31Arg-инсулина гларгина (расщепление после положения 31 в B-цепи инсулина гларгина, называемого "дез-Arg") и дезB30Thr-инсулина гларгина (расщепление после положения 29 B-цепи инсулина гларгина, называемого "дез-Thr").
Выбранными вариантами подвергали расщеплению препроинсулин гларгин. Результаты показаны в таблице 2. Содержание инсулина гларгина, дезB32Arg-инсулина гларгина и дезB29Thr-инсулина гларгина представлено в виде площади пика на аналитической хроматограмме HPLC в конце расщепления и представляет собой соотношение инсулина гларгина и побочных продуктов. Кроме того, молярный выход расщепления представлен в соответствии с
где
n(инсулина гларгина) = количество молей образовавшегося инсулина гларгина
n(препроинсулина гларгина) = количество молей использованного препроинсулина гларгина
На фигуре 4 показана кинетика реакции варианта свиного трипсина № 105 (SEQ ID NO: 105) в качестве примера оптимизированного варианта трипсина.
Таблица 2 - Сравнение результатов расщепления с препроинсулином гларгином
| Мутант | Чистота | Выход | ||
| SEQ ID NO: | Инсулин гларгин %площади |
дезArg %площади |
дезThr %площади |
% |
| 2 | 53,6 | 19,1 | 5,2 | 65 |
| 4 | 86,4 | <0,5 | 2,9 | >90 |
| 9 | 85,2 | <0,5 | 3,6 | >90 |
| 10 | 82,7 | <0,5 | 2,6 | >90 |
| 11 | 84,1 | <0,5 | 2,2 | >90 |
| 14 | 84,5 | <0,5 | 2,4 | >90 |
| 18 | 82,6 | <0,5 | 1,9 | >80 |
| 19 | 81,0 | <0,5 | 3,3 | >80 |
| 24 | 82,3 | <0,5 | 2,8 | >80 |
| 25 | 80,4 | <0,5 | 2,8 | >80 |
| 36 | 87,6 | <0,5 | 1,5 | >90 |
| 41 | 82,8 | <0,5 | 1,9 | >90 |
| 53 | 81,3 | <0,5 | 2,1 | >80 |
| 56 | 85,3 | <0,5 | 2,0 | >90 |
| 57 | 87,5 | <0,5 | 2,3 | >90 |
| 73 | 83,0 | <0,5 | 2,2 | >90 |
| 74 | 82,4 | <0,5 | 2,1 | >80 |
| 77 | 88,2 | 0,5 | 1,6 | >90 |
| 78 | 85,1 | 0,5 | 1,6 | >90 |
| 79 | 87,8 | 0,7 | 0,3 | >90 |
| 80 | 90,1 | 0,9 | 0,5 | >90 |
| 81 | 89,7 | 1,2 | 0,5 | >90 |
| 82 | 83,8 | 0,6 | 0,3 | >80 |
| 83 | 89,0 | <0,5 | 1,2 | >90 |
| 84 | 85,4 | 0,6 | 1,6 | >90 |
| 85 | 85,4 | 1,1 | 0,2 | >90 |
| 86 | 79,3 | 0,8 | 0,1 | >80 |
| 87 | 83,8 | 0,6 | 0,3 | >80 |
| 88 | 84,3 | 0,7 | 1,9 | >90 |
| 89 | 88,1 | 0,5 | 1,2 | >90 |
| 90 | 89,5 | 0,9 | 0,2 | >90 |
| 91 | 86,8 | 1,0 | 0,3 | >90 |
| 92 | 88,1 | 0,9 | 0,6 | >90 |
| 93 | 71,3 | 0,7 | 0,3 | >75 |
| 94 | 85,2 | 0,8 | 0,3 | >90 |
| 95 | 90,0 | 1,0 | 0,6 | >90 |
| 96 | 78,7 | 0,7 | 0,3 | >80 |
| 97 | 89,4 | <0,5 | 1,2 | >90 |
| 98 | 89,4 | 0,9 | 2,7 | >90 |
| 99 | 89,2 | 0,9 | 1,0 | >90 |
| 100 | 80,0 | 0,7 | 0,3 | >80 |
| 101 | 89,2 | 1,0 | 0,4 | >90 |
| 102 | 88,7 | 0,4 | 1,2 | >90 |
| 103 | 90,7 | 0,9 | 1,4 | >90 |
| 104 | 89,3 | 1,1 | 1,0 | >90 |
| 105 | 88,9 | 1,0 | 0,9 | >90 |
| 106 | 86,8 | 0,7 | 1,0 | >90 |
| 107 | 88,1 | 0,4 | 1,3 | >90 |
| 108 | 88,8 | 0,8 | 0,7 | >90 |
| 109 | 85,9 | 0,7 | 0,5 | >80 |
| 110 | 90,6 | 0,9 | 0,6 | >90 |
| 111 | 85,9 | 0,7 | 2,6 | >90 |
| 113 | 86,1 | 0,5 | 1,7 | >90 |
| 115 | 83,5 | 0,8 | 0,6 | >90 |
| 116 | 82,7 | 0,5 | 0,6 | >90 |
| 117 | 85,0 | 0,6 | 0,8 | >90 |
| 118 | 87,6 | 0,6 | 1,0 | >90 |
| 119 | 85,2 | 0,6 | 1,0 | >90 |
Как ясно видно из таблицы 2, оптимизированные варианты трипсина демонстрируют повышенную селективность расщепления в отношении препроинсулина гларгина, что приводит к значительному увеличению выхода, сопровождаемому снижением профиля примесей, при рассмотрении B31Arg-инсулина гларгина (дезArg) и дезB30Thr-инсулина гларгина (дезThr). Сравнение таблиц 1 и 2 демонстрирует очень высокую сопоставимость результатов расщепления, полученных с человеческим препроинсулином и препроинсулином гларгина.
Пример 7: Способ HPLC
Способ Высокоэффективная жидкостная хроматография
Колонка Изготовитель: Macherey & Nagel
Торговое наименование: Nucleosil 120-5 C18
Размер: 250 мм x 4 мм
Подвижная фаза A: 45 мM натрий-фосфатный буфер (pH 2,5). 315 мM NaCl. 25% (объем/объем) ацетонитрила
Подвижная фаза B 45 мM натрий-фосфатный буфер (pH 2,5). 55 мM NaCl. 65% (объем/объем) ацетонитрила
Градиент время/мин Подвижная фаза A Подвижная фаза B
0 мин 94% 6%
30 мин линейный 90% 10%
Вводимый объем: 5 мкл
Обнаружение: UV (215 нм)
Пример 8: Экзопептидазная активность
Эти эксперименты проводили при 8°C и значении pH, составляющем 8,3 (буферный раствор).
Раствором инсулина гларгина (0,5 г/л) наполняли соответствующий термостатируемый реакционный сосуд и реакцию запускали добавлением раствора SEQ ID NO: 2 (100 ед/гинсулина). Образцы отбирали через определенные промежутки времени и ферментативную реакцию немедленно останавливалипосредством подкисления раствора образца с применением 1 н. раствора HCl. Образцы анализировали с помощью HPLC (см. пример 7). Кинетика реакции показана на фиг. 3.
Как ясно видно на фиг. 3, концентрация инсулина гларгина снижается с течением времени. Помимо образования небольшого количества B30-дезThr-инсулина гларгина, основным продуктом, образующимся в этой реакции, является B32-дезArg-инсулин гларгин, что указывает на то, что трипсин под SEQ ID NO: 2 способен отщеплять единственный аргинин в положении B32 посредством экзопептидазной активности.
Таблица 3: Перечень вариантов трипсина
| SEQ ID NO: | F24 | S44 | D56 | G78 | R99 | R107 | K125 | Y131 | K170 | S172 | W193 |
| 1 | F | S | D | G | R | R | K | Y | K | S | W |
| 2 | F | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | W |
| 3 | X | X | X | X | X | X | X | X | X | X | X |
| 4 | R | S | D | G | A | R | K | Y | K | A | S |
| 5 | R | S | D | G | L | R | K | Y | K | A | S |
| 6 | R | S | D | G | F | R | K | Y | K | A | S |
| 7 | R | S | D | G | W | R | K | Y | K | A | S |
| 8 | R | S | D | G | G | R | K | Y | K | A | S |
| 9 | R | S | D | G | Y | R | K | Y | K | A | S |
| 10 | R | S | D | G | T | R | K | Y | K | A | S |
| 11 | R | S | D | G | N | R | K | Y | K | A | S |
| 12 | R | S | D | G | D | R | K | Y | K | A | S |
| 13 | R | S | D | G | E | R | K | Y | K | A | S |
| 14 | R | S | D | G | H | R | K | Y | K | A | S |
| 15 | R | S | D | G | R | R | A | Y | K | A | S |
| 16 | R | S | D | G | R | R | G | Y | K | A | S |
| 17 | R | S | D | G | R | R | Y | Y | K | A | S |
| 18 | R | S | D | G | R | R | S | Y | K | A | S |
| 19 | R | S | D | G | R | R | C | Y | K | A | S |
| 20 | R | S | D | G | R | R | E | Y | K | A | S |
| 21 | R | S | D | G | R | R | H | Y | K | A | S |
| 22 | R | S | D | G | R | R | L | Y | K | A | S |
| 23 | R | S | D | G | R | R | Q | Y | K | A | S |
| 24 | R | S | D | G | R | R | K | Y | Y | A | S |
| 25 | R | S | D | G | R | R | K | Y | A | A | S |
| 26 | R | S | D | G | R | R | K | Y | G | A | S |
| 27 | R | S | D | G | R | R | K | Y | N | A | S |
| 28 | V | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 29 | L | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 30 | S | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 31 | Q | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 32 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 33 | R | S | D | G | R | T | K | Y | K | A | S |
| 34 | R | S | D | G | R | R | K | A | K | A | S |
| 35 | R | S | D | G | R | R | K | L | K | A | S |
| 36 | R | S | D | G | R | R | K | M | K | A | S |
| 37 | R | S | D | G | R | R | K | T | K | A | S |
| 38 | R | S | D | G | R | R | K | C | K | A | S |
| 39 | R | S | D | G | R | R | K | N | K | A | S |
| 40 | R | S | D | G | R | R | K | E | K | A | S |
| 41 | R | S | D | G | R | R | K | H | K | A | S |
| 42 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 43 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | T | S |
| 44 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | S | S |
| 45 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | C | S |
| 46 | A | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 47 | I | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 48 | M | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 49 | T | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 50 | N | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 51 | K | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 52 | R | L | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 53 | R | P | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 54 | R | S | A | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 55 | R | S | W | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 56 | R | S | N | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 57 | R | S | H | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 58 | R | S | D | G | R | P | K | Y | K | A | S |
| 59 | R | S | D | G | R | G | K | Y | K | A | S |
| 60 | R | S | D | G | R | S | K | Y | K | A | S |
| 61 | R | S | D | G | R | D | K | Y | K | A | S |
| 62 | R | S | D | G | R | R | K | V | K | A | S |
| 63 | R | S | D | G | R | R | K | I | K | A | S |
| 64 | R | S | D | G | R | R | K | W | K | A | S |
| 65 | R | S | D | G | R | R | K | G | K | A | S |
| 66 | R | S | D | G | R | R | K | S | K | A | S |
| 67 | R | S | D | G | R | R | K | Q | K | A | S |
| 68 | R | S | D | G | R | R | K | D | K | A | S |
| 69 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | F |
| 70 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | Y |
| 71 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | T |
| 72 | R | S | D | S | R | R | K | Y | K | A | S |
| 73 | R | S | D | A | R | R | K | Y | K | A | S |
| 74 | R | S | D | P | R | R | K | Y | K | A | S |
| 75 | R | S | D | Y | R | R | K | Y | K | A | S |
| 76 | R | S | D | E | R | R | K | Y | K | A | S |
| 77 | R | P | H | G | H | T | C | M | K | A | S |
| 78 | R | S | H | P | H | T | C | Y | K | A | S |
| 79 | R | P | H | P | H | R | A | M | K | A | S |
| 80 | R | S | H | P | H | T | S | M | K | A | S |
| 81 | R | S | H | P | H | T | A | M | K | A | S |
| 82 | R | P | H | P | H | R | C | M | K | A | S |
| 83 | R | P | H | P | N | T | S | M | K | A | S |
| 84 | R | P | H | P | N | T | S | M | K | S | S |
| 85 | R | P | H | P | H | T | C | M | K | A | S |
| 86 | R | P | D | P | A | T | S | M | K | A | S |
| 87 | R | P | H | P | H | T | S | M | K | A | S |
| 88 | R | P | H | P | H | T | S | M | K | S | S |
| 89 | R | P | H | P | H | T | A | M | K | A | S |
| 90 | R | P | H | P | H | T | A | M | K | S | S |
| 91 | R | P | H | P | A | T | S | M | K | A | S |
| 92 | R | P | H | P | A | T | C | M | K | A | S |
| 93 | R | S | D | P | N | T | C | M | A | A | S |
| 94 | R | P | H | G | N | R | C | M | A | A | S |
| 95 | R | P | H | P | H | R | S | M | A | A | S |
| 96 | R | P | D | P | H | R | S | M | A | A | S |
| 97 | R | P | H | P | A | T | A | M | A | A | S |
| 98 | R | P | H | P | A | T | A | M | A | S | S |
| 99 | R | S | H | P | N | T | S | Y | A | A | S |
| 100 | R | P | D | P | H | T | C | M | A | A | S |
| 101 | R | S | H | P | N | T | S | M | A | A | S |
| 102 | R | P | H | P | H | T | S | M | A | A | S |
| 103 | R | P | H | P | H | T | S | M | A | S | S |
| 104 | R | S | H | P | N | T | C | M | A | A | S |
| 105 | R | S | H | P | N | T | A | Y | A | A | S |
| 106 | R | S | H | P | A | T | C | M | A | A | S |
| 107 | R | P | H | P | H | T | C | M | A | A | S |
| 108 | R | P | D | P | A | T | C | M | A | A | S |
| 109 | R | S | H | G | N | T | C | M | A | A | S |
| 110 | R | S | H | P | H | R | C | M | A | A | S |
| 111 | R | P | H | P | H | T | S | Y | A | A | S |
| 112 | R | P | H | P | H | T | S | Y | A | S | S |
| 113 | R | P | H | G | A | T | A | Y | A | A | S |
| 114 | R | P | H | G | A | T | A | Y | A | S | S |
| 115 | R | P | H | G | N | T | S | M | K | A | S |
| 116 | R | P | H | G | N | T | S | M | A | A | S |
| 117 | R | P | H | G | N | T | A | M | K | A | S |
| 118 | R | P | H | G | H | T | A | M | A | A | S |
| 119 | R | P | H | G | A | T | A | M | K | A | S |
| 120 | R | S | D | G | R | R | P | Y | K | A | S |
| 121 | R | S | D | G | R | R | K | Y | I | A | S |
| 122 | R | S | D | G | R | R | K | Y | F | A | S |
| 123 | G | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 124 | R | S | D | G | R | R | K | K | K | A | S |
| 125 | D | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 126 | E | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 127 | R | Y | D | G | R | R | K | Y | K | A | S |
| 128 | R | S | D | G | R | R | K | P | K | A | S |
| 129 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | N |
| 130 | R | S | D | G | R | R | K | Y | K | A | C |
Полноразмерные последовательности свиного трипсина дикого типа и выбранные варианты трипсина:
Свиной трипсин дикого типа, SEQ ID NO: 1:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHFCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DSCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSWGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
Вариант S172A, SEQ ID NO: 2:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHFCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSWGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
Общая последовательность свиного трипсина с вариабельными положениями в положениях аминокислот 24, 44, 56, 78, 99, 107, 125, 131, 170, 172 и 193; SEQ ID NO: 3:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHXCGGSLI NSQWVVSAAH CYKXRIQVRL GEHNIXVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNXNT LDNDIMLIKL SSPATLNSXV ATVSLPXSCA AAGTECLISG WGNTXSSGSS XPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGX DXCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSXGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 4:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 5:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSLV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 6:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSFV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 7:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSWV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 8:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSGV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 9:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSYV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 10:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSTV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 11:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 12:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSDV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 13:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSEV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 14:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 15:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 16:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTGSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 17:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTYSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 18:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 19:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 20:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTESSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 21:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTHSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 22:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTLSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 23:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTQSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 24:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGY DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 25:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 26:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGG DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 27:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGN DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 28:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHVCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 29:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHLCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 30:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHSCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 31:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHQCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 32:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 33:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 34:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS APSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 35:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS LPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 36:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 37:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS TPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 38:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS CPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 39:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS NPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 40:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS EPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 41:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS HPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 42:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 43:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DTCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 44:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DSCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 45:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DCCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 46:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHACGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 47:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHICGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 48:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHMCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 49:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHTCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 50:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHNCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 51:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHKCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 52:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKLRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 53:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 54:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIAVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 55:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIWVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 56:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNINVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 57:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 58:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPPSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 59:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPGSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 60:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPSSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 61:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPDSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 62:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS VPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 63:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS IPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 64:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS WPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 65:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS GPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 66:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS SPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 67:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS QPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 68:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS DPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 69:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSFGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 70:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSYGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 71:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSTGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 72:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNSNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 73:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNANT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 74:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 75:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNYNT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 76:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNENT LDNDIMLIKL SSPATLNSRV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTKSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 77:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 78:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 79:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 80:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 81:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 82:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 83:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 84:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DSCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 85:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 86:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 87:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 88:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DSCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 89:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 90:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DSCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 91:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 92:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 93:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 94:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 95:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 96:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 97:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 98:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DSCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 99:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 100:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 101:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 102:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 103:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DSCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 104:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 105:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 106:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 107:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 108:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIDVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 109:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 110:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKSRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPRSCA AAGTECLISG WGNTCSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 111:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 112:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNPNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DSCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 113:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 114:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS YPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DSCQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 115:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 116:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTSSSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 117:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSNV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 118:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSHV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGA DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
SEQ ID NO: 119:
IVGGYTCAAN SIPYQVSLNS GSHRCGGSLI NSQWVVSAAH CYKPRIQVRL GEHNIHVLEG NEQFINAAKI ITHPNFNGNT LDNDIMLIKL SSPATLNSAV ATVSLPTSCA AAGTECLISG WGNTASSGSS MPSLLQCLKA PVLSDSSCKS SYPGQITGNM ICVGFLEGGK DACQGDSGGP VVCNGQLQGI VSSGYGCAQK NKPGVYTKVC NYVNWIQQTI AAN
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> SANOFI-AVENTIS DEUTSCHLAND GMBH
<120> ВАРИАНТЫ СВИНОГО ТРИПСИНА
<130> 589-276 PCT
<150> EP18158034.1
<151> 2018-02-22
<160> 130
<170> PatentIn версия 3.5
<210> 1
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Sus scrofa
<400> 1
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Phe Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ser Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Trp Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 2
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина S172A
<400> 2
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Phe Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Trp Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 3
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Общая последовательность свиного трипсина с вариабельными положениями в
положениях аминокислот 24, 44, 56, 78, 99, 107, 125, 131, 170, 172 и 193
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (24)..(24)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Ala, Asn, Arg, Gln, Ile, Leu, Lys, Met,
Phe, Ser, Thr и Val
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (44)..(44)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Leu, Pro и Ser
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (56)..(56)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, His и Trp
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (78)..(78)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Ala, Glu, Gly, Pro, Ser и Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (99)..(99)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Ala, Arg, Asn, Asp, Glu, Gly, His, Leu,
Phe, Thr, Trp и Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (107)..(107)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Arg, Asp, Gly, Pro, Ser и Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (125)..(125)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Ala, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Leu, Lys,
Ser и Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (131)..(131)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, Cys, Gln; Glu, Gly, His,
Ile, Leu, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr и Val
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (170)..(170)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Ala, Asn, Gly, Lys и Tyr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (172)..(172)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Ala, Cys, Ser и Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (193)..(193)
<223> Xaa выбрана из группы, состоящей из Phe, Ser, Thr, Trp и Tyr
<400> 3
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Xaa Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Xaa Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Xaa Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Xaa Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Xaa Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Xaa Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Xaa Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Xaa Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Xaa Asp Xaa Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Xaa Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 4
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 4
<400> 4
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 5
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 5
<400> 5
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Leu Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 6
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 6
<400> 6
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Phe Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 7
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 7
<400> 7
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Trp Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 8
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 8
<400> 8
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Gly Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 9
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 9
<400> 9
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Tyr Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 10
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 10
<400> 10
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Thr Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 11
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 11
<400> 11
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 12
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 12
<400> 12
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asp Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 13
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 13
<400> 13
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Glu Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 14
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 14
<400> 14
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 15
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 15
<400> 15
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 16
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 16
<400> 16
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Gly Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 17
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 17
<400> 17
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 18
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 18
<400> 18
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 19
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 19
<400> 19
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 20
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 20
<400> 20
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Glu Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 21
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 21
<400> 21
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr His Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 22
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 22
<400> 22
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Leu Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 23
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 23
<400> 23
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Gln Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 24
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 24
<400> 24
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Tyr Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 25
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 25
<400> 25
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 26
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 26
<400> 26
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Gly Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 27
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 27
<400> 27
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Asn Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 28
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 28
<400> 28
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Val Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 29
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 29
<400> 29
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Leu Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 30
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 30
<400> 30
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Ser Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 31
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 31
<400> 31
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Gln Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 32
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 32
<400> 32
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 33
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 33
<400> 33
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 34
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 34
<400> 34
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Ala Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 35
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 35
<400> 35
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Leu Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 36
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 36
<400> 36
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 37
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 37
<400> 37
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Thr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 38
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 38
<400> 38
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Cys Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 39
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 39
<400> 39
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Asn Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 40
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 40
<400> 40
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Glu Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 41
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 41
<400> 41
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser His Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 42
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 42
<400> 42
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 43
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 43
<400> 43
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Thr Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 44
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 44
<400> 44
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ser Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 45
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 45
<400> 45
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Cys Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 46
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 46
<400> 46
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Ala Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 47
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 47
<400> 47
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 48
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 48
<400> 48
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Met Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 49
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 49
<400> 49
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Thr Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 50
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 50
<400> 50
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Asn Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 51
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 51
<400> 51
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Lys Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 52
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 52
<400> 52
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Leu Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 53
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 53
<400> 53
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 54
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 54
<400> 54
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Ala Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 55
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 55
<400> 55
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Trp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 56
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 56
<400> 56
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asn Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 57
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 57
<400> 57
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 58
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 58
<400> 58
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Pro Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 59
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 59
<400> 59
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Gly Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 60
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 60
<400> 60
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Ser Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 61
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 61
<400> 61
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Asp Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 62
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 62
<400> 62
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Val Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 63
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 63
<400> 63
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Ile Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 64
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 64
<400> 64
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Trp Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 65
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 65
<400> 65
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Gly Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 66
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 66
<400> 66
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Ser Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 67
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 67
<400> 67
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Gln Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 68
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 68
<400> 68
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Asp Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 69
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 69
<400> 69
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Phe Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 70
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 70
<400> 70
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Tyr Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 71
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 71
<400> 71
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Thr Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 72
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 72
<400> 72
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Ser Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 73
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 73
<400> 73
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Ala Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 74
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 74
<400> 74
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 75
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 75
<400> 75
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Tyr Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 76
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 76
<400> 76
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Glu Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 77
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 77
<400> 77
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 78
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 78
<400> 78
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 79
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 79
<400> 79
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 80
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 80
<400> 80
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 81
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 81
<400> 81
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 82
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 82
<400> 82
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 83
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 83
<400> 83
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 84
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 84
<400> 84
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ser Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 85
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 85
<400> 85
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 86
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 86
<400> 86
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 87
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 87
<400> 87
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 88
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 88
<400> 88
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ser Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 89
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 89
<400> 89
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 90
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 90
<400> 90
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ser Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 91
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 91
<400> 91
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 92
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 92
<400> 92
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 93
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 93
<400> 93
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 94
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 94
<400> 94
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 95
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 95
<400> 95
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 96
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 96
<400> 96
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 97
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 97
<400> 97
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 98
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 98
<400> 98
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ser Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 99
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 99
<400> 99
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 100
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 100
<400> 100
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 101
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 101
<400> 101
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 102
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 102
<400> 102
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 103
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 103
<400> 103
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ser Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 104
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 104
<400> 104
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 105
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 105
<400> 105
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 106
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 106
<400> 106
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 107
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 107
<400> 107
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 108
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 108
<400> 108
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 109
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 109
<400> 109
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 110
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 110
<400> 110
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Cys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 111
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 111
<400> 111
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 112
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 112
<400> 112
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Pro Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ser Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 113
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 113
<400> 113
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 114
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 114
<400> 114
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ser Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 115
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 115
<400> 115
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 116
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 116
<400> 116
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ser Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 117
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 117
<400> 117
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Asn Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 118
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 118
<400> 118
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser His Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ala Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 119
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 119
<400> 119
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Pro Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile His Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Ala Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Thr Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Met Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 120
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 120
<400> 120
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Pro Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 121
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 121
<400> 121
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Ile Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 122
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 122
<400> 122
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Phe Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 123
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 123
<400> 123
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Gly Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 124
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 124
<400> 124
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Lys Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 125
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 125
<400> 125
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Asp Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 126
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 126
<400> 126
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Glu Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 127
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 127
<400> 127
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Tyr Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 128
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 128
<400> 128
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Pro Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Ser Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 129
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 129
<400> 129
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Asn Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<210> 130
<211> 223
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариант свиного трипсина № 130
<400> 130
Ile Val Gly Gly Tyr Thr Cys Ala Ala Asn Ser Ile Pro Tyr Gln Val
1 5 10 15
Ser Leu Asn Ser Gly Ser His Arg Cys Gly Gly Ser Leu Ile Asn Ser
20 25 30
Gln Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Tyr Lys Ser Arg Ile Gln Val
35 40 45
Arg Leu Gly Glu His Asn Ile Asp Val Leu Glu Gly Asn Glu Gln Phe
50 55 60
Ile Asn Ala Ala Lys Ile Ile Thr His Pro Asn Phe Asn Gly Asn Thr
65 70 75 80
Leu Asp Asn Asp Ile Met Leu Ile Lys Leu Ser Ser Pro Ala Thr Leu
85 90 95
Asn Ser Arg Val Ala Thr Val Ser Leu Pro Arg Ser Cys Ala Ala Ala
100 105 110
Gly Thr Glu Cys Leu Ile Ser Gly Trp Gly Asn Thr Lys Ser Ser Gly
115 120 125
Ser Ser Tyr Pro Ser Leu Leu Gln Cys Leu Lys Ala Pro Val Leu Ser
130 135 140
Asp Ser Ser Cys Lys Ser Ser Tyr Pro Gly Gln Ile Thr Gly Asn Met
145 150 155 160
Ile Cys Val Gly Phe Leu Glu Gly Gly Lys Asp Ala Cys Gln Gly Asp
165 170 175
Ser Gly Gly Pro Val Val Cys Asn Gly Gln Leu Gln Gly Ile Val Ser
180 185 190
Cys Gly Tyr Gly Cys Ala Gln Lys Asn Lys Pro Gly Val Tyr Thr Lys
195 200 205
Val Cys Asn Tyr Val Asn Trp Ile Gln Gln Thr Ile Ala Ala Asn
210 215 220
<---
1. Вариант свиного трипсина, сохраняющий активность свиного трипсина, содержащий или состоящий из аминокислотной последовательности, которая характеризуется по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 1,
где указанная аминокислотная последовательность отличается от SEQ ID NO: 1 по меньшей мере одной или несколькими аминокислотными заменами в одном или нескольких положениях, соответствующих F24, S44, D56, G78, Y131, S172 и W193 нативного свиного трипсина в соответствии с SEQ ID NO: 1,
при условии, что указанная аминокислотная последовательность не представляет собой нативный свиной трипсин в соответствии с SEQ ID NO: 1; и
при условии, что указанная аминокислотная последовательность не представляет собой вариант свиного трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2.
2. Вариант свиного трипсина по п. 1,
где аминокислота в положении, соответствующем F24, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, Arg, Gln, Ile, Leu, Lys, Met, Ser, Thr и Val;
где аминокислота в положении, соответствующем S44, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Leu и Pro;
где аминокислота в положении, соответствующем D56, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, His и Trp;
где аминокислота в положении, соответствующем G78, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Glu; Pro, Ser и Tyr;
где аминокислота в положении, соответствующем Y131, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, Cys, Gln; Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met, Ser, Thr, Trp, Val;
где аминокислота в положении, соответствующем S172, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Cys и Thr; и/или
где аминокислота в положении, соответствующем W193, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Phe, Ser, Thr и Tyr.
3. Вариант свиного трипсина по любому из пп. 1, 2, где указанная аминокислотная последовательность дополнительно отличается от SEQ ID NO: 1 по меньшей мере одной или несколькими аминокислотными заменами в одном или нескольких положениях, соответствующих R99, R107, K125 и K170 нативного свиного трипсина в соответствии с SEQ ID NO: 1.
4. Вариант свиного трипсина по п. 3,
где аминокислота в положении, соответствующем R99, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, Glu, Gly, His, Leu, Phe, Thr, Trp и Tyr;
где аминокислота в положении, соответствующем R107, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Asp, Gly, Pro, Ser и Thr;
где аминокислота в положении, соответствующем K125, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Leu, Ser и Tyr; и/или
где аминокислота в положении, соответствующем K170, заменена аминокислотой, выбранной из группы, состоящей из Ala, Asn, Gly и Tyr.
5. Вариант свиного трипсина по любому из пп. 1-4, где указанная аминокислотная последовательность представляет собой SEQ ID NO: 3,
где
- Xaa24 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Asn, Arg, Gln, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Ser, Thr и Val;
- Xaa44 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Leu, Pro и Ser;
- Xaa56 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, His и Trp;
- Xaa78 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Glu, Gly, Pro, Ser и Tyr;
- Xaa99 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Arg, Asn, Asp, Glu, Gly, His, Leu, Phe, Thr, Trp и Tyr;
- Xaa107 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Arg, Asp, Gly, Pro, Ser и Thr;
- Xaa125 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Leu, Lys, Ser и Tyr;
- Xaa131 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Asn, Asp, Cys, Gln; Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr и Val;
- Xaa170 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Asn, Gly, Lys и Tyr;
- Xaa172 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala, Cys, Ser и Thr; и/или
- Xaa193 представляет собой аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Phe, Ser, Thr, Trp и Tyr;
при условии, что SEQ ID NO: 3 не представляет собой свиной трипсин дикого типа в соответствии с SEQ ID NO: 1; и
при условии, что SEQ ID NO: 3 не представляет собой вариант свиного трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2.
6. Вариант свиного трипсина по любому из пп. 1-5, где указанная аминокислотная последовательность выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 58, SEQ ID NO: 59, SEQ ID NO:, 60, SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 67, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 69, SEQ ID NO: 70, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 75, SEQ ID NO: 76, SEQ ID NO: 77, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 87, SEQ ID NO: 88, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 100, SEQ ID NO: 101, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 114, SEQ ID NO: 115, SEQ ID NO: 116, SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118 и SEQ ID NO: 119.
7. Вариант свиного трипсина по любому из пп. 1-6, где
(i) указанный вариант способен к расщеплению пептида с общей формулой A-Lys-Thr-Arg-Arg-B с получением продукта расщепления с общей формулой A-Lys-Thr-Arg-Arg с выходом, составляющим по меньшей мере 80%,
где A представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот; и
где B представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот;
и/или
(ii) вариант проявляет повышенную селективность в отношении расщепления человеческого препроинсулина, препроинсулина гларгина, препроинсулина лизпро, препроинсулина аспарта или препроинсулина глулизина в C-концевом положении относительно положения B32-Arg по сравнению с вариантом свиного трипсина S172A в соответствии с SEQ ID NO: 2.
8. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вариант свиного трипсина по любому из пп. 1-7, где указанная молекула нуклеиновой кислоты необязательно содержится в векторе или необязательно интегрирована в геном.
9. Клетка-хозяин, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по п. 8, для получения варианта свиного трипсина, сохраняющего активность свиного трипсина.
10. Способ получения варианта свиного трипсина по любому из пп. 1-7, включающий стадии:
культивирования клетки-хозяина по п. 9; и
выделения молекулы-предшественника, представляющей собой трипсиноген, варианта свиного трипсина из культуральной среды или из клетки-хозяина; и
активации молекулы-предшественника, представляющей собой трипсиноген, с получением таким образом указанного варианта свиного трипсина.
11. Вариант свиного трипсина по любому из пп. 1-7, или молекула нуклеиновой кислоты по п. 8, или клетка-хозяин по п. 9 для применения в способе изготовления пищевого ингредиента или кормового ингредиента.
12. Применение варианта свиного трипсина по любому из пп. 1-7 в способе получения человеческого инсулина, аналога инсулина или производного инсулина.
13. Применение по п. 12, где аналог инсулина выбран из группы, состоящей из инсулина аспарта, инсулина лизпро, инсулина глулизина и инсулина гларгина.
14. Применение варианта свиного трипсина по любому из пп. 1-7 для расщепления белка или пептида с общей формулой A-Lys-Thr-Arg-Arg-B,
где A представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот; и
где B представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из одной или нескольких аминокислот.
15. Применение по п. 14, где расщепление приводит к получению продукта расщепления A-Lys-Thr-Arg-Arg.
16. Применение по п. 15, где расщепление приводит к получению продукта расщепления A-Lys-Thr-Arg-Arg с выходом, составляющим по меньшей мере 80.
