Способ получения протеолитических ферментов
О П И С А Н И Е 340692
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 13.V.1970 (№ 1439858/28-13) .Ч Кл. С 12d 13 10 с нрисоединением заявки №
Лриооитет
Комитет по аслам изобретений и открытий при Совете Мииистров
СССР
УДК 577.15.08(088.8) Опубликовано 05Х1.1972. Бюллетень № 18
Дата опубликования описания
Автор изобретения
Заявитель
В. И. Кузнецова
Всесоюзный научно-исследовательский институт гидролиза растительных материалов
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ азот оксидата в виде сульфата аммония аммоний1ные соли орга нических кислот ,мела сса
КН2Р04
MgSO4
ZTIS04
MII SO4
FeSO4
2 — 4
0,8 — 1
0,5 (по PB)
1,37
0,12
0,01
0,05
0,015
20
Изобретение относится к микробиологической промышленности.
Известен способ получе1нпя протеолитических ферменто в путем выращивания их продуцеHToe, например Aspergillus tef ricola, па питательной среде, Icoäåðæàùåff псточо1ики углерода, азота, в прнсутст1вни минеральных солей.
Предлагаемый способ поа1воляст получить более высокий,выхо д протео IIITIIHefcKIix ферментов, à та кже сократить:срок .ферhfelHTации.
Это достигается тем, TTQ tB,качестве,источника азота используют оксидат гидролизного лигнина в количест1ве 2 — 4% по азоту (Ilo
Кьелыдалю), а в качест1ве источника углерода используют мелаосу,в количестве, ра вном
0,5% по редуцирующим 1веществам.
При предлагаемом способе получения протеолитических фсрменто в fB со стаяв ферментационной среды вводят оксндат лигнина в количе1стве 2 — 4% по азоту, который является продуктом окислителыной дест1рук цпи гидролиз ного лигвина кислородом воздуха,в,присутст вии аммиака If содержит 0,8 — 1% аммо нийных солей орга«1пческпх кислот (мура1вьиной, янтарной, уксусной) и в большом количист1ве аз от <В (виде с) лъфата ам|мония, ам монийных солей органических кислот и других .соединений азота.
Оксидат лигнина является благо приятным и легкоус1вояемым источ ником азотного питания 1для продуцентов протеолитических ферxiBHToB. Ферментационная среда B качестве
5 источника углерода содержит мелассу в количестве 0,5 j„- по редуцирующпм веществам.
Добавление мелассы .способствует обогащению фермеаттационной,среды витаминными и биологически активными веществами.
10 Состав ферментационной среды, Пример. В ферментацио нную среду (fcoстав указан вьпие) после стерилизации и до25 ведения pl-l,до 6,8 — 7,0 засевают проросшие конпдпи Aspergillffs 1ег iicola 3374. Биосинтез протеолптических ферментов осуществляют путе м глубинного культивирования продуцента,в колбах Эрленмейера на качалке при
30 30 С в течение 48 «ас, 340692
Количество известная специфическаяая среда
Показатель предлагаемая среда
0,72
0,36
Сахароза, Глюкоза, оа
Меласса, о„
Оксидат, 0,2
1,37
0,123
0,015
0,01
0,05
0,67
Предмет изобретения
48 — 50
36 — 40
По окончании срока выращивания биомассу гриба отделяют фильтрованием, фермент ны11 препарат выделяют путем .осаждения четырьмя объемами этанола с последующиел высушиванием.
Составитель М. Ларина
Техред 3. Тараненко
Редактор А. Сер
Корр KTOp T. Гревцова
Заказ 1830/10 Изд. М 820 Тираж 448 Подписное
ЦН!!ИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, )К-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2
KNO, О
КН РО,, Мд5О„ ;;
FeSO„, %
ZnSO,„,;
MnSO, o,.
Протеолптическая активность, ед/,ил
Время ферментации, час
0,5 (по РВ)
2 — 4 по азоту (опеделен по методу ьельдаля)
1,37
0,123
0,015
0,01
0,05
0,78
Определение:протеолитической активности (по А нсону) проводят непо средст1венно в фильтрате культуральпой жидкости, а,также в рaiствоpе сухого препарата фермента, В таблице .приведены сра в нительные 1данные по получению протеазы продуце нтом
Aspergillus terricolB 3374 на специфической ферме нтацио.1гной среде, состав минералыных солей которой взят за основу для данного
10 способа.
1. С посо б получения протеолитических
15 ферменто в,путе м выращи вания их продуценTGB, например Aspergiltus terricolB, iHB питатель ной Icpege, содержащей источники углерода, азота, в присутст вии минеральных солей, отличающийся тем, что, с целью повыше20 ния выхода и а ктив ности ферме нто в, а также сокращения п р оцессов фер ментации, в качест ве источника азота используют оксидат гидролизного лиг нина в количестве 2 — 4 по азоту (по Кьель далю).
25 2. С пособ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве источника углерода используют мслассу в количестве, ра вном 0,5Я> по редуцирующим,веществам.
