Способ получения солей сульфогликопептидов

 

ьсесОЮЗн АЯ

ИЛТ1 .С МАМ

С И

i II) 492075

Союз Советских

Социалистических изоь етения

К ПАТЕНТУ

Республик (61) Дополнительный к патенту № (22) Заявлено 17.10.73 (21) 1964135, 23-4 (23) Приоритет — (32) 18,10.72 (31) 30582-А/72 (33) Италия

Опубликовано 15.11.75, Бюллетень ¹ 42

Дата опубликования описания 10.05.76 (51) М. Кл. С 07с 103 52 У- б

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 547.964.4.07 (088.8) (72) Авторы изобретения

Иностранцы

Адриано Бутти и Джузеппе Прино (Италия) Иностранная фирма

«Кринос Индустриа Фармакобиологика С. и. А.» (Италия) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОЛЕЙ

СУЛЬФОГЛ ИКОПЕПТИДОВ

Зо

11,65

-: 10,16

1,45

9.9

12.8

3,4

1.85

6,3

4,5

Изобретение относится к способу получения новых сульфогликопсптидных солей, которые могут найти широкое применение в фармацевтической промышленности.

Известен способ получения солей сульфогликопептидов с щслочными, щслочноземельными и тяжелыми металлами, заключающийся в том, что водный раствор сульфогликопептида подвергают взаимодсйствшо с раствором гидроокисн соответствующего металла и выделяют целевой продукт известным способом.

Однако в литературе нет сведений о способе получения солей сульфогликопсптидов с а-аминокислотами.

Предлагается способ получения солей сульфогликопептидов с природными пли синтетическими а-аминокислотами, заключающийся в том, что сульфогликопсптид подвергают взаимодействию с одной или несколькими а-аминокислотами с последующим выделением целевого продукта известным способом.

Пример 1. Гистидиновая соль сульфогликопептида.

20 г натрисвой соли сульфогликопсптида

pIIcTBopHIoT в 200 мл дистиллированной воды и полученный таким образом раствор пропускают через колонку с катионообмепной смолой типа AmI7eilite IR= 120 (Н+), смо iy промывают сщс 150 мл воды и водные фракции объединяют. Полученный раствор далее добавляют к раствору гистпдина, который получают в результате растворения 18 г гпдрохлорида гистидина и 3.7 г гидрата натрия в

100 мл воды.

После реакции, проведенной указанным способом, в полученную смесь добавляют 1500 мл этанол,:, выпаглшш осадок отделяют от расгвора на центрифуге. Далее этот осадок промывшот три раза раствором, содержащим этанол и воду в соотношении 3: 1 (обьемныс до iII) . Полученное порошкообразное всп;ество сушат в вакууме при 50 С. Получают 22 г целевого продукта. Количественный анализ это15 го продукта дал следующие результаты (вес. %):

Гпстидин

Сульфогликопситид

20 в состав которы.; входят

Азот

Сульфосера

Натрий

Гексоза (C!;HIO)

25 Гекса мины

АцеTn 7bHhIC гр i Iilil l

Сиаловая кислота

Протеин ы

Влага

492075

10,24

2,01

8,78

10,2

13,5

3,6

1,92

6,4

4,7

42

10,04

9,05 50

0,5

8,9

10,8

2,9

2,9 55

5,4

4,4

Пример 2. Лизиновая соль сульфогликопептида.

Лизиновую со;b сульфогликопептида получают аналогично описанному в примере 1, В качестве исходных продуктов используют 16 r моногидрохлорида лизина и 20 r сульфогликогептида в форме его натриевой соли. Получают 21,7 г целевого продукта, имеющего следующий состав, определенный по результатам анализа (вес. %):

Лизин 34

Сульфогликопептид 66 в состав которых входят

Сульфидная сера

Натрий

Азот

Гексоза

Гекса мины

Ацетильные группы

Сиаловая кислота

Протеины

Влага

Пример 3. Глютаминовая соль сульфогликопептида.

25 г натриевой соли сульфогликопептида растворяют в 250 мл дистиллированной воды и полученный таким образом раствор пропускают через колонку с катионообменной смолой типа Amberlite IR=120 (Н+), смолу промывают 150 мл воды и водные фракции объединяют. В полученный раствор сульфогликопептида при перемешивании добавляют

15,5 г 1-глютамина. рН полученного раствора

2,5. Далее раствор подвергают диализу в течение одной ночи при 4 С с отделением дистиллированной воды с помощью регенерированной целлюлозной мембраны, имеющей отверстия размером около 0,03 мм. Раствор концентрируют при пониженном давлении и температуре 40 С до 200 мл и лиофилизуют. Выход целевого продукта 35 г, а процентный состав продукта, определенный с помощью анализов, следующий (вес. %):

Глютамин

Сульфогликопептид в состав которых входят

Азот

Сульфидная сера

Натрий

Гексоза

Гексамины

Ацетильные группы

Сиаловая кислота

Протеины

Влага

Пример 4. Метиониновая соль сульфогликопептида.

25 r натриевой соли сульфогликопептида растворяют в 250 мл дистиллированной воды и полученный раствор пропускают через колонку с катионообменной смолой типа Amberlite IR =120 (Н+). Смолу промывают еще

150 мл дистиллированной воды и водные фракции объединяют. В этот раствор при перемешивании добавляют 15 r Р,1-метионина.

Далее раствор подвергают диализу в течение

12 ч при 4 С с отделением дистиллированной воды с помощью регенерированной целлюлозной мембраны, имеющей отверстия размером около 0,03 мм. Раствор концентрируют при пониженном давлении и температуре около 40 С до 200 см и лиофилизуют. Выход целевого продукта 35,4 г, а процентный состав продукта, определенный с помощью анализов, следующий (вес % ):

Метионин 43,4

Сульфогликопептид 56,5 в состав которых входят

Азот 6

Сульфидная сера 9,95

Натрий 0,5

Гексоза 8,7

Гексамины 10,5

Ацетильные гр ппы 2,8

30 Сиаловая кислота 1,5

Протеины 5,3

Влага 4,6

Пример 5. Аспарагиновая соль сульфогчикопептида

Аспарагиновую соль сульфогликопептида получают в соответствии с методикой, изложенной в примерах 3 и 4. Целевой продукт имеет следующий состав, определенный в резул тате анализа (вес. %):

40 Аспарагин 35

Сульфогликопептид 65 в состав которых входят

Азот 9,6

Сульфидная сера 10,1

45 Натрий 0,4

Гексоза 9,4

Гексамины 13

Ацетильные группы 3,4

Сиаловая кислота 1,8

Протеи ны 6,2

Влага 4,5

По приводимым в примерах 3 и 4 методикам были получены другие соли сульфогликопептидов с различными типами аминокислот, в таблице представлены составы этих препаратов, определенные аналитическими методами.

492075

Состав целевого продукта, вес.

Аминокислота

Пример

СульфоНатрий

Ацетил- Сиаловая группы кислота

Аминокислота

Гексамины

Азот

Гексозы

Протеины

9,0

10,0

9,8

10, 62

10,04

6,8

16,5

6,15

1,5

1,7

1,77

1,9

1,55

1,25

10,0

12,7

0,5

0,7

0,5

44,0

36,00

37,0

32,5

36,0

56,0

8,7

9,0

9,6

10,5

9,0

8,6 б

8

5,3

6,0

6,0

6,4

6,0

1 2

2,8

3,З

3,5

3,б

3,4 6,1

Аргинин

Ци стени

Пролин

Серин

Треонин

Триптофан

6,5

6,6

6,2

9,1

13,2

0,4

13,5

0,5

12,5

0,5

8,6

Формула изобретения

Составитель Л. Фонина

Техред 3. Тараненко

Редактор Е. Хорина

1(прректор А. Дзесова

Заказ 717, 1! Изд. Уз 1994 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий! !3035, Москва, )1,-35, Раугпская наб., д. 4,5

Типография, пр. Сапунова. 2

1. Способ получения солей сульфогликопептидов, отличающийся тем, что сульфогликопептид подвергают взаимодействгно с одной или несколькими природными или синтетическими и-аминокислотами.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что и-аминокислотой является глютамин.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что и-аминокислотой является метионнн.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что и-аминокислотой является гистидин.

5. Способ по п. 1, о т л и ч а и шийся тем, что и-аминокислотой является лизин.

6. Способ по и. 1, отлича1ощийся тем, что и-аминокислотой является аспарагин.

7. Способ по и. 1, отличающийся тем. что о.-амтшокислотой является аргннин.

5 8. Способ по и. 1, отл пч а ющи и с я тсм, что и-a ïøîêttcëîòît11 является цнстеин.

9. Способ по и. 1, отличающийся тем, что с.-аминокислотой является пролин. !

0. Спосоо по и. 1, отличающийся тем, 10 tTQ и-ам1шокнслотой является серии.

11. Способ t10 и. 1, от 7 tt Lt а toщпй с я Tcit, что и-аминокислотой является треонин.

12. Способ по и. 1, отличающийся тем, что и-аминокислотой является триптофан.