Способ получения антиовариальной цитотоксической сыворотки "прооварин"
t
524552
ОП ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 22.08.67 (21) 1176817/13 с присоединением заявки— (23) Приоритет— (43) Опубликовано 15.08.76. Бюллетень ¹ 30 (45) Дата опубликования описания 27.10.76 (51) М.Кл 2 А 61 К 35/16
Государственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 615.373.39 (088.8) (72) Авторы изобретения |О. А. Спасокукоцкий, H. С. Бакшеев, А. Г. Гоноровский и Э, Г. Колоколова
Институт физиологии им. А. A. Богомольца (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ
АНТИОВАРИАЛЪНОЙ ЦИТОТОКСИЧ ЕСКОЙ
СЫВОРОТКИ ПРООВАРИН
Изобретение относится к области медицины и касается получения лечебно-профилакти ческих препаратов.
Способа получения антио вариальной цитотоксической сыворотки в патентной и специальной литературе описано не было.
Цель изобретения — получение антиовариальной цитотоксической сыворотки.
С|пособ,получения антиовариальной цитотоксической сыворотки заключается в том, что кроликов иммунизируют 4 — 5-кратно с четырехдневными интервалами .водно-солевой ,взвесью ткани янчников женщин .и отделяют сыворотку.
Для получения иммунной сыворотки,прооварин используют кроликов породы «шеншила» весом 2 — 2,5 кг в возрасте от одного до трех лет, здоровых по,ветеринарным и экспериментально-клиническим данным.
Количество лейкоцитов не должно превышать десяти тысяч.
Для иммунизации и получения сыворотки берут кроликов, так как к сыворотке люди обычно не сенсибилизированы.
Яичники у погибших женщин забирают не позднее 24-х ч после гибели без нарушения стерильности при вскрытии полости живота стерильными инструментами и помещают в стерильную посуду (стеклянный или металлический бюкс).
Устанавливают наличие, практического здоровья погибшей до ее смерти и отсутствие воспалительных и опухолевых процессов в самом яичнике.
Органы забирают у погибших женщин,в возрасте от 16 до 45 — 50 лет.
Иммунизацию антигеном, полученным из доставленного яичника женщины, производят в,день получения органа. Для этого полученный орган в стерильной посуде стерильными инструментами освобождают от оболочки. Затем разрезают пополам, с помощью лупы определяют по характеру паренхимы органа наиболее активную в функциональном отно15 шении его часть (с фоликулами). Этот участок вырезают, из него удаляют видимые части кровеносных сосудов. Затем эту часть органа измельчают ножницами и освобождают от крови повторными промываниями стерильным физиологическим раствором в стерильном стеклянном сосуде. После промывания производят стерильно навеску ткани из расчета 500 г паренхимы на 1 кг живого веса кролика. Затем в стерильной фаянсовой ступке производят растирание помещенной туда ткани с добавлением стерильного кварцевого песка (1 — 1,5 г) и,постепенного добавления стерильного физиологического раствора 1: 10.
После этого производят центрифугирование в стерильных центрифужных пробирках. После
524552
0,75
0,5
0,3
0,2
Формула изобретения
Сост а в и тел ь С, Малютина
Техред М. Семенов
Корректор И. Сим кина
Редактор Л. Василькова
Заказ 952/1467 Изд. М 1725 Тираж 630 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, К-35, Раушскаи наб., д. 4/5
Тпп, Харьк. фил. пред. «Патент» образования недостаточной жидкости (над песком) ее отсасывают стерильным шприцем.
Отсасывание производят,в две отдельные стерильные пробирки:,верхний надо адоч;1ый слой — прозрачный вЂ,в одну пробирку, а находящийся,под ним слой (над песком) — в другую пробирку. Если:взятая первая жидкость недостаточно прозрачна и в ней могут быть примеси мелких частиц паренхимы, то .перед введением ее в вену фильтруют через четыре слоя стерильной марли. Гомоггниз1,"рованную надосадочную жидкость из второй .пробирки отсасывают также ыприцем во вто,рую,пробирку. Затем производят парентеральное введение находящихся,в пробирках жидкостей. Гомогенную жидкость (из второй пробирки) вводят внутрибрюшинно. Чтобы не повредить кише-:ник, кролика держат вниз головой и вводят жидкость в участок живота, находящийся вверху. Через 1 ч производят внутривенное .введение,прозрачной надосадочной жидкости из первой .пробирки, делают это дрсбными дозами. Зто способствует десенсибилизации и "íèìàåò реакцию, ооусловлепную тканевой несовместимостью. Обе надосадочные жидкости, разведенные 1: 10, перед введением разводят еще раз стерильным физиологическим раствором тоже 1: 10 (или 1: 5).
1При всех инъекциях дозы антигена одинаковы.
Иммунизирующие инъекции антигена, полученные из,паренхимы женского яичника, производят 4 — 5 раз с четырехдневными интервалами между ними.
После последней инъекции антигена, на седьмой день после нее берут первую .пробу крови у иммунизированного кролика для получения сыворотки в количестве, необходимом для определения реакции связывания комплемента, позволяющей количественно установить наличие и концентрацию (титр) специфических антител для,данного тканевого антигена.
Рабочий титр сыворотки прооварин—
1: 100, но не оолее 1: 400.
5 Обычно берут, вторую пробу на девятый день после, последней иммунизирующей инъекции, так как через этот срок чаще,происходит продукция и концентрация специфических антител в крови кролика.
1О Лнтиовариальцая,цптото|ксичеакая сыворот,ка представляет cîáîé .прозрачную жидкость соломенно-желтого цвета слегка опалесциру1ощую. Препарат готовят асептически, после разлива в sTc;;H;IbabIp ампулы асептически
15 в специальном боксе .полученной сыворотки прооварин она,проходит, бактериологический контроль.
Применяют в виде подкожных инъекций .в разведении 1: 10 стерильным физиологичес20 ким раствором. Лечебный курс состоит из 3—
5 инъекций с двух-трехдневными интервалами между ними.
Доза цельной сыворотки взрослому чело25 веку колеблется от 0,07 до 0,03 мл, доза разведенного препарата физиологическим раствором 1: 10 колеблется в размерах от 0,7 до
0 5 мл на инъекцию. На курс разведенный препарат .вводят в дозах; мл:
1-я инъекция
2-я инъекция
3-я инъекция
4-я инъекция
Способ получения антиовариальной цитотоксической сыворотки, о тл и ч а ю шийся тем, что кроликов иммунизируют 4 — 5-кратно с четырехдневными интервалами, водно-соле вой;взвесью ткани яичников женщин и отделяют сыворотку.
